血小板临床输注

单采血小板
优
单一供者
点
易于配型
红细胞及白细胞残留量低
血小板剂量受限
缺
来源有限
Biblioteka Baidu
点 单采耗时长，给供者带来不便
手工血小板
可以增加剂量 来源广泛
来自捐献的全血，数量巨大 多个供者
不便于配型
红细胞及白细胞残留量高
血小板输注的适应证
• 预防性血小板输注 • 治疗性血小板输注
预防性血小板输注
使各种血小板生成障碍患者的血小板计数达 到安全水平，防止出血。
邓晶、夏文杰、叶欣、徐秀章、邵媛、陈扬凯、丁浩强、罗广平、王嘉励（广州血 液中心临床
输血研究所）热带医学杂志 2012年11月第12卷第11期 • 文中观点：
通过收集22例临床上确诊为新生儿免疫性血小板减少症（NIT）的患儿为研究对象， 采用 ELISA 方法检测患儿及其父母的血小板相关抗体，应用 PCR-SSP法对患儿及父 母进行 HLA及HPA基因分型，根据相应的抗原进行抗体特异性分析。结果22例NIT患 儿中，14 例是由于同种免疫性因素引起的，其中 27.3％（6例)由 HLA抗体引起 ,13.6％（3例）由HPA抗体引起，22.7％（5例）由HLA＋HPA 抗体引起 ；9.1％（2 例）由于被动免疫性因素引起;27.3％（6例 ）由自身抗体引起 。其中,同种免疫性 抗体以抗 HLA-A2、19，抗-B40 及抗 HPA-3a多见。 • 结论： 在新生儿免疫性血小板减少症中，主要以父母血小板血型不合引起 新生儿同种免疫性血小板减少症为主，临床产前诊断预防和产后治疗具有重要意义。
NAIT
NAIT
NAIT
NAIT
PTR
血小板输注无效：platelet transfusion refractoriness ,PTR 是指患者在连续两次接受足够剂量的血小板输 注后，仍处于无反应状态，即：临床出血表现 未见改善；血小板计数未见明显增高，有时反 而会下降；输入的血小板在体内存活期很短； CCI和PPR未能达标.
轻离心
重离心
富血小板血浆
红细胞
PRP法
重离心
贫血小板血浆 血小板
全血分离的 血小板
轻离心
贫血小板血浆
白膜 红细胞
Buffy coat 法
单采血小板
又称机采血小板，来自单个供者，一个 治疗量的血小板从10U（200ml）全血中分离 得到。我国规定一份单采血小板含量不低于 2.5×1011个。
手工血小板VS单采血小板
◆目前在我国，对于肝素所致的血小板减少症及血 栓并发症研究较少，没有这方面的统计数字。
总结
1. 血小板表面有很复杂的抗原系统；
2.血小板表面的抗原能够刺激机体产生相应的抗体，导致血小
板输注无效、输血反应、NAIT、流产等疾病；
3. 对于不相合的血细胞输注，人们无法容忍,而对于不相合的
血小板输注却认为是常规，事实上血小板输注无效，同样 面临着死亡-出血而亡;
对于免疫复合物机制，可以将药物直接加入待检标本中； 对于半抗原机制，可将其加入0.5%BSA中。
检测时加入药物的浓度，应参照相应药物的药代动力学 数据，选用下列三个浓度：
1.略低于谷浓度 2.峰浓度 3.峰浓度的5-10倍。
对照标本与血小板
无药物性血小板减少症的健康人标本，作为本 实验的对照标本。
◆父母双亲的HPA基因检测，在高加索地区采取对 其HPA-1和HPA-5基因检测，而在亚洲地区应考虑进 行HPA-4和HPA-5基因检测。
◆父母双亲交叉配型实验，将母体血清与父亲血小 板进行交叉配型实验，即使不能确切知道不相合的 抗原，但这种方法也能发现母体是否存在血小板同 种异体免疫反应。
NAIT
受血者血清/血浆 50μl/孔
阳性 水浴 洗30涤m5i次n
反应板 （已包被血小板单抗）
血小板单层
阴性
指示红细胞 （人IgG致敏红细胞）
抗人IgG 各50μl/孔
200g,5min离 心
200g,5min离 心
阳性反应
阴性反应
PLT1 PLT2 PLT3 PLT4 PLT5
PLT6 NC PC
血小板交叉配型意义
胎盘屏障
Y
YY Y
NAIT
◆胎母同种异体免疫血小板减少症（fetomaternal alloimmune thrombocytopenia，FMAIT） 致病机理与新生儿溶血病（HDN）相似。
◆由于胎儿遗传自父亲的血小板抗原刺激母体产生IgG型的抗血 小板抗体。 瘀点和瘀斑，神经系统损伤，颅内出血甚至死亡。
4-6人份混合，O型血小板。该血小板与待检 血小板做配型实验，结果应为阴性。
每一个标本使用三条试剂，一条用于免疫复合 物机制，两条用于半抗原机制。
检测标本
对照标本
浓度1 浓度2 浓度3 浓度1 浓度2 浓度3
免疫复合物机制
试验布局
PC
NC
半抗原机制
阳性对照
阴性对照
肝素引起的血小板减少症
• 肝素引起的血小板减少症（heparin-induced thrombocytopenia，HIT）， 患者主要表现为血小板减少，而主要并发症却是病理性（通常是致命 性的）血栓形成。
◆因多数病例在出生后才得以诊断，故此病也称作新生儿同种 异体免疫血小板减少症。
◆初次妊娠妇女即可发生FMAIT，其发病率大约为1/800-1500 。
NAIT临床表现
◆FMAIT患儿病情变化较大，具有自限性，常在出生后 2-3周恢 复。
◆轻度血小板减少患儿有时没有任何临床症状。病情较重患儿 临床表现为皮肤、体内外黏膜出血，出现紫癜、瘀点或瘀斑。
免疫复合物机制：药物与抗体结合形成免疫复合物， 与血小板上的Fc受体结合，介导血 小板的破坏。
半抗原机制：药物小分子与血小板膜蛋白结合，形成 新的抗原，刺激免疫系统产生抗体，从 而破坏血小板。
怀疑患者因应用药物而导致血小板减少症时，应准备相 应的药物。如果为液体剂型，可以直接使用。如果为固体剂 型，需要将其破碎、溶解于蒸馏水中。
小板无力症、抗血小板药物
输注剂量及方法
成人每次输注一个治疗量，严重出血或易产生 同种免疫者可一次输注2个治疗量。 儿童根据年龄和病情决定输注量 新生儿输20-30ml
取回的血小板尽快输，以患者可耐受的 最快速度输！
输注剂量及方法
➢给成人预防性输注 血小板时，推荐使用 一个治疗量。如果不 出现血小板输注无效， 这将使体内血小板水 平至少增加20×109/L
包被血小板后，处理组板条中加入2滴二磷酸氯喹；对照组 板条加入2滴生理盐水，37℃水浴30分钟，洗板三次，然后继续 检测
未处理孔 阳性 阳性 阳性 阴性 阴性
处理孔 阴性 阳性 弱阳性 阴性 阳性
抗体类型 HLA抗体 HPA抗体 HLA抗体（+ HPA抗体） 无相关抗体 重新实验，查明原因
PN
氯喹处理组 盐水对照组
◆严重患儿可能发生颅内出血（intracranial haemorrhage， ICH），占15%-20%。
◆与FMAIT相关的ICH80%发生在子宫内，其中14%发生在妊娠20 周前，28%发生在妊娠30周前。
NAIT早期诊断与筛查
◆母体血清抗HPA抗体检测，然而母体抗体水平到 预产期时逐渐下降，约有30%的病例抗体阴性。
区分HLA、HPA抗体
盐水对照组
PC NC
氯喹处理组
盐水对照组 氯喹处理组 盐水对照组 氯喹处理组
药物性血小板抗体检测
许多药物会导致血小板减少，常见的有肝素、奎宁、奎 尼丁等，均会诱导产生药物依赖性血小板抗体，从而产生血小 板减少症。
药物性抗体产生的机制尚不完全明了。目前认识的产生 机制主要有：
◆ 如何在孕前/孕期正确地评估因父母血小板血型不合 引起的流产、NAIT的风险？
◆ 曾有反复流产史的育龄妇女，可在怀孕前进行夫妻双 方的血小板相关抗体检测，对由于母婴血小板血型不 合而导致的流产或 NAIT进行早期的诊断和治疗。
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
• 父母血小板血型不合引起新生儿同种免疫性血 小板减少症的初步研究
◼血小板输血采用随机供者血小板有效率不超过30%； ◼采用交叉配型相容性血小板有效率为92%，而对于重度血 小板免疫患者，输注相容性血小板有效率为70%。
血小板抗体检测方法-固相凝集法
同种/同种异体抗体检测
血小板谱细胞 （三人份O型混合血小板）
50μl/孔
50g,5min离心 洗涤3次
患者血清/血浆 50μl/孔
1. 血小板生成障碍：骨髓抑制、骨髓衰竭 2. 稀释性血小板减少：大量输血时 3. 血小板功能异常：血小板无力症、抗血小板药
物
禁忌症
1. 血栓性血小板减少性紫癜（TTP）：首选 血浆置换。
2. 溶血尿毒综合征（HUS）：局部血管内凝 血
3. 免疫性血小板减少（ITP）： 4. 药物、脾亢导致的血小板减少：HIT、血
血小板临床输注
血小板制品
◆全血分离的血小板：又称手工血小板。由 200ml全血制备的浓缩血小板为1个单位，所 含血小板数应≥2.0×1010个。制备方法有富 血小板血浆法和白膜法。
◆单采血小板：血细胞分离机采集的单采血小 板1人份（袋），即为一个治疗量，所含血 小板数≥2.5×1011个
全血分离的血小板
1. 血小板计数低于20×109/L，伴有血小板消耗 或破坏增加的因素，如感染、发热、脾肿大、 DIC。
2. 病情稳定，血小板计数低于10×109/L。 3. 血小板计数低于5×109/L,立即输注。 4. 实施侵入性操作时，血小板计数应提高至
50×109/L以上。
治疗性血小板输注
针对因血小板数量减少或功能异常而导致的 出血，输血小板以达到快速止血。
4.为了有效地利用血小板，输注血小板之前应进行血小板抗体
检测和交叉配型，进行血小板配合性输注。
总结
5.血小板抗体检测对预防非溶血性输血反应，诊断 NAIT、评估胎母血小板不合导致的流产风险有重要 意义
血小板输注无效
血小板输注无效的危害
1）患者发生免疫反应，加重病情。 2）患者病情得不到改善，病危甚至死亡。 3）浪费财力、物力、宝贵的血小板资源。 4）存在医疗纠纷隐患。 5）不利于采供血机构和医疗机构业务水平的提高。
血小板抗体检测方法-固相凝集法
血小板配型
供血者血小板 50μl/孔
50g,5min离心 洗涤3次
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
• 实验数据
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
• 实验结果
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
处
区分HLA、HPA抗体
理 组
二磷酸氯喹可以破坏血小板膜上HLA抗原。
阳性 水浴 洗30涤m5i次n
反应板 （已包被血小板单抗）
血小板单层
阴性
指示红细胞 （人IgG致敏红细胞）
抗人IgG 各50μl/孔
200g,5min离 心
200g,5min离 心
阳性反应
阴性反应
血小板抗体检测在妇产科领域的应用
◆ 青年女性流产率逐年上升
◆ 每一次怀孕、流产都可能造成母体因外来抗原刺激而 产生抗体，危及下一次妊娠
• HIT禁忌血小板输血。（GUIDELINES FOR THE USE OF PLATELET
TRANSFUSIONS, British Journal of Haematology, 2003,122,10-23）
肝素引起的血小板减少症
HIT
◆在美国，每年有近 1200 万人因肢体或肺部血栓、 心脏病或血管成形术而接受肝素治疗，这 1200 万人当中，有 36 万人将出现 HIT，其中可能有 12 万人会出现血栓并发症（中风、截肢或死亡）， 而有 3 万 6 千人可能会死亡 (Warkentin T E et al. 1995)。
血小板输注疗效评价：临床+检查
血小板回收率（PPR）：1h、24h 1h PPR<30%,24h PPR<20%,考虑血小板输注无效
校正血小板计数增加值（CCI）：1h、24h
1h CCI<7500,24h PPR<4500,考虑血小板输注无效
NAIT机制
母体同种异体抗 体通过胎盘
母体同种异体免疫 胎儿血小板减少