水质总大肠菌群和粪大肠菌群(纸片快速法)检测方法确认表
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C=100*M/Q
式中:
C—水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度(MPN/L)
M—查MPN表得到的MPN值(MPN/100ml)
Q—实际水样最大接种量(ml)
100—为10*10ml,其中,10将MPN值的单位MPN/100ml转换为MPN/L,10ml为MPN表中最大接种量。
3.结果表示:
测定结果保留二位有效数字,大于等于100时以科学计数法表示,结果的单源自文库为MPN/L。平均值以几何平均计算。
1.仪器和设备
1.1高压蒸汽灭菌器
1.2培养箱
1.3冰箱
1.4采样瓶
1.5试管
1.6水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片
2.试剂:2.1硫代硫酸钠2.2乙二胺四乙酸二钠
采样和测试过程中,所用到的玻璃器皿需灭菌后方可使用。
方法描述
按MPN法,将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂(溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯四氮唑即TTC)以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上,在特定的温度(37℃或44.5℃)培养24h,当细菌生长繁殖时,产酸使pH值降低,溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色,同时,产气过程相当的脱氢酶在适宜的pH范围内,催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲(TTF)。即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点(或红晕)。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断,从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在,再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。
检测结果的判断
1.结果判读:
(1)制片上出现红斑或红晕且周围变黄,为阳性。
(2)纸片全片变黄,无红斑或红晕,为阳性。
(3)纸片部分变黄,无红斑或红晕,为阴性。
(4)纸片的紫色背景上出现红斑或红晕,而周围不变黄,为阴性。
(5)纸片无变化,为阴性。
2.结果计算:
根据不同接种量的阳性纸片数量,查MPN表得到MPN值,按公式换算并报告1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数:
方法名称
水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定
(纸片快速法)
申请人
项目负责人员
制定原因
验证检测方法符合实验室要求、确保数据准确性与有效性
方法适用范围
适用于地表水、地下水及废水中的总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。
方法来源
HJ 755-2015《水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法》
仪器、试剂和环境的要求
附件说明
表1
运行说明
经验证该方法符合我实验室使用。
审批意见
技术经理:
日期:
总经理:
日期:
表1
式中:
C—水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度(MPN/L)
M—查MPN表得到的MPN值(MPN/100ml)
Q—实际水样最大接种量(ml)
100—为10*10ml,其中,10将MPN值的单位MPN/100ml转换为MPN/L,10ml为MPN表中最大接种量。
3.结果表示:
测定结果保留二位有效数字,大于等于100时以科学计数法表示,结果的单源自文库为MPN/L。平均值以几何平均计算。
1.仪器和设备
1.1高压蒸汽灭菌器
1.2培养箱
1.3冰箱
1.4采样瓶
1.5试管
1.6水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片
2.试剂:2.1硫代硫酸钠2.2乙二胺四乙酸二钠
采样和测试过程中,所用到的玻璃器皿需灭菌后方可使用。
方法描述
按MPN法,将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂(溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯四氮唑即TTC)以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上,在特定的温度(37℃或44.5℃)培养24h,当细菌生长繁殖时,产酸使pH值降低,溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色,同时,产气过程相当的脱氢酶在适宜的pH范围内,催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲(TTF)。即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点(或红晕)。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断,从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在,再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。
检测结果的判断
1.结果判读:
(1)制片上出现红斑或红晕且周围变黄,为阳性。
(2)纸片全片变黄,无红斑或红晕,为阳性。
(3)纸片部分变黄,无红斑或红晕,为阴性。
(4)纸片的紫色背景上出现红斑或红晕,而周围不变黄,为阴性。
(5)纸片无变化,为阴性。
2.结果计算:
根据不同接种量的阳性纸片数量,查MPN表得到MPN值,按公式换算并报告1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数:
方法名称
水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定
(纸片快速法)
申请人
项目负责人员
制定原因
验证检测方法符合实验室要求、确保数据准确性与有效性
方法适用范围
适用于地表水、地下水及废水中的总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。
方法来源
HJ 755-2015《水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法》
仪器、试剂和环境的要求
附件说明
表1
运行说明
经验证该方法符合我实验室使用。
审批意见
技术经理:
日期:
总经理:
日期:
表1