醌类化合物鉴定试剂和其他类别试剂
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醌类化合物鉴定试剂
(1)Borntrager 试剂
检查羟基蒽醌衍生物。
2%氢氧化钠或2%碳酸钠溶液(或甲醇溶液)。取lml样品的乙醇溶液,加Iml试剂,呈红色为阳性反应。在薄层色谱上喷洒试剂,显橙黄或红色斑点。黄酮类化合物遇碱也能反应生成黄、橙、红色等。
(2)菲格尔(Feigl)试剂
检查醌类衍生物。
溶液I : 25 %碳酸钠溶液。溶液n: 4 %甲醛的苯溶液。溶液川:5%邻二硝基苯的苯溶液,
取1滴样品的苯溶液,加入上述3种试液各1滴,混匀,置水浴上加热I〜4min,呈显著的紫色为阳性反应。
(3 )硼氢化钠一二甲基甲酰胺试剂
检查蒽醌及其衍生物。
20g硼氢化钠溶于100ml二甲基甲酰胺中。作色谱显色剂用。喷洒试剂后,于紫外光灯下观察,显强的黄、绿或蓝色荧光为阳性反应。
(4 )硼酸试剂
检查羟基蒽醌类化合物。
1 %硼酸溶液。作色谱显色剂用,喷洒后,置紫外光灯下观察,呈黄、橙、红色荧光为阳性反应。(5)对亚硝基二甲基苯胺试剂
检查蒽酮类衍生物。
0.1 %对亚硝基二甲基苯胺的吡啶溶液。取1m1样品的乙醇溶液,置水浴上蒸干,残渣用吡
啶溶解,再滴试剂数滴,显紫色或绿色为阳性反应。
(6 )活性次甲基试剂
检查苯醌及萘醌类衍生物。
lg活性次甲基试剂(例如丙二酸酯、乙酰乙酸酯等)溶于30ml氨与乙醇的等体积混合溶液中。取5ml 样品的乙醇溶液,加入3ml试剂,显蓝、紫或红色为阳性反应,萘醌分子中具羟基,可使反应减慢或不起反应。
5.内酯、香豆素类鉴定试剂
(1 )开环—闭环试剂
检查内酯环。
溶液1: 1 %氢氧化钠溶液。溶液n:2%盐酸溶液。取lml样品的乙醇溶液,加2ml溶液I,
置沸水浴上加热3〜4min,溶液比未加热时澄清。再加溶液n酸化(pH2),放置,溶液又变
为混浊。酚性化合物和有机酸有干扰,但可用下法予以区别,取样品乙醇溶液数毫升,置水浴上蒸干溶剂,用乙酸乙酯溶解后置分液漏斗内,用5%氢氧化钠溶液萃取酚性及有机酸成
分,乙酸乙酯溶液用水洗至中性后按上法检测。□
(2 )异羟肟酸铁试剂
检查内酯环。
溶液1: 7%盐酸羟胺甲醇溶液(新鲜配制)。溶液n:10%氢氧化钾甲醇溶液。溶液川: 1 % 三氯化铁甲醇溶液。取1m1样品的甲醇溶液,加入溶液I、n各5滴,置沸水浴上加热3min〜
4min,冷却后,用稀盐酸调至pH3〜4,再加入溶液川1滴〜2滴,显橙红或紫红色为阳性反应。作色谱显色用,将溶液I ,n等量混合,喷洒后空气中干燥10min,再喷溶于1 %盐
酸中的三氯化铁溶液,显橙红或紫红色斑点。
光下观察,多数羟基香豆素有强的荧光。
(3)稀氢氧化钠溶液将检样点于滤纸片或薄层上,试样边缘点上碱液,晾干,置紫外灯
配合酚类鉴定试剂的检查,以确定游离酚羟基的存在及取代位置。
6,强心甙鉴定试剂
(1)碱性3,5—二硝基苯甲酸(Kedde)试剂
检查强心甙的、一不饱和内酯环。
2% 3 , 5 —二硝基苯甲酸甲醇溶液与5%氢氧化钾溶液,用前按1 : I混合。取1m1样品的
甲醇溶液,加入3〜4滴试剂,显紫红色为阳性反应,几分钟后褪色。也适用于薄层色谱。
(2)碱性苦味酸(Baljet)试剂
检查强心甙的、一不饱和内酯环。
9ml 1 %苦味酸乙醇溶液与1ml I0 %氢氧化钠溶液用前配制混合。用1m1样品的乙醇溶液,
加入1滴试剂,放置15min左右,显橙红色或红色为阳性反应。
(3)碱性亚硝酰铁氰化钠(Legal)试剂」
检查不饱和内酯、甲基酮或活性亚甲基(常用于强心甙)。
溶液1: 0.5 %亚硝酰铁氰化钠乙醇溶液。溶液H:10 %氢氧化钠溶液。取1 m1样品的甲醇
溶液,置水浴上蒸干,冷却后加Iml吡啶溶解残渣,加入4〜5滴溶液I和1〜2滴溶液H,
溶液显红色并逐渐消失为阳性反应。用于薄层色谱检查,将1g亚硝酰铁氰化钠溶于10 %氢
氧化钠一乙醇(1 : 1 )的溶液中,喷洒后,显红色或紫色斑点。
检查甾体、甾体皂苷、三萜类及强心苷。取0.1〜0.2mg样品,置于白瓷反应板上,加入0.3ml醋酐,使样品溶解,沿边缘滴入硫酸, 出现红-紫-蓝-绿色,最后褪色为甾体皂甙,三萜皂甙只能呈黄-红-紫等。(6 )三氯醋酸一氯胺T试剂
检查洋地黄毒甙元衍生物和2, 6-去氧糖苷。
25 %三氯醋酸乙醇(氯仿)溶液4ml与3 %氯胺T溶液1ml混匀。喷洒后,100 C加热数分钟,于紫外光灯下观察。洋地黄毒甙元的苷类显黄色荧光,羟基洋地黄毒苷元的甙类显亮蓝
色荧光,异羟基洋地黄毒苷元的苷类呈灰蓝色荧光。洋地黄毒糖的苷( 2 , 6-去氧糖苷)
在可见光下呈暗蓝色。
强心苷的鉴定应由苷元(甾体母核和不饱和五元内酯)和2—去氧糖两部分共同证实。
7、甾体、三萜及其苷的鉴定试剂
(1)三氯化锑试剂
检查甾体、萜类、皂苷。
25g三氯化锑溶于75ml氯仿中。喷后100 C加热5min ,不同的皂苷元在可见光或紫外光灯下显不同颜色。
(2)三氯醋酸试剂
检查皂甙。
3.3g三氯醋酸溶于10ml氯仿,再加入1〜2滴30%过氧化氢溶液。将样品的氯仿溶液滴在滤纸上,加试剂I滴,加热至60C,生成红色—紫色为甾体皂甙;加热到100 C始见显色为
三萜皂甙o
(3)硫酸:甲醇(1 : 1)试剂喷后加热,不同皂苷元可显红褐色、紫色、黄色或黑色。所显颜色与温度无关。
(4)氯磺酸:乙酸(1 : 1)试剂喷后130 C加热5min,各种皂苷元可显天蓝色、紫色、粉红色、淡棕色等,在紫外光灯下也显不同的荧光。
(5)香草醛-硫酸试剂
检查高级醇类、酚类、甾体、萜类、芳香油。
1g香草醛溶于100ml硫酸中,或0.5g香草醛溶于100ml硫酸—乙醇(4 : 1)中。喷洒后,室温、120 C加热观察,显示红、蓝、紫等各种颜色斑点。
&氰苷鉴定试剂
(1)苦味酸试纸取适当大小的滤纸,浸入苦味酸饱和溶液中,浸透后取出,晾干。再浸
入10 %碳酸钠溶液内,迅速取出,晾干即得。取样品粉末0.5g置试管中,加水混合均匀,
加入稀硫酸数滴。在试管口夹放一条苦味酸试纸(试纸不能接触到药液) ,塞紧。将试管在
沸水浴中加热数分钟,试纸变成红色,表明含氰苷。
(2)普鲁士蓝试验
溶液1: 10 %硫酸亚铁溶液(用前配制)。溶液H:5 %三氯化铁溶液。取样品粉末0.5g置试管中,加水湿润,立即用经10 %氢氧化钾溶液湿润的滤纸将试管口包紧,于热水浴上加
热10min后,在滤纸上加溶液I、稀盐酸和溶液n各1滴,滤纸显蓝色为阳性。