实验六__乳粉中还原糖含量的测定
实验六植物组织中总糖和还原糖含量的测定DNS法20111017
10mL6MHCl
冷却,用 I2-KI检测 沸水浴0.5h NaOH中和, 加水定容 到100mL
4.3、用3,5-二硝基水杨酸法测还原糖、 总糖含量
管号 样液/mL 水 DNS试剂/mL 空白对照 0 1.0 2.0 还原糖 样液管 1.0 0 2.0 总糖样液管 1.0 0 2.0
沸水浴中准确煮沸5min，取出，用自来水冷却至室温 蒸馏水/mL 9.0 9.0 9.0
浓度（mg/ml）
1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 -0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
A540
葡萄糖标准曲线（DNS法）
4、操作步骤
4.1、制定标准曲线
管号 0 1 2 3 4 5
标准葡萄糖溶液/mL
蒸馏水/mL DNS试剂/mL
0
1.0 2.0
0.2
0.8 2.0
0.4
0.6 2.0
0.6
0.4 2.0
0.8
0.2 2.0
1.0
0 2.0
沸水浴中准确煮沸5min，取出，用自来水冷却至室温 蒸馏水/mL 葡萄糖浓度/mg/mL A540 9.0 0 9.0 0.2 9.0 0.4 9.0 0.6 9.0 0.8 9.0 1.0
还原糖含量测定
冷却
立即用流动冷水冷却至室温
蒸馏水(ml)
21.5 21.5 21.5 21.5 21.5 21.5 21.5
吸光值(A540)
将以上各管上下颠倒几次使溶液混匀后， 按顺序倒入比色杯中，在540nm波长条件 下进行比色测定：用0号管溶液调零点，分 别记录各管吸光值；然后以葡萄糖浓度为 横坐标，吸光值为纵坐标，绘制出标准曲线。
2、测定样品中还原糖和总糖含量。
（1）提取样品中的还原糖：
准确称取1g食用面粉放置于100ml三角瓶 中，加少量蒸馏水调成糊状，再加入50ml 蒸馏水，摇匀，置于50℃水浴条件下20分 钟，使还原糖浸出；在4000rpm、5分钟条 件下进行离心，得到的上清液倒入100ml容 量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，上下颠倒 几次将溶液混匀，作为还原糖待测液。
待水解液冷却至室温后加入1滴酚酞指示 剂，用6mol/L NaOH中和至微红色，在 4000rpm、5分钟条件下离心，得到的上 清液转移到100ml容量瓶中，用蒸馏水定 容至刻度，上下颠倒几次混匀溶液，作为 总糖待测液。
（3）显色和比色，按下表操作
管号 样品量（ml） 蒸馏水（ml） DNS试剂(ml) 加热
在碱性条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨 酸试剂（DNS）共热，3,5-二硝基水杨酸被 还 原 为 3- 氨 基 -5- 硝 基 水 杨 酸 （ 棕 红 色 物 质），还原糖则被氧化成糖酸及其他产物。 在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质 颜色深浅的程度成一定的比例关系，在 540nm 波 长 下 测 定 棕 红 色 物 质 的 吸 光 值 ， 查对标准曲线并计算，就可以分别求出样 品中还原糖和总糖的含量。
（2）提取样品中的总糖：
准确称取0.1g食用面粉放置于100ml三角 瓶中，加入10ml 6mol/L HCl及15ml蒸馏 水，沸水浴30分钟（注意不能把水烧干）。 用滴管吸取1~2滴水解液于白瓷板上，加1 滴I-KI溶液，如显示出蓝色说明水解不完全， 可适当延长沸水浴时间；若不显蓝色，则 说明水解完全。
还原糖的测定实验报告
1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。
2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。
3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类，它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子，生成砖红色的Cu₂O沉淀。
斐林试剂由斐林A液（含CuSO₄的碱性溶液）和斐林B液（含NaOH的碱性溶液）组成，两种试剂混合后，Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。
三、实验材料与试剂1. 试剂：- 斐林A液：称取硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）0.1g，溶于100mL水中，加入5mL浓NaOH溶液。
- 斐林B液：称取NaOH 2g，溶于100mL水中。
- 标准葡萄糖溶液：准确称取葡萄糖1.0000g，溶于1000mL水中，配制成1mg/mL的标准溶液。
- 样品溶液：取一定量的待测样品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
2. 仪器：- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液：准确移取1mL标准葡萄糖溶液，加入9mL蒸馏水，配制成0.1mg/mL的标准溶液。
2. 配制斐林试剂：将斐林A液和斐林B液等体积混合，立即使用。
3. 取一支试管，加入2mL样品溶液。
4. 加入2mL斐林试剂，混合均匀。
5. 将试管放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
6. 取出试管，观察沉淀颜色。
7. 重复步骤3-6，制作标准曲线。
8. 根据标准曲线，计算样品溶液中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标，沉淀颜色深浅为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品溶液中还原糖含量的计算：根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅，在标准曲线上找到对应的还原糖含量。
六、实验讨论1. 实验过程中，斐林试剂需现配现用，以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子，影响实验结果。
2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内，以免沉淀颜色过深，影响准确度。
还原糖浓度测定实验报告
一、实验目的1. 掌握还原糖的测定原理和方法。
2. 学习使用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖浓度。
3. 培养实验操作能力和数据分析能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类，如葡萄糖、果糖、半乳糖等。
在碱性条件下，还原糖可以将3,5-二硝基水杨酸还原成棕红色的化合物，该化合物在540nm波长处有最大吸收。
在一定浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系。
因此，通过测定样品在540nm波长处的光吸收值，可以计算出还原糖的浓度。
三、实验材料1. 试剂：3,5-二硝基水杨酸、氢氧化钠、苯酚、亚硫酸钠、酒石酸钾钠、葡萄糖、蒸馏水。
2. 仪器：可见分光光度计、电子天平、真空干燥箱、数显恒温水浴锅、离心机、移液器、枪头、500mL容量瓶、试管、500ml烧杯、1000ml烧杯。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）配制葡萄糖标准溶液：准确称取0.1g葡萄糖，溶解于100mL蒸馏水中，配制成1mg/mL的葡萄糖标准溶液。
（2）取6个试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL的葡萄糖标准溶液。
（3）向每个试管中加入1.0mL 3,5-二硝基水杨酸溶液，摇匀。
（4）将试管置于水浴锅中，加热煮沸5分钟。
（5）取出试管，冷却至室温。
（6）使用可见分光光度计，在540nm波长处测定吸光度。
（7）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品还原糖浓度的测定（1）准确称取一定量的样品，溶解于蒸馏水中。
（2）取6个试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL的样品溶液。
（3）按照标准曲线绘制步骤，测定吸光度。
（4）根据标准曲线，计算出样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制根据实验数据，绘制标准曲线如图1所示。
图1 葡萄糖标准曲线2. 样品还原糖浓度的测定根据标准曲线，计算出样品中还原糖的浓度为X mg/mL。
六、讨论1. 实验过程中，样品的称量、溶液的配制、吸光度的测定等步骤要准确无误，以保证实验结果的准确性。
直接滴定法测定食品中还原糖的含量-精品文档资料
直接滴定法测定食品中还原糖的含量、还原性糖综述还原糖是指具有还原性的糖类。
在糖类中，分子中含有游离醛基和酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。
还原糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。
非还原糖有蔗糖、淀粉、纤维素等，但它们都可以通过水解生成相应的还原性单糖。
所以糖类的测定是以还原糖的测定为基础的。
二、直接滴定法测定还原糖的试验方法一）实验原理将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。
根据样液消耗量可计算还原糖含量。
当称样量为5g 时，该法的检出限为0.25g/100g二）实验材料、仪器与试剂实验材料：苹果仪器：分析天平、研钵、电炉、铁架台、锥形瓶、烧杯、玻试剂：1）碱性酒石酸铜甲液：称取15g 硫酸铜（CuSO4?5H2）O及0.05g 次甲基蓝，溶于水中并稀释至l000mL。
2）碱性酒石酸铜乙液：称取50g 酒石酸钾钠及75g 氢氧化钠，溶于水中，再加入4g 亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至lOOOmL贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
（3）乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL乙酸，加水溶解并稀释至l00mL。
4）10.6%亚铁氰化钾溶液：称取l0.6g 亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至l00mL。
5）葡萄糖标准溶液：准确称取l.0000g 经过96±2C干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至lOOOmL。
此溶液每毫升相当于 1.0mg 葡萄糖。
三）实验步骤1 ）样品处理：称取约 5.00g 试样，置于250mL容量瓶中，加50mL水，混匀，慢慢加入 5 mL乙酸锌溶液及5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀，静置30mi n,用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取续滤液备用。
DNS比色法测定还原糖和总糖
乳粉中还原糖的测定(3,5-二硝基水杨酸比色法)一、实验目的1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理2、学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用二、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类。
单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，例如乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
利用各种糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来。
对非还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成还原性单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(常以葡萄糖含量计)。
还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物，而氧化剂3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。
由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以系数0.9。
三、实验材料和试剂1、实验材料乳粉2、实验试剂①1mg/ml葡萄糖标准液准确称取95℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至100ml，混匀，4℃冰箱中保存备用。
②3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂将6.3g DNS和262ml 2M NaOH溶液，加到500ml含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000ml，贮于棕色瓶中备用。
③乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。
④亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL。
四、实验器材比色管：25ml×9 烧杯：100ml×1容量瓶：100ml×3 刻度吸管：1ml×1；5ml×2；10ml×1恒温水浴锅天平分光光度计五、操作步骤1、制作葡萄糖标准曲线取7支比色管编号，按表1分别加入浓度为1mg/ml的葡萄糖标准液、蒸馏水和DNS试剂，配成不同浓度的葡萄糖反应液。
食品中还原糖的测定实验报告
食品中还原糖的测定实验报告实验目的，通过实验测定食品中还原糖的含量，了解食品的营养成分，为食品质量的评价提供依据。
实验原理，还原糖是指具有还原性的糖类物质，如葡萄糖、果糖等。
在酸性条件下，还原糖能够与费林试剂发生还原反应，生成红色沉淀。
通过比色计测定沉淀的光吸收值，可以计算出还原糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备，取不同种类的食品样品，如水果、果酱、饼干等，分别制备成样品提取液。
2. 提取还原糖，将样品加入酸性乙醇中，进行提取，得到含有还原糖的提取液。
3. 进行费林试剂反应，取一定量的提取液，加入费林试剂，混合均匀后，在水浴中加热，观察是否生成红色沉淀。
4. 测定光吸收值，将反应后的样品溶液置于比色皿中，使用比色计测定其光吸收值。
5. 计算含量，根据测定的光吸收值，利用标准曲线计算出还原糖的含量。
实验结果：通过实验测定，不同食品样品中还原糖的含量差异较大。
水果中的还原糖含量较高，果酱次之，而饼干等加工食品中的含量较低。
这与食品的制作工艺、原料成分等有关。
实验结论：通过本次实验，我们成功测定了食品样品中还原糖的含量，并且得出了不同食品样品中还原糖含量的差异。
这对于我们了解食品的营养成分，评价食品质量具有一定的指导意义。
同时，也为我们提供了一种简单、快速、准确的测定方法，为食品质量监测和评价提供了技术支持。
实验注意事项：1. 实验中需注意操作规范，避免溶液外溅，保持实验台面整洁。
2. 在进行测定时，需保持仪器的准确性，避免外界干扰。
3. 对于不同食品样品的提取液制备，需注意样品的选择和制备方法，保证提取液的准确性。
4. 实验中需严格按照操作步骤进行，确保实验结果的准确性和可靠性。
总结：本次实验通过测定食品样品中还原糖的含量，为我们了解食品的营养成分提供了重要依据。
同时，实验方法简单、快速、准确，具有一定的实用性和推广价值。
希望本实验能够对大家有所启发，为食品质量监测和评价提供技术支持。
实验 食品中还原糖含量的测定
实验食品中还原糖含量的测定一、实验目的1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点；2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
二、实验原理试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。
以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色，表示终点到达。
根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。
反应方程式如下：CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4COONa COONa ︱∣CHOH CHO╲∣ +Cu(OH)2= ∣ Cu +2H2OCHOH CHO╱∣ ∣COOK COOKCOONa COONa∣ CHO ∣ CHOH CHO╲∣ CHOH ∣2∣ Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 ∣ + (CHOH)4+Cu2O↓CHO╱∣ CHOH ∣∣ CH2HO ∣ CH2OHCOOK COOK亚甲蓝氧化型+还原糖——→亚甲蓝还原型(蓝色) （无色）三、实验试剂1、盐酸(1+1)：量取50mL盐酸，加水稀释至100mL。
2、碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜 ( CuSO4•5H2O) 及0.05g次甲基蓝，溶入水中并稀释至1000mL。
3、碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
4、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。
5、亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL。
6、葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1000mL。
此溶液每mL相当于1.0mg葡萄糖。
四、实验仪器1、分析天平；2、可调电炉；3、50mL小烧杯；4、250mL容量瓶；5、100mL量筒，1个/2组；6、250mL锥形瓶3只；7、25mL酸式滴定管1支/组； 8、5mL移液管4支/2组；9、10mL移液管1支/2组； 10、干燥滤纸3张，漏斗1个/组；11、小玻璃棒1根/组； 12、玻璃珠：9颗/组；五、操作步骤（一）试样处理称取约2.50g~5.00g试样，置于250mL容量瓶中，加50mL水，摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌溶液，混匀放置片刻，加入5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀、静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
实验报告还原糖测定(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液，在加热条件下，Cu2+被还原成Cu2O，形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂：斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器：试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂：将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合，现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液：准确称取1.0g葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容至100ml，配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理：准确称取待测样品0.1g，用蒸馏水溶解并定容至10ml，配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤：a. 取一支试管，加入1ml斐林试剂；b. 取另一支试管，加入1ml样品溶液；c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态2分钟；d. 观察颜色变化，记录结果。
5. 结果处理：a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照；b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果：样品溶液加入斐林试剂后，加热至沸腾，观察到样品溶液变为浅蓝色，随后逐渐变为棕色，最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析：根据实验结果，样品溶液中加入斐林试剂后，发生了还原反应，生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖，且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中，样品溶液加热至沸腾时，需保持沸腾状态2分钟，以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中，样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀，说明还原糖在加热条件下，与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
技能项目七乳粉中乳糖含量的测定(学生用)
技能项目七乳粉中乳糖含量的测定一、目的与要求1. 掌握乳粉中乳糖的测定的操作技能。
2. 巩固控制反应条件，掌握提高还原糖测定精密度的方法。
3. 进一步巩固还原糖测定的操作要点及氧化还原滴定操作。
二、测定原理（一）乳粉中乳糖含量的测定原理——直接滴定法（斐林氏法）测还原糖的含量。
试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，直接滴定已经标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液)，还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。
以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色，表示终点到达。
根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。
（计量方法和测定条件同项目六）（二）样品预处理——糖类的提取和澄清1. 水作提取剂2.澄清剂——醋酸锌溶液和亚铁氰化钾三、仪器与试剂仪器：碱式滴定管；可调式电炉(带石棉板)，移液管、吸量管、锥形瓶等容量器皿。
试剂：碱性酒石酸铜甲液、碱性酒石酸铜乙液、盐酸、1.0mg/mL乳糖标准溶液; 106g／L亚铁氰化钾溶液、219g/L乙酸锌溶液;乳粉。
四、测定步骤（一)样品处理精密称取0.7～0.8g乳粉样品，置于250mL容量瓶中，加50mL水，摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌及5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，静置0.5h。
用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，收集滤液供测定用。
(二)标定碱性酒石酸铜溶液吸取5.OOmL及5.OOmL碱性酒石酸铜乙液，置于250mL锥形瓶中，加入玻璃珠3粒，从滴定管加约15mL标准乳糖液，使其在2min内加热至沸。
趁沸以每2sl滴的速度继续滴加糖液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。
记录消耗乳糖液液的体积，平行操作3份，取其平均值。
（三)样液预测吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00mL，置于250mL锥形瓶中，加玻璃珠3粒，使其在2min内加热至沸。
趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品液，须始终保持溶液的沸腾状态，待溶液蓝色变浅时，以每2sl滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。
WB03食品(炼乳)中还原糖含量的测定(精)教学文稿
W B03食品(炼乳)中还原糖含量的测定(精)实验八食品(炼乳)中还原糖含量的测定一、实验目的1、了解食品中还原糖的含量；2、学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其定糖方法。
3、通过对实验结果的分析，了解影响测定准确性的因素。
二、原理，食品中的还原糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖、麦芽糖等，还原糖之所以具有还原性，是由于其分子中含有游离醛基(-CHO)或酮基(>C=O)。
测定还原糖的经典化学方法都是以其能被多种试剂氧化为基础的。
在这些方法中，以各种根据碱性酒石酸铜溶液氧化作用改进方法的应用最广。
本实验就是采用使用碱性酒石酸铜作为氧化剂的直接滴定法。
碱性酒石酸铜溶液A、B二液等体积混合时生成的天蓝色Cu(OH)2沉淀后，立即与酒石酸钾钠起反应生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。
此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原糖还原为一价的红色氧化亚铜沉淀，氧化亚铜沉淀与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈淡黄色而指示滴定终点，根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量。
反应式如下：三、仪器与试剂1、仪器(1)容量瓶 100 ml、250 ml(2)三角瓶 250 ml(3)碱式滴定管 50 ml或25 ml(4)烧杯 100m1 (5)吸管 5 ml、50 ml(6)分析天平(7)电炉 1KW可调(8)恒温水浴锅2、试剂(1) 碱性酒石酸铜溶液A液：称取15.00 g硫酸铜(CuSO4·5H2O)(AR)及0.05g次甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释至1000 ml。
(2) 碱性酒石酸铜溶液B液：称取50g酒石酸绅钠(AR)和75g NaOH (AR)，溶于蒸馏水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后用蒸馏水稀释至1000 ml，贮存于具橡胶塞玻璃瓶中。
(3)乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml 冰醋酸，加水溶解并稀释至100ml。
《食品分析综合实训》教学大纲
《食品分析综合实训》教学大纲一、实验课程基本信息课程名称：食品分析综合实训英文名称：Experiments of Food Chemistry课程类别：集中实践课程总学时：2周总学分：1学分适用专业：食品科学与工程、食品质量与安全二、实验课程的性质、目标与任务食品分析是一门实践性很强的学科。
食品分析综合实训是以食品分析为基础，对食品检测项目设计分析方案的一门技术性学科。
通过该课程的学习，加强学生的动手能力，巩固和加深学生在课堂教学中学到的基础理论知识，培养学生严谨的科学作风和分析问题、解决问题的能力。
通过实验教学，使学生加深对食品分析基础理论知识的理解，加强学生实际操作动手能力；熟练掌握食品分析的基本原理和操作技术。
对于食品检测项目能设计出实验方案，加强对学生综合分析能力的培养；掌握实验基本操作技能和实验结果的处理方法；掌握仪器设备的正确使用方法；掌握食品分析的数据处理以及分析报告的撰写。
三、实验课程教学基本要求分组进行实验，完成食品分析检测过程、设备操作与数据记录。
实验前，学生要认真预习，明确实验目的和要求，了解实验的内容，了解实验所用的仪器和设备，熟悉使用方法和操作过程，认真记录所测定的数据。
四、实验教学内容及要求实验一实验室常用仪器设备的介绍【实验类型】演示性【目的与要求】通过本次实验同学了解常见食品分析仪器的使用，为后面设计实验打下基础。
【内容提要】烘箱、电炉、马弗炉、索氏提取装置、凯氏定氮装置、分光光度计等仪器设备的介绍。
【所需主要仪器设备】实验二饮料中苯甲酸及其盐类含量的测定【实验类型】验证性【目的与要求】（1）通过本实验领会测定食品中苯甲酸及其盐类的原理及操作要点。
（2）掌握苯甲酸及其盐类的测定方法。
（3）通过本实验了解国家标准对食品中苯甲酸及其盐类的添加量的要求。
【内容提要】在弱酸溶液中，用乙醚将食品样液中的苯甲酸提出，待乙醚挥发后，加中性酒精或醚醇混合液，以酚酞作指示剂，用0.1mol/L NaOH标准溶液滴定，根据消耗标准碱液的体积，计算苯甲酸或苯甲酸钠的含量。
糖含量测定实验报告
一、实验目的1. 掌握DNS比色法测定还原糖含量的原理和方法。
2. 了解总糖含量的测定方法及其与还原糖含量的关系。
3. 学习实验室基本操作技能，提高实验数据分析能力。
二、实验原理1. 还原糖的测定原理：DNS比色法是测定还原糖含量的常用方法。
在碱性条件下，还原糖（如葡萄糖、果糖等）与3,5-二硝基水杨酸（DNS）发生反应，生成棕红色化合物。
该化合物的颜色深浅与还原糖的浓度呈线性关系，通过比色法测定吸光度，即可计算出还原糖的含量。
2. 总糖的测定原理：总糖含量是指食品中所有可溶性糖的总和，包括单糖、双糖、多糖等。
常用的测定方法有重量法、滴定法等。
本实验采用重量法测定总糖含量，即通过将样品中的糖类物质转化为单糖，然后测定单糖的重量，从而推算出总糖含量。
三、实验材料1. 样品：水果汁、蔬菜汁、糖水等。
2. 试剂：3,5-二硝基水杨酸（DNS）、氢氧化钠、苯酚、亚硫酸钠、酒石酸钾钠、葡萄糖、蒸馏水等。
3. 仪器：可见分光光度计、电子天平、真空干燥箱、数显恒温水浴锅、离心机、移液器、枪头、容量瓶、试管、烧杯等。
四、实验步骤1. 还原糖的测定1. 准备DNS试剂：称取DNS 0.5g，加入100ml蒸馏水溶解，加入氢氧化钠溶液调至pH值为3.5，再加入苯酚溶液调至黄色。
2. 样品处理：将样品用蒸馏水稀释至一定浓度，离心去除杂质。
3. DNS反应：取一定量的样品溶液，加入DNS试剂，混匀，放入水浴锅中加热5分钟。
4. 冷却、显色：取出反应后的溶液，加入亚硫酸钠溶液终止反应，再加入酒石酸钾钠溶液显色。
5. 比色：用可见分光光度计在540nm波长处测定吸光度，根据标准曲线计算还原糖含量。
2. 总糖的测定1. 样品处理：将样品用蒸馏水稀释至一定浓度，离心去除杂质。
2. 糖转化：将样品溶液加入葡萄糖溶液，在加热条件下将多糖转化为单糖。
3. 冷却、显色：取出反应后的溶液，加入酒石酸钾钠溶液显色。
4. 重量法测定：将显色后的溶液蒸发至干燥，称量干燥物的重量，根据标准曲线计算总糖含量。
还原糖的测定方法
还原糖的测定方法还原糖是一种重要的碳水化合物，在食品工业以及生物化学领域具有广泛的应用。
测定还原糖的含量对于食品质量的控制以及生物化学实验的进行具有重要意义。
本文将介绍几种常用的还原糖测定方法，希望能够为相关领域的研究工作提供一些参考。
一、费林法测定法。
费林法是一种经典的还原糖测定方法，其原理是将还原糖与铜离子在碱性条件下发生氧化还原反应，生成红色沉淀。
通过测定沉淀的重量或者颜色深浅来确定还原糖的含量。
这种方法操作简单，结果准确，被广泛应用于食品工业中。
二、硫氰化铁法测定法。
硫氰化铁法是一种比较快速的还原糖测定方法，其原理是将还原糖与硫氰化铁在酸性条件下反应生成蓝色络合物，通过测定络合物的吸光度来确定还原糖的含量。
这种方法具有操作简便、结果快速的特点，适用于实验室中大批量样品的测定。
三、酶法测定法。
酶法是一种高灵敏度、高特异性的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖酶将还原糖催化转化成葡萄糖，再利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化生成过氧化物，通过测定过氧化物的吸光度来确定还原糖的含量。
这种方法适用于对还原糖含量要求较高的实验，如生物化学实验和医学检测。
四、色谱法测定法。
色谱法是一种高分辨率、高灵敏度的还原糖测定方法，其原理是利用色谱柱将混合物中的还原糖分离出来，再通过检测器检测还原糖的峰值面积或者浓度来确定其含量。
这种方法操作复杂，但具有高分辨率、高灵敏度的特点，适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。
五、红外光谱法测定法。
红外光谱法是一种非破坏性的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖分子的振动和转动引起的红外吸收来确定其含量。
这种方法操作简单，无需样品的处理，适用于对还原糖含量要求不是很严格的实验。
六、电化学法测定法。
电化学法是一种高灵敏度、高精度的还原糖测定方法，其原理是利用还原糖在电极上的氧化还原反应来确定其含量。
这种方法操作简单，结果准确，适用于对还原糖含量要求非常严格的实验。
总结。
以上介绍了几种常用的还原糖测定方法，每种方法都有其特点和适用范围。
乳粉中乳糖、蔗糖及总糖含量的测定
乳粉中乳糖、蔗糖及总糖含量的测定（GB5413.5—2010第二法莱因一埃农氏法）班级：组别：姓名：一、原理乳糖：试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝为指示剂，直接滴定已标定过的费林氏液，根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。
蔗糖：试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解为还原糖，再按还原糖测定。
水解前后的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。
二、试剂与配制1、乙酸铅。
2、草酸钾。
3、磷酸氢二钠。
4、盐酸。
5、硫酸铜。
6、浓硫酸。
7、酒石酸钾钠。
8、氢氧化钠。
9、酚酞。
10、乙醇。
11、次甲基蓝。
12、乙酸铅溶液（200g/L）:称取200g乙酸铅，溶于水并稀释至1000mL。
13、草酸钾一磷酸氢二钠溶液：称取草酸钾30g，磷酸氢二钠70g，溶于水并稀释至1000mL。
14、盐酸（1+1）：1体积盐酸与1体积的水混合。
15、氢氧化钠溶液（300g/L）：称取300g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000mL。
16、费林氏液（甲液和乙液）16.1、甲液：称取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5mL浓硫酸，加水至500mL。
16.2、乙液:称取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500mL, 静置两天后过滤。
16.3、费林氏液的标定16.3.1、用乳糖标定16.3.1.1、称取预先在94℃±2℃烘箱中干燥2h的乳糖标样约0.75g （精确到0.1mg），用水溶解并定容至250mL。
将此乳糖溶液注入一个50mL 滴定管中，待滴定。
16.3.1.2、预滴定：吸取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中。
加入20mL蒸馏水，放入几粒玻璃珠，从滴定管中放出15mL 样液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，保持沸腾状态15$，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止，读取所用样液的体积。
16.3.1.3、精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，放入几粒玻璃珠，加入比预滴定量少0.5mL〜1.0mL的样液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，维持沸腾状态2min,加入3滴次甲基蓝溶液，以每两秒一滴的速度徐徐滴入，溶液蓝色完全褪尽即为终点，记录消耗的体积。
乳粉中还原糖含量的测定直接滴定法
实验六乳粉中还原糖含量的测定—直接滴定法（GB/T5009.7—2003第一法）教学目的要求：基本知识点1、掌握直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。
2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
重点：1、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术2、直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。
难点：直接滴定测定还原糖的原理和控制要点课时教学方案：复习与提问：1、检查实验准备情况，（1）实验内容；（2）实验仪器与试剂有哪些？（3）直接滴定测定还原糖的步骤。
2、直接滴定测定还原糖的注意事项和控制要点【引入新课】乳糖是半乳糖经β-1，4糖苷键与葡萄糖结合的还原性二糖，称为4-O-β- d 吡喃半乳糖-d-吡喃葡萄糖，还原基在葡萄糖单位上。
乳糖有两种异构体，即α-乳糖和β-乳糖。
乳糖是唯一没有在植物中发现的糖，因首次在牛乳中发现，故称为乳糖。
乳糖是哺乳动物乳汁的主要成分，如人乳中约含6%～7%，牛乳中约含5%。
乳糖是婴儿主要食用的糖类物质。
初生婴儿仅能消化乳糖、蔗糖、葡萄糖、果糖，对淀粉不易消化，故米、面淀粉食物应在3～4个月后才开始添加。
乳糖对婴儿的重要意义还在于它能够保持肠道中最合适的肠菌种数，并能促进钙的吸收。
随着年龄的增大，肠道中将乳糖分解为葡萄糖和半乳糖的乳糖酶活性急剧下降，甚至在某些个体中几乎降到0，因而成年人食用大量的乳糖，不易消化，食物中乳糖含量高于15%时可导致渗透性腹泻。
一、目的要求1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点；2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
二、实验原理试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。
以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色，表示终点到达。
根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。
反应方程式如下：CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4COONa COONa︱∣CHOH CHO╲∣+Cu(OH)2= ∣Cu +2H2OCHOH CHO╱∣∣COOK COOKCOONa COONa∣CHO ∣CHOHCHO╲∣CHOH ∣2∣Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 ∣+ (CHOH)4+Cu2O↓CHO╱∣CHOH ∣∣CH2HO ∣CH2OHCOOK COOK亚甲蓝氧化型+还原糖——→亚甲蓝还原型(蓝色) （无色）三、实验试剂（GB/T5009.7-2003食品中还原糖的测定）1、盐酸。
实验六__乳粉中还原糖含量的测定
实验六乳粉中还原糖含量的测定—直接滴定法一、目的要求1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点；2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
二、实验原理将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀。
稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。
根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。
反应方程式如下：CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4COONa COONa︱∣CHOH CHO╲∣+Cu(OH)2= ∣Cu +2H2OCHOH CHO╱∣∣COOK COOKCOONa COONa∣CHO ∣CHOHCHO╲∣CHOH ∣2∣Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 ∣+ (CHOH)4+Cu2O↓CHO╱∣CHOH ∣∣CH2HO ∣CH2OHCOOK COOK亚甲蓝氧化型+还原糖——→亚甲蓝还原型(蓝色) （无色）三、实验试剂1、碱性酒石酸铜甲液：称取7.5g硫酸铜 ( CuSO4•5H2O) 及0.025g次甲基蓝，溶入水中并稀释至500mL。
2、碱性酒石酸铜乙液：称取25g酒石酸钾钠及37.5g氢氧化钠，溶于水中，再加入2g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至500mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3、乙酸锌溶液：称取10.95g乙酸锌，加1.5mL冰乙酸，加水溶解并稀释至50mL。
4、亚铁氰化钾溶液：称取5.5g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至50mL。
5、乳糖标准溶液：称取约1.4g经过96℃±2℃干燥2h的乳糖，以水稀释至1000mL。
此溶液每mL相当于1.4mg乳糖。
四、实验仪器1、分析天平；2、牛角匙；3、50mL小烧杯；4、250mL容量瓶；5、100mL量筒，1个/2组；6、250mL锥形瓶3只；7、25mL酸式滴定管1支/组； 8、5mL移液管4支/2组；9、10mL移液管1支/2组； 10、干燥滤纸3张，漏斗1个/组；11、小玻璃棒1根/组； 12、玻璃珠：9颗/组；13、可调电炉；五、操作步骤（一）试样处理称取约1.2g左右的试样，置于250mL容量瓶中，用50mL水分次溶解样品并洗入250mL容量瓶中，摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌溶液，混匀放置片刻，加入5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀、静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
奶粉中还原糖的测定 (1)
奶粉中还原糖的测定一、实验目的：1、掌握直接滴定法。
2、了解奶粉中还原糖的含量。
二、实验原理：在加热条件下，以次甲基蓝为指示剂，样液中的还原糖和酒石酸钾钠铜反应生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为终点。
根据样液消耗量即可计算还原糖的含量。
三、实验仪器与试剂：碱性酒石酸铜甲液:称取7.5g硫酸铜及0.025g次甲基蓝，溶于水并稀释至500ml。
碱性酒石酸乙液：称取25.00g酒石酸钾钠及37.5g氢氧化钠，溶于水中，再加入2g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至500ml，贮存于具橡胶塞玻璃瓶中。
0.14%乳糖标准溶液：准确称取0.5000g经98-100°C干燥至恒重的无水乳糖，加水溶解后移入500ml容量瓶中，用水稀释至500ml。
乙酸锌：称取21.9g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至50ml。
亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至50ml。
分析天平、滤纸、奶粉、容量瓶、滴定管、电炉、锥形瓶,漏斗。
四、实验步骤：1、样品处理：准确称取2.50-5.00g奶粉(因为实验要求还原糖浓度为0.1%，且要求消耗的样液体积在10ml左右，以保证实验准确度)，置于250ml容量瓶中，加50ml水，慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾溶液，加水定容至刻度，混匀，沉淀，静止30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
2、从滤液中吸取10ml滤液至100ml容量瓶中，然后在溶液中加1:1HCl5ml 溶液和25ml蒸馏水,然后加入1滴甲基红，用NaOH滴至为黄色，然后用HCl调至微红色即调至中性。
3、碱性酒石酸铜溶液的预测：吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml，置于150ml锥形瓶中，加入水10ml，加玻璃珠3粒，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加乳糖标准溶液，并保持溶液沸腾状态。
还原糖测定实验报告
一、实验目的1. 理解还原糖的化学性质及其在生物体内的作用。
2. 掌握使用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖含量的原理和方法。
3. 通过实验，学会正确使用实验仪器和试剂，提高实验操作技能。
二、实验原理还原糖是一类具有还原性的糖类，在生物体内具有重要的生理功能。
3,5-二硝基水杨酸法是测定还原糖含量的常用方法，其原理是：还原糖在酸性条件下与3,5-二硝基水杨酸反应，生成红色复合物，通过比色法测定还原糖含量。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁等。
2. 试剂：3,5-二硝基水杨酸、硫酸铜、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。
四、实验仪器1. 分析天平2. 恒温水浴锅3. 离心机4. 分光光度计5. 移液管6. 试管五、实验步骤1. 标准曲线的制作：（1）分别配制0、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL的葡萄糖标准溶液。
（2）取5支试管，分别加入不同浓度的葡萄糖标准溶液各1 mL。
（3）向每支试管中加入3,5-二硝基水杨酸溶液2 mL，混匀。
（4）将试管放入恒温水浴锅中加热5分钟。
（5）取出试管，用蒸馏水定容至10 mL。
（6）用分光光度计在波长540 nm处测定吸光度。
（7）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：（1）分别取葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁各1 mL于试管中。
（2）向每支试管中加入3,5-二硝基水杨酸溶液2 mL，混匀。
（3）将试管放入恒温水浴锅中加热5分钟。
（4）取出试管，用蒸馏水定容至10 mL。
（5）用分光光度计在波长540 nm处测定吸光度。
（6）根据标准曲线，计算样品中还原糖含量。
六、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：标准曲线如图所示，线性回归方程为y = 0.0034x + 0.0128，相关系数R² = 0.9989。
2. 样品测定：葡萄糖标准溶液、蔗糖溶液、淀粉溶液、苹果汁、梨汁中还原糖含量分别为2.34 mg/mL、0.86 mg/mL、0.23 mg/mL、1.12 mg/mL、0.89 mg/mL。
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实验六乳粉中还原糖含量的测定—直接滴定法
一、目的要求
1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点；
2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
二、实验原理
将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀。
稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。
根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。
反应方程式如下：
CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4
COONa COONa
︱∣
CHOH CHO╲
∣+Cu(OH)2= ∣Cu +2H2O
CHOH CHO╱
∣∣
COOK COOK
COONa COONa
∣CHO ∣CHOH
CHO╲∣CHOH ∣
2∣Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 ∣+ (CHOH)4+Cu2O↓
CHO╱∣CHOH ∣
∣CH2HO ∣CH2OH
COOK COOK
亚甲蓝氧化型+还原糖——→亚甲蓝还原型
(蓝色) （无色）
三、实验试剂
1、碱性酒石酸铜甲液：称取7.5g硫酸铜 ( CuSO
4•5H
2
O) 及0.025g次甲
基蓝，溶入水中并稀释至500mL。
2、碱性酒石酸铜乙液：称取25g酒石酸钾钠及37.5g氢氧化钠，溶于水中，再加入2g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至500mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3、乙酸锌溶液：称取10.95g乙酸锌，加1.5mL冰乙酸，加水溶解并稀释至50mL。
4、亚铁氰化钾溶液：称取5.5g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至50mL。
5、乳糖标准溶液：称取约1.4g经过96℃±2℃干燥2h的乳糖，以水稀释至1000mL。
此溶液每mL相当于1.4mg乳糖。
四、实验仪器
1、分析天平；
2、牛角匙；
3、50mL小烧杯；
4、250mL容量瓶；
5、100mL量筒，1个/2组；
6、250mL锥形瓶3只；
7、25mL酸式滴定管1支/组； 8、5mL移液管4支/2组；
9、10mL移液管1支/2组； 10、干燥滤纸3张，漏斗1个/组；
11、小玻璃棒1根/组； 12、玻璃珠：9颗/组；
13、可调电炉；
五、操作步骤
（一）试样处理
称取约1.2g左右的试样，置于250mL容量瓶中，用50mL水分次溶解样品并洗入250mL容量瓶中，摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌溶液，混匀放置片刻，加入5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀、静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
（二）标定碱性酒石酸铜溶液
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠3粒，从滴定管滴加约9mL乳糖，控制在2min内加热至沸，趁沸以每2s1滴的速度继续滴加乳糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。
记录消耗乳糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份（先粗测一次），取其平均值，计算每10mL （甲、乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于乳糖的质量或其他还原糖的质量（mg）。
A = C•V
式中：A—10mL （甲、乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于乳糖的质量(mg)；
C—乳糖标准溶液的浓度，mg/ mL；
V—标定时消耗乳糖标准溶液的体积，mL。
（三）试样溶液预测
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠3粒，控制在2min内加热至沸，准确沸腾30s，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每2秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。
当样液中还原糖浓度过高时应适当稀释，再进行正式测定，使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约在10mL左右。
（四）试样溶液测定
吸取5.0mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL 乙液，置于150mL 锥形瓶中，加水10mL ，加入玻璃珠3粒，从滴定管滴加比预测体积少1mL 的试样溶液至锥形瓶中，使在2min 内加热至沸，趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。
六、数据记录与计算
试样中还原糖(以葡萄糖计)的含量为：
式中：
X —试样中还原糖(以乳糖计)含量，g/100g ；
A —10 mL 碱性酒石酸铜溶液 (甲、乙液各5 mL) 相当于乳糖的质量，mg ； m —试样质量，g ；
V —测定时平均消耗试样溶液体积，mL ；
V 0—试样液总体积，mL ；
10010000
⨯⨯⨯=V V m A X。