高中生物 第一章 无茵操作技术实践 第一节 微生物的培养和应用素材 苏教版选修1
苏教版高二生物选修1(生物技术实践)电子课本课件【全册】
苏教版高二生物选修1（生物技 术实践）电子43页 0231页 0347页 0484页 0536页 0562页 0564页 0616页
第一章 无菌操作技术实践 第二节 分离特定的微生物并测定其数量 第二章 发酵技术实践 第三章 酶的应用技术实践 第二节 制备和应用固定化酶 第一节 生物成分的分离与测定技术 第二节 测定发酵食品中的特定成分 附录3 显微观察、计数和测量细胞 附录4 生物科学实验的设计与实施 附录6 生物科学实验结果的分析与总结
第一章 无菌操作技术实践
苏教版高二生物选修1（生物技术 实践）电子课本课件【全册】
第一节 微生物的培养和应用
苏教版高二生物选修1（生物技术 实践）电子课本课件【全册】
第二节 分离特定的微生物并测 定其数量
2019-2020年苏教版高中生物《生物技术实践》第一章 无茵操作技术实践第一节 微生物的培养和应用课后练习第
2019-2020年苏教版高中生物《生物技术实践》第一章无茵操作技术实践第一节微生物的培养和应用课后练习第七篇第1题【单选题】关微生物营养物质的叙述中，正确的是( )A、是碳源的物质不可能同时是氮源B、凡碳源都提供能量C、除水以外的无机物只提供无机盐D、无机氮源也能提供能量【答案】：【解析】：第2题【单选题】下列有关味精生产的一些措施的叙述，正确的是( )A、常用的菌种是谷氨酸棒状杆菌和金黄色葡萄球菌B、培养基是含有五种营养成分的合成培养基C、在发酵中要控制的只是温度、pH、通气量D、味精是谷氨酸与NazC03中和后，再经过过滤、浓缩、离心分离【答案】：【解析】：第3题【单选题】下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )A、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B、以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C、以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D、以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂【答案】：【解析】：第4题【单选题】在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是( )A、分解尿素的细菌B、硝化细菌C、分解纤维素的细菌D、乳酸菌【答案】：【解析】：第5题【单选题】从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的( )A、将土壤用无菌水稀释，制备10^﹣^3～10^﹣^5土壤稀释液B、将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C、用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D、从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株【答案】：【解析】：第6题【单选题】培养流感病毒时应选择的培养基是( )A、固体培养基B、牛肉膏蛋白冻培养基C、活的鸡胚D、A，B，C都可以【答案】：【解析】：第7题【单选题】下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )A、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B、取10^4、10^5、10^6倍的土壤稀释液和无菌水各0．1ml，分别涂布于各组平板上C、将实验组和对照组平板倒置，37^0C恒温培养24-48小时D、确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数【答案】：【解析】：第8题【单选题】实验测定链霉素对三种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线(3条均与图中链霉素带接触)，将平板置于37℃恒温箱内培养3天，结果如图所示，从实验结果看，以下的叙述错误的是( )A、它能阻止结核杆菌生长B、它对结核杆菌比对霍乱菌更有效C、它对结核杆菌比对伤寒菌更有效D、它可以用于治疗伤寒病人【答案】：【解析】：第9题【单选题】下列关于高中生物学实验的叙述，正确的是( )A、在制备果酒和果醋的实验过程中都要持续通入氧气B、分离土壤中不同种类的微生物需采用相同的稀释度C、将DNA粗提取后用二苯胺进行鉴定时需要进行水浴加热D、选择过氧化氢酶作为探究温度对酶活性影响实验的理想材科【答案】：【解析】：第10题【单选题】下列有关实验的描述中，正确的有( )①稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目②在高倍显微镜观察线粒体实验中用健那绿染色后细胞死亡③橙色的重铬酸钾溶液在碱性条件下可与酒精发生反应，变成灰绿色④观察洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂的实验中可用碱性染料吡罗红染色⑤用果胶酶处理苹果泥时，大幅度提高反应温度能使果胶酶更充分地催化反应．A、1项B、2项C、3项D、4项【答案】：【解析】：第11题【单选题】下列有关微生物培养与应用的说法正确的是( )A、分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源B、大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段C、微生物在固体培养基上生长时可形成肉眼可见的单个细菌D、接种前需要对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行消毒处理【答案】：【解析】：第12题【填空题】凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．目前，利用微生物生产高活力的凝乳酶是主要发展方向．如图1，用紫外线照射芽孢杆菌，分离、培养，再检测各菌株所产生的凝乳酶活力．请回答下列问题：（1）为达到分离的目的，需要配制培养基，主要步骤是计算→称量→溶化→______→分装→倒平板．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______（2）图中过程b的目的是通过平板划线法获得______；通常使用的划线工具是______（3）上述平板培养基中应含有______、水和无机盐等营养成分．固体培养基中常用琼脂作凝固剂，理想的凝固剂应具有的特点是______（多选）．A．含有某些特殊的营养物质B．消毒灭菌不会改变其特性C．能被微生物分解和利用D．微生物生长温度范围内保持固体状态E．配制方便且有良好的透明性（4）在一定温度下（35℃），一定时间内（通常为40分钟），凝固1mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位（U）凝乳酶活力检测结果如图2所示，图示说明基因突变是______（5）同样是杆菌，但作用大相径庭．绿脓杆菌常引发烧伤病人化脓性感染，临床上常用阿洛西林、比阿培南、美罗培南、头孢菌素等抗生素进行治疗．为确定患者体内的绿脓杆菌对上述不同抗生素的敏感性，做了相关的实验．将含等剂量的阿洛西林、比阿培南、美罗培南、头孢菌素的相同大小的滤纸片分别均匀置于平板培养基上的不同位置，适宜条件下培养一段时间，观察结果如图3．根据结果判断，患者最适宜选用的抗生素是______【答案】：【解析】：第13题【填空题】某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株．请回答：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以______为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于______培养基．（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈______状态放置．为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行______处理．为了排除______，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照．（3）为了筛选出菌株，可将适量的______试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是______，则说明此种菌能够分泌脂肪酶．（4）纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用______法接种于新的培养基平板上．【答案】：【解析】：第14题【实验探究题】在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
第一章 无茵操作技术实践 第1课时 复习学案 苏教版选修1
第一章无茵操作技术实践第1课时复习学案苏教版选修1微生物营养要素及培养基配制过程、原则1、微生物的营养要素微生物的营养物质主要包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子五大类，列表总结如下：微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐；对于异养生物而言，含有C、H、O、N的化合物既是碳源也是氮源，也可能是能源；NaHCO3既是无机盐，也是自养微生物的碳源；绝大多数微生物缺乏合成生长因子的能力或合成能力有限，所以要在培养基中加入生长因子。
2、微生物培养基的配制（以牛肉膏蛋白胨培养基为例）（1）配制培养液在200 mL烧杯中加入100 mL蒸馏水，再加入0. 5 g牛肉膏、l g蛋白胨、0. 5 g NaCl、1g琼脂，边加热边搅拌，配制成培养液。
（2）调节pH采用pH试纸测试，调节培养基的酸碱度至7. 0～7. 2。
（3）分装将培养基趁热分装到洁净的试管中. 培养基的高度约为试管高度的1／5。
注意不要污染试管口，用棉花塞塞紧试管。
（4）包扎将3～5支试管扎成一捆，外包1层牛皮纸或2层报纸，用线扎好。
在试管壁上注明培养基的名称、组别、配制日期等。
（5）灭菌高压蒸汽灭菌是常用的灭菌方法。
在温度为121℃，气压为1.0 kPa的条件下灭菌20 min。
切断电源，待压力表中指针指向“0”点后，取出灭菌物品。
（6）搁置斜面待试管冷却至50℃左右，将试管口部枕在高约1 cm的木条或其他合适高度的物体上，使其自然倾斜，斜面长度不超过试管总长的1／2。
3、微生物培养基的配制原则（1）目的要明确（根据微生物的种类、培养目的等）。
如培养基可由简单的无机物组成，生产用的培养基内可加入化学成分不明确的天然物质，而分类鉴定用的培养基内必须加入已知化学成分的物质。
（2）营养要协调。
注意各种营养物质的浓度和比例。
（3）pH要适宜。
各种微生物适宜生长的pH范围不同。
如细菌、放线菌和真菌的最适pH 分别为：6.5～7.5、7.5～8.5、5.0～6.0。
2019-2020学年高中生物第一章无茵操作技术实践第一节微生物的培养和应用素材苏教版选修1.doc
2019-2020学年高中生物第一章无茵操作技术实践第一节微生物的培养和应用素材苏教版选修1——微生物培养基的类型由于各种所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。
据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、以及不同的使用目的等而分成若干类型。
1.按照培养基的成分来分培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
(1)合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2.按照培养基的物理状态分培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
(3)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
3.按照微生物的种类分培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等。
2019-2020学年度高中生物《生物技术实践》第一章 无茵操作技术实践第一节 微生物的培养和应用苏教版课后辅
2019-2020学年度高中生物《生物技术实践》第一章无茵操作技术实践第一节微生物的培养和应用苏教版课后辅导练习第二十篇➢第1题【单选题】下列关于分离技术或方法的叙述，错误的是( )A、将细胞匀浆放入离心管中进行差速离心可分离各种细胞器B、用含有刚果红的培养基可分离出能分解尿素的微生物C、利用DNA和其它杂质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同的特性分离出DNAD、使用凝胶色谱法可以分离不同相对分子质量的蛋白质【答案】：【解析】：➢第2题【单选题】下列说法不正确的是( )A、科学家从70～80℃热泉中分离得到耐高温的TaqDNA聚合酶B、统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5 ，以M3作为该样品菌落数的估计值C、设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度D、同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多【答案】：【解析】：➢第3题【单选题】在谷氨酸发酵生产中，必须不断地调整PH，原因是( )①在发酵过程中，溶液的PH会发生变化②当PH呈酸性时，谷氨酸的产量会下降③不调整PH，培养液中生产的谷氨酸会转变成其他物质．A、①②B、①③C、②③D、①②③【答案】：【解析】：➢第4题【单选题】用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是A、未接种的选择培养基B、未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C、接种了的选择培养基D、接种了的牛肉膏蛋白胨培养基【答案】：【解析】：➢第5题【单选题】下列关于生物学实验和调查活动的叙述，正确的是( )A、平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌，但前者不能用来计数B、观察有丝分裂根尖分生区多数细胞染色体排在细胞中央C、^32P标记的噬菌体与大肠杆菌共培养时间过长，搅拌离心后上清液放射性强度所得到数值与实际数值相比，可能偏小D、调查土壤小动物丰富度时，用诱虫器采集小动物时没有打开装置上的电灯导致所得到数值与实际数值或者应得数值相比，可能偏大【答案】：【解析】：➢第6题【单选题】下列有关菌种保藏的叙述中，错误的是( )A、频繁使用的菌种，可用斜面基保藏在4℃的冰箱中B、临时保藏菌种的培养基不需要定期更换C、长期保藏的菌种，需要降低代谢和变异发生概率D、长期保藏菌种时，各取lmL灭菌甘油和培养菌液混匀后保存在-20℃冷冻箱中【答案】：【解析】：➢第7题【单选题】以纤维素为唯一碳源筛选出多种具有较高纤维素降解能力的微生物，其中有真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与下列哪种生物类似( )A、硝化细菌B、蓝藻C、蚯蚓D、兔子【答案】：【解析】：➢第8题【单选题】关于细菌的叙述中，正确的是( )A、不同种类细菌的生长均需要相同碳源B、常用液体培养基分离获得细菌单菌落C、细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期D、培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选【答案】：【解析】：➢第9题【单选题】微生物分离和培养正确方法步骤是( )A、灭菌、培养基的配制、搁置斜面、接种、培养B、培养基的配制、灭菌、搁置斜面、接种、培养C、接种、灭菌、培养基的配制、搁置斜面、培养D、培养基的配制、接种、灭菌、搁置斜面、培养【答案】：【解析】：➢第10题【单选题】某大肠杆菌能在基本培养基上生长，其突变体M和N均不能在基本培养基上生长，但M可在添加了氨基酸甲的基本培养基上生长，N可在添加了氨基酸乙的基本培养基上生长，将M和N在同时添加氨基酸甲和乙的基本培养基中混合培养一段时间后；再将菌体接种在基本培养基平板上，发现长出了大肠杆菌（X）的菌落。
高中生物第一章无茵操作技术实践第一节微生物的培养和应用教案苏教版选修
微生物的培养与应用重点知识归纳及讲解(一)微生物需要的营养物质及功能1、微生物需要的营养物质：碳源、氮源、生长因子、无机盐和水五大类。
2、碳源、氮源、生长因子的来源及功能。
严源：无机物＜UCV NaHCOs等1有机物(權、脂肪釀、花生粉饼等3 - 碳涯J常用：糖类，尤其星葡蔔幫-G能：①主要用于构成徽生物的细腕物颱和一些代谢产物・②异养徽生物的主要能源物廣.源：无机氮源(叫、NHA NO3_1有机氮濾(尿素r牛肉承蛋白豚等儿常用：氨盐、硝関盐°功能：主要用于合咸蛋白嵐、核醵和含氮代谢产物.主要包括：维生素、氨基酸、喊基等・I生长因孑彳特点：徽生物生长必不可少的、需求量很少“有些徽生物可以自己合成.功能：是酶和核酣的齟成成分。
(二)培养基的种类及配制原则「目的明确：很据所培养的徽生物种类、培养目的等，选择原料BI营养协调：浓度适宜、比例适宜Bj pH要适宜:鈿菌杲适pH対6 J ,放线菌杲适pH为7.5-S 5，I 其菌摄适pH为5,0-6 0.(三)无菌技术1、无菌技术的内容(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
(3)已经灭菌处理的材料用具不与周围的物品接触。
(4)实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
2、消毒方法(1)煮沸消毒法：如在100 C煮沸5〜6min。
(2)化学药剂消毒法：如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源。
3、灭菌方法(1)灼烧灭菌。
(2)干热灭菌。
(3)高压蒸汽灭菌。
(四)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、计算根据配方比例，计算配制一定量的培养基所需各种成分的用量。
2、称量3、溶化4、灭菌5、倒平板思考：平板冷凝后，为什么要将平板倒置?口迅連通过火1,舟灭过■的培界01放庄火培旁的鼻巾上.右的左手捷1.州序丰的梅抬牠會描将堵养*打开抵欄大于脱口附费电・右手将整曲■中的20mL)^人培捽n,左手翼即盃I堪粹皿的m亂■固.k^jW5-10 nun,然乩轉甲扳開过僅Jd■在下* ■庭农上.平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒 置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污 染。
高中生物第一章无菌操作技术实践第1课时微生物的分离和培养同步备课教学案苏教版选修
第1微生物的分离和培养[学习导航]1.简述高压蒸汽灭菌锅的使用方法及注意事项。
2.掌握制备细菌培养基的方法。
3.学会利用无菌操作技术接种与培养大肠杆菌。
[重难点击]1.培养基的配制方法及常见种类。
2.大肠杆菌的接种与分离培养。
一、微生物分离和培养的基本理论1.无菌操作技术实验室常利用高温处理达到灭菌效果，包括采用干热灭菌或湿热灭菌等方法。
(1)干热灭菌方法是将拟灭菌的物品放在干热灭菌箱内，在160～170 ℃温度下加热1～2 h 以达到灭菌的目的。
(2)湿热灭菌方法常采用高压蒸汽灭菌锅进行，如手提式高压蒸汽灭菌锅就是实验室常用的灭菌仪器之一。
高压蒸汽灭菌锅的使用包括加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等步骤。
2.配制培养基(1)培养基概念：为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。
(2)培养基类型①天然培养基：采用动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成，如牛肉膏蛋白胨培养基。
优点：取材便利、营养丰富、配制简便；缺点：营养成分难以控制、实验结果的重复性较差。
②合成培养基：由准确称量的分析纯等级别的高纯度化学试剂加蒸馏水配制而成，如葡萄糖铵盐培养基。
优点：化学成分及其含量明确、实验的可重复性好；缺点：配制繁琐、成本较高。
(3)培养基成分：一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。
(4)培养基的配制原则：在配制培养基时，根据拟培养的微生物的不同需要，有时还要加入维生素等特殊的营养物质，并要调节培养基的pH使之满足微生物生长的需要。
3.接种微生物(1)接种的概念：在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。
(2)常用的接种工具：玻璃涂布器、接种针、接种环等。
(3)接种方法①用接种针进行穿刺接种。
②用接种环进行斜面接种或在固体培养基平板上进行划线接种。
③用玻璃涂布器进行涂布平板接种等。
1.“无菌操作”与人们的生活休戚相关，无时无处不在。
高中生物第一章无茵操作技术实践第一节微生物的培养和应用素材苏教版选修1(new)
微生物的培养与应用-—微生物培养基的类型由于各种所需要的营养不同，所以培养基的种类很多.据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、以及不同的使用目的等而分成若干类型。
1.按照培养基的成分来分培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
（1)合成培养基.合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。
（2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用.（3）半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2。
按照培养基的物理状态分培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
（1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面.（2)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便,也常用于发酵工业.（3)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
3.按照微生物的种类分培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等.4。
高中生物第一章无菌操作技术实践第一节微生物的分离和培养第2课时微生物分离和培养的技术操作(以(1)
第2课时微生物分离和培养的技术操作(以大肠杆菌为例）学习导航明目标、知重点难点了解培养基的配制过程及培养基的配制原则。
（重点）掌握无菌操作和接种技术.(重、难点）［学生用书P9］阅读教材P10~14分析大肠杆菌的接种与分离培养1．配制牛肉膏蛋白胨培养基错误!→错误!→错误!→错误!→错误!→错误!2．斜面接种和培养大肠杆菌斜面接种大肠杆菌的主要目的有菌种转移、扩大培养和保存纯净菌种等。
具体操作步骤：准备接种→错误!→错误!→错误!→错误!→错误!→错误!3．平板划线分离和培养大肠杆菌在实验室中，平板常常被用来培养、分离细菌等微生物.(1）牛肉膏蛋白胨固体培养基的平板制作配制好的培养基装瓶错误!灭菌→倒平板操作（A.打开瓶塞→B.灼烧瓶口灭菌→C。
倒培养基→D.倒置平板)（2)平板划线分离与培养大肠杆菌①平板划线法的含义：用带有微生物的接种环在平板培养基表面通过分区划线而纯化分离微生物的一种方法。
②注意事项：接种和划线操作时需要在酒精灯火焰附近进行。
③培养结果:可以得到由单个细菌增殖而形成的菌落。
判一判(1）锥形瓶的瓶口通过火焰灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
(√）（2)平板冷凝后，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染.（√)（3）制备细菌培养基的操作顺序为配制培养液、调节pH、灭菌、分装.(×)(4）使用已灭菌的接种环、培养基，操作过程中不再灭菌。
(×）连一连培养基的配制[学生用书P10］利用培养基培养微生物首先要把微生物接种到培养基上,在实验室中,平板常常被用来培养、分离细菌等微生物。
结合教材P10～14内容完成以下探究。
探究1 下表是牛肉膏蛋白胨固体培养基的成分,请说出各成分提供的营养培养基组分提供的主要营养物质牛肉膏5。
0 g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨10。
0 g 碳源、氮源和维生素NaCl 5.0 g 无机盐H2O定容至1 000 mL 氢元素、氧元素骤,学会培养基的配制配制培养基↓调节pH至7。
苏教版高中生物选修一第一章无菌操作技术实践第一节微生物的分离和培养---微生物培养分离技术实例和应用
氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解， 会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1) 筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配 方如表1。
液体培 蛋白 牛肉 氯苯 氯化钠 硝酸铵 无机盐(无 蒸馏水
养基 胨/g 膏/g mg
g
g
碳)
L
Ⅰ号 10 5
5
5
－
－
1
Ⅱ号 － － 50
5
3
适量
• 第四种是？微？生？物降解法
一、 质疑探究
我们能否找到一种能分解石油的微 生物，依靠其强大的繁殖速度，通 过优化筛选，使其快速处理石油污 染呢？
让我们一起来设计实验吧！
明星材料：石油分解菌
实验设计思路
1.寻找石油分解菌 富含石油的极端环境
2.制备培养基 原油无机盐培养基
3.石油分解菌的分离纯化 平板划线法
二、回 归 知 识 点
1.培养基的制备流程 2.倒平板技术精析 3.平板划线法精析 4.稀释涂布法精析 5.菌种的保存
知识点1：培养基的制备流程
1.计算
2.称量
3.溶化
加琼脂时玻璃棒要不断搅拌，防止琼脂 糊底导致烧杯破裂
4.灭菌 培养基：高压蒸汽灭菌；
培养皿等器具：干热灭菌
5.倒平板待培养基冷却到50℃，在酒精灯火焰附
能将石油分解菌筛选出来呢？ +无机盐+
提示：选择培养基（以 石油 为唯生一长碳因源子）+
水
原成分油无K机2H盐P N培aH养2 基(N：H4K) 2MHgSPOF4e：Cl20.C1a-C1l ％酵，母 原油 NaH2OP4O4：PO04 .1-2S0O.54％OH，24O·7(NH4)22SO4：浸0粉.0500含..量200％10％，-.10M -1.0g100S％..15O-％，4·C007..a02H5％C-2l2O00：..：051％0-0.0.00-00.10.100-1-100.5.0-00.％0.01011％，，00F..e02酵2％C- l母202：0.浸5％粉：0.02-0.2％，原油0.5-2％0％。％
精选2019-2020年生物《生物技术实践》第一章 无茵操作技术实践第一节 微生物的培养和应用苏教版习题精选第
精选2019-2020年生物《生物技术实践》第一章无茵操作技术实践第一节微生物的培养和应用苏教版习题精选第五十七篇第1题【单选题】下列说法中不正确的是( )A、科学家从70℃～80℃热泉中分离得到耐高温的TaqDNA聚合酶B、设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度C、统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5 ，以M3作为该样品菌落数的估计值D、同其他环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多【答案】：【解析】：第2题【单选题】选用下列实验材料能得到预期实验结果的是( )A、用^35S标记噬菌体研究DNA的半保留复制B、用人的成熟红细胞观察DNA、RNA的分布C、用富含枯枝落叶的土壤分离纤维素分解菌D、用T细胞和骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体【答案】：【解析】：第3题【单选题】下列有关颜色反应的叙述，错误的是( )A、在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现蓝绿色B、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料C、细菌分解尿素后，会使培养基的碱性增强，使得加入的酚红指示剂变红D、刚果红可以与纤维素形成红色复合物【答案】：【解析】：第4题【单选题】下列关于植物组织培养中灭菌操作的叙述中，错误的是( )A、外植体用酒精消毒B、镊子等器械需用酒精灭菌C、操作者双手用酒精消毒D、培养基需高压蒸汽灭菌【答案】：【解析】：第5题【单选题】做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是( )A、高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B、倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C、为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D、用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上【答案】：【解析】：第6题【单选题】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的叙述不正确的是( )A、等培养基冷却后在酒精灯火焰附近倒平板B、右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰C、将锥形瓶中的培养基倒入培养皿后，立即盖上皿盖D、待平板冷却后将平板倒置，使皿盖在上、皿底在下【答案】：【解析】：第7题【单选题】下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是( )A、制作果醋时应不断通入无菌空气B、在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用平板划线法C、通过比色法来检测亚硝酸盐含量需要制备标准显色液D、利用DNA和蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同提取DNA【答案】：【解析】：第8题【单选题】“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不能筛选成功的是( )A、在全营养的培养基中，筛选大肠杆菌B、在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物C、用纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能够分解纤维素的微生物D、在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物【答案】：【解析】：第9题【单选题】要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用( )A、固体培养基B、液体培养基C、加入青霉素的培养基D、加入高浓度食盐的培养基【答案】：【解析】：第10题【单选题】能促进分解植物细胞壁的酶可以在下列哪种生物体内找到( )A、动物病毒B、硝化细菌C、酸奶中的乳酸菌D、家兔盲肠中的细菌【答案】：【解析】：第11题【单选题】伊红﹣美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是( )A、大肠杆菌在该培养基中形成特定的菌落B、大肠杆菌能使培养基改变颜色C、大肠杆菌能在该培养基中很好生活，其余微生物不能很好生活D、大肠杆菌的代谢产物与伊红﹣美蓝结合，使菌落呈深紫色，并有金属光泽【答案】：【解析】：第12题【单选题】下列有关刚果红染色法的叙述，不正确的是( )A、刚果红可以在倒平板时加入B、在倒平板时加入刚果红不需要灭菌C、刚果红可以在菌落形成后加入D、在菌落形成后加入刚果红不需要灭菌【答案】：【解析】：第13题【实验探究题】利用微生物分解淀粉生产糖浆具有广阔的应用前景．某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验．实验步骤：①配制以______为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是______．②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现______．③将接种针用______法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入______（固体、半固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖．上述所有倒平板和接种操作，都应在超净台上______附近进行．上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于______培养基，如果在培养基中加入碘，则该含有碘的培养基从功能上属于______培养基．上述中能够高效分解淀粉的细菌的代谢类型是______ ．【答案】：无【解析】：第14题【实验探究题】培养基中含有的尿素和葡萄糖分别为细菌培养提供了______和______。
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微生物的培养与应用
——微生物培养基的类型由于各种所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。
据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、以及不同的使用目的等而分成若干类型。
1.按照培养基的成分来分
培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
(1)合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2.按照培养基的物理状态分
培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
(3)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
3.按照微生物的种类分
培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等。
4.按照培养基用途分
培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。
(1)加富培养基。
是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液，用以培养要求比较苛刻的某些微生物。
(2)选择性培养基。
是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。
利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。
(3)鉴别培养基。
是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。
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