16-17消毒与细菌检查
消毒管理办法三十一条
消毒管理办法三十一条1.消毒管理的重要性消毒是防止细菌、病毒、真菌等病原微生物传播的有效手段，对于公共场所和个人健康至关重要，因此制定一套科学合理的消毒管理办法十分必要。
2.制定消毒计划在各类场所（如医院、学校、餐厅等）必须制定详细的消毒计划，包括消毒频率、方法、消毒剂的选用等。
3.确定消毒频率根据实际情况确定不同区域的消毒频率，一般来说，人流密集的区域需增加消毒频率。
4.选择合适的消毒剂消毒剂的选择应当根据被消毒物体的特性来确定，不同的消毒剂有不同的杀菌谱和适用范围。
5.确保消毒剂的浓度和使用方法符合标准消毒剂的浓度和使用方法应符合国家相关标准，严格按照说明书进行配置和操作。
6.实施标准操作程序制定标准操作程序，包括消毒前的清洁、消毒方式、消毒时间等，确保每一步操作都规范可控。
7.如何处理消毒剂残留消毒后应正确处理消毒剂残留，避免对环境和人体造成危害。
8.检查和评估消毒效果对消毒效果进行定期检查和评估，确保达到预期的消毒效果，及时调整消毒措施。
9.操作人员培训对从事消毒工作的人员进行培训，包括消毒知识、操作技能以及防护措施的培训。
10.建立消毒档案做好消毒记录的保存工作，建立档案，记录消毒日期、内容、剂量等信息。
11.特殊人群的消毒管理对于特殊人群，如孕妇、婴幼儿等，应采取额外的消毒管理措施，避免消毒剂对其造成影响。
12.定期对设施设备进行消毒定期对公共设施、设备进行消毒，保证使用安全和环境卫生。
13.携带消毒用品个人在外时，可携带一些简单的消毒用品，保持个人卫生。
14.外出回家消毒外出回家后，可对衣物、鞋子等进行简单的消毒，减少外界细菌对居家环境的污染。
15.衣物消毒的注意事项衣物消毒需注意选择适用的消毒剂和方法，保证彻底消毒而又不会对衣物造成损害。
16.蔬果消毒蔬果消毒是保证食品安全的关键，可用清水浸泡、食用碘酒喷洒等方法进行消毒。
17.厨房卫生消毒厨房是细菌滋生的重灾区，定期对厨房进行卫生消毒，保证食品安全。
(整理)纯化水管道系统消毒效果及消毒周期验证
纯化水贮水罐、输送管道系统消毒效果及消毒周期验证方案目录项目页次一、概述 ---------------------------------------------------------------------3二、验证目的 ----------------------------------------------------------------3三、适用范围 ----------------------------------------------------------------3四、验证实施人员、职责、时间 ------------------------------------------3五、相关文件-----------------------------------------------------------------4六、验证内容 -------- --------------------------------------------------------41、臭氧消毒法--------------------------------------------------------------41.1臭氧消毒法原理-----------------------------------------------------41.2水中臭氧浓度的测定---------------------------------------------------41.3臭氧消毒效果评价------------------------------------------------------51.4臭氧消毒周期的确定----------------------------------------------------52、双氧水消毒法------------------------------------------------------------52.1双氧水消毒效果评价------------------------------------------------52.2双氧水消毒周期的确定---------------------------------------------53、附：检测结果及结论附：卫生学验证原始记录一、概述纯化水贮罐、输送管道的清洁、消毒是为了确保纯化水的质量，防止药品污染，保证药品安全。
幼儿园常用餐具消毒方法
幼儿园常用餐具消毒方法1. 使用高温热水消毒：将餐具放入热水中，并加热至沸腾状态，保持在沸腾状态下煮沸2-3分钟。
这种方法适用于可以耐受高温的餐具，如不锈钢餐具。
2. 使用消毒柜进行消毒：将餐具放入专用的消毒柜中，按照使用说明进行操作。
消毒柜通常使用高温蒸汽或紫外线进行杀菌，安全且有效。
3. 使用漂白剂消毒：将餐具浸泡在稀释后的漂白剂溶液中，浸泡时间为15分钟。
之后，用清水彻底冲洗餐具，确保漂白剂残留物被清洗掉。
4. 使用餐具消毒液：选用符合国家标准的餐具消毒液，按照使用说明进行操作。
通常是将餐具浸泡在消毒液中一段时间后，用清水冲洗。
5. 运用紫外线灯进行消毒：将餐具放在紫外线灯下，照射一定时间。
紫外线具有一定的杀菌作用，但注意不能直接接触到紫外线。
6. 进行手工清洗：使用洗碗剂和热水进行清洗，将餐具彻底洗净，确保没有食物残留。
7. 定期进行大清洗：不仅要日常清洗，还应定期进行彻底清洗。
可以将餐具浸泡在温水中，添加适量的洗洁精，并用刷子清洗餐具的各个角落。
8. 注意刷子的清洗：清洗刷子本身也是很重要的一步，刷子上会残留细菌和污垢，所以要定期清洗、更换刷子。
9. 干燥餐具：清洗后的餐具要晾干，不要让水滴残留在餐具上，以免细菌滋生。
10. 定期检查餐具质量：定期检查餐具是否有裂纹、断裂等情况，避免使用有安全隐患的餐具。
11. 分开储存：将不同种类的餐具分开储存，避免污染交叉。
12. 落地摆放：餐具应落地放置，避免与其他物品接触，以免二次污染。
13. 定期更换餐具：餐具使用时间过长会损坏，容易滋生细菌，因此需要定期更换新的餐具。
14. 使用清洁毛巾：清洁餐具时使用干净的毛巾，避免使用脏污的毛巾造成污染。
15. 餐具存放位置：餐具应储存在干燥通风的地方，避免潮湿环境促使细菌生长。
16. 餐盘消毒：餐盘是常用的餐具之一，可以使用以上的消毒方法进行清洗。
17. 餐具刷子的选择：选择优质的餐具刷子，刷毛柔软，清洗效果好，且易于清洗干净。
消毒与灭菌
实验目的： 1 了解自然界中细菌的分布 2 了解消毒、灭菌的原理和使用方法
一、细菌分布及检测 1 、空气中细菌的检查：取普通平板一块，任 意置处，打开盖，约15分钟，再盖上盖子， 放于37℃培养24小时，取出观察有无细菌生 长。 2、皮肤上细菌检查：直接用手指在平板表面 上轻轻抹划线。37℃培养24小时后，取出观 察有无细菌生长。 3、咽喉部细菌检查：用无菌棉拭子在咽喉部 涂抹后，涂在血平板上。
二、消毒与灭菌 消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并 不一定能杀死含芽胞的细菌和非病原微生 物。 灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。 防腐：防止或抑制细菌生长繁殖的方法， 细菌一般不死亡。同一种化学药品在高浓 度时为消毒剂，低浓度时为防腐剂。 无菌：不含活菌的意思。
物理消毒灭菌法 一、热力灭菌法 1、干热灭菌法 2、湿热灭菌法 二、电磁波辐射杀菌法 三、滤过除菌法 四、超声波杀菌 五、干燥 六、低温 化学消毒法
化学消毒机制： 1、菌体蛋白变性或凝固 2、干扰细菌的酶系统和代谢 3、损伤菌细胞膜增加其通透性，胞外液体 内渗，致使细菌破裂。
常用消毒剂： 氧化剂：过氧化氢 --- 皮肤创伤、化脓性炎 症、厌氧菌感染消毒 卤素：氯---饮水和游泳池水的消毒 碘酒---皮肤消毒 酒精：皮肤、低温计消毒
实验16-消毒灭菌
实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制实验16 消毒灭菌、微生物生长的控制一、抗生素对微生物生长的控制（一）目的要求掌握滤纸片的抑菌试验方法。
理解抗生素的抑菌谱。
（二）基本原理抗生素是微生物产生的一类具很高活性的次生代谢产物，敏感微生物以低浓度的抗生素处理后，其生长、繁殖就会受到抑制或死亡。
微生物对不同抗生素的敏感性差异极大，对有的抗生素极敏感，而对别的抗生素没有任何反应。
一种抗生素能够作用的微生物种类的范围也是有限的，抗生素能作用的微生物种类称为该抗生素的抗菌谱。
对多种微生物有作用的抗生素称为广谱抗生素，对种类数量少的抗生素称为窄谱抗生素。
抗生素接触或进入微生物细胞内能使微生物死亡的最低剂量，称为致死剂量。
敏感微生物若在琼脂培养基平板培养过程中接触或进入微生物细胞内的抗生素达到或超过致死剂量的区域内，因微生物不能生长平板呈透明状态，否则因微生物生长平板表面不透明，并在表面形成菌苔。
在敏感微生物细胞或孢子制成的平板上，放置滤纸园片、再在纸片上滴加抗生素溶液后，抗生系将呈园形向外扩散，而且抗生素在培养基内形成浓度梯度，纸片处抗生素的浓度，纸片以外抗生素的浓度逐渐减小。
因而，在恒温培养中的过程中，将在纸片附近出现透明的抗菌圈。
抑菌圈的大小与抗生素的浓度、滴加的体积、抗生系的扩散性、微生物的敏感度、微生物细胞的浓度等有关。
（三）器材1、培养基肉汤蛋白胨平板。
2、器材培养箱、移液品、打孔器、滤纸、镊子、无菌试管、无菌吸管、无菌水、洗尔球等。
3、菌种大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌4、抗生素青霉素（四）操作步骤l、滤纸片准备用打孔器打取滤纸片.放入培养皿内灭菌后备用。
2、抗生素溶液配制称取注射用青霉素粉，以无菌水配成溶液。
3、带菌平板制作将牛肉膏--蛋白胨—琼脂培养基沸水浴溶化后，于45℃恒温水浴保温。
以无菌水将斜面菌种细胞洗下制成悬浮液，以血球计数板测孢子浓度，再加入无菌水将悬浮液浓度调为108-9个细菌/ml。
消毒供应中心理论试题(二)
消毒供应中心理论试题（二）成绩：姓名：一、单项选择(60分)1下列哪项属于低水平消毒（）A冲洗 B 微波 C 臭氧 D 过氧化氢E碘伏2棉布包装的消毒包灭菌后其有效期在室温25摄氏度以下为（）A 7~10B 1周C 14天D 2周E 3天3人类皮肤上的微生物可分类为两大类( )A长住菌和暂住菌B病毒和细菌C球菌和杆菌D 葡萄球菌和链球菌E益生菌和致病菌4包外化学指示胶带封包时，其长度不得低于（）A 5cmB 3cmC 10cmD 8cm5煮沸消毒水温应达到（）A 80度B 90度C 105度D 100度E 半年6煮沸消毒所需要时间应从（）A水热后算起 B 加水后算起 C 放入器械后算起D煮沸后算起E计时起算起7煮沸消毒时物品不宜放置过多，一般不超过容量的（）A 1/3B 2/4C 3/4D 2/3E 4/58煮沸消毒时间一般为（）A水开后2~5分钟 B 水开后5~15分钟 C 水开后15~30分钟 D 水开后30分钟以上9医院感染按其病原体的来源可分为（）A交叉感染、医源性感染和自身感染 B 内源性和外源性 C 科预防性和不可预防性D 血源性和非血源性 E 传染性和非传染性10认真洗手可以去除皮肤上的哪类细菌（）A常住菌 B 暂住菌 C 条件致病菌 D 致病菌 E 寄生菌11对于无明确潜伏期的疾病在入院多少时间后发生的感染视为医院感染（）A 12小时B 24小时C 48小时D 72小时E 6小时12对化学消毒剂抵抗力最强的是（）A结核杆菌 B 芽胞 C 细菌繁殖体 D 大肠杆菌 E 假铜绿单胞菌13下列哪项不属于高水平消毒法（）A电力辐射 B 含氯消毒剂 C 二溴海因 D 过氧乙酸 E 碘伏14空气消毒效果的监测，采样时间应在消毒处理后，采样前应关好门窗，在无人走动的情况下，静止多少时间后进行采样（）A 5分钟B 10分钟C 15分钟D 20分钟E 25分钟15关于有效氯，下列哪项描述是正确的（）A是指含氯消毒剂氧化能力相当的氯量，其含量用mg/L或% 浓度表示 B 是指含氯消毒剂所含氯量，其含量用mg/L表示 C 是指含氯消毒剂中能杀灭细菌的氯量，其含量用ppm表示 D 是指含氯消毒剂中含次氯酸钠的量其含量用mg/L表示E是指含氯消毒剂所含氯化钠的量，其含量用mg/L表示16下面关于医院感染的描述哪项是错误的（）A医院感染是指患者、探视者和医院职工在医院内发生的感染并出现症状，但不包括入院时既有的或已潜伏的感染 B 新生儿经产道时发生的感染属于医院感染 C 引起住院感染的微生物可来自他人，称为交叉感染或外源性感染，也可来自病员自身，称为自身感染和内源性感染 D 病人入院时已发生的感染并直接与上次住院有关，亦为医院感染E医院感染的定义是指病人在住院期间遭受的感染17下列哪项未达到灭菌处理要求（）A环氧乙烷灭菌 B 高压蒸汽灭菌 C 160℃的干热灭菌2小时 D 2%的戊二醛酸浸泡10小时 E 紫外线灯照射2小时18医院首选的灭菌方法是：（）A.压力蒸汽灭菌B.环氧乙烷灭菌C.等离子灭菌D.戊二醛浸泡灭菌19在下列物品中属于高度危险器材的是：（）A.穿刺针B.胃肠及支气管内窥镜C.听诊器D.体温计20灭菌物品包装时，敷料类重量不得超过：（）A.1kgB.3kgC.5kgD.7kg21环氧乙烷的杀菌机制是与微生物发生：（）A.非特异性氧化反应B.非特异性烷基化反应C.特异性氧化反应D.特异性烷基化反应22 供应室无菌区环境空气卫生学标准是下列那项：（）A.≤200cfu/m³B.≤300cfu/m³C.≤400cfu/m³D.≤500cfu/m³23压力蒸汽灭菌生物监测使用的指示菌是：（）A.枯草杆菌黑色变种芽胞B.嗜热脂肪杆菌芽胞C.结核杆菌芽胞D.短小杆菌芽胞E60124 空气培养采样布点方法，当房间面积≤30ｍ2 时，应设几个采样点：（）A.2个B.3个C.4个D.5个25 关于医院消毒供应中心的空气净化，无菌区要求气压达到：（）A. －5～0PaB. 0～5PaC. 5～10PaD. 10～15Pa26 国标中注射针头标记是以下列那项来表示的：（）A.针头斜面角度B.针管外径和长度C.针管内径和长度D.针头斜面角度和长度27 供应室灭菌合格率应达到：（）A.90％B.95％C.98％D.100％28下面哪一项消毒剂不属于高效消毒剂（）A碘伏 B 含氯消毒剂 C 二溴海因 D 环氧乙烷 E 过氧乙酸29下面哪种物品不能用压力蒸汽灭菌器进行灭菌（）A换药碗 B 手术刀 C 敷料 D 油纱布 E 手术衣30消洗灵消毒按消毒处理水平属于（）A高水平消毒法B中水平消毒法 C 低水平消毒法 D 灭菌E弱水平消毒法二、多选题(20分)1消毒供应中心是医院内承担各科室所有重复使用诊疗器械、器具和物品以及无菌物品供应的部门（）A 回收B 清洗C 消毒D 灭菌E 分类2、消毒供应中心工作区域包括（）A 去污区B 检查、包装及灭菌区C 无菌物品存放区D 办公室E 休息室3、消毒供应中心工作区域设计与材料要求符合要求的是（）A 各区域间应设实际屏障B 缓冲间应设洗手设施，采用非手触式水龙头开关。
消毒灭菌及医院环境卫生学监测制度
消毒灭菌及医院环境卫生学监测制度
一.医院感染重点部门、特殊区域的空气、使用中消毒液、医务人员手的监测每季度抽查一次，其余部门每半年一次，当怀疑医院感染的流行或暴发与环境卫生学有关时及时进行监测，
二.供应室预真空压力蒸汽灭菌器，每天灭菌前进行B-D试验；每锅进行工艺监测；每包进行化学监测，包外贴化学指示带、包内放置化学指示卡；每周进行生物监测。
三.病区治疗室、换药室、病室的空气、物表、医务人员手的监测每半年一次，
四.输血科储血冰箱空气监测每季度一次。
五.重点科室物表每月监测一次。
六.对使用中紫外线灯管强度每半年监测一次，新灯管使用时监测一次。
七.污水的监测，医院每月进行随机抽检一次，每日监测余氯2次；每季度监测沙门氏菌、志贺氏菌一次；每季度请环保部门进行抽检一次。
八.血液透析室物表、透析液每月监测一次，透析用水每季度监测一次。
九.对一次性医疗卫生用品的进货、保管、使用、用后的无害化处理每季度检查一次。
十.内镜的消毒、灭菌每月监测一次。
手卫生微生物学检测的标准
手卫生微生物学检测的标准
手卫生微生物学检测的标准主要包括细菌菌落总数的合格标准。
普通手卫生的细菌菌落数应≤10cfu/cm²，而外科手消毒的细菌菌落数应≤5cfu/cm²。
这意味着在手卫生消毒后，每平方厘米的手部皮肤上，细菌的数量不应超过这些标准。
此外，手卫生消毒效果的监测还应考虑不同环境下的手合格标准。
例如，在Ⅰ类和Ⅱ类区域，细菌菌落总数应≤5cfu/cm²；在Ⅲ类区域，细菌菌落总数应≤10cfu/cm²；在Ⅳ类区域，细菌菌落总数应≤15cfu/cm²。
这些标准旨在确保手部卫生在不同环境下都能达到一定的卫生标准，从而减少细菌感染的风险。
总的来说，手卫生微生物学检测的标准是确保手部清洁和卫生，减少细菌数量，以降低感染的风险。
医务人员和公众都应遵循这些标准，并定期进行手部卫生检测，以确保手部的卫生状况符合要求。
纯化水管道系统消毒效果及消毒周期验证
纯化水贮水罐、输送管道系统消毒效果及消毒周期验证方案一、概述纯化水贮罐、输送管道的清洁、消毒是为了确保纯化水的质量，防止药品污染，保证药品安全。
根据GMP要求，须对纯化水贮罐、输送管道的清洗及消毒效果进行验证。
本再验证按《纯化水系统清洁规程》用臭氧水、双氧水对纯化水贮罐及输送管道系统进行消毒，验证了纯化水中通入臭氧的时间及臭氧水的消毒效果、消毒周期；双氧水的消毒效果及消毒周期。
二、验证目的通过实施消毒效果及消毒周期的验证，确定消毒剂的消毒效果及消毒周期，检查并确认消毒效果是否符合要求。
三、适用范围本标准适用于纯化水贮罐、输送管道系系统消毒效果及消毒周期验证。
四、验证小组成员及职责所在部门姓名生产副总（组长）生产部质量管理部质检科质保科设备部1验证小组组长负责验证方案的批准。
负责本验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。
负责验证报告的审批。
负责再验证周期的确定。
2设备部负责组织试验所需仪器、设备的验证。
负责仪器、仪表、量具等的校正。
负责设备的维护保养。
负责设备的操作。
3质量部负责取样及提供验证所需检测数据。
负责收集各项验证、试验记录，并对试验结果进行分析后验证过程监督检查确保结果可靠性4生产部负责验证方案制定和实施。
总结验证记录本次再验证工作自年月日开始，年月日结束。
五、相关文件药品生产质量管理规范（2010年修订）药品生产质量管理规范（2010年修订）附录中国药典2010年版一部药品生产验证指南中药生产验证指南纯化水系统清洁规程JB-WS-Q-019-C微生物限度检查操作规程JB-TZ-029-C六、验证内容1、臭氧消毒法：1.1臭氧消毒法原理臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧和单个氧原子，后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，可氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必需的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。
多余的氧原子则会自行重新结合成为普遍氧分子，不存在任何有害残留物，故称无污染消毒剂。
传染病消毒效果检查
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传染病消毒效果检查
目前检测多仍采用一此条件致病菌为间接指标。
肠道传染病以大肠杆菌为指标，呼吸道传染病以溶血性链球菌为指标。
肝炎病毒近年表面抗原，DNA聚合酶以及电镜观察，甲肝病毒分离等为指标。
如消毒前后均未检出大肠杆菌或溶血性链球菌，则可以消毒后自然菌总数率低的百分率评价，消毒后自然菌总数下降80%以上为效果良好，降低70%为较好。
减少60%以上为一般，减少60%以下为不合格。
具体检查方法：
1.物品表面检查
在消毒物品相邻部位划出2个10cm2范围，消毒前后别以无菌棉签采样，接种后培养24～48小时观察结果。
2.排泄物检查
消毒前后各取0.2ml排泄物的稀释液接种肉汤管，37℃培养24小时后再取样转种相应的培养基，24～48小时后观察结果。
3.空气消毒效果检查
一般用自然沉降法。
医学`教育网搜集整理消毒前后在消毒的空间不同平面和位置。
放置4～5个平面，暴露5～30分钟后盖好，培育24～48小时观察结果。
医疗器械微生物检验
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菌种 #2022
• 大肠埃希菌
［CMCC（B）44 102］
• 金黄色葡萄球菌 ［CMCC（B） 26 003］
• 枯草芽孢杆菌 ［CMCC（B） 63 501］
计数培养基 • 白色念珠菌
大肠埃希菌2个平皿
枯草芽孢杆菌2个平皿
计数培养基适用 玫瑰红钠琼脂培养基
白色念珠菌2个平皿
性检查
黑典霉2个平皿
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基：白色念珠菌2个平皿 用相同的对照培养基替代被检培养基做对照
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计数培养基适用性检查
结果判定
若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落 平均数的70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落 一致，判该培养基的适用性检查符合规定。
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培养基
标准菌株处理及增菌用培养基
选择性培养基
鉴别培养基
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培养基
培养基的灭菌时间和温度，应按照各种培养基的规定进行，以保证灭菌效 果及不损失培养基的必需营养成分。
制成的培养基应透明 ，以便观察细菌生长 性状以及其他代谢活 动所产生的变化。
培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。应按各种 培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长 的适宜pH值为7.2～7.6。酵母菌霉菌（6.0～ 6.5）。调节可用1N HCl或NaOH。
显微镜、 恒温培养箱、压力蒸汽灭菌 器、薄膜过滤装置、比浊仪
等。
仪器 用具
试管、注射器、三角瓶、刻 度吸管、移液器、精密PH试 纸、滤膜、滤杯、剪刀、镊 子、无菌服、牛皮纸等。
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实验准备
无菌药品GMP检查指南
无菌药品GMP检查指南2015年10月目录一、目的 (3)二、适用范围及检查依据 (3)三、无菌药品生产工艺概述 (3)四、检查要点 (6)(一)质量管理系统 (6)(二)厂房、设施及设备系统 (9)(三） ....................................................................................................................... 物料系统15(四)生产系统 (18)（五） ....................................................................................................... 包装和贴签系统24(六） .......................................................................................................... 实验室控制系统26五、参考文献 (29)一、目的本指南的主要目的是为检查员在实施无菌药品生产企业检查时提供指导.检查组应参照本指南的要求检查无菌药品生产质量管理情况，评价企业无菌保证的能力，以确定企业是否符合《药品生产质量管理规范(2010年修订）》（以下简称GMP）的要求。
二、适用范围及检查依据本指南适用于无菌药品的GMP检查，包括无菌制剂生产全过程和无菌原料药的灭菌和无菌生产过程。
无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂和原料药，通常包括大容量注射剂、小容量注射剂、粉针剂、冻干粉针剂、眼用制剂、耳用制剂、埋植剂、供雾化器用的液体制剂、冲洗剂、外用制剂、无菌原料药等.无菌药品按生产工艺可分为两类：采用最终灭菌工艺的为最终灭菌产品;部分或全部工序采用无菌生产工艺的为非最终灭菌产品。
院感培训试题(附答案)
2015上半年院感知识培训试题科室：姓名：分数：一、单选题1、关于医院感染的概念错误的是( )A、入院时处于潜伏期的感染不是医院感染B、医院感染是指在医院内获得的感染C、慢性感染急性发作是医院感染D、与上次住院有关的感染是医院感染E、婴幼儿经胎盘获得的感染不是医院感染2、医院感染主要发生在( )A、门诊、急诊病人B、探视者C、医务人员D、住院病人E、陪护人员3、下列情况属于医院感染的是( )A、在皮肤、粘膜开放性伤口只有细菌定植而无临床症状或体征者B、由损伤而产生的炎症或由非生物因子刺激产生的炎性反应C、婴儿经胎盘获得的感染:如CMV、弓形虫发生在出生后48小时以内者D、住院中由于治疗措施而激活的感染E、由于输注苏打外渗引起的局部炎性反应4、医院污物的处理原则错误的是( )A、防止污染扩散B、分类收集C、分别处理D、医疗垃圾与生活垃圾一同处理E、尽可能采用焚烧处理5、目前国内医院感染最常发生的部位是( )A 、泌尿道B、外科切口C、血液D、下呼吸道E、胃肠道6、灭菌速度快、灭菌效果好、对经济、环境污染小的是( )A 、环氧乙烷灭菌法B、戊二醛浸泡灭菌法C 、辐射灭菌法D、过氧乙酸浸泡灭菌法E、压力蒸汽灭菌法7、有关医院感染预防与控制的概念错误的是( )A 、外源性感染是可以预防的B、洗手是预防医院感染的重要措施C 、做好消毒隔离就可以杜绝医院感染的发生D 、内源性医院感染是可以预防的E 、滥用抗菌药物可致二重感染8、有关抗生素管理下列哪项错误( )A 把抗菌药物分成一线、二线药物,二线药物应控制使用B 二线药物毒副作用大、价贵、疗效低C 、在同类抗生素中应留有替代药物,在必要时再启用D 、无药敏结果参考时,可按经验选药原则用药E 、定期全院菌株的药敏统计结果公布,为临床用药与药剂科进药提供信息9、治疗室的管理中下列哪项错误( )A 、注射、治疗时,应铺无菌盘,抽出的药液存放不能超过2小时B 、治疗室中开启的各种溶媒不得超过24小时C 、治疗室中开启的无菌溶液需要4小时内使用D 、碘酒、酒精瓶应保持密闭, 每周更换及灭菌1-2次E 、经消毒后的棉球、纱布包,一经打开,保存时间不得超过48小时10、有关隔离的概念,下列哪项是错误的( )A 、咽白喉应严格隔离,皮肤白喉需接触隔离B、流行性腮腺炎进行呼吸道隔离,脊髓灰质炎进行肠道隔离C、大面积烧伤进行接触隔离D、多重耐药菌株感染应列入接触隔离E、活动性肺结核的隔离期是有效治疗后6周11、氨基糖甙类抗生素的抗菌作用机制主要是( )A 、干扰细菌细胞壁的合成B、损伤细胞膜C、影响细菌蛋白质的合成D 、抑制细菌核酸的合成12、压力蒸汽灭菌时金属包的重量不得超过多少公斤?( )A 、5 B、6 C、8 D、713、预真空灭菌器的装载量不得超过柜室内容量的多少?( )A 、90% B、80% C、95% D、70%14、干热灭菌油剂、粉剂的厚度不得超过多少?( )A 、0.650㎝B、O.635㎝C、0.560㎝D、0.630㎝15、消毒使用的紫外线是什么波段的紫外线?( )A 、B 波B、A 波C、D 波D、C 波16、以下哪种材料可以用作过氧乙酸的包装?( )A 、聚乙烯塑料桶B、玻璃瓶C、矿泉水瓶D、金属桶17、压力蒸汽灭菌时金属包的重量不得超过多少公斤?( )A 、5 B、6 C、8 D、718、嗜热脂肪杆菌芽孢培养的温度是( )A 、37℃B、32℃C、42℃D、56℃19、一次性使用无菌医疗用品的质量检验应在什么时间进行采样?( )A 、在使用后B、在消毒灭菌前C、在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样D 、在使用中20、最有效的空气消毒方法是( )A 、化学消毒B、通风换气C、紫外线照射D、空气消毒机二、多选题1、医护人员在何种情况下应该加强洗手( )A 、接触病人前后,特别是在接触有破损的皮肤、粘膜和侵入性操作前后B 、进行无菌技术操作前后,进入和离开隔离病房、ICU 、母婴室、新生儿病房、烧伤病房、感染性疾病病房等重点部门时,戴口罩和穿脱隔离衣前后C 、接触血液、体液和被污染的物品后D、脱手套后2、医院地面的清洁与消毒措施应包括( )A. 地面应湿式清扫, 保持清洁B、当有血迹、粪便、体液等污染时, 应及时以含氯消毒剂拖洗C、消毒剂浓度符合要求D、拖洗工具使用后应先消毒、洗净、再晾干;3、医院感染是指( )A 、住院病人在医院内获得的感染B、在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染C 、不包括入院前已开始或入院时已处于潜伏期的感染D、医院工作人员在医院内获得的感染4、特殊感染伤口如:炭疽、气性坏疽、破伤风等的处理原则是( )A 、处臵后进行就地(诊室或病室)严格隔离B、处臵后进行严格终末消毒C 、不得进入换药室D 、感染性敷料应放在黄色防渗漏的污物袋内E 、及时焚烧处理5、医院感染的传播途径主要包括( )A 、接触传播B、空气传播C 、水、食物D、医源性传播E、生物媒介物传播三、判断题1、由于诊疗措施激活的潜在性感染, 如结核杆菌等的感染属医院感染( )2、如不慎被锐器刺伤, 应立即采取相应保护措施、清创, 对创面进行严格消毒处理( )3、医院感染暴发是指在某医院、某科室的住院病人中, 短时间内, 突然发生许多医院感染病例的现象( )4、保护性隔离措施是指为高度易感病人受到来自其它病人、医务人员、探视者及病区环境中各种条件致病微生物的感染, 而采取的措施( )5、国务院卫生行政部门应当及时的如实通报和公布疫情,并可以授权省、自治区、直辖市政府行政部门及时的如实通报和公布本行政区域的疫情。
微生物学实验习题
实验一常用培养基的制备、灭菌与消毒思考题1、培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是无菌的?2、在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么?3、培养微生物的培养基应具备哪些条件?为什么?4、培养基的配制原则是什么?5、高压蒸汽灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽？6、灭菌完毕后,为什么要待压力降到0时才能打开排气阀,开盖取物？7、在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,怎样杜绝一切不安全的因素？实验二、普通光学显微镜的使用思考题1、试列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。
为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？2、什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？3、影响显微镜分辨率的因素有哪些？4、根据你的实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察。
实验三、革兰氏染色法思考题1、哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？2、进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题?3、革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色?4、不经过复染这一步，能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？5、你认为制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节?6、为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?7、如果涂片未经热固定，将会出现什么问题?加热温度过高、时间太长，又会怎样呢?实验四、显微镜直接计数法思考题根据你实验的体会，说明用血球计数板计数的误差主要来自哪些方面？应如何尽量减少误差，力求准确？实验五微生物接种技术思考题1、如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养？请写出为什么高氏I号培养基和马丁氏培养基中要分别加入酚和链霉素？如果用牛肉膏蛋白胨培养基分离一种对青霉素具有抗性的细菌，你认为应如何做？2、试述如何在接种中，贯彻无菌操作的原则?3、以斜面上的菌种接种到新的斜面培养基为例说明操作方法和注意事项。
中护微生物-实验3细菌分布检查与消毒灭菌实验
一、细菌的分布检查
1.空气中细菌的检查 材料:琼脂平板
方法:将制作好的琼脂平板敞开放置在空气中 37度温箱内培养18-24小时后观察结果。
意义：检测环境达标与否
5min -10min,后盖上皿盖，然后分别做好标记，
2.咽喉部细菌的检查
(1)咽喉拭子法：
材料：血平皿、咽拭子 方法：
1. 用干净棉签咽部取材； 2. 将取得样本以分区划线形式接种在血平皿上； 3. 37℃ 温箱内孵育24小时后观察结果。
三、药物敏感实验（纸片法）
测量抑菌环的大小，初步判定并比较细菌对不 同药物的敏感情况，判断药物的敏感度，一般 以敏感、中度敏感、耐药三个等级报告结果。
药敏实验
材料：琼脂平板、细菌培养物、药敏纸片 方法：1. 挑取少量细菌培养物密集划线； 2. 夹取青霉素及庆大霉素药敏片各一片， 置于琼脂平板表面（注意间隔）；
(2)咳碟法
• 取血平板一个，将盖打开，置于距口腔10厘 米处，用力咳嗽数次，然后盖好，置37度温 箱培养18-24小时观察结果。
二、消毒灭菌的实验
1.皮肤消毒试验（操作） 每两名学生用一个琼脂平板，先在平板底部用蜡笔画 分5格，标明序号。 两人用未消毒手指分别在1、2格内涂布。
然后用2%碘酒消毒手指后再分别涂抹3、4格，余下第5 格作为空白对照。
4.常用消毒灭菌器及除菌滤器介绍
高压蒸汽灭菌器 干烤箱（干热灭菌器） 滤器
三、药物敏感实验（纸片法）
方法：
1. 取琼脂平板一个用记号笔在平板底部标记贴抗生素纸片的位置。
2. 点燃酒精灯。用棉签蘸取菌液，在琼脂平板上密集而均匀地涂布。 3. 待培养基稍干后，无菌操作用镊子分别取抗生素纸片按标记位置贴
微生物实验
二、消毒与灭菌
1、常用热力灭菌器 （示教）
2、紫外线杀菌
（示教）
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1、常用热力灭菌器
高压蒸汽灭菌器 干热灭菌器
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高压蒸汽灭菌器（湿热灭菌法最常用）
• 原理：水在常压大气中100 ℃沸腾，气压增加，
沸腾温度随之增加。在密闭的高压灭菌器内，当压 力增加到15磅/ cm2时，温度相当121.3 ℃。在这 种温度下维持20—30分钟可以杀死细菌的繁殖体 与芽孢。
温度： 160 －170 ℃ 时间： 2小时 适用范围： 主要用于玻璃器皿 使用注意：1、 禁用：塑料、橡胶、金属；
2、 玻璃器皿放入干烤箱前充分干燥； 3、 干烤箱温度不超过180 ℃； 4、 灭菌后，温度冷却至40 ℃以下取物品
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2、紫外线杀菌
▪ 原理：紫外线波长200－300nm处，具有杀 菌作用。因为细菌吸收了紫外线的能量，在 其DNA中形成胸腺嘧啶双聚体，干扰DNA的 复制，影响细菌酶的活性，导致细菌的死亡。
项目 生长情况 意义 菌种
大肠杆菌
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平板划线分离培养
实验目的：分离培养、获得纯种细菌。 做法：借助划线将混合菌液在琼脂平板 的表面分散开来，使单个细菌在平板的 一个点上生长繁殖，形成单个菌落，以 达到分离培养、获得纯种细菌的目的， 并根据各种菌落的特征来鉴别细菌。
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平板划线的操作步骤
第1组线
▪ 杀菌特点：1， 杀菌力强 2， 穿透力弱 ▪ 适用范围：空气及物体表面。
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紫外线杀菌—操作方法：
①用消毒棉签蘸取大肠杆菌,反复划线接种于无 菌琼脂平板，使细菌均匀涂布于培养基的表面。
②用无菌镊子夹取无菌三角纸片一张，铺盖在琼 脂平板中间。将平板放在紫外线灯下照射30分 钟，然后用无菌镊子夹去三角纸片，盖好平板， 放入37 ℃温箱培养24小时，观察结果。
医院环境及消毒灭菌监测与质控-
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* 结果判定：当指示卡中间光敏涂料的颜色由乳 白色变成不同程度的淡紫色（与周围标有灯管 强度70μW/cm2）的标准色块相一致，则判为 紫外线灯管合格，当变至与周围某一相应色块 相同时，则判定所接受紫外线照射剂量已达到 该项消毒要求。
1．物理监测： 是利用紫外线强度照射仪直接读出其辐照度值的
方法。 * 监测方法： 开启紫外线灯5min后，将测定波长为
253.7nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂 直距离1m的中央处，待仪表稳定后，所示数据即为该 紫外线灯管的辐照度值（μW/cm2）。 * 结果判定：普通30w直管型紫外线灯: 新灯辐照强度≥90μW/cm2为合格； 使用中紫外线灯辐照强度≥70μW/cm2为合格； 30W高强度紫外线新灯的辐照强度≥180μW/cm2为合格。
消毒液染菌
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•倾注法：
1ml消+9ml盐水
0.5ml(20℃ 7d)
0.5ml(36℃ 3d)
消毒液染菌量（cfu/ml）=每个平板上的cfu×20
* 结果分析：
* 注意事项：正确选用中和剂,采样后1h内检测
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(二) 质控标准: * 使用中消毒液细菌菌落总数应≤100cfu/ml
不得检出致病微生物； * 无菌器械保存液必须无菌生长。
* 检测方法：将采样平板置37 ℃培养48h，计 数并鉴定细菌。
* 结果计算：空气细菌菌落总数（cfu/m3） =50000N/AT
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* 注意事项：采样前应关好门窗、空调， 在无人走动情况下，静止10min再进行采 样。
规模化蛋鸡养殖场水线消毒剂选择建议
143徐向前/江苏省江阴市水产畜牧技术推广中心 214400基金项目：江苏现代农业蛋鸡产业技术体系质量安全与加工创新团队2021-2022年度实施项目摘 要：果，明确最佳蛋鸡养殖场水线消毒剂。
搜集到当地蛋鸡养殖场17种水线消毒剂，按照说明书推荐作用时间对实验室水样进行消毒。
试验发现不同水线消毒剂抑菌效果不同，同种消毒剂不同厂家作用时间不同，抑菌率也不同，其中甲酸盐、丙酸盐、过氧乙酸、过硫酸氢钾复合粉、过氧乙酸、三氯异氰尿酸、溴化二，而其他水线消毒剂消毒效果不能达到100%。
规模化蛋鸡养殖场需要综合消毒效果、经济成本、操作可行性等多方面因素后选择合适的水线消毒剂。
水线消毒剂；蛋鸡；规模化养鸡场；科学选择水是蛋鸡养殖过程中重要的物质基础，而饮水清洁度直接关乎鸡群肠道健康和疫病传染情况。
就目前规模化养鸡场水源供应情况来看，越来越多的养鸡场采用密闭水线饮水设备保障鸡群正常饮水，由于密封水线设备容易滋生微生物和藻类，产生生物膜和致病菌，还会堵塞输水管道，造成设备故障或缩短使用年限。
针对规模化蛋鸡养殖场水线消毒剂类型多样、消毒方式不一、消毒效果未知的现状，本研究收集了江苏地区部分养殖场所用的水线消毒剂，以实验室水样来检验消毒效果，为探讨不同类型水线消毒剂抑菌效果提供理论参考。
1 材料与方法1.1 材料 本试验所用消毒剂共包括酸化剂类、过氧化物类、碘制剂、碱类、氯制剂、醛类和表面活性剂七种，不同成分消毒剂共17种，详见表1。
1.2 方法 本研究基于实验室水质情况对江苏地区规模化蛋鸡养殖场17种常用的水线消毒剂进行消毒，消毒方法为浸泡消毒，消毒时间参照说明书推荐的作用时间进行，试验前对实验室现有水质进行检查，检查结果为在未使用消毒剂情况下，水样菌落总数为1721CFU/mL 、大肠菌群为89CFU/mL 。
2 试验结果如表1所示，当前规模化蛋鸡养殖场所用消毒剂种类繁多，以酸化消毒剂使用最多，收集到的水线消毒剂种类最多，包括7类。
实验三细菌的分布与消毒灭菌
实验三细菌的分布与消毒灭菌【目的】①了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。
②了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病，称为正常菌群。
③熟悉外界因素对细菌的影响，学习常用的消毒灭菌方法。
④了解不同细菌对外界因素具有不同的抵抗力。
一、细菌的分布检查（一）空气中的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。
【方法】①取普通琼脂平板一只开启皿盖，培养基面向上放于实验桌上，暴露5～30min后盖好。
②置37℃培养18～24小时后观察结果。
【结果】（填表10-1）平板培养基表面或多或少有菌落生长。
（二）地面水中的细菌检查【材料】地面水(河水、井水或池水)、高层琼脂培养基、1ml无菌吸管、灭菌培养皿。
【方法】①以无菌吸管吸取1ml地面水，加入灭菌平皿中。
②将已溶化且冷至45℃左右的高层琼脂倾注人上述平皿中，加盖后轻轻摇动，使水与琼脂充分混匀，静凝。
③37℃ 24小时后取出观察，计数菌落。
【结果】（填表10-1）（三）衣服、票证、头发、手指皮肤上的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。
【方法】取普通平板一个，用蜡笔在平板背面玻璃上划成四等分，并贴上标签(图10-1)。
然后以无菌操作法，用衣袖角、票证、头发及手指或指甲内污物，在平板培养基表面相应部位轻轻涂抹，置37℃培养24小时，观察并记录结果。
【结果】填表培养基表面涂抹处有菌落生长。
衣服、票证、头发、手指皮肤上的细菌检查（四）正常人体咽喉部的细菌检查【材料】血液琼脂平板培养基、灭菌棉拭、接种环、酒精灯。
【方法】取灭菌棉拭一支，在被检查者咽喉部轻轻涂擦后，再涂于血液琼脂培养基—侧，然后改用灭菌接种环作分离划线接种。
盖上皿盖，37℃孵育24小时（或者采用咳喋法）。
【结果】（填表10-1）琼脂平板表面有菌落生长。
其中占优势的是一种细小菌落，其周围有草绿色的不完全溶血环。
此为咽喉部的正常菌群—甲型链球菌。
院感检查方案
院感检查方案一、背景介绍院感（医院感染）是指在医疗机构内发生的与医疗活动相关的感染。
院感的发生会给患者及医务人员的健康造成威胁，并增加医疗机构的经济负担。
因此，为了提高医疗质量和安全水平，制定一套全面的院感检查方案尤其重要。
二、目的本院感检查方案的目的是为了评估医疗机构内院感的发生情况，及时发现和解决问题，提高医疗质量和安全水平。
三、检查内容1. 医院环境卫生检查：包括医院内部各科室、手术室、病房、洗手间等的卫生情况，如清洁度、消毒措施、垃圾处理等。
2. 医疗器械消毒和灭菌检查：检查医疗器械消毒和灭菌的操作规范、设备维护情况、灭菌效果等。
3. 医务人员手卫生检查：检查医务人员手卫生的操作规范、频率、洗手液的使用情况等。
4. 医疗废物处理检查：检查医疗废物的分类、包装、储存和处理情况。
5. 患者隔离措施检查：检查患者隔离措施的执行情况，包括患者病房的隔离设施、隔离衣物的使用情况等。
6. 医院感染监测和报告检查：检查医院感染监测和报告的制度和执行情况，包括感染监测数据的采集、分析和报告等。
四、检查方法1. 文件资料审查：检查医疗机构内相关的文件、记录和报告，了解院感管理制度和执行情况。
2. 现场检查：随机抽查各科室、手术室、病房等，对医疗环境、器械消毒、医务人员操作等进行实地检查。
3. 采样检测：对医疗器械、洗手液、废物等进行采样，送实验室进行微生物学检测。
五、检查频率根据医疗机构的规模和院感发生情况，制定不同的检查频率。
普通建议每年进行至少一次全面检查，并根据需要进行随机抽查。
六、检查结果处理1. 检查结果将以书面形式向医疗机构负责人报告，包括发现的问题、存在的风险、改进意见等。
2. 医疗机构负责人应及时组织相关部门制定整改措施，并按时完成整改工作。
3. 检查结果将作为医疗机构内部评估和外部监管的重要依据。
七、改进措施1. 加强院感管理制度的建设，明确责任和流程。
2. 提高医务人员的院感防控意识，加强培训和教育。
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第16--17章消毒灭菌与细菌感染的实验室检查【学习建议】第16章介绍了消毒灭菌、防止细菌感染的基本知识。
第17章介绍了细菌感染性疾病的实验室诊断方法。
通过学习这两章内容，我们应掌握消毒、灭菌、无菌、无菌操作的概念及临床意义、适用于高压蒸汽灭菌法灭菌的物品种类及杀灭芽胞所需的压力、温度和时间等；以及细菌感染的标本采集与送检原则。
熟悉物理灭菌法的种类、热力灭菌法的种类和用途、具有最强杀菌效应的紫外线波长、紫外线杀菌的适用范围和注意事项、常用化学消毒剂的种类、用途；以及病原菌分离鉴定的一般程序、检测细菌抗原及相应抗体的常用方法及举例。
了解干热灭菌法和湿热灭菌法的效能区别、紫外线的杀菌机制、化学消毒剂的作用机制和影响因素、以及细菌抗体检测结果分析的注意事项、临床意义、以及细菌核酸的检测方法。
【【内容提要】一、基本概念：消毒、灭菌、无菌、无菌操作、防腐、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法二、常用物理消毒灭菌法（一）热力灭菌法1．干热灭菌法（1）焚烧法：废弃物、传染性动物尸体等灭菌。
（2）烧灼法：取菌环、试管口、瓶口等灭菌（图1：烧灼试管口、图2：烧灼接种环）。
（3）干烤法：160～170℃，2～3小时，玻璃器皿、瓷器等灭菌。
2．湿热灭菌法（1）巴氏消毒法：61.1～62.8℃，30min; 71.7℃, 15～30s, 牛奶、酒类等消毒。
（2）煮沸法：100℃，5～10min，食具、一般外科器械消毒。
杀死芽胞需1～3小时。
（3）流通蒸汽消毒法：100℃，15～30min，不能杀死芽胞。
（4）间歇灭菌法：流通蒸汽消毒法重复三次，间歇期置37℃温箱过夜，可杀死芽胞。
营养培养基的灭菌。
（5）高压蒸汽灭菌法：102.97～116.70Kpa（1.05～1.20kg/cm2）, 121～123℃，20min。
灭菌效果最好、应用最广泛的灭菌方法。
用于一切耐高温、高压和潮湿的物品灭菌。
（二）紫外线与电离辐射杀菌法1．日光及紫外线：265～266nm波长的紫外线杀菌作用最强。
空气、物体表面消毒。
2．电离辐射：x射线、γ射线、微波等，塑料制品灭菌。
（三）滤过除菌法：血清、抗生素、抗毒素等除菌。
三、化学消毒法（一）常用化学消毒剂的种类、浓度及用途。
（二）化学消毒剂的作用机制1．使菌体蛋白质变性2．干扰细菌酶系统3．改变细菌细胞膜通透性（三）影响消毒剂作用的因素1．消毒剂的浓度和作用时间2．温度与酸碱度3．细菌性质4．环境中的拮抗物质四、细菌感染的实验室检查原则（一）病原菌及其成分的检测（二）细菌特异性抗体的检测五、常用物品的消毒灭菌方法【概念简释】1．消毒：杀灭物体上病原微生物, 但不一定杀死芽胞的方法。
2．消毒剂：用于消毒的化学药品称为消毒剂，如碘酒、酒精等。
3．灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。
包括致病菌、非致病菌、繁殖体和芽胞。
4．无菌：特定物体中或物体表面无任何活的微生物的状态。
无菌状态是灭菌的结果。
5．无菌操作：指防止微生物进入人体或进入其他物品的操作方法。
6．防腐：抑制微生物生长和繁殖的方法。
7．防腐剂：低浓度的化学消毒剂。
8．巴氏消毒法：巴斯德创用、沿用至今的牛奶、酒类消毒法。
采用加热61.1～62.8℃，30分钟；或71.7℃, 15～30秒, 杀灭牛奶、酒类等物品中的病原微生物而又不破坏其中的营养和口味（链接：图3：巴氏消毒灭菌器）。
9．流通蒸汽消毒法：采用普通蒸笼或Arnold流通蒸汽灭菌器加热100℃，15～30分钟，可杀死细菌繁殖体，但不能杀死芽胞（链接：图4：Arnold 灭菌器）。
10。
间歇灭菌法：流通蒸汽消毒法重复三次，每次间歇期置37℃温箱过夜，促使芽胞发芽变为繁殖体，被下一次蒸汽灭菌时杀灭。
主要用于营养培养基的灭菌，可杀死芽胞。
11．高压蒸汽灭菌法：利用密闭的高压蒸汽灭菌器，加热时蒸汽不能外溢而压力升高，随之温度升高，灭菌效果大为加强，可杀灭一切微生物和芽胞，是灭菌效果最好、应用最广泛的灭菌方法。
用于一切耐高温、高压和潮湿的物品灭菌。
通常灭菌所需压力为102.97～116.70Kpa（1.05～1.20kg/cm2）, 可达温度为121～123℃，维持时间15～20min（链接：图5：高压蒸汽灭菌器）。
12．肥达反应：用已知的伤寒杆菌“O”抗原和“H”抗原、以及甲、乙、丙型副伤寒杆菌的“H”抗原测定患者体内相应抗体的一种直接凝集试验，可用于辅助诊断伤寒杆菌或副伤寒杆菌感染引起的肠热症。
13．外斐反应：利用变形杆菌OK株的菌体“O”抗原代替立克次体的抗原，检测患者体内相应抗体的交叉凝集试验。
用于辅助诊断立克次体感染引起的斑疹伤寒。
14．冷凝集试验：用于诊断肺炎支原体感染的一种非特异性凝集试验。
取感染肺炎支原体的患者血清，加入人的“O”型红细胞，在4℃时凝集为阳性反应。
原因是肺炎支原体感染者体内产生的一种抗体可在4℃时凝集人的“O”型红细胞。
【重点解析】1．消毒：消毒是指杀灭或清除外环境中的病原微生物，其目的是切断传播途径，防止各种疾病的传播与扩散。
如饮水、餐具的消毒、饭前便后洗手可以预防肠道传染病的流行；住房内经常通风换气，可以预防呼吸道传染病。
这些都属于预防性消毒。
消毒不一定杀死全部微生物，通常也不能杀死芽胞。
用于消毒的化学药品称为消毒剂。
如碘酒、酒精用于注射时的皮肤消毒。
2．灭菌：灭菌是指杀灭物体上所有微生物，包括致病菌、非致病菌、繁殖体和芽胞。
如手术过程中用的器械、纱布、缝线、包括手术医生戴的手套、穿的手术衣等，必须经过灭菌处理，杀死所有微生物的繁殖体和芽胞，达到无菌状态后才能应用。
因此，灭菌的要求比消毒严格得多。
凡是进入病人体内的治疗必需采取无菌操作，所用物品、器械必需经过灭菌，而只采用消毒往往可造成病人的感染如术后感染、注射部位感染等。
如新中国成立前，旧法接生导致许多新生儿死于新生儿破伤风，就是由于剪脐带的剪刀没有经过灭菌处理，使破伤风杆菌的芽胞进入新生儿体内导致新生命的夭折。
有些个体医生给病人针灸，只是用酒精擦一下针灸针以示消毒。
再有，静脉吸毒者在药瘾发作时，常常不顾一切的互相共用注射器而不采取任何灭菌措施。
实际上未经过灭菌的注射器和针灸针可以传播乙型肝炎、艾滋病等严重疾病。
3. 无菌：特定物体中或物体表面无任何活的微生物的状态。
无菌状态是灭菌的结果。
特定物体包括哪些物品呢？凡是与介入性医疗操作有关的物品，如外科手术器械、敷料、手术衣、手术者的手、手术手套；注射、采血用的注射器；输液、注射用药和液体、输液管；牙科器械；胃镜、直肠镜等内窥镜；都应经过灭菌处理达到无菌状态才能使用。
这里特别要提醒的是，当对某种感染性疾病需要分离病原菌做微生物学诊断时，临床标本取材时所用的试管、烧瓶、棉拭子、引流管等，必须是无菌的。
尽管标本中可能带有某种病原菌，但不允许外界环境中的其他微生物进入标本混淆是非，造成诊断错误，导致治疗错误。
4. 无菌操作：指防止微生物进入人体或进入其他物品的操作方法。
如微生物实验、细胞培养、医疗工作中的手术、注射、换药、内窥镜的检查等，都必须采用无菌操作方法，保证实验结果的准确和医疗效果。
如微生物学实验诊断中的细菌培养，既要保证外界环境中的细菌不能进入实验标本中，混淆实验结果造成误诊，也要避免实验标本中的病原菌污染周围环境和我们自身，造成新的感染。
无菌操作对微生物学诊断的正确性、对保证手术成功、避免交叉感染和医源性感染、乃至于保护我们自身健康，都是至关重要的。
医学史上，美国医生立克次和捷克科学家普若瓦泽基都因研究斑疹伤寒时未注意严格的无菌操作，因而受到研究对象立克次体的感染而牺牲。
后人为了纪念这两位科学家，以立克次的名命名了一类微生物，即立克次体，把流行性斑疹伤寒的病原体命名为普氏立克次体。
5．常用湿热灭菌法：方法名称温度（℃）时间消毒灭菌效果及适用物品巴氏消毒法61.1～62.871.7 30分15～30秒牛奶、啤酒、葡萄酒等煮沸法加入：1～2％NaHCO31001055～15分1～3小时食具、注射器、胶管可杀死破伤风杆菌和肉毒杆菌芽胞一般外科器械（防锈）杀灭芽胞流通蒸汽法间歇灭菌法10010075～8015～30分15～30分×330～60分×3次以上(间歇期37℃过夜)同煮沸法, 不能杀死芽胞血清培养基营养培养基可杀死芽胞高压蒸气灭菌法121～126(103.43kPa1.05Kg/cm2)15～20分普通培养基、生理盐水、手术器械、敷料、手术衣、橡皮手套6．高压蒸汽灭菌法：是应用最广泛,效果最可靠的灭菌方法。
原理同高压锅。
密闭的容器中加水和加热，水变为蒸汽不能外溢，压力升高，温度随着升高。
凡是能经受高温和高压的物品都应采取高压蒸汽灭菌. 但一定要注意冷空气的完全排除. 否则达不到预定温度和消毒效果。
冷空气排除量与温度的关系(在压力103.43kPa, 即15磅/口寸2时)冷空气排除量(%) 100 75 50 25 0可达到温度(℃)7．紫外线：紫外线是波长100～400nm的电磁波。
200～275nm波段具有杀菌效应，杀菌力最强的波长段是250～270nm, 作用机制是破坏细菌DNA构形，影响其碱基配对。
日光有一定的杀菌作用主要是因为其中的紫外线。
紫外线灯即低压水银蒸汽灯，可以放出人工紫外线用于消毒灭菌。
紫外线灯的杀菌效果主要取决于照射剂量：照射剂量=照射强度×照射时间。
照射强度以单位时间内每平方厘米的微瓦数来表示。
我国《消毒技术规范》规定：对于一般的消毒灭菌，紫外线照射剂量不应低于100000μw.s/cm2 ；紫外线灯的输出强度不应低于70μw/cm2；照射时间不应低于25分钟；照射距离不得超过1米。
使用紫外线灯，必须经常注意紫外线灯的照射强度。
因为如果达不到一定的照射强度的话, 非但杀不死细菌,反可诱导细菌发生变异。
当照射强度下降时，可以延长照射时间来达到一定的照射剂量。
但使用中的灯管强度降至70μw/cm2 时即应更换. 虽然消毒技术规范中规定新灯管的使用寿命不应低于1000h，但一般灯管使用时间累计760h后照射强度明显下降。
紫外线最大的弱点是穿透力弱。
普通玻璃、纸张、灰尘等都可阻碍紫外线的穿过而影响它的杀菌效果。
因此，紫外线必须直接照射才有杀菌作用。
紫外线灯的应用范围：（1）空气消毒：如微生物实验室、传染病房、产房、手术室、婴儿室内的空气消毒。
紫外线对皮肤和眼有损伤，因此采用直接照射时，室内不应有人。
室内有人时，可采用反向上层式照射，利用空气的对流达到室内空气消毒目的；也可采用通过式照射，如手术室和外科病房，可以将紫外线灯装在通风管道或空调器里，使过滤的空气消毒，能有效降低术后感染率；在儿科病房或病区走廊的入口处装上紫外线灯采用屏障式照射，可以有效降低交叉感染率。
（2）物体表面消毒：如牙科器械、超滤膜、透析纸等消毒。