山慈菇含药血清对SMMC7-721细胞侵袭黏附能力的影响_曾迪
中药山慈姑对甲状腺癌细胞的促凋亡作用
1． 2 主要试剂 L － 15 培养基（ 武汉博士德生物有限公司） 、胎牛 50% ～ 60% ，密封 4℃ 冷藏 24 ～ 48 h 后滤过，并用 95% 乙醇洗涤
血清（ FBS 杭州四季青生物有限公司） 、四甲基噻唑蓝（ MTT 美国 沉淀，收集滤液。滤液经真空减压回收得深棕色浸膏 6． 0 g。用
前临床上常用于内、外、妇、儿、皮肤等疾病的治疗，尤其是以复方 （ 瑞士梅特勒 － 托利多公司） 、多通道 PCＲ 扩增仪（ PTC － 220 美 的形式用于抗肿瘤治疗［2］。现代药理学研究表明，山慈姑有抗 国 MJ 公司） 、BIO － ＲAD 电泳仪（ 美国 Bio － Ｒad 公司） 、凝胶成像
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时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 1 期
LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2014 VOL． 25 NO． 1
试剂） 提 取 总 ＲNA，核 酸 蛋 白 分 析 仪 检 测 含 量 后 以 TIANscript cDNA 第一链合成试剂盒进行逆转录成 cDNA。取 cDNA1． 2μl、 Premix Taq Version 10 μl、上 游 引 物 0． 6 μl、下 游 引 物 0． 6 μl、 ddH2 O 6μl 进行扩增。扩增条件为： 94℃ 预变性 5 min，94 ℃ 变性 30 s，57． 6℃ 退火 30 s，72℃ 延伸 45 s，35 个循环后 72℃ 延伸 5 min。最后将扩增产物于 2% 琼脂糖凝胶电泳，应用凝胶成像系 统进行扫描并用 Image J 软件分析图像。 2． 5 统计学处理 数据用 x珋± s 表示，用 SPSS16． 0 统计学软件进 行分析，多组间的比较采用方差分析，LSD 法对各组数据进行两 两比较，检验水准 α = 0． 05，P ＜ 0． 05 有统计学意义。 3 结果 3． 1 山慈姑对 SW579 细胞的增殖抑制作用 山慈姑提取物在 1 ～ 100 mg / ml 范围内对 SW579 细胞有不同程度的促凋亡作用。 在浓度为 1 ～ 30 mg / ml 范围内对细胞增殖的抑制作用呈浓度依 赖性； 山慈姑对 SW579 细胞的抑制作用随着药物作用时间的延 长而增强，呈时间依赖性（ 见图 1） 。在 48h 后对细胞的抑制作用 减缓，且随着作用时间的延长细胞的状态较差，因此选择作用时 间为 48 h 为药物作用观察时间（ 见表 1） ； 经 SPSS16． 0 统计软件 计算得出山慈姑的 IC50 为 18． 81mg / ml。
山慈姑对甲状腺癌SW579细胞BCL-2和C-myc表达的影响
械一 厂） 、 高速低温离 心机 （ ５ ８ １ ０ Ｒ德国 Ｅ ｐ ｐ ｅ ｎ ｎ ｄ ｏ ｒ ｆ
Ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ｉ ｆ ｕ ｇ ｅ 公司 ） 、 Ａ Ｂ ２ ０ ４一Ｅ分析 天平 （ 瑞 士 梅特 勒 一
的趋势 。 。 目前 甲状 腺癌 的治疗 不论 是手 术 治疗 、 内科综 合治疗 或肿瘤 分子靶 向治疗 、 基 因治疗 及免疫
山慈姑有抑制 甲状腺癌 细胞的增殖作 用， 这一作 用可能与下调凋亡相关基 因Ｂ Ｃ Ｌ一 ２与 Ｃ— ｍ ｙ ｃ 表达水平有 关。 【 关键词 】 山 慈姑 ；甲状腺癌 细胞 ； Ｂ Ｃ Ｌ一 ２； Ｃ—ｍ ｙ ｃ ；细胞增 殖
甲状腺癌 是 内分 泌系统最 常见 的恶性肿 瘤 ， 据 国
【 摘要 】 目的 探 讨 中药山慈姑对 甲状腺癌 凋亡相 关基 因Ｂ Ｃ Ｌ一 ２ 和 Ｃ— ｍ ｙ ｃ 表达水平的影响 。方法 不同
浓度的 山慈姑作 用于人 甲状腺 癌 Ｓ Ｗ５ ７ ９细 胞 ４ ８ ｈ后 ， 采用 Ｍ １ Ｔ ｒ法计 算 出 山 慈姑 对 Ｓ Ｗ５ ７ ９的半 数 抑 制 浓度
（ Ｉ Ｃ 。 ） ； 将 实验 分 为 山 慈姑 ０ ． ５ Ｉ Ｃ 。 （ 低浓度 ） 组、 Ｉ Ｃ 。 （ 中浓 度 ） 组、 ２ Ｉ Ｃ 。 （ 高浓 度 ） 组 和 阴性 对 照 组 ４个 组 ， 将 各 浓 度 组 药物 分 别 作 用 于 Ｓ Ｗ５ ７ ９细胞 ４ ８ ｈ后 ， Ｒ Ｔ—Ｐ Ｃ Ｒ检 测 各 组 Ｂ Ｃ Ｌ一 ２和 Ｃ—ｍ ｙ ｃ基 因 的表 达 水 平 。 结 果 山 慈姑 对
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材料
甲状腺癌细 胞株 ， 又称 Ｓ Ｗ５ ７ ９细胞 （ 中科
基于网络药理学研究浙贝母-山慈菇药对干预甲状腺癌的作用机制
基础研究中国民间疗法 犆犎犐犖犃 犛犖犃犜犝犚犗犘犃犜犎犢，犕犪狉 ２０２４，犞狅犾 ３２犖狅 ５通信作者：樊茜，Ｅ ｍａｉｌ：ｆｑ１３９９４２５２８１２＠１６３．ｃｏｍ第一作者：侯鹏霄，Ｅ ｍａｉｌ：５４４７８２８７０＠ｑｑ．ｃｏｍ （扫描二维码 查看文中图片）基于网络药理学研究浙贝母 山慈菇药对干预甲状腺癌的作用机制侯鹏霄樊茜（山西省肿瘤医院／中国医学科学院肿瘤医院山西医院／山西医科大学附属肿瘤医院，山西太原０３００１３）【摘要】 目的：采用网络药理学的研究方法，探索浙贝母 山慈菇药对干预甲状腺癌的机制。
方法：在中药系统药理学数据库与分析平台（ＴＣＭＳＰ）中查找浙贝母和山慈菇这两味中药的活性成分，检索有效活性成分的作用靶点，利用Ｕｎｉｐｒｏｔ将各作用靶点转换成基因通用名。
在ＯＭＩＭ、ＧｅｎｅＣａｒｄｓ数据库中分别筛选和甲状腺癌有关的靶点，通过Ｃｙｔｏｓｃａｐｅ３．７．１软件把得到的结果进行可视化，绘制药物 成分 靶点网络图及核心靶点的蛋白质 蛋白质相互作用网络，将药物作用靶点与疾病靶点采用Ｍｅｔａｓｃａｐｅ在线数据库进行京都基因与基因组百科全书（ＫＥＧＧ）及基因本体（ＧＯ）功能富集分析。
结果：浙贝母 山慈菇药对调治甲状腺癌的核心成分有１０种，其潜在的作用靶点有７５个；数据库筛选出与甲状腺癌相关的疾病作用靶点２３５７个，甲状腺癌疾病核心靶点９６个，其中ＮＰＭ１、ＨＳＰＡ５、ＨＤＡＣ５等基因较为关键。
ＧＯ功能富集分析细胞组分主要与核糖核蛋白复合物有关，分子功能主要与组蛋白脱乙酰酶结合有关，生物过程主要与调节细胞对压力的反应有关。
ＫＥＧＧ信号通路富集主要包括新型冠状病毒感染、细胞凋亡、剪接体及缺氧诱导因子 １（ＨＩＦ １）信号通路和细胞周期等信号通路有关。
结论：浙贝母 山慈菇药对干预甲状腺癌的机制包含多靶点、多通路，可为后续临床应用及药物开发提供理论依据和方向。
【关键词】 甲状腺癌；浙贝母 山慈菇；药对；网络药理学中图分类号：Ｒ２５９；Ｒ２８５ 文献标识码：Ａ 犇犗犐：１０．１９６２１／ｊ．ｃｎｋｉ．１１ ３５５５／ｒ．２０２４．０５１９ 我国甲状腺癌的发病率呈持续上升趋势，研究表明，我国甲状腺癌的发病率为２０．３／１０万，是目前常见的内分泌系统恶性肿瘤［１］。
山慈菇提取物抑制血管形成的药效学研究
精 自皮蛋购 自吉林 农 业科技 学院 养鸡场 ；人脐 静 脉细 胞株 （ Ｈ Ｕ Ｖ Ｅ Ｃ） ， 购 自上海 细胞 所 。
１ 。 ２试 验方 法
Ｃ Ｏ： 饱和湿度培养箱中继续孵育 ，孵育 ７ ２小时后即可观察到药 物载体周围新生血管生长 情况 。 山慈菇提取物对鸡胚尿囊膜新生 血管抑 制 率 ：药 物新 生血 管抑 制率 ＝ （ 生理盐 水 组新 生血 管数 一
１ ． ２ ． １山慈菇鳞 茎提 取物 的制 备 真 空干 燥 的 山慈菇 鳞 茎 （ ４ 公斤 ） 粉碎后 ， ８ ５ ％乙醇回流提取 ３ 次， 合并提取液得浸膏（ １ ７ ０ 克） ， 将干 浸 膏用 水 （ ５ ０ ０ 毫升 ） 悬 浮后 ， 依次 用正 丁醇 、 乙酸 乙酯 萃取 ， 回收溶 剂得 正丁 醇部 分 （ ３ 克） 、 乙酸 乙酯 部 分（ ４ ５ 克） 、 水 层部 分 （ １ ２ ０ 克） 。
１ ． １试 验材料
山慈 菇购 自安 徽 毛集 镇 ； ＭＴ Ｔ 、 ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 、 Ｒｅ ｔ ｉ ｎ ｏ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ（ Ｓ ｉ ｇ ｍａ 公 司） ， ＭＣ Ｄ Ｂ 一 １ ３ １ 细 胞培 养基 （ Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ Ｂ Ｒ Ｌ公 司 ） ， 胰酶 、 小 牛血 清 、 Ｌ 一谷氨 酰胺 （ 华美 生物 工程公 司 ） ， 其他 试 剂均 为 国产分 析 纯 ； 受
（ ％） ＝（ 对 照组 ０ Ｄ 值 一实验 组 ０ Ｄ值） ／（ 对照 组 ０ Ｄ 值 一空 白组 ０ Ｄ值 ） Ｘ １ ０ ０ ％ 。计 算药物 半数 抑 制浓度 （ Ｉ Ｃ ５ ０ ） 。 １ ． ２ ． ５鸡 胚 绒 毛 尿 囊 膜 （ ｃ ｈ ｉ ｃ ｋ ｅ ｍｂ ｒ ｙ ｏ ｃ ｈ ｏ ｒ ｉ ａ Ｕ ａ ｎ ｔ ｏ ｉ ｃ ｍｅ ｍｂ ｒ ａ ｎ ｅ ， ｃ Ｍ ） Ａ ￣ 管形 态学检 测 参考 文献方 法等 方法 ， 制 备鸡 胚 尿囊 膜 。 设置 山慈 菇提 取物 给 药组 、生 理盐 水阴 性对 照 组 、 Ｒｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ｏ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ阳性对 照组 。 甲基纤 维 素 Ｍ２ ０配制 成 Ｏ ． ５ ％ 浓 度溶 液 ， 灭菌 ， 制 备 直径 为 ７ 毫 米 甲基纤 维素膜 药物 载 体贴 于 Ｃ Ｍ 的部 位 。其 中 Ａ 山慈菇 提取物 组平 行设 置 ５ 个 质量 浓度 ， 滴加 １ ０ ｕ ｌ 含 不同 浓度 药 物 的生 理盐 水溶 液于 甲基 纤维 素膜 上 （ 终 浓度 分别 １ ２ ． ５ ｕ ｇ ／ ｍ ｌ 、 ２ ５ ｕ ｇ ／ ｍｌ 、 ５ ０ ｕ ｇ ／ ｍｌ 、 １ ０ ０ ｕ ｇ ／ ｍ ｌ 、 ２ ０ ０ ｕ ｇ ／ ｍ ｌ 的 山慈菇 醇提 物 ） ，同时 以不 含 药 物 的生 理盐 水 为 阴性 对 照组 ， Ｒｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ｏ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ （ １ ０ ｕ ｌ 、 １ ０ ０ ｕ ｇ ／ ｍ １ ） 为 阳性 对照 组 ， 每组 １ Ｏ 个鸡胚 ， 将 无菌 贴膜 封闭窗 口 ， 于３ ７ ￣ ｛ ２ 、 ５ ％
扶正解毒汤含药血清对镍转化细胞增殖抑制作用探究
扶正解毒汤含药血清对镍转化细胞增殖抑制作用研究1吕晓云，蒲晓丽，朱玉真，赵健雄，孙应彪兰州大学中西医结合研究所，兰州（730000）E-mail：lvxy@摘要：目的通过细胞培养方法，研究灌服中药扶正解毒汤（FJD）后兔血清对镍转化细胞（Nt16HBE）增殖的抑制作用。
方法将FJD血清作用于Nt16HBE细胞7d，分别以四甲基固氮唑盐（MTT）法、流式细胞仪（FCM）及TRAP-PCR-ELISA法检测FJD血清对镍转化细胞生长的抑制情况及其对核转录－kB（NF-κB）、端粒酶活性变化的影响。
结果 10％体积分数的高、中、低剂量FJD血清对Nt16HBE细胞生长以及NF-κB、端粒酶活性均有较强的抑制作用，且存在剂量－效应和时间－效应关系(P<0.05~0.01)。
结论FJD血清可显著抑制镍转化细胞增殖，其机制与下调NF- kB、端粒酶表达有关。
提示FJD具有一定的体外拮抗镍致癌效应。
关键词：正解毒汤；含药血清；镍；细胞增殖；核转录因子-κB；端粒酶镍化合物为人类Ⅰ类确证致癌物[1]。
多年来，国内外运用各种实验方法进行了大量有关镍致癌的动物实验及职业病临床研究，取得了重要的进展。
其中，体外镍暴露诱导细胞恶性转化作为敏感的遗传终点之一，具有极高的可信度。
许多实验室已建立了多种镍化合物诱导啮齿类及浦乳类细胞恶性转化模型。
同时，人们也在积极寻求有效的镍毒性包括镍致癌的干预手段。
近十六年来，本课题组运用扶正解毒汤（FJD）进行了系统的镍毒性干预的体内动物实验及临床研究[2，3]，证实了该复方的有效性。
本研究首次以经硫酸镍（NiSO4）诱导恶性转化的人支气管上皮（16HBE）细胞（简称Nt16HBE）[4]为研究目标，从体外途径观察FJD对镍转化细胞增殖的抑制作用并探讨其作用机制，以期为该复方拮抗镍致癌性提供新的理论依据。
1. 材料与方法1.1 材料1.1.1细胞及动物 16HBE细胞及Nt16HBE细胞由广州医学院化学致癌研究所建系并惠赠。
中药学_丽江山慈菇_药材详解课件模板_性味
中医药用价值详解：丽江山慈菇
原始形态： 或过之，先端弯钩状；花被片6，紫色。 蒴果倒卵形或卵圆形，宽约5mm，有棱。 花果期6-7月。
中医药用价值详解：丽江山慈菇
生态环境： 生于山坡草地或松林下。 资源分布：分布于云南、西藏等地。
中医药用价值详解：丽江山慈菇
性状鉴别：
1.性状鉴别：球茎呈不规则短圆锥形，直 径0.7-2cm，高1-1.5cm；顶端渐尖，基部 常呈脐状凹入或平截。表面黄白色或灰黄 棕色，光滑，一侧有自基部伸至顶端的纵 沟。质坚硬，碎断面角质样或略带粉质， 类白色或黄白色。味苦而微麻。
中医药用价值详解：丽江山慈菇
炮制： 取原药材，除去杂质。用时捣碎。 饮片性状：参见“药材鉴别”项。贮干燥 容器内，置阴凉通风处，防蛀、防霉。
中医药用价值详解：丽江山慈菇
性味： 苦；微辛；微温腺癌；鼻咽癌；唾腺肿瘤； 瘰疬；皮肤肿块；痛风。
中医药用价值详解：丽江山慈菇
药理作用：
作用，结果表明秋水仙碱肌内注射每日 125μg／kg，连续给药 4星期，对神经 周围组织的粘连、纤维化的形成，有明显 的抑制作用。家兔腹腔内注入 30mg／L。 秋水仙碱溶液，用量lmg／kg，术后10-15 天剖腹探查，记录粘连处数、致密程度、 粘连面积，并将粘连组织进行电子显微镜 观
中医药用价值详解：丽江山慈菇
药理作用：
注Coilmg疼痛缓解，症状、体征也迅速改 善，止痛机制尚不完全清楚。Col不影响 肾对尿酸的排泄，也不影响尿酸的血浓度。 Col能和微管蛋白结合，妨碍了有丝分裂 中纺锤体的功能并引起粒细胞和其他可移 动细胞中原纤维微管解聚和消失。这一作 用显然是Col有效作用的基础，即抑制粒 细胞移向发炎区
采收和储藏：夏、秋季采收，除去茎叶及 须根，洗净，晒干。
苦参素含药血清对人肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖活性的影响
苦参素含药血清对人肝癌细胞株SMMC-7721体外增殖活性的影响湛学军;谢大泽;胡银英;汤幽;周南进;戴革【摘要】Objective To investigate the effect of serum containing matrineon the proliferation of human hepatoma cell line SMMC-7721,provide scientific evidence for liver cancer therapy with matrine. Methods Kunming mice were given matrine by gavage and then the blood was collected to prepare serum containing matrine. Human hepatoma cell line SMMC-7721 and mice serum containing matrine were used the research subject andthe research drug,respectively. Serum containing matrine on the pro-liferation inhibitory activity of the tumor cells were determined by using MTT assay. It was observed that the effects of different dosage of administration and different culture time on the inhibitory activity. Results Serum containing matrine had different de-grees of inhibition on SMMC-7721. As compared with the cell control group and the normal salinegroup (negative control group) , there was significant difference the inhibitory activity(P<0.05or P<0.01). There was no significant difference when serum containing matrine of the high dosage at concentration of 40% were compared with serum containing 5-fluorouracil (5-Fu) group (positive control group)at the same concentration (P>0.05). And the inhibitory activity showed obvious dose-effect relationship. When serum containing matrine was cultured with the tumor cells for 24 and 48 hours,the inhibitory activity was better than for 72 hours. Conclusion Serumcontaining matrine has good effects of anti-hepatoma in vitro.%目的：探讨苦参素含药血清对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖活性的影响，为苦参素应用于肝癌的治疗提供科学依据。
研究快报 参杖颗粒含药血清对HSC增殖及α-SMA表达的抑 …
Duan YJ, Yin NN, Gao QH, Wan Y, Ma WP, Zhang CW, Lv WL. Shenzhang granules inhibit cell proliferation and reduce α-SMA expression in hepatic stellate cells. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2014; 22(10): 1396-1401 URL: /1009-3079/22/1396.asp DOI: /10.11569/wcjd.v22.i10.1396
0 引言 肝纤维化是肝脏细胞外基质(extracellular matrix, ECM)异常生成和积累的结果[1]. 当肝脏受到各 种损伤时, 肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC) 被活化并向肌纤维母细胞转化, 主要表现为细胞 增殖、游动、收缩能力增强及细胞因子和ECM 的大量合成, 并导致肝窦毛细血管化, HSC的活 化增殖和收缩功能在此过程中起中心作用[2,3]. 当 HSC转化为肌成纤维细胞时, 能特征性地表达 α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin, α-SMA), 使得肝脏内α-SMA含量增加[4]. 中药复 方抗肝纤维化实验研究表明: 中药复方能抑制 和减少HSC中α-SMA的表达, 从而抑制HSC的 激活和肝纤维化[5]. 因此α-SMA的变化被看成 HSC活化与否的标志, 成为肝纤维化的一个重要 的评价指标[6].
结果: Western blot实验结果显示10倍浓度的 参杖颗粒含药血清对HSC的α-SMA的表达 有明显减少; 同时RT-PCR结果显示α-SMA的 mRNA水平在10倍浓度血清处理的HSC中最 低; 细胞周期检测结果显示细胞明显被阻滞
泰山山慈菇对小鼠肝癌的治疗作用及相关免疫机制研究
泰山山慈菇对小鼠肝癌的治疗作用及相关免疫机制研究目的探讨泰山山慈菇对小鼠肝癌的免疫治疗作用。
方法本课题首先制备泰山山慈菇提取液，体外用山慈菇提取液对H22肝癌细胞进行干预，分为空白组、山慈菇提取液低、中、高剂量组和5-氟尿嘧啶阳性对照组，干预12 h后，Annexin V和7-AAD染色，流式细胞术检测细胞凋亡。
体内制备小鼠H22实体瘤肝癌模型，将50只小鼠分为山慈菇低、中、高剂量组、5-Fu阳性对照组、模型对照组，每组10只。
山慈菇各剂量组均进行灌胃治疗，模型组灌胃等体积生理盐水，5-Fu 阳性对照组进行等体积腹腔注射。
连续10 d，停药后次日摘取小鼠眼球取血后颈椎脱臼处死小鼠，检测小鼠肿瘤大小分析对肿瘤的抑制作用。
酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-2（IL-2）和γ-干扰素（IFN-γ）的含量。
结果泰山山慈菇提取液体外促进H22肿瘤细胞凋亡且具有剂量依赖性。
体内抑制H22肿瘤的生长，增加血清中TNF-α、IL-2和IFN-γ的含量且呈现剂量依赖性。
结论泰山山慈菇通过增加抗肿瘤细胞因子产生发挥抗肿瘤作用。
Abstract：Objective To investigate the immunotherapy effect of Taishan mountain mushroom on liver cancer in mice.Methods We first prepared the Taishan mountain mushroom extract.In vitro，the H22 hepatoma cells were treated with the extract of mushroom extract in vitro.It was divided into blank group，low，middle and high dose group and 5- fluorouracil positive control group.After 12 h intervention，Annexin V and 7-AAD were stained，and cell apoptosis was detected by flow cytometry.The mice model of H22 solid tumor was prepared in vivo，and 50 mice were divided into low，medium and high dose group，5-Fu positive control group and model control group，with 10 rats in each group.The rats in each dose group were treated by intragastric perfusion，and the model group was given iso-volume intraperitoneal injection of normal saline and 5-Fu positive control group.For 10 d，the mice were killed the next day after extirpation of eyeball and blood，and the inhibitory effect of tumor size analysis on the tumor was detected.Enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）was used to detect the levels of TNF-α，IL-2 and IFN-γ in serum.Results The extract of Taishan mountain mushroom promoted the apoptosis of H22 tumor cells in a dose-dependent manner.In vivo，the growth of H22 tumor was inhibited and the levels of TNF-α，IL-2 and IFN-γ in serum increased.Conclusion Taishan mountain mushroom plays an anti-tumor role by increasing the production of anti-tumor cytokines.Key words：Taishan mountain mushroom；Liver cancer；Tumor necrosis factor -α；Interleukin-2；γ-interferon肝癌是死亡率較高、五年生存率较低、恶性程度极高的肿瘤疾病之一。
山慈菇提取物对肝癌细胞增殖及tnf-α、il-1β、il-6表达的影响
山慈菇提取物对肝癌细胞增殖及TNF-a、IL-10、IL-6的影响唐纯明，何自力，李军湖南师范大学第一附属医院湖南省人民医院，长沙431000摘要：目的观察山慈菇提取物对肝癌SMMC-7721细胞增殖及TNF-a.IL-10.IL-6表达的影响。
方法对SMMC-7721细胞分别给予0、100、200、400、600、800、1000mg/L山慈菇提取物培养24,48,72h,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。
将SMMC-7721细胞分为0mg/L组、00mg/L组、00mg/L组、00mg/L组，分别加入0、00、600,800mg/L的山慈菇提取物培养24h,采用平板克隆形成实验测算细胞形成率，光学倒置显微镜下观察细胞形态变化，采用qRT-PCR法检测细胞中的TNF-a.IL-10.IL-6mRNA,采用ELISA法检测细胞培养液上清中的TNF-a、IL-10、IL-6。
结果400、600、800mg/L组细胞克隆形成率低于0mg/L组,00.800mg/L组克隆形成率低于400mg/L组（P均＜0.05）。
400.600.800mg/L组随着药物浓度增大，细胞形态皱缩，，细胞易脱落，尤以800mg/L组最明显。
400、600、800mg/L组细胞中TNF-a.IL-10.IL-6mRNA表达及细胞培养液上清TNF-a、IL-10、IL-6水平均低于0mg/L组,00.800mg/L组低于400mg/L组（P均＜0.05）。
结论山慈菇提取物可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,并抑制细胞中TNF-a.IL-10.IL-6的分泌。
提取通过抑制炎症因子分泌，调节肿瘤微环境，从而抑制细胞增殖。
关键词：山慈菇提取物;SMMC-7721细胞;细胞增殖；TNF-a;IL-10；IL-6doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2020.08.003中图分类号:R285.5文献标志码:A文章编号：1002-266X（2020）08-0011-04Effects of iphigenia indica extract on proliferation and expression of TNF-a,IL-1p,and IL-6of hepatoma SMMC-7721cellsTANG Chunming,HE Zili,LI JunThe First Affiliated Hospital of Hunan Normal University,Changsha431000,ChinaAbstract:Objective To observe the effects of iphigenia indica extract on the proliferation and the expression levels of tumor necrosis factor-a(TNF-a),interleukin-10(IL-10),and interleukin-6(IL-6)of liver cancer SMMC-7721cells.Methods SMMC-7721cells were administered0,100,200,400,600,800,and1000mg/L iphigenia indica extracts for24，48，and72h，respectively，and the cell proliferation inhibition rate was detected by CCK-8.SMMC-7721cells were divided into0mg/L group,400mg/L group,600mg/L group,and800mg/L group,which were cultured with0, 400,600,and800mg/L iphigenia indica extract for24h.The plate clone formation assay was used to detect the cell clone formation ability;optical inverted microscope was used to observe the change of cell morphology;quantitative real-time PCR (qRT-PCR)was used to detect TNF-a,IL-10,and IL-6mRNA;enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was used to detect the levels of TNF-a,IL-10,and IL-6in the supernatants of cell culture fluid.Results The colony formation rates were lower in the400,600,and800mg/L groups than in the0mg/L group,and the colony formation rates were lower in the600,800and800mg/L groups than in the400mg/L group(all P<0.05).With the increase of drug concentrations in the400,600,and800mg/L groups,the cell morphology shrank,adherence was poor,and the cells were prone to fall off,especially in the800mg/L group.The expression levels of TNF-a,IL-10,and IL-6mRNA and the levels of TNF-a,IL-10,and IL-6in cell culture supernatants in the400,600,and800mg/L groups were lower than those in the0mg/ L group,those in the600and800mg/L groups were lower than those in the400mg/L group(all P<0.05).Conclusions Iphigenia indica extract can inhibit the proliferation of liver cancer SMMC-7721cells,and inhibit the expression and se-基金项目：国家自然科学基金资助项目（81372157）。
山慈菇含药血清对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、凋亡以及迁移能力影响
山慈菇含药血清对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、凋亡以及迁移能力影响的实验研究作者：陈思邢晓静来源：《云南中医中药杂志》2020年第04期摘要：目的观察山慈菇含药血清对人乳腺SK-BR-3细胞增殖、凋亡以及迁移能力的影响。
方法选用20只SD雌性大鼠，2月龄，体重（200±20）g，使用随机数字表法将大鼠随机分为实验组和空白对照组，每组10只，实验组大鼠按0.01 mL/g灌胃山慈菇浓煎剂，对照组大鼠给予等体积的生理盐水，每日灌胃1次，连续6d，末次灌胃后，腹主动脉取血，制作含药血清;同时培育人乳腺癌SK-BR-3细胞。
使用MTT法检测人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖情况、荧光显微镜观察SK-BR-3凋亡情况以及划痕试验检测SK-BR-3细胞迁移情况。
结果与对照组比较，实验组能够明显抑制人乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖、诱导细胞凋亡以及延缓人乳腺癌SK-BR-3细胞向划痕中央聚集。
结论山慈菇含药血清能够有效抑制人乳腺癌SK-BR-3细胞活性，并加速细胞凋亡以及延缓细胞的迁移能力。
关键词：山慈菇含药血清;人乳腺癌SK-BR-3细胞;细胞凋亡;细胞迁移【Abstract】Objective：To observe the effects of Iphigenia indica Kunth drug serum on the proliferation，apoptosis and migration ability of human breast SK-BR-3 cells. Methods：20 SD female rats of 2 months old and weighing （200 ± 20）g were randomly divided into an experimental group and a blank control group by using a random number table method，10 rats per group. The rats in the experimental group were administered with Iphigenia indica Kunth decoction and the rats in the control group were given the same volume of physiological saline once a day for 6 days. In the lasttime，the abdominal aorta was taken for blood to make drug serum. At the same time human breast cancer SK-BR-3 cells were bred. MTT method was used to detect the proliferation of the human breast cancer SK-BR-3 cells. SK-BR-3 apoptosis was observed by using a fluorescence microscope，and SK-BR-3 cell migration was detected by a scratch test. Results：Compared with the control group，the experimental group can significantly inhibit the proliferation of the human breast cancer SK-BR-3 cells，induce cell apoptosis and delay the accumulation of the human breast cancer SK-BR-3 cells toward the center of the scratch. Conclusion：Iphigenia indica Kunth drug serum can effectively inhibit human breast cancer SK-BR-3 cell activity，accelerate cell apoptosis and delay cell migration.【Key words】Iphigenia indica Kunth drug serum，human breast cancer SK-BR-3 cells，cell apoptosis，cell migration乳腺癌是常見的女性疾病之一，近年来其发病率呈逐年上升趋势。
复方山慈菇醇提物对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响
复方山慈菇醇提物对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响*梁聪1，李媛媛1，莫凡露1，李丹1，周逸帆1，郭哲2△，何萍1△（1.广西医科大学药学院，南宁530021；2.广西医科大学第三附属医院急诊科，南宁530031）摘要目的：探讨复方山慈菇醇提物对人三阴性乳腺癌（TNBC ）MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响。
方法：将人乳腺癌MDA-MB-231细胞分为溶剂对照组和复方山慈菇醇提物组，0.1%DMSO 或不同浓度的复方山慈菇醇提物作用于MDA-MB-231细胞24h 、48h 后，CCK-8法检测细胞活性；Hoechst33342染色法观察细胞形态学变化；Annexin V-APC/7-AAD 双染色流式分析检测细胞凋亡率；Western blot 检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax 和Caspase-3的表达。
结果：复方山慈菇醇提物可浓度和时间依赖性地抑制MDA-MB-231细胞的增殖（P ＜0.05），24h 、48h 的IC50分别为0.51mg 生药/mL 和0.26mg 生药/mL ；0.25mg 生药/mL 、0.5mg 生药/mL 、1.0mg 生药/mL 复方山慈菇醇提物处理24h 后，Hoechst33342染色显示细胞出现凋亡样变化；流式细胞术检测结果表明，与溶剂对照组比较，复方山慈菇醇提物可浓度依赖性地增加MDA-MB-231细胞凋亡率（P ＜0.05）；Western blot 法显示，与溶剂对照相比，0.5mg 生药/mL 复方山慈菇醇提物组Bax 、Caspase-3蛋白表达升高，Bcl-2蛋白表达下降（均P ＜0.05）。
结论：复方山慈菇可体外抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖，机制可能与其下调Bcl-2及上调Bax 、Caspase-3蛋白表达而诱导凋亡有关。
关键词复方山慈菇醇提物；人乳腺癌MDA-MB-231细胞；细胞增殖；凋亡中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1005-930X （2020）04-0690-05DOI ：10.16190/ki.45-1211/r.2020.04.022*基金项目：国家自然科学基金地区科学基金项目（No.81660681）广西科技基础条件平台建设课题资助项目（广西实验动物资源共享服务平台建设）（No.15-235-06）；2018广西研究生教育创新计划课题资助项目（No.YCSW2018110）△通信作者，郭哲，E-mail:*****************；何萍，E-mail:****************收稿日期：2020-01-20Effects of compound extract of pseudobulbus cremastrae seu pleiones on proliferationand apoptosis of human breast cancer MDA-MB-231cellsLiang Cong 1，Li Yuanyuan 1，Mo Fanlu 1，Li Dan 1，Zhou Yifan 1，Guo Zhe 2，He Ping 1（1.Pharmaceutical College ，Guangxi Medical University ，Nanning 530021，China ；2.Emergency Department ，The Second Nanning People ’s Hospital ，Nanning 530021，China ）Abstract Objective:To explore the effect of compound extract of pseudobulbus cremastrae seu pleiones on proliferation and apoptosis of human triple negative breast cancer （TNBC ）MDA-MB-231cells.Methods:Hu-man breast cancer MDA-MB-231cells were divided into solvent control group and compound extract of pseudo-bulbus cremastrae seu pleiones group.After MDA-MB-231cells were treated with 0.1%DMSO or different concentrations of compound extract of pseudobulbus cremastrae seu pleiones for 24h and 48h ，the cell viabili-ty was detected by CCK-8method ，the cell morphological changes were observed by Hoechst 33342staining ，and the apoptosis rate was detected by Annexin V-APC/7-AAD double staining flow analysis.Western blot was used to detect the expression of apoptosis-related proteins Bcl-2，Bax ，and Caspase-3.Results:The compound extract of pseudobulbus cremastrae seu pleiones could inhibit the proliferation of MDA-MB-231cells in a con-centration-and time-dependent manner （P ＜0.05）.The IC50of 24h and 48h were 0.51mg/mL and 0.26mg/mL.After treated with 0.25mg/mL ，0.5mg/mL ，1.0mg/mL compound extract of pseudobulbus cremastraeseu pleiones for 24h ，Hoechst 33342staining showed MDA-MB-231cells had apoptosis-like chang-es.The results of flow cytometry showed that com-pared with the solvent control group ，the compound extract of pseudobulbus cremastrae seu pleiones could increase the apoptosis rate of MDA-MB-231cells in a concentration-dependent manner （P ＜0.05）.Western blot showed that compared with the solvent 广西医科大学学报JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY2020Apr ；37（4）··690control，the expression of Bax and Caspase-3protein were increased and the expression of Bcl-2protein was de-creased in0.5mg/mL compound extract group of pseudobulbus cremastrae seu pleiones（all P＜0.05）.Con⁃clusion:Compound pseudobulbus cremastrae seu pleiones can inhibit the proliferation of human breast cancer MDA-MB-231cells in vitro，and the mechanism may be related to induce apoptosis by down-regulation of Bcl-2expression and up-regulation of Bax and Caspase-3protein expression.Keywords compound extract of pseudobulbus cremastrae seu pleiones；human breast cancer MDA-MB-231 cell；proliferation；apoptosis乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一［1］，其中约20%的浸润性乳腺癌是缺少雌激素、孕激素及人类表皮生长因子受体的三阴性乳腺癌（TNBC）。
山慈菇多糖化学式
山慈菇多糖化学式山慈菇多糖（Pleurotus ostreatus polysaccharide，POP）是从山慈菇（Pleurotus ostreatus）中提取的一种多糖物质，具有很强的免疫调节作用和抗肿瘤活性。
近年来，山慈菇多糖已成为研究领域的热点之一，引起了广泛的关注。
本文将介绍山慈菇多糖的化学式、生物学功能及其应用前景。
山慈菇多糖的化学式为[C6H10O5]n，它是由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物，其中的单糖包括葡萄糖、甘露糖和木糖等。
山慈菇多糖的分子量较大，通常在10000-100000之间。
二、山慈菇多糖的生物学功能山慈菇多糖具有很强的免疫调节作用和抗肿瘤活性。
研究表明，山慈菇多糖可以促进巨噬细胞和T细胞的活性，增强它们对肿瘤细胞的杀伤作用，从而起到抗肿瘤的作用。
山慈菇多糖还可以提高人体免疫力，增强人体对病原微生物的抵抗能力，有助于预防和治疗感染性疾病。
三、山慈菇多糖的应用前景由于山慈菇多糖具有很强的免疫调节作用和抗肿瘤活性，因此在医药领域有广泛的应用前景。
目前已有许多研究表明，山慈菇多糖可以用于治疗多种类型的肿瘤，如肝癌、胃癌、乳腺癌等。
山慈菇多糖还可以用于治疗炎症性疾病、自身免疫性疾病等。
山慈菇多糖被认为是一种非常有前途的天然药物。
山慈菇多糖是一种具有重要生物学功能的多糖物质，具有很强的免疫调节作用和抗肿瘤活性。
在医药领域有广泛的应用前景。
随着对山慈菇多糖的深入研究，相信它的应用范围会越来越广泛，对人类健康的贡献也会越来越大。
四、山慈菇多糖的研究进展1. 化学结构的研究研究者们通过多个技术手段对山慈菇多糖的化学结构进行了深入研究。
核磁共振（NMR）技术是最常用的手段之一，可对多糖的分子结构、糖链长度和组成等方面进行鉴定。
研究结果表明，山慈菇多糖主要由α-葡萄糖、β-葡萄糖、α-甘露糖和β-木糖等单糖组成，其中α-葡萄糖和β-葡萄糖的比例最高。
还有研究者对山慈菇多糖的分子量进行了测定，结果表明其分子量一般在10万左右。
山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180体内生长抑制作用
Effects of Pseudobulbus cremastrae seu pleiones Polysaccharide on the Regulation of Immune Function and the Inhibition of Tumor Growth in Sarcoma S180 Tumor-Bearing Mice
Lymphocyte proliferation capacity and the phagocytic activity of spleen macrophages were determined by 3-(4,5-dimethyl-
2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide and neutral red methods; the effects of PCSPP on tumor growth,
DOI:10.7506/spkx1002-6630-201813032 中图分类号：R151.3 文献标志码：A 引文格式：
文章编号：1002-6630（2018）13-0216-06
姜爽, 徐婧瑶, 苏鑫, 等. 山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180体内生长抑制作用[J]. 食品科学, 2018,
JIANG Shuang1, XU Jingyao2, SU Xin1, LIU Zhi1, SONG Wu1,*
(1. College of Basic Medical Sciences, Changchun University of Chinese Medicine, Changchun 130117, China; 2. Affiliated Hospital, Changchun University of Chinese Medicine, Changchun 130021, China)
山慈菇水煎剂对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响
352018.01论著·论述山慈菇水煎剂对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响林晓燕 孙晓红 张璐萍滨州医学院 山东省烟台市 264003【摘 要】目的：研究山慈菇水煎剂对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。
方法：山慈菇水煎剂（200，400，600mg/mL）分别作用于胶质瘤U118细胞0h、24h、48h，分别采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell 实验对细胞的增殖、迁移、侵袭能力进行检测。
结果：山慈菇水煎剂（200，400，600mg/mL）作用于胶质瘤U118细胞24小时和48小时均能显著降低细胞的增殖能力（P<0.05），且当山慈菇水煎剂（200，400，600mg/mL）作用于U118细胞48小时，增殖抑制率分别高达20.64%、47.61%、51.23%；划痕实验结果表明，不同浓度山慈菇水煎剂作用24小时及48小时均能明显降低胶质瘤U118细胞的迁移能力（P<0.05），且48小时药物降低细胞迁移的能力高于24小时；体外侵袭实验显示，山慈菇水煎剂（200，400，600mg/mL）培养24h 和48h 均能明显的降低侵袭细胞数目，差异具有统计学意义（P<0.05）；结论：山慈菇水煎剂能够减轻U118胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力，但对于其具体的机制还需要进一步的研究。
【关键词】山慈菇水煎剂；胶质瘤细胞；增殖；侵袭；迁移胶质瘤是一种发病率高、致死率高的恶性脑肿瘤，5年内脑胶质瘤患者的生存率小于10%，该病多发于30岁至40岁的中年人群，其约占中年颅内肿瘤患者的1/3至2/3。
胶质瘤侵袭性高，发病机制复杂，对于该疾病还没有完全根治的治疗方法[1]。
目前，对于脑胶质瘤的治疗，临床上主要采用手术配合术后放化疗为主。
放化疗不仅对肿瘤细胞存在杀伤力，对机体内正常的细胞也有很强的杀伤力[2]，副作用强，加重患者的不良反应，严重影响患者的生存质量及生活质量[3-5]。
山慈菇对甲状腺癌SW579细胞增殖及凋亡的影响
山慈菇对甲状腺癌SW579细胞增殖及凋亡的影响于治凡;刘英华;肖均财;王明伟【摘要】目的探讨山慈菇对甲状腺癌SW579细胞增殖及凋亡的影响.方法采用不同浓度(10、20、40、80、160 mg/ml)的山慈菇提取液作用于甲状腺癌SW579细胞48 h,同时以只加培养液的处理组为对照组,采用噻唑蓝(MTT)法检测SW579细胞的增殖抑制率,计算半数抑制浓度(IC50).收集经10 mg/ml和20 mg/ml山慈菇处理48 h的SW579细胞和只加培养液处理48 h的对照组SW579细胞,采用流式细胞仪检测SW579细胞的凋亡率,采用蛋白质印迹(Western blot)法检测SW579细胞中B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)的表达水平.结果 MTT检测结果显示,山慈菇浓度为0、10、20、40、80、160 mg/ml时,对SW579细胞的增殖抑制作用呈先上升后下降的趋势,山慈菇浓度为20 mg/ml时的增殖抑制率最高,经计算IC50为11.59 mg/ml.流式细胞仪检测结果显示,经10 mg/ml和20 mg/ml山慈菇处理的SW579细胞的凋亡率分别为(25.56±1.62)％和(58.85±2.26)％,均高于对照组的(8.05±1.05)％,差异均有统计学意义(P<0.05).Western blot检测结果显示,经10 mg/ml和20 mg/ml山慈菇处理的SW579细胞中Bcl-2蛋白表达水平均低于对照组.结论山慈菇能够抑制甲状腺癌SW579细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达有关.【期刊名称】《癌症进展》【年(卷),期】2018(016)010【总页数】4页(P1292-1294,1298)【关键词】山慈菇;甲状腺癌;细胞增殖;细胞凋亡【作者】于治凡;刘英华;肖均财;王明伟【作者单位】荣成市中医院外科,山东荣成 264300;荣成市中医院外科,山东荣成264300;荣成市中医院外科,山东荣成 264300;湖北省肿瘤医院病理科,武汉4300790【正文语种】中文【中图分类】R736.1甲状腺癌是一种常见的发生于头颈部的内分泌系统恶性肿瘤，近年来其发病率呈上升趋势，在女性中发病尤为突出，越来越引起人们的关注[1-2]。
中药山慈姑对甲状腺癌细胞的增殖及NIS基因的影响
将不同浓度药物作用48h后的SW579细胞于倒置显微镜下观察其 形态学变化。（2）NIS mRNA水平的检测分别收集山慈菇低浓度 （0.5IC50）组、中浓度（IC50）组、高浓度（2IC50）组以及 阴性对照组作用48h的SW579细胞，用RT-PCR法检测各组细胞NIS mRNA的表达情况。
研究结果：（1）山慈菇提取物在1-100mg/ml范围内对SW579细 胞有不同程度的抗细胞增殖作用，半数抑制浓度（IC50）为 10.38mg/ml。（2）山慈菇提取物浓度为1-30mg/ml范围内时， 对SW579细胞增殖的抑制作用随着浓度的增加而增加，在 30mg/ml时药物的抑制作用达到高峰；在浓度为40-100mg/ml时， 对细胞生长的抑度组、中浓度组以及高浓度组中的表达明 显高于阴性对照组（P=0.000），且随着药物浓度的增加NIS mRNA的表达水平也随着增加（P<0.001）。结论：（1）山慈 菇对甲状腺癌细胞株SW579细胞的增殖具有抑制作用。
（2）山慈菇对甲状腺癌细胞株SW579细胞的增殖表现出低剂量 兴奋效应。（3）NIS基因在甲状腺癌细胞株SW579细胞中低表达。
中药山慈姑对甲状腺癌细胞的增殖及 NIS基因的影响
研究目的：研究中药山慈菇对甲状腺癌细胞增殖的抑制作用， 同时探讨山慈菇对甲状腺癌细胞中NIS基因的影响，为临床应用 提供科学依据。研究方法：（1）细胞增殖抑制实验取对数生长 期的SW579细胞接种于96孔板中，分别加入不同浓度的山慈菇提 取液，作用48h后，利用MTT法于自动酶标仪上测490nm的吸光光 度A值，并求出山慈菇对SW579细胞的IC50。
（4）山慈菇可使甲状腺癌细胞株SW579细胞中NIS基因表达上调。
山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响
山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响郭淳;龚永杰;孙放;王璐;牛晓雨;胡秀华【期刊名称】《中医学报》【年(卷),期】2017(32)10【摘要】目的:探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖、迁移的影响。
方法:利用细胞培养技术对人乳腺癌T-47D细胞进行培养;利用MTT法比较不同浓度山慈菇水煎剂组和对照组对T-47D细胞生长增殖情况的影响;利用细胞划痕实验,检测不同浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞迁移的影响。
结果:不同浓度的山慈菇水煎剂(50 g·L^(-1)、100 g·L^(-1)、200 g·L^(-1),400 g·L^(-1)、600 g·L^(-1)、800 g·L^(-1))对T-47D细胞的生长抑制率分别为-0.60%、-17.10%、-0.60%、65.08%、81.15%、82.80%,400~800 g·L^(-1)质量浓度山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D细胞的增殖有明显抑制作用;划痕实验结果显示200 g·L^(-1)、300g·L^(-1)山慈菇水煎剂作用24h和48h后,与对照组比较,乳腺癌T-47D细胞的划痕距离较大,划痕未见明显愈合,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:一定浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞生长增殖具有抑制作用,低浓度(<200 g·L^(-1))的山慈菇水煎剂对T-47D细胞的生长增殖无影响,即无细胞毒性;高浓度(>200 g·L^(-1))的山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D的增殖有明显的抑制作用;一定浓度的山慈菇水煎剂可以抑制T-47D细胞的迁移运动。
【总页数】4页(P1832-1835)【关键词】乳腺癌;肿瘤;T-47D细胞;山慈菇水煎剂;细胞增殖;细胞迁移【作者】郭淳;龚永杰;孙放;王璐;牛晓雨;胡秀华【作者单位】北京中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R273.79【相关文献】1.山慈菇水煎剂对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响 [J], 牛晓雨;王璐;孙放;龚永杰;郭淳;胡秀华2.制首乌含药血清对人乳腺癌T-47D细胞增殖及ER表达的影响 [J], 朱璨; 王嫣; 李尧锋; 田敏; 唐文超; 杨长福; 王和生3.山慈菇水煎剂对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响 [J], 林晓燕; 孙晓红; 张璐萍4.山慈菇含药血清对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、凋亡以及迁移能力影响的实验研究 [J], 陈思; 邢晓静5.二苯乙烯苷对人乳腺癌T-47D细胞增殖及其雌激素受体表达的影响Δ [J], 朱璨;王嫣;李尧锋;付云燕;唐文超;杨长福;王和生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
山慈姑醇提取液对SGC-7901细胞的抗肿瘤机制
山慈姑醇提取液对SGC-7901细胞的抗肿瘤机制林如辉;李钻芳;曾建伟;林久茂;彭军【期刊名称】《福建中医药大学学报》【年(卷),期】2012(022)005【摘要】目的探讨山慈姑醇提取液对胃癌SGC-7901细胞的抗肿瘤机制。
方法用山慈姑提取液对SGC-7901细胞进行干预,分为空白组、山慈姑提取液0.75、1、1.5 mg/mL组,MTT检测,激光共聚焦显微镜观察山慈姑提取液对胃癌细胞凋亡情况,透射电镜观察4组肿瘤细胞的超微结构变化。
结果 MTT显示1.5 mg/mL组抑制率为62.39±2.56,与0.75 mg/mL及1 mg/mL组比较,P〈0.05,呈剂量依赖性;激光共聚焦显微镜观察胃癌细胞1.5 mg/ml组凋亡细胞荧光强度最强,细胞核呈圆形或椭圆形变;透射电镜观察1.5 mg/mL组最明显,胃癌细胞核异染色质边聚成半月状,线粒体缩小明显,电子密度增加。
结论山慈姑提取液能诱导胃癌细胞的凋亡,具有抗肿瘤作用。
【总页数】3页(P22-24)【作者】林如辉;李钻芳;曾建伟;林久茂;彭军【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.花边莲提取液对人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的影响 [J], 余波;涂硕;刘卓琦;杨晓红;吴剑;余乐涵;万福生2.山慈姑醇提取液对SGC-7901细胞的抗肿瘤机制 [J], 林如辉;李钻芳;曾建伟;林久茂;彭军3.地被菊提取液对人胃癌SGC-7901细胞的影响 [J], 沈延春;黄蓉;庹新兰4.青龙衣提取液对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用的影响 [J], 杨爱华; 邹桂华; 赵英福; 沈广志5.莪术醇诱导鼻咽癌CNE-2细胞凋亡作用及其抗肿瘤机制探讨 [J], 刘健翔;王娟;蒋晓山;陈旭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
山慈菇水煎剂对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响
山慈菇水煎剂对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响牛晓雨;王璐;孙放;龚永杰;郭淳;胡秀华【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2018(040)001【摘要】目的探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、细胞周期、凋亡和迁移的影响.方法运用MTT法观察药物处理对MDA-MB-231细胞生长增殖情况的影响;应用流式细胞术检测山慈菇水煎剂对MDA-MB-231细胞增殖周期的影响;应用荧光显微镜观察山慈菇水煎剂作用前后对MDA-MB-231凋亡情况的影响;划痕实验检测不同质量浓度的山慈菇水煎剂对MDA-MB-231细胞迁移的影响.结果不同质量浓度(100、200、400、800 mg/mL)的山慈菇水煎剂作用MDA-MB-231细胞48 h后,对细胞增殖的抑制率分别为13.34％、22.19％、37.14％、79.76％;流式细胞术结果显示,山慈菇水煎可以使MDA-MB-231细胞的细胞周期各个时相发生改变,G1期细胞百分数下降,G2期细胞百分数明显增加;300 mg/mL和550 mg/mL的山慈菇水煎剂作用48 h后,荧光显微镜下可见MDA-MB-231细胞核染色质凝集,分布在细胞核的外周,为早期细胞凋亡的改变;划痕实验结果显示,300 mg/mL和550 mg/mL山慈菇水煎剂作用24h和48 h,乳腺癌MDA-MB-231细胞的划痕距离未见明显愈合.结论山慈菇水煎剂可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,并可将细胞周期阻滞在G2期,同时可以促进细胞凋亡,并有效抑制其迁移.【总页数】4页(P197-200)【作者】牛晓雨;王璐;孙放;龚永杰;郭淳;胡秀华【作者单位】北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.不同药物麻醉的乳腺癌患者血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响2.山奈酚诱导三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中乳腺癌耐药蛋白的表达并下调抗肿瘤药物对MDA-MB-231细胞的杀伤作用3.山慈菇通过PI3 K/Akt信号通路影响乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和凋亡4.复方山慈菇醇提物对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响5.山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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http : / / journa. l fmmu. edu . cn 黏附后所测 的 A 值为一定 值 , 则 可用 A 值代替 黏附率作 为黏 附指标 [ 3] . 1 . 2 . 4 侵袭实验 将侵袭 小室 (M illicel1) 水 平放入 24 孔 板 中 , 在小室 内膜上滴加 M atrigel 胶 , 50 L /孔 , 静 止放置 5 h ; 在小室外加入 600 L 含 5 mL /L 胎牛 血清的 RPM I1640 培养 液作为趋化剂 . 取处理后的细胞 , 经胰酶 消化后 , 以 2 ∃ 109 /L 密度重悬于含 1 g /L BSA 的 无血 清 RP M I1640 培 养液 中 . 将 100 L 处 理后 的 7721 细胞 悬液 加入 到上 室 中 ( 1 ∃ 105 个 / 孔 ). 将 24 孔板置于 37∀ , 50 mL /L CO2 的培 养箱 中培养 48 h. 取出 M illice ll小室 , 弃去培养 液 , 用棉签擦去微孔膜上 层的 细胞 , 经 950 mL /L 乙醇固 定 10 m in 后 , 取下滤 膜进 行 HE 染 色及中性树胶 封 片 , 在 40 ∃ 光 镜 下计 数 膜 背面 侵 袭的 细 胞 数 , 计数 3 次并求其 平均值 . 统计学处理 : 数据 以 x % s 表示 , 通 过 SPSS 13. 0 统计 软 件进行 t 检验 , P < 0. 01 为差异有统计学意义 . 2 结果 用黏附实验测定对照血清组 以及含药 血清组 处理 的肝癌细胞的黏附率 , 中药山慈菇含药血清培养的肝癌细胞的 黏附率低于正常血清培养的肝癌细胞的黏附率 [ ( 0. 76 % 0. 13) vs ( 0. 94 % 0 . 20), P < 0. 01]. 用侵袭小室测定对照血清组以及 含药血清组处理后的肝癌细胞的侵袭细胞数, 中药山慈菇含药 血清培养的肝癌细胞的侵袭细胞 数低于正常 血清培养 的肝癌 细胞的侵袭细胞数 [ ( 113 % 9) vs ( 98 % 8), P < 0 . 01]. 3 讨论 山慈菇具有清 热解毒、 化 痰散结 之功 效 , 临床上 常 与黄连、 刺五加配伍治 疗胰 腺癌、 食 道癌 等 . 已有 研究 报道 : 黄连解毒汤含药 血清 对人 肝癌 Be1 7402 以 及人 小细 胞肺 癌 NC I H446 瘤株具有抑制作用 [ 4] , 而刺五加含 药血清 对 HT29 , U 937 和 A549 细胞株均有明显的增殖抑制作用 [ 5] . 中药山慈菇所含 化学 成分 复杂 , 纯 化单 体困 难 , 采用 血 清药理学方法能较好地反映其 抗肿瘤的药 效作用 . 实验 结果 显示山慈菇含药 血清 组 SMM C 7721 细 胞的 黏附 率以 及侵 袭 细胞数均显著低于 对照 组 ( P < 0. 01), 表明 山慈 菇含 药血 清 对 SMM C 7721 细胞的黏附 和侵袭 能力 均具 有明 显的 抑制 作 用 . 这种抑制作用可 能来自 原方 剂的一 些固 有成 分 , 但也 不 排除新产生的代谢产物的抗肿 瘤作用 . 日本学者 增川典 古曾 利用 D ia ion 20, LH 20, 硅胶柱层 析技术 分离得 到山 慈菇的 乙 酸乙酯 及 正 丁 醇提 取 物 , 并 通过 快 速 原 子 轰 击 质 谱 ( FA B M S) 、 NOE 等 技 术 进 行 了 药 理 分 析 , 证 实 了 该 提 取 物 是 以 batatasin 及 3& O m ethy lbatatas in 为配 基的 糖 甙 [ 6] . 利用 药 物 提纯技术对生药山慈 菇的药 物成分 进行提 纯 , 并结 合血清 试 验验证其药理活性 , 将有助 于阐明 中药 山慈菇 抗肿 瘤作用 的 有效成分 . 参考文献 !
山慈菇含药血清对 S MMC 7721 细胞侵 袭、 黏附能力的影响
曾 迪 , 李晓祥 , 边永钎 , 刘利兵 , 梁向艳
1 2: 口腔医学系二 队八年制学 员 , 基础 医学教 学实验中心 , 陕西 西安 710033) 关键词 ! 含药血清 ; SMM C 7721; 侵袭 ; 黏附 ; 山慈菇 中图号 ! R 743 文献标识码 ! B 0 引言 山 慈菇 甘、 微 辛、 寒 , 有小 毒 , 入 肝脾 经 , 有 消肿 散 结、 化痰清热解毒之功 [ 1] . 近些年来 , 山 慈菇在临床 上作为抗 癌药而引起 关 注 . 我们 采用 正 常血 清 和含 药 血清 分 别 处理 SMM C 7721肝癌细胞的方法 , 利 用黏附、 侵袭实验检 测中药山 慈菇对 S MM C 7721 细胞体外侵袭、 黏附能力的影 响, 进而从细 胞水平上探索中药山 慈菇 对肝癌 细胞 浸润、 侵袭 能力的 抑制 作用 . 1 材料和方法 1. 1 材料 RP M I1640 培养液购自 G IBCO BRL 公司 . M a tri ge l及侵袭小室 (M illice l1) 购自 BD 公司 . BSA、 结 晶紫及 明胶 均为 S igm a公司产品 . Lambda25UV /v is紫外分光光度 计 ( Per k in E l m er) . 成年大耳白兔 , 雌性 , 体质量 1 . 5~ 2. 0 kg, 由动物 实验中心提供 . 人 SMM C 7721 肝癌细胞来源于上海生化与细 胞生物学研究所细胞库 . 中药山慈菇 ( 购自西京 医院中药 科 ) 捣碎 , 30∀ 水 浸泡 1 h, 先 武 火煎 熬 20 m in, 再 文 火煎 熬 60 m in, 合并 水煎液 , 3000 r /m in 离心 10 m in, 过滤上 清液 , 终浓 度为生药 890 g /L , 4∀ 冰箱保存 . 1. 2 方法 1. 2 . 1 空白血清与 含药血 清的制 备 [ 2] 成 年雌性 大耳 白兔 4 只 , 随机分成对 照组 ( 生理盐水 ) 和给药组 ( 13 g /kg), 每组 2 只 . 给药组 , 每天 灌胃 给药 2 次 , 每次 30 mL, 连续 5 d; 对照 组 , 每天灌服等量 生理盐 水 . 末次给 药前 12 h, 禁食 不禁 水 . 末次给 药 2 h 后 , 心 脏 取 血 , 静 止 12 h, 3000 r/m in 离 心 10 m in, 分离血清 , 0. 22 m 微孔滤膜除菌 , - 20∀ 冰箱保存 . 1. 2 . 2 细胞培养与分组 人 SMM C 7721 肝癌细 胞常规 培养 于含 15 mL /L 小牛血清的 RPM I 1640 培养液 中 , 在 37∀ 、 饱 和湿度、 50 mL /L CO2 孵箱中培养 , 每 2~ 3 d 换液 传代培 养 . 以 1: 4 的比例将得到的含药血清、 空白 血清分别与 RPM I1640 配制成培养 液 , 并 用该 培养液 培养 SMM C 7721 细 胞 48 h, 作 为空白对照组和含药 血清组 . 1. 2 . 3 黏 附 实验 用 M atr ige l 胶 ( M 胶 # 无血清培养液 = 1# 300) 包被 96 孔 培养板 , 50 L /孔 , 4∀ 过 夜 . 加入含 20 g /L BSA 的 PBS 于 室温封闭 30 m in, 再以 PBS 洗 涤 . 取 处理 后的 细 胞 , 经胰酶消化后 , 以 2 ∃ 109 /L 密度重悬于含 1 g /L BSA 的 无血清 RP M I1640 培 养液 中 . 将 细胞 接种 于 M atrigel 包被 的 96 孔培 养板中 , 2 ∃ 104 个细 胞 /孔 , 置 37∀ , 50 mL /L CO2 培 养箱中培养 . 60 m in 后 , 弃去培养液和未 黏附的细 胞 , 每 孔加 入 2 g /L 结晶紫 50 L , 室温 放置 10 m in, 轻 轻洗去除 多余的 染料 , 通风干燥 24 h . 然后加入 100 L 细胞裂 解液室温 放置 20 m in , 用酶标仪于波长 540 nm 测定 A 值 . 黏附率 即为 所测 得的 A 值与 细胞全部黏 附后所测 A 值 的比值 , 由于细 胞全部
[ 1 ] 骆红梅 , 童 红 , 徐 洪 . 山慈菇 质量标准研究 [ J] . 中国 药业 , 2007, 16( 10 ) : 57 . [ 2 ] 杨仙凌 . 中药血清药理学研究方法应用现状及展望 [ J] . 浙江中 医药大学学报 , 2007 , 31( 5 ): 662 - 665 . [ 3 ] 郭 昱 , 郭 霞 , 韩 俊岭 , 等 . 肝 瘾 口服 液含 药 血清 对 人肝 癌 BEL 7402细胞 系生 物 学行 为 的 影响 [ J] . 中 药 药理 与 临 床 , 2007, 23( 5) : 153- 155 . [ 4 ] 孙 健 , 温庆辉 , 李 夏 , 等 . 黄连解毒汤及其含药血清的 化学成 分及抗肿瘤作用对 比研 究 [ J ]. 中国 中药杂 志 , 2006, 31 ( 18 ) : 1526 - 1529 . [ 5 ] 蔡 宇 , 陈 冰 , 余绍蕾 , 等 . 刺 五加提 取物含 药血 清抗肿 瘤作 用的研究 [ J]. 上海中医药杂志 , 2006, 40 ( 1) : 58- 59 . [ 6 ] 增川典古 , 北岛润一 . 生药山慈菇的成分及药理活性研究 [ J] . 国 外医学 中医中药分册 , 2006, 29( 7) : 30 - 32 . 编辑 袁天峰
收稿日期 : 2008 05 13 ; 接受日期 : 2008 10 06 通讯作者 : 刘利兵 . Te: l ( 029) 84774764 Em ai: l l iu lib ing@ 163 . com 作者 简介 : 曾 迪 . 本 科生 . Te: l ( 029 ) 82502364 Em ai: l di lal6891@ 163. com