现行两种水质粪大肠菌群测定方法的比较
两种酶底物法监测水中(粪)大肠茵群商品化制品的比较
环境研 究 与监测
第２ ７ 卷
分析 测试 （ ２ ２ ～ ２ ４）
两种酶底物法监测水 中（ 粪） 大肠 茵群 商品化 制品的 比较
张会 强 马 文 鹏 刘 敏 周 弛 张秦 铭 张佳 音 梁卫 东 张 宇
陕西 西安 ７ １ ０ ０ ５ １ ）
第 １ 期
张会强等 ： 两种酶底物法检测水 中（ 粪） 大肠菌群商 品化制品 的比较
２ ３
２ 结 果
行对数处理 后（ １ ｇ （ Ｍ Ｐ Ｎ ／ Ｌ ） ） 利用Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ８ ． ０ 统计软件
进行 配对 ｔ 检验Ｉ ， 分析 结果 见表２ 。
表２总大肠菌群检测数据配对ｔ 检验结果
方 法Ｉ 。
国产ｃ ｏ ｌ ｉ ｔ ｅ ｅ ｈ 试剂 、 １ ０ ０ ｍ Ｌ 无菌取样瓶 （ 含１ ． ５ ％
然 而 由于 酶底 物 法 商 品化 培 养 基 及 其 耗 材 的 价格 昂贵 ， 阻碍 了其 发 展【 ０ １ 。《 生 活饮用 水 标 准检 验 方法》 中对 酶 底 物 法 培 养基 的选 择 规 定 “ 可选 市 售 商品化制品” 同 时提 供 了培 养 基 的基 本 成 分 ： 硫 酸 铵、 硫 酸锰等 １ ３ 种 成分 供 实验人 员 自己配制 『 Ｉ ｌ １ ’ 但 是 由于 该 培 养 基 实 验室 配制 的操 作 性 不 强 和 商 品 化 培养 基 的便利 性 ， 多数实 验 人员 仍倾 向购买 商 品 化 试剂 ， 有 行业 人 上提 出酶底 物法 试 剂 的 国产化 有 利
近年 来 国 内出现 了价格 低 廉 的 同类 制 品 ， 同为
酶底物法５ ｌ 孔和９ ７ ￣ Ｌ ＭＰ Ｎ （ 最可能数 ， ｍ ｏ ｓ ｔ ｐ ｒ ｏ ｂ ａ ｂ ｌ ｅ ｎ ｕ ｍ ｂ ｅ ｒ ） 计数 原理 ， 本项试验选取 了国产商品化 的 ｃ ｏ ｌ ｉ ｔ ｅ ｃ ｈ 试剂与进 口ｅ ｏ ｌ ｉ ｌ ｅ ａ 试 剂及其各 自配套制 品
水中粪大肠菌群检测方法的比较
Ｃｏ ｌ ｉ ｆ ｏ ｒ ｍ Ｂａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ）Ｄｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ
Ｄ Ｉ Ｎ Ｇ Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ — ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ， Ｓ ＨＥ Ｎ Ｌ ｉ — ｊ ｕ ａ ｎ ， Ｚ ＨＡ Ｎ Ｇ Ｘ ｉ ａ ｎ ｇ ， Ｘ Ｕ Ｄ ｏ ｎ ｇ — ｊ ｉ ｏ ｎ ｇ ， Ｃ Ｈ Ｅ Ｎ Ｑ ｉ ａ ｏ ， Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｘ ｉ ａ ｏ — ｑ ｉ ｏ ｎ ｇ ， Ｔ Ａ Ｎ Ｇ Ｙ ｕ ｎ ， Ｌ Ｉ Ｊ ｉ ｎ ｇ
Ｃｏ ｍｐ ａ ｒ ｉ ｓ ｏ ｎ ｂｅ ｔ ｗｅ ｅ ｎ Ｐａ ｐｅ ｒ Ｄｉ ｓ ｋ Ｍｅ ｔ ｈｏ ｄ ａ ｎｄ Ｍｕ ｌ ｔ ｉ ｐ ｌ ｅ － ｔ ｕ ｂ ｅ Ｆｅ ｒ ｍ ｅ ｉ ｎ Ｗａ ｔ ｅ ｒ Ｆｅ ｃ ａ ｌ Ｂａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ（ Ｔｈ ｅ ｒ ｍｏ ｔ ｏ ｌ ｅ ｅ ｒ ａ ｎ ｔ
（ １ ．Ｎ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ｇ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍ ｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ Ｍｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ， Ｎ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ｇ ，
第２ ５卷
第 ３期
环 境 监 测 管理 与技 术
２ ０ １ ３年 ６月
水中粪大肠茵群检测方法的比较
丁程成 ， 沈 丽娟。 ， 张翔。 ， 徐 东 炯。 ， 陈桥 ， 张小琼。 ， 汤云。 ， 李晶
（ １ ． 环 境保 护部 南京环 境科 学研 究所 ， 江 苏 南京 ２ １ ０ ０ ４ ２ ；
方 法检 测 结 果 的 回 归 关 系 显 著 ； 国际 标 准 样 品试 验 表 明 ， 两种方法的精密度与准确度均无统计学意义上的显著性差异 。 关键词 ： 粪大肠菌群 ； 纸片快速法 ； 多管发酵法 ； 水 质 中图分类号 ： Ｘ ８ ３ ２ 文献 标 识 码 ： Ｂ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ６—２ ０ ０ ９ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３— ０ ０ ３ ８一 Ｏ ３
滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析
滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析滤膜法与酶底物法检测污水中粪大肠菌群的比较分析一、引言随着城市化进程的加速和人口的不断增长，污水处理成为一项重要的环保任务。
污水中的粪大肠菌群是评估水质和卫生水平的重要指标之一。
为了准确快速地检测污水中的粪大肠菌群，科学家们发展了各种检测方法。
其中，滤膜法和酶底物法是常用的两种方法，本文将对这两种方法进行比较分析。
二、滤膜法滤膜法是通过将粪大肠菌群附着在滤膜上，再通过计数形状与颜色进行检测。
其操作包括取样、滤膜萃取、滤膜染色和计数四个步骤。
滤膜法具有简单、直观、操作便捷等优势，被广泛应用于实际工作中。
然而，滤膜法的检测结果容易受到环境因素的干扰，例如水质的浑浊度、背景物质的影响等，这可能导致结果的不准确。
三、酶底物法酶底物法是通过检测粪大肠菌群特有的酶活性来间接测定其存在。
常用的指示剂是3-indoxyl-β-D-glucuronide（X-Gluc），它能与酶β-D-葡萄糖苷酸酶反应产生可见的蓝色产物。
这种方法的优势在于结果的准确性较高，而且不受环境因素的影响。
但是，酶底物法需要较长的检测时间，操作较为复杂，并且对仪器设备要求较高。
四、比较分析（1）准确性方面：滤膜法和酶底物法在检测粪大肠菌群方面均有较高的准确性，但是酶底物法的结果更为精确。
滤膜法容易受到环境因素的影响，导致结果的偏差。
（2）操作方面：滤膜法操作简便，流程清晰，不需要特殊的仪器设备，适用于现场快速检测。
酶底物法的操作较为复杂，需要仪器设备支持，所需时间较长。
（3）受环境因素影响方面：滤膜法受环境因素影响较大，如水质浑浊度、背景物质等因素会干扰检测结果。
酶底物法不受环境因素的影响，结果更为稳定。
（4）适用范围方面：滤膜法适用于对大量样品进行快速筛查，特别是现场检测。
酶底物法适用于对粪大肠菌群的高灵敏度检测，尤其适合于研究或实验室内的检测。
五、结论综上所述，滤膜法和酶底物法是常用于检测污水中粪大肠菌群的两种方法。
多管发酵与滤膜法测定桶装水粪大肠菌群比较
有水源、水处理系统、工厂卫生管理、 水微生物安全风险控制[J].食品研究与
塑料桶和操作人员的个人卫生m 。
开 发 ,2009,30(11):188-191.
法 和 滤 膜 法 测 得 粪 大 肠 菌 群 分 别 为 20
[6] 国 家 标 准 委 .GB 19298-2014
个 /L 和 1 5 个 /L。
食品安全国家标准包装饮用水[S].北 京 ：
3 . 2 影响因素
中国标准出版社,2014.
(1)
桶装水中微生物污染的来源 [7] 吴 清 平 ，张 永 清 ，张菊梅.饮用
±咅养基上，44.5 °C下培养，然后计数滤 水 而 言 滤 膜 法 的 检 测 结 果 比 多 管 发 酵
膜上生长的次特性菌落数，计算出每升 法更为可靠；
的水样中含有的粪大肠菌群数。
(3)
桶 装 水 在 开 封 7 天 后 ，水中
2 . 2 分析步骤
的 粪 大 肠 菌 群 会 增 加 ，所以尽可能在
利描
分析与检测
多管发酵与滤膜法测定桶装水糞大肠菌群比较
□高梦雅广东环境保护工程职业学院张伟欣广东贝源检测技术股份有限公司
摘 要 ：粪大肠菌群是总大肠菌群的一部分，是水质污染的生物学指标之一。 本文通过多管发酵法与滤膜法两种方法 对桶装水中粪大肠菌群进行检测，并对两种方法进行比较和分析， 同时，对桶装饮用水的饮用卫生提出建议。
水样中的粪大肠菌群数。
[2] 杨 克 敌 .环 境 卫 生 学 （第 6 版 ）
3 结果分析
[M].北 京 ：人民卫生出版社,2007:130.
3 . 1 结果计算与汇总
[3] 王 全 新 ，马 红 朋 ，王 海 欣 ，
两种方法测定桶装水中粪大肠菌 等.禹州市桶装饮用水直饮水铜绿假
水中粪大肠菌群测定方法的比较研究分析——酶底物法与多管发酵法
酶底物法（ Ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｔ ｅ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｑ ｕ ｅ ） 是 利 用
大肠 菌 群能 分解 培 养 液 ， 使 之呈 黄 色 ， 以及 大 肠 埃
希 氏菌使 培 养液 在 波长 ３ ６ ６ ｎ ｌ ｎ紫外 光 下 产生 荧 光
Ｗａ ｎ ｇ Ｙａ ｎ，Ｌ ｏ ｎ ｇ Ｊ ｉ ａ ｈ ｏ ｎ ｇ ，Ｘｕ Ｘ ｉ ｏ ｎ ｇ ｆ ｅ ｉ ，Ｌ ｉ Ｊ ｉ ｎ ｇ
（ Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｓ ｈ ａ Ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍ ｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｍｏ ｎ ｉ ｔ ｏ ｒ ｉ ｎ ｇ Ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ｅ ，Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｓ ｈ ａ ４ １ ０ ０ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
第３ ８卷第 ７期 ２ ０ １ ３年 ７月
环 境 科 学 与 管理
ＥＮＶＩ Ｒ０Ｎ 佃 ＮＴＡＬ Ｓ ＣＩ ＥＮＣＥ ＡＮＤ Ｍ ＡＮＡＧＥＭ ＥＮＴ
Ｖ０ １ ． ３ ８ ＮＯ ． ７
Ｊ ｕ ｌ ｙ ２ ０１ ３
文 章编 号 ： １ ６ ７ ４— ６ １ ３ ９ （ ２ Ｏ １ ３ ） Ｏ ７— ０ １ ２ ６— ０ ３
结果ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ稳 定 ， 满 足环 境 监 测技 术 要 求 ， 可 用 以评 价 水 质 微 生 物 污 染 程 度 。
关键 词 ： 酶底物法 ； 多管 发 酵 法 ； 粪 大肠 菌 群 中 图分 类 号 ： Ｘ ８ ３ ０ ． ２ 文 献标 识 码 ： Ｂ
Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｆ ｅ ｃ ａ ｌ Ｃｏ ｌ ｉ ｆ ｏ ｒ ｍ ｉ ｎ Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｂ ｙ Ｅｎ ｚ ｙ ｍｅ Ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｔ ｅ Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｑ ｕ ｅ ａ ｎ ｄ Ｍｕ ｌ ｔ ｉ ｐ ｌ ｅ— — ｔ ｕ ｂ ｅ Ｆ ｅ ｒ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｑ ｕ ｅ
水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)两种检测方法的比较研究
水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)两种检测方法的比较研究摘要：本文采用固定底物酶底物法与传统多管发酵法对水中粪大肠菌群进行比对试验，比较两者检测结果的一致性。
结果表明，两种方法在结果一致性方面相关性好，无统计学意义上的显著性差异，与多管发酵法相比，酶底物法具有简便快速、结果准确、特异、实验过程污染的可能性低、无二次污染等优点。
关键词：固定底物酶底物法多管发酵法粪大肠菌群Comparative Study on Two Detection Methods of Fecal Coliform in Water (Thermotolerant Coliforms )Luo Yun Liuzhou Environmental Protection Monitoring Station, Guangxi 545001Abstract: This paper conducts a comparative test on fecal coliform in water with Defined Substrate Technology(DST) enzyme substrate technique and traditional Multiple-tube fermentation technique and compares the consistency of detection results. The result shows that both methods have a good correlation in the consistency of results and there is no significant difference in statistical sense. Compared to multiple-tube fermentation technique, enzyme substrate technique has such advantages as simplicity, rapidness, accurate result, specificity, low possibility of pollution in the experimental process and secondary pollution avoided.Key words: Defined Substrate Technology(DST) enzyme substrate technique; Multiple-tube fermentation technique; Fecal coliform粪大肠菌群（耐热大肠菌群）是水质污染的重要指标之一。
水环境粪大肠菌群监测2种分析方法的对比
水环境粪大肠菌群监测2种分析方法的对比粪大肠菌群是监测水体是否被粪便污染的指示菌,是监测地表水尤其是饮用地表水的重要指标之一。
它是总大肠菌群的一部分,其基本性状和总大肠菌群相似。
在实验时,将培养温度提高到44.5C,我们把可以在此条件下生长并发酵产酸产气的,称粪大肠菌群。
经典的粪大肠菌群的监测方法是采用多管发酵法,但这种方法具有前期准备时间长、任务繁重;培养过程中操作繁琐的缺点,并且事后还要清洗大量的试管,浪费人力、物力、财力。
为此很多厂家研发了大肠菌群的快检纸片。
采用纸片法,大大缩短了实验的时间,并且根本不需要再清理大量的试管,减轻了劳动强度,也节约了宝贵的水资源。
那么,多管发酵法和纸片法的数据究竟有没有相关性?作者采用某厂生产的大肠菌群的快检纸片通过对比实验旨在探讨这个问题。
一、分析方法1、多管发酵法(1)培养基单倍和三倍乳糖蛋白胨培养液(培养液的成分与制备略,下同)EC培养液(2)步骤①水样接种量：将水样充分混匀后,根据水样污染的程度确定水样的接种量,每个样品至少用3个不同的水样量接种,同一接种水样量要有五管。
如果接种的体积为10ml,则接种于含有三倍浓度5ml的乳糖蛋白胨培养液的试管内,如果接种量为1ml或者小于1ml,则接种于含有单倍浓度10ml的乳糖蛋白胨培养液的试管内。
②初发酵：将接种了水样的试管,在370.5C下培养242h,产酸和产气的发酵管表明实验阳性。
如产气不明显,可轻拍试管,有小气泡升起的为阳性。
③复发酵试验轻微振荡初发酵阳性的发酵管,用3mm接种环将培养物转接到EC培养液中。
在440.5C水浴中培养242h,培养后立即观察。
发酵管产酸产气表明确信试验阳性。
④计算和报告结果根据不同接种量的发酵管所出现的阳性结果的数目,从MPN表中查相应的MPN 指数,计算出每升水中粪大肠菌群的MPN值。
2、纸片法采用某厂生产的大肠菌群快检纸片①水样接种量：将水样充分混匀后,根据水样污染的程度确定水样的稀释倍数,每个样品至少用3个不同的水样量接种,同一接种水样量要有五个纸片。
比较快速检测水中粪大肠菌群的方法
f论与综述清洗世界Cleaning World第36卷第12期2020年12月文章编号：1671-8909 ( 2020) 12-0121-003比较快速检测水中粪大肠菌群的方法刘招椿(宁德市环境监测站东侨分站，福建宁德 352 1000)摘要：目的：粪大肠菌群集中产生在温血动物和人的粪便当中，其数量的多少在一定程度上直接代表着水体受粪便污染的具体程度，是目前国际上所通行的对受粪便污染水质监测的重要指示菌，其也是对城市污水特别是 生活污水进行综合评价的关键指标之一。
现阶段，我国环境监测部门主要采用多管发酵法和膜过滤法作为标准的 检测方法，但是这两种方法在检测过程中所花费的时间往往都比较长，一般需要两三天的时间，并且实验步驟十 分繁琐，对于环境的要求非常高。
为此，简便快速的检测方法至关重要。
关键词：水中粪大肠菌群；快速检测；固定底物酶底物法；多管发酵法中图分类号：X 321 文献标识码：A〇引言分析水中粪大肠菌群快速检测方法-固定底物酶底 物法与多管发酵法的比较，进而为实际检测工作提供更 多更好的检测方法。
方法：在检测水中粪大肠菌时分别利用固定底物酶 底物法与多管发酵法进行检测，在此基础上对两种方法 的检测结果进行比较。
结果：对大肠菌群进行科学检测 时，利用酶底物法与多管发酵法所检测出来的结果，在 一定程度上具备非常强的相关性，在浓度范围相对较低 的状态下样品浓度所具备的相关性比高浓度范围更好， 二者差异有统计学意义。
结论：利用酶底物法的检测结 果在一定程度上会比多管发酵法的检测结果低，这极有 可能与酶底物法检测的大肠埃希氏菌、多管发酵法检测 的粪大肠菌群所造成的，当置信度控制在95%的条件 下是允许存在差异的，并且与环境各方面的监测要求十 分相符，基于检测水中粪大肠方法成本价格、准确度、 灵敏度、简易性及定量范围的考虑，建议选用97孔定 量盘法与酶底物法检测水中粪大肠菌群。
1实验部分1.1仪器设备和试剂材料(1) 仪器设备。
环境水样中粪大肠菌群的两种方法的比较
的测定原理和实验步骤 ， 比较 固定底物酶底物法与 多管发酵法对于水 中粪大肠菌群 的检测 ， 即使用科立得 Ｔ Ｍ （ Ｃ ｏ ｌ ｉ ｌ ｅ ｒ ｔ ） 试剂和传统 方法检 测比
较两种方法试验结果 ， 最 终 得 出结 论 。
【 关键词 】 粪大肠菌群 多管发酵法 ｉ 固定底物酶底物法
３ 实验结果
选 用 粪 大肠 茵 群 标 准 茵株 ０ ６ ２ ０ １ ６ 一 Ｈ 对 两种 方 法 进 行 比
对。 比对 结果 如 表 ｌ 。
袭 ｌ 两 种 方 法 的 可 储 度 检 验
验 步骤繁琐 ． 实验 环 境 要 求较 高 ． 所 以我 们 需要 寻 找 和 选 择 快
速 简便 的 检 测 方 法 是 十 分 必 要 的 。此 外还 有 最 新 发 布 了一 个
１ ． ２ 设 备和材 料
科 立得 Ｔ Ｍ（ Ｃ ｏ ｌ ｉ ｌ ｅ ｒ ｔ ） 试剂 ， １ ０ ０ ｍ Ｌ无 菌瓶 （ 合有 １ ． ５ ％硫 代 硫 酸钠） ， 封 口机 ， ９ ７孔 定 量 盘 ， ９ ７孔 阳 性 标 准 比 色盘 ， 乳 糖 蛋
白胨 ， Ｅ Ｃ 肉汤 ， ３ ｍ ｍ 接种 环 ，酒精灯 ，培养 箱 （ 控 温 精 确± Ｏ ． ５ ℃） 、 恒 温振 荡 水 浴锅 ， 压力灭菌器 ． 移液枪等 。
【 中图分类号 】 Ｘ ８ ３ ２
【 文献标识码 】 Ａ
【 文章编号 】 ２ ０ ９ ５ — ２ ０ ６ ６ （ ２ ０ １ ７ ） １ ０ — ０ ０ １ ５ — ０ ２
引 言
①用无菌样品瓶量取 １ ０ ０ ｍ Ｌ混匀水样 （ 或 用无菌水适度
， 并加 入 科 立 得 Ｔ Ｍ（ Ｃ ｏ ｌ ｉ ｌ ｅ ｒ ｔ ） 试 剂 充 分 摇 匀溶 解 。 粪 大 肠 菌 群 又 称 耐 热 大肠 茵群 ． 是一群在 ４ ４ ． ５ ℃培 养 ２ ４ ～ 稀释 的水样）
几种粪大肠菌群检测方法的比较
水样滤完后，再抽气约 5s，关闭滤器阀门。取 下滤器，用灭菌镊子夹取带菌滤膜边缘部分移放 到 M – FC 培养基上，滤膜截留细菌面朝上，滤膜 应与培养 基 完 全 贴 紧。 盖 好 平 皿，将 平 皿 倒 放 到 44. 5℃ ± 0. 5℃ 隔水式培养箱中，培养 24 ± 2 h。 1. 2. 2. 3 计数和报告结果
和产气的发酵管表明试验阳性。如在倒管内产气
不明显，可轻拍试管，有小气泡升起的为阳性。
1. 1. 3 复发酵实验
轻微振荡初 发 酵 试 验 阳 性 结 果 的 发 酵 管，用
3 mm 接种环或灭菌棒将培养物转接到 EC 培养
液中。在 44. 5℃ ± 0. 5℃ 水浴下培养 24 ± 2 h。培
养后立即观察。发酵管产气表明确信试验阳性。
随着分子生 物 学 的 发 展 及 原 理 的 利 用，微 生 物的检测方法发生了质的变化，如仍然处于研究 阶段，技术的复杂性和检测费用较高的聚合酶链 式技术 （ polymerase chain reaction，PCR）〔5〕、荧 光 原位 杂 交 技 术 （ fluorescent in situ hybridization， FISH）〔6〕、自动化检测方法（ Automatization） 、利用 抗体与抗原特异性结合免疫荧光法〔5〕等目前还不 能广泛用于粪大肠菌群的日常检测。因此要实现 实际操作应用与普及还需要经历一个长期的反复
1. 1. 4 计算和报告结果
根据不同的接种量的发酵管所表现阳性结果
水中粪大肠菌群测定方法的比较研究分析
水中粪大肠菌群测定方法的比较研究分析湖南衡阳421200摘要:多管发酵法、滤膜法、纸片快速法和酶底物法是目前国内测定水中粪大肠菌群的常用标准方法。
分别从方法的检出限、方法操作、准确度和方法间的一致性四个方面对水中粪大肠菌群的测定进行了对比研究，总结出各方法的适用范围和优缺点，为分析人员根据实际条件和水样类型选择最佳方法提供参考。
关键词:粪大肠菌群;酶底物法;多管发酵法;滤膜法;纸片快速法粪大肠菌群是在 44．5℃ 温度下能生长并发酵乳糖产酸，产气，需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，主要来自粪便。
粪大肠菌群又称耐热大肠菌群，可以指示水体是否遭受粪便污染，直接指示生活污水的污染，间接反映肠道致病菌的污染风险，是水质检验中非常重要的卫生指标。
目前，国内测定水中粪大肠菌群的标准分析方法有多管发酵法、滤膜法、纸片快速法和酶底物法。
多管发酵法早在 1985 年就列入了《生活饮用水标准检验方法》( GB 5750 －85) ，至今已经沿用了三十多年，是行业内公认的粪大肠菌群测定的经典方法，卫生、水利、环保等行业均有多管发酵法的方法标准。
美国公共卫生协会( APHA) 出版的《水和废水标准检验方法》( 20 版) 中方法 9221E 也采用的是多管发酵法; 滤膜法采用直接计数特征菌落的方式，不同于其它三种方法采用 MPN 法计数，其应用广泛性仅次于多管发酵法，美国 APHA 方法9222D和ISO9308 － 1: 2014采用的是滤膜法; 纸片快速法在西方发达国家采用较少，主要在一些发展中国家使用，环保部在 2015 年发布了测定水中粪大肠菌群的纸片快速法; 酶底物法利用粪大肠菌群在邻硝基苯－β － D －吡喃半乳糖苷培养基上培养产生β － D －半乳糖苷酶，该酶可以分解色源底物释放出黄色的邻硝基苯酚，通过颜色变化定性，MPN 法定量。
我国没有酶底物法测定粪大肠菌群的现行国家和行业标准，美国APHA 方法 9221 E、ISO 9380 － 2: 2012 和 GB5750． 12 －2006均将酶底物法列入标准，但仅限测定总大肠菌群和大肠埃希氏菌。
两种检验水质粪大肠茵群方法的比较研究
两种检验水质粪大肠茵群方法的比较研究摘要：粪大肠菌群是评价水环境质量的重要卫生指示菌之一,水质粪大肠菌群的监测检验对保障人体健康和维护良好的生态环境有着重要的意义。
本文对实际水样分别用多管发酵法和滤膜法进行检验比较。
关键词：粪大肠菌群；多管发酵法；滤膜法；检测水样abstract: the fecal coliform over the water environmental quality evaluation, is one of the important health instructions bacteria, water quality monitoring inspection of fecal coliform over to protect the human health and maintain good ecological environment has important significance. this paper respectively with more actual water pipe, fermentation and the membrane filter method for the inspection comparison.keywords: fecal coliform bacteria; many tube fermentation; the membrane filter method; testing water中图分类号： r378.2+1 文献标识码：a 文章编号：水中病原微生物对人体健康形成的危害历史悠久，受病原微生物污染的水体中含有大量的致病菌，可引起伤寒、痢疾、霍乱和腹泻等肠道疾病，历史上曾发生过一些大城市因水源水质受到污染而造成的致命传染病的爆发和蔓延。
虽然人们现在通过采用加氯消毒的方式，已基本上控制了水致传染病的问题，但水体中还是不断发现新的病原微生物种，病原微生物至今仍是威胁人类健康和生命的重要原因。
论水环境中两种细菌检测方法的对比
总 大 肠 菌 群 数 ／ Ｌ ＿
９
有 总 大 肠 菌 群存 在 。 １ ． １ ． ２ ． ２水源水检验方法 （ １ ） 将水样按 １ ： １ ０稀释。 （ ２ ） 在各装有 ５ ｍｌ 的３ 倍浓缩乳糖蛋白陈培养液的 ５ 个试管 中 （ 内 有倒管） 各加人 ｌ Ｏ ｍ ｌ 水样 ； 在各装有 ｌ Ｏ ｍ ｌ 乳糖蛋 白陈 培养 液的 ５ 个试管 中（ 内有倒管） ， 各加人 ｌ ｍ ｌ 水样 ； 在各管装有 ｌ Ｏ ｍ ｌ 乳糖 蛋 白 陈培养液的 ５ 个试管中（ 内有倒管） ， 各加人 １ ： １ ０稀释水样 。 共计 １ ５ 管， ３ 个稀释度。以后的检测步骤同上述生活饮用水的检验方法。 １ ． ２滤 膜 法
论水环境 中两种细菌检 测方法的对 比
杨 明 （ 天津市东丽 区环境保护监测站
摘 要： 大 肠 杆 菌 是 人 及 各 种 动 物 肠 道 中的 正 常 寄 居 茵， 食 物 或 水 中大 肠 杆 菌 的 检 出即 意 味 着 直 接 或在负０ ． ５ ｘ １ ０ １ ３ ． ２ ５ ｈ Ｐ ａ 下抽 滤 。 ｆ ３ ） 水样滤完后 ， 再抽气约 ５ ｓ ， 关上滤器阀门 ， 取下滤器 ， 用灭菌镊 期 粪便 污 染 。在 检 测原 理 和 步骤 、 适 用 范 围 以 及 检 测 结 果 子夹取滤膜边 缘部分 ， 移取在 品红亚硫酸钠 培养基上 ， 滤膜截 留 等 方 面 对 两种 常规 的 大肠 茵群 检 测 方 法 作 了对 比研 究 。 细菌面 向上 ， 滤膜应 与培养基 完全 贴紧 ， 两者之间不得 留有气泡 ， 然后再放人 ３ ７ ℃恒温箱内培养 ２ ２ — ２ ４ ｈ 。 关键词 ： 菌群 ； 水环 境 ； 多管 发 酵 法 ； 滤 膜 法 ｆ ４ ） 观察结果 ： 挑选符合 下列特征菌落进行革 兰氏染色镜检 ： 紫红 １原 理和 步骤 色， 具有金属光泽 的菌落 ； 深红色 ， 不带或 略带 金属光泽 的菌落 ； １ ． １多管发酵法 淡红色 ， 中心色较深的菌落。 １ ． １ ． １ 原 理 ｆ ５ ） 凡系革兰氏染色阴性无芽胞杆菌 ， 再接种于乳糖蛋白陈培养液 根据总大肠菌群应具有 的生物特性 ， 如革 兰氏阴性 无芽胞杆 或乳糖 蛋白陈半 固体培养基 （ 接种前应将此培养基放人水浴 中煮 菌， 在 ３ ７ ￣ Ｃ 时２ ４ ｈ内能发 酵乳糖并产 酸产气 ， 能在选择性培 养基 沸排气 ， 冷却凝 固后方 能使用 ） 经３ ７ ￣ Ｃ 培养， 前 者于 ２ ４ ｈ产 酸产 上产生典型菌落。 气； 或后者经 ６ — ８ ｈ 培养后产气者 ， 则判定为总大肠菌群 阳性 。 １ ． １ ． ２步 骤 （ ６ １ １ Ｌ水中总大肠菌群数等于滤膜 生长 的大肠菌落总数乘 以 ３ 。 １ ． １ ． ２ ． １ 生活饮用水检 验方法 （ １ ） 初 发 酵 试 验 ：在 ２个 各 装 有 已灭 菌 ５ ０ ｍ ｌ 的 ３倍 浓 缩 乳糖 蛋 白 陈培养液 的大试管或烧瓶 中（ 内有倒管） ， 以无菌操作 各加人原 水 ２综合 比较 样 ｌ Ｏ Ｏ ｍｌ ； 在 １ ０支装配 已灭菌 ５ ｍ ｌ 的３ 倍 浓缩乳糖 蛋白陈培养液 大肠菌群检测用多管发酵法 ， 工作量较 大 ， 操作繁琐 ， 有时需 的试管 中（ 内有倒管１ ， 以无菌操作各加 人原水样 ｌ Ｏ Ｏ ｍ ｌ ， 混合 后置 ７ ２ ｈ才能得到结果 。以滤膜法测定饮用水等试样中大肠菌群是一 于３ ７ ℃恒温箱 内培养 ２ ４ ｈ 。 克服了多管发 酵法 中的许 多缺点 。它 可以通过增加洁 （ ２ ） 平板分 离 ： 经培养 ２ ４ ｈ后 ， 将产酸产气及 只产酸 的发酵管 分别 种好方法 ， 尤 其对水质非常 洁净 的 接种于品红亚硫 酸钠培养基或伊红美蓝培养基上 ， 再 置于 ３ ７ ％恒 净度高 的水样 的滤过量来提高测定精度 ， 设 想如果滤 过水 样为 ｌ Ｏ Ｏ ｍ ｌ 时大肠菌 温箱 内培养 １ ８ — ２ ４ ｈ ， 挑选符合下列 特征的菌落 ， 取菌落 的一 小部 水样如矿泉水等特别适用 ， ０ ０ ｍ ｌ 或 ｌ Ｏ ０ ０ ｍ ｌ 再培 分 进行 涂片 、 革兰 氏染色镜检。品红亚硫 酸钠培养基上 的菌落 ： 紫 群培养结果 呈阴性 ，如果该水样量增加到 ５ 养可能呈现阳性 ， 而 多管发酵法 限制 了测定 的水样量 。对饮用水 红色 ， 具 有金属 光泽 的菌落 ； 深 红色 ， 不 带或 略带金 属光 泽 的菌 只有 ３ ０ ０ ｍｌ 接 种量 ， 对水 源水而言接种量 则只有 ５ ５ ． ５ ｍ ｌ 或 落； 淡红色 ， 中心色较深 的菌落 。伊 红美 蓝培养基上的菌落 ： 深紫 而言 ， 更 少。接种量少势必影响洁净度高的水 样精度 ， 过滤可 以除去水 黑色 ， 具有金属光泽的菌落 ； 紫黑色 ， 不带或略带金属光泽的菌 样 中影 响细菌生长 的成分。 水样过滤后滤膜培养 ２ ４ ｈ ， 计数滤膜上 落； 淡紫红色 ， 为中心色较深 的菌落 。 ｄ或更 （ ３ ） 复发酵试验 ：上述涂 片镜 检的菌落如 为革 兰氏 阴性无芽胞 杆 的大肠菌群菌落即可出报告 ，而多管发酵法则必 须经 过 ３ 不 能满 足卫 生监督工作 的需要 。滤膜法精 菌， 则挑取该 菌落 的另一部分再接种于 普通浓度乳糖蛋 白陈培养 长时间才能得出结果 ， 准确度高 ， 测定误差较小 ， 可通过增加测定水量而获得更可 液（ 内有倒管） ， 每管 可接种分离 自同一初发 酵管 的最典 型 的菌落 密度 、 此方 法与多管发酵法相 比优 点较 多。 １ － ３个 ， 然后置于 ３ ７ ℃恒温箱 中培养 ２ ４ ｈ ， 有产酸产气 者 ， 即证 实 靠的水质信息 ，
粪大肠菌群测定的多管发酵法与纸片快速法比对分析
1引言
粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分，主要来自粪 便，在44.5 °C温度下能生长并发酵乳糖产酸产气切。 六盘水生态环境监测中心一直采用多管发酵法进行水 质中粪大肠菌群的测定,此方法精度高 ，但操做时间长, 步骤较为繁琐，需验证实验⑷，如果发酵管中存在其他 种类的产气菌，会致使检测结果偏离⑷。本次实验是对 多管发酵法与纸片快速法进行实验比对,对相同的实验 样品分别用此两种方法进行检测和结果评价 ，比较两种 方法的有效性和可比性。
<20 3.3X102
<20 1. 1X102
40 2. 4X103
2.4X103 2. 4X103
1.4X103 2. 1X101 1.6X104 1.4X104
表2粪大肠菌群实验结果判定
多管发酵法
95%置信限值
下限
上限
浓度 /(MPN/L)
/ 1. 1X102
/ 9.3X102
<20 2. 3X102
表3 粪大肠菌群平行双样实验结果判定
多管发酵法
95%置信限值
下限
上限
浓度 /(MPN/L)
纸片快速法
95%置信限值
下限
上限
1. 1X102
9.3X102
2. 3X102
70
7. 0X102
70 3. 7X102
7.0X102 3.4X103
1. 3X102 7. 9X102
30 2.5X102
3. 1X102 1. 9X103
2实验概况
2.1材料与方法 多管发酵法:乳糖蛋白培养基、EC肉汤培养基。 纸片快速法:BD105 I水质(粪)大肠菌群快速检验
纸片、BD105 H水质(粪)大肠菌群快速检验纸片。 2.2仪器和设备
水中粪大肠菌群测定方法-纸片快速法与多管发酵法的比较
水中粪大肠菌群测定方法-纸片快速法与多管发酵法的比较黄晓容【摘要】2015年10月国家环境保护部发布了行业标准《水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法》（HJ755-2015）（以下简称纸片快速法）。
之前环境监测部门一直在使用国家环境保护部于2007年3月发布的行业标准《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法（试行）》（HJ/T347-2007）（以下简称多管发酵法）。
纸片快速法操作简单快速,在标准中对采样瓶的处理、样品的保存、水样的稀释接种等做出了详细的规定,而多管发酵法中没有相应规定。
本文对两个标准的异同点进行比较,提出了将这两种方法的优点应用于实际环境监测工作中。
【期刊名称】《生物技术世界》【年(卷),期】2016(000)004【总页数】2页(P33-33,35)【关键词】粪大肠菌群;多管发酵法;纸片快速法【作者】黄晓容【作者单位】重庆市黔江区环境监测中心站，重庆409000【正文语种】中文【中图分类】X8我国地表水体粪大肠菌群含量普遍较高，部分水域含量甚至超过Ⅴ类水质标准数万倍［2］。
我国粪便微生物指标的评价还处于起步阶段，水质评价多以常规理化指标为主，对微生物指标的评价有待进一步加强。
目前水中粪大肠杆菌群检测方法主要有传统的滤膜法及多管发酵法，并且已经列入环保行业标准方法（HJ/T347-2007），此两种传统方法被国内环境监测部门广泛采用，但上述方法操作时间需2-5天，步骤较为繁琐，需验证试验。
多管发酵法每100毫升水样中最低检出限为2个粪大肠菌群［1］。
冯青英等人对传统的多管发酵法进行了优化，将水样接种至乳糖蛋白胨培养液后，在44.5℃±0.5℃培养箱中培养24h后直接读取结果［3］。
多管发酵法不受浊度的影响，可以对浊度较大的污水水样进行监测。
纸片法培养时间对阳性管率有明显影响，适用于测定受粪便污染程度较轻的水体［4］。
多管发酵法和纸片快速法均为行业标准，对粪大肠菌群的检测做出了详细的规定，现就两个标准中的异同做以下探讨。
水中粪大肠菌群的测定-酶底物法与荧光光度法的比较
水中粪大肠菌群的测定-酶底物法与荧光光度法的比较
张茵;刘溪南;王静;刘娟
【期刊名称】《煤炭与化工》
【年(卷),期】2024(47)3
【摘要】采用酶底物法和荧光光度法对水源水、景观水、污水中粪大肠菌群进行检测。
通过检测高浓度标准样品与低浓度标准样品发现,酶底物法和荧光光度法相比,荧光光度法检测结果相对误差更小,跟接近于真值,其结果更为准确。
荧光光度法相对标准偏差低于酶底物法,表明荧光光度法检测的稳定性优于酶底物法。
通过选取不同类型的实际样品分别用2种方法测定,并对结果进行统计学分析,发现2种方法在统计学中具有相关性,无显著差异。
采用荧光光度法测定粪大肠菌群具有测定时间短,减少了人为误差,同时避免了测定时间对结果的影响,特别适合应急检测。
【总页数】5页(P151-154)
【作者】张茵;刘溪南;王静;刘娟
【作者单位】河北省生态环境监测中心;中国南水北调集团中线有限公司河北水质监测中心;石家庄高新技术产业开发区供水排水公司
【正文语种】中文
【中图分类】O65
【相关文献】
1.水中粪大肠菌群测定方法的比较研究分析——酶底物法与多管发酵法
2.固定底物酶底物法与多管发酵法和快速纸片法测定水中粪大肠菌群(耐热大肠菌群)的比较
3.滤膜法与固定底物酶底物法测定地表水中粪大肠菌群的比较研究
4.酶底物法与多管发酵法和纸片法测定水中粪大肠菌群方法比较
5.酶底物法与纸片快速法测定地表水中粪大肠菌群的比较分析
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多管发酵法与滤膜法测定粪大肠菌群对照实验
多管发酵法与滤膜法测定粪大肠菌群对照实验【摘要】本文采用传统多管发酵法与滤膜法对水中粪大肠菌群进行比对实验，比较两者监测结果的一致性。
结果表明，两种方法在结果一致性方面相关性好，与多管发酵法相比，滤膜法具有简便快速、结果准确的特点，实验过程污染的可能性低、无二次污染等优点。
【关键词】多管发酵法滤膜法粪大肠菌群引言；水中粪大肠菌群的测定是污水处理的重要指标之一，环境监测的重要意义指通过对影响环境质量因素的代表值的测定，确定环境质量（或污染程度）及其变化趋势，从而指导工艺。
然而面对每天繁重的监测工作，如何使实验更准确，方法更简便，是我们实验人员更加关注的问题。
本文主要讨论多管发酵法与滤膜法测定粪大肠菌群这两种方法，通过实验对照，确定一个最佳方法用于工艺指导。
粪大肠菌群是水质污染的重要指标之一。
目前，我国地表水及废水中粪大肠菌群的监测方法主要有传统的多管发酵法（MTF）及滤膜法（MF）。
无论是哪一种方法，都是利用其可在高温生长并发酵乳糖产酸产气的特点，所以实验过程最终要的环节是严格地控制好温度。
本实验通过采用传统多管发酵法与滤膜法，对大量实际水样中的粪大肠菌群同步检测，进行比对实验，实验结果进行比较分析。
一、实验部分1、多管发酵法1.1培养基的准备① 乳糖蛋白胨培养液：称取23.3g乳糖蛋白胨培养液于1L超纯水中，分装于有倒立发酵管的试管中，120度高温灭菌15分钟。
单倍培养液取10ml，准备10支。
三倍培养液取5ml，准备5支。
② EC肉汤：称取3.7g EC肉汤于1L超纯水中，分装于有倒立发酵管的试管中，120度高温灭菌15分钟，每管8ml，准备10支。
1.2实验方法①根据我厂的出水情况，接种量分别为10ml、1ml、0.1ml，接种体积10ml的水样装入3倍乳糖蛋白胨培养液中，共5支。
接种体积1ml和0.1ml的水样各装入单倍乳糖蛋白胨培养液中，分别5支。
共15支。
②在37℃±0.5℃下培养24±2h，产酸和产气的发酵管表明实验阳性。
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现行两种水质粪大肠菌群测定方法的比较
作者：马旭东赵锋
来源：《绿色科技》2015年第10期
摘要：指出了由国家环境保护总局主持修订的第三版地表水环境质量标准《地表水环境质量标准》（GB3838—2002）2002年4月发布，其中粪大肠菌群也被列为24项基本项目之一。
然而直到2007年3月才由国家环境保护总局发布了行业标准《水质粪大肠菌群的测定多管发酵发和滤膜法》（HJ/T347-2007）（以下简称“行业标准”）。
之前环境监测部门一直都是在使用卫生部发布的《生活饮用水标准检验方法微生物指标》（GB/T5750.12-2006）（以下简称“国家标准”）。
主要通过对这两个标准的异同点的比较，探究了将这两种方法的优点用在实际的环境监测工作中。
关键词：地表水环境质量标准；粪大肠菌群；环境监测
中图分类号：X832
文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2015）10-0216-02
1 概述
大肠菌群并非细菌学分类命名，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌，粪大肠菌群则是大肠菌群的一部分主要来自于粪便，因此粪大肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染，可能存在大肠杆菌。
国家标准和行业标准中都对粪大肠菌群的检测（多管发酵法）作出了比较详细的规定，现就其两个标准中的异同作出如下探讨。
2 相同点
适用范围相同：行业标准和国家标准都适用于地表水、地下水和污水中的粪大肠菌群的检测。
原理相同：多管发酵法是以最可能数简称MPN来表示试验结果的。
实际上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠菌群密度和卫生质量的一种方法。
如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。
不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度。
因此在实验设计上，水样所要求重复的数目，要根据所要求数据的准确度而定。
3 不同点
（1）国家标准中规定水样采集前，需要在采样瓶中加入适量的硫代硫酸钠，用以消除或减小样品中的氯对于微生物正常生长的影响，而行业标准中没有相应的规定。
（2）国家标准中规定水样在分析时的稀释方法为取1 mL水样注入到9 mL灭菌生理盐水中混匀，若需要再次稀释则取上述稀释液1 mL注入到9 mL灭菌生理盐水中，以此类推。
若接种量小于1 mL时则必须作10倍递增稀释，并且还要注意的是每递增稀释一次，换用1支1 mL灭菌刻度吸管，行业标准中没有相应的规定。
（3）对于不同的水样，国家标准中没有给出一个建议稀释度，而行业标准中有一个明确的稀释方法建议，见表1。
（4）复发酵试验的方法不同，这一点也是最为重要的一点。
行业标准中对于复发酵试验的规定是：轻微震荡初发酵试验阳性的发酵管，用3 mm接种环或灭菌棒将培养物转接到EC 培养液中。
在44.5±0.5℃下培养24±2 h。
接种后所有发酵管必须在30 min内放入水浴中。
培养后立即观察，发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性。
而国家标准中规定若复发酵有产气者，则转种于伊红美蓝琼脂平板上，置44.5℃培养18～24 h，凡平板上有典型菌落者，则证实为粪大肠菌群阳性。
即国家标准中在复发酵试验发酵管产酸或产气之后还需要进行一个平板分离和革兰氏染色见证试验才能证明水样中有无粪大肠菌群的存在，而行业标准中只要是复发酵试验产气则就能证明粪大肠菌群阳性。
4 革兰氏染色
4.1 原理
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
4.2 步骤
（1）涂片固定。
（2）草酸铵结晶紫染1 min。
（3）自来水冲洗。
（4）加碘液覆盖涂面染约1 min。
（5）水洗，用吸水纸吸去水分。
（6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20 s后水洗，吸去水分。
（7）蕃红染色液（稀）染1 min后，自来水冲洗。
干燥，镜检。
5 革兰氏染色对于粪大肠菌群检测的重要意义
在微生物学中，大肠杆菌是一种革兰氏阴性无芽孢的原核生物。
相对于革兰氏阳性细菌来说，其特点是：细胞壁较薄、较疏松且肽聚糖含量较低。
这就造成了在进行革兰氏染色时会在复染阶段被二次染色从而区别于革兰氏阳性细菌。
6 结论
（1）行业标准中没有对于采样时采样瓶的处理方法，故在实际操作中可以参照国家标准中的相关规定。
（2）行业标准中没有规定水样在分析时的稀释方法，故在实际操作中可以参照国家标准中的相关规定。
（3）在实际的分析工作中分析人员可以根据这个稀释方法以及平时对于该项目的积累可以尽可能少地选择一个或者几个稀释度对样品进行分析，从而减少因稀释度的选择不合适而造成的各种浪费。
（4）就算按照国家标准的规定，每个样品在复发酵之后还要对其阳性试管进行分离鉴定及革兰氏染色，而在分离鉴定和革兰氏染色过程中仍然会有可能因操作手法、试剂或其他偶然因素而造成鉴定结果出现假阳性或假阴性，从而对粪大肠菌群的整个实验结果造成偏离甚至是错误。
而在行业标准的复发酵过程中，如果发酵管中根本不存在大肠杆菌，而是存在一些其他种类的革兰氏阳性细菌，而革兰氏阳性细菌在发酵过程中也必然会产气。
这时只要发现其产气就认定为粪大肠菌群阳性是否欠妥。
7 建议
总大肠菌群、粪大肠菌群和细菌总数等都是属于生物监测项目，并常常与其他各种化学项目同期采样。
因这两个标准中都没有对于生物项目和化学项目在采样时应注意的先后顺序，从而导致经常会出现在同一个采样点位先采化学项目、后采生物项目，或者化学项目与生物项目
交替进行采样的情况，而这些情况势必会对生物项目的水样造成影响。
希望下次修订标准的时候可以考虑这个情况。
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.生活饮用水标准检验方法微生物指标 GB/T 5750.12-2006[S].北京：中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会：2006.
[2]国家环境保护部.水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法 HJ/T347-2007 [S].北京：国家环境保护部，2007.
[3]周德庆.微生物教程[M].2版.北京：高等教育出版社，2002.
[4]沈萍.微生物学实验[M].4版.北京：高等教育出版社，2007.
[5]国家环境保护总局，国家质量监督检验检疫总局.地表水环境质量标准 GB3838-2002[S].北京：国家环境保护总局，国家质量监督检验检疫总局，2002.
[6]周群英.环境工程微生物学[M].3版. 北京：高等教育出版社，2000.。