高效液相色谱仪课件
合集下载
高效液相色谱-HPLCppt课件.ppt
色谱法的分类
按固定相的形态分:
平面色谱 o 纸色谱
o 薄层色谱
柱色谱
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
色谱法的分类示意图
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
▪ 高压梯度洗脱（高压混合，高压进柱，2个 泵。）
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
▪安捷伦泵：小视频 ▪色谱学堂：泵
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
色谱法原理及分类
什么是色谱法 色谱法溯源 Tswett（茨维特)的实验 色谱法原理 色谱法的分类
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
什么是色谱法
色谱法是一种现代的分离分析方法 1906年正式命名(见诸文献) 20世纪30年代开始广泛研究和应用 高效液相色谱法的广泛应用始于20世纪70年代
1. 紫外—可见光度检测器：
①固定波长：254nm ， 低压汞 灯。
② 可 调 波 长 ： 190 ～ 800mm ， 钨灯，氘灯。
UV
③光电二极管矩阵检测器： 190～700nm。
接色谱柱 石英窗 光电倍增管
废液
▪篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
高效液相色谱法原理及其应用ppt课件
+ 固定相——具有生物活性的配基键 合到载体表面上形成
+ 适用于生物样品中酶、抗体、受体 等的分离
+ 分离机制：利用化学反应将固定液 的官能团键合在载体表面，使组分 在吸附－分配的过程中分离
+ 应用较广泛的色谱法：反相键合相 色谱
+ 固定相：极性小的烷基键合相 C8柱，C18柱（ODS柱）
+ 流动相：极性大的甲醇-水或乙腈水
+ 色谱分析法是分析化学中获得广泛应用 的一个重要分支，是一个具有强大生命 力的分离分析技术。
+ 采用高压输液泵将规定的流动相泵入装 有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离 测定的色谱方法。注入的供试品由流动 相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离， 并依次进入检测器，由积分仪或数据处 理系统记录和处理色谱信号，最终得到 各组分的色谱峰。
的缓冲溶 或一定pH 的缓冲溶
液
值的缓冲 液，可加
溶液
入改性剂
分离原理
吸附与解 吸
溶解与挥 发
可逆性的 离子交换
多孔凝胶 的渗透或 过滤
具有锁匙 结构络合 物的可逆 性离解
+ 与气相色谱法的分析方法基本相同 + 定性分析方法：
色谱鉴定法 化学鉴定法 两谱联用鉴定法 + 定量分析方法： 外标法 内标法 面积归一化法（要求每一个组分 都出峰）
HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作 用力，能提高柱的选择性、改善分离度，对
分离起正向作用。且流动相种类较多，选择余 地广，改变流动相极性和pH值也对分离起到 调控作用，当选用不同比例的两种或两种以 上液体作为流动相也可以增大分离选择性。
3．操作条件区别 GC：加温操作（※对气相色谱分离效
+ 适用于生物样品中酶、抗体、受体 等的分离
+ 分离机制：利用化学反应将固定液 的官能团键合在载体表面，使组分 在吸附－分配的过程中分离
+ 应用较广泛的色谱法：反相键合相 色谱
+ 固定相：极性小的烷基键合相 C8柱，C18柱（ODS柱）
+ 流动相：极性大的甲醇-水或乙腈水
+ 色谱分析法是分析化学中获得广泛应用 的一个重要分支，是一个具有强大生命 力的分离分析技术。
+ 采用高压输液泵将规定的流动相泵入装 有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离 测定的色谱方法。注入的供试品由流动 相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离， 并依次进入检测器，由积分仪或数据处 理系统记录和处理色谱信号，最终得到 各组分的色谱峰。
的缓冲溶 或一定pH 的缓冲溶
液
值的缓冲 液，可加
溶液
入改性剂
分离原理
吸附与解 吸
溶解与挥 发
可逆性的 离子交换
多孔凝胶 的渗透或 过滤
具有锁匙 结构络合 物的可逆 性离解
+ 与气相色谱法的分析方法基本相同 + 定性分析方法：
色谱鉴定法 化学鉴定法 两谱联用鉴定法 + 定量分析方法： 外标法 内标法 面积归一化法（要求每一个组分 都出峰）
HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作 用力，能提高柱的选择性、改善分离度，对
分离起正向作用。且流动相种类较多，选择余 地广，改变流动相极性和pH值也对分离起到 调控作用，当选用不同比例的两种或两种以 上液体作为流动相也可以增大分离选择性。
3．操作条件区别 GC：加温操作（※对气相色谱分离效
高效液相色谱仪器故障的诊断与维修-ppt课件.ppt
峰变宽 漏夜
故障排除 增加浓度 使系统到达平衡 检查进样器 使用柱温箱
检查漏夜的位置并维修
出现两个或多个未被完 选择其它色谱条件以改善分离
全分离的物质的峰
效果
检测器时间常数太大 使用较小的时间常数
ppt课件
11
4.峰分叉
现象
判断
柱性能下降
保护柱失效
故障排除 更换色普柱 换柱芯
峰分叉
色谱柱或保护柱被污染 清洗柱或保护柱，必要时更换
检测池被污染或有气体
用甲醇或其他强极性的溶剂冲 洗流通池
ppt课件
21
现象
判断
故障排除
测定的波长选择有误 基线漂移
使用分光光度计说明背景吸收， 如背景值高，说明流动相含有 紫外吸收化合物导致基线漂移。 使用的流动相应在紫外截止波 长以外，或更换溶剂
系统泄漏
检查并进行维修
样品中有强保留的物质 用强度合适的溶剂清洗色谱柱
判断
故障排除
样品前处理时产生降解 用标准品对照、检查样品处理过
或混入杂质
程，换新样品
色谱图出 现鬼峰 前一次进样的洗脱物
增加分析时间或梯度洗脱、提高 流速、如问题仍存在，两次进样 间用强溶剂冲洗色谱柱
注射器脏
清洗注射器、冲洗进样口
ppt课件
15
现象
判断
故障排除
流动相被污染
清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入 口过滤器、使用HPLC级试剂
衡
统平衡
室温不稳
基线漂移 流动相污染或分解
使用柱温箱、将系统置于恒温、 空气对流小的环境
清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入 口过滤器、使用HPLC级试剂
流动相脱气不充分
脱气重新平衡系统
高效液相色谱分析 教学PPT课件
四、离子交换色谱
此法是利用离子交换原理和液相色谱技术相结 合，测定各类阴、阳离子的分离分析方法。它既 适于无机离子，也适于有机物分离，如蛋白质、 氨基酸、核酸等。
1. 原理：利用不同待测离子对固定相的亲和能力 （或离子交换能力）的差别来实现分离的。
阳离子交换: R - SO-3H M R SO-3M H
从速率理论各项的差别看HPLC与GC的区别
H A B Cu u
1）涡流扩散项A 2）分子扩散项 B/u
A=2dp B=2Dl
3）传质阻力项
包括固定相传质阻力系数和流动相传质阻力系数
Hs
Cs df2 Ds
u
Hm
Cm
d
2 p
Dm
u
Hsm
Csm d p2 Dm
u
改进固定相成为提高液相色谱柱效的一个重要问题
惰性核
薄膜型
表面多孔型
四、排阻色谱法固定相
• 软质凝胶：水为流动相，孔径大小由交联剂控制 • 半硬质凝胶：适用于非极性有机溶剂，不能随意 更换溶剂，能耐较高压力，流速不宜大
• 硬质凝胶：多孔硅胶、多孔玻珠；多孔硅胶化学 稳定性好，热稳定性好，机械强度高，吸附问题需 要进行特殊处理。
• 选择填料时首先要考虑相对分子质量排阻极限
三、离子对色谱法（IPC）
主要用来分离强极性有机酸和有机碱。
原理：将与待测物离子A电荷相反的离子B（称为 对离子或反离子）加入到流动相中，使待测离子 与对离子形成离子对AB，该AB离子对的性质与A 离子或B离子的性质不同，即间接改变了待测离子 的保留特性。
还可借助离子对的生成给试样引入紫外吸收活发 荧光的基团，以提高检测的灵敏度。
早期通过在担体上涂渍一薄层固定液制备固定 相, 现多为化学键合固定相（通过化学反应将有机 分子键合在载体表面所形成的柱填充剂，具有稳定、 流失小、适于梯度淋洗等特点 ）。
高效液相色谱仪(HPCL)的演示应用
（1）类胡萝卜 素的HPLC色 谱行为特征： 通常会选择 450nm左右 的波长。当其 吸光系数已知 时,就可以根 据其峰面积对 化合物进行定 量分析。
（2）固定相 的选择： 在类胡萝卜 素的正相HPLC 分离中,最常 用的固定相是 硅胶
（3）温度 由于其线型 和刚性结构, 类胡萝卜素 分子HPLC条 件的改变比 其它化合物 要敏感的多
食品的化学安全性问题是人们关注的热门课题。食品 是人类生活中不可缺少的必需品。各种食品具有不同的 特性和营养成分，直接关系人体的健康。在食品生产过 程中往往需要添加防腐剂、抗氧化剂、人工合成色素、 甜味剂、保鲜剂等化学物质，其含量过高对人体健康不 利。此外食品在生产、包装和运输过程中可能会被化学 物质污染，如发生农药残留[1]、兽药残留[2]等危害人 体健康。通过食物链的富集，人类从食品中摄取了种类 繁多且浓度高于环境浓度的有毒、有害物质，而这些有 害物质的化学结构与性质经动植物体后变得更为复杂。 因此，食品分析的重要性日益重要。
（1）材料破碎
天然类胡萝卜素是 存在于生物组织细胞 中的。如不把细胞破 碎，是不可能将其中 的类胡萝卜素有效地 萃取出来的。因此， “材料的破碎”，准 确地讲是指细胞的破 碎，破碎的程度应达 到“亚细胞级”。
（2）萃取 类胡萝卜素的 萃取一般与材料 的破碎同步进行， 方法包括研磨和 剪切。（化合物 的相似相容原理） 应注意的事项包 括:快速、除氧、 温度、PH
1.绿色蔬菜和水果：所有绿色植物组织的细胞的叶 绿体内包含有同样的主要色素:叶绿素a和b、β-胡 萝卜素、叶黄素、紫黄质和新黄质。 2.黄-橙-红色水果和蔬菜：黄-橙-红色水果中类胡 萝卜素的组分是十分多样化的。同样的颜色可以由 不同的类胡萝卜素来产生。最典型的例子为番茄(番 茄红素)和红辣椒(辣椒红素)。
Agilent 1260 Infinity 高效液相仪基本操作课件
学习交流PPT
15
（四）、进样器
（1）标准自动进样器G1319B
（2）高性能自动进样器G1367E
学习交流PPT
16
自动进样器进样过程（1）
进样前，六通阀切换到旁路位置，来自泵的溶剂进入端口1、6直接
流到色谱柱。
学习交流PPT
17
自动进样器进样过程（2）
进样开始后，取样针抬起，把样品瓶抓至针座上，取样针扎入样品瓶，
学习交流PPT
7
（三）、泵
常用的分析泵有单元泵、 二元泵和四元泵。其中， B型：600bar C型：400bar
学习交流PPT
8
四元泵前视图
学习交流PPT
9
四元泵的工作原理示意图
学习交流PPT
10
二元泵前视图
学习交流PPT
11
二元泵工作原理示意图
学习交流PPT
12
泵头维护注意事项
1、泵头密封垫需要成对更换，反相体系和正相体系 所使 用的密封垫不同。
Agilent1260高效液相色谱仪 硬件简介
学习交流PPT
1
目录
一、组成部分 二、工作原理 三、安装与维护
学习交流PPT
2
一、组成部分
（一）、溶剂柜 （二）、脱气机 （三）、泵 （四）、进样器 （五）、柱温箱 （六）、检测器
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
学习交流PPT
3
仪器的安装
连接线： ①电源线 ②LAN线 ③CAN线 ④遥控线
３、示差折光检测器（RID）
４、荧光检测器（FLD）
５、蒸发光散射检测器（ELSD）
其中，选择性检测器：VWD、 DAD和 RID；
通用型检测器： FLD学、习交E流LPSPTD。
《高效液相色谱仪》课件
《高效液相色谱仪》ppt课件
目 录
• 高效液相色谱仪简介 • 高效液相色谱仪的组成和工作原理 • 高效液相色谱仪的操作流程 • 高效液相色谱仪的维护与保养 • 高效液相色谱仪的实验技术与应用实例
01
高效液相色谱仪简介
定义与特点
定义
高效液相色谱仪是一种分离和分 析复杂混合物中各组分的仪器， 基于物质在固定相和流动相之间 的分配差异实现分离。
。
食品工业
用于检测食品中的添加剂、农 药残留和营养成分等。
高效液相色谱仪的发展历程
起源
20世纪50年代初，基于经典液 相柱色谱的原理，开发出了高
效液相色谱法。
发展
20世纪60年代，出现了填充柱 和柱切换技术，提高了分离效 率。
革新
20世纪70年代，出现了高效微 粒固定相和新型检测器，提高 了灵敏度和选择性。
流动相的纯化和过滤
确保流动相的纯度和清洁度，以避免对色谱柱和检测器造成污染。
流动相的脱气
使用真空脱气法或超声波脱气法去除流动相中的气泡，以避免对色 谱分离造成干扰。
色谱柱的安装与选择
安装色谱柱
按照仪器说明书正确安装色谱柱 ，确保密封性和稳定性。
色谱柱的选择
根据样品的性质和分离要求，选择 合适的色谱柱类型和规格。
检测器对流出的组分进行 检测，并将信号记录下来 ，形成色谱图。
高效液相色谱仪的分离原理
分配原理
组分在固定相和流动相之 间的分配平衡是实现物质 分离的基础。
吸附与解吸平衡
组分在固定相上的吸附与 流动相中的溶解度差异导 致分离。
分子间作用力
分子间的相互作用力（如 范德华力、氢键等）影响 组分的吸附与解吸平衡。
物的分子结构和化学键信息。
目 录
• 高效液相色谱仪简介 • 高效液相色谱仪的组成和工作原理 • 高效液相色谱仪的操作流程 • 高效液相色谱仪的维护与保养 • 高效液相色谱仪的实验技术与应用实例
01
高效液相色谱仪简介
定义与特点
定义
高效液相色谱仪是一种分离和分 析复杂混合物中各组分的仪器， 基于物质在固定相和流动相之间 的分配差异实现分离。
。
食品工业
用于检测食品中的添加剂、农 药残留和营养成分等。
高效液相色谱仪的发展历程
起源
20世纪50年代初，基于经典液 相柱色谱的原理，开发出了高
效液相色谱法。
发展
20世纪60年代，出现了填充柱 和柱切换技术，提高了分离效 率。
革新
20世纪70年代，出现了高效微 粒固定相和新型检测器，提高 了灵敏度和选择性。
流动相的纯化和过滤
确保流动相的纯度和清洁度，以避免对色谱柱和检测器造成污染。
流动相的脱气
使用真空脱气法或超声波脱气法去除流动相中的气泡，以避免对色 谱分离造成干扰。
色谱柱的安装与选择
安装色谱柱
按照仪器说明书正确安装色谱柱 ，确保密封性和稳定性。
色谱柱的选择
根据样品的性质和分离要求，选择 合适的色谱柱类型和规格。
检测器对流出的组分进行 检测，并将信号记录下来 ，形成色谱图。
高效液相色谱仪的分离原理
分配原理
组分在固定相和流动相之 间的分配平衡是实现物质 分离的基础。
吸附与解吸平衡
组分在固定相上的吸附与 流动相中的溶解度差异导 致分离。
分子间作用力
分子间的相互作用力（如 范德华力、氢键等）影响 组分的吸附与解吸平衡。
物的分子结构和化学键信息。
《仪器分析》4-高效液相色谱法
精选课件
(4) 示差折光检测器： 是一种中等灵敏度(10–6 g/mL)的通用型检测器。
是利用纯流动相和含有待测组分的流动相之间折射率的 差别进行检测的。
可分为三类：反射式；折射式（偏振式）和干涉式。常 用前两种。
优点：灵敏度适宜，操作简便是一种通用型的检测器； 缺点：对温度变化敏感，不能用于梯度洗脱。 应用范围：聚合物、糖。还用于分析以紫外检测和荧光
精选课件
药典中的液相色谱检测器
精选课件
常用的检测器:
(1) 紫外光度检测器：是一种选择性浓度检测器，仅 对那些在紫外波长有吸收的物质有响应。
作用原理：基于待测试样对特定波长的紫外光有选择 性的吸收，试样浓度与吸光度的关系服从比尔定律。
结构：
1－低压汞灯 2－透镜 3－遮光板 4－测量池 5－参比池 6－紫外滤光片 7－双紫外光敏电阻
精选课件
⑶ 色谱柱 GC柱很长，特别是毛细管柱可长至几十米至上百米，柱效
很高(理论塔板数N = 104~106)。HPLC柱较短，一般为15~25 cm，柱效(理论塔板数N = 103~104)，低于GC柱。 ⑷ 检测器
与GC相比，HPLC检测器种类较多。 ⑸ 制备色谱
GC难以制备样品，因为进样量小，难以收集或被破坏。 HPLC可进行制备，即制备色谱。
精选课件
2. 进样系统
在高效液相色谱中，常用的进样方式： 高压阀进样：优点是能用于高压，适于大体积进样，重现性
好；缺点是进样阀进样时需排掉一部分试样，不同的进样 量需用不同的定量管，同时峰的扩展也比注射进样大。 微量注射器进样：也可由微量注射器注入取样环少量样品， 即采用较大体积取样环而进少量试样，进样量由注射器控 制，试样不充满取样环，只填充一部分体积。
(4) 示差折光检测器： 是一种中等灵敏度(10–6 g/mL)的通用型检测器。
是利用纯流动相和含有待测组分的流动相之间折射率的 差别进行检测的。
可分为三类：反射式；折射式（偏振式）和干涉式。常 用前两种。
优点：灵敏度适宜，操作简便是一种通用型的检测器； 缺点：对温度变化敏感，不能用于梯度洗脱。 应用范围：聚合物、糖。还用于分析以紫外检测和荧光
精选课件
药典中的液相色谱检测器
精选课件
常用的检测器:
(1) 紫外光度检测器：是一种选择性浓度检测器，仅 对那些在紫外波长有吸收的物质有响应。
作用原理：基于待测试样对特定波长的紫外光有选择 性的吸收，试样浓度与吸光度的关系服从比尔定律。
结构：
1－低压汞灯 2－透镜 3－遮光板 4－测量池 5－参比池 6－紫外滤光片 7－双紫外光敏电阻
精选课件
⑶ 色谱柱 GC柱很长，特别是毛细管柱可长至几十米至上百米，柱效
很高(理论塔板数N = 104~106)。HPLC柱较短，一般为15~25 cm，柱效(理论塔板数N = 103~104)，低于GC柱。 ⑷ 检测器
与GC相比，HPLC检测器种类较多。 ⑸ 制备色谱
GC难以制备样品，因为进样量小，难以收集或被破坏。 HPLC可进行制备，即制备色谱。
精选课件
2. 进样系统
在高效液相色谱中，常用的进样方式： 高压阀进样：优点是能用于高压，适于大体积进样，重现性
好；缺点是进样阀进样时需排掉一部分试样，不同的进样 量需用不同的定量管，同时峰的扩展也比注射进样大。 微量注射器进样：也可由微量注射器注入取样环少量样品， 即采用较大体积取样环而进少量试样，进样量由注射器控 制，试样不充满取样环，只填充一部分体积。
超高效液相色谱(UPLC)课件
AU AU
对流出时间接近的色谱峰有更好的分离度及更高的灵敏度
2.理论基础
在高效液相色谱速率理论中， Van Deemter方程式的简
化表达式：
如果仅考虑固定相的粒度 对 的影响，其简化方程式可表 达为：
更小的颗粒度……
van Deemter 曲线带来的承诺
如果填料的颗粒继续演变……
填料颗粒尺寸的演变
AU
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50 M inutes
3.00
3.50
4.00
4.50
5.00
0.012 0.010 0.008 0.006
0.004 0.002 0.000 -0.002 0.00
UPLC™ 1.7µm
0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 M inutes 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00
3.1 超高效液相色谱的C18色谱柱
固定相粒度 直径可达
dp
1.7µm 色谱柱长可 达3-5cm
3.1.1 色谱柱颗粒化学
改善了高pH稳定性
改善了硅胶的柱效和反压
改善了低pH稳定性
在杂化的碳-硅基质内具有桥式乙烷的1.7µm颗粒 三官能团键合C18配体
3.1.2 色谱柱硬件
筛板、柱管和连
HPLC
45.05 41.22 43.13
%
10.57 9.68
12.91
16.58 17.78 22.96 19.16
1.68 3.26
5.99
0 H040114A_RP_ESI+_002AB 100
28.88 32.91 45.23 25.60
高效液相色谱法培训PPT课件
注意事项与常见问题解答
样品处理注意事项
01
避免样品污染、损失或变质，确保处理过程的准确性和可重复
性。
常见问题及解决方法
02
针对样品处理过程中可能出现的问题，如回收率低、干扰物质
多等，提供相应的解决方法。
安全与防护
03
注意有毒有害试剂的使用安全，做好个人防护和环境保护工作。
04 方法开发与优化策略
梯度洗脱程序设计思路
初始比例确定
根据待测组分的极性差异，选 择合适的初始流动相比例。
梯度斜率设置
根据组分的分离情况，调整梯 度斜率，使各组分在合适的保 留时间内洗脱出来。
梯度时间设置
确保梯度洗脱过程中，各组分 能够充分分离，同时避免过长 的分析时间。
梯度曲线类型
根据实际需求选择合适的梯度 曲线类型，如线性梯度、凹形
梯度或凸形梯度等。
方法验证内容及标准
精密度
准确度
通过添加回收率试验，验证方法 的准确度，确保测定结果可靠。
考察方法的重复性和中间精密度， 确保测定结果的稳定性。
线性范围
确定方法的线性范围，确保待测 组分浓度在该范围内时，测定结 果准确可靠。
专属性
考察方法对待测组分的选择性， 确保其他共存物质不干扰测定。
长期稳定性
考察样品在规定的储存条件下放置一定时间后的稳定性，以确定 样品的保质期和储存条件。
方法学考察
对分析方法本身进行稳定性考察，包括方法的耐用性、重复性和 中间精密度等指标的评估。
质量控制图绘制和应用
质量控制图绘制
根据长期稳定性考察数据，绘制质量控 制图，包括平均值、标准差和控制限等 指标。
VS
发展历程及应用领域
超高效液相色谱法PPT课件
• 3、 高温分析
•
柱温最高达150℃；高温促使新技术的应用，比如绿色色谱法
（Green LC）。
4、 高速LCMS分析
•
与超快速LCMS、LCMS-2020相结合。
第35页/共49页
头发中烟碱和可替宁的超高效液相色谱测 定
• 烟碱( nicotine)是烟草中的主要生物碱, 是导致
吸烟成瘾的物质动因, 也是评价人体摄入烟草烟
第24页/共49页
• 此技术可保证可靠、重现的进样；在自动进样器内，可安置96 位或384位样品盘。每个位置可放置2或4mL样品瓶。新型的样 品组织器可接受21个样品盘的编程。
第25页/共49页
• 与传统的HPLC相比，UPLC的速度、灵敏度及 分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍。
• 因此其在蛋白质、肽、代谢组学分析及其它一 些生化领域里将会得到广泛应用。另外，在天 然产物的分析方面，使用UPLC与质谱检测器连 接，会对天然产物分析，特别是中药研究领域 的发展是一个极的促进。
第47页/共49页
第26页/共49页
• 在提到“蛋白组学”或“代谢组学”时，与 没有“组”的差别从分析的角度说就是样品量 极大，需要在短时间分析成千上万的样品。 UPLC不损失分离度的高速度优点在里就能充分 体现。多生化样品及天然产物都十分复杂，
第27页/共49页
第28页/共49页
Waters UPLC 超高效液相色谱
• 3 μm是15 cm长普通色谱柱颗粒大小的极限。这是在色谱柱达 到最佳流速而又不超出市售仪器（使用任何配比的甲醇－水混 合溶剂）的压力限制范围的条件下，运行系统所能使用的最小 颗粒大小。（注意：迄今为止，用于HPLC的最小颗粒是0.67 μm