羟基喜树碱对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响_胡国信

病 毒性肝炎慢性化
、
重症 化基础与临 床研 究进 展 学 术 会 议论 文 汇 编
肝脏
邹 勇”
1 2
. .
K 细 胞 在 病 毒诱 导 的 急 性肝衰 竭 中通 过
s
Fa s / Fa
陈韬
* 1
L和 K G
,
O /
KG
`
OL 途 径增 强 对肝细胞 的杀伤
朱传 龙
2
` ` ` ’ 韩梅芳 王 洪 武 严 伟 民 宋 戈 武泽光 王 晓 晶
, ,
肝 细胞
,
有 较 多肝 细 胞 变 性 和 细 胞核 溶解
。
9 成 片 的 出 血性 坏死 h
残存 的肝 细胞 肿 胀
坏 死 区 可 见 大量 炎 细胞
。
肠 道病理 改变 光镜 下 见各 对 照 组肠 绒毛 完 整
无 上皮脱 落及 碎 屑 形成
D 组 部 分绒 毛 不 整
水肿 及炎 细胞 浸 润
一
,
8周 2 0
,
只雄
性 B 吐 B z C 小 鼠(体 重 为 1 8
G 欲N 肝坏死组
,
2 5克 )
,
随机 分为 (生 理 盐水 对 照 组
,
,
A组 )
,
;
,
(廿 S组
,
B组);
l (G a
N组
。
C 组 )(
P L
SI
D 组 )各 4 5
:
只
。
各 组分 5个 时 间点 (2
6
,
9
;
,
12
.
4 h 2 )
每个 时 间点 9 只 小 鼠
,
) 指 标 检测 2 ( 性信号 变化
肠组 织 S C
;
.
①
.
l E 染 色观察 肝脏及 肠道 病理 改 变
t t m l e Bo
。
A 切检 测 ; ③ 免疫 ② 血 清丙氨 酸氨 基转 移酶 (
一p
.
组化 方法 观察 小 鼠肠 道 p l g
s ④ We
哪 C (S C为 多聚 免疫 球 蛋 白受体
共同第一作 者 ;
:
#
通 讯作 者
e一
mi l a
:
n q
n i
t j 护h
t j .
:
m. u
e d
n c
联 系方式
湖北 省武汉 市解放 大道 l 的 5号 (邮编
4 30 30);
电话
:
027一 5366239一
、
5 3 6 6 2 5 15
N K细 胞是 一类 具 有多 种 免疫 学功 能的 免疫 细胞
。
T 法 )检测 细胞 增 殖情 况
,
找出 H c P T对
H S C 一 T 6 细胞 增 殖抑 制 的 最佳作用 浓 度 ;
流 式细 胞术 检 测 细胞 凋亡 率 ; 透射 电镜 下 观察 细 胞 凋 亡 的形态
结果 M
;
学 变 化 情况
;
琼脂 糖 凝 胶 电泳法 检 测 D N A 片段 化
P<. 0
t
,
沈阳
n 00 1
目的
:
c 通过 观 察急 性肝 坏死小 鼠模 型肠 道 分 泌 成 分 ( S e
。
S) C
,
免疫 球蛋 白 ( A I 醉 )的 表
一
达 变化
研 究急 性肝 坏死 小 鼠肠 道免疫 屏 障损伤 的机 制 : : l N 方法 (l ) 内毒素 (廿 ) S 及 D 一 氨及 半乳 糖 (G a ) 联合 腹 腔注 射建 立 急性肝 坏死 模 型 将 6
竭的发 病过 程 中起 着至 关重 要 的作 用
s 压a s L 和 N K G Z D八 K C ZD L途 径 所诱 导 的 肝 其 杀 伤 活 性 主要依赖 F a
轻 基 喜 树碱 对大 鼠肝 星 状 细 胞 增 殖与 凋 亡 的影 响
胡 国信 一 附属 医 院感染 科
L 和 细 胞 毒 受体 N (
我 们 发现
s 慢 加急性 肝衰 竭 患者外 周血 N K 细 胞 上 表达 的 F a
0 P 3 K
和 N K p 4 6 )水平 较之 轻
中度慢 性肝 炎患 者有统计学差 异
细胞损伤
。
这些结果 表 明
,
,
N K 细 胞 在急性 肝 衰竭 和 H B V 感 染导 致 的 慢加急性 肝 衰
,
染后 4 8 小 时肝 脏 N K细胞 中显 著上 调
通 过 在感 染后 2 4 小 时耗竭 N K细胞
。
小 鼠 的生 存率 可 以从 0% 显著 提
高到 2 .2
( N
22%
。
一 高度 活化 的肝 脏 N K 细胞在 体外 对 M H v 3感 染 的肝 细胞 表现 出较 强 的杀伤 活性
但 是该 杀
c J 小 鼠肝脏 中的 N K l b
。
在感染 后 4 8 小 时达 到高峰
。
。
,
并 维持在 高水平 状态 直至 小 鼠死亡
F 细胞 杀 伤 活性 以 及 胞 内 I
,
而外 周血
F一 a
、
脾脏 和
骨髓 的N K 细 胞 数 量则 明显 下 降
活 化标 志 c D 6 9
N
一
,
和 TN
水 平 均在 感
半定量 分析 小 鼠肠道 S C 蛋白
:
、
l g R 的胞 外 段 部 分
I 必 的形 成 ) 负责 S
.
、
I
必阳
I 醉蛋
白表 达变化 ; ⑤ e R
,
l a
一
t m i
e
P C R 方 法检 测
m R N A 相对 含量
结 果 : (1 )
H E 染色
:
肝脏 病理 改变
。
A组:
肝 小 叶 结 构清 楚
。 ,
.
和 大 鼠正 常 肝细胞 株 ( B
.
R L一3 ) A
分别 在实
验组 (分别 以 含 H C盯 浓度为 0
,
.
,
.
6 0
3 0 12 5 0 2 5 0 5
,
.
,
,
l
,
2 4
,
,
8 16 32 m
,
,
叭 的培养 液作 用)
,
和 对 照 组 (单 纯 培 养 ) 中体 外 培养 2 4 h
应 用 四 甲 基偶 氮 哇 盐 法 ( M
、
罗小 平
,
l 宁琴 #
华 中科技大 学 同济 医 学 院附属 同济 医 院感染科 安 徽 医科 大 学附属 省 立 医 院感染科 (安徽 合肥
感染 性疾病研究所 (湖北武 汉 4 3 0
)
30 )
u .
30 )
.
2 3000 1
3
*
3 0 华 中科技 大 学 同济 医 学院 附属 同济 医 院儿科 (湖 北 武汉 4
,
我们对 H B V 慢 加 急肝 衰竭 患者 的外周 血 P B M C进 行 了 相关 检测
l b / c J 小 同时我们采用 了 M H V 一 3诱 导 的 B a
,
鼠暴发 型 肝 炎模 型 进行 了 N K 细胞 的功 能学 研究
细胞 数 量显 著上 升
,
。
研 究结 果显 示
、
M H V 一 3 感染 后 B a l
,
大 鼠正 常肝 细 胞 株 ( B
R卜
) A增 殖 的影 响
。
.
确定 H C盯 的 给药 最佳 浓度 ; 探讨 H C P T 对 体外 培养 的大 鼠肝 星
SC一T 6 )
,
.
状 细胞 的增 殖 与凋 亡 的影 响
方 法 大 鼠肝星 状细 胞株 ( H
0 0 8 0 0 16 0 0 3 1 0
,
,
以 中央 静脉 为 中心
。
肝 索呈放 射状 排列
,
肝细 胞完 整
细胞 肿胀 肿胀 细胞
, ,
,
肝血 窦清 晰
B组 :
肝 细胞有 轻度 肝细 胞水肿
。
有个别 点状 坏死
;
,
C组 :
多处 点灶状 坏死
,
,
肝
少 许肝 细胞 可 见 嗜酸性 变
:
D组:
;
2 肝脏 有 少量 点状坏 死 h
,
6 肝 脏 出 现 多处 点状坏 死 h
s 伤活 性 可 以 被 F a
L 和 N K G Z D 单 克 隆阻 断抗 体所 阻 断
在M H V
。
一
3 诱 导 的小 鼠模 型
中
,
Fa s L 和 细 胞 毒受 体
P K
0 和 N K P 4 6 ) 在病毒感 染后 肝 脏 N K 细胞 上 高度表 达 3
, 。
通 过进 一 步对 H B v 感染 患 者 的病例 对 照 研究后
2
.
2 % 4 ,
。
2 6 2 5% 0 sm .
5 6 5%
,
4 7 0 5%
.
8 7 6%
与对 照 组 ( 4 8 9 %
,
1 80%
.
)相 比
,
差 异有 显 著 性 ( F = 3 4 2 4
,
p
<
0 0 1)
昨 的 H C盯 作 用 H S C