肥大细胞染色液(阿利新蓝沙黄法)
AB-PAS染色液说明书
仅供科研使用版本号：161213AB-PAS染色液(南京森贝伽生物科技有限公司)【产品组成】Component SBJ-0410S6×50mlSBJ-0410M6×100mlStore at试剂(A):阿利新蓝染色液50ml 100ml 4℃,避光试剂(B):过碘酸溶液50ml 100ml 4℃,避光试剂(C): Schiff Reagent 50ml 100ml 4℃,避光试剂(D):苏木素染色液50ml 100ml 室温,避光试剂(E): 酸性分化液50ml 100ml 室温试剂(F): Scott蓝化液50ml 100ml 室温【保存条件】4℃,避光,6个月【产品概述】糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该技术不仅能显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质。
阿利新蓝(又称阿尔辛蓝、爱先蓝等)和PAS技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。
这种技术也常用作广泛检测黏蛋白的手段，切片先经标准阿利新蓝(pH=2.5)染色再使用PAS技术。
阿利新蓝可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。
PAS技术可将中性黏蛋白染成深红或红紫色，同时将既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的组织和细胞染成深浅不同的紫色，这是由于阿利新蓝与Schiff试剂结合并发生反应。
上述染色常可出现在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小肠杯状细胞中。
阿利新蓝的染色原理在于是类铜钛花青染料，这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
分子中带正电荷的盐键与酸性黏多糖物质中带负电荷的酸性基团结合形成不溶性的复合物而呈蓝色，再与PAS迚行复合染色，就能显示三种不同黏液物质成分。
AB-PAS染色液核心成分为阿利新蓝染色液和Schiff Reagent，多用于黏液物质染色，糖原、中性黏蛋白、各种糖蛋白呈紫红色，其余呈蓝色。
阿利新蓝染色液-A液(pH2.5)
阿利新蓝染色液-A 液(pH2.5)简介：阿利新蓝(Alcian)又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。
这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。
该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。
阿利新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明，普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连，如含羧基和硫酸根的酸性黏液物质的羧基和硫酸根形成不溶性复合物，即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色。
pH 值为2.5时，组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的组织(如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白)染色。
pH 值为1.0时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织(如硫酸黏液物质)染色。
中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner 腺体部位的中性黏蛋白)不能与阿利新蓝反应。
组成：自备材料：1、 系列乙醇2、 蒸馏水3、 核固红染色液操作步骤(仅供参考)：1、 二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。
2、 入阿利新蓝染色液(pH2.5)染色。
3、 流水冲洗。
4、 入核固红染色液复染。
5、 流水冲洗。
6、 梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。
染色结果: 编号 名称 DG0043 Storage 阿利新蓝染色液-A 液(pH2.5) 100ml 4℃ 避光 使用说明书 1份酸性黏蛋白(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)蓝色蛋白多糖和透明质酸蓝色细胞核红色注意事项：1、固定液采用中性福尔马林。
2、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低(pH=1.0)的阿利新蓝，即调pH值为1.0。
染色程序与pH=2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。
3、已开封试剂应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法)
Leagene 。
com 北京雷根生物技术有限公司
甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法)
简介：
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
(一)肥大细胞染色
1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。
4、(可选)0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速95%和无水乙醇脱水。
染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(二)软骨染色
1、 石蜡切片入二甲苯2次。
2、 系列乙醇各1min 。
3、 自来水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。
5、 自来水洗2min ，滤纸吸干水分。
6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
注意事项：
1、 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应
相应延长。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 DA0055 Storage Toluidine Blue O Stain(1%,磷酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份。
尿液有形成分检查的临床价值与问题
尿液有形成分检查的临床价值与问题——丛玉隆尿液有形成分（urine formed element）是指来自泌尿道,并以可见形式渗出、排出、脱落和浓缩结晶所形成的物质的总称，通过离心方式得到的浓缩的尿有形成分称之为尿沉渣（urine sediment）。
尿液有形成分检查是一项非常经典的检验项目，具有数百年的发展历史，是最早出现的一种临床检验技术手段。
它和尿液理学检查、尿液化学检查共同构成尿液常规分析的全部内容，并与其相辅相成，互相弥补和互相印证。
但应指出有形成分检查对于临床医生了解泌尿系统各个部位的变化，对辅助泌尿系统疾病的定位诊断、鉴别诊断和预后判断更具有明显的应用价值。
一.尿液有形成分检查内容尿液中显微镜检查可见的有形成分种类非常多，可分为有机成分和无机成分两大类。
一些成分具有明确的病理意义，如细胞、管形、寄生虫等具有明确诊断价值；另一些为生理性排出的成分，如各种生理性结晶、上皮细胞等，这些成分在某些情况下具有辅助诊断价值。
尿液有形成分可分为几大类别。
1.有机成分(1).细胞成分：红细胞、白细胞、上皮细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等。
(2).管型成分：透明管型、颗粒管型、蜡样管型、红细胞管型、白细胞管型、肾小管上皮细胞管型、脂肪管型、宽幅管型、血红蛋白管型等。
(3).其他有机成分脂肪滴、粘液丝、细菌、真菌、寄生虫、精子、前列腺液混入物、类管型等。
2.无机成分主要为结晶(1).生理性结晶：草酸、磷酸、尿酸等成分与钙、镁、铵等离子结合形成各种无机盐及有机盐类结晶：如尿酸氨结晶、马尿酸结晶等。
(2).病理性结晶：胆红素结晶、胆固醇结晶、胱氨酸结晶、亮氨酸结晶、酪氨酸结晶、含铁血黄素颗粒等。
(3).药物结晶：磺胺类、解热镇痛类药物结晶，解热镇痛类药物结晶，吡哌酸结晶，造影剂类结晶。
二.尿液有形成分检查方法鉴于尿液有形成分检查的重要意义,国内外学术界非常注意尿液检查方法学的标准化、规范化。
早在1827年，Bright首次发现管型，Bird（1854年）Purdy（1900年）进一步证明了尿沉渣检查的临床价值，Addis（1948年）建立了尿沉渣物定量检查法，美国NCCLS（1991年）提出了“尿常规分析”的推荐标准（GP16-P），经过四年实践以后提出了“尿液分析和尿液标本采集、转运和保存”（1995年）的标准文件（GP-16A），日本JCCLS（1995年）制定了“尿沉渣检查标准”我国中华医学会第一次全国临床检验学术会议（1983年会议）提出了尿常规检查标准化问题，中华医学会检验分会临床血液学检验与尿液分析专题研讨会提出了我国尿沉渣的推荐标准（1995年武夷山会议），2002年，我国卫生部颁布了尿液检查的行业标准首次规范了我国医学实验室尿液常规检查方法，2009年8月中华医学会检验分会临床血液与尿液检验学组召开了尿液有形成分检验高峰论坛对尿液有形成分检查方法标准化（见图1）和应用自动化仪器对镜检筛选等方面取得了共识。
阿利新蓝染色液(pH2.5,细胞专用)
北京吉美生物技术有限公司阿利新蓝染色液(pH2.5,细胞专用)产品简介：阿利新蓝(Alcian)又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。
这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。
该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。
pH值为2.5时，组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的酸性黏液物质（硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白）染色。
Jimei 阿利新蓝染色液(pH2.5,细胞涂片专用)采用改良Lison法，利用染液的不同pH值可区分粘液物质的类属，pH为1时，羧基（COOH）不着色，硫酸基（OSO3H）着色，pH 为2.5时，羧基染色良好而硫酸粘液着色不佳。
使硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白着色。
中性黏蛋白如（如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白）不能与阿利新蓝反应。
本试剂仅适用于科研领域，特别适用于细胞涂片染色，不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成：自备材料：1、甲醇2、蒸馏水操作步骤（仅供参考）1、制备新鲜涂片，用甲醇固定5min。
2、水洗、晾干。
3、滴加Alcian染色液染色30min。
4、充分水洗、晾干。
5、滴加Alcian复染液复染30~60s。
6、水洗、晾干、镜检。
注意事项：1、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低（pH=1.0）的阿利新蓝，即调pH值为1.0。
染色程序与pH=2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。
2、Alcian染色液呈酸性，染色时应与普通染色分开，否则影响细胞着色。
3、Alcian染色液染色后，涂片应充分水洗，否则影响复染效果。
4、己开封试剂应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以名挥发或变质。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
阿利新蓝软骨细胞染色原理
阿利新蓝软骨细胞染色原理
阿利新蓝软骨细胞染色是一种细胞学技术，利用一种称为阿利新蓝的染色剂来染色软
骨细胞。
这种染色剂是一种碱性染料，可以与染色体和细胞核的 DNA 结合，使它们变色，从而能够在显微镜下观察和分析。
阿利新蓝软骨细胞染色的原理是将染色剂溶于显微镜盐水中，然后将软骨组织样本放
入该溶液中，使其浸泡一段时间。
在此期间，阿利新蓝会渗透进细胞，与 DNA 连接，并
形成深蓝色的颗粒，使细胞核变色。
在完成染色后，样本用洗涤盐水进行洗涤，以去除未结合的染色剂，并使其在显微镜
下更加清晰可见。
最后，将样本覆盖物置于玻片上，用显微镜观察和记录细胞的形态和分
布情况。
利用阿利新蓝染色技术可以分析软骨细胞的形态、数量和分布情况，从而可以帮助医
生和研究人员更好地了解软骨细胞生长和病理变化，以便于对软骨疾病和损伤进行治疗和
预防措施的制定。
甲苯胺蓝溶液配制及使用方法
100ml Mayer 苏木素染色液
100ml Mayer 苏木素染色液
100ml 苏木素伊红(HE)染色液
4×10ml 苏木素伊红(HE)染色液
100ml Core 苏木素染色液
100ml Core 苏木素染色液
100ml Carazzi 苏木素染色液
100ml Carazzi 苏木素染色液
50ml
北京华越洋生物提供 QQ1733351176
保存：室温避光储存，有效期至少 12 个月。 关键词：甲苯胺蓝溶液
甲苯胺蓝溶液相关染色产品:
货品名称 中性红染色液(0.33%） 中性红染色液(0.5%） 中性红染色液(0.1% 常规染色) TTC 染色液（0.4%） Masson 三色染色试剂盒 普鲁士蓝染色试剂盒 尼氏染色液(焦油紫法) 吕氏碱性美蓝染色液（0.4%） 亮绿 SF 染色液 溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液 饱和油红 O 染色液 Van Gieson 染色液 Van Gieson 染色试剂盒 Schiff 试剂 茜素红 S 染色液（0.2%） 煌焦油蓝染色液 2% TTC 染色液 革兰氏染色液试剂盒 醋酸洋红染色液 姬姆萨原液 姬姆萨工作液 瑞氏-姬姆萨复合染液 瑞氏染液 结晶紫染色液(2.5%) 结晶紫染色液(1%) 结晶紫染色液(0.1%) 荚膜染色液（试剂盒） 芽孢染色液（试剂盒）
50ml×2 伊红染色液(醇溶)
糖原 PAS 染色液试剂盒（过碘酸-雪夫染色液） 50ml×4 Scott 蓝化液
伊红染色液
100ml 氨水溶液(0.1%)
标准阿利新蓝染色液
3×50ml 氨水溶液(0.3%)
阿利新蓝染色液(pH2.5)
100ml 氨水溶液(0.5%)
阿利新蓝染色液(pH=1.0)（试剂盒）
阿利新蓝染色原理
阿利新蓝染色原理
阿利新蓝染色是一种在生物学实验中经常使用的染色方法。
它的
原理是基于DNA与RNA与阿利新蓝染料的亲和力，通过染色剂与核酸
间的静电吸引力将目标物质染色。
在DNA或RNA分子的化学结构中，氮碱基由两个环组成，并且在
环的构型中包含了各个不同原子的带电部分。
阿利新蓝染料含有离子
化的胺基和缩醛基，这些带电部分与氮碱基相互吸引，从而实现染色。
阿利新蓝染料还具有相对中等的分子量，能够渗透细胞膜和核孔，可
方便地染色细胞质和细胞核。
此外，阿利新蓝染料与目标分子对比度高，有利于显微镜下的观察。
为了将阿利新蓝染料应用于实验中，通常需要制备适当的工作液。
给定的工作液浓度需要根据实验要求来决定。
一般情况下，适宜浓度
为0.1%-0.5%左右。
将待测样品与工作液混合后，进行短暂的染料处理，通常在5-10分钟内即可取得较好的染色效果。
接着，对样品进行简单
水洗和干燥，然后就可以在显微镜下直接观察和记录结果了。
总的来说，阿利新蓝染色是一种简单、可靠、经济的染色方法，
几乎适用于所有生物学实验。
它的优势在于对样品危害小，同时易于
使用，对于初学者或实验室没有专门染色设备的团队来说是非常实用的。
虎纹蛙消化道肥大细胞的组化性质
第 ３ ９卷 第 ２期
２１ ０ ０年 ３月
虎纹蛙消化道肥大细 胞的组化性质
张 妮， 旋， 亟 ， 全 洪 秋 伟 林 匾 圈 王 溪， 艳
（ 福建农林大学动物科学学院， 福建 福州 ３００ ） ５０２
摘要： 采用 改良甲苯胺蓝 （ Ｂ 、 ＭＴ ） 阿利新蓝一沙黄（ ＢＳ 、 Ａ － ） 甲基 绿一 派洛宁（ — ）天青 Ⅱ一伊红一瑞特 、 ＭＧ Ｐ 、 硫堇及 Ｐ ＳＨ Ａ —Ｅ 等 ６种组织化学 染色方法 ， 对虎纹蛙消化道肥大细胞 （ Ｃ） Ｍ 的组 化性质进 行了研究． 结果表 明 ： 虎纹 蛙消 化道中食管 、 胃贲 门、 胃体 、 胃幽门 、 空肠 、 十二指肠 、 回肠 、 直肠等部 位均有 ＭＣ分布 ； ＭＣ呈长梭形 、 圆形 、 圆形、 卵 不规 则形 ， 主要存 在于黏膜 固有层或黏膜下层 内 ， 有沿血管和腺泡周围分布 的趋 向． ６种染 色法 中 ， Ｍ Ｂ染 色效果最好 ， 在 用 Ｔ ＭＣ易定位 ， 组织结 构清 晰可辨 ， 胞质呈紫红色 ； 其次为 Ａ ． ＢＳ染色 ， ＭＧ Ｐ及 天青 Ⅱ—伊 红一瑞 特的染 色效果一般 ， 堇染色效果 差 ，Ａ — Ｅ染 而 － 硫 Ｐ ＳＨ
ｓ ｅｓｒｃｕ ｏ ｌ ｅ ｓｅ ｌａｌ ，ａ ｄ ｃｌ ｐａｍａｗａ ｕｐｅ ｒｄ ＡＢ Ｓ ｓａｎｎ ａ ｅｔｒｅ ｅ ｔ ｕ ｔｕ ｔｒ ｃ ｕｄｂ ｅ ｎ ｃｅｒｙ ｎ ｅｌ ｌ ｅ ｓ ｓｐ ｒ ｌ ｅ ． — ｔｉ ｇ ｈ ｄ ｂ ｔ ｆ ｃ，ＭＧ— ｎ ｚ ｒ Ⅱ－ｏ ｉ— ｉ ｅ Ｐ ａ ｄ ａｕｅ ｅｓ ｎ
ＺＡＧ ｅ ｉＬ ａ 匝 珂 ＨＮ ｉ ，ＩＸ ｎ ｗ． Ｎｕ， ｎ
， ＡＧ ｕ －，ＯＧ ａｑ Ｗ Ｎ ａｘ ＨＮ ｎｉ Ｑ ｎｌ ｉ Ｙ— ｕ
尼罗罗非鱼消化道肥大细胞的组化性质
作者 简介 ： 旋（９ ９ ，男，福建龙 海人 ； 士；研究 方向为 水产动 物疾 病学 。Ｅ ｍａ ： ｎ ａ ｕ ｎ ９ ｏｍ ｉｃ ｍ 林 １７ 一） 硕 ． ｉ ｌ ｋ ｉ ａ ７ ＠ｈ ｔ ａ ． ｌｉ ｘ ｌｏ
织 中 ＭＣ的分 布已有报 道［ ８２１ 。 罗罗非鱼 （ ｉ ５ ，－４ 尼 －１ １ Ｎｌ ｅ ｔａ ｉ ，属 鲈 形 目（ｅｃ ｏｍｅ） ｉ ｐａ ｌ ） Ｐ ｒｉ ｒ ｓ，丽 鱼 科 （ ｉ ｌ ａ） ｆ Ｃ ｃ ｉ ｅ， ｈｄ 罗非鱼 属（ｉ ｐａ 。 Ｔｌ ｉ 尼罗 罗非鱼适 应性 广 、 病力强 、 ａ ） 抗
ＭＣ 的分 布异质 性与 细胞类 型 、功能 以及其分 化成
熟 密切相 连 。 因此 ，对 动物 不 同组织 器官 中逐 个研 究 ＭＣ分布规 律及组 织化学 性质 已成 为 ＭＣ生物学
研究 的重要课 题之 一 。
胞 的研 究 ， 采 用多 种组 织化 学方 法研 究 罗非鱼 肥 但
大细胞 胞浆颗 粒异 质性 的报道 尚未 见到 。本研 究应 用 改 良甲苯胺 兰法（ Ｂ 、 ＭＴ ） 阿利新 兰一 红 Ｏ 复染法 番 ｆＢＳ ） Ａ ／Ｏ 、甲基绿 一 洛 宁染 色法 （ ．） 派 ＭＧ Ｐ 、天 青 Ｉ． Ｉ
楚，胞 质颗粒 较 清晰 ；尼罗 罗非鱼 肥大 细胞胞浆 颗粒都 呈红 色，即肥大 细胞胞 浆 主要 含肝 素，不含组胺 。天 青 Ｉ． Ｉ伊红 一 氏混合 液染 色效 果也很 好 ， 被 染的 肥大 细胞较 少；８ ％乙醇硫 堇 染色 ，在 尼罗 罗非鱼 消化 道 瑞 但 ０
各段 组织 中均未 能鉴 定 出肥 大细 胞 。尼罗罗 非鱼 消化道 肥大 细胞 大多分 布于 浅层 的黏 膜或血 管 、腺体 周围
肥大细胞培养方法
骨髓来源肥大细胞原代培养主要试剂耗材与设备试剂：1640基础培养基：gibco 31800-0221%青链霉素双抗：gibco 1902417谷氨酰胺：gibco 1894153胎牛血清：gibco 10099-1410.25%胰酶：gibco 1894145IL-3：Peprotech 213-13-10SCF：Peprotec 250-03-10耗材：6孔细胞培养板（corning）、15ml离心管（corning）、1.5ml离心管（axygen）、各量程吸头（axygen）、0.22μm滤器（millipore）设备：细胞培养箱：力康生物HF-100低速离心机：SCILOGEX DMO-412倒置显微镜：奥林巴斯CKX41超净工作台：珠江再鑫EVL-53移液器：eppendorff4℃/-20℃冰箱：海尔水浴锅：CFYQYB YLE-1000实验方法1、诱导药物配制：（1）IL-3：将10ug IL-3粉末溶解于500ul超纯水中配制成20ug/ml储存液-20℃备用。
（2）SCF：将10ug SCF粉末溶解于500ul超纯水中配制成20ug/ml储存液-20℃备用。
2、肥大细胞专用培养基配制：超净工作台内取84ml DMEM/F12基础培养基于无菌、干净的瓶内，加入15ml FBS、1ml 双抗、0.07%β-巯基乙醇、20ng/ml CSF、30ng/ml IL-3，0.22um过滤器过滤后转移至新的瓶内，盖紧瓶盖，4℃冰箱保存备用。
3、肥大细胞培养：（1）脱颈法处死SD大鼠（体重约200g），75%酒精浸泡消毒3min。
转入超净工作台内操作，剪开后肢皮肤，去除腿部肌肉，暴露出股骨，尽可能将股骨外部肌肉剥离干净，剪下股骨。
（2）剪去股骨两端的股骨头，使用5ml注射器吸取1640基础培养基后将骨髓吹打出来，吹打过程中尽可能将骨髓冲洗干净。
（3）使用巴氏吸管将骨髓吹打成单细胞悬液，1000rmp/min离心5min收集细胞，如发现收集的细胞中有大量红细胞时需使用红细胞裂解液处理。
肥大细胞特殊染色
肥大细胞特殊染色肥大细胞（Mast cell）来源于未分化的间充质细胞正常多见于小血管周围，结缔组织中有少量，常见于支气管周围和胰腺的小叶间导管周围，肠系膜小血管周围较多比一般细胞大（直径20~30微米），圆形或椭圆形，核较小，圆形，胞质充满粗大并具异染性的圆形嗜碱性颗粒，HE染色呈红色肥大细胞颗粒含肝素、组织胺、慢反应物质和嗜酸性粒细胞趋化因子等成分，参与过敏反应取材要组织新鲜，迅速固定，颗粒因存放过久而被破坏染色方法：硫堇法、甲苯胺蓝法、苏木精-中性红法、陶利新蓝沙黄法、醛品红-橘黄G法等硫堇法或甲苯胺蓝法将肥大细胞颗粒染成红紫色，其他组织蓝色苏木精中性红法将细胞颗粒染成红色阿利新蓝沙黄法将幼稚型肥大细胞染成蓝色，成熟型肥大细胞颗粒染成红色醛品红-橘黄G法将肥大细胞颗粒染成深紫色，其他细胞不着色，背景橙黄色，对比清晰甲苯胺蓝染色法试剂：甲苯胺蓝液：甲苯胺蓝(Toluidine blue)0.5克，加蒸馏水至100毫升0.5%冰醋酸液：冰醋酸（Glagial acetic acid)0.5毫升，蒸馏水99.5毫升方法：⑴组织固定于10%甲醛生理盐水或甲醛酒精液，常规脱水包埋切片。
⑵切片常规脱蜡至水。
⑶甲苯胺蓝液染20~30分钟，水速洗。
⑷冰醋酸液分化至细胞核和颗粒清晰，水稍洗，用风扇吹干。
⑸二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：肥大细胞颗粒红紫色，核蓝色。
染色后用风扇吹干而不用酒精脱水，因酒精容易使肥大细胞颗粒呈蓝色。
硫堇可代替甲苯胺蓝。
醛品红-橙黄G法（改良的Gomori，1950）试剂：醛品红液：弹力纤维橙黄G液：脑垂体方法：⑴组织固定于10%甲醛生理盐水溶液，常规脱水包埋切片。
⑵切片脱蜡至80%酒精。
⑶70%酒精稍洗。
⑷入醛品红液染10~15分钟。
蒙古马皮肤肥大细胞两种染色方法的比较
蒙古马皮肤肥大细胞两种染色方法的比较赵一萍;庄玉;芒来;白东义;赵启南【摘要】为探讨不同染色方法对蒙古马皮肤肥大细胞(MC)显示的影响,本试验采用将蒙古马皮肤用Carnoy氏液固定,然后进行常规甲苯胺蓝-藏红O复染法和改良甲苯胺蓝-藏红O不同复染时间的染色方法,光镜下进行观察.结果表明,蒙古马皮肤采用改良甲苯胺蓝-藏红O复染5 s染色方法(MTB-S)对肥大细胞有很好的染色效果.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2011(032)011【总页数】3页(P120-122)【关键词】肥大细胞;皮肤;蒙古马;染色【作者】赵一萍;庄玉;芒来;白东义;赵启南【作者单位】内蒙古农业大学动物科学院,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学院,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学院,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学动物科学院,内蒙古呼和浩特010018【正文语种】中文【中图分类】S853.55;S852.81肥大细胞（mast cell，MC）定居在机体各个组织中，如皮肤、淋巴样组织、子宫、膀胱、肠系膜、消化道的浆膜和黏膜下层、血管周围以及肺组织。
肥大细胞在与外界环境接触的部位（皮肤，气管和肠道等）中起着"第一道防线"的作用，在结缔组织中扮演"微脉管系统信息传递者"作用［1］。
肥大细胞被激活后，能迅速地、选择性地产生恰当的介质引发保护性先天免疫反应和生理反应［2］，并通过介质导致快速的炎症反应，接着招募细胞因子和增加肥大细胞数目。
国内外对于不同物种、不同组织肥大细胞的研究非常广泛［3－5］，但对于马的研究相对较少，特别是国内仍未见相关报道。
本文就蒙古马皮肤中肥大细胞的形态、分布进行分析，为进一步研究蒙古马不同组织器官肥大细胞的分布、数量以及肥大细胞内所含物质奠定基础，进而为深入探讨肥大细胞在蒙古马免疫功能上的作用提供组织形态学依据。
肥大细胞PAS-甲苯胺蓝染色法(教学课件)
讨论
单击此处添加标题
3. 通过PAS-甲苯胺蓝染色显示肥大细胞 形态结构典型，胞质内嗜碱性颗粒清 晰。显示肥大细胞中颗粒是识别和判 断及其功能状态提供的研究方法，也 为科研提供了较好的方法。
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• 在组织学观察中，我们怎样能够显示肥大 细胞的结构及特征呢？
学习任务 结果分析
镜检
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取材 固定
染色
组织取材
取皮下组织铺片
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组织固定
AFA固定液配制:
95%酒精 85ml 甲醛 15ml 冰醋酸 5ml
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染色
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PAS-甲苯胺蓝染色
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肥大细胞PAS-甲苯胺蓝染色法
Mast cell PAS- Toluidine blue staining
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这张照片中我们能看 到什么现象？
• 就是过敏（a添加标题
• 当肥大细胞受到过敏原刺激时，体内浆细 胞，生成IgE抗体，IgE与肥大细胞的IgE受 体结合后，机体对该过敏原便处于致敏状 态，作为过敏原与肥大细胞表面的IgE结合 使其激活脱颗粒，引起过敏反应。
取出固定好组织放入蒸馏水洗净， 置于氧化剂放置6min，自来水 冲洗1次，蒸馏水浸洗2次，放入 Schiff试剂，置于室温阴暗处，
浸染色10min，取出组织玻片在蒸 馏水洗净，将洗净的组织玻片放入
0.5%甲苯胺蓝液，其染色时间 只需30秒。
甲苯胺蓝染色
医学检验·检查项目：阿利新蓝染色_课件模板
医学检验·各论：阿利新蓝染色 >>>
相关症状： 皮肤黏蛋白沉积、白血病细胞浸润。
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相关疾病：
慢性粒细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白 血病、急性白血病、白血病性咽峡炎、急 性淋巴细胞性白血病、小儿急性淋巴细胞 性白血病、小儿慢性粒细胞白血病、小儿 骨髓增生异常综合征、小儿白血病、小儿 急性髓样白血病、小儿成人型慢性粒细胞 白血病、小儿类白血病反应、小儿雅克什 综合征、人类T淋巴细胞病毒感染、类白 血病反应。
医学检验·各论 阿利新蓝染色 内容课件模板
医学检验·各论：阿利新蓝染色 >>&g 化学相结合的一种检查技术。临床采用阿 利新蓝染色法进一步鉴别各类血细胞提高 对急性早幼粒细胞白血病诊断具有重要意 义。
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临床意义：
颗粒增多的早幼粒细胞和Auer小体呈 强阳性反应，有助于急性早幼粒细胞 白 血病的诊断。巨核细胞阳性反应对发现 MDS中的小巨核细胞有一定的价值。
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正常值：
粒细胞系原粒细胞呈阴性反应，早幼 粒细胞呈中度阳性，成熟中性粒细胞则为 弱阳性或阴性反应。巨核细胞为阳性反应。 单核细胞阳性反应应表现为胞质边缘染成 蓝色。淋巴细胞和幼红细胞呈阴性反应。
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相关检查： 苏丹黑B染色、胶体铁染色、羊水细胞性 染色质检查、羊水细胞培养染色体检查、 特异性脂酶染色、phi(φ)小体染色。
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用5种染色方法显示大鼠腮腺内肥大细胞的比较
用5种染色方法显示大鼠腮腺内肥大细胞的比较
苏秋香;林莉
【期刊名称】《沈阳医学院学报》
【年(卷),期】2000(002)001
【总页数】3页(P43-45)
【作者】苏秋香;林莉
【作者单位】沈阳医学院医学基础部组织胚胎学教研室,沈阳;沈阳医学院附属卫校化学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R329－33
【相关文献】
1.不同固定液,染色法显示结缔组织肥大细胞效果的比较 [J], 陈晓军;何泽涌
2.介绍一种显示肥大细胞快捷简便的染色方法 [J], 陈洪勋;王骋;任兴昌
3.大鼠淋巴器官中肥大细胞不同染色方法的比较 [J], 朱辛为;鲁质博;李质馨;王晓玉;郭素红;侯瑜
4.大鼠淋巴器官中肥大细胞不同染色方法的比较 [J], 朱辛为;鲁质博;李质馨;王晓玉;郭素红;侯瑜
5.不同固定液和染色方法显示山羊子宫内肥大细胞效果的比较 [J], 王立芹;申颖;王树迎;黄丽波;侯衍猛
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病理学特殊染色技术肥大细胞（醛品红橘黄G法硫堇法）
病理学特殊染色技术肥大细胞（醛品红橘黄G法硫堇法）
肥大细胞(Mast cell)
某些过敏性疾病诊断和显示与鉴别某些肿瘤；
诊断和研究肥大细胞增生性疾病
Halmi改良醛品红橘黄G法
①醛品红液：
②橘黄G液：橘黄G 2克，溶于蒸馏水100毫升，加磷钨酸5克，过滤使用
方法：
⑴组织用甲醛生理盐水固定
⑵切片脱蜡至水
⑶70%酒精洗涤
⑷醛品红液10~20分钟
⑸70%酒精洗去多余染料，蒸馏水稍洗
⑹橘黄G液染数秒，蒸馏水洗
⑺95%酒精分色，无水酒精快速脱水
⑻二甲苯透明，中性树胶封片
结果：
肥大细胞深紫色
红细胞橘黄色
其他组织黄色
硫堇染色
试剂：
①硫堇液：硫堇0.5克溶于蒸馏水100毫升，稍加温溶解
②醋酸液：冰醋酸0.2%毫升，蒸馏水100毫升
方法：
⑴组织用中性甲醛生理盐水溶液固定
⑵切片脱蜡至水
⑶硫堇液染色30~60分钟，蒸馏水洗
⑷醋酸水溶液分色数秒，水洗2分钟
⑸用滤纸吸干
⑹二甲苯透明，中性树胶封片
结果：
肥大细胞颗粒呈紫红色，细胞核呈蓝色。
肥大细胞-甲苯胺蓝
肥大细胞-甲苯胺蓝目的：此细胞广泛分布于结缔组织中。
胞质含有异染性颗粒，由肝磷脂和组胺构成。
原理：肥大细胞被染成红-紫色(异染质着染)和蓝色的背景(正染质着染)。
异染性组织染色原理是一种染液染出不同的颜色。
是因为碱性染料的PH值、染料浓度和温度。
蓝色和紫色染料可显出红色，红色染料可显出黄色异染色组织原理。
对照：皮肤固定：10%甲醛技术：4μ石蜡切片设备：染色，蒸馏水稍洗。
试剂：甲苯胺蓝原液：甲苯胺蓝Toluidine Blue O 1.0 gm70%酒精alcohol 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
工作液：甲苯胺蓝Toluidine blue, Stock 5.0 ml1%氯化钠Sodium chloride 45.0 ml新鲜配制，用后丢弃。
警告：避免接触和吸入。
1%氯化钠：氯化钠Sodium chloride 0.5 gm蒸馏水Distilled water 50.0 ml新鲜配制。
安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。
在通风场所进行。
避免接触和吸入。
甲苯胺蓝O：有引起人的胃肠道和血液紊乱报导。
程序：1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 甲苯胺蓝工作液1-2 minutes。
3.蒸馏水稍洗×3。
4. 快速95%和无水乙醇脱水。
5. 二甲苯透明和封固。
结果：肥大细胞紫红色背景蓝色参考文献：Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp282,Battelle Press, OhioLuna L, Manual Of Histologic Staining Methods from the AFIP, 3rd Ed, 1968,pp 162-163, McGraw-Hill, NYCrookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the HistopathologyLaboratory, 2nd ED, 1991, Anatech肥大细胞-甲苯胺蓝对照：皮肤技术：4μ石蜡切片程序：1. 脱蜡至蒸馏水。
甲苯胺蓝染液使用说明书
颜色变化。
准备
使用前新鲜配制甲苯胺蓝工作液。
甲苯胺蓝工作液的配制：1 份甲苯胺蓝染液 A+9 份甲苯胺蓝染液 B，即得甲苯胺蓝工作液。
使用说明
1. 样品处理：石蜡切片样品脱蜡水化：二甲苯脱蜡，2×5min；依次浸入梯度乙醇（无水乙
醇、无水乙醇、95%、85%、75%乙醇）和蒸馏水中各 5min 水化，蒸馏水水洗三遍。
2. 甲苯胺蓝工作液染 1~3min；
3. 蒸馏水漂洗 3 次，
4. 95%乙醇、100%乙醇、100%乙醇快速脱水（每次蘸 10 下，因为在乙醇中可快速褪色）；
5. 二甲苯透明，2×3min，中性树胶封固。
结果
肥大细胞应为蓝紫色/紫红色。
注意事项
1. 需自备梯度乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它
胞，多见于血管周围、黏膜下等。肥大细胞染色意义较大，可用于某些过敏性疾病、肥大细
胞增生性疾病、肥大细胞瘤等的诊断，本产品能够快速染色，且特异性强，效果稳定，能将
肥大细胞的典型形态结构显示清楚。
肥大细胞含有肝素和由组胺组成的颗粒。甲苯胺蓝将肥大细胞染为蓝紫色。由于染料
pH，染料浓度和温度的不同，它可能将细胞染成不同的颜色。蓝色染料可能会有一个红色的
封片剂。
2．第一次使用本试剂盒时建议先取 1~2 个样品做预实验。
温馨提示
为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。
储存温度
2~8℃避光储存。
包装清单
货号
品名
包装
HCY132A
甲苯胺蓝染液 A
10mL
HCY132B
甲苯胺蓝染液 B
100mL
说明书
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肥大细胞染色液(阿利新蓝沙黄法)
简介：
肥大细胞(Mast cell)是疏松结缔组织内常见的细胞，常成群的沿着小血管和淋巴管分布，也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围，一般细胞较大，直径约为20-30μm ，呈圆形或椭圆形，胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。
Leagene 肥大细胞染色液(阿利新蓝沙黄法)能够区分不同类型的异染颗粒，染色后幼稚型肥大细胞颗粒呈蓝色，成熟型肥大细胞颗粒呈红色，对比较为清楚。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 取新鲜组织立即固定于10%中性福尔马林固定液中，常规脱水包埋。
2、 切片厚度5-6μm ，常规脱蜡至水。
3、 用阿利新蓝沙黄染色液滴染。
4、 稍微水洗。
5、 Csaba 脱水剂反复脱水。
6、 二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
幼稚型肥大细胞颗粒 蓝色 成熟型肥大细胞颗粒
红色
注意事项：
1、 肥大细胞染色时，应注意组织要新鲜，取出后立即固定。
2、 如无10%中性福尔马林固定液，可用4%的甲醛生理盐水代替。
3、 如果Csaba 脱水剂不够，可用乙醇替代，但片子易于脱色。
4、 分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色。
编号 名称
DA0049 3×50ml Storage
试剂(A): Csaba 酸化液 50ml RT 试剂(B): 阿利新蓝沙黄染色液 100ml 4℃ 避光 试剂(C): Csaba 脱水剂 250ml
RT 避光 使用说明书
1份
有效期：12个月有效。
相关：
编号名称
DC0032 Masson三色染色液
DF0111 中性福尔马林固定液(10%)
DG0005 糖原PAS染色液
DJ0001 普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法)
PS0013 RIPA裂解液(强)
PW0053 Western抗体洗脱液(碱性)
TE0002 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP微板法)。