副溶血性弧菌教学提纲

➢ 在血琼脂平板上菌落的周围可见溶血 环，某些菌株可形成β溶血或α溶血。
本菌在伊红美兰琼脂上 不生长，某些菌株在麦 康凯上生长，生长的菌 落呈圆形，平坦、半透 明或浑浊，略带红色。
伊红美蓝琼脂培养基主要成分：蛋白胨、乳 糖、磷酸氢二钾、伊红、美蓝、琼脂粉、蒸 馏水。 麦康凯培养基：蛋白胨 17g，脙胨 3g，猪 胆盐(或牛、羊胆盐) 5g，氯化钠 5g，琼脂 17g，蒸馏水 1000mL，乳糖 10g，0.01%结 晶紫水溶液 10mL，0.5%中性红水溶液 5mL
从患者样品中分离的致病菌株在人或家兔红 细胞的培养基中生长，能产生β溶血。
海水中及海产品中分离的菌株不溶血，这个 现象称为“神奈川现象”。能在神奈川培养 基上产生β溶血者，称为神奈川实验阳性。
副 溶
试验项目 革兰氏染色镜检
氧化酶
血
动力
性
蔗糖
弧
葡萄糖
结果 阴性，无芽孢
+ + +
菌
甘露醇
+
的
分解葡萄糖产气
注：显色培养基成分：特殊营养物质（75.0 g/L）、混合显色剂（2.3g/L）、琼 脂（15.0g/L）。显色培养基是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底 物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基。
四、生化特性
能分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、淀粉和阿 拉伯胶糖，产酸，不产气。不发酵乳糖、蔗 糖、纤维二糖等。
-
生 化
乳糖 硫化氢 赖氨酸脱羧酶
性
VP
+ -
状
ONPG
-
阳性：+ 阴性：-
3 ％氯化钠三糖铁琼脂中的反应为底层变 黄不变黑，无气泡，斜面颜色不变或红色 加深。
嗜盐性试验
挑取纯培养的单个可疑菌落，分别接种 0%、 6%、8%和 10%不同氯化钠浓度的胰胨水，36 ℃±1 ℃培养 24 h，观察液体混浊情况。
成分：酵母粉 5.0 , 蛋白胨10.0, 硫代硫酸钠10.0, 枸橼酸钠10.0, 牛胆粉5.0, 牛胆酸钠3.0 , 蔗糖20.0 , 氯化钠10.0, 柠檬酸铁1.0 , 麝香草酚兰0.04, 琼脂15.0, pH值8.6 ± 0.1,
典型的副溶血性弧菌在弧菌显色培养基上呈圆 形、半透明、表面光滑的粉紫色菌落，直径 2mm--3 mm.
3、易感者 男女老幼均可患病，但以青壮年为多， 病后免疫力不强，可重复感染。本病多发生于夏秋 沿海地区，常造成集体发病。近年来沿海地区发病 有增多的趋势。
预防措施
1、动物性食品应煮熟煮透再吃。 2、注意海鲜是否干净、新鲜，食前应用淡水
反复冲洗，吃时煮熟煮透，再加适量食醋； 3、生熟食品分开存放，装海产品的器具及接
触海产品的手应洗净擦干再接触其他食品。
二、基本情况及特征
大小：0.7~1.0μm，有时有丝状菌体，可长达15 μm 特征：一端有鞭毛，运动活泼，菌周有鞭毛
革兰染色阴性需氧菌,无芽孢，两端有 浓染现的形态有球状、 球杆状、卵圆状和丝状。
三、培养特性
1966年国际弧菌命名委员会正式命名为副溶血 性弧菌。
中毒食品主要是海产品鱼、虾、蟹、贝类和海 藻等海产品，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋
类，约有半数中毒者为食用了腌制品后。中毒原 因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染．
副溶血性弧菌致病性
致病因子： 1、耐热直接溶血素TDH，肠毒素
2、耐热相关溶血素TRH，与TDH 相似。
在SS平板上，菌落中等大小，长出1～2mm扁 平、无色、半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈 粘稠状。
典型的副溶血性弧菌在TCBS琼脂培养基呈圆形、 半透明、表而光滑的绿色菌落，用接种环轻触， 有类似口香糖的质感，直径2mm--3 mm 。
注：TCBS中文名：硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂培养基。
副溶血性弧菌
Vibrio parahaemolyticus
目录
一、引起疾病症状（致病性、流行病学情况） 二、基本情况及特征 三、培养特性 四、生化特性 五、抗原特征 六、检验方法（举例阐述检验某一食品、商品中该菌的 详细操作过程）
一.副溶血性弧菌疾病症状
副溶血性弧菌（Bibrio Parahemolyticus）， 进食含有该菌的食物致可食物中毒，也称嗜盐 菌食物中毒。
副溶血弧性菌常导致肠胃不适，伴随食物中毒 等症状。表现为急性肠胃炎，腹痛、吐泻、发 烧等特征。少数重症者引起原发性败血症。
副溶血性弧菌的发现
于1950年10月从日本大阪市，发生的一起咸 沙丁鱼食物中毒，患者肠道排泄物和食物中首 次分离出副溶血性弧菌。
在日本，副溶血性弧菌食物中毒约占细菌性食 物中毒的70%～80%.1958年上海市防疫站也从 烤鸭所致食物中毒的患者中分离出此菌。以后 在我国、日本、印度、美国等许多国家均陆续 报道有本病的发生。
副溶血性弧菌的流行病学
1、传染源 传染源为病人，集体发病时往往仅少 数病情严重者住院，而多数未住院者可能成为传染 源，但由于病人仅在疾病初期排菌较多，其后排菌 迅速减少，故不至因病人散布病菌而造成广泛流行。
2、传播途径 本病经食物传播，主要的食物是海 产品或盐腌渍品，常见者为蟹类、乌贼、海蜇、鱼 等，其次为蛋品、肉类或蔬菜。进食肉类或蔬菜而 致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。
副溶血性弧菌在无氯化钠和 10%氯化钠的胰胨 水中不生长或微弱生长，在 6%氯化钠和 8%氯 化钠的胰胨水中生长旺盛。
10％ NaCl
嗜盐性试验
6％NaCL
MR 试验方法
MR试验方法：取一种细菌的24h 培养物，接种于葡萄糖蛋白胨水培 养基中，置37℃培养48～72h，取 出后加甲基红试剂3～5滴，凡培养 液呈红色者为阳性，以‘‘十”表 示；橙色者为可疑，以“±”表示； 黄色者为阴性，以“—”表示。
➢ 1、需氧菌，需氧性很强，营养要求不高。 ➢ 2、在含盐3～3.5%培养基中生长最好，无盐
条件下不能生长。 ➢ 3、最适温度30~37℃，PH7.4~8.0。 ➢ 4、不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂
抵抗力弱。
➢ 在液体培养基中，呈现浑浊，表面形 成菌膜，R型菌发生沉淀。
➢ 在固体培养基上的菌落通常为隆起， 圆形，稍混浊，不透明，表面光滑湿润， 传代之后出现不圆整、粗糙型菌落，或灰 白色半透明或不透明的菌落。