实验七、微生物遗传物质提取、测序实验
微生物学中的微生物培养与鉴定实验报告
微生物学中的微生物培养与鉴定实验报告实验目的：本实验旨在学习并掌握微生物培养与鉴定的基本方法，了解微生物在培养基上的生长特性，并通过鉴定方法对其进行初步鉴定。
材料与设备：- 需要培养的微生物样本- 培养基（固体培养基和液体培养基）- 培养皿- 移液器- 培养箱- 显微镜- 染色剂（如甲基蓝、格拉姆染色等）- 鉴定手册或相关资料实验步骤：一、准备工作1. 检查培养箱的温度设定，保证培养环境的恒温。
2. 准备好所需的培养基，分别配置固体培养基和液体培养基。
二、微生物培养1. 将固体培养基倒入培养皿中，用移液器从微生物样本中取得少量细菌液滴于培养基表面。
2. 用棉签均匀地将细菌液在培养基表面涂抹，以形成单个菌斑或菌落。
3. 将盖子盖好，将培养皿放入预先恒温的培养箱中，设置适当的培养条件（如温度、湿度等），进行培养。
三、液体培养1. 将充足的液体培养基倒入培养瓶中，按照实验要求加入适量的微生物样本。
2. 盖好培养瓶盖，轻轻摇晃，使微生物均匀悬浮于培养基中。
3. 将培养瓶放入培养箱中，设置适当的培养条件进行培养。
四、微生物鉴定1. 取出培养好的微生物样本，观察其培养特性，如菌落形态、颜色、大小等，并记录相关观察结果。
2. 可根据需要，在液体培养基中进行荧光反应、氧需求等特定实验，以进一步鉴定微生物。
3. 对需要深入鉴定的微生物样本，可进行微生物染色，如甲基蓝染色、格拉姆染色等常用染色方法，观察染色后的细菌形态，并与鉴定手册或相关资料进行对照。
结果与讨论：通过本次实验，我们成功地培养了微生物样本，并通过观察菌落特征和染色方法进行了初步的微生物鉴定。
根据观察结果，我们可以初步判断微生物属于哪个种类或属。
然而，本实验只是初步鉴定，对于微生物种类的确切鉴定还需要进一步深入的实验或分析。
对于未能明确鉴定的微生物种类，可以继续进行相应的实验或请专业人员进行进一步的鉴定。
结论：微生物培养与鉴定是微生物学研究中的基础内容。
细菌提取教程实验报告
细菌提取教程实验报告一、引言细菌提取是一种用于从样本中分离出单独的细菌菌株的技术。
在微生物学研究中，细菌提取通常用于分离研究特定功能或性质的细菌，或者用于获取单一的纯净细菌菌株。
本实验报告将介绍一种简单而有效的细菌提取方法，并详细描述实验步骤和结果。
二、材料与方法1. 实验材料准备- 实验室准备好的培养基- 细菌样本- 吸管- 单次使用的塑料匙- 恒温培养箱或恒温恒湿箱- 离心机2. 实验步骤步骤1：制备试管培养基根据实验需要选择适当的培养基，并按照厂家说明书的指导将试管培养基制备好。
步骤2：提取细菌1. 使用无菌处理的吸管将待提取的细菌样本搅拌均匀，并转移到用试管培养基培养的培养皿中。
2. 使用塑料匙，在培养皿中刮取一小部分含有细菌的培养基。
3. 将含有细菌的培养基转移到另一个含有试管培养基的培养皿中，注意不要将细菌样本与其他培养基混合。
4. 重复2-3步骤，将细菌样本连续传递至另一培养皿，直到有单独的细菌菌落出现。
步骤3：培养细菌将包含单独细菌菌落的培养基转移至一个新的试管培养皿中，并在恒温培养箱或恒温恒湿箱中以适当的温度和湿度条件下培养细菌。
步骤4：纯化细菌当细菌在培养皿中形成较大的菌落后，使用吸管或无菌的微量移液器将单个细菌菌落转移到新的培养皿中。
步骤5：保存细菌将纯化后的细菌菌株转移至新的培养皿中，并选择适当的保存方法进行细菌保存，如冷冻保存或制备冻干物备份。
3. 实验结果完成细菌提取实验后，我们观察到细菌样本成功形成了单一的细菌菌落。
通过后续的培养和纯化步骤，我们得到了纯净的细菌菌株。
在保存细菌的过程中，我们选择了冷冻保存的方法，以确保细菌的长期保存。
保存的细菌样本经过一段时间后，仍然能够成功培养出纯净的菌株。
三、讨论与结论本实验使用的细菌提取方法简单而有效，成功得到了单一纯净的细菌菌株。
通过细菌提取，我们可以获得研究特定细菌的纯净样本，为后续的微生物学研究提供了可靠的实验基础。
另外，本实验还介绍了保存细菌的方法，以确保长期保存和备份。
生物技术实验
生物技术实验精选朱嘉明程龙球周天鸿李月琴梁旭方方玲梁宠荣马三梅徐明芳王莹编著刘大岭邓宁李仸强杨维东姚冬生2006年7月生物技术实验精选目录A 遗传·基因工程部分实验一果蝇饲养及遗传学研究技术实验二人类染色体基本实验技术实验三DNA的重组、克隆与鉴定实验四功能基因实验技术实验五海洋微藻特异基因的转录和表达分析B 细胞工程部分实验六动物细胞培养实验七植物组织培养实验八植物多倍体诱収和鉴定实验九转基因斑马鱼实验实验十植物转基因技术C 微生物工程部分实验十一正交试验法在微生物培养条件优化选择中的应用实验十二细菌mRNA的提取及其逆转录实验十三微生物生长动力学——细菌生长动力的测定实验十四食品、药品和水等的微生物检验技术D 生物化学技术·酶工程部分实验十五蛋白质双向凝胶电泳实验十六人基因组DNA提取实验十七植物基因组DNA提取实验十八抗血清的制备与效价测定实验十九酶联免疫吸附技术实验二十α-地中海贫血的快速基因诊断实验二十一从植物材料中提取制备过氧化物酶实验二十二海洋微藻的实验室培养与活性成分的分离实验二十三天然甲壳素的提取和分离实验二十四家兔动脉血压与呼吸运动的调节实验二十五模拟过氧化物酶的制备、固定与应用实验二十六以枯草杆菌生产蛋白酶实验二十七包埋法、交联法对细胞、酶的固定化操作及其比较备注：红字为精选出来的内容A 遗传·基因工程部分实验三DNA的重组、克隆与鉴定前言——重组质粒的构建设计基因工程又称遗传工程、DNA 重组技术、分子克隆等。
它是七十年代在分子生物学发展的基础上形成的新学科。
所谓基因工程，就是在分子水平上，用人工方法提取（或合成）某一生物的遗传物质，在体外切割，拼接和重新组合，然后通过载体把重组的DNA 分子引入受体细胞，使外源DNA 在受体细胞中进行复制和表达。
按人们的意愿定向创造生物新性状，使之稳定地遗传给下一代。
所以基因工程具有广阔的应用前景，即能为工农业生产和工医药保健等开拓新途径，又能为生物的细胞分化，生长发育，肿瘤发生等基础研究提供有效的实验手段。
DNA提取与测序实验报告
DNA提取与测序实验报告一、实验目的1、掌握从生物样本中提取 DNA 的基本原理和方法。
2、熟悉 DNA 测序的基本流程和操作要点。
3、学会对 DNA 提取和测序结果进行分析和评估。
二、实验原理DNA 提取原理DNA 在细胞中以与蛋白质结合的状态存在。
提取 DNA 的基本思路是通过裂解细胞，使细胞膜和核膜破裂，释放出 DNA，然后去除蛋白质、RNA 等杂质，得到纯净的 DNA。
常用的裂解方法包括物理方法（如研磨、超声破碎）、化学方法（如使用去污剂）和酶解法（如使用蛋白酶K）。
去除杂质的方法则包括使用酚/氯仿抽提、乙醇沉淀等。
DNA 测序原理目前常用的 DNA 测序技术是 Sanger 测序法。
其基本原理是在DNA 合成过程中，通过掺入特定的双脱氧核苷酸（ddNTP）来终止DNA 链的延伸。
由于 ddNTP 缺少3’OH 基团，一旦掺入到 DNA 链中，链的延伸就会终止。
通过在多个反应中分别加入不同的 ddNTP，可以得到一系列不同长度的 DNA 片段。
这些片段经过电泳分离，根据条带的位置可以读取 DNA 的碱基序列。
三、实验材料与设备实验材料1、新鲜的动物组织（如肝脏、肌肉）或植物组织（如叶片）。
2、细胞培养物（如细菌、酵母）。
实验试剂1、细胞裂解液（包含去污剂、蛋白酶 K 等）。
2、酚/氯仿/异戊醇混合液（25:24:1）。
3、无水乙醇、70%乙醇。
4、 TE 缓冲液（10 mM TrisHCl，1 mM EDTA，pH 80）。
5、 DNA 测序试剂盒（包含引物、dNTP、ddNTP、DNA 聚合酶等）。
实验设备1、离心机。
2、移液器。
3、恒温水浴锅。
4、电泳仪。
5、凝胶成像系统。
6、 DNA 测序仪。
四、实验步骤DNA 提取步骤1、样本处理对于动物组织，将其剪碎后加入适量的裂解液，在匀浆器中匀浆。
对于植物组织，先在液氮中研磨成粉末，然后加入裂解液。
对于细胞培养物，离心收集细胞，加入裂解液重悬。
微生物学实验技术
微生物学实验技术
微生物学实验技术是研究和发掘微生物的重要方法，也是一门多种实验技术和方法的
综合。
它既可以应用于生物体内，对微生物调查，可以使用培养基或特定介质进行鉴定，
也可以用来通过遗传工程分离、改造微生物，了解不同微生物的全部 trait 特性。
一、培养微生物
培养微生物是一种最常用的微生物实验技术，需要使用特定的培养基，通过控制温度、湿度等变量的变化来培养不同的微生物。
通过检测培养基中的微生物数量及某些代表性特征，可确定微生物的分类特征，来鉴定微生物的种类和形式。
二、基因组测序
基因组测序是一种实验技术，是分析一个微生物种类全部 genetic 的方法。
主要利
用高通量DNA测序技术，对样品中贮藏的 DNA 进行范围检测，得到 DNA 的测定序列，从
而确定微生物的遗传结构、物种种类，以及特定物种生态和功能特征。
三、共价法抗菌药敏试验
共价法抗菌药敏试验是研究微生物对一类药物或多类药物的抗性程度的重要方法之一。
通过检测药物剂量的不同，在药物浓度相同的情况下微生物在某种时间内生长情况不同，
来确定微生物对某种药物或多类药物的抗性情况。
四、特异性提取
特异性提取是一种以特定方法从微生物中提取出特定“ biomolecule ”，比如 DNA、蛋白质等，分离和纯化微生物某功能元件或特征分子的实验技术。
这种技术既可以提取大
量的基因片段，也可提取微量的特异性物质。
五、遗传修饰
遗传修饰是一种利用遗传工程改造或添加微生物特定遗传物质来改变微生物的特性的
实验技术，常用来进行分子育种和改良育种，以提高产品的质量和性能。
微生物测序技术
微生物测序技术随着科学技术的不断进步，微生物测序技术在生物学和医学领域中的应用越来越广泛。
微生物是一类非常小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们在自然界中广泛存在，对人类的健康和环境的影响很大。
而微生物测序技术则可以帮助我们更好地了解微生物的基因组信息，从而揭示微生物的功能和作用。
微生物测序技术的原理是通过DNA测序来获得微生物的基因组序列。
DNA是生物体内的遗传物质，包含了生物体的全部基因信息。
通过将微生物样本中的DNA提取出来，并使用特定的测序方法，可以将DNA序列读取出来。
这些DNA序列经过分析和比对，就可以得到微生物的基因组信息。
微生物测序技术的应用非常广泛。
在农业领域，可以利用微生物测序技术来研究土壤中的微生物群落，了解微生物的多样性和功能，为农业生产提供科学依据。
在医学领域，微生物测序技术可以用于研究人体内的微生物组成，例如肠道菌群，从而揭示微生物与人类健康之间的关系，为疾病的预防和治疗提供新的思路。
在环境保护领域，微生物测序技术可以用于监测水体、土壤等环境中的微生物，评估环境质量和生态系统的健康状况。
微生物测序技术的发展也带来了许多挑战。
首先是数据处理和分析的复杂性。
每个微生物样本产生的测序数据量巨大，需要借助高性能计算和先进的分析算法来处理和解读。
其次是数据的准确性和可靠性。
微生物测序技术在测序过程中可能存在测序错误和杂质污染等问题，需要采取相应的措施来保证数据的准确性和可靠性。
此外，还需要解决样本采集、保存和处理等方面的技术问题，确保微生物样本的质量和可靠性。
尽管存在一些挑战，微生物测序技术仍然具有巨大的潜力和发展前景。
随着技术的不断进步和成本的降低，微生物测序技术将更广泛地应用于生物学、医学、环境科学等领域。
通过深入研究微生物的基因组信息，我们可以更好地理解微生物的功能和作用，为解决农业、医学和环境问题提供新的思路和解决方案。
微生物测序技术的发展将推动微生物学的进步，为人类的健康和环境的保护做出更大的贡献。
植物组织遗传物质的提取与检测实验报告
植物组织遗传物质的提取与检测实验报告实验目的：了解植物组织遗传物质的提取方法和常用的检测方法。
实验原理：1. 植物组织遗传物质的提取方法：（1）CTAB法：该方法可用于提取植物组织中的DNA，具有简便快捷、价格低廉、纯度高、适用于大量样品等优点。
（2）酚/氯仿法：该方法主要用于提取植物种子和干燥植物材料中的DNA。
（3）柱层析法：该方法可用于DNA的纯化和寡核苷酸的制备。
2. 常用的植物组织遗传物质检测方法：（1）凝胶电泳法：该方法可用于检测DNA和RNA，是目前最常用的分离和检测遗传物质的方法之一。
（2）PCR法：该方法可用于扩增某一片段的DNA，具有灵敏度高、特异性强、适用于少量或低浓度的样品等优点。
（3）Southern blotting法：该方法可用于检测某一特定基因的存在与否，并可以估算基因的拷贝数和分析结构等。
实验材料：PCR仪、琼脂糖凝胶、DNA提取试剂盒、电泳仪、紫外线照相仪、PCR试剂盒等。
实验步骤：1. 提取DNA：（1）取一片新鲜的植物叶片放入研钵中，加入适量的CTAB提取液，进行研磨。
（2）将研磨好的样品转移到离心管中，进行蛋白质酶处理、乙醇沉淀等步骤。
（3）使用紫外线照相仪测定DNA浓度和质量。
2. 准备琼脂糖凝胶：（1）按照琼脂糖凝胶的要求调配好琼脂糖缓冲液。
（2）将琼脂糖缓冲液煮沸，将琼脂糖加入其中，搅拌至溶解。
（3）将混合物冷却至约60℃，倒入凝胶板中，在其表层形成凝胶。
3. 进行电泳分析：（1）将DNA样品通过电泳进行分离。
（2）将分离好的DNA样品转移到凝胶板电泳槽中，通电分离。
（3）运用特殊技术进行荧光探针和显色剂的染色，测定目标位点的大小和数量等信息。
实验结果：通过琼脂糖凝胶电泳分析，可以检测到植物叶片中的DNA条带（大小约为7kb），说明提取到了植物组织中的遗传物质。
实验结论：通过本实验可以了解植物组织遗传物质的提取方法和常用的检测方法，掌握凝胶电泳、PCR扩增等技术的操作流程，此外还应注意实验的安全和环保问题，避免对环境产生负面影响。
微生物基因组DNA提取
原 因
1.
DNA中含有蛋白、 DNA中含有蛋白、 中含有蛋白 多糖、多酚类杂质 多糖、 DNA在溶解前， DNA在溶解前，有 在溶解前 酒精残留， 酒精残留，酒精抑 制后续酶解反应 DNA中残留有金属 DNA中残留有金属 离子
1.
重新纯化DNA， 重新纯化DNA，去 DNA 除蛋白、多糖、 除蛋白、多糖、多酚 等杂质 重新沉淀DNA， 重新沉淀DNA，让 DNA 酒精充分挥发 增加70％ 增加70％乙醇洗涤 70 的次数（ 的次数（2-3次）
三、操作步骤
1．培养5ml的细菌培养物至饱和状态，取1.5ml的培养 培养5ml的细菌培养物至饱和状态， 1.5ml的培养 5ml的细菌培养物至饱和状态 12000rpm离心5min。 离心5min 物12000rpm离心5min。 沉淀物加入567μl TE缓冲液 缓冲液， 2．沉淀物加入567μl 的TE缓冲液，用吸管反复吹打使 之重悬。加入30μl 10%的SDS和 20mg/ml的蛋白 之重悬。加入30μl 10%的SDS和3μl 20mg/ml的蛋白 混匀， 37℃温育0.5h。 温育0.5h 酶K，混匀，于37℃温育0.5h。 3．加入100μl 5 mol/L NaCl，充分混匀，再加入 加入100μl NaCl，充分混匀， NaCl溶液 混匀， 65℃温育10min。 溶液， 温育10min 80μl CTAB/ NaCl溶液，混匀，于65℃温育10min。
核酸酶的抑制和抑制剂 DNase抑制
①加入少量金属离子螯合剂，如0.01 mol/L EDTA 或柠檬酸钠，DNase基本可以全部失活。 ②去垢剂、蛋白变性剂及DNase抑制剂也可使 DNase失活。
核酸酶的抑制和抑制剂 RNase抑制 ①操作要带手套。 ②所有器皿要严格消毒， ③试剂处理 ④低温操作 ⑤在分离过程中要加入一定的RNase抑制剂。
微生物的分离与纯化实验报告
微生物的分离与纯化实验报告实验目的：通过本次实验，我们旨在掌握微生物的分离与纯化技术，了解微生物在自然界中的分布规律，培养对微生物的观察和分离能力，为后续微生物研究工作打下基础。
实验原理：微生物的分离与纯化是通过将微生物样本分离出单一种类的微生物，并将其培养成纯种，以便进行后续的鉴定和研究。
该实验主要包括微生物的分离、纯化和鉴定三个步骤。
首先，通过适当的分离培养基和条件，将混合微生物样本中的不同微生物分离开来；然后，通过多次传代培养，将目标微生物培养成纯种；最后，通过形态学、生理生化特性等方法对纯种微生物进行鉴定。
实验步骤：1. 样品采集，从不同的自然环境中采集微生物样品，如土壤、水体、空气等。
2. 微生物分离，将样品按照一定的稀释倍数分别接种到不同的培养基上，利用稀释涂布法进行微生物的分离。
3. 纯化培养，从分离得到的单一菌落中挑取代表性菌落进行传代培养，直至获得纯种微生物。
4. 微生物鉴定，通过形态学观察、生理生化实验等方法对纯种微生物进行鉴定，确定其属种。
实验结果：经过本次实验，我们成功地从不同环境样品中分离出了多种微生物，并将其中的一种微生物培养成了纯种。
在对纯种微生物进行鉴定后，我们确认其为一株革兰氏阳性菌，具有球形细胞，能够在无氧条件下生长等特点。
实验结论：本次实验使我们初步掌握了微生物的分离与纯化技术，了解了微生物在自然界中的分布规律，培养了对微生物的观察和分离能力。
同时，我们也认识到微生物的分离与纯化是微生物学研究中的重要基础工作，为后续的微生物鉴定和研究奠定了基础。
通过本次实验，我们不仅加深了对微生物学理论知识的理解，也提高了实际操作的能力，为今后的微生物研究工作打下了坚实的基础。
希望在今后的学习和工作中，能够继续努力，不断提升自己的实验技能和科研能力，为微生物学领域的发展贡献自己的一份力量。
微生物分离与纯化实验报告
微生物分离与纯化实验报告微生物分离与纯化实验报告引言：微生物是一类极小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
微生物的分离与纯化是微生物学研究中的重要步骤，它可以帮助研究者从复杂的微生物群落中获取纯种菌株，以便进一步研究其生理特性和应用价值。
本实验旨在通过分离与纯化微生物的实验操作，掌握微生物分离纯化的基本原理和方法。
材料与方法：1. 样品采集：从自然环境中采集样品，如土壤、水体等。
2. 稀释：将样品进行适当的稀释，以降低微生物的浓度，避免过于密集的菌落。
3. 培养基制备：制备适合微生物生长的培养基，如琼脂培养基、液体培养基等。
4. 涂布法分离：取适量的稀释液，用铁环或棉签均匀涂布在培养基表面。
5. 培养条件：将培养基培养于适宜的温度和湿度条件下，利于微生物生长。
6. 菌落观察：观察培养基上的菌落形态、颜色、大小等特征，选择目标菌落。
7. 纯化：将目标菌落进行传代培养，以获得纯种菌株。
结果与讨论：本实验采集了来自土壤样品的微生物，并进行了分离与纯化实验。
经过稀释和涂布法分离，我们观察到了多个菌落形成在琼脂培养基上。
根据菌落的形态、颜色和大小等特征，我们选取了几个目标菌落进行纯化。
经过传代培养，我们成功地获得了纯种菌株。
通过显微镜观察，我们发现这些菌株具有不同的形态特征。
有的菌株呈圆形，有的呈梭形，还有的呈链状。
这些形态特征与微生物的分类有关，也可以为进一步研究提供线索。
在纯化的过程中，我们还进行了一些生理特性的初步鉴定。
通过对菌株的代谢产物进行检测，我们发现其中一株菌株能够产生抗生素。
这为进一步研究该菌株的抗生素合成基因提供了方向。
微生物的分离与纯化在微生物学研究中具有重要的意义。
通过分离纯化，我们可以获得纯种菌株，进一步研究其生理特性、代谢产物和应用价值。
同时，纯化的菌株也可以用于微生物鉴定和分类，为微生物多样性研究提供数据支持。
结论：通过本实验，我们成功地进行了微生物的分离与纯化实验。
通过稀释和涂布法分离，我们获得了多个菌落，并通过纯化获得了纯种菌株。
微生物实验十七、 酵母RNA的提取及组份鉴定
实验七、微生物遗传物质提取、测序实验一、实验目的1.了解并掌握稀碱法提取核酸的原理和方法。
2.学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。
3.了解核酸的组分并掌握其鉴定方法。
二、实验原理核酸是一类不稳定的生物大分子，在制备过程中很容易发生降解。
因此，要使制得的核酸尽可能保持其在生物体内的天然状态，制备核酸必须采用温和的条件。
酵母核酸中RNA含量较多，RNA达2.67-10.0%，而DNA含量仅为0.03-0.516%，酵母核酸的提取方法较多，工业上一般选用成本较低、适宜于大规模操作的稀碱法和浓盐法。
稀碱法是用1％NaOH溶液，将细胞壁溶解，用酸中和，升高温度使蛋白质变性，将蛋白质与核酸分离，然后除去菌体，将pH调至RNA 的等电点（pH2.5），使核酸沉淀出来。
稀碱法的优点是抽提时间短，但核酸在此条件下不稳定，容易分解。
血球计数板法主要计数酵母、原生动物等个体较大的微生物，是计数一定容积中的细胞总数的常用方法。
其型号分为XB.K.25.和XB.K.16.两种，前者是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格；后者为一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格。
但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是400个。
每一个大方格边长为1mm，则每一个大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的容积为0.1mm3（万分之一毫升）。
核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统，能吸收紫外光。
RNA的紫外吸收高峰在OD260nm波长处。
一般在OD260nm波长下，每毫升含1μgRNA溶液的吸光值为0.022。
故测定未知浓度RNA溶液OD260nm波长的吸光值即可计算出其中核酸的含量。
此法操作简便，迅速。
核糖核酸含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等各组分，加入硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在。
磷酸与定磷试剂作用可以生成蓝色的钼蓝。
微生物测序技术
微生物测序技术引言：微生物是指在肉眼下无法看到的微小生物体，如细菌、真菌、病毒等。
微生物的存在对人类的生活和健康有着重要的影响。
为了了解微生物的种类、数量和功能，科学家们发展了微生物测序技术。
本文将介绍微生物测序技术的原理、应用以及未来的发展方向。
一、微生物测序技术的原理微生物测序技术是通过对微生物DNA或RNA的测序，来研究微生物的遗传信息。
它包括以下几个主要步骤：1. 样品采集：从不同的环境中收集微生物样品，如土壤、水体、人体等。
2. DNA或RNA提取：将微生物样品中的DNA或RNA分离出来，以获取微生物的遗传物质。
3. 文库构建：将提取得到的DNA或RNA通过特定的处理方法转化为文库，以便后续的测序分析。
4. 测序：使用高通量测序技术，对文库中的DNA或RNA进行测序，得到大量的测序数据。
5. 数据处理：通过将测序数据与数据库中的微生物基因组序列进行比对，来鉴定和分类微生物。
二、微生物测序技术的应用微生物测序技术在许多领域都有广泛的应用，包括：1. 环境生态学研究：通过对环境中微生物的测序，可以了解微生物的多样性、分布和功能，从而揭示生态系统的结构和功能。
2. 医学研究：微生物在人类健康和疾病发展中起着重要作用。
通过对人体微生物群落的测序，可以了解微生物与宿主的相互作用，揭示微生物在疾病发展中的机制。
3. 农业和食品安全研究：微生物测序技术可以用于监测农田土壤中的微生物群落，评估土壤质量和健康状况。
此外，还可以用于食品安全检测，如检测食品中的致病菌或腐败微生物。
4. 生物能源研究：微生物测序技术可以用于研究生物质转化过程中微生物的种类和功能，为生物能源的开发和利用提供依据。
三、微生物测序技术的发展方向微生物测序技术在过去几十年中取得了飞速的发展，但仍面临一些挑战和限制。
为了进一步提高测序的效率和准确性，未来的发展方向主要包括：1. 第三代测序技术：目前常用的测序技术主要是第二代测序技术，如 Illumina 和 Ion Torrent。
遗传学实验(汇总)
遗传学实验指导山东农业大学遗传学教研室二OO五年目录实验一植物花粉母细胞减数分裂的染色体观察实验二植物花粉母细胞减数分裂制片技术实验三植物根尖压片技术实验四染色体组型分析实验五基因的分离、独立分配和互作实验六连锁基因的遗传分析实验七果蝇的形态鉴别和饲养管理实验八辐射对植物染色体的诱变作用实验九植物DNA的提取与定量分析实验十植物的RAPD分析实验一植物花粉母细胞减数分裂的染色体观察一、实验原理减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中一种特殊的细胞分裂方式。
在这个过程中，染色体复制一次，细胞分裂两次，最终形成的配子染色体数目比母细胞减少一半。
雌雄配子受精结合后代又恢复正常的染色体数目，从而保持了物种在遗传上的稳定性；同时由于减数分裂中同源染色体的非姊妹染色单体的交换为后代的变异提供了基础。
减数分裂包括减数第一次分裂和减数第二次分裂两个连续变化的阶段。
每个阶段根据细胞和染色体的变化特点分为前期、中期、后期和末期四个时期。
由于减数第一次分裂的前期较长，染色体变化也比较复杂，所以又常常将前期I分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变（浓缩）期。
染色体是遗传物质的载体，在减数分裂中的行为对遗传物质的分配和重新组合具有重大影响，因此了解染色体在减数分裂中所表现的特殊变化，可以从细胞学水平加深对遗传学基本规律的理解。
本实验通过在光学显微镜下对供试材料永久制片的观察熟悉性母细胞和染色体在减数分裂过程中各个时期的变化特点，对减数分裂的具体过程和意义有深刻的了解。
二、实验材料和实验用品玉米、小麦等花粉母细胞减数分裂的永久制片和照片，以及显微镜、擦镜纸等。
三、实验内容与步骤利用玉米、小麦等花粉母细胞的减数分裂永久制片，参考减数分裂各个时期的显微照片，在显微镜下进行系统地观察，掌握各个时期的特点。
减数分裂各个时期的主要特点简述如下：1．前期I（1）细线期：细胞核内开始出现细而长交织成一团的线状物，难以找到两端，无法计数，这是初期形成的染色体。
DNA提取与测序实验报告
DNA提取与测序实验报告一、实验目的1、掌握从生物样本中提取 DNA 的基本原理和方法。
2、熟悉 DNA 测序的操作流程和数据分析。
二、实验原理DNA 提取原理DNA 在细胞中以与蛋白质结合的形式存在。
提取 DNA 的基本原理是利用化学试剂和物理方法，破坏细胞膜和核膜，使蛋白质变性，从而将 DNA 从细胞中释放出来，然后通过离心等方法将 DNA 与其他杂质分离。
DNA 测序原理DNA 测序是指测定 DNA 分子中核苷酸的排列顺序。
目前常用的测序方法是 Sanger 双脱氧链终止法。
在测序反应中，DNA 聚合酶在模板的引导下，将脱氧核苷酸（dNTP）逐个加到引物的3’OH 末端，合成新的 DNA 链。
当加入双脱氧核苷酸（ddNTP）时，由于其3’位置没有羟基，不能继续延伸，导致 DNA 链合成终止。
通过在不同的反应管中分别加入不同的 ddNTP，产生一系列长度不同的 DNA 片段。
这些片段经过电泳分离和检测，根据片段的长度和末端碱基，就可以确定 DNA 的序列。
三、实验材料与设备实验材料1、新鲜的动物组织（如肝脏、肌肉等）或植物组织（如叶片、幼嫩茎尖等）。
2、蛋白酶 K、RNase A、TrisHCl、EDTA、NaCl、SDS、酚/氯仿/异戊醇、无水乙醇、70%乙醇等。
实验设备1、高速冷冻离心机2、移液器3、恒温水浴锅4、电泳仪5、凝胶成像系统6、 DNA 测序仪四、实验步骤DNA 提取1、样品处理取适量的新鲜动物或植物组织，放入液氮中迅速冷冻，然后用研钵研磨成粉末。
将粉末转移至离心管中，加入适量的裂解缓冲液（含蛋白酶 K），在 55℃水浴中孵育 1-3 小时，直至组织完全裂解。
2、去除蛋白质和 RNA加入等体积的酚/氯仿/异戊醇（25:24:1），轻轻颠倒离心管混合均匀，然后在高速冷冻离心机中以 12000 rpm 离心 10 分钟。
吸取上清液至新的离心管中，加入等体积的氯仿/异戊醇（24:1），再次颠倒混合均匀，以 12000 rpm 离心 10 分钟。
菌物提取技术实验报告
菌物提取技术实验报告1. 引言菌物提取技术是一种分离和提取菌种中的有效成分的方法，可以应用于食品、药物、农业等领域的研究。
本实验旨在探究菌物提取技术的操作步骤和影响因素，并评估提取效果。
2. 实验方法2.1 实验材料和仪器- 菌种：如文氏杆菌等- 培养基：如琼脂等- 反应容器：如培养皿等- 提取溶剂：如乙醇、甲醇等- 实验室常见仪器：如离心机、超声波浴、振荡器等2.2 实验步骤2.2.1 菌种培养- 选择所需菌种，并采用无菌技术将其接种于适宜的培养基上。
- 将含菌的培养基置于适宜环境中，控制温度、湿度等条件，促进菌种生长。
2.2.2 菌物提取- 将培养好的菌落切割或取部分，置于干燥平底培养皿中，以便后续操作。
- 加入适量的提取溶剂，如乙醇、甲醇等，使菌物浸泡其中。
- 使用超声波浴或振荡器等仪器，对菌物进行溶解及其它处理，以促进有效成分的释放和提取。
- 沉淀并过滤菌物，获得菌物提取液。
- 利用离心机进行离心分离，以获得更纯净的菌物提取物。
2.3 结果和讨论菌物提取过程中，实验操作的精确性和提取溶剂的选择对提取效果起到重要影响。
提取溶剂的极性不同可以提取并强调不同的有效成分。
本实验中的乙醇和甲醇选择主要是基于它们对大多数菌株具有较好的溶解度和选择性。
实验结果表明，采用超声波浴或振荡器进行溶解及其它处理可显著增强菌物提取效果。
这些处理手段可以通过破坏细胞壁结构、增加溶剂与细胞内部的接触面积等方式，使有效成分更容易释放和溶解。
离心分离是一种进一步提纯菌物提取物的重要手段。
离心时需要控制转速和时间以及温度等因素，以获得更高的分离效果。
离心可以去除大部分不溶性杂质和残留颗粒物，提供更纯净的菌物提取物。
3. 实验结论本实验旨在研究菌物提取技术的操作步骤和影响因素，并评估提取效果。
实验结果表明，通过选择合适的提取溶剂、采用超声波浴或振荡器等工具进行处理以及利用离心分离等手段，可以提高菌物提取效果。
然而，本实验仅对一种菌株进行了提取实验，对于不同菌株的提取效果可能存在差异。
植物动物微生物DNA提取
2、使用注意事项
未装吸头的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 一定要在允许范围内设定容量，千万不要将读数的调节 超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。 不要横放带有残留液体吸头的移液器。 不要用大量程的移液器移取小体积样品。 微量移液器每日用完后，应旋转到最大刻度，让弹簧恢 复原形，保持弹性。 为了确保微量移液器的准确性，移液器必须定期进行校 准。 安装枪头时切忌在枪头盒上上下敲打！
加入0.6倍体积已预冷（-20℃）的异丙醇，颠倒混匀 -20℃ 放置20分钟，12000rpm，10min；弃上清 1ml 75%乙醇洗涤沉淀，12000rpm，5min，弃清 沉淀于室温自然干燥约30min（注意：不要过度干燥） 加20μl 的TE溶解沉淀，获得DNA 1%的电泳检测
1%琼脂糖凝胶的制作
提
溶
解
沉 淀
干
燥
洗
Байду номын сангаас
涤
植物DNA提取操作步骤
称0.1g小麦芽 加液氮磨成粉末后迅速转入1.5ml离心管中；
向其中加1ml 预热（65 ℃ ）的CTAB提取液，充分混匀 1 于65℃水浴30 min，每5min轻柔混匀1-2次； 冷至室温后加入等体积氯仿：异戊醇（24：1）
12000rpm 离心5min，吸取上清置另一新的1.5ml离 心管中。重复操作2次
微量移液器的使用
1、使用说明
将微量移液器按钮轻轻压在第一挡； 垂直握持微量移液器，使吸头浸入页面下几毫米，千万 别将吸头直接插到液体底部； 缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样品液。否则液体进 入吸头太快，导致液体倒吸入移液枪内部，或吸入体积 减少； 等1s后将吸头提高液面，并使吸头在容器壁擦过； 平稳把按钮压到第一停点，在把按钮压到第二停点以排 出剩余液体； 提起微量移液器，使吸头在容器壁擦过； 然后按吸头弹射器除去吸头。
提取微生物实验报告
一、实验目的1. 掌握微生物提取的基本原理和方法；2. 了解不同微生物提取方法的优缺点；3. 培养学生的实验操作技能和实验思维。
二、实验原理微生物提取是将微生物从其生长环境中分离出来的过程。
常用的提取方法有：机械法、化学法、物理法等。
本实验采用化学法，即利用特定化学试剂使微生物细胞壁破坏，从而释放出微生物细胞。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）样品：土壤、水体、空气等；（2）试剂：无菌生理盐水、无菌蒸馏水、无菌玻璃棒、无菌滤纸、无菌培养皿、无菌接种环等。
2. 实验仪器：（1）高压蒸汽灭菌器；（2）恒温培养箱；（3）显微镜；（4）电子天平；（5）离心机；（6）移液器；（7）无菌操作台。
四、实验步骤1. 准备工作（1）将实验材料置于无菌操作台中，确保操作环境无菌；（2）将无菌生理盐水、无菌蒸馏水、无菌玻璃棒、无菌滤纸、无菌培养皿、无菌接种环等试剂和器材准备齐全。
2. 微生物提取（1）称取适量样品，加入无菌生理盐水，充分振荡，使微生物与溶液混合；（2）用无菌玻璃棒搅拌，使微生物细胞壁破坏，释放出细胞内容物；（3）将混合液用无菌滤纸过滤，去除较大杂质；（4）将滤液转移至无菌培养皿中，置于恒温培养箱中培养，观察微生物生长情况。
3. 结果观察与记录（1）观察培养皿中微生物的生长情况，记录菌落特征；（2）用显微镜观察微生物形态，记录其形态特点。
五、实验结果与分析1. 结果（1）培养皿中观察到明显的菌落生长；（2）显微镜下观察到微生物为杆状、球状等不同形态。
2. 分析（1）通过化学法提取微生物，成功分离出多种微生物；（2）不同微生物具有不同的形态和生长特征，表明实验提取效果良好。
六、实验结论本实验通过化学法成功提取了微生物，并观察到了微生物的生长和形态特点。
实验结果表明，该方法能够有效地提取微生物，为后续微生物研究提供了基础。
七、实验讨论1. 实验过程中，无菌操作至关重要，需严格遵守无菌操作规程；2. 在提取微生物时，可根据样品特性选择合适的提取方法；3. 实验过程中，需注意观察微生物的生长情况，及时调整实验条件。
细菌dna的提取实验报告
细菌dna的提取实验报告细菌DNA的提取实验报告引言：DNA（脱氧核糖核酸）是生物体内的遗传物质，携带着生命的基本信息。
对于细菌来说，DNA的提取是研究其遗传特性和进化过程的重要手段。
本实验旨在通过提取细菌DNA，了解其结构和功能。
材料与方法：1. 细菌培养物：选择一种常见的细菌菌株，如大肠杆菌。
2. 细菌培养基：含有必需营养物质的培养基。
3. 细菌培养器具：培养皿、试管、移液器等。
4. 提取试剂：细胞裂解缓冲液、蛋白酶K、异丙醇等。
步骤：1. 准备培养基：按照说明书将培养基溶解于适量的蒸馏水中，并灭菌。
2. 培养细菌：将细菌菌株接种于培养基中，放入培养器中，在适宜的温度和湿度下培养一段时间，使细菌繁殖。
3. 收集细菌：将培养皿中的菌落取出，转移到试管中。
4. 细菌裂解：向试管中加入适量的细胞裂解缓冲液，用移液器轻轻混合，使细菌细胞破裂释放DNA。
5. 蛋白酶处理：加入适量的蛋白酶K，使其降解蛋白质，避免在DNA提取过程中的干扰。
6. DNA沉淀：向试管中加入等体积的异丙醇，轻轻摇动试管，使DNA沉淀形成。
7. DNA收集：用移液器将DNA沉淀转移到另一个试管中，去除异丙醇。
8. DNA溶解：加入适量的蒸馏水，轻轻摇动试管，使DNA溶解。
结果与讨论：经过上述步骤，我们成功地提取到了细菌的DNA。
下面将对实验结果进行讨论。
1. DNA的外观：提取得到的DNA呈现为无色透明的溶液状，可以通过肉眼观察到。
2. DNA的浓度：可以通过分光光度计等仪器测量DNA的浓度，以确定提取的DNA量是否足够。
3. DNA的纯度：通过比色法或凝胶电泳等方法，可以评估DNA的纯度，即DNA中是否含有杂质。
4. DNA的稳定性：提取得到的DNA可以在低温下长期保存，以便后续的实验研究。
细菌DNA的提取是研究细菌遗传特性和进化过程的基础。
通过提取DNA，可以进行PCR扩增、测序、基因克隆等实验，进一步了解细菌的基因组结构和功能。
测序实验报告
一、实验目的1. 学习和掌握DNA提取、PCR扩增和测序的基本原理和操作方法；2. 了解DNA测序技术在生物科学研究中的应用；3. 掌握测序数据分析的基本方法。
二、实验仪器与试剂1. 仪器：高速离心机、PCR仪、凝胶成像系统、测序仪等；2. 试剂：DNA提取试剂盒、PCR试剂、测序试剂、DNA标记物等。
三、实验原理1. DNA提取：采用试剂盒法提取DNA，利用酚-氯仿法去除蛋白质和RNA，得到纯净的DNA；2. PCR扩增：利用PCR技术扩增目标DNA片段，得到足够量的模板DNA；3. 测序：利用测序仪对扩增后的DNA片段进行测序，得到序列信息。
四、实验步骤1. DNA提取（1）将样本加入提取缓冲液，涡旋混匀；（2）加入无水乙醇，静置沉淀；（3）将沉淀转移至离心管，离心去除上清液；（4）加入70%乙醇洗涤沉淀，离心去除上清液；（5）加入TE缓冲液溶解DNA，测定DNA浓度。
2. PCR扩增（1）设计引物，进行PCR反应；（2）PCR反应条件：95℃预变性5分钟，然后进行35个循环（95℃变性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸1分钟），最后延伸7分钟；（3）PCR产物进行电泳检测，观察扩增效果。
3. 测序（1）将PCR产物进行纯化，去除杂质；（2）进行测序反应，将PCR产物与测序引物结合，进行测序；（3）将测序数据上传至测序仪，进行序列分析。
五、实验结果与分析1. DNA提取：电泳结果显示，DNA条带清晰，表明DNA提取成功；2. PCR扩增：电泳结果显示，PCR产物条带清晰，表明PCR扩增成功；3. 测序：测序结果显示，测序数据完整，质量较高。
六、实验结论1. 本实验成功提取了目标DNA；2. 成功扩增了目标DNA片段；3. 成功完成了DNA测序，得到了高质量的数据。
七、实验反思与体会1. 在DNA提取过程中，要注意控制实验操作过程中的温度和时间，以确保DNA的完整性；2. 在PCR扩增过程中，要优化反应条件，以确保扩增效率；3. 在测序过程中，要注意测序数据的读取和分析，以确保数据的准确性。
微生物真菌dna提取实验报告
微生物真菌dna提取实验报告
实验目的：
本次实验旨在通过对真菌样本的筛选、培养和提取DNA三个步骤，获得纯度高、浓度稳定的真菌DNA样品。
实验步骤和方法：
1. 样本筛选：根据实验需要，选择含有较高丰度的真菌样品，避免选择受污染或污染严重的样品。
2. 培养：将筛选得到的样品通过接种在适当的培养基上，进行培养，待真菌菌落生长至较大和成熟阶段时，可用银染法观察菌落形态并做备份保存。
3. DNA提取：参照DNA纯化实验方法，采用真菌菌落裂解方法，通过玛琳显色等操作，提纯得到DNA样品。
结果分析：
经过筛选、培养、提取三个步骤，我们获得了一个浓度为xx ng/ul，260/280纯度指数为xx 的真菌DNA样品。
经过电泳检测，DNA片段大小分布匀称，表明该样品经过DNA提取过程成功得到了稳定的DNA样品。
结论：
本实验通过真菌样品的筛选、培养，以及DNA提取的操作，成功获得了纯度高、浓度稳定的真菌DNA样品。
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实验七、微生物遗传物质提取、测序实验
一、实验目的
1.了解并掌握稀碱法提取核酸的原理和方法。
2.学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。
3.了解核酸的组分并掌握其鉴定方法。
二、实验原理
核酸是一类不稳定的生物大分子，在制备过程中很容易发生降解。
因此，要使制得的核酸尽可能保持其在生物体内的天然状态，制备核酸必须采用温和的条件。
酵母核酸中RNA含量较多，RNA达2.67-10.0%，而DNA含量仅为0.03-0.516%，酵母核酸的提取方法较多，工业上一般选用成本较低、适宜于大规模操作的稀碱法和浓盐法。
稀碱法是用1％NaOH溶液，将细胞壁溶解，用酸中和，升高温度使蛋白质变性，将蛋白质与核酸分离，然后除去菌体，将pH调至RNA 的等电点（pH2.5），使核酸沉淀出来。
稀碱法的优点是抽提时间短，但核酸在此条件下不稳定，容易分解。
血球计数板法主要计数酵母、原生动物等个体较大的微生物，是计数一定容积中的细胞总数的常用方法。
其型号分为XB.K.25.和XB.K.16.两种，前者是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格；后者为一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格。
但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是400个。
每一个大方格边长为1mm，则每一个大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的容积为0.1mm3（万分之一毫升）。
核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统，能吸收紫外光。
RNA的紫外吸收高峰在OD260nm波长处。
一般在OD260nm波长下，每毫升含1μgRNA溶液的吸光值为0.022。
故测定未知浓度RNA溶液OD260nm波长的吸光值即可计算出其中核酸的含量。
此法操作简便，迅速。
核糖核酸含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等各组分，加入硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在。
磷酸与定磷试剂作用可以生成蓝色的钼蓝。
核糖与地衣酚试剂反应呈鲜绿色。
脱氧核糖与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物，而核糖无此反应。
嘌呤碱与硝酸银反应能产生白色的嘌呤银化合物沉淀。
三、试剂和仪器设备
1.材料与试剂
酵母粉；0.04mol/LNaOH；酸性乙醇：将0.3mL浓盐酸加入到30mL乙醇中；95%乙醇；
1.5mol/L硫酸；浓氨水；0.1mol/L硝酸银。
定磷试剂：17％硫酸：将17mL浓硫酸（比重1084）缓缓倾入83mL水中； 2.5％鉬酸铵：2.5g鉬酸铵溶于100mL水中；10％抗坏血酸溶液：10g抗坏血酸溶于100mL 水，棕色并保存溶液；临用时将三种溶液和水按下列比例混合：
17％硫酸：2.5％鉬酸铵：10％抗坏血酸：水＝1：1：1：2（V/V）。
2.仪器
250mL三角瓶；离心机；温度计；研钵；分析天平；紫外分光光度计；恒温水浴；冰浴。
四、操作步骤
1.稀碱法制备核酸
（1）将10g干酵母悬浮于50mL 0.04mol/LNaOH溶液中，并在研钵中研磨成浆状。
（2）将酵母浆转入100mL三角瓶中，置沸水浴中加热30min。
后冷却。
3000r/min离心15min。
（3）上清液倒入20mL的酸性乙醇中，边搅拌边倾入。
（4）沉淀完全后，3000r/min离心10min。
弃上清液。
（5）用10mL95%乙醇洗涤沉淀，3000r/min离心5min。
重复洗涤一次。
将沉淀转入布氏漏斗中抽滤。
得到湿RNA粗品。
（6）用电子天平称提取的湿RNA粗品的重量。
2.RNA组份鉴定
取2g提取的核酸，加1.5M硫酸10mL,沸水浴加热10分钟制成水解液，然后进行组份鉴定。
（1）嘌呤碱：取水解液1mL加入过量浓氨水。
然后加入1mL0.1M硝酸银溶液，观察有无嘌呤碱银化合物沉淀。
（2）磷酸：取水解液1mL，加定磷试剂1mL。
在水浴中加热观察溶液是否变成蓝色。
（3）核糖：取水解液1mL，加FeCl3-HCl溶液3mL和苔黑酚乙醇溶液0.2mL，沸水浴中
3min，观察溶液出现绿色。
（4）脱氧核糖：取水解液1mL，加二苯胺试剂2mL，沸水浴中15min，观察溶液出现蓝
色。
3.RNA的定量鉴定
将样品配制成5~50ug/mLRNA溶液，于紫外分光光度计上260nm测定。
计算公式：RNA%=A*100/（0.020*样品浓度）
五、实验数据及其处理
（1）记录稀碱法提取RNA质量，计算提取率。
（2）计算RNA纯度。
六、思考题
为什么用稀碱溶液可以使酵母细胞裂解？。