残留溶剂GC检查方法的设计与验证.pptx

非极性柱
弱极性柱
中低极性柱
中等极性柱
商品名
DM-1, DB-1, HP-1, SPB-1, BP-1, SE-30, Rtx-1, ZB-1, AT-1, CP-Sil5CB等
DM-5, DB-5, HP-5, SPB-5, BP-5, SE-52, Rtx-5, ZB-5, PE-5,SE-54, CP-Sil8CB等
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以下三点注意：
FID－质量型检测器，对有机物均有响应，只 是对难电离的卤代烃和氮/磷化合物灵敏度比 ECD、NPD检测器低很多。
ECD－半选择性的检测器，对多种类型化合 物均有响应。如果含有其他非卤代烃溶剂， 应进行系统适用性试验考察分离度。＊＊
如果采用FID检测器，同时又采用填充柱测定 三氯甲烷，灵敏度达不到限度要求。＊
检测器：原则是避免流出色谱柱的组分冷凝 。FID检测器通常设置为300ºC。
顶空瓶平衡温度：温度越高，蒸汽压越高，顶空气 体的浓度越高，分析灵敏度越高。待测组分的沸点 越低，对温度越敏感。但温度的改变只影响分配系 数K，并不影响相比β。
例如水溶液中的甲醇、甲乙酮、甲苯、正己烷 和四氯乙烯，80ºC平衡温度与40ºC平衡温度相比 ，甲醇在顶空气体中的浓度增加5.15倍，甲乙酮浓 度增加2.61倍，甲苯只增加25%，而正己烷和四氯 乙烯，分别增加2.6%和10.4%。
三、供试品溶液的配制
不可超声或加热助溶＊ ，以免残留溶剂 挥发；如果顶空进样，样品置顶空瓶封 盖之后可以超声或加热溶解。
大颗粒样品不可以研磨取样，只能取原 态样品（或冷冻粉碎）。
顶空进样方式要求对照品配制与供试品 配制方法应绝对一致，否则顶空瓶中气 液平衡状态有差异（基质效应）。
对照品配制最好采用标准加入法。
WAX
AT-225, OV－225等
化学成分 50％氰丙基甲 聚乙二醇 硝基对苯二酸
基聚硅氧烷
（PEG） 改性的聚乙二醇
六、温度
色谱柱：初温应接近样品中最轻组分的沸点 ，而终温则取决于最重组分的沸点，升温速 率则要依样品的复杂程度。
进样口：一般接近沸点最高的组分，但要低 于易分解组分的分解温度。常用的条件是 250ºC。
当待测溶剂在有机相中的分配系数明显大于水相（ 例如三氯甲烷），对顶空进样来说采用有机相如 DMF为溶剂不是很好的选择（K大，灵敏度低）； 如果样品也只能在有机相中溶解，建议采用混合液 。
直接进样：
水、合适的有机溶媒或混合液。对于非极性 色谱柱，水对柱有影响，会缩短柱的使用寿 命。
助溶方式：
有报道加5%SDS助溶。 顶空小平加盖后可超声加热助溶
四、顶空瓶中样品体积
顶空样品瓶中的样品体积（Vs）对分析结果影响很 大，因为它直接决定了相比β。
Cg＝Co/（K＋β）其中β＝Vg/Vs，K＝Cs/Cg，当 K>>β时，样品体积改变对灵敏度影响很小。
当K<<β时，影响很大。
例如，分析水中的二氧六环和环己烷（三氯甲烷） ，60ºC平衡，两者的K分别为642、0.04。当样品体 积由1ml增加至5ml，二氧六环的峰面积只提高了 1.3％，而环己烷却提高了452％。根据实际经验来 说，20ml顶空瓶样品装量为5ml比较适当。
五、色谱柱
残留溶剂检查大多需要较高的分离度和检测 灵敏度，通常采用毛细管色谱柱。填充柱口 径大，造成溶剂峰扩散，检测灵敏度低＊。
实践证明，使用非极性至中等极性色谱柱， 配合适当柱温梯度可分离大部分有机溶剂。 通常当待查溶剂数目仅两、三种时，可用极 性较强的色谱柱，出峰快，分析时间短；当 溶剂数目较多时，还是优选非极性至中等极 性柱分离较好。
二、溶媒
选择原则：溶解样品，并对色谱柱无损坏
例如直接进样不能含GC不能分析的无机盐
顶空进样：
首选水，其次DMF、DMSO、不挥发酸碱溶液， 不可使用盐酸溶液和氨水，可选择在80～90°C加 热能溶解样品的试剂。温度太高爆瓶
如待查成分为苯、甲苯、三氯甲烷等水溶性不好的 溶剂，可采用混合液，即先用少量乙醇或甲醇溶解 待查溶剂再用水稀释。
残留溶剂GC检查方法的设计与验证
－毛细管检查方法
高青 北京市药品检验所
一、检测器 二、溶媒 三、供试品溶液的配制 四、顶空瓶中样品体积 五、色谱柱 六、温度 七、进样方式 八、提高灵敏度 九、提高分离度 十、未知峰归属 十一、方法验证
一、检测器
FID（火焰电离）、 NPD（热表面电离）和 ECD（化学电离） ，应用范围分别为有机物 、氮/磷化合物、电负性物质（卤代烃）。 多数情况下，三氯甲烷、DMF、DMSO均用 FID检测，但需采取一些措施提高检测灵敏度 。 四氯化碳则必须用ECD检测器。
DM-35, DB-35, HP-35,SPB-35, BP-35, Rtx-35, ZB-35, 等
DM-1701, HP-1701, SPB-7, ZB-1701, Rtx-1701, CP-Sil19CB等
化学成分 100％二甲基 聚硅氧烷
5%苯基-甲基聚 35%苯基65%甲基 14%氰苯基
硅氧烷
聚硅氧烷
86%甲基聚硅
氧烷
中等/强极性 极性柱
极性柱
商品名 DB-225,
DB-WAX, DB-FFAP,
HP-225, SP-225,
HP-
HP-FFAP,
INNOWAX, CP- FFAP，
BP-225, DB-23，
DB-WAXetr, OV-3501 CP-WAX,ZB- 等
Rtx-225,
实际工作中往往是在满足灵敏度的条件下，选 择较低的平衡温度。过高的温度可能导致某些组分 的分解和氧化。一般采用高沸点溶剂时，样品比较 稳定的情况下，推荐80ºC左右的平衡温度。
七、进样方式
作为残留溶剂检查，顶空进样有许多优越性 ，不需要对样品进行特殊处理，不用担心样 品中不挥发组分对GC分析的影响。直接进样 对仪器要求低，由于部分实验室不具备顶空 进样器，该方法的应用也具普遍性。
进样方式选择需注意的几点：
对于待测溶剂在溶解样品的溶剂中溶解度小 （分配系数小）的情况下，例如三氯甲烷在 水溶液中，采用顶空进样方式测得的灵敏度 将大于直接进样；反之，例如甲醇与水互溶 性好，直接进样的灵敏度将大于顶空进样。
测定二氯甲烷、三氯甲烷等卤代烃时，如果 溶剂为水，直接进样容易造成FID检测器灭火 ，此时优选顶空进样。