活体组织氧化应激活性氧ROS初级荧光测定试剂盒
植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说
植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂是一种旨在通过二甲基-4-亚硝基苯胺，受到单线态氧气-的作用，出现去色现象，由分光光度仪比色分析，定量检测植物组织细胞内单线态氧气活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），以及叶绿体等细胞器的单线态氧气检测。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HClO）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
其中单线态氧气（singlet oxygen；1 O2）是分子氧（O2）的抗磁形式或电激发形式。
通过染料分子，例如孟加拉红（Rose Bengal）、亚甲基兰（Methylene Blue）、卟啉类化合物（Porphyrins）染料的光敏过程中能量转移产生，或过氧化氢和次氯酸的化学反应产生。
单线态氧气可以调节紫外线A辐射的生物学作用、激活各种细胞信号通路等。
单线态氧气会导致植物的光动力损伤（photodynamic damage）和动物心血管问题。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)说明书
植物样品的吸光度值和 0.5mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗氧化 能力为 0.5mM/(0.5g/5ml)=0.5mmol/100g；
血浆(血清)样品的吸光度值和 0.7mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗 氧化能力为 0.7mM；
细胞(组织)匀浆样品的吸光度值和 0.3mM 的 Fe2+的吸光度值相同，该匀浆液蛋白浓度为 0.2mg/ml，则该细胞(组织)样品的总抗氧化能力为 0.3mM/0.2mg/ml=0.15mmol/g； 0.3mM 的抗氧化物质，其吸光度值和 0.6mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则其相对总抗氧化能力为 0.6mM/0.3mM=2。
注意事项： 1、 实验材料应尽量新鲜，样品提取的整个过程最好在 4℃条件下进行；如取材后不能立即 检测，也可以-80℃冻存后再进行测定(应在 1 个月内测定完毕)。 2、 亚铁标准溶液如变为黄色或棕黄色应弃用。 3、 测定 593nm 如有困难，亦可在 585~605nm 范围内进行测定。 4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)即 Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称 T-AOC Assay Kit，是一种采用铁离子还原能力(Ferric Reducing Ability of Plasma,FRAP)来测定样品抗氧化活性的方法，其原理是在酸性条件下样品中的抗 氧化物质还原 Fe3+-TPTZ 产生 Fe2+-TPTZ，呈现出明显的蓝色(紫色)，于 593nm 处有最大 的光吸收，在 Fe3+-TPTZ 过量的情况下测定蓝色物质的生成量即可获得待测样品的还原能 力即总抗氧化能力，由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素，并且由 于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于 10μM，因此血浆等样品中的铁离 子或亚铁离子不会显著干扰 FRAP 法的检测反应，本方法可以对血浆、血清、尿液等各种体 液，细胞或组织裂解液、植物或中草药抽提液或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力进行检测。 该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧高质荧光测定试剂盒
1． 本产品为 20 次操作 2． 操作时，须戴手套 3． 孵育时，须避免光照 4． 建议染色完成后，即刻进行荧光分析 5． 本公司提供膜电位依赖性活性氧检测试剂产品 6． 本公司提供系列活性氧检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定 2． 本产品经鉴定荧光清晰
产品内容
缓冲液（Reagent A） 选择液（Reagent B） 补充液（Reagent C） 染色液（ Reagent D） 产品说明书
毫升 微升 毫升 微升 1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里，染色液（Reagent D），严格避免光照； 有：用于染色孵育 （共聚焦）荧光显微镜：用于观察荧光线粒体 荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于测定线粒体荧光强度
技术背景
超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基 （hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷 氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-） 次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等 细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。氯甲基二氯二 氢荧光素二乙酯（6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate, acetyl ester；CM－H2DCFDA）是 取代二氯二氢荧光素二乙酯（2´,7´-dichlorodihydrofluorescin diacetate；DCFH-DA）的升级产品，一种完全 自由通过细胞膜，并在细胞内长期滞留而不易外漏的染色剂。一旦被过氧化氢、羟自由基或氢氧基、过氧 化基、次氯酸等氧化，便产生荧光。据此测定线粒体活性氧族的浓度。三氟甲氧基苯腙羧基氰化物（carbonyl cyanide 4-trifluoromethoxy henylhydrazone；FCCP）使线粒体膜化学离子梯度消失。
细胞活性氧与氧化应激的关系
细胞活性氧与氧化应激的关系细胞是人体最基本的单位，其正常的生理状态与细胞内环境的平衡有关。
氧化应激是细胞内环境不平衡的重要因素。
在人体中，细胞活性氧（ROS）是一种重要的自由基，可引起氧化应激反应，对细胞产生不良影响。
本文将对细胞活性氧与氧化应激关系进行探究。
一、细胞活性氧ROS是一种由氧气分子通过还原反应生成的自由基。
这些自由基在细胞代谢和生物化学反应中产生，并在正常生理状态下保持相对平衡。
涉及氧化还原反应的生理过程，如细胞呼吸、代谢、机体免疫等均需要ROS参与。
此外，ROS还可以参与信号传递，对于细胞生长、分化和凋亡均有影响。
然而，当ROS积累到一定程度时，会引起细胞氧化应激损伤。
ROS可以攻击细胞内不饱和脂肪酸、蛋白质、DNA等重要分子，导致它们的氧化损伤。
这样的氧化应激会导致细胞功能受损、凋亡、疾病进展等不良后果。
二、氧化应激反应在正常生理状态下，细胞可以通过一系列抗氧化系统来消除ROS。
这些抗氧化系统包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化酶（GPx）等。
这些酶可以将ROS转化为无害物质，避免其造成细胞氧化应激反应。
然而，当抗氧化系统过度消耗，或ROS产生过多时，抗氧化反应也不再有效。
此时，细胞膜和DNA等分子结构会受到氧化应激的损伤，自由基进入细胞结构造成的氧化应激进一步加剧，产生恶性循环。
这样的氧化应激对细胞产生不良影响，可引起心脑血管疾病、神经退行性疾病、癌症等。
三、细胞活性氧与氧化应激关系细胞活性氧和氧化应激是两者之间的因果关系。
ROS在正常生理状态下可以维持细胞代谢和生物化学反应的平衡；而在过量积累时却会引起氧化应激，从而对细胞造成不良影响。
细胞内的一些激素和信号分子，如TGF-β、NF-κB、HIF等，也会调节ROS的生成和消除，参与细胞内环境的平衡调节。
氧化应激反应会诱导细胞自身激活APOPTOTIC程序，引发细胞凋亡。
因此，生物体中存在一系列保护细胞不被ROS引起的氧化应激的反应和修复机制。
活性氧检测试剂盒 说明书
活性氧检测试剂盒 Reactive oxygen species assay kit
货号：CA1410
规格：100-500T
产品内容：
10 mM DCFH-DA in DMSO 活性氧供体 说明书
0.1 ml 1 ml 1份
20 ºC 保存 20 ºC 保存
产品简介：
活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化
物(O2•−, H2O2, •OH, ONOO−, •NO)等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过
程。采用 2,7-dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA)是迄今常用也是较灵敏的细胞内活性氧检探针。
DCFH-DA 没有荧光，进入细胞后被酯酶水解为 dichlorofluorescin (DCFH)。在活性氧存在时 DCFH 被氧化
3. PBS 洗涤细胞 2 次。 三、荧光检测
采用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜图像检测照相，绿色荧光强度代表活性氧水平。也可进行微板荧 光分析仪(multiwell fluorescence plate reader)实时或每 10 分钟分时逐点检测荧光强弱。对于流式细 胞仪可将细胞用胰酶消化 PBS 洗涤后重悬检测。
1. 加入 DCFH-DA 于培养基，推荐初始工作浓度为 10 µM。对不同的细胞和处理，DCFH-DA 工作浓度可 为 100 nM~20 µM，需进行预实验确定合适的浓度。总体稀释倍数应在 1:500~1000 以上以避免 DMSO 对细胞 的影响。以 DMSO 作为溶剂对照。
2. 37 ºC 孵育细胞 30min~至几个小时，通常 30-60min 即可。孵育时间长短与细胞类型、刺激条件、 DCFH-DA 浓度有关。
活性氧（ROS）测定试剂盒说明书
②、波长设置：最佳激发波长 500(50015nm)，最佳发射波长 525 (53020 nm)。也可按照 FITC 荧光检
测条件检测。 ③、结果以荧光度值表示。
四、细胞样本操作步骤：（可用激光共聚焦显微镜观察，也可用于流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光分光度 计测定）
二、试剂组成及保存： 1、0.1ml 10mM DCFH-DA in DMSO，20℃保存。 2、1ml 活性氧供氢体，4-8℃保存。
三、组织样本操作步骤：（可用激光共聚焦显微镜观察，也可用于流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光分光度 计测定）
1、单细胞悬液制备： 方法 1、采用单细胞悬液制备仪制备单细胞悬液。 方法 2、酶消化法： 方法 3、机械法（网搓法）：
本试剂盒仅用于科研实验
1、直接将探针加入培养液中： ①、直接将 DCFH-DA 探针加入无血清培养基中：一般按照 1 ：1000 用无血清培养液稀释 CFH-DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜， 通常对于 6 孔板的一个孔加入稀释好的 DCFH-DA 不少于 1ml。 ②、取一份不加探针，只加入培养基的细胞设为阴性对照管。阳性对照管：取一份已加入探针的细胞，同 时加入活性氧供氢体诱导细胞，推荐该试剂的工作浓度为 20～100µM。 ③、37℃孵育细胞 30min～几小时，通常为 30～60min 即可，孵育时间长短与细胞类型、刺激条件、DCFH-DA 浓度有关。一般阳性对照在刺激细胞 30 分钟左右，即可观察到明显的绿色荧光。 ④、吸去培养液，利用无血清培养液或者 0.01MPBS 反复吹打，肉眼观察瓶底由半透明(细胞单层连接成 片)转为透明，细胞层几乎全部吹打到 PBS 中。 ⑤、将细胞悬液全部收集到 1.5ml 离心管中。用无血清培养液或者 PBS 洗涤 2 次，以充分去除未进入细 胞内的 DCFH-DA。1000rpm/min，5min，吸净上清后加入 PBS 重新悬浮细胞进行测定。
MPT比色法检测试剂盒说明书
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 GMS10095.3 GMS10095.3A GMS10095.3B GMS10095.3C GMS10095.1 GMS10095.2 GMS10095.2 GMS12226
规格 10/50 次 10/50 次
10 次 50 次 50 次 10 次 100 次 20 次 20 次 10 次
3
GMS10014.1 GMS10014.2 GMS10014.3 GMS10014.4 GMS10014.5 GMS10014.6
GMS10015 GMS10016.1 GMS10016.2 GMS10016.3
吸光值比值降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增强
9． 构建膜通道孔诱导开放曲线：纵座标（Y）为吸光值比值（A540/Initial A540），横座标（X）为时间（秒）
注意事项
1． 本产品为 20 次操作 2． 操作时，须戴手套 3． 使用时，避免污染母液，尤其是 GENMED 缓冲液（Reagent A） 4． 线粒体样品中忌用磷酸盐、EDTA、钙镁离子等处理 5． 建议使用未经诱导或抑制处理的样品作为阴性对照 6． 建议孵育完成后，即刻进行检测分析 7． 可以使用 540nm 波长的滤波器或者 440nm 波长的滤波器 8． 可以使用分光光度仪检测，0.2 毫升比色皿替代酶标板 9． 540nm 波长的 0 分钟读数通常 0.8 为理想状态；而 540nm 波长的 0 分钟读数通常 0.2 为理想状态 10．样本测定 1 分钟或其它检测时间读数低于 0 分钟读数表明膜通道孔开放 11．如果膜通道孔为瞬时开放（transient），则吸光读数缓慢降低 12．GENMED 诱导液（Reagent B）含有氯化钙，用户可以使用其它诱导剂替代，例如磷酸盐，二氧化钾
活性氧检测试验方案
活性氧检测试验方案活性氧检测是一种用于评估物质或生物体中产生的活性氧（ROS）水平的方法。
ROS是一类极具活性的氧化物质，可在正常细胞代谢中产生，并参与多种生理过程。
然而，当ROS的产生超过细胞的抗氧化能力时，就会导致氧化应激，对细胞和组织造成损害，并与一系列疾病的发生和发展相关。
为了测量活性氧的水平，可以使用一系列的试剂和方法。
以下是一个可能的活性氧检测实验方案：实验材料：1.活体组织样本（例如细胞培养物、小鼠肝脏组织等）2.PBS缓冲液3.DCFDA（二氟荧光二乙酸盐）染料溶液4.活性氧产生剂（例如H2O2）5.抗氧化剂（例如维生素C）6.血红素（免疫染色用）实验步骤：1.准备工作：a.将DCFDA溶液按照说明书的要求稀释到适当的浓度。
b.用PBS缓冲液洗涤和预处理样本，去除可能影响实验结果的其他物质。
2.观察基础水平：a.取一小部分样本，不加任何试剂，放入显微镜观察台下。
b.使用适当的增强型荧光显微镜观察样本的荧光强度和分布。
3.活性氧产生实验：a.取适量的样本放入显微镜观察台下。
b.添加一定浓度的活性氧产生剂（例如H2O2），混匀。
c.立即在显微镜观察荧光信号的变化。
d.记录荧光信号的强度和分布。
4.抗氧化剂实验：a.取适量的样本放入显微镜观察台下。
b.添加一定浓度的抗氧化剂（例如维生素C），混匀。
c.立即在显微镜观察荧光信号的变化。
d.记录荧光信号的强度和分布。
5.数据分析：a.使用图像分析软件测量荧光信号的平均强度和荧光染色的面积。
b.对每个样本的数据进行统计分析，如平均值、标准误差等。
c.使用统计学方法（如t检验或方差分析）比较不同处理组之间的差异。
总结：通过以上步骤，可以获得活性氧的水平，评估其在不同条件（如活性氧产生剂和抗氧化剂的存在与否）下的变化。
这个实验方案可以用于研究活性氧在细胞和组织中的作用，以及评估抗氧化剂的功效。
氧化应激的指标
氧化应激的指标
氧化应激的指标有很多，以下列出了一些常见的指标：
1. ROS（Reactive Oxygen Species，活性氧）：活性氧是氧化应激的主要物质，可以通过荧光染料或自由基捕捉剂等方法检测。
2. MDA（Malondialdehyde，丙二醛）：MDA是膜脂过氧化反应的产物，是氧化应激的重要指标之一，可以通过比色法或荧光法检测。
3. SOD（Superoxide Dismutase，超氧化物歧化酶）：SOD是一种重要的抗氧化酶，可以检测SOD的活性或基因表达水平来评估氧化应激的程度。
4. CAT（Catalase，过氧化氢酶）：CAT也是一种重要的抗氧化酶，可以检测其活性或基因表达水平来评估氧化应激的程度。
5. GSH（Glutathione，谷胱甘肽）：GSH是一种重要的抗氧化剂，可以通过比色法或荧光法等方法检测。
6. 线粒体膜电位（Mitochondrial membrane potential，MMP）：MMP是线粒体功能的重要指标，氧化应激可改变MMP，可通过荧光染料检测。
7. DNA氧化损伤：DNA氧化损伤是氧化应激的重要标志之一，可以通过单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）或8-OHdG 等指标检测。
8. 炎症因子：氧化应激可引起炎症反应，相关炎症因子如TNF-α（Tumor Necrosis Factor-α）和IL-6（Interleukin-6）等可以作为氧化应激的指标之一。
细胞内氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书中文版主要用途
细胞内氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途细胞内氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂是一种旨在通过二甲基4亚硝基苯胺，受到单线态氧气一的作用，出现去色现象，由分光光度仪比色分析，定量检测细胞内单线态氧气活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。
其适用于各种活体细胞(动物、人体等)内单线态氧气的检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景超氧自由基阴离子(6UPerOXideradiCaI；O2过氧化氢(hydrogenperoxide；H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxylradical；0H)、过氧化基(ρeroxylradical；R00'氢过氧自由基(hydroperoxyl；HOO烷氧自由基(alcoxy!radical).氮氧基(niiricOxide；NO)、过氧亚硝基阴离子(PerOXyniIrileanion；ONOO)次氯酸(hypochlorousacid；HCl0)、半酸自由基(SemiqUinoneradiCaI)、单线态氧气(Singletoxygen)等细胞内活性氧族(ReaciiveOxygenSpecies;ROS)的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
其中单线态氧气(SinglelOXygen；I02)是分子轨(O2)的抗磁形式或电激发形式。
通过染料分子，例如孟加拉红(RoSeBengal),亚甲基兰(MelhyIeneBIue)、吓咻类化合物(PorPhyrinS)染料的光敏过程中能量转移产生，或过氧化氢和次氯酸的化学反应产生。
单线态氧气可以调节紫外线A辐射的生物学作用、激活各种细胞信号通路等。
单线态氧气会导致植物的光动力损伤(photodynamicdamage)和动物心血管问题。
基于二甲基・4.亚硝基苯胺(NH-DimeihyLp-Iiiirosoaniline;PNDA或RNO)作为单线态氯气的选择性受体，在单线态氧气的存在下，产生去色作用，在分光光度仪下(44Onm波长)，呈现吸光峰值的降低。
细菌氧化应激活性氧(ROS)高质荧光测定试剂盒产品说明书
细菌氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细菌氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒是一种旨在通过透膜荧光染色剂氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯，在细菌氧化条件下，产生荧光，来定量检测细菌活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种实验用细菌菌株氧化应激活性氧的分析。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定，滞留持久，荧光清晰。
技术背景细菌作为模式生物，是环境化学毒性研究的常用工具。
活性氧的检测可以用于诸如多环芳烃化合物或重金属的毒性作用以及修复（remediation）的评价指标。
超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯（6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate, acetyl ester；CM－H2DCFDA）是取代二氯二氢荧光素二乙酯（2´,7´-dichlorodihydrofluorescin diacetate；DCFH-DA）的升级产品，一种完全自由通过细胞膜，并在细胞内长期滞留而不易外漏的染色剂。
细胞ROS测定试剂盒说明书1
用户自备
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（GMS12024）：用于细胞脱离 完全细胞培养液（GMS12052）：用于细胞操作所需的培养基 15 毫升锥形离心管：用于细胞操作的容器 1.5 毫升离心管：用于细胞染色的容器 血细胞计数仪：用于细胞计数 台式离心机：用于沉淀细胞 细胞流式仪：用于细胞荧光分析 （共聚焦）荧光显微镜：用于观察荧光细胞
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c) 或使用荧光分光光度仪检测（定量检测）：
1）移取 400 微升上述细胞悬液到 1 毫升比色杯
2）加入
微升 GENMED 保存液（Reagent D）
3）上下倾倒混匀数次
4）放进荧光分光光度仪：激发波长 540nm，散发波长 590nm――
RFU 增高，表明活性氧族（ROS）含量高
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二、 直接法
活体组织氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒 细胞内氧化应激活性氧（ROS）比色法定量检测试剂盒
细胞内氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂盒
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A
GMS10111.1 v.A
GENMED 细胞内氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
GENMED 细胞内氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氢溴化乙啶， 在细胞氧化条件下，产生红色荧光，来定量检测细胞内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。 该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养 学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。
碧云天活性氧检测试剂盒 S0033S S0033M 说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号活性氧检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0033S 活性氧检测试剂盒 >100次 S0033M活性氧检测试剂盒>500次产品简介：活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit ，也称ROS Assay Kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA 进行活性氧检测的试剂盒。
DCFH-DA 本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH 。
而DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。
细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH 生成有荧光的DCF 。
检测DCF 的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。
本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂Rosup ，以便于活性氧的检测。
Rosup 是一种混合物(compound mixture),浓度为50mg/ml 。
本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。
本试剂盒S0033S 包装可以测定100-500个样品，S0033M 包装可以测定500-2500个样品。
包装清单：产品编号 产品名称 包装 S0033S-1 DCFH-DA (10mM)0.1ml S0033S-2 活性氧阳性对照(Rosup, 50mg/ml)1ml —说明书1份产品编号 产品名称 包装 S0033M-1 DCFH-DA (10mM)0.5ml S0033M-2活性氧阳性对照(Rosup, 50mg/ml)5ml —说明书1份保存条件：-20ºC 保存，一年有效。
注意事项：探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
植物细胞氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂盒产品说
植物细胞氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物细胞氧化应激活性氧羟自由基原位荧光染色试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂羟苯基荧光素，与细胞内羟自由基的反应，产生绿色荧光，来测定细胞内羟自由基活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢等的研究。
其适用于各种新鲜植物组织（例如根尖、叶片等）和培养细胞等细胞内氧化应激活性氧羟自由基的分析。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定，荧光清晰。
技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
其中羟自由基或氢氧基具有极度反应性和毒性，同时半衰期短（10－9至10－10秒）。
其产生主要是水分子受到高能量放射后裂解、过氧化物和次氯酸反应、过氧化氢的还原、超氧化物的歧化等形成。
在植物组织中，羟自由基将启动放射性诱导损伤、攻击植物蛋白和膜脂而引起氧化损伤。
羟苯基荧光素（Hydroxyphenyl fluorescein；2-[6-(4’-Hydroxy)phenoxy-3H-xanthen-3-on-9-yl]benzoic acid；HPF）是一种完全自由通过细胞膜的染色剂，一旦与羟自由基反应，产生脱苄基（o-dearylation）作用，生成强烈荧光的荧光素（fluorescein）。
人活性氧(ROS)ELISA检测试剂盒操作注意事项说明
人活性氧(ROS)ELISA检测试剂盒操作注意事项说明
人活性氧(ROS)ELISA检测试剂盒操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封(低温干燥)保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
人活性氧(ROS)ELISA检测试剂盒性能
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于
0.9900。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于1.0 IU/ml。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月。
ros检测试剂盒原理
ros检测试剂盒原理
ros检测试剂盒的原理主要是通过特定的荧光探针来检测细胞或组织中的活性氧(Reactive Oxygen Species, ros)水平。
活性氧是一类具有高度反应性的化学物质，包括超氧阴离子、过氧化氢和羟自由基等。
它们在生物体内产生并参与许多生理和病理过程，如免疫反应、炎症、氧化应激和衰老等。
ros检测试剂盒通常包含以下几种主要成分：
1. 荧光探针：荧光探针是一种能够与活性氧发生特异性结合的化合物，其分子结构中通常含有一个或多个荧光基团。
当荧光探针与活性氧结合时，荧光基团的结构和/或位置发生改变，导致荧光强度发生变化。
这种变化可以通过荧光光谱仪或其他相关设备进行实时监测和定量分析。
2. 缓冲液：缓冲液用于维持试剂盒内溶液的pH值稳定，以保证荧光探针与活性氧的结合效果。
3. 酶抑制剂：酶抑制剂可以抑制某些可能影响ros水平的酶活性，从而确保检测结果的准确性。
4. 标准品：标准品是一种已知活性氧浓度的溶液，用于建立ros 浓度与荧光强度之间的标准曲线。
通过将待测样品的荧光强度与标准曲线进行比较，可以计算出待测样品中的活性氧浓度。
ros检测试剂盒的使用方法如下：
1. 将待测样品与试剂盒中的缓冲液、酶抑制剂等成分混合均匀。
2. 向混合液中加入荧光探针，使其充分结合活性氧。
3. 使用荧光光谱仪或其他相关设备对混合液进行荧光强度测量。
根据标准曲线，计算出待测样品中的活性氧浓度。
需要注意的是，不同品牌的ros检测试剂盒可能采用不同的荧光探针和检测方法，因此在选择和使用试剂盒时应仔细阅读说明书并遵循操作规程。
活体组织氧化应激活性氧ROS初级荧光测定试剂盒
活体组织氧化应激活性氧( ROS )初级荧光测定试剂盒产品说明书主要用途活体组织氧化应激活性氧 ( ROS)初级荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氯荧光乙酰乙酸盐，在组织氧化损伤条件下，产生荧光，来定量检测组织内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
适宜于活体动物组织的分析。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。
技术背景超氧自由基阴离子( superoxide radical ；O2- )、过氧化氢( hydrogen peroxide ；H2O2 )、羟自由基或氢氧基( hydroxyl radical ；OH- )、过氧化基( peroxyl radical ；ROO- )、氢过氧自由基 (hydroperoxyl ；HOO )、烷氧自由基( alcoxyl radical )、氮氧基( nitric Oxide ；NO- )、过氧亚硝基阴离子( peroxynitrite anion；ONOO- )次氯酸( hypochlorous acid；HOCl )、半醌自由基( semiquinone radical )、单线态氧气 (singlet oxygen )等细胞内活性氧族 ( Reactive Oxygen Species；ROS )的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
2',7'-二氯荧光乙酰乙酸盐( 2',7'-dichlorofluorescein diacetate ，DCFH-DA )一种完全自由通过细胞膜的染色剂。
一旦被过氧化氢、过氧化基、过氧亚硝基阴离子等氧化，便产生绿色荧光。
据此测定组织细胞内活性氧族的浓度。
产品内容保存方式保存染色液( Reagent B)在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证12 月用户自备50 毫升锥形离心管：用于组织收集的容器15 毫升锥形离心管：用于工作液配制和组织处理的容器1.5 毫升离心管：用于工作液配制的容器6 孔细胞培养板：用于组织染色的容器培养箱或恒温水槽：用于染色孵育荧光显微镜：用于观察荧光组织荧光分光光度仪：用于组织荧光定量检测实验步骤方法一：新鲜组织薄片定性检测实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液( Reagent B)置入冰槽里融化，稀释液(Reagent C)放进37℃恒温水槽里预热。
动物细胞氧化应激活性氧（ROS）光泽精化学发光法定量检测试剂盒说明书
动物细胞氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒说明书一、检测原理动物细胞氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒是血液卵磷脂胆固醇乙酰转移酶(LCAT)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过非界面性的水溶性单体底物，在磷脂酶或乙酰转移酶的水解下，其释放的产物发生吸收峰值的变化，即采用比色法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种血液样品(动物、人体等)卵磷脂胆固醇乙酰转移酶的活性检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
二、样品收集、处理及保存方法血液样品分为耳静脉采血、颈静脉采血、前腔静脉采血、心脏采血、翅静脉采血，应根据工作实际选择合适的采血方式。
全血样品是在样品中加抗凝剂，可用0.1%肝素、阿氏液、3.8%枸橼酸钠。
我们通常做免疫效果抗体检测需要血清，血液在采集后室温静置2小时以上，冬季需要加温，高速离心，或者4度过夜，抽取血清。
注意事项：1每份样品一定按要求采够量，比如禽血清一般要求不少于0.5毫升，猪血清一般要求不少于1毫升。
2血清样品要清亮、无溶血、无变质。
3样品容器上贴详细标签4尽量防止或避免反复冻融。
组织样品：采集的每个组织块要单独放一个已消毒的容器内，贴详细标签，防止组织间相互污染，注意消毒，以防散毒。
做好个人防护。
分泌物和排泄物：常用的就是禽流感咽喉拭子和泄殖腔拭子的采集。
容器中首先放入含有抗菌素的PH值为7.0-7.4的PBS液，原则上咽喉、泄殖腔拭子分别放置。
抗生素的浓度为青霉素2000IU/ml,链霉素2mg/ml,庆大霉素(卡那霉素)50ug/ml,制霉菌素10000IU/ml,粪便和泄殖腔拭子所用的抗生提高5倍。
加入抗生素后应调整PH值至7.0-7.4。
粪便样品：常用的是禽流感野鸟粪便的采集，注意样品一定为新鲜粪便。
皮肤样品三、储存条件14℃或-20℃四、试剂盒内容标准品样本稀释液检测抗体-HRP20×洗涤缓冲液底物A底物B终止液说明书自封袋五、操作方法1. 从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
活性氧ROS分析试剂盒H2DCFDA
活性氧ROS 分析试剂盒 H 2DCFDA说明书修订日期说明书修订日期：：2015.07.13Cat number ：KGAF018Store at -20℃ for 6months ，避光For Research Use Only （科研专用）一、产品描述我们提供还原型具有细胞膜透性的ROS 荧光探针衍生物。
还原型与乙酰化形式的2'，7'-二氯荧光素（DCF ）是无荧光的乙酸酯基团，在胞内可以被酯酶氧化或水解，从而脱去，生成带电荷形式的探针。
利用合适的激发光源可以很方便地在各种检测平台上观察测量，如流式细胞仪、荧光酶标仪和荧光显微镜。
由于染料很容易受到光氧化，在进行实验时必须必须全程注意避光。
相比较其非羧基衍生物，羧基-H2DCFDA 带有额外的负电荷。
羧基-H2DCFDA SE 是带有一个氨基活性的琥珀酰亚胺酯基团,可与与胞内成分以共价形式更持久的结合。
二、产品包装三、操作说明制备储液工作液必须新鲜配制，实验结束即可丢弃稀释过的多余探针，染料在水溶液中更容易氧化分解，请尽快用完。
在最低探针加载浓度的条件下，本试剂盒提供的探针，可以满足切片或悬浮细胞（设置加载孵育液体积每个反应不超过2mL 的情况下）至少1000 TESTS 。
一般注意事项一般来说，只要能获得足够的荧光信号即可，尽量选择最小浓度的AM 酯，尽量减少AM 酯的水解副产物（甲醛和乙酸）的富集。
加载条件的选择尽可能考虑原有细胞的自然生长条件。
一些研究者给出的建议是：生理温度较之室温对于染料的加载效果更好。
综合考虑，我们推荐您在进行ROS 检测时，优先使用具有细胞膜透性的ROS 探针，如羧基-DCFDA 或者荧光素二醋酸（FDA ）。
加载探针1.1 制备活细胞悬浮液（106细胞/mL ）。
注意：对象是贴壁细胞的话，条件与悬浮细胞类似。
用PBS 稀释AM 加载溶液（参见步骤2）浸没贴壁细胞（或细胞爬片）。
1.2 用PBS 或者HBSS 稀释10mM 的AM 原液，制成AM 加载工作溶液（终浓度为1~10µM ）。
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活体组织氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒
产品说明书
主要用途
活体组织氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氯荧光乙酰乙酸盐，在组织氧化损伤条件下，产生荧光，来定量检测组织内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
适宜于活体动物组织的分析。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
2',7'-二氯荧光乙酰乙酸盐（2',7'-dichlorofluorescein diacetate，DCFH-DA）一种完全自由通过细胞膜的染色剂。
一旦被过氧化氢、过氧化基、过氧亚硝基阴离子等氧化，便产生绿色荧光。
据此测定组织细胞内活性氧族的浓度。
产品内容
清理液（Reagent A）300毫升
染色液（Reagent B）1毫升
稀释液（Reagent C）200毫升
说明书1份
保存方式
保存染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证12月
用户自备
50毫升锥形离心管：用于组织收集的容器
15毫升锥形离心管：用于工作液配制和组织处理的容器
1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器
6孔细胞培养板：用于组织染色的容器
培养箱或恒温水槽：用于染色孵育
荧光显微镜：用于观察荧光组织
荧光分光光度仪：用于组织荧光定量检测
实验步骤
方法一：新鲜组织薄片定性检测
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀释液（Reagent C）放进37℃恒温水槽里预热。
然后移出25微升染色液（Reagent B）到新的15毫升锥形离心管，加入2.5毫升稀释液（Reagent C)，混匀后，将染色工作液置入暗室里。
然后进行下列操作。
1．手术取出动物组织
2．放进预冷的50毫升锥形离心管
3．加入3毫升清理液（Reagent A）浸泡15秒
4．用镊子取出组织，用无菌绵纸吸干
5．即刻用刀片切离组织为1cm X 1cm大小的片状组织
6．用镊子将组织薄片放进6孔培养板的一个孔
7．加入2.5毫升含有染色液（Reagent B）和稀释液（Reagent C）的染色工作液
8．放进37℃培养箱孵育20分钟，避免光照（注意：如果组织薄片较厚，可以增加孵育时间至60分钟）
9．小心抽去染色工作液
10．加入3毫升清理液（Reagent A）
11．用镊子将组织薄片放在载玻片上
12．压片
13．即刻在荧光显微镜下观察（定性检测）：激发波长490nm，散发波长520nm――绿色荧光增强，表明活性氧族（ROS）含量高
方法二：组织匀浆定量检测
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀释液（Reagent C）放进37℃恒温水槽里预热。
然后移出25微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，加入990微升稀释液（Reagent C)，混匀后，将染色工作液置入暗室里。
然后进行下列操作。
1．手术取出动物组织，并秤重以确定组织重量
2．移取1克组织，放进预冷的50毫升锥形离心管
3．加入3毫升的清理液（Reagent A）
4．用镊子取出组织，用无菌绵纸吸干
5．即刻用刀片切碎组织
6．放进一个预冷的15毫升锥形离心管
7．加入5毫升预冷的稀释液（Reagent C）
8．涡旋震荡5秒，充分混匀
9．即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
10．在冰槽里用研磨棒匀化组织（注意：切莫过度匀化）
11．将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管
12．置入冰槽里备用
13．移取5微升组织匀浆物进行蛋白定量检测
14．移取50微升组织匀浆物（样品）或50微升稀释液（Reagent C）（背景对照）到1毫升石英比色杯里
15．加入950微升升含有染色液（Reagent B）和稀释液（Reagent C）的染色工作液16．上下倾倒混匀
17．放进37℃恒温水槽孵育20分钟，避免光照
18．即刻放进荧光分光光度仪检测：激发波长490nm，散发波长520nm——（样品RFU-对
方法三：组织匀浆微量检测
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置入冰槽里融化，稀释液（Reagent C）放进37℃恒温水槽里预热。
然后移出10微升染色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，加入200微升稀释液（Reagent C)，混匀后，将染色工作液置入暗室里。
然后进行下列操作。
1．手术取出动物组织，并秤重以确定组织重量
2．移取200毫克组织，放进预冷的15毫升锥形离心管
3．加入1毫升的清理液（Reagent A）
4．用镊子取出组织，用无菌绵纸吸干
5．即刻用刀片切碎组织
6．放进一个预冷的15毫升锥形离心管
7．加入1毫升预冷的稀释液（Reagent C）
8．涡旋震荡5秒，充分混匀
9．即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
10．在冰槽里用研磨棒匀化组织（注意：切莫过度匀化）
11．将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管
12．置入冰槽里备用
13．移取5微升组织匀浆物进行蛋白定量检测
14．移取50微升组织匀浆物（样品）或50微升稀释液（Reagent C）（背景对照）到1毫升石英比色杯里
15．加入200微升升含有染色液（Reagent B）和稀释液（Reagent C）的染色工作液
16．上下倾倒混匀
17．放进37℃恒温水槽孵育20分钟，避免光照
18．即刻放进荧光酶标仪检测：激发波长490nm，散发波长520nm——（样品RFU-对照RFU）＝实际RFU：增加，表明活性氧族（ROS）含量高
注意事项
1．本产品为20次（1克组织）、100次（200毫克组织）、500次（200毫克组织，酶标板）或40次（组织薄片）操作
2．建议使用新鲜组织，手术切除后1小时内的样品
3．操作时，须戴手套
4．孵育时，须避免光照
5．如果组织薄片较厚，可以增加孵育时间至60分钟
6．组织匀浆时，切莫过度
7．建议组织染色完成后，即刻进行荧光定量或定性分析
8．本公司提供阳性对照甲萘醌溶液，观察组织荧光增强现象
9．本公司提供系列活性氧检测试剂产品
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定荧光清晰。