副溶血性弧菌
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副溶血性弧菌
，
返回
嗜盐性试验培养基
成分
蛋白胨 氯化钠 蒸馏水
2g
按不同量加
100mL
供碳氮源、维生素和生长因子 控制弧菌生长情况（7%生长最旺盛）
pH7.7
制法 配制2%蛋白胨水，校正pH， 共配制3瓶，每瓶100mL。 每瓶分别加入不同量的氯化钠： (1)3g；(2)7g；(3)10g。 待溶解后分装试管。 121℃高压灭菌15min。
2. 本菌嗜盐畏酸，若盐浓度低于0.5%则不生长，pH值为 8.0—8.5。
3. 本菌对酸较敏感，当pH6以下即不能生长，在普通食醋中
4. l一3min即死亡。
5. 分解葡萄糖，产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖。
6. 在固体培养基上菌落常隆起，圆形，表面光滑，湿润。在 3％一3．5％含盐水中繁殖迅速，每8～9min为一周期。 对高温抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被杀死。本菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度 的酚和煤酚皂溶液杀灭。
凝固剂
返回
3%氯化钠三糖铁琼脂
供碳氮源、维生素和矿物质
可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出， 酸性呈黄色，碱性呈红色
较高含量可维持均衡的渗透压 硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，
与硫酸亚铁中的铁盐生成黑色硫化铁
凝固剂
此 斜菌 面的 颜反 色应 不为 变底 或层 红变 色黄 加不 深变 ，黑 有， 动无 力气 。泡
组员： 李铭艳（食品国标） 黄敏慧（进出口食品） 刘伟 （PCR定量检测） 刘建焕（ELISA快速检测）
概述
1. 副溶血性弧菌属弧菌科，是一种嗜盐性细菌。是 一种生活在近海的海洋微生物，深海一般未发现， 尤其是在洗浴者和海产加工工人的伤口中。
返回
嗜盐性试验培养基
成分
蛋白胨 氯化钠 蒸馏水
2g
按不同量加
100mL
供碳氮源、维生素和生长因子 控制弧菌生长情况（7%生长最旺盛）
pH7.7
制法 配制2%蛋白胨水，校正pH， 共配制3瓶，每瓶100mL。 每瓶分别加入不同量的氯化钠： (1)3g；(2)7g；(3)10g。 待溶解后分装试管。 121℃高压灭菌15min。
2. 本菌嗜盐畏酸，若盐浓度低于0.5%则不生长，pH值为 8.0—8.5。
3. 本菌对酸较敏感，当pH6以下即不能生长，在普通食醋中
4. l一3min即死亡。
5. 分解葡萄糖，产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖。
6. 在固体培养基上菌落常隆起，圆形，表面光滑，湿润。在 3％一3．5％含盐水中繁殖迅速，每8～9min为一周期。 对高温抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被杀死。本菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度 的酚和煤酚皂溶液杀灭。
凝固剂
返回
3%氯化钠三糖铁琼脂
供碳氮源、维生素和矿物质
可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出， 酸性呈黄色，碱性呈红色
较高含量可维持均衡的渗透压 硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，
与硫酸亚铁中的铁盐生成黑色硫化铁
凝固剂
此 斜菌 面的 颜反 色应 不为 变底 或层 红变 色黄 加不 深变 ，黑 有， 动无 力气 。泡
组员： 李铭艳（食品国标） 黄敏慧（进出口食品） 刘伟 （PCR定量检测） 刘建焕（ELISA快速检测）
概述
1. 副溶血性弧菌属弧菌科，是一种嗜盐性细菌。是 一种生活在近海的海洋微生物，深海一般未发现， 尤其是在洗浴者和海产加工工人的伤口中。
副溶血性弧菌
副溶血性弧菌是一种 嗜盐性细菌。主要来 自海产品以及含盐分 较高的腌制食品。 该菌存活能力强。
传播途径
分布极广，主要分 布在海水和水产品 中 畜禽肉、咸菜、咸 蛋、淡水鱼等都发 现有副溶血性弧菌 的存在。 海水是本菌的污染 源，海产品、海盐、 带菌者等都有可能 成为传播本菌的途 径，另外有肠道病 史的居民、渔民带 菌率偏高，也是传 染源之一。
症状
起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐。 由副溶血性弧菌引起的食物中毒一
般表现为急发病，潜伏期2-24小时
预防措施
1、动物性食品应煮熟煮透再吃。 2、隔餐的剩菜食前应充分加热。 3、防止生熟食物操作时交叉污染。 4、水理盐水，以纠正失水。 副溶血性弧菌对氯霉素敏感。 发生中毒后要立即停止食用可疑中 毒食品。 一定去医院就医，不能硬抗
传播途径
分布极广，主要分 布在海水和水产品 中 畜禽肉、咸菜、咸 蛋、淡水鱼等都发 现有副溶血性弧菌 的存在。 海水是本菌的污染 源，海产品、海盐、 带菌者等都有可能 成为传播本菌的途 径，另外有肠道病 史的居民、渔民带 菌率偏高，也是传 染源之一。
症状
起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐。 由副溶血性弧菌引起的食物中毒一
般表现为急发病，潜伏期2-24小时
预防措施
1、动物性食品应煮熟煮透再吃。 2、隔餐的剩菜食前应充分加热。 3、防止生熟食物操作时交叉污染。 4、水理盐水，以纠正失水。 副溶血性弧菌对氯霉素敏感。 发生中毒后要立即停止食用可疑中 毒食品。 一定去医院就医，不能硬抗
副溶血性弧菌检测
副溶血性弧菌的分布与传播
分布
副溶血性弧菌主要分布在近海岸的海 水、海底沉积物和鱼贝类等海产品中 ，尤其在温带和亚热带地区的沿海水 域更为常见。
传播
副溶血性弧菌主要通过食用被污染的 海产品，尤其是生的或未煮熟透的鱼 、贝类等传播给人类。此外，也可通 过直接接触带菌的水或食物传播。
副溶血性弧菌的致病性
结果报告
根据检测结果，撰写并提交检测报告。
04 副溶血性弧菌检测的应用 与意义
在食品安全领域的应用
食品生产过程监控
副溶血性弧菌检测是食品安全监 控的重要环节，用于确保食品在 生产、加工和储存过程中的卫生
安全。
食品质量评估
通过检测食品中副溶血性弧菌的数 量和种类，评估食品的质量和安全 性，确保消费者健康。
提供科学决策依据
副溶血性弧菌检测数据可为政府和相关部门提供科学决策依据，促进 食品安全、环境保护和公共卫生领域的政策制定和实施。
05 副溶血性弧菌检测的挑战 与展望
当前面临的挑战
检测方法的局限性
目前常用的副溶血性弧菌检测方法，如培养法、免疫学方法和分子生物学方法，存在灵敏 度不高、特异性不强、操作繁琐等问题，难以满足快速、准确检测的需求。
分离培养法具有较高的特异性，但检测时间较长，且对操作人员的技术要求较高。
免疫学检测方法
免疫学检测方法利用抗体与抗原的特 异性结合来检测副溶血性弧菌，包括 间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验 等。
免疫学检测方法具有快速、简便的优 点，但可能出现假阳性或假阴性的结 果。
分子生物学检测方法
分子生物学检测方法利用DNA或RNA的特异性序列来检测副溶血性弧菌，如聚合酶 链式反应（PCR）、基因芯片等。
检测规范
副溶血性弧菌检验技术
2.6 无菌试管：18mm×180mm、15mm×100mm
2.7 无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头
2.8 无菌锥形瓶：容量250mL、500mL 1000mL 2.9 无菌培养皿：直径90mm
2.10 全自动微生物生化鉴定系统
2.11 无菌手术剪、镊子
225ml 3%氯化钠碱性蛋白陈水
液体
25mL
摇匀 36±1℃ 均质
25g
样品
8~18h
固体 样品
划线分离
氧化酶 试验
革兰氏 染色
•典型的副溶血性弧菌在 TCBS上呈圆形、半透明、 表面光滑的绿色菌落，用接 种环轻触，有类似口香糖的 质感，直径2mm~3mm。
TCBS琼脂 科玛嘉显色琼脂
3％氯 化钠TSI
GB 4789.7-2013 标准解读
5 操作步骤
5.1.3 以无菌操作样品25g（mL）加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225mL，用旋转刀片式均质器以8000r/min均 质1min,或拍击式均质器拍击2min，制备成1：10的样品匀液。如无均质器，则将样品放入无菌乳钵，自 225mL3%氯化钠碱性蛋白水中取少量稀释液加入无菌乳钵，样品磨碎后放入500mL无菌锥形瓶，再用少量 稀释液冲洗乳钵中的残留样品1~2次，洗液放入锥形瓶，最后将剩余稀释液全部放入锥形瓶，充分振荡，制 备1：10的样品匀液。
食品中副溶血性弧菌检验
一、副溶血性弧菌概况
副溶血性弧菌属弧菌科，是一种生活在近海的海洋微生物，深海一般未发现，大多 在温暖的季节水体中分离到该菌。从多种海产品中均能分离到该菌。
副溶血性弧菌引发的胃肠炎一般表现为骤发性剧烈腹痛。所有的副溶血性弧菌胃肠炎 起因均是由于进食了海产品或海产品相关的一些食物。在日本，有副溶血型弧菌引发 的胃肠炎相当普遍，约占全部胃肠炎爆发事件的50%，原因是日本人爱生吃鱼。
致病菌检验-副溶血性弧菌.
65种。
（ 缺编：K2 、 K14 、K17、 K35、 K62）
血清分型：所有副溶血性弧菌的H 抗原均相同，但是O 抗
原和K 抗原存在差异，以13种O抗原及65种K抗原将其分为 13个群和845个型。
副溶血性弧菌的流行病学
• 1、传染源 传染源为病人，集体发病时往往仅少数病情严重者 住院，而多数未住院者可能成为传染源，但由于病人仅在疾病初 期排菌较多，其后排菌迅速减少，故不至因病人散布病菌而造成 广泛流行。 • 2、传播途径 本病经食物传播，主要的食物是海产品或盐腌渍 品，常见者为蟹类、乌贼、海蜇、鱼、黄泥螺等，其次为蛋品、 肉类或蔬菜。进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污 染所引起。 • 3、易感者 男女老幼均可患病，但以青壮年为多，病后免疫力 不强，可重复感染。本病多发生于夏秋沿海地区，常造成集体发 病。近年来沿海地区发病有增多的趋势。
来源和传播途径
• 分布极广，主要分布在海水和水产品中，我国 华东地区沿岸的海水的副溶血性弧菌检出率为 47.5%~66.5%，海产鱼虾的平均带菌率为 45.6%~48.7%，夏季可高达90%以上。出了海产 品以外，畜禽肉、咸菜、咸蛋、淡水鱼等都发 现有副溶血性弧菌的存在。 • 海水是本菌的污染源，海产品、海盐、带菌者 等都有可能成为传播本菌的途径，另外有肠道 病史的居民、渔民带菌率偏高，也是传染源之 一 。
预防措施
• 对海产品赢特别注意操作，加工前用消毒 水洗干净，接触过海产品的用具要洗刷干 净； • 最好不吃凉拌菜，若吃充分洗净，活加醋 拌 • 严格执行生熟食品分开 • 剩菜饭，食前要回锅热透
致 病 菌 副溶血性弧菌 检 验
一.副溶血性弧菌的概述
• 副溶血性弧菌（Bibrio Parahemolyticus）， 进食含有该菌的食物致可食物中毒，也称嗜 盐菌食物中毒，主要是海产品。临床上以急 性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要 症状。本病多在夏秋季发生于沿海地区，常 造成集体发病。近年来由于海鲜空运，内地 城市病例也渐增多。此菌对酸敏感，在普通 食醋中5分钟即可杀死；对热的抵抗力也较 弱。
（ 缺编：K2 、 K14 、K17、 K35、 K62）
血清分型：所有副溶血性弧菌的H 抗原均相同，但是O 抗
原和K 抗原存在差异，以13种O抗原及65种K抗原将其分为 13个群和845个型。
副溶血性弧菌的流行病学
• 1、传染源 传染源为病人，集体发病时往往仅少数病情严重者 住院，而多数未住院者可能成为传染源，但由于病人仅在疾病初 期排菌较多，其后排菌迅速减少，故不至因病人散布病菌而造成 广泛流行。 • 2、传播途径 本病经食物传播，主要的食物是海产品或盐腌渍 品，常见者为蟹类、乌贼、海蜇、鱼、黄泥螺等，其次为蛋品、 肉类或蔬菜。进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污 染所引起。 • 3、易感者 男女老幼均可患病，但以青壮年为多，病后免疫力 不强，可重复感染。本病多发生于夏秋沿海地区，常造成集体发 病。近年来沿海地区发病有增多的趋势。
来源和传播途径
• 分布极广，主要分布在海水和水产品中，我国 华东地区沿岸的海水的副溶血性弧菌检出率为 47.5%~66.5%，海产鱼虾的平均带菌率为 45.6%~48.7%，夏季可高达90%以上。出了海产 品以外，畜禽肉、咸菜、咸蛋、淡水鱼等都发 现有副溶血性弧菌的存在。 • 海水是本菌的污染源，海产品、海盐、带菌者 等都有可能成为传播本菌的途径，另外有肠道 病史的居民、渔民带菌率偏高，也是传染源之 一 。
预防措施
• 对海产品赢特别注意操作，加工前用消毒 水洗干净，接触过海产品的用具要洗刷干 净； • 最好不吃凉拌菜，若吃充分洗净，活加醋 拌 • 严格执行生熟食品分开 • 剩菜饭，食前要回锅热透
致 病 菌 副溶血性弧菌 检 验
一.副溶血性弧菌的概述
• 副溶血性弧菌（Bibrio Parahemolyticus）， 进食含有该菌的食物致可食物中毒，也称嗜 盐菌食物中毒，主要是海产品。临床上以急 性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要 症状。本病多在夏秋季发生于沿海地区，常 造成集体发病。近年来由于海鲜空运，内地 城市病例也渐增多。此菌对酸敏感，在普通 食醋中5分钟即可杀死；对热的抵抗力也较 弱。
副溶血性弧菌检验课件
培养温度
在37℃下培养24-48小时，观察是否 有细菌生长。
分离培养
分离培养基
在SS（Salmonella Shigella）培养基上进行分离培养，副溶 血性弧菌在此培养基上呈现绿色菌落。
菌落形态
观察菌落的形状、大小、色泽等特征，以初步判断是否为副 溶血性弧菌。
生化鉴定
氧化酶试验
副溶血性弧菌为阳性结果。
基因测序
对PCR扩增产物进行测序，与副溶血性弧菌的基因序列进行比对，以确定是否 为副溶血性弧菌。
快速检测方法
Hale Waihona Puke 免疫胶体金试纸条利用抗原抗体反应的原理，将特异性抗体或抗原固定在试纸条上，当与样品中的 副溶血性弧菌抗原或抗体结合后，会出现显色反应，判断是否为副溶血性弧菌。
生物传感器
利用生物传感器技术，将副溶血性弧菌的特异性抗体或抗原固定在传感器上，当 与样品中的副溶血性弧菌结合后，会产生电信号或光信号，通过信号的强弱判断 副溶血性弧菌的浓度。
消毒处理
对接触过患者的物品和 环境进行消毒处理。
加强监测
加强食品和水质的监测 ，及时发现并控制副溶
血性弧菌的传播。
消毒与灭菌方法
高温消毒
将食品或物品加热至70度以上 ，持续一段时间进行消毒。
紫外线消毒
使用紫外线灯对空气和表面进 行消毒。
化学消毒
使用漂白粉、酒精等化学药剂 进行消毒。
煮沸消毒
将水加热至沸腾状态，持续一 段时间进行消毒。
培养特性
副溶血性弧菌为需氧或兼性厌氧菌， 在普通培养基上生长良好，适宜温度 为37°C，适宜盐浓度为2-4%。
流行病学特点
01
02
03
传染源
副溶血性弧菌主要来自海 产品，如鱼类、贝类、甲 壳类等。
在37℃下培养24-48小时，观察是否 有细菌生长。
分离培养
分离培养基
在SS（Salmonella Shigella）培养基上进行分离培养，副溶 血性弧菌在此培养基上呈现绿色菌落。
菌落形态
观察菌落的形状、大小、色泽等特征，以初步判断是否为副 溶血性弧菌。
生化鉴定
氧化酶试验
副溶血性弧菌为阳性结果。
基因测序
对PCR扩增产物进行测序，与副溶血性弧菌的基因序列进行比对，以确定是否 为副溶血性弧菌。
快速检测方法
Hale Waihona Puke 免疫胶体金试纸条利用抗原抗体反应的原理，将特异性抗体或抗原固定在试纸条上，当与样品中的 副溶血性弧菌抗原或抗体结合后，会出现显色反应，判断是否为副溶血性弧菌。
生物传感器
利用生物传感器技术，将副溶血性弧菌的特异性抗体或抗原固定在传感器上，当 与样品中的副溶血性弧菌结合后，会产生电信号或光信号，通过信号的强弱判断 副溶血性弧菌的浓度。
消毒处理
对接触过患者的物品和 环境进行消毒处理。
加强监测
加强食品和水质的监测 ，及时发现并控制副溶
血性弧菌的传播。
消毒与灭菌方法
高温消毒
将食品或物品加热至70度以上 ，持续一段时间进行消毒。
紫外线消毒
使用紫外线灯对空气和表面进 行消毒。
化学消毒
使用漂白粉、酒精等化学药剂 进行消毒。
煮沸消毒
将水加热至沸腾状态，持续一 段时间进行消毒。
培养特性
副溶血性弧菌为需氧或兼性厌氧菌， 在普通培养基上生长良好，适宜温度 为37°C，适宜盐浓度为2-4%。
流行病学特点
01
02
03
传染源
副溶血性弧菌主要来自海 产品，如鱼类、贝类、甲 壳类等。
神奈川现象的名词解释
神奈川现象
菌株在含高盐的人O型血或兔血以及D-甘露醇作为碳源的我萋琼脂平板上可产生β溶血的现象副溶血性弧菌在普通血平板上不溶血或只产生α溶血。
但在特定条件下，某些菌株在含高盐（7%）的人O型血或兔血以及D-甘露醇作为碳源的我萋琼脂平板上可产生β溶血，称为神奈川现象。
引发菌种及预防
副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus）是一种嗜盐性细菌。
副溶血性弧菌食物中毒，是进食含有该菌的食物所致，主要来自海产品，如墨鱼、海鱼、海虾、海蟹、海蜇，以及含盐分较高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。
本菌存活能力强，在抹布和砧板上能生存1个月以上，海水中可存活47天。
临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。
本病多在夏秋季发生于沿海地区，常造成集体发病。
近年来由于海鲜空运，内地城市病例也渐增多。
副溶血弧菌系弧菌科弧菌属，革兰染色阴性，为多形态杆菌或稍弯曲弧菌。
本菌嗜盐畏酸。
最适宜的培养基：温度为37℃，含盐3%一3．5%，pH值为7．4—8．5。
本菌对酸较敏感，当pH6以下即不能生长，在普通食醋中l一3min即死亡。
在3%一3．5%含盐水中繁殖迅速，每8～9min为一周期。
对高温抵抗力小，56℃时5 10min即可死亡。
本菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。
预防措施包括：动物性食品应煮熟煮透再吃；隔餐的剩菜食前应充分加热；防止生熟食物操作时交叉污染；海产品宜用饱和盐水浸渍保藏（并可加醋调味杀菌），食前用冷开水反复冲洗。
副溶血性弧菌检验
2）培养特性
嗜盐：在含氯化钠(20-30g／L最适) 的培养基
上生长，无盐和110g ／L以上不生长。
生长温度：最适为37℃，4 ℃不生长。
pH: 最适pH为7.4-8.0。
需氧Байду номын сангаас:需氧性很强，厌氧条件下生长缓慢。
7
3）抵抗力
敏感：淡水等无盐环境 不耐热 对酸敏感，在2％冰醋酸或食醋中立即死亡， 对氯、碳酸、来苏水等一般化学消毒剂敏感： 对磺胺噻唑、氯霉素、合霉素敏感。 耐受：耐高浓度NaCl－海水，盐渍酱菜中存活时间较长； 耐低温的抵抗力较强 耐青霉素、磺胺嘧啶。
历史：食物中毒于1950年在日本首发，副溶血性弧菌（V. parahemolyticus）于我国大陆沿海地区食物中毒中最常见的一 种病原菌。
3
2、分类:弧菌科、弧菌属。
3、副溶血性弧菌生物学特性
1）菌体形态学特征 3）抵抗力 5）致病性 2）培养特性 4）生化特性
5
1）菌体形态学特征
本菌为G-，多形态，无芽孢，单端单鞭毛，有嗜盐特性， 在30-37℃最适温度时增长较快，一般冬季不易检出。
10
中毒原因:烹调时未烧熟、煮、透,或熟制品污染后未再彻 底加热。 中毒食品:副溶血性弧菌食物中毒多发生在海产品大量上市 时。中毒食品主要是海产品,其次为咸菜、熟肉 类、禽肉、禽蛋类,约有半数为腌制品。 主要症状:中毒后潜伏期一般在10小时左右。发病急,主要 症状为恶心、呕吐、腹泻、腹痛、发热,尚有头 痛、多汗、口渴等症状。 失水过多者可引起血压下降，电解质紊乱，出现 虚脱。少数严重病人由于休克、昏迷而死亡。 食用提醒: *加工海产品一定要烧熟煮透。 **烹调或调制海产品、拼盘时可加适量食醋。
谢谢大家
副溶血性弧菌讲解
2、增菌
（1）定性检测
将制备好的 1:10 样品匀液于 36 ℃±1℃培养 8 h～18 h。
（2）定量检测
•用无菌吸管吸取 1:10 样品匀液 1 mL，注入含有 9 mL 3% 氯化钠碱性蛋白胨水的试管内，振摇试管混匀，制备 1:100 的样品匀液。
•另取 1 mL 无菌吸管，按之前操作程序，依次制备 10 倍系 列稀释样品匀液，每递增稀释一次，换用一支 1 mL 无菌吸 管。
MR:阳性 （红色）
左侧为阴性 对照
VP：阴性
五、抗原的特征
O抗原是耐热的菌体抗原，目前有O1~O13共 13种，可用于血清学鉴定。 K抗原是一种荚膜抗原，现有K1~K71，也用于 血清学鉴定。 中国大陆副溶血弧菌大部分是O3：K6。
六、检验实验
目前副溶血性弧菌的检验采用国标法（GB/T 4789.7—2013 ）
-
生 化
乳糖 硫化氢 赖氨酸脱羧酶
性
VP
+ -
状
ONPG
-
阳性：+ 阴性：-
3 ％氯化钠三糖铁琼脂中的反应为底层变 黄不变黑，无气泡，斜面颜色不变或红色 加深。
嗜盐性试验
挑取纯培养的单个可疑菌落，分别接种 0%、 6%、8%和 10%不同氯化钠浓度的胰胨水，36 ℃±1 ℃培养 24 h，观察液体混浊情况。
b.典型的副溶血性弧菌在 TCBS 上呈圆形、半透明、 表面光滑的绿色菌落，用接种环轻触，有类似口香 糖的质感，直径 2 mm～3 mm。从培养箱取出 TCBS 平板后，应尽快（不超过 1 h）挑取菌落或标记要 挑取的菌落。典型的副溶血性弧菌在弧菌显色培养 基上的特征按照产品说明进行判定。
4.纯培养
在SS平板上，菌落中等大小，长出1～2mm扁 平、无色、半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈 粘稠状。
第七节 副溶血性弧菌
二、致病性
1、致病因素 ★侵袭力：活菌(105~107/g)，可使人致病 . ★产生溶血毒素：内毒素，成分是脂多糖，100℃30min不 被破坏。 2、媒介食品 主要是海产品（鱼、虾、蟹、蛤等）， 含盐量较高的食物亦可带菌。 3、所致疾病 食物中毒、急性胃肠炎、败血症等。
二、致病性
4、预防措施 （1）海产品加工前用消毒水冲洗干净，接触过海产品的 厨具、容器和手及水池等均要洗刷干净，以免污染食品 （2）若要吃凉拌菜应充分洗净，现在沸水中烫后，加醋， 放置10min后，再放其他调味剂 （3）严格执行生熟食品分开制度 （4）剩饭菜，在食用前要回锅热透
在固体培养基上菌落呈圆形凸起，混浊不透明，表面
光滑，较湿润，边缘不整齐。 在血平板上可见溶血环。
3、生化特性
分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖，蔗糖。 H 2 S （－）、 V-P （－）、靛基质（吲哚试验）（ + ）、
精氨酸（－）
甲基红（+）、赖氨酸（＋）、溶血＋/-
V.P反应
• 检测某种细菌分解碳水化合物产生乙酰甲 基甲醇[CH3CH（OH）COCH3]的反应。 通常把细菌培养在葡萄糖蛋白胨液体培养 基中，加入强碱可见显有红色。此反应用 于细菌的鉴别
8
4、抗原结构结构
O抗原（菌体抗原）：O1~O13
H抗原（鞭毛抗原）： K抗原（荚膜抗原）：K1~K71
13种。
65种。
（ 缺编：K2 、 K14 、K17、 K35、 K62）
血清分型：所有副溶血性弧菌的H 抗原均相同，但是O 抗
原和K 抗原存在差异，以13种O抗原及65种K抗原将其分为 13个群和845个型。
5
• 2、尿素酶（Urease，脲酶）试验
副溶血性弧菌
研究对象：样品中是否检出副溶血性弧菌。
02 定性检测检验原理
特点：首先将样品接种到氯化钠琼脂平板和ss琼脂平板各一个，培养18-24h观察 研究对象：根据证实为副溶血性弧菌阳性的试管管数，查MPN检索表，报告每克 （毫升）副溶血性弧菌的MPN值。
检验流程
样品25g(ml)+3%氯化钠碱性蛋白胨水
36±1℃18h
副溶血性弧菌
furongxuexinghujun
制作人：刘明路
01
生物学特性
shengwuxuetexing
02
04 06
检验原理
jianyanyuanli
目录
CONTENTS
03 05
实验材料
shiyancailiao
操作步骤
caozuobuzhou
检验结果
jianyanjieguo
注意事项
zhuyishixiang
嗜盐性试 验
将上述培养物接种无盐胨水
、7%、11%氯化钠胨水 。
检验 结果
检验结果
初步鉴定 结果
副溶血性弧菌： 氧化酶试验：阳性。 涂片镜检：G-，棒状、弧状、卵圆状等多形态，无芽胞，有鞭毛。 3％氯化钠三糖铁斜面 ：底层变黄不变黑，无气泡，斜面颜色不变 或红色加深，有动力。 嗜盐性试验：分别接种于不同氯化钠浓度的胰胨水中培养，在无 氯化钠和10％氯化钠的胰胨水中不生长或微弱生长，在7％氯化钠的 胰胨水中生长旺盛。
首先将样品接种到氯化钠 琼脂平板和ss琼脂平板各 一个，培养18-24h观察。 也可增菌液直接分离。
生化试验
V-P、靛基质、甲基红试验 等
第三步 第二步
第四步
第五步
第六步
可以菌落培 养
02 定性检测检验原理
特点：首先将样品接种到氯化钠琼脂平板和ss琼脂平板各一个，培养18-24h观察 研究对象：根据证实为副溶血性弧菌阳性的试管管数，查MPN检索表，报告每克 （毫升）副溶血性弧菌的MPN值。
检验流程
样品25g(ml)+3%氯化钠碱性蛋白胨水
36±1℃18h
副溶血性弧菌
furongxuexinghujun
制作人：刘明路
01
生物学特性
shengwuxuetexing
02
04 06
检验原理
jianyanyuanli
目录
CONTENTS
03 05
实验材料
shiyancailiao
操作步骤
caozuobuzhou
检验结果
jianyanjieguo
注意事项
zhuyishixiang
嗜盐性试 验
将上述培养物接种无盐胨水
、7%、11%氯化钠胨水 。
检验 结果
检验结果
初步鉴定 结果
副溶血性弧菌： 氧化酶试验：阳性。 涂片镜检：G-，棒状、弧状、卵圆状等多形态，无芽胞，有鞭毛。 3％氯化钠三糖铁斜面 ：底层变黄不变黑，无气泡，斜面颜色不变 或红色加深，有动力。 嗜盐性试验：分别接种于不同氯化钠浓度的胰胨水中培养，在无 氯化钠和10％氯化钠的胰胨水中不生长或微弱生长，在7％氯化钠的 胰胨水中生长旺盛。
首先将样品接种到氯化钠 琼脂平板和ss琼脂平板各 一个，培养18-24h观察。 也可增菌液直接分离。
生化试验
V-P、靛基质、甲基红试验 等
第三步 第二步
第四步
第五步
第六步
可以菌落培 养
副溶血性弧菌使用说明
副溶血性弧菌编号 名称北京华越洋生物NRR00440 副溶血性弧菌基本信息：名称：副溶血性弧菌规格：300ul甘油菌储存温度：-‐80℃基因组：副溶血性弧菌简介：副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus，VP），为革兰氏阴性杆菌，呈弧状、杆状、丝状等多种形状，无芽孢。
副溶血性弧菌是一种嗜盐性细菌，主要来源于鱼、虾、蟹、贝类和海藻等海产品。
此菌对酸敏感，在普通食醋中5分钟即可杀死，对热的抵抗力较弱，对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。
在对该菌进行培养的最适宜的培养基：温度为30℃—37℃，含盐2.5%—3%(若盐浓度低于0.5%则不生长)，pH 值为8.0—8.5。
操作说明：1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。
也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。
2，为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
冷冻管开封：用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌株复溶：无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取1ml 左右复溶液，加入到冷冻管中。
轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮：用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。
做好标识，在适宜温度下培养。
细菌在30-‐35℃培养箱中培养24-‐48h，真菌在23-‐28℃培养箱中培养24-‐72h （必要时，可适当延长培养时间）。
菌株传代：将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中（尽量增大接种量：如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓慢释放），适宜温度下培养，用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注意事项：1、菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放置会导致菌种衰退；2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；3、一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才能正常生长；4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时来电询问；5、某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态；培养过程中亦要保持厌氧状态；6、某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-‐10%CO2 促进生长；7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。
副溶血弧菌的活化条件
副溶血弧菌的活化条件
副溶血弧菌是一种嗜盐细菌，必须在含盐%-8%的环境中才能生长，且最适宜的生长盐浓度为2%-4%。
这种细菌无法在无盐的培养基上生长，在含盐
浓度过高（10%以上）的培养基上也无法生长。
副溶血弧菌能在温度为5-44℃的范围内生长，但最佳的生长温度为30-35℃，当温度低于40℃时停止生长。
此外，该细菌适宜的pH值为，其中
最为适宜，在pH低于6的酸性条件下生长不佳。
副溶血弧菌对酸敏感，在食醋中3分钟即可死亡。
该菌不耐热，当温度达到56℃时，5分钟内即可死亡，90℃时，1分钟内即可失去活性。
在低温环境中，副溶血弧菌容易死亡。
以上内容仅供参考，建议查阅关于副溶血弧菌的文献资料或咨询微生物学家，获取更准确的信息。
9、副溶血性弧菌检测
《食品安全国家标准 食品中致病菌限量》GB29921-2013 水产制品 （熟制水产品、即食生制水产品、即食藻类制品）： n=5; c=1; m=100MPN/g（mL); M=1000MPN/g（mL） 水产调味品： n=5; c=1; m=100MPN/g（mL); M=1000MPN/g（mL）
7）结果与报告
根据检出的可疑菌落生化性状，报告25 g（mL）样品中检出 副溶血性弧菌。如果进行定量检测，根据证实为副溶血性弧菌阳 性的试管管数，查最可能数（MPN）检索表，报告每g（mL）副 溶血性弧菌的MPN值。
《腌制生食动物性水产品微生物指标》GB 10136-2005 致病菌（沙门氏菌、副溶血性弧菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球 菌）不得检出
副溶血性弧菌检验 GB4789.7-2013
1
主要内容
1、概述 2、分类 3、生物学特性 4、流行病学 5、检验
1、概述
副溶血性弧菌（ Vibrio parahaemolyticus ） 分布广泛的海洋来源细菌，食物中毒重要的病原菌之一。 夏秋季节的沿海地区，经常由食用受污染的海产品引起爆 发性食物中毒。 流行病历史：世界首例副溶血性弧菌食物中毒1950年发生 在日本；中国最早的报道见于1962 年；美国发生于1971年；均 由海产品引发。
4）初步鉴定试验
3.5％氯化钠三糖铁琼脂：底层 变黄，斜面不变色，有动力， 不产生硫化氢. 镜检形态：本菌为G-，多形态，无芽孢。
氧化酶试验：氧化酶阳性。
嗜盐性试验： 0%不生长 6%和8%旺盛生长 10%不生长
14
5）确定鉴定：取纯培养物分别接种含3%氯化钠的甘露醇、赖氨酸、
MR-VP培养基，36℃士1℃培养24h~48h后观察结果。隔夜培养物进行 ONPG试验。
食品中副溶血性弧菌的检验
食品中副溶血性弧菌的检验
食品中副溶血性弧菌的检验
一、概况 媒介食品 副溶广泛存在于海岸和海水中，海生动
植物常会受到污染而带菌。海鱼、虾、蟹、蛤等海 产品带菌率极高；被海水污染的食物、某些地区的 淡水产品如鲫鱼、鲤鱼等及被污染其他含盐量较高 的食物如咸菜、咸肉、咸蛋亦可带菌，也可因受到 污染而引起中毒。带用少量该菌的食物，在适宜的 温度下，经3～4小时细菌可急剧增加至中毒数量。 进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污 染所引起。
无粘性，(绿)兰色，直径2—4mm 嗜盐选择性平板：直径2.5mm，圆整或不
齐，隆起混浊，无粘性，无色，湿润。 4、选择性培养
取上述可疑菌落接种于3.5% Nacl-TSI 培养37℃ 24小时 5、镜检：取上述可疑菌落镜检，应为革兰氏 阴性，无芽胞多形态，两端浓染。
食品中副溶血性弧菌的检验
副溶血性弧菌在海博 弧菌显色培养基上典 型特征。典型 副溶
7、生化试验
• 分别接种各类生化培养基，置37 ℃恒温培 养。除V-P、靛基质、甲基红试验培养48小 时后加试剂观察外，其他均可在24小时观 察。试验结果判定参照下表。
食品中副溶血性弧菌的检验
生化特性
葡萄糖产 酸 葡萄糖产 气 蔗糖 乳糖 甘露醇 硫化氢 甲基红
7、生化试验
副溶血性弧菌的生化性状表
血性弧菌显蓝色至蓝 绿色 ， 霍乱弧菌和 其它弧菌显无色。
副溶血弧菌在蔗糖琼脂（tcbs）平 板上的菌落
食品中副溶血性弧菌的检验
6、嗜盐性试验
将可疑培养物接种于不同盐浓度的盐胨水 中，37℃ 24小时，观查生长情况。盐含量 0、3、7、9、11% ， 在3-7 %生长良好。
０ ３ ７ ９ 11
食品中副溶血性弧菌的检验
食品中副溶血性弧菌的检验
一、概况 媒介食品 副溶广泛存在于海岸和海水中，海生动
植物常会受到污染而带菌。海鱼、虾、蟹、蛤等海 产品带菌率极高；被海水污染的食物、某些地区的 淡水产品如鲫鱼、鲤鱼等及被污染其他含盐量较高 的食物如咸菜、咸肉、咸蛋亦可带菌，也可因受到 污染而引起中毒。带用少量该菌的食物，在适宜的 温度下，经3～4小时细菌可急剧增加至中毒数量。 进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污 染所引起。
无粘性，(绿)兰色，直径2—4mm 嗜盐选择性平板：直径2.5mm，圆整或不
齐，隆起混浊，无粘性，无色，湿润。 4、选择性培养
取上述可疑菌落接种于3.5% Nacl-TSI 培养37℃ 24小时 5、镜检：取上述可疑菌落镜检，应为革兰氏 阴性，无芽胞多形态，两端浓染。
食品中副溶血性弧菌的检验
副溶血性弧菌在海博 弧菌显色培养基上典 型特征。典型 副溶
7、生化试验
• 分别接种各类生化培养基，置37 ℃恒温培 养。除V-P、靛基质、甲基红试验培养48小 时后加试剂观察外，其他均可在24小时观 察。试验结果判定参照下表。
食品中副溶血性弧菌的检验
生化特性
葡萄糖产 酸 葡萄糖产 气 蔗糖 乳糖 甘露醇 硫化氢 甲基红
7、生化试验
副溶血性弧菌的生化性状表
血性弧菌显蓝色至蓝 绿色 ， 霍乱弧菌和 其它弧菌显无色。
副溶血弧菌在蔗糖琼脂（tcbs）平 板上的菌落
食品中副溶血性弧菌的检验
6、嗜盐性试验
将可疑培养物接种于不同盐浓度的盐胨水 中，37℃ 24小时，观查生长情况。盐含量 0、3、7、9、11% ， 在3-7 %生长良好。
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食品中副溶血性弧菌的检验
副溶血性弧菌食物中毒的科普知识课件
在厨房中避免交叉污染，使用不同的切板。
如何预防？ 了解来源
选择信誉良好的餐厅和供应商，了解海鲜的来源 和处理方式。
尽量避免在不洁或卫生条件差的地方用餐。
发生后如何处理？
发生后如何处理？
就医建议
一旦出现相关症状，应及时就医，尤其是高危人 群。
医生可根据症状和病史进行适当的检测与治疗。
发生后如何处理？
副溶血性弧菌食物中毒科普知识
演讲人：
目录
1. 什么是副溶血性弧菌食物中毒？ 2. 发生在哪里？ 3. 谁容易感染？ 4. 如何预防？ 5. 发生后如何处理？
什么是副溶血性弧菌食物中毒 ？
什么是副溶血性弧菌食物中毒？
定义
副溶血性弧菌食物中毒是由副溶血性弧菌（ Vibrio parahaemolyticus）引起的一种食源性疾病 。
补充水分
腹泻和呕吐时需补充足够的水分和电解质，以防 脱水。
可使用口服补液盐或饮用清淡的液体。
发生后如何处理？
避免自行用药
不建议自行使用抗生素或止泻药，需遵循医生的 指导。
不当用药可能会加重病情或延误治疗。
谢谢观看
即使如此，仍建议避免食用生海鲜。
谁容易感染？
旅行者
前往高风险地区的旅行者也面临感染风险，特别 是食用当地海鲜时。
建议在旅行时选择经过充分加热处理的食品。
如何预防？
如何预防？ 食品安全
确保海鲜在食用前充分煮熟，避免生食海鲜。
加热至70摄氏度以上可有效杀灭细菌。
如何预防？ 注意卫生
处理海鲜时，保持良好的个人卫生，勤洗手，使 用干净的工具。
发生在哪里？
发生在哪里？
污染源
副溶血性弧菌主要通过食用生或未煮熟的海鲜传 播，例如生蚝、虾和鱼。
如何预防？ 了解来源
选择信誉良好的餐厅和供应商，了解海鲜的来源 和处理方式。
尽量避免在不洁或卫生条件差的地方用餐。
发生后如何处理？
发生后如何处理？
就医建议
一旦出现相关症状，应及时就医，尤其是高危人 群。
医生可根据症状和病史进行适当的检测与治疗。
发生后如何处理？
副溶血性弧菌食物中毒科普知识
演讲人：
目录
1. 什么是副溶血性弧菌食物中毒？ 2. 发生在哪里？ 3. 谁容易感染？ 4. 如何预防？ 5. 发生后如何处理？
什么是副溶血性弧菌食物中毒 ？
什么是副溶血性弧菌食物中毒？
定义
副溶血性弧菌食物中毒是由副溶血性弧菌（ Vibrio parahaemolyticus）引起的一种食源性疾病 。
补充水分
腹泻和呕吐时需补充足够的水分和电解质，以防 脱水。
可使用口服补液盐或饮用清淡的液体。
发生后如何处理？
避免自行用药
不建议自行使用抗生素或止泻药，需遵循医生的 指导。
不当用药可能会加重病情或延误治疗。
谢谢观看
即使如此，仍建议避免食用生海鲜。
谁容易感染？
旅行者
前往高风险地区的旅行者也面临感染风险，特别 是食用当地海鲜时。
建议在旅行时选择经过充分加热处理的食品。
如何预防？
如何预防？ 食品安全
确保海鲜在食用前充分煮熟，避免生食海鲜。
加热至70摄氏度以上可有效杀灭细菌。
如何预防？ 注意卫生
处理海鲜时，保持良好的个人卫生，勤洗手，使 用干净的工具。
发生在哪里？
发生在哪里？
污染源
副溶血性弧菌主要通过食用生或未煮熟的海鲜传 播，例如生蚝、虾和鱼。
副溶血性弧菌检验
规范。
01
02
03
采用适当的生物安全防护措 施，如穿戴防护服、戴手套
、口罩等。
对实验废弃物进行妥善处理 ，防止交叉污染和环境污染
。
04
05
定期对实验室进行生物安全 检查，及时发现并消除安全
隐患。
废弃物处理与环保要求
建立废弃物处理制度，对实 验废弃物进行分类收集和处 理。
04
遵守环保法规和相关标准， 确保实验室废弃物处理符合 环保要求。
副溶血性弧菌检验
汇报人：XX
• 引言 • 病原学特性 • 检验方法与步骤 • 临床意义与解读 • 实验室质量控制与安全管理 • 研究进展与展望
01
引言
目的和背景
了解副溶血性弧菌的 生物学特性及致病机 制
提高对副溶血性弧菌 感染的防控意识和能 力
掌握副溶血性弧菌的 检验方法和诊断标准
副溶血性弧菌概述
对实验人员进行定期培训 ，提高其专业技能和质量 控制意识。
对实验仪器进行定期维护 和校准，确保其处于良好 状态。
对实验数据进行统计分析 ，及时发现并解决问题。
采用标准化的实验方法和 操作程序，减少实验误差 。
生物安全管理与防护
对实验人员进行生物安全培 训，提高其生物安全防护意
识。
建立生物安全管理制度，明 确实验室人员的食品卫生管理，防止海产品污染；避 免食用未经煮熟的海产品；加强个人卫生 习惯，饭前便后洗手；对于食品加工人员 ，应定期进行健康检查，防止带菌者污染 食品。
05
实验室质量控制与安全管理
实验室质量控制措施
建立完善的实验室质量管 理体系，包括质量手册、 程序文件、作业指导书和 记录等。
抵抗力与传播途径
抵抗力
01
02
03
采用适当的生物安全防护措 施，如穿戴防护服、戴手套
、口罩等。
对实验废弃物进行妥善处理 ，防止交叉污染和环境污染
。
04
05
定期对实验室进行生物安全 检查，及时发现并消除安全
隐患。
废弃物处理与环保要求
建立废弃物处理制度，对实 验废弃物进行分类收集和处 理。
04
遵守环保法规和相关标准， 确保实验室废弃物处理符合 环保要求。
副溶血性弧菌检验
汇报人：XX
• 引言 • 病原学特性 • 检验方法与步骤 • 临床意义与解读 • 实验室质量控制与安全管理 • 研究进展与展望
01
引言
目的和背景
了解副溶血性弧菌的 生物学特性及致病机 制
提高对副溶血性弧菌 感染的防控意识和能 力
掌握副溶血性弧菌的 检验方法和诊断标准
副溶血性弧菌概述
对实验人员进行定期培训 ，提高其专业技能和质量 控制意识。
对实验仪器进行定期维护 和校准，确保其处于良好 状态。
对实验数据进行统计分析 ，及时发现并解决问题。
采用标准化的实验方法和 操作程序，减少实验误差 。
生物安全管理与防护
对实验人员进行生物安全培 训，提高其生物安全防护意
识。
建立生物安全管理制度，明 确实验室人员的食品卫生管理，防止海产品污染；避 免食用未经煮熟的海产品；加强个人卫生 习惯，饭前便后洗手；对于食品加工人员 ，应定期进行健康检查，防止带菌者污染 食品。
05
实验室质量控制与安全管理
实验室质量控制措施
建立完善的实验室质量管 理体系，包括质量手册、 程序文件、作业指导书和 记录等。
抵抗力与传播途径
抵抗力
副溶血性弧菌
副溶血性弧菌
副溶血性弧菌是一种嗜盐性弧菌，存在于海水、海底沉积物和鱼类、贝类等海产品中。
该菌是引起沿海地区食物中毒的常见病原菌。
本菌为革兰染色阴性。
呈弧形、杆状、丝状等多形态。
无芽孢，无荚膜，有单鞭毛，运动活泼。
在含有3.5%NaCl的培养基中生长良好，如无盐则不能生长。
致病菌株能产生溶血毒素，使人或家兔红细胞溶血。
该菌抵抗力弱，56℃经5min、1%醋酸或50%食醋5min均可杀死，淡水中存活不超过2d以上。
人因食入未煮熟的海产品或污染该菌的盐渍食物，如海蜇、海鱼、虾、贝类等而感染。
潜伏期平均6～10h。
主要症状有腹痛、腹泻、呕吐、脱水或发热，粪便多为水样或糊状，少数为粘液血便。
病程1～7d，一般恢复较快。
病后免疫力不强，可再感染。
治疗可用庆大霉素、氟哌酸、复方新诺明等药物。
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1、传染源 传染源为病人，集体发病时往往仅少 数病情严重者住院，而多数未住院者可能成为传染 源，但由于病人仅在疾病初期排菌较多，其后排菌 迅速减少，故不至因病人散布病菌而造成广泛流行。 2、传播途径 本病经食物传播，主要的食物是海 产品或盐腌渍品，常见者为蟹类、乌贼、海蜇、鱼 等，其次为蛋品、肉类或蔬菜。进食肉类或蔬菜而 致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。 3、易感者 男女老幼均可患病，但以青壮年为多， 病后免疫力不强，可重复感染。本病多发生于夏秋 沿海地区，常造成集体发病。近年来沿海地区发病 有增多的趋势。
典型的副溶血性弧菌在弧菌显色培养基上呈圆
形、半透明、表面光滑的粉紫色菌落（75.0 g/L）、混合显色剂（2.3g/L）、琼 脂（15.0g/L）。显色培养基是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底 物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基。
四、生化特性
能分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、淀粉和阿 拉伯胶糖，产酸，不产气。不发酵乳糖、蔗 糖、纤维二糖等。 从患者样品中分离的致病菌株在人或家兔红 细胞的培养基中生长，能产生β溶血。 海水中及海产品中分离的菌株不溶血，这个 现象称为“神奈川现象”。能在神奈川培养 基上产生β溶血者，称为神奈川实验阳性。
预防措施
1、动物性食品应煮熟煮透再吃。 2、注意海鲜是否干净、新鲜，食前应用淡水 反复冲洗，吃时煮熟煮透，再加适量食醋； 3、生熟食品分开存放，装海产品的器具及接 触海产品的手应洗净擦干再接触其他食品。
二、基本情况及特征
大小：0.7~1.0μm，有时有丝状菌体，可长达15 μm 特征：一端有鞭毛，运动活泼，菌周有鞭毛
中毒食品主要是海产品鱼、虾、蟹、贝类和海
藻等海产品，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋 类，约有半数中毒者为食用了腌制品后。中毒原 因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染．
副溶血性弧菌致病性
致病因子： 1、耐热直接溶血素TDH，肠毒素 2、耐热相关溶血素TRH，与TDH 相似。
副溶血性弧菌的流行病学
副溶血性弧菌的发现
于1950年10月从日本大阪市，发生的一起咸 沙丁鱼食物中毒，患者肠道排泄物和食物中首 次分离出副溶血性弧菌。 在日本，副溶血性弧菌食物中毒约占细菌性食 物中毒的70%～80%.1958年上海市防疫站也从 烤鸭所致食物中毒的患者中分离出此菌。以后 在我国、日本、印度、美国等许多国家均陆续 报道有本病的发生。 1966年国际弧菌命名委员会正式命名为副溶血 性弧菌。
革兰染色阴性需氧菌,无芽孢，两端有 浓染现象，其中间着色较淡或不着色。
菌体形态呈多型性，主 要出现的形态有球状、 球杆状、卵圆状和丝状。
三、培养特性
1、需氧菌，需氧性很强，营养要求不高。 2、在含盐3～3.5%培养基中生长最好，无盐 条件下不能生长。 3、最适温度30~37℃，PH7.4~8.0。 4、不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂 抵抗力弱。
嗜盐性试验
MR 试验方法
MR试验方法：取一种细菌的24h
培养物，接种于葡萄糖蛋白胨水培 养基中，置37℃培养48～72h，取 出后加甲基红试剂3～5滴，凡培养 液呈红色者为阳性，以‘‘十”表 示；橙色者为可疑，以“±”表示； 黄色者为阴性，以“—”表示。
副溶血性弧菌
Vibrio parahaemolyticus
目录
一、引起疾病症状（致病性、流行病学情况） 二、基本情况及特征 三、培养特性
四、生化特性
五、抗原特征
六、检验方法（举例阐述检验某一食品、商品中该菌的
详细操作过程）
一.副溶血性弧菌疾病症状
副溶血性弧菌（Bibrio Parahemolyticus）， 进食含有该菌的食物致可食物中毒，也称嗜盐 菌食物中毒。 副溶血弧性菌常导致肠胃不适，伴随食物中毒 等症状。表现为急性肠胃炎，腹痛、吐泻、发 烧等特征。少数重症者引起原发性败血症。
副 溶 血 性 弧 菌 的 生 化 性 状
试验项目 革兰氏染色镜检 氧化酶 动力 蔗糖 葡萄糖 甘露醇 分解葡萄糖产气 乳糖 硫化氢 赖氨酸脱羧酶 VP ONPG 阳性：+
结果 阴性，无芽孢 + + + + + 阴性：-
3 ％氯化钠三糖铁琼脂中的反应为底层变 黄不变黑，无气泡，斜面颜色不变或红色 加深。
在液体培养基中，呈现浑浊，表面形 成菌膜，R型菌发生沉淀。 在固体培养基上的菌落通常为隆起， 圆形，稍混浊，不透明，表面光滑湿润， 传代之后出现不圆整、粗糙型菌落，或灰 白色半透明或不透明的菌落。 在血琼脂平板上菌落的周围可见溶血 环，某些菌株可形成β溶血或α溶血。
本菌在伊红美兰琼脂上 不生长，某些菌株在麦 康凯上生长，生长的菌 落呈圆形，平坦、半透 明或浑浊，略带红色。
典型的副溶血性弧菌在TCBS琼脂培养基呈圆形、 半透明、表而光滑的绿色菌落，用接种环轻触， 有类似口香糖的质感，直径2mm--3 mm 。
注：TCBS中文名：硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂培养基。
成分：酵母粉 5.0 , 蛋白胨10.0, 硫代硫酸钠10.0, 枸橼酸钠10.0, 牛胆粉5.0, 牛胆酸钠3.0 , 蔗糖20.0 , 氯化钠10.0, 柠檬酸铁1.0 , 麝香草酚兰0.04, 琼脂15.0, pH值8.6 ± 0.1,
伊红美蓝琼脂培养基主要成分：蛋白胨、乳 糖、磷酸氢二钾、伊红、美蓝、琼脂粉、蒸 馏水。 麦康凯培养基：蛋白胨 17g，脙胨 3g，猪 胆盐(或牛、羊胆盐) 5g，氯化钠 5g，琼脂 17g，蒸馏水 1000mL，乳糖 10g，0.01%结 晶紫水溶液 10mL，0.5%中性红水溶液 5mL
在SS平板上，菌落中等大小，长出1～2mm扁 平、无色、半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈 粘稠状。
嗜盐性试验
挑取纯培养的单个可疑菌落，分别接种 0%、 6%、8%和 10%不同氯化钠浓度的胰胨水，36 ℃±1 ℃培养 24 h，观察液体混浊情况。 副溶血性弧菌在无氯化钠和 10%氯化钠的胰胨 水中不生长或微弱生长，在 6%氯化钠和 8%氯 化钠的胰胨水中生长旺盛。
10％ NaCl
6％NaCL