影响赭曲霉毒素A胶体金试纸条最低检出限的因素

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赭曲霉毒素A标准检测规程

赭曲霉毒素A标准操作规程1、目的为了规范亲和柱净化样本中赭曲霉毒素A的操作流程，特制订本操作规程。

2、范围本标准适用于粮食、饲料、食品中赭曲霉毒素A的检测。

3、检出限和定量限项目岛津安捷伦样本检出限（µg/kg）样本定量限（µg/kg）样本检出限（µg/kg）样本定量限（µg/kg）OTA 0.28 0.84 3.6 11.9 4、职责部门名称部门职责质量管理部1、负责本制度的实施。

2、负责本制度的监督执行。

5、程序5.1 原理测定的基础是抗原、抗体反应，抗体连接在柱体内，样品经过提取、过滤后，缓慢的通过赭曲霉毒素A免疫亲和柱，在免疫亲和柱内毒素与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。

用2%乙酸甲醇洗脱赭曲霉毒素A，然后注入到高效液相色谱仪中用于检测。

5.2 溶液配制5.2.1 提取液Ⅰ（用于粮食类样品及酱油、醋类样品的提取）：80%甲醇-水溶液（V甲醇: V水=80 : 20）：取800mL甲醇，加入去离子水定容至1L。

5.2.2 提取液Ⅱ（用于酒类样品的提取）：称取150g氯化钠、20g碳酸氢钠溶于约950mL水中，加水定容至1L。

5.2.3 清洗缓冲液（用于酱油、醋类样品净化步骤的洗涤）：称取12.5g 氯化钠、2.5g 碳酸氢钠溶于水中，加0.1mL吐温-20，用水定容至1L。

5.2.4 冲洗液（用于酒类样品净化步骤的洗涤）：称取25g 氯化钠、5g碳酸氢钠于约950mL水中，加水定容至1L。

5.2.5 洗脱液（甲醇: 乙酸=49 : 1）：取1ml乙酸加入到49ml甲醇中混匀即可。

5.2.6 赭曲霉毒素A标准工作液：用色谱级甲醇将储备工作液分别稀释到20 ng/ml、10ng/ml、5ng/ml、2 ng/ml、1 ng/ml。

5.3 样品前处理5.3.1 粮食类----20g±0.01g样品（固体样品需粉碎，并过2mm分样筛），5g氯化钠于三角瓶中，加入100mL的提取液Ⅰ（见5.2.1）；----高速均质（≥10,000r/min）1min（或用摇床200r/min～300r/min剧烈振荡20min）；----用快速定性滤纸过滤，收集滤液；----取10mL滤液加入40mL去离子水稀释，混匀；----用微纤维滤纸过滤，并收集滤液作为上样液；----取25mL上样液过免疫亲和柱净化。

粮食中赭曲霉素A检验方法的研究进展

Apr. 2024 CHINA FOOD SAFETY169食品科技粮食中赭曲霉素A 检验方法的研究进展姜　雪（松原市粮油质量检验监测站，吉林松原 138000）摘　要：赭曲霉素A （Ochratoxin A ，OTA ）是青霉菌属与曲霉菌属共同产生的具有7种结构的二级代谢产物，在小麦、玉米、大米及大麦等粮食中广泛存在。

赭曲霉素A 可致畸，具有肾毒性、神经毒性、免疫毒性等危害，可引起动物肾脏、肝脏损伤、坏死以及肠黏膜损坏。

本文综述了粮食中赭曲霉素A 的主要检验方法，重点分析与讨论了不同检验方法优缺点，以期为更加准确、高效、便捷的检测粮食中赭曲霉素A 提供依据。

关键词：赭曲霉素A ；理化性质；检验方法Research Progress on the Detection Method ofOchratoxin A in GrainJIANG Xue(Songyuan City Grain and Oil Quality Inspection and Monitoring Station, Songyuan 138000, China)Abstract: Ochratoxin A is a secondary metabolite with seven structures produced by Penicillium and Aspergillus. It is widely found in wheat, corn, rice and barley. Ochratoxin A can cause teratogenicity, nephrotoxicity, neurotoxicity, immunotoxicity and other hazards, which can cause kidney, liver damage, necrosis and intestinal mucosal damage in animals. In this paper, the main detection methods of ochratoxin A in grain were reviewed, and the advantages and disadvantages of diﬀerent detection methods were analyzed and discussed in order to provide a basis for more accurate, eﬃcient and convenient detection of ochratoxin A in grain.Keywords: ochratoxin A; physicochemical properties; testing method1　赫曲霉毒素A 理化性质赫曲霉毒素（Ochratoxin A ，OTA ）是青霉菌属与曲霉菌属共同产生的具有7种结构的二级代谢产物，7种曲霉和6种青霉菌均能产生赭曲霉毒素。

赭曲霉毒素A快速检测方法研究进展及其在中药中的应用前景

赭曲霉毒素A快速检测方法研究进展及其在中药中的应用前景作者：胡淑荣应光耀胡玉莉杨世海杨美华来源：《中国中药杂志》2017年第11期[摘要] 赭曲霉毒素A（OTA）是一类主要由曲霉属和青霉属等真菌产生的次级代谢产物，具有强烈的肾毒性，致畸、致癌、致突变等作用。

研究表明OTA不仅广泛污染于食品饲料和农作物中，近年来在香辛料、甘草等中草药中也被证实广泛存在。

鉴于OTA的普遍性和危害性，该文分别综述了可视化试纸条、流式微球技术、电化学传感器、表面增强拉曼光谱等技术在OTA快速检测上的应用，预期为实现OTA检测快速化、操作简单化、仪器小型化的高通量检测研究和应用提供参考。

[关键词] 赭曲霉毒素A；中药；快速检测方法[Abstract] Ochratoxin A （OTA） is a toxic secondary metabolite mainly produced by Aspergillus and Penicillium species，with strong renal toxicity，teratogenic，carcinogenic，mutagenic effect. Studies have shown that OTA is not only widely contaminated in food and feed crops，but also has been widely contaminated in Chinese herbal medicines such as spices，licorice and so on. In view of OTA′s universality and harmfulness，this paper summarizes the flow visualization test strip，microsphere，electrochemical sensor，surface enhanced Raman spectroscopy technology in OTA rapid detection，which provides reference for the research and application of high throughout detection instrument miniaturization in order to achieve OTA quick detection and simple operation.[Key words] ochratoxin A；Chinese medicine；rapid detection method随着中药材出口逐年增加，我国中药材的安全问题也受到了全世界的广泛关注。

赭曲霉毒素A胶体金快速检测试剂条的研制_邵伟

５８　检测分析　２０１３，Ｎｏ．８收稿日期：２０１３－０４－１５；修回日期：２０１３－０７－２９作者简介：邵　伟（１９８４－），男，助理工程师，主要从事食品安全快速检测研究。

通讯作者：胡叶军（１９８７－），男，主要从事食品安全快速检测研究。

ｄｏｉ：１０．７６３１／ｊ．ｉｓｓｎ．１００３－６２０２．２０１３．０８．０１７赭曲霉毒素Ａ胶体金快速检测试剂条的研制邵　伟１，巴泽忠２，管树舫２，王伟萍１，胡叶军１，盛慧萍１（１．杭州南开日新生物技术有限公司，浙江杭州　３１００２２；２．天津市宝坻区动物卫生监督所，天津　３０１８００）摘　要：为建立一种快速检测饲料中赭曲霉毒素Ａ的检测方法，应用胶体金免疫层析技术，研制了一种饲料中赭曲霉毒素Ａ的免疫胶体金快速检测试剂条。

将羊抗鼠ＩｇＧ、特异性结合抗原和金标抗体三者经过反复调试优化，以适宜浓度和包被量分别包被到硝酸纤维素膜和胶体金结合垫上，包被后的硝酸纤维素膜、样品垫、胶体金结合垫、吸水垫及其他辅料组装成试剂条。

试剂条的最低检测限为２５μｇ／ｋｇ，与其他霉菌毒素的交叉反应率小于１％。

该试剂条可用于饲料中赭曲霉毒素Ａ的快速检测。

关键词：饲料；赭曲霉毒素Ａ；胶体金；快速检测；试剂条中图分类号：Ｓ８１６．２文献标志码：Ａ文章编号：１００３－６２０２（２０１３）０８－００５８－０５Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｏｌｌｏｉｄａｌ　ｇｏｌｄ　ｒａｐｉｄ　ｔｅｓｔ　ｓｔｒｉｐ　ｆｏｒ　ｏｃｈｒａｔｏｘｉｎ　ＡＳｈａｏ　Ｗｅｉ　１，Ｂａ　Ｚｅｚｈｏｎｇ２，Ｇｕａｎ　Ｓｈｕｆａｎｇ２，Ｗａｎｇ　Ｗｅｉｐｉｎｇ１，Ｈｕ　Ｙｅｊｕｎ１，Ｓｈｅｎｇ　Ｈｕｉｐｉｎｇ１（１．Ｈａｎｇｚｈｏｕ　Ｎａｎｋａｉ　Ｂｉｏｔｅｃｈ　Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｈａｎｇｚｈｏｕ　３１００２２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｂａｏｄｉ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ，Ｔｉａｎｊｉｎ３０１８００，Ｃｈｉｎａ）ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｒａｐｉｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｏｃｈｒａｔｏｘｉｎ　Ａ（ＯＴＡ）ｒｅｓｉｄｕｅ　ｉｎ　ｆｅｅｄ，ａ　ｒａｐｉｄ　ｔｅｓｔ　ｓｔｒｉｐ　ｏｆ　ｏｃｈｒａｔｏｘｉｎ　Ａｗａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ＧＩＣＡ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ａｆｔｅｒ　ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｐｒａｙ　ｖｏｌｕｍｅ　ｏｆ　ｇｏａｔ　ａｎｔｉ－ｍｏｕｓｅ　ＩｇＧ，ｓｐｅ－ｃｉｆｉｃ　ａｎｔｉｇｅｎ　ａｎｄ　ｇｏｌｄ　ｌａｂｅｌｅｄ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｙ，ｔｈｅ　ｃｏａｔｅｄ　ＮＣ　ｍｅｍｂｒａｎｅ，ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｐａｄ，ｔｈｅ　ｃｏｌｌｏｉｄａｌ　ｇｏｌｄ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅ　ｐａｄ，ａｂｓｏｒｂｅｎｔ　ｐａｄ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ａｃｃｅｓｓｏｒｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ａｓｓｅｍｂｌｅｄ　ｉｎｔｏ　ａ　ｔｅｓｔ　ｓｔｒｉｐ．Ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　ｔｅｓｔ　ｓｔｒｉｐ　ｗａｓ　２５μｇ／ｋｇ．Ｔｈｅｃｒｏｓｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｔｏ　ｏｔｈｅｒ　ｍｙｃｏｔｏｘｉｎｓ　ｗａｓ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　１％．Ｔｈｉｓ　ｔｅｓｔ　ｓｔｒｉｐ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｏｃｈｒａｔｏｘｉｎ　Ａ　ｉｎｆｅｅｄ　ｒａｐｉｄｌｙ．ＫＥＹＷＯＲＤＳ：ｆｅｅｄ；ｏｃｈｒａｔｏｘｉｎ　Ａ；ｃｏｌｌｏｉｄａｌ　ｇｏｌｄ；ｒａｐｉｄ　ｔｅｓｔ；ｒｅａｇｅｎｔ　ｓｔｒｉｐｓ霉菌毒素是由霉菌或真菌产生的有毒次级代谢产物，在自然界中分布非常广泛，主要包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、Ｔ－２毒素等。

基于核酸适配体检测赭曲霉毒素A_方法与酶联免疫法的对比研究

品加标回收率试验，并与酶联免疫法进行比较。［结果］核酸适配体法检测ＯＴＡ在０．０５～１０．００ｎｇ／ｍＬ具有较好的线性，饲料样品中添加
ＯＴＡ的回收率为９２．０％～９３．５％，与酶联免疫法相比，２种方法之间具有较好的一致性。［结论］该研究建立的基于核酸适配体检测ＯＴＡ
２．３２种方法的比较从表２可以看出，核酸适配体法检测
免疫法检测试剂盒说明书在１～８１ｎｇ／ｍＬ建立标准曲线，其
时间从加入待测样品或标准品进行反应开始计算），工作中
１１７３９（Ｒ＝０．９８６１），最低检测限为０．０５ｎｇ／ｍＬ；而根据酶联
２
标准方程为Ｙ＝－３０．３１Ｘ＋７４．８６（Ｒ＝０．９９５８），最低检测限为
ＯＴＡｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙｈａｓｈｉｇｈｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄａｃｃｕｒａｃｙ，ｌａｙｉｎｇｔｈｅｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｒａｐｉｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＯＴＡｉｎｆｅｅｄ．
ＫｅｙｗｏｒｄｓＡｐｔａｍｅｒ；ＯｃｈｒａｔｏｘｉｎＡ；Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ＥＬＩＳＡ；Ｆｅｅｄ
点。该研究前期已建立了基于核酸适配体的赭曲霉毒素Ａ
检测方法［１２］，在此将该方法用于饲料样品中ＯＴＡ的检测并
与酶联免疫法进行比较，考察该方法建立的准确性。
１材料与方法
１．１试验材料４－羟乙基哌嗪乙磺酸（ＨＥＰＥＳ）为北京Ｓｏ⁃
ｌａｒｂｉｏ公司产品，链亲和素购为上海源叶生物公司产品，牛血
作者简介邓昌良（１９９０—），男，福建龙岩人，助理实验师，从事药物分

胶体金测试条法对粮食中赭曲霉毒素快速定量测定的研究

ｔａｔｉｏｎｌｉｍｉｔｗａｓ７￣ｇ／ｋｇ．Ｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅ — ｎｔ（ｒ）ｗａｓ０．９９９９ｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ５～２０￣ｇ／ｋｇ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｆｉｒｍｅｄｏｂｊｅｃｔｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅｍａｔｅｒｉａｌ，ａｃｃｕｒａｃｙｗａｓｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ
ｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｃｏｌｌｏｉｄａｌｇｏｌｄｓｔｒｉｐｓａｎｄｔｈｅｈｉｇｈ＿ ’ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏ — ，
ｍａｔ — ｏｇｒａｐｈｙｕｓｉｎｇｔｈｅｐａｉｒｅｄｔ－ｔｅｓｔ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｏｌｌｏｉｄａｌｇｏｌｄ；ｏｃｈｒａｔｏｘｉｎＡ；ｇｒａｉｎ；ｒａｐｉｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ
赭曲霉毒素Ａ（ｏｃｈｒａｔｏｘｉｎＡ，ｏＴＡ）是赭曲霉
毒素（０Ｔ）的一种，为２Ｂ类致癌物，对动物和人体
具有肾脏毒性、肝脏毒性，另外还有致畸、致突变和
对人类生命造成危害，因此对ＯＴＡ检测显得非常必要。目前赭曲霉Ｃ）口］、高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）ｌ４］及

基质分散固相萃取净化液相色谱检测谷物中赭曲霉毒素A

Ｃ１ｓｌｈｓｎａｌｓｐｗｄｒｐａｅｎｔｅｍｏｔｒｇｎｌｎｕｌｘｄｂｅｔｅＡｎｈｎｐｔｉｌｓｙｉｇｓｗｉｈ８ｏｉｐａｅａｄｓｍｐｅｏｅｌｃｄｉｈｒａｅｔｙａｄｆｌｍｉｅｙｐｓｌ．ｄｔｅｕｎｇａｓｓｒｎｅｔｄｙ
测赭曲霉毒素Ａ含量的方法。
目前报道的检测赭曲霉毒素Ａ含量的主要方法有：薄层色谱法（Ｃ）７、酶联免疫法ＴＩ＿Ｊ（ＩＳ］免疫胶体金试纸条法ｌ和高效液色谱ＥＡ）、Ｉｇ法（Ｉ）ｌ。。薄层色谱分析法是较早用于毒素ＨＰｌ等ｃ。检测的一种方法，其优点是方法简单，用的试剂价使
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ｅｔｂｌｈｍｅｈｏｏｆｘｔａｔｏｎＴｏｓａｉａｓｔｄｅｒｃｉｗｉｈｍａｔｉｓｉ— ｔｒｘｏｌｄｐｈａｅｓｄｉｐｒｉｎ（ＭＳｓｅｓｏＰＤ），ｈｉｐｅｆｍａｅｌｑｄｇｈｒｏｒｎｃｉｕｉ
４０ｎ；样量２ｌ６ｍ进０“ 。
差，放时间短；体金颗粒大，透能力较差等。存胶渗
食用小麦样品中赭曲霉索Ａ的污染率为４．６／５１６９。
收稿日期：Ｏ２Ｏ３修回日期：０２０２ｌ一３２；２１－７１９作者简介：李尧（９１）男，析员，程师，１８一，分工主要从事色谱、谱分析。质

同时检测两种真菌毒素的胶体金试纸条的研制

速检测卡。结果：该检测卡能同时检测ＡＢ和ＯＦ。Ａ两种真茵毒素，且两者之间互不干扰，灵敏度均可达到２ｇ，，重复性、稳定性均良好。结论：成功制作出了能同时检测两种真菌毒素的快速检测卡，一次操．ｇＬ５作能检测两种毒素，节省了检测时间和检测成本。关键词黄曲霉毒素Ｂ；赭曲霉毒素Ａ；单克隆抗体；胶体金
ｏｐｒｔｎｃｕｄｅｅｔｂｏｈｔｘｎｏａｅｅｔｔｍｅｎｄｏｔｎｅｏｅａｉｏｌｄｔｃｔｏｓｔｓｖｔｓｉａｃｓ．ｏｉ
ＫｅｗｏｄａｌｔｘｎｌｏｈａｏｉＡ；ｍｏｏｌｎｎｉｏｙｃｌｉａｏｄ；ｔｓｓｒｙｒｓｆｏＢ；ｃｒｔｘｎａｉｎｃｏａａｔｄ；ｏｏｄｌｌｌｂｇｅｔｔｐｉ
ｗｉｈＣｉｌｅｕｌｅｅｔｔｏｋｎｓｏｕｇｏｉｓＷ８ｓｃｅｓｌｒｄｃｄｈｃａｓｍｕｔｏｓｙｄｔｃｗｉｄｆｆｎｉｔｘｎ８ｕｃｓｆｌｐｏｕｅ，ｗｈｃａｅｔｒｄｎｎａｕｙｉｈＷｓｆａｕｅｔＩｌ
０１ｏ，ｐ７４的ＣＳ稀释）．ｌＬＨ．０ｔｏＢ，此为检测ＯＡ的
１材料与方法
１１材料与试剂．
检测线Ｔ；（）Ｖ — Ｆｌ全抗原（１３ＯＡＡＢ完１ｍｇ／ｍ，Ｌ
０１ｏ／Ｈ．ＣＳ．ｌＬｐ７Ｏｍ４的Ｂ稀释），此为检测ＡＢ的Ｆｌ

影响赭曲霉毒素A胶体金试纸条最低检出限的因素

影响赭曲霉毒素A胶体金试纸条最低检出限的因素韦素梅;李炜;刘运龙【摘要】比较分析了不同类型的硝酸纤维素膜、抗原点样位置和不同的喷金量对赭曲霉毒素A胶体金试纸条最低检出限的影响,筛选出最佳的适合OTA胶体金测试条的组合条件.结果表明Whatman-AE99、Pall vivid 170、Sartorius CN140、Millipore-135四种类型的NC膜中,Millipore-135的NC膜最好,包被抗原的划线位置为距离NC膜最低线1.0 cm的位置最佳,喷金量为每毫升的金标液离心纯化后用700μL的复原液来复原,铺于宽度为0.5 cm的金垫上.以上条件的筛选为OTA胶体金测试条的优化提供了有利的试验依据.【期刊名称】《粮食与食品工业》【年(卷),期】2013(020)002【总页数】4页(P55-57,61)【关键词】赭曲霉毒素A;最低检出限;硝酸纤维素膜;喷金量;划线位置【作者】韦素梅;李炜;刘运龙【作者单位】广西粮油科学研究所南宁 530001;广西粮油科学研究所南宁530001;广西粮油科学研究所南宁 530001【正文语种】中文【中图分类】R155.5胶体金免疫层析技术和酶联免疫吸附法等免疫分析技术近年来在生物各个领域得到了越来越多的应用，特别是食品安全快速检测的应用发挥着很大的作用［1］。

赭曲霉素A（Ochratoxin A，简称OTA）的胶体金快速检测试纸条已经能够达到10ng／mL的检测水平［2］。

免疫胶体金是基于抗原抗体的特异性反应，用胶体金作为标记物［3－5］。

该方法操作简单，几分钟内即可通过目视判断检测结果，比酶联免疫吸附法操作较简单，更适合现场应用［6］。

本试验讨论赭曲霉素A试纸条制备的各项条件，为下一步赭曲霉素A胶体金的研发提供试验依据。

1 材料与方法1.1 主要试剂、耗材和仪器1.1.1 主要试剂及耗材柠檬酸三钠、氯金酸和BSA（均购自Sigma公司）；兔抗OA－BSA多克隆抗体、OTA－BSA抗原和羊抗兔IgG（购自南宁蓝光生物技术公司）；硝酸纤维素膜（简称NC膜，购于上海杰一生物技术公司）；玻璃纤维纸和吸水纸（均购自上海金标生物技术公司）。

小麦中赭曲霉毒素A含量测定方法的改进研究

小麦中赭曲霉毒素A含量测定方法的改进研究作者：和霁恬邵志凌放茂良来源：《粮食科技与经济》2018年第01期[摘要]目的：优化GB 5009.96-2016中赭曲霉毒素A检测的前处理方法和色谱条件，以适应大批量样本的检测。

方法：样品经甲醇：水（V：V=80：20）漩涡提取、免疫亲和层析净化，超高效液相色谱法测定。

色谱条件为Thermo Scientific Hypersil GOLD C18反相柱（100mm×2.1mm，粒径1.9μm），流动相为1%乙酸水-乙腈（V：V=60：40），流速为0.25mL/min，进样量4μL，柱温：25℃，荧光检测激发波长333nm，发射波长460nm。

结果：赭曲霉毒素A在1.00～20.00ng/mL时具有良好的线性关系，相关系数R2=0.999 7，加标回收率为82.9%～90.1%，精密度RSD5.1%～6.1%。

本方法实验用时和流动相用量分别比国标法减少72.8%和87.5%。

结论：本方法适用于小麦中赭曲霉毒素A含量的测定且更灵敏、高效和环保。

在大批量样品分析中可有效节约时间、材料成本。

[关键词]小麦；赭曲霉毒素A；超高效液相色谱；免疫亲和柱；漩涡提取中图分类号：S512.1 文献标识码：A DOI：10.16465/431252ts.20180114赭曲霉毒素A（Ohratoxin A，OTA）主要由曲霉属、青霉属等真菌污染产生，在谷物中的污染率和污染水平最高，具有肝肾毒性。

我国食品安全国家标准中真菌毒素的限量值为5.0μg/kg。

目前用于赭曲霉毒素A定量分析的方法主要有高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法、酶联免疫法、薄层色谱法、免疫胶体金法和免疫亲和柱法等，GB 5009.96-2016采用了免疫亲和层析净化-高效液相色谱法、离子交换固相萃取柱净化-高效液相色谱法、免疫亲和层析净化-液相色谱串联质谱法、酶联免疫吸附测定法和薄层色谱测定法共5种方法。

中国对食品中赭曲霉素的最低含量标准

中国对食品中赭曲霉素的最低含量标准中国对食品中赭曲霉素的最低含量标准在中国，食品安全一直是国家和民众关注的焦点之一。

其中，食品中的添加剂和污染物质是备受关注的问题之一。

赭曲霉素是一种青霉素类抗生素，常被用于饲料和食品的防腐处理。

然而，长期食用可能会对人体健康造成影响。

中国对食品中赭曲霉素的最低含量标准制定成为了关注热点之一。

我们来了解一下赭曲霉素。

赭曲霉素是一种广谱抗生素，在饲料和食品加工过程中被广泛使用。

它可以抑制细菌和真菌的生长，延长食品的保质期。

然而，长期食用含有赭曲霉素的食品可能导致人体健康问题，尤其是对肝脏和肾脏有一定程度的损害。

基于对赭曲霉素的了解，中国对食品中赭曲霉素的最低含量标准制定显得尤为重要。

根据《中华人民共和国食品安全法》和相关法规，中国国家食品安全标准委员会于××年××月××日颁布了《食品安全国家标准食品中赭曲霉素的最低含量限量》，明确规定了食品中赭曲霉素的最低含量限量。

这一标准的颁布，有助于保障食品安全，保护消费者权益，促进食品行业的健康发展。

对于这一标准，我个人认为，它的颁布对于保障公众的健康和权益至关重要。

食品作为人们日常生活中不可或缺的一部分，其安全性直接关系到人民群众的身体健康。

制定食品中赭曲霉素的最低含量标准，可以有效减少食品中赭曲霉素的使用量，减少赭曲霉素对人体健康造成的潜在危害。

在这篇文章中，我们从赭曲霉素的定义和作用开始，逐步深入引入了中国关于赭曲霉素的最低含量标准。

接下来，我们对这一标准的制定意义进行了探讨，并结合了个人观点。

我将回顾文章的主要内容，并总结对这一议题的理解。

中国对食品中赭曲霉素的最低含量标准的制定，是一个积极的举措。

我们期待这一标准能够有效执行，为保障食品安全和人民健康做出积极贡献。

希望未来在食品安全领域能够有更多的创新举措，让人们吃得更放心、更健康。

近年来，食品安全一直是人们关注的焦点之一。

基于侧向层析原理的赭曲霉毒素A快速检测试纸条的研制

基于侧向层析原理的赭曲霉毒素A快速检测试纸条的研制黄巧莲;金庆日;章先;周一媚;陈彦永;徐露凝;杨永春;程昌勇;田广燕【摘要】针对霉菌毒素精准检测技术的开发对于保障食品安全至关重要.利用胶体金与赭曲霉毒素A单抗偶联物和赭曲霉毒素A-BSA偶联物(OTA-BSA),开发了一种快速检测赭曲霉毒素A的方法.研究结果表明:①当OTA-BSA配制终质量浓度为4.8 g·L-1,质控线用羊抗鼠IgG配制终质量浓度为1.5 g·L-1,硝酸纤维素(NC)膜的包被量为1.0μL· cm-1时呈现最清晰、最均匀的条带.②赭曲霉毒素A胶体金快速检测试纸条的灵敏度达到1.0μg·L-1,检测时间仅为5 min,非常适合现场快速检测.该检测试纸条具有携带方便、灵敏度高、特异性强等优点.由于本方法检测时间短,灵敏度高,与传统的仪器和酶联免疫检测方法相比,在野外和临床检测中更具有推广应用价值.【期刊名称】《浙江农林大学学报》【年(卷),期】2016(033)003【总页数】6页(P531-536)【关键词】动物医学;赭曲霉毒素A;胶体金试纸条;快速检测;侧向层析【作者】黄巧莲;金庆日;章先;周一媚;陈彦永;徐露凝;杨永春;程昌勇;田广燕【作者单位】浙江农林大学动物科技学院,浙江临安 311300;浙江农林大学动物科技学院,浙江临安 311300;浙江大学动物科学学院,浙江杭州 310058;浙江农林大学动物科技学院,浙江临安 311300;浙江农林大学动物科技学院,浙江临安311300;浙江农林大学动物科技学院,浙江临安 311300;浙江农林大学动物科技学院,浙江临安 311300;浙江农林大学动物科技学院,浙江临安 311300;浙江农林大学外国语学院,浙江临安 311300【正文语种】中文【中图分类】S859.84浙江农林大学学报，2016，33（3）：531-536Journal of ZheJiang A&F University赭曲霉毒素（ochratoxin）是曲霉属Aspergillus和青霉属Penicillium一些产毒菌株的次级代谢产物，包括赭曲霉毒素A，B，C，D和a等7种结构类似化合物［1］；其中赭曲霉毒素A（ochratoxin A，OTA）毒性最大，在自然界分布最广泛，对农产品的污染也最严重，是严重危害人类健康的毒素之一。

农产品中赭曲霉毒素A免疫层析试纸条快速检测技术研究

农产品中赭曲霉毒素A免疫层析试纸条快速检测技术研究李鑫;李培武;张奇;张文;丁小霞;唐晓倩【摘要】基于胶体金免疫层析原理建立了一种快速检测赭曲霉毒素A(ochrotaxin A,OTA)的胶体金试纸条的研制方法,包括胶体金的制备、金标记探针的制备、试纸条各条件参数的测试和优化等.试纸条检测OTA的肉眼可视检测限为0.25ng/mL,检测时间为10min,试纸条能特异性识别OTA而不与赭曲霉毒素B及其他真菌毒素发生交叉反应,使用简单、方便、成本低,重复性好,保质期长,尤其适用于农产品中OTA的现场快速筛查.【期刊名称】《中国油料作物学报》【年(卷),期】2014(036)005【总页数】5页(P648-652)【关键词】赭曲霉毒素A;胶体金;免疫层析;试纸条;快速检测【作者】李鑫;李培武;张奇;张文;丁小霞;唐晓倩【作者单位】中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉,430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉,430062;农业部生物毒素检测重点实验室,湖北武汉,430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉,430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉,430062;农业部生物毒素检测重点实验室,湖北武汉,430062;农业部油料产品质量安全风险评估实验室(武汉),湖北武汉,430062;农业部油料及制品质量监督检验测试中心,湖北武汉,430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉,430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉,430062;农业部生物毒素检测重点实验室,湖北武汉,430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉,430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉,430062;农业部油料及制品质量监督检验测试中心,湖北武汉,430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉,430062;农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,湖北武汉,430062;农业部油料产品质量安全风险评估实验室(武汉),湖北武汉,430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北武汉,430062;农业部生物毒素检测重点实验室,湖北武汉,430062;农业部油料及制品质量监督检验测试中心,湖北武汉,430062【正文语种】中文【中图分类】TS207赭曲霉毒素(ochratoxin)是曲霉属和青霉菌属真菌产生的次级代谢产物，包括结构类似的一类化合物，其中以赭曲霉毒素A(ochratoxin A，OTA)的分布最广，毒性最大。

饲料原料中赭曲霉毒素的快速筛查胶体金快速定量法

《饲料原料中赭曲霉毒素的快速筛查胶体金快速定量法》江西省地址标准编制说明一、标准制定意义（一）介绍赭曲霉毒素A是由多种生长在粮食（小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等）、花生、蔬菜（豆类）等农作物上的曲霉和青霉产生的。

动物摄入霉变饲料后，这种毒素也可能出此刻猪和母鸡等的肉中。

赭曲霉毒素要紧损害动物肝脏与肾脏，引发肝脏和肾脏损伤，大量毒素也可能引发动物肠黏膜炎症和坏死。

有报导指出，食物中的OTA与一种致命的地址性肾脏疾病（balkanendemicnephropathy）有关，且有致癌、致畸作用，最近几年来引发了人类营养学家的重视。

正常条件下，小麦和玉米受OTA污染的机率较小，约1%～5%，其含量为～5mg/kg；大麦和燕麦被污染的机率较高，约为10%，其含量一样在kg以下，个别样品高达27mg/kg。

赭曲霉毒素包括3种类型，毒性强弱顺序是：OTA>OTC>OTB。

OTB是OTA的脱氯衍生物，OTC是OTA的乙基酯，OTB和OTC的含量一样较低，毒性较OTA小。

因此，饲料检测时能够要紧分析OTA含量。

目前，小麦、大麦、玉米等谷类作物中OTA的测定方式有薄层色谱法（TLC）、酶联免疫吸附法（ELISA）、气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、高效液相色谱-质谱法（HPLC-MS）。

TLC法繁琐费时，且灵敏度、特异性较差，提取进程中所需有机溶剂品种多且量大，易污染环境，对人体有较大危害。

ELISA法测定结果受试剂盒不同、实验温度、仪器灵敏度等条件阻碍较大。

GC、GC-MS、HPLC和HPLC-MS法普遍存在着样品前处置进程复杂，灵敏度易受样品的净化、浓缩等步骤的阻碍，耗时，检测设备昂贵，并要求有专业的技术人员及较长的分析周期。

同时，这些检测方式无一例外要求在检测进程中利用毒素标准溶液，给环境和检测人员的平安造成风险。

本标准项目是通过化学合成法制备赭曲霉毒素A人工抗原，利用此抗原免疫实验动物制备赭曲霉毒素A单克隆抗体，基于此原料基础上开发赭曲霉毒素A快速检测试纸条，再通过胶体金读数仪进行大米、玉米、小麦等样品中赭曲霉毒素的定量分析。

胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉毒素A在谷物及饲料中的研究

胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉毒素A在谷物及饲料中的
研究
扶胜;冯才伟;杨梅;李平
【期刊名称】《食品安全导刊》
【年(卷),期】2016(0)12
【摘要】应用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测谷物和饲料中赭曲霉毒素A 的方法,其中包括胶体金的制备、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。

测试结果表明赭曲霉毒素A快速检测试纸条对谷物类样品检测限为5 ng/m L,对饲料样品检测限为100ng/m L,检测时间为10 min,试纸条特异性好,假阳性率小于5%,假阴性率为0。

该法使用简单方便。

【总页数】3页(P120-122)
【作者】扶胜;冯才伟;杨梅;李平
【作者单位】贵州勤邦食品安全科学技术有限公司;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司【正文语种】中文
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赭曲霉毒素A,B的提取,分析与鉴定

赭曲霉毒素A,B的提取,分析与鉴定孙蕙兰;牛钟相【期刊名称】《山东农业大学学报：自然科学版》【年(卷),期】1989(020)001【摘要】用赭曲霉菌(也称棕曲霉菌)生产菌株,接种于无菌的混合饲料中培养。

培养物用乙腈—石油醚—氯仿提取,用碳酸氢钠水溶液进行液液分配,水相酸化后再用氯仿萃取,经硅胶柱层析净化,用苯:冰醋酸(9:1)洗脱。

紫外光下分别收集绿色萤光区带和兰色萤光区带,采用紫外分光光度计检测。

选用波长333nm的赭曲霉毒素A(Ochratoxin A.简称OA)和波长318nm的赭曲霉毒素B(Ochratoxin B.简称OB)收集液,分别将收集液(OA和OB)浓缩,然后结晶。

OA产品为无色针状晶体;OB为淡黄色颗粒状晶体。

OA和OB的UV最大吸收峰分别为333nm和318nm。

萤光最大激发波长分别为335nm和320nm,最大发射波长分别为465nm和456nm,通过UV、HPLC、NMR、IR谱图及TLC的R_f值证明产品是赭曲霉毒素A和B。

【总页数】5页(P1-5)【作者】孙蕙兰;牛钟相【作者单位】不详;不详【正文语种】中文【中图分类】Q949.327.1【相关文献】1.棉油皂脚中棉酚的提取分析及鉴定 [J], 李文孝;贾光锋;徐升运;陈卫锋;张红艳;李忠玲2.从海鱼加工下脚料中提取核酸的试验(Ⅱ)--从鱼白中提取核酸及产物纯度分析和组分鉴定 [J], 王建;施晓捷3.微量物证提取工具对鉴定结果的影响——以道路交通事故中油漆物证提取为例进行分析 [J], 许静枫;朱洪庆;蒋芸;缪磊4.基于靶板甲酸直接提取法的MALDI-TOF MS鉴定棒状杆菌和类棒状菌群效能分析 [J], 张宁梅;米思蓉;屈宁5.响应面分析法优化黑果枸杞总花色苷提取工艺及结构鉴定 [J], 李云霞;黄延春;贾美林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。