生物技术制药总结
生物制药知识点总结(HPU)
生物制药知识点总结(HPU)1、生物技术药物：采用DNA重组技术或其他生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物。
2、干扰素：人体细胞分泌的一种具有广泛抗病毒，抗肿瘤和免疫调节活性的活性蛋白质。
3、高密度发酵：是应用一定的培养技术和设备来提高菌体生物量和目标产物时空产率的发酵技术。
是指培养液中工程菌的菌体浓度在50gDCW/L以上，理论上的最高值可达200gDCW/L、4、植物细胞全能性：指植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息，从而具备发育成完整植株的遗传能力。
5、细胞分化：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程。
6、脱分化：已分化的细胞在一定因素作用下恢复细胞分裂能力,失去原有分化状态的过程。
7、继代培养：由最初的外植体上切下的新增殖的组织，培养一段时间而称之为第一代培养。
连续多代培养即为继代培养。
8、固定化酶：是指经过物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。
9、抗体酶：具催化能力的免疫球蛋白，具有典型的酶反应特性。
10、发酵工程：利用微生物制造工业原料与工业产品提供服务的技术。
简答题1、生物技术制药的特征：1）高技术2）高投入3）长周期4）高风险5）高收益2、利用基因工程技术生产药品的优点：1）利用基因工程技术可大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床使用建立有效的保障2）可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围3）利用基因工程可以发掘更多内源性生理活性物质4）内源性活性物质在作为药物使用时，存在不足之处，可以通过基因工程和蛋白质工程对其改造5）利用基因工程技术可获得新型化合物，扩大药物筛选来源3、利用基因工程生产药物的基本过程：①目的基因的克隆，②构造DNA重组体，③构造工程菌，④目的基因的表达，⑤外源基因表达产物的分离纯化产品的检验4、反转录法获得目的基因的过程：1）mRNA纯化2）cDNA第一链的合成3）cDNA第二链的合成4）cDNA克隆5）将重组体导入宿主细胞6）cDNA文库的鉴定7)目的cDNA克隆的分离与鉴定5、影响基因工程菌的因素，如何控制：1）培养基：需要对基质中营养物质的配比进行优化，以满足细菌大量繁殖和外源蛋白表达的需要。
生物技术制药重点简答总结
⽣物技术制药重点简答总结⽣物技术制药概论1、⽣物技术制药过程包括哪些内容（P5）第⼀阶段：实验室研究阶段，也称为发现或探索研究，属于应⽤基础研究阶段;第⼆阶段：产品开发阶段，属于应⽤阶段，与第⼀阶段统称为研发阶段，即临床前研究;第三阶段：商业化阶段，是将产品推向市场的过程。
2、详细说明下⾯专业英语的含义：T arget identification and validation：靶基因的发现和证实Assay development：建⽴检验⽅法Proof of concept:理论验证High throughput:⾼通量筛选Lead generation:先导化合物的发现Lead optimization: 先导化合物的优化System biology：系统⽣物学Therapeutics: 治疗学Commercialization : 商业化First human dose：⼈类第⼀剂量基因⼯程制药3、有哪些⽅法合成第⼆链cDNA?第⼀：⾃我引导合成法，（Self priming）：RNaseH 消化mRNA摸板；cDNA 3’形成发夹结构（loop）；发夹作为引物合成第⼆链；需要酶：klenow 和S1。
第⼆：⼤肠杆菌RNaseH酶降解取代法（Replacement synthesis）：RNaseH 在RNA摸板上形成缺⼝或空隙，从⽽形成RNA引物；在E.coli DNA polymerase 的驱动下合成⾮连续性第⼆链，需要T4 连接酶接合形成完整第⼆链。
4、有哪些引物⽤来合成cDNA第⼀链？Oligo dT (T=12-18),；随机引物(n=6) ；基因特异性引物(n=18-25)5、建⽴cDNA ⽂库有什么好处？（书）cDNA⽂库代表⽣物某⼀特定器官或组织在某⼀特定的发育时期，细胞转录⽔平上的基因群体。
因为基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有⼀部分表达，⽽且处在不同的环境条件、不同的分化时期，故基因表达的种类和强度也不尽相同，因此cDNA⽂库具有组织特异性。
生物技术制药要点
生物技术制药要点概括1.现代生物技术发展大事记：年代主要发现和进展1953 Watson和Crick阐明了DNA的双螺旋结构1958 分离得到DNA聚合酶I，并在试管内制得人工DNA1960 发现mRNA，并阐明了mRNA在蛋白质合成中的作用1966 破译遗传密码1967 分离得到DNA连接酶1970 分离出第一个限制性内切酶1971 第一次用限制性内切酶和连接酶获得重组DNA1972 合成了完整了tRNA基因1974 Boyer和Cohen建立了DNA重组技术1975 Kohler和Milstein建立了单克隆抗体技术1976 DNA测序技术诞生1978 Genentech公司在大肠杆菌中表达出胰岛素1981 第一个单克隆抗体诊断试剂盒在美国被批准使用1981 第一台商业化生产DNA自动测序仪诞生1982 用DNA重组技术生产的第一个动物疫苗在欧洲获得批准1983 基因工程Ti质粒用于植物转化1988 PCR（聚合酶链式反应）技术诞生1990 美国批准第一个体细胞基因治疗方案1997 英国培育出世界上第一只克隆羊多莉1998 美国批准艾滋病疫苗进行人体实验2001 人类基因组草图完成2003 世界上第一个正式批准的基因治疗药物重组腺病毒-p53注射液在中国上市2008 人类将表皮细胞激活为干细胞2.生物技术药物（biopharmaceutics）:广义是是指所有以生物质为原料只去的各种生物活性物质及其人工合成类似物、以及通过现代生物技术制的的药物，狭义指利用生物体、生物组织、细胞及其成分，综合应用化学。
生物学和医药学各学科原理和技术方法制得的用于预防、诊断、治疗和康复保健的制品，而这里特指采用DNA重组技术或其他现代生物技术研制的蛋白质或核算类药物。
3.生物技术药物的四大类型：基因重组药物、基因药物、天然药物、合成的半合成的生物技术药物。
4.生物技术药物的主要特点：剂量小，活性高；分子结构复杂，分子量一般较大；稳定性较差，易失活或分解，体内半衰期短；具有种属特异性；具有免疫原性；分析检验的特殊性。
生物技术制药重点整理
一．名词解释1.生物药物:指从生物体、生物组织、细胞、体液等，利用物理、化学、生物技术等原理和方法方法制造一类用于预防、治疗和诊断的制品2.悬浮培养:培养细胞的生长不依赖支持物的表面，可在培养液中呈悬浮状态生长。
3.双功能抗体:它是非天然抗体，结合抗原的两个臂具有不同的特异性。
4.补料分批培养:将种子接入发酵反应器中进行培养，经过一段时间后，间接或连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生长。
5.单克隆抗体:是将抗体产生B淋巴细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合所产生的抗体。
6.质粒的分裂不稳定:指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒子代菌的现象7.基因表达:指细胞在生命过程中，将储存在DNA中的遗传物质经过转录与翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子8.连续培养:将种子接入发酵反应器中，培养至一定菌体浓度后，进行不间断的培养9.酶工程是:酶学和工程学相互渗透结合、发展而形成的新学科。
从应用目的出发研究酶的、应用酶的特异催化功能并通过工程华东将原料转变为有用物质的技术。
固定化培养：将固定化技术应用基因工程菌的连续培养中，以提高治理的稳定性。
10.连续发酵：发酵过程中，一边补入新鲜的料液，一边放出等量的发酵液，使发酵罐中的体积保持不变。
特点：达到稳定后，菌体的浓度、产物的浓度、限制性基质的浓度都是恒定的，不随时间发生改变11.分批发酵：在封闭培养系统内具有初始限制量基质的一种发酵方式特点：一次性投料，，在发酵过程中不再补料，直到放罐。
整个过程中，菌体浓度、产物浓度随时间的变化而变化12.补料分批发酵：在分批发酵的基础上，间歇或连续的补加新鲜的培养基的一种发酵方式特点：1)在二次或多次补入新鲜的料液，延长产物的合成周期，提高产量；2）只有料液的加入，没有发酵液的放出。
因此发酵结束时，体积比考试的时候有所增加13.半连续发酵：在补料分批发酵的基础上，间歇放掉一部分发酵液特点：放掉部分发酵液，再补加新鲜的料液，有利于有害物质的稀释，有利于产物的合成，提高产量14．原生质体融合：用脱壁酶脱去细胞的细胞壁，变成原生质体，再用聚乙二醇促进原生质体的相互融合，形成异核体的活重组子的技术15.诱变剂：能诱发基因发生突变并使突变率超过自发突变水平的物理化学因子16.发酵工程：利用微生物制造工业原料或工业产品17.诱变育种：利用物理或化学的因素，人工诱发基因的突变，筛选高产菌种的过程18.生物技术制药：利用现代生物技术可以人为地创造一些条件，借助微生物、动物或植物生产所需的医药品19.生物技术药物：采用DNA重组技术或其他新技术研制的蛋白质或核酸类药物20.嵌合抗体：由鼠源性抗体的V区基因与人抗体的C区基因嵌合，然后插入到载体中，转染骨髓瘤细胞表达的抗体分子21.交联法：用双功能或多功能试剂，将酶与酶或微生物的细胞与细胞之间交联的固定化方法二．简答题1.影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素？⑴外源基因的拷贝数⑵外源基因的表达效率①启动子的强弱②核糖体结合位点的有效性③SD序列和起始密码A TG的间距④密码子组成⑶表达产物的稳定性⑷细胞的代谢负荷2.简述单克隆抗体的制备过程将产生抗体的B淋巴细胞与多发性的骨髓瘤细胞发生融合，产生具有两亲代细胞特征的杂交瘤细胞，将（大量培养能产生抗体的）杂交瘤细胞注入至小鼠的腹腔内，分离小鼠的腹腔抗体3.制备基因工程药物的一般程序？参考答案：获取目的基因，构建重组质粒，组建工程菌，培养工程菌，产物的分离纯化，除菌过滤，半成品检定，成品检定，包装4．发酵的基本过程菌种——种子制备——发酵液的预处理——提取精制1）用作培养菌种、扩大生产的发酵罐、培养基的配制2）对发酵罐、培养基以及辅助发酵的设备进行消毒杀菌3）将已培养好的具有生物活性的纯菌株转接到发酵罐中4）将接种到发酵罐中的菌株控制在适宜的条件下生长并产生代谢产物5）提取并精制，以得到合格的产品6）回收或处理发酵过程中产生的废物或废水5．微生物的发酵方式：分批发酵（在封闭的发酵系统内具有初始限制量的培养基质的一种发酵方式。
生物技术制药重点总结
1.生物药物：又称为生物工程，是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其它基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的技术。
2.生物技术药物：采用DNA重组技术或其它生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物，主要是重组蛋白和核酸类药物，如细胞因子、纤溶酶原激活剂、血浆因子等。
3.质粒载体：质粒是指独立于原核生物染色体之外具有自主复制能力的遗传物质。
分三种构型：共价闭合环状DNA(cccDNA)、开环DNA(ocDNA)、线状DNA(IDDNA)。
在琼脂糖凝胶电泳中迁移率：cccDNA > IDDNA > ocDNA4.目的基因的常用制备方法主要包括化学合成法、PCR法、基因文库法和cDNA文库法等。
5.PCR法是指聚合酶链反应，是根据生物体内DNA复制原理在DNA聚合酶催化和dNTP参与下，引物依赖DNA模板特异性的扩增DNA。
在含有DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTP的缓冲溶液中通过三个循环步骤扩增DNA：：①变性—双链DNA模板加热变性，解离成单链模板；②退火—温度下降，引物与单链模板结合（温度下降，PCR特性下降，效率升高）；③延伸—温度调整至DNA聚合酶最适宜温度，DNA聚合酶催化dNTP加至引物3′-OH，引物以5′→3′方向延伸，最终与单链模板形成双联DNA, 并开始下一个循环。
6.cDNA文库法：cDNA是指与mRNA互补的DNA。
cDNA文库法是指提取生物体总mRNA，并以mRNA作为模板，在逆转录酶的催化下合成cDNA的一条链，再在DNA聚合酶的作用下合成双链cDNA，将全部cDNA都克隆到宿主细胞而构建成cDNA文库。
7.影响目的基因与载体之间连接效率的主要因素：①DNA片段之间的连接方式；粘性末端的连接效率高于平头末端。
②目的基因与载体的浓度和比例；增加DNA浓度可以提高连接效率，目的基因于载体DNA的摩尔数比应大于1。
生物技术制药的特征
生物技术制药是利用生物技术手段生产药物的过程，它具有以下几个特征：
基于生物系统：生物技术制药利用生物系统，如细胞、微生物、动植物等，作为药物的生产工具。
这些生物系统可以被改造、操控和优化，以产生目标药物或药物的前体。
重视基因工程技术：生物技术制药倚重基因工程技术，通过基因克隆、DNA重组、转基因等手段，将目标基因或基因组片段导入生产宿主中，使其表达所需的蛋白质药物。
大规模生产：生物技术制药通常采用大规模发酵和培养技术，以批量生产药物。
这涉及到控制发酵过程的温度、pH、营养物质等因素，以优化生物反应条件并最大程度地提高产量。
多样性和特异性：生物技术制药能够生产多样性的药物，包括蛋白质药物、抗体、疫苗等。
这些药物通常具有高度的特异性，能够精确地与靶标相互作用，从而提高治疗效果并降低不良反应。
遗传稳定性：生物技术制药在生产过程中通常需要确保宿主细胞或微生物菌株的遗传稳定性，以确保产生的药物具有一致的品质和效力。
这要求对宿主细胞进行筛选和维持，以保持稳定的基因表达和产物产量。
药物安全性和监管要求：生物技术制药在药物安全性和监管方面具有特殊要求。
由于药物的生产是通过生物系统进行的，需要严格的质量控制、验证和审计，以确保产品的安全性、纯度和有效性。
生物技术制药复习知识点
生物技术制药复习知识点第一章绪论1.生物制药的研究内容包括基因工程制药, 细胞工程制药, 酶工程制药和发酵工程制药。
2.生物技术制药, 是采用现代生物技术人为地创造一些条件, 借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品。
3.生物技术药物, 是采用DNA 重组技术、单克隆抗体技术或其它生物新技术研制的蛋白质、治疗性抗体或核酸类药物。
4.生物药物, 指包括生物制品在内的生物体的初级和次级代谢产物或生物体的某一组成部分, 甚至整个生物体用作诊断和治疗的医药品。
5.现代生物药物四种类型: ①应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂。
②基因药物, 如基因治疗剂、基因疫苗、反义药物和核酶等。
③来自动植物和微生物的天然生物药物。
④合成与部分合成的生物药物。
6.生物药物按功能用途分为三类: 治疗药物, 预防药物和诊断药物。
7.生物技术药物的特性：分子结构复杂, 具种属特异性, 治疗针对性强、疗效高, 稳定性差, 基因稳定性, 免疫原性、重复给药会产生抗体, 体内半衰期短, 受体效应, 多效性和网络效应, 质量控制的特殊性, 生产系统的复杂性。
8.生物技术制药特征：高技术, 高投入, 长周期, 高风险, 高收益。
9.基因诊断: 指采用分子生物学的方法在DNA水平或RNA水平对基因的结构和功能进行分析从而对特定的疾病进行诊断。
第二章基因工程制药1.利用基因工程技术生产药品的优点: （1）可以大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽（如胰岛素、干扰素、细胞因子等）, 为临床使用提供有效的保障；（2）可以提供足够数量的生理活性物质, 以便对其生理、生化和结构进行深入的研究, 从而扩大这些物质的应用范围；（3）利用基因工程技术可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质；（4）内源性生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处, 可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除；（5）利用基因工程技术可获得新型化合物, 扩大药物筛选来源。
生物制药总结范文
随着科学技术的飞速发展，生物制药行业在我国逐渐崛起，成为推动医药产业进步的重要力量。
在过去的一年里，我有幸投身于生物制药领域，通过理论学习和实践操作，对生物制药有了更为深刻的认识。
以下是我对生物制药的总结：一、生物制药概述生物制药是指利用生物技术手段，从生物体、生物组织、细胞或细胞器中提取具有生物活性的物质，或通过生物技术改造微生物、细胞或细胞器，生产具有治疗、诊断、预防等作用的药物。
生物制药具有高效、低毒、安全等优点，是未来医药产业发展的趋势。
二、生物制药的发展现状近年来，我国生物制药行业取得了显著成果。
在政策扶持、市场需求和科技创新的推动下，生物制药企业不断涌现，产品种类日益丰富。
目前，我国生物制药行业已涉及肿瘤、心血管、神经系统等多个领域，部分产品在国际市场上具有竞争力。
三、生物制药的学习与实践1. 理论学习：在大学期间，我系统学习了生物化学、分子生物学、细胞生物学等基础课程，掌握了生物制药的基本理论和方法。
同时，通过参加学术讲座、研讨会等活动，了解了国内外生物制药领域的最新研究动态。
2. 实践操作：在实验室实习期间，我参与了多个生物制药项目的研究。
通过实践操作，我熟悉了细胞培养、基因工程、发酵工程等生物制药技术，提高了实验技能和创新能力。
3. 交流与合作：在实习过程中，我与团队成员紧密合作，共同完成实验任务。
通过与导师、同学及行业专家的交流，我学会了如何将理论知识应用于实际工作中，提高了自己的综合素质。
四、生物制药的未来展望生物制药行业具有广阔的发展前景。
随着生物技术的不断进步，未来生物制药将呈现以下趋势：1. 产品创新：生物制药企业将加大研发投入，开发具有自主知识产权的新药，提高我国生物制药在国际市场的竞争力。
2. 精准医疗：生物制药将向精准医疗方向发展，针对不同患者制定个性化治疗方案，提高治疗效果。
3. 绿色制药：生物制药企业将注重环境保护，采用绿色生产工艺，降低生产成本，实现可持续发展。
生物制药实习总结模板6篇
生物制药实习总结模板6篇篇1时间过得真快，转眼间在生物制药岗位实习已有半年之久。
在这段时间里，我学到了很多课堂之外的知识，也积累了一些工作经验。
以下是我这段时间的实习总结，敬请领导和同事审阅。
一、实习背景与目标本次实习的目的是为了将课堂上学到的理论知识与实际工作相结合，提高自己的实践能力。
在实习过程中，我主要关注以下几个方面：一是了解生物制药行业的基本知识，包括行业现状、发展趋势等；二是掌握生物制药相关岗位的基本技能，如实验操作、数据分析等；三是提升自己的团队协作能力和沟通能力，为未来的工作打下坚实的基础。
二、实习内容与过程在实习期间，我参与了多个生物制药项目的研究与开发工作。
其中，我主要负责了某个新药的药效学评价项目。
在这个项目中，我不仅学习了如何进行药物筛选、剂量设定等实验设计，还掌握了相关的实验操作技能。
同时，在项目进展过程中，我也积极参与团队讨论，提出自己的见解和建议，为项目的顺利进行贡献了自己的力量。
此外，我还参与了一些与生物制药相关的市场调研活动。
通过这些调研活动，我不仅了解了市场需求和竞争情况，还学习了一些市场分析的方法和技巧。
这些经验对于我未来的职业发展具有重要的参考价值。
三、实习收获与体会通过这次实习，我不仅学到了丰富的专业知识，还提高了自己的实践能力和团队协作能力。
在实习过程中，我也遇到了一些困难和挑战，但通过不断努力和摸索，我总能找到解决问题的方法。
同时，我也深刻认识到生物制药行业的重要性和发展趋势，为自己未来的职业发展奠定了坚实的基础。
然而，在实习过程中，我也发现自己存在一些不足之处。
例如，在实验操作中有时会出现一些小错误或疏漏；在团队协作中有时会因为沟通不畅导致误解或不必要的麻烦。
针对这些问题，我将在未来的学习和工作中更加注重细节和沟通技巧的提升。
四、建议与展望针对本次实习经验，我提出以下几点建议以供领导和同事参考：一是建议公司加强对实习生的培训和指导力度，帮助我们更快地适应工作环境和岗位要求；二是建议公司为我们提供更多元化的实践机会和学习资源，以便我们能够更全面地了解生物制药行业的现状和发展趋势；三是建议公司注重对我们团队协作能力和沟通技巧的培养，以提升我们的综合素质和竞争力。
《生物技术制药》笔记_学习笔记
《生物技术制药》笔记第一章：生物技术制药概述1.1生物技术的定义与发展1.2生物制药的历史背景1.3生物药物的分类1.4生物技术制药的现状与趋势第二章：生物药物的研发过程2.1药物发现与筛选2.2临床前研究2.3临床试验的设计与实施2.4药物上市后的监测第三章：生物制药的生产技术3.1重组DNA技术3.2细胞培养与发酵技术3.3纯化与制剂技术3.4质量控制与标准化第四章：生物药物的市场与经济学4.1生物制药市场的规模与增长4.2价格与经济负担4.3竞争与合作策略4.4政策与法规影响第五章：生物药物的安全性与有效性5.1药物的安全性评估5.2副作用与不良反应5.3有效性研究方法5.4风险管理策略第六章：未来生物制药的发展方向6.1个性化医疗与精准治疗6.2新兴技术的应用（如CRISPR等）6.3全球健康与生物制药的合作6.4持续创新与可持续发展第1章：生物技术制药概述生物技术的定义与发展生物技术是利用生物系统、活细胞或其衍生物来开发或制造产品的技术。
它的应用涉及医学、农业、工业等多个领域。
生物技术的核心在于对生物体的基因和细胞过程的理解与利用。
关键概念：生物技术的定义：应用生物学和技术于生产、改良生物产品的过程。
发展历程：自20世纪初的微生物发酵技术起，经过基因工程、重组DNA技术等阶段，逐渐形成现代生物技术。
重要进展：1973年，第一例重组DNA技术成功。
1982年，首个重组人胰岛素上市。
1990年，基因治疗首次在临床应用。
生物制药的历史背景生物制药起源于对传统药物的改良，随着对生物体内机制的深入了解，生物制药逐渐崭露头角。
生物制药主要利用生物技术生产药物，包括抗体、疫苗、蛋白质等。
历史节点：1920年代，青霉素的发现标志着抗生素时代开始。
1970年代，开始利用细胞培养技术生产单克隆抗体。
1980年代，生物制药行业迅速发展，多种生物药物陆续上市。
重要药物：人胰岛素：由大肠杆菌生产，治疗糖尿病。
重组人干扰素：用于治疗病毒感染及某些癌症。
生物技术制药复习知识点
生物技术制药复习知识点第一章绪论1.生物制药的研究内容包括基因工程制药，细胞工程制药，酶工程制药和发酵工程制药。
2.生物技术制药，是采用现代生物技术人为地创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品。
3.生物技术药物，是采用DNA 重组技术、单克隆抗体技术或其它生物新技术研制的蛋白质、治疗性抗体或核酸类药物。
4.生物药物，指包括生物制品在内的生物体的初级和次级代谢产物或生物体的某一组成部分，甚至整个生物体用作诊断和治疗的医药品。
5.现代生物药物四种类型：①应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂。
②基因药物，如基因治疗剂、基因疫苗、反义药物和核酶等。
③来自动植物和微生物的天然生物药物。
④合成与部分合成的生物药物。
6.生物药物按功能用途分为三类：治疗药物，预防药物和诊断药物。
7.生物技术药物的特性：分子结构复杂，具种属特异性，治疗针对性强、疗效高，稳定性差，基因稳定性，免疫原性、重复给药会产生抗体，体内半衰期短，受体效应，多效性和网络效应，质量控制的特殊性，生产系统的复杂性。
8.生物技术制药特征：高技术，高投入，长周期，高风险，高收益。
9.基因诊断：指采用分子生物学的方法在DNA水平或RNA水平对基因的结构和功能进行分析从而对特定的疾病进行诊断。
第二章基因工程制药1.利用基因工程技术生产药品的优点：（1）可以大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽（如胰岛素、干扰素、细胞因子等），为临床使用提供有效的保障；（2）可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围；（3）利用基因工程技术可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质；（4）内源性生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处，可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除；（5）利用基因工程技术可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。
2.基因工程技术就是将目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建工程菌（或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。
生物技术制药复习重点
生物技术制药重点一、名解1、载体：携带外源目的基因或DNA进入宿主细胞，实现外源基因或DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子，主要有粒载体和入噬菌甾体。
2、铁壁培养：大多数动物细胞进行培养时需要贴附因子，内细胞自身分泌或认为在培养基中加入，使细胞在支持物表面贴附伸展和生长繁殖的培养方法。
3、基因工程制造：利用基因重组技术将外源基因导入宿主菌或细胞进行大规模培养以获得蛋白质药物的过程。
4、人鼠嵌合抗体：利用DNA重组技术，将鼠抗体轻、重链可变区基因插入含有人体抗体恒定的表达载体中，转化哺乳动物细胞表达的抗体。
5、转化细胞系：正常的细胞经过某个轻化过程，失去正常细胞的转点而获得无限增殖的能力，得到的细胞系称为轻化细胞系。
6、离子交换层析：利用蛋白质等电点的差异来实现不同蛋白质间的分离和纯化。
7、生物技术制药：指利用基因工程、细胞工程、发酵工程、蛋白质工程等生物技术来研究、开发和生产用于预防、治疗和诊断疾病的药物。
8、人源化抗体：CDR移植即把鼠抗体的CDR移植到人抗体的可变区内，所得到的抗体称CDR移植抗体或改型抗体，也就是人源化抗体。
9、前体：在药物的生物合成过程中，被菌体直接用于药物合成而自身结构无显著改变的物质。
10、接种量：移种的种子液体和接种后发酵罐培养夜体积之比。
11、次级代谢产物：微生物从合成代谢的中间产物出发合成一些生理功能不明确，化学结构特殊，且对细胞生命并非必须的产物。
12、固定化酶，是将具有一定的胜利功能的酶或生物细胞，用物理或化学方法将其固定，作用固定生物催化而加以利用的一种技术。
13、凝胶过滤层析：凝胶是一种惰性的不带电荷具有三维结构的多孔网状物质，当样品随流动相经过凝胶柱时大分子不能进入凝胶微孔而被洗脱出来，小分子能进入微孔流出速度慢，从而实现分离纯化的目的。
二、问答题1、疏水层析的原理是什么？需要进行几步操作？洗脱顺序是什么？答：原理：利用蛋白质分子表面上的疏水区域（非极性氨基酸残基的侧链）和介质的疏水基因之间的相互作用。
药品生物期末实验总结
药品生物期末实验总结一、实验目的本次实验的主要目的是通过对药物的生物效应进行研究，进一步了解药物的作用机理，为新药研发提供科学依据。
二、实验内容与方法本次实验主要包括以下几个方面的内容：药物的药理作用研究、药物代谢与排泄研究、药物毒性与安全性研究等。
本次实验采用了体内实验和体外实验相结合的研究方法，具体的实验操作和方法如下：1. 药物的药理作用研究选取研究对象动物，按照一定的剂量给予药物，观察药物对动物的生理、生化指标的影响。
同时，还可以通过电生理记录技术、免疫组化技术等手段研究药物对细胞和组织的作用机制。
2. 药物代谢与排泄研究采集动物的血液和尿液样本，进行药物浓度的测定和分析。
通过测定药物代谢产物的质量、浓度等参数，了解药物在体内的代谢和排泄途径。
3. 药物毒性与安全性研究采用实验动物模型，给予一定剂量的药物，观察毒性反应和副作用。
通过形态学、生理学、生化学等指标的测定，研究药物的毒性和安全性。
三、实验结果与分析通过对实验数据的统计和分析，得到了以下结论：1. 药物的药理作用研究通过实验发现，药物A对研究对象动物的心血管系统有显著的影响，可以抑制血管收缩，降低血压。
通过电生理记录技术的研究，发现药物A可以抑制神经细胞的活动，从而达到抑制血管收缩的目的。
2. 药物代谢与排泄研究通过对动物血液和尿液样本的分析，发现药物B在体内主要通过肝脏进行代谢，并通过胆汁排泄至肠道，从而进入粪便。
同时，也有一部分药物B通过肾脏排泄至尿液中。
3. 药物毒性与安全性研究实验结果显示，药物C在高剂量下对动物的肝脏和肾脏造成了一定程度的损害，导致肝功能异常和肾功能异常。
这表明药物C具有一定的毒性，需要注意剂量的选择。
综合以上实验结果，可以对药物的生物效应和作用机制进行进一步的研究和探讨。
四、实验结论与意义本次实验通过对药物的药理作用、药物代谢与排泄、药物毒性与安全性等方面的研究，得出了一些关键的结论和意义：1. 药物A具有降压作用，可以作为治疗高血压病的药物候选。
生物制药年度总结(3篇)
第1篇一、引言2023年，我国生物制药行业在国内外市场环境下砥砺前行，不断取得突破性进展。
在政策扶持、市场需求和技术创新的共同推动下，行业整体呈现出稳步发展的态势。
本报告将对2023年度生物制药行业的发展情况进行全面总结，分析行业面临的机遇与挑战，并对未来发展趋势进行展望。
二、行业整体发展情况1. 市场规模持续扩大2023年，我国生物制药市场规模达到XX亿元，同比增长XX%。
其中，创新药市场规模占比逐年提升，成为行业发展的主要驱动力。
2. 政策环境持续优化政府出台了一系列政策措施，如《关于加快生物医药产业发展的若干政策措施》、《关于促进生物制品产业发展的若干措施》等，为生物制药行业提供了良好的政策环境。
3. 研发投入持续增加2023年，我国生物制药企业研发投入总额达到XX亿元，同比增长XX%。
企业对创新药研发的重视程度不断提高。
4. 创新成果丰硕2023年，我国生物制药行业在肿瘤、免疫、神经、代谢等领域取得了一系列创新成果，多个新药上市，为患者提供了更多治疗选择。
三、重点领域发展情况1. 创新药研发2023年，我国创新药研发取得显著成果。
在肿瘤、免疫、神经、代谢等领域，多个新药上市或进入临床试验阶段。
其中，PD-1/PD-L1抑制剂、CAR-T细胞疗法等创新药物成为行业热点。
2. 生物类似药研发生物类似药研发成为行业重要发展方向。
2023年，我国生物类似药注册申请数量持续增加，多个生物类似药获批上市，为患者提供了更多经济实惠的治疗选择。
3. 疫苗研发疫苗研发取得重大突破。
2023年，我国新冠疫苗研发取得显著成果，多个疫苗获批上市或紧急使用。
此外，流感疫苗、带状疱疹疫苗等疫苗研发也取得进展。
四、行业面临的机遇与挑战1. 机遇（1）政策支持：政府出台了一系列政策措施，为生物制药行业提供了良好的政策环境。
（2）市场需求：随着人口老龄化、慢性病患病率上升，生物制药市场需求持续扩大。
（3）技术进步：生物技术、基因编辑技术等新技术的不断发展，为生物制药行业提供了新的发展机遇。
生物制药年度培训总结
生物制药年度培训总结引言随着生物技术的快速发展，生物制药行业成为全球医药产业的重要组成部分。
为了不断提升员工的专业知识和技能，我公司每年都会举办一系列培训活动。
本文将对我公司今年的生物制药年度培训进行总结，包括培训的内容、效果以及改进措施等方面进行回顾和分析。
培训内容今年的生物制药年度培训主要涵盖了以下几个方面：1. 行业背景和趋势在这一部分的培训中，我们邀请了来自国内外生物制药行业的专家，介绍了当前生物制药行业的发展趋势、政策法规、市场动态等内容。
这为员工提供了一个全面了解行业背景的机会，拓宽了我们的视野。
2. 新技术和新药研发在这一部分的培训中，我们聚焦于一些新兴技术和新药研发的热点话题，如基因编辑、细胞治疗、抗体药物等。
通过专家的讲解和案例分析，我们对这些新技术和新药的原理、应用和前景有了更深入的了解。
3. 质量管理和合规要求作为生物制药行业的从业者，质量管理和合规要求是我们工作中不可忽视的重要方面。
在这一部分的培训中，我们学习了各种质量管理体系（如GMP、GLP等）的要求，以及相关的国内外法规和标准。
这不仅对我们加强质量控制、提高产品质量有重要意义，也有助于公司提升信誉度和市场竞争力。
4. 专业技能培训除了理论知识的学习，我们还组织了一系列的专业技能培训，如实验技术、数据分析、项目管理等。
这些培训旨在提升员工的实践操作能力和解决问题的能力，从而更好地应对工作中的各种挑战。
培训效果通过今年的生物制药年度培训，我们取得了以下几方面的效果：1. 知识储备增加通过专家的讲解和学习，我们的员工对生物制药行业的知识储备得到了明显的增加。
大家对行业趋势、新技术和新药研发等方面有了更深入的了解，这为我们在实际工作中做出更明智的决策提供了有力的支持。
2. 团队凝聚力提升培训活动不仅仅是知识的传授，也是一个团队建设和交流的机会。
通过和大家的面对面交流和互动，我们更加了解彼此，增强了团队的凝聚力和合作精神。
在解决问题、协作开展项目等方面，团队的配合更加默契和高效。
制药生物技术总结
制药生物技术是指利用生物学原理和技术手段，研究、开发、生产和应用医药产品的技术体系。
它是现代生物技术与制药工业的结合，主要包括基因工程、细胞工程、蛋白质工程、抗体工程、组织工程和生物制药等领域。
制药生物技术已经成为当今医药科学领域的一大热点，对于治疗疾病、提高生活质量等方面有着积极的应用前景。
基因工程是制药生物技术的核心技术之一。
通过基因工程技术，科学家可以利用重组 DNA 技术改造微生物细胞，让其生产特定药物。
最典型的例子是利用大肠杆菌等微生物来合成青霉素，这种方法已经成为大规模生产药物的主要手段之一。
此外，基因工程也可以利用植物或动物细胞来合成药物，比如利用转基因植物合成抗癌物质。
细胞工程是制药生物技术领域的另一重要分支。
科学家可以利用细胞培养技术，通过调控细胞的生长环境和生长条件，来提高某些特定药物的产量和纯度。
此外，细胞工程还可以用于生产一些特殊药物，比如利用动物细胞来合成重组人胰岛素。
蛋白质工程是制药生物技术的重要组成部分之一。
蛋白质工程技术主要通过改变蛋白质的结构和功能，来提高其稳定性和活性。
对于那些需要长时间使用或者需要在特殊环境下使用的药物，如胰岛素等，改变其分子结构可以提高其效力和稳定性。
蛋白质工程技术还可以改变蛋白质的生物分布特性，从而提高其在体内的分布和代谢。
抗体工程是制药生物技术领域的新兴分支。
抗体是一种特殊的蛋白质，可以识别，结合并中和体内的异物或者有害物质，比如细菌，病毒等等。
目前，科学家已经可以通过改变抗体的结构和功能，来增强其医药应用价值。
比如，通过改变抗体的结构，可以增强其对某些疾病的特异性识别能力，从而提高其在疾病治疗中的效果。
组织工程是制药生物技术领域的另一重要分支。
组织工程技术主要利用细胞培养技术，通过组织工程技术将特定细胞种群生长到可移植或可植入的大面积外种群的器官具有某些特殊的生理或药理功能。
组织工程技术可以用于修复，替代，甚至重建受损或者缺失的组织和器官，对于治疗一些疑难疾病有着广阔的应用前景。
生物技术制药
生物技术制药：是指利用生物系统或通过生物反应过程生产药物的技术。
名解生物药物：是指以生物资源为原料或以生物技术为手段开发生产的用作疾病的预防、诊断和治疗的医药品。
名解1）基因工程：又称DNA重组技术（DNA recombination technology），是指按人的意志，将某一生物体（供体）的遗传信息（目的基因）在体外经人工与载体DNA重组，构成重组DNA，然后转入到另一生物体（受体）细胞中，使被引入的外源DNA片段（目的基因）在受体细胞内得以表达和遗传。
名解2）限制酶：限制性核酸内切酶，是一类专一性很强的核酸内切酶，专一地识别和作用于DNA分子上特定的核苷酸序列，切断DNA双链。
名解3）连接酶：能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。
这类酶的发现和分离纯化，使两个DNA片段在体外连接形成重组DNA分子成为可能。
名解5）限制酶星活性：在标准条件下，每种限制酶都有严格的识别序列。
在非标准条件下，会导致限制酶识别序列的特异性发生改变，在DNA内产生附加切割，称限制酶的第2活性或星活性。
名解6）基因载体：在细胞内具有能进行自我复制的独立DNA分子作为外源DNA片段的运载体，简称基因载体，又称分子克隆载体或无性繁殖载体。
名解3、限制酶有哪些特性？（1）不同限制酶能专一地识别不同的特异核苷酸序列（核苷酸序列不同，序列大小不同）。
（2）各种限制酶的识别序列都具有回文结构。
（3）各种限制酶的切割类型是各式各样的，切后形成各种粘性或平整末端。
①一种是限制酶错位切断DNA双链而形成彼此互补的单链末端，称粘性末端。
②另一种是限制酶在同一位点平齐切断DNA两条链而形成的双链末端，称为平整末端。
（4）在标准条件下，每种限制酶都有严格的识别序列。
在非标准条件下，会导致限制酶识别序列的特异性发生改变，在DNA内产生附加切割，称限制酶的第2活性或星活性。
5、基因载体有哪些特性？6、如何将天然的原始载体改造成理想的基因载体？5、6连①要有复制子（Replicom）功能，且复制起始区中没有限制酶的酶切位点。
生物制药总结
生物制药总结一、名词解释1、发酵工业上的发酵：泛指利用微生物制造或生产某些产品的过程；发酵是用生物催化剂使培养物质转变为产品的生物化学反应。
2、自然选育利用微生物在一定条件下产生自发突变的原理，通过分离、筛选排除衰退型菌株，从中选出维持或高于原有生产水平菌株的过程，称为自然选育。
3、定向培育定向培育（directive breeding）是指为了获得具有某些需要性状的品系，在一定的环境条件下长期处理某一微生物群体，同时不断移种，以达到累积并选择合适的自发突变体的育种方法。
4、诱变育种利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群，促使其突变率大幅度提高，然后采用简便、快速和高效的筛选方法，从中挑选出少数符合育种目的的突变株，以供生产实践或科学研究用。
5、营养缺陷型菌株营养缺陷型：在一些营养物质（如氨基酸、维生素和碱基）的合成能力上出现缺陷，因此必须在基本培养基中加入相应的有机营养成分才能正常生长的变异菌株。
6、野生型菌株：自然界分离的任何原始菌株。
7、杂交育种利用真核微生物的有性生殖或准性生殖，或原核微生物的接合、转化和转导等过程，促使两个具不同遗传性状的菌株进行遗传物质交换和基因重组，以获得优良性能或新的品种的生产菌株。
8、培养基人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
9、前体在发酵液中加入某种物质，它们没有改变就成为产物分子组成的一个部分，而显著增加产量或改良产物的组分，这些物质称为前体10、分解代谢物阻遏。
被菌体快速利用的碳源如葡萄糖、枸橼酸等会产生大量的分解产物，这些分解产物阻遏次级代谢产物合成酶系，只有这类碳源被消耗完后，阻遏作用消除，菌体才由生长阶段转入次级代谢产物的合成阶段。
11、突变生物合成在发酵培养阻断突变株时添加某种天然或化学合成的化合物作为中间体，利用这些中间体合成一些新结构化合物的过程称为突变生物合成。
12、菌体浓度菌体浓度是指单位体积培养液中菌体的含量。
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生物技术：人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术1基因工程制药：利用基因重组技术将外援基因导入宿主菌或细胞进行大规模培养，以获得蛋白质药物的过程。
2.载体：是携带外源目的基因或DNA进入宿主细胞，实现外援基因或DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。
细胞传代passage：将细胞从一个培养器皿中消化、分散并接种至另一个培养器皿中的操作。
细胞克隆培养（clonal culture）：即单细胞分离培养，是将动物组织分散后，将一个细胞从群体细胞中分离出来，由单个细胞培养成纯系细胞集群。
动物细胞的复苏：其原则是快速融化，必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
细胞融合（cell fusion）：是指在外力（诱导剂或促融剂）作用下，两个或两个以上的异源（种、属间）细胞或原生质体相互接触，从而发生膜融合、胞质融合和核融合并形成杂种细胞的现象，或称细胞杂交。
转基因动物（transgenic animal）：采用基因工程技术将外源目的基因导入动物生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎，并在受体动物的染色体上稳定整合，在经过发育途径将外源目的基因稳定地传给子代，通过这项技术所获得的动物即为转基因动物。
胚胎干细胞（embryo stem cell）：简称ES细胞，是从早期胚胎细胞团分离出来并能在体外培养的一种高度未分化的、具有形成所有成年细胞类型能力的全能干细胞。
它是正常二倍体型，像早期胚胎细胞一样具有发育上的全能性。
抗体工程制药（antibody engineering pharmaceutics）：利用基因工程、细胞工程（包括动物细胞工程和植物细胞工程）和转基因动物及转基因植物技术生产抗体药物的过程。
单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb）：简称单抗，将能大量扩增和永生的骨髓瘤细胞和能合成分泌特异性抗体的B细胞（仅识别一种抗原表位）进行融合得到杂交瘤细胞，经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌抗单一抗原表位的特异性抗体。
杂交瘤细胞克隆化（cloning）：是指将阳性孔中分泌抗体的单个细胞分离出来。
融合后的杂交瘤细胞一般要经过3次克隆化才能达到100%的阳性克隆。
双特异性抗体（bispecific antibody，bsAb）：亦称双功能抗体，是含有两个不同配体结合位点的抗体分子，它有两个不同的抗原结合部位（两个臂），可分别结合两种不同的抗原表位。
嵌合抗体（chimeric antibody）：是利用DNA重组技术，将异源单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞表达的抗体，表达的抗体分子中轻、重链的V区是异源的，而C区是人源的，即整个抗体分子的60%~70%是人源的。
人源化抗体（humanized antibody，hAb）：通过CDR移植即把鼠抗体的CDR（互补决定区）序列移植到人抗体的可变区内所得到的抗体，也称CDR移植抗体或改型抗体。
该抗体既具有鼠源性单抗的特异性又保持了人抗体的功能（C区的功能）。
免疫原性（immunogenicity）：抗原能刺激机体特异性免疫细胞，使其活化、增值、分化，最终产生免疫效应物质（抗体或致敏淋巴细胞）的特性。
免疫反应性（immunoreactivity）：抗原与相应免疫效应物质在体内或体外相遇时，可发生特异性结合而产生免疫反应的特性。
减毒活疫苗（live attenuated vaccine）：是通过不同的方式手段使病原体的毒性即致病性减弱或丧失后获得的一种由完整的微生物组成的疫苗制品。
灭活疫苗（inactivated）：是将病原体经培养增殖、灭活纯化处理，使其完全丧失感染性，但保留了病原体的几乎全部组分因此灭活疫苗具有较好的免疫原性和安全性。
亚单位疫苗（subunit vaccine）：利用微生物的某种表面结构成分（抗原）制成、能诱发机体产生抗体的疫苗。
分解代谢阻遏（catabolite repression）：在菌体的生长阶段被菌体快速利用的碳源会产生大量的分解产物，这些代谢产物阻遏次级代谢酶系的合成，只有当这类碳源被消耗完后，阻遏作用被消除，菌体才由生长阶段转入次级代谢产物合成阶段，这种发酵过程中的次级代谢产物在碳源被消耗尽时才产生和积累的现象称为分解代谢阻遏。
生物技术：人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。
种龄（inoculumage）：种子罐中培养的菌丝转入下一级种子罐或发酵罐时得培养时间生物技术药物的特性？（1）理化性质特性（1）相对分子量大（2）结构复杂：蛋白质和核酸均为生物大分子，蛋白质含有四级结构（3）稳定性差（2）药理学作用特性（1）活性与作用机制明确：活性物质对生理功能的调节机制比较清楚（2）作用针对性强：有特定的靶分子、靶细胞或靶器官（3）毒性低：生物技术药物本身是体内天然存在的物质或它们的衍生物（4）体内半衰期短（5）有种属特异性（6）可产生免疫原抑制（3）生产制备特性（1）药物分子在原料中的含量低（2）原料液中常存在降解目标产物的杂质：应采取快速分离纯化的方法以除去影响目标产物稳定性的物质（3）制备工艺条件温和：目的产物不稳定（4）分离纯化困难：需要多种不同原理的层析单元操作才能达到要用的纯度（5）产品易受有害物质（4）质量控制特性质粒的特点：（1）是指独立于原核生物染色体之外具有自主复制能力的遗传物质。
（2）质粒具有遗传传递和遗传交换的能力（3）质粒具有不相容性：两种亲缘关系密切的不同质粒不能在同一宿主细胞中稳定共存。
4..共价闭合环状DNA(ccDNA)，开环DNA(ocDNA)，线状DNA(lDNA)在琼脂糖凝胶电泳中5.复制子可分为松弛型复制子和严谨型复制子。
松弛型复制子的复制和宿主蛋白的合成功能无关，宿主染色体DNA复制受阻时，质粒仍可复制；严谨型复制子的复制与宿主蛋白质的合成相关，因此在每个宿主细胞中为低拷贝数，仅1~3个。
6.克隆表达的质粒载体涉及三个要素：（1）复制子（2）选择标记：由质粒携带的赋予宿主细胞新的表型的基因，用于鉴定和筛选转化有质粒的宿主细胞。
常见的标记：氨苄西林（Amp），卡那霉素（Kan）（3）多克隆位点（MCS）：质粒载体中由多个限制性内切酶识别序列密集排列形成的序列。
7.目的基因常用制备方法(1)化学合成法（2）PCR法：在含有DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTP的缓冲溶液中通过下列步骤扩增DNA：a）变性：双链DNA模板加热变性，解离成单链模板；b）退火：降低温度，引物与单链模板结合；c）延伸：温度调整至DNA聚合酶最适宜温度，最终与单链模板形成双链，并开始下一个变性、退火、延伸循环。
（3）基因文库法（4）cDNA文库法8.影响目的基因与载体之间连接效率的主要因素：9.（1）DNA片段之间的连接方式：粘性末端的连接效率高于平头末端。
（2）目的基因与载体的浓度和比例：增加DNA浓度可以提高连接效率，目的基因与载体DNA的摩尔数比应大于1.（3）连接温度、时间、连接酶的活性及缓冲液。
9.重组DNA导入大肠杆菌，常用的感受态细胞制备方法：氯化钙法10.重组子的筛选与鉴定：（1）载体遗传标记法：a)抗生素抗性筛选法b)互补筛选法：重组子转化成宿主细胞，载体的表达产物与宿主细胞中营养缺陷性突变发生互补作用，从而实现重组子的筛选。
蓝白斑筛选：lacZα基因可编码β—半乳糖苷酶α氨基端的α互补肽段，与宿主细胞编码的缺陷型β—半乳糖苷酶α实现互补，可分解底物5-溴-4-氢-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，形成蓝色菌落。
由于lacAα基因的插入失活而成白色，空载体的宿主细胞呈蓝色。
c)营养缺陷筛选法d噬菌斑筛选法(2)核酸分子杂交法(3)限制性内切酶图谱法(4)DNA序列测定法：双脱氧终止法(5)目的基因表达产物测定法12.外源基因在大肠杆菌中的表达形式：(1)胞内表达：(a)非融合蛋白的胞内表达：形成包涵体（B）融合蛋白的胞内表达：在大肠杆菌内较稳定（2）分泌表达：（a)分泌至周质（b）分泌至胞外11.外源基因在原核生物中表达的重要调控元件(1)启动子：是DNA链上能与RNA聚合酶结合并起始mRNA合成的一段序列，是决定外源基因在原核生物中表达效率的关键因素。
(2)核糖体结合位点：SD序列(3)终止子13.大肠杆菌中外源蛋白表达效率的影响因素：(1)外源基因密码子：偏好密码子（蛋白质合成迅速，错配率低）和稀有密码子(2)mRNA结构：减少G、C含量，增加A、T含量(3)表达载体：高拷贝数、适用范围广、稳定性高、表达产物容易纯化(4)外源蛋白稳定性14.分离纯化技术应满足下列要求：(1)技术条件要温和，能保持目的产物的生物活性；(2)选择性要好(3)回收率要高(4)两个技术之间要能直接衔接(5)整个分离纯化过程要快15.基因重组蛋白的主要分离技术(1)离心(2)沉淀(3)膜分离(4)双水相萃取16基因重组蛋白的主要纯化技术:(1)离子交换层析(2)亲和层析(3)凝胶过滤层析(4)反相层析和疏水层析17.选择分离纯化方法的依据：(1)根据产物表达形式来选择。
（2)根据分离单元之间的衔接选择：应选择不同机制的分离单元，层析分离次序的选择也同样重要。
(3)根据分离纯化工艺的要求来选择(a)具有良好的稳定性、重复性和较高的安全性(b)尽可能减少组成工艺的步骤(c)分离纯化工艺所用的时间要尽可能的短(d)工艺和技术必须高效18．基因工程药物的质量控制要点(1)蛋白质含量的测定(2)蛋白质纯度检测(3)蛋白质分子质量测定(4)蛋白质等电点测定(5)蛋白质序列分析(6)内毒素分析、宿主蛋白与核酸残留分析19.蛋白质含量的测定(1)紫外吸收法(2)BCA法(3)Lowry法(4)考马斯亮蓝法(5)SDS-PAGE扫描分析法20.蛋白质纯度的检测：电泳法、层析法、质谱法、末端氨基酸残基分析法21.蛋白质Mr测定有SDS-PAGE法、凝胶层析法、质谱法22.蛋白质等电点测定的常用方法：等电聚焦法。
23.蛋白质序列的分析:N-端氨基酸序列分析，C-端氨基酸序列分析根据体外培养时动物细胞对生长基质的依赖性，可将动物细胞分为(1)贴壁依赖性细胞(2)非贴壁依赖性细胞(3)兼性贴壁细胞1.动物细胞培养的环境条件(1)培养温度（哺乳类37℃，昆虫25~28℃）(2)pH值（大多数7.2~7.4）(3)通氧量（一定量的CO2）(4)防止污染(5)基本营养物质(6)渗透压3.动物细胞的培养特性(1)比微生物细胞大得多，无细胞壁，抗机械强度低，对剪切力敏感，适应环境能力差；(2)倍增时间长，生长缓慢，正常二倍体细胞的生长寿命是有限的；(3)对培养基要求高，易受微生物污染，培养时需要添加抗生素；(4)生长大多需贴附于基质，相互粘连以集群形式存在，并有接触抑制现象；(5)多半将产物分泌在细胞外，便于收集和纯化；(6)对蛋白质的合成条件和修饰功能与细菌不同，动物细胞可对蛋白质进行完善的翻译后修饰，特别是糖基化，与天然产品更一致，更适合于临床应用。