生物：《基因工程的基本操作程序》课件讲义(新人教版选修)
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《基因工程的基本操作程序》课件(新人教选修)
供体生物细胞
取出 DNA 用限制酶剪 去多余部分
限制酶
目的基因
获得目的基因的方法1. 从基因中获取目的基因什么是基因？ 基因的有关信息与什么相联系？
获得目的基因的方法
2.人工合成基因法——PCR扩增技术
PCR (polymerase chain reaction) ——聚合酶链式反应 是一项再生物体外复制特定DNA片段 的核酸合成技术。通过此技术，可获 取大量的目的基因。
基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草 杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。
用人工的方法使体外重组的DNA分子转移到 受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途 径。
目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细 胞的繁殖而复制，由于细菌繁殖的速度非常快，
将目的基因导入受体细胞并使之扩增
导入
扩增
将目的基因导入各类细胞的方法
分子杂交技术
练习
1）以下说法正确的是 （C）
A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷 酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多 个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来
练习
2) 有关基因工程的叙述中，错误的是（ A ）
A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起 来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶
显微注射技术
导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠
将目的基因导入微生物细胞
利用大肠杆菌可以生产出人的 胰岛素。若要生产人的糖蛋白， 可以用大肠杆菌吗？
基因操作的基本步骤
四、目的基因的检测与鉴定
检测转基因生物的染色体DNA上是否 插入了目的基因 检测目的基因是否转录出mRNA 检测目的基因是否翻译成蛋白质
取出 DNA 用限制酶剪 去多余部分
限制酶
目的基因
获得目的基因的方法1. 从基因中获取目的基因什么是基因？ 基因的有关信息与什么相联系？
获得目的基因的方法
2.人工合成基因法——PCR扩增技术
PCR (polymerase chain reaction) ——聚合酶链式反应 是一项再生物体外复制特定DNA片段 的核酸合成技术。通过此技术，可获 取大量的目的基因。
基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草 杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。
用人工的方法使体外重组的DNA分子转移到 受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途 径。
目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细 胞的繁殖而复制，由于细菌繁殖的速度非常快，
将目的基因导入受体细胞并使之扩增
导入
扩增
将目的基因导入各类细胞的方法
分子杂交技术
练习
1）以下说法正确的是 （C）
A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷 酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多 个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来
练习
2) 有关基因工程的叙述中，错误的是（ A ）
A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起 来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶
显微注射技术
导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠
将目的基因导入微生物细胞
利用大肠杆菌可以生产出人的 胰岛素。若要生产人的糖蛋白， 可以用大肠杆菌吗？
基因操作的基本步骤
四、目的基因的检测与鉴定
检测转基因生物的染色体DNA上是否 插入了目的基因 检测目的基因是否转录出mRNA 检测目的基因是否翻译成蛋白质
人教版高中生物选修三1.2《基因工程的基本操作程序》课件18张PPT
将目的基因导 入植物细胞
（二）方法
农杆菌转化法 基因枪法
将目的基因导 入动物细胞
将目的基因导 入微生物细胞
花粉管通道法
——显微注射法
——感受态细胞
四、目的基因的检测与鉴定
（一）、检测
1、检测转基因生物染色体的DNA上是否 插入了目的基因 (关键步骤)
（1）方法: DNA分子杂交
（2）过程:
① 首先取出转基因生物的基因组DNA ② 用含目的基因的DNA片段用放射性同位素 等作标记,以此做探针 ③ 使探针和转基因生物的基因组杂交,若显 示出杂交带,表明染色体已插入染色体DNA中
一、目的基因的获取 未知序列： 从基因获得 ( DNA library )
已知序列： 人工合成 利用PCR技术扩增 聚合酶链式反应(Polymerase Cha胞 DNA 受 目 许多 运 产生 DNA 载入 载 导入 体 扩增 特定 分 的 细 体 片段 性状 离 基 胞 因
1.
随堂测试
1.在基因工程中使用的限制性核酸内切酶， 其作用是（ B ）
A.将目的基因从染色体上切割出来
B.识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C.将目的基因与运载体结合 D.将目的基因导入受体细胞
2.基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基 因工程的叙述中，错误的是（ A ）
A.限制酶只用于切割获取目的基因
2、检测目的基因是否转录出了mRNA （1）方法：分子杂交 （2）过程： 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交，若 出现杂交带,表明目的基因转录出了mRNA。 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法：抗原抗体杂交
（二）、鉴定（个体生物学水平）
抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等
课堂小结获取目的基因 从基因 利用PCR 化学方法人工合成 2. 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ、标记基因 3. 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 4. 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定
高中生物基因工程的基本操作程序课件新人教版选修 PPT
法一:直接分离法(鸟枪法) 提取某种生物得全部DNA
用适当得限制酶酶切
一定大小得DNA片段
将DNA片段与运载体连接
(4)从已有物种分离出目得基因
(生物不同基因得许多DNA片段,导 入受体菌得群体中储存,各个受体菌理获得感受态细胞 ④过程:
Ca2+处理 大肠杆菌
感受态 细胞
表达载体 与感受态 细胞混合
感受态细胞 吸收DNA
例:
若通过基因过程生产人得糖蛋白可以用 大肠杆菌作为工程菌吗？
不可以,糖蛋白上得糖链就是在内质网 和高尔基体上加工完成,而内质网和高尔基 体存在真核细胞中,大肠杆菌就是原核生物, 细胞中不含这两种细胞器。
思考: 人工合成得目得基因就是否具有完整基因 结构得基因？
不具有,缺少非编码区(启动子、终止子)和非编码 序列(如内含子),要人工构建。
二、 基因表达载体得构建——核 心1、作用:
①使目得基因在受体细胞中稳定存在 并遗传给子代。
②同时使目得基因能表达和发挥作用。
2、组成:
IMN
(1)目得基因。
(2)启动子:就是RNA聚合酶识别和结合部位。
导入
含有氨苄青霉素 得完全培养基
不具有氨苄青霉 素 抗性基因得 农杆菌
证明:目 得基因 已导入
农杆菌
农杆菌
存活
含有氨苄青霉素 得完全培养基
农杆菌
具有氨苄青霉素抗 性基因得农杆菌
检测
导入植物细胞通过组织培养产生新个体
组织培养 脱分化
农杆菌
导入植 物细胞
组织培养 脱分化
再分化
个体生物学 水平得鉴定
如虫吃后中毒死亡,则说明摄 入了抗虫基因并得到表达
高中生物基因工程的基本操作程序 课件新人教版选修
用适当得限制酶酶切
一定大小得DNA片段
将DNA片段与运载体连接
(4)从已有物种分离出目得基因
(生物不同基因得许多DNA片段,导 入受体菌得群体中储存,各个受体菌理获得感受态细胞 ④过程:
Ca2+处理 大肠杆菌
感受态 细胞
表达载体 与感受态 细胞混合
感受态细胞 吸收DNA
例:
若通过基因过程生产人得糖蛋白可以用 大肠杆菌作为工程菌吗？
不可以,糖蛋白上得糖链就是在内质网 和高尔基体上加工完成,而内质网和高尔基 体存在真核细胞中,大肠杆菌就是原核生物, 细胞中不含这两种细胞器。
思考: 人工合成得目得基因就是否具有完整基因 结构得基因？
不具有,缺少非编码区(启动子、终止子)和非编码 序列(如内含子),要人工构建。
二、 基因表达载体得构建——核 心1、作用:
①使目得基因在受体细胞中稳定存在 并遗传给子代。
②同时使目得基因能表达和发挥作用。
2、组成:
IMN
(1)目得基因。
(2)启动子:就是RNA聚合酶识别和结合部位。
导入
含有氨苄青霉素 得完全培养基
不具有氨苄青霉 素 抗性基因得 农杆菌
证明:目 得基因 已导入
农杆菌
农杆菌
存活
含有氨苄青霉素 得完全培养基
农杆菌
具有氨苄青霉素抗 性基因得农杆菌
检测
导入植物细胞通过组织培养产生新个体
组织培养 脱分化
农杆菌
导入植 物细胞
组织培养 脱分化
再分化
个体生物学 水平得鉴定
如虫吃后中毒死亡,则说明摄 入了抗虫基因并得到表达
高中生物基因工程的基本操作程序 课件新人教版选修
人教版高中生物选修三1.2《基因工程的基本操作程序》ppt精讲课件
调控基因组：含有一种生物_所__有__的基因
部分基因：含有一种生物的_一__部__分__基因:
①含义:是一项在生物体外_复__制__特__定__D_N_A_片__段__的核酸合成技术。
【解析】选D。基因表达载体的构建是基因工程的第二步,也是 基因工程的核心;一个基因表达载体的组成除目的基因外还必须 具有启动子、终止子、标记基因等部分;目的基因主要是指编码 蛋白质的结构基因;由于受体细胞不同,基因表达载体的构建也 会有差别,不可能都是相同的。
三、目的基因导入受体细胞 1.目的基因导入受体细胞的过程:
遗传
代;
(2)使目的基因能够_____和_________。
表达 发挥作用
2.基因表达载体组成:
启动子
终止子
标记 3.基因表达载体的功能:通过基因表达载体将_________导入受
体细胞。
目的基因
四、将目的基因导入受体细胞
1.转化含义:_目__的__基__因__进入受体细胞内,并且在受体细胞内 _________和_____的过程。 维持稳定 表达
【典例训练3】农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然 条件下感染植物,因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。 下图为农杆菌转化法的示意图,试回答下列问题:
(1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是
,利用农杆
菌自然条件下感染植物的特点,能实现
。具体原理
是在农杆菌的Ti质粒上存在T-DNA片段,它具有可转移至受体细
术要求高
适用范围小
3.PCR技术与生物体内DNA复制的比较:
项目
PCR技术
DNA复制
解旋方式 DNA在高温下变性解旋
解旋酶催化
场所 不酶 同 点 温度条件
部分基因：含有一种生物的_一__部__分__基因:
①含义:是一项在生物体外_复__制__特__定__D_N_A_片__段__的核酸合成技术。
【解析】选D。基因表达载体的构建是基因工程的第二步,也是 基因工程的核心;一个基因表达载体的组成除目的基因外还必须 具有启动子、终止子、标记基因等部分;目的基因主要是指编码 蛋白质的结构基因;由于受体细胞不同,基因表达载体的构建也 会有差别,不可能都是相同的。
三、目的基因导入受体细胞 1.目的基因导入受体细胞的过程:
遗传
代;
(2)使目的基因能够_____和_________。
表达 发挥作用
2.基因表达载体组成:
启动子
终止子
标记 3.基因表达载体的功能:通过基因表达载体将_________导入受
体细胞。
目的基因
四、将目的基因导入受体细胞
1.转化含义:_目__的__基__因__进入受体细胞内,并且在受体细胞内 _________和_____的过程。 维持稳定 表达
【典例训练3】农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然 条件下感染植物,因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。 下图为农杆菌转化法的示意图,试回答下列问题:
(1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是
,利用农杆
菌自然条件下感染植物的特点,能实现
。具体原理
是在农杆菌的Ti质粒上存在T-DNA片段,它具有可转移至受体细
术要求高
适用范围小
3.PCR技术与生物体内DNA复制的比较:
项目
PCR技术
DNA复制
解旋方式 DNA在高温下变性解旋
解旋酶催化
场所 不酶 同 点 温度条件
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