离子交换层析技术在多糖分离纯化中的应用

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离子交换技术在多糖分离纯化中的应用

然大分子物质，是自然界中含量最丰富的生物聚合物，为构成生命的分子基础之一，是所有生命有机体的重要
组成成分与维持生命所必须的结构材料。近２，随０ａ来
能，特别是对机体免疫功能的作用。
多糖的研究虽然较生命中其他３大类物质（白蛋
维普资讯
河北农业科学，２０，１（）６０８２７：１８—１９，１２６７ＪｕｎｌｆｅｅＡｒｕｔｒｌｃｎｅｏｒａｏｂｉｇｉｌａＳｉｃｓＨｃｕｅ
责多糖分离纯化中的应用
多糖也称多聚糖，是由很多个单糖单位构成的糖类
物质，来自于动物细胞膜和植物、微生物细胞壁中的天
免疫促进剂而引起了医药界的广泛关注，并逐渐认识到多糖及复合物分子具有极其重要的生物功能。越来越多
的研究证明，多糖具有复杂的多方面的生物活性和功
工业手段之一。且近年来在多糖的分离纯化中应用广泛。
要的生理功能及其广泛的应用被不断挖掘，引起了人们
越来越大的兴趣，现在多糖已成为天然药物及保健品研
发中的重要组成部分。据不完全统计，目前全球至少有
３０余个多糖正在分别进行正规的抗肿瘤、抗艾滋病及糖尿病治疗等临床试验，２００２年全球糖类药物及保健品的销售额己超过１３亿美元。有学者说 “ １纪的９２世头２，是多糖的时代 ” 。多糖的结构及其功能的研０ａ … 究己成为继蛋白质和核酸研究之后探索生命奥秘的第三里程碑。作为药物的多糖在治疗肿瘤时，不像一般化疗

deae纤维素柱层析多糖原理

DEAE纤维素柱层析是一种常用的离子交换色谱技术，用于多糖的分离和纯化。

其原理基于离子交换体对溶液中带电离子的吸附和解吸作用。

具体原理如下：
1. DEAE纤维素柱：DEAE纤维素是一种带有正电荷的离子交换介质，具有许多二级胺基团。

这种柱材与带负电荷的多糖分子发生静电相互作用。

2. 样品加载：将混合溶液中含有多糖的样品加载到DEAE纤维素柱上。

多糖与柱子表面的二级胺基团之间发生静电作用，带负电荷的多糖被柱子捕获。

3. 洗脱梯度：通过改变洗脱缓冲液的离子强度或pH值，使得多糖以不同的速率从柱子上洗脱。

一般采用梯度洗脱，即逐渐增加洗脱缓冲液中的盐浓度或调节pH值，以逐步将多糖从柱子上解吸下来。

4. 分离和纯化：根据多糖在DEAE纤维素柱上的亲和性差异，它们在洗脱梯度中以不同的速率逐渐分离。

带有较低亲和性的多糖会被较早洗脱，而带有较高亲和性的多糖则会在较高盐浓度或pH值条件下才从柱子上洗脱。

通过DEAE纤维素柱层析，可以实现多糖的粗分离和初步纯化。

这种方法可用于生物医药、食品工业等领域中对多糖的分离、纯化和研究。

重要多糖分离纯化方法及应用实例

证实了LNTⅠb 为蛋白多糖的假设.
实验结论：
1 利用超滤法快速分离多糖的不同组分，再分别对这些组分利用DEAE‐52 纤维素层析进一步纯化，最后用Sephadex G‐200 凝胶柱层析和聚丙烯酰胺凝胶连续电泳检测多糖纯度. 建立了一套高效快速的香菇多糖提取方法. 通过上述方法，从香菇浓缩液中纯化的LNTⅠb 的多糖含量为95.55%. 2 通过Sephadex G‐200 凝胶柱层析和聚丙烯酰胺凝胶连续电泳检测，可以证实LNTⅠb 为蛋白多糖.
20098??volume30???多糖分离纯化方法及应用实例???多糖的应用现状?????近20?年来随着天然药物化学药理研究的不断深入即分析手段突飞猛进的发展多糖的研究引起了国内外许多学者极大的兴趣
2009‐8 volume30
多糖分离纯化方法及应用实例
多糖的应用现状
近 20 年来,随着天然药物化学、药理研究的不断深入即分析手段突飞猛进的发展,多糖的研究引起了国内外许多学者极大的兴趣。研究表明, 多糖具有复杂的多方面的生物活性和功能,特别是对机体免疫功能的作用。现在多糖已成为天然药物及保健品研发中的重要组成部分。
多糖分离纯化实例香菇多糖的分离纯化研究
实验流程：香菇浓缩液离心
超滤（100kDa、5kDa）醇200 凝胶层析
多糖含量的测定多糖组分纯度检测实验结果
1、超滤结果通过两次不同分子量的超滤膜的分离，可以从香菇出多糖中分离出两个组分：LNTⅠ
上海办事处：地址：上海张江益丰路 55 弄春港丽园 67 号 201 室邮编：201203 电话：021-58950178 传真：021-58950178
透析、超滤及超速离心
选用不同规格的超滤膜和透析带进行超滤和透析,以及一定条件下的超速离心操作,可按分子大小差异把多糖样品分级。超滤和透析更常用于除去小分子物质。

多糖提取纯化化学修饰和抗氧化性研究进展

多糖提取纯化化学修饰和抗氧化性研究进展多糖是一类含有多个糖基的生物高分子化合物，广泛存在于植物和动物体内。

多糖具有多种生理功能，如调节免疫系统、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等。

多糖的提取纯化、化学修饰和抗氧化性研究对于开发多糖的生物活性和应用具有重要意义。

多糖的提取和纯化是多糖研究的基础工作。

传统的多糖提取方法包括浸提法、酶解法和离子溶液沉淀法等。

浸提法是将原料与溶剂接触，在适当条件下提取多糖。

酶解法是通过适当的酶对原料进行酶解，从而获得多糖。

离子溶液沉淀法是利用离子溶液与多糖反应，形成离子复合物，再通过沉淀和洗涤等步骤获得纯净的多糖。

还有一些新型的多糖提取方法，如超声波辅助法、微波辅助法和离子液体辅助法等。

这些新型的提取方法能够更高效、更快速地提取多糖，并且能够减少对环境的污染。

多糖的纯化是为了去除多糖样品中的杂质，提高多糖的纯度。

目前常用的纯化方法有超滤、透析、凝胶渗透层析和离子交换层析等。

超滤是利用超滤膜的筛分作用，将多糖和较小分子的杂质分离。

透析是通过半透膜的选择性渗透，将多糖和低分子物质分开。

凝胶渗透层析是利用凝胶颗粒的孔隙大小分离不同分子大小的物质。

离子交换层析是通过阳离子交换剂和阴离子交换剂对多糖样品进行交换，从而实现多糖的分离纯化。

化学修饰是将多糖分子与化学试剂反应，改变多糖的化学结构和性质。

常用的化学修饰方法有酯化、醚化、羧化、硫酸化和甲基化等。

酯化是将多糖中的羟基与酸反应，形成酯键的修饰方法。

醚化是将多糖中的羟基与醚试剂反应，形成醚键的修饰方法。

羧化是将多糖中的羟基与羧基试剂反应，形成酯键或酰胺键的修饰方法。

硫酸化是将多糖中的羟基与硫酸试剂反应，形成硫酸酯的修饰方法。

甲基化是将多糖中的羟基与甲基试剂反应，形成甲基基团的修饰方法。

化学修饰能够改变多糖的理化性质和生物活性，拓宽多糖的应用领域。

多糖的抗氧化性是指多糖对有害自由基的清除能力和抑制氧化反应的能力。

多糖的抗氧化性主要通过两种方式实现：直接清除自由基和间接抑制氧化反应。

多糖分离纯化

多糖分离纯化一、概述多糖是一类高分子化合物，具有复杂的结构和多样的功能，广泛存在于生物体内。

多糖的分离纯化是研究其结构和性质、开发应用的前提和基础。

本文将介绍多糖分离纯化的方法及其优缺点。

二、多糖分离纯化方法1. 溶液沉淀法溶液沉淀法是一种常用的多糖分离纯化方法。

该方法基于不同多糖在不同浓度下溶解度不同的原理，通过控制溶液中某些成分（如盐类）浓度来使目标多糖沉淀。

该方法操作简单，但需要对目标多糖在不同条件下的溶解度有较为准确的了解，并且会受到其他成分影响。

2. 离子交换色谱法离子交换色谱法是一种利用固定在固相上带电基团与目标多糖间相互作用实现分离纯化的方法。

该方法适用于具有明显电荷差异或含有特定官能团（如硫酸基、羧基等）的多糖。

该方法分离效果好，但需要对固相的选择和操作条件进行优化。

3. 凝胶过滤色谱法凝胶过滤色谱法是一种利用多孔凝胶作为分离介质，目标多糖根据其大小在凝胶中进行分离的方法。

该方法适用于具有不同分子量的多糖，且操作简单、分离效果较好。

但由于凝胶孔径大小限制，对于较小或较大的多糖可能无法有效分离。

4. 亲和层析法亲和层析法是一种利用目标多糖与特定配体间相互作用实现分离纯化的方法。

该方法适用于具有特定结构或功能的多糖，如具有特异性结合蛋白质、抗原表位等。

该方法操作简单、分离效果较好，但需要对配体选择和操作条件进行优化。

5. 聚焦电泳法聚焦电泳法是一种利用电场作用将目标多糖在pH梯度中移动并实现分离纯化的方法。

该方法适用于具有不同等电点或带电性质的多糖。

该方法分离效果好、可同时实现高效分离和纯化，但需要对pH梯度的选择和操作条件进行优化。

三、多糖分离纯化方法的优缺点1. 溶液沉淀法优点：操作简单，无需昂贵设备。

缺点：需要对目标多糖在不同条件下的溶解度有较为准确的了解，并且会受到其他成分影响。

2. 离子交换色谱法优点：分离效果好，适用于具有明显电荷差异或含有特定官能团（如硫酸基、羧基等）的多糖。

多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定

多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定以多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定为题，本文将介绍多糖的分离纯化方法、纯度鉴别和分子量测定的原理和技术。

一、多糖的分离纯化方法多糖是一类由多个糖基组成的生物大分子，其结构复杂多样。

为了研究多糖的性质和功能，需要将多糖与其他杂质分离开来并纯化。

常用的多糖分离纯化方法包括离心沉淀、凝胶层析、离子交换层析、亲和层析等。

离心沉淀是一种简单有效的多糖分离纯化方法。

通过调节离心速度和时间，可以使多糖与其他杂质沉淀分离，然后将上清液取出，即可得到相对纯净的多糖溶液。

凝胶层析是一种常用的多糖分离纯化方法。

凝胶层析根据多糖分子的大小和形状，利用凝胶的孔隙大小选择性地分离多糖。

常用的凝胶材料有琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶等。

离子交换层析是一种利用多糖与离子交换树脂之间的电荷相互作用进行分离的方法。

树脂表面带有正负电荷，多糖分子根据其电荷性质与树脂发生吸附和解吸作用，从而实现分离纯化。

亲和层析是一种利用多糖与特定的亲和配体之间的特异性结合进行分离的方法。

常见的亲和配体有金属离子、抗体、受体等。

通过与亲和配体结合，多糖可以被选择性地吸附在亲和树脂上，其他杂质则被洗脱，从而实现纯化。

二、多糖的纯度鉴别多糖的纯度鉴别是判断多糖溶液中是否存在杂质的过程。

常用的纯度鉴别方法包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外-可见光谱、红外光谱等。

聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的多糖纯度鉴别方法。

通过在凝胶中施加电场，多糖分子根据其大小和电荷性质在凝胶中迁移，从而实现分离和鉴定。

紫外-可见光谱是一种常用的多糖纯度鉴别方法。

多糖溶液在紫外-可见光谱范围内有特征性的吸收峰，通过测量多糖溶液在不同波长下的吸光度，可以判断多糖溶液中是否存在杂质。

红外光谱是一种常用的多糖纯度鉴别方法。

不同多糖具有特征性的红外吸收峰，通过测量多糖溶液的红外光谱，可以判断多糖溶液中是否存在杂质。

三、多糖的分子量测定多糖的分子量是衡量多糖结构大小的重要指标。

多糖分离纯化

多糖分离纯化1. 概述多糖是由许多重复单元组成的生物大分子，具有广泛的生物功能和应用价值。

多糖的分离纯化是从混合物中分离出目标多糖并提高纯度的过程。

本文将介绍多糖分离纯化的常用方法和技术，以及其在食品、药品和生物工程等领域的应用。

2. 多糖的分离方法多糖的分离方法主要包括溶剂沉淀、离子交换、凝胶过滤、超滤、逆流层析、电泳和气相色谱等。

下面将分别介绍这些方法的原理和应用情况。

2.1 溶剂沉淀溶剂沉淀是利用溶剂的物理性质，如极性和温度等，使多糖在溶液中发生相分离的方法。

通常采用醇类溶剂，如乙醇或异丙醇。

溶剂沉淀适用于多糖与其他溶质的溶解度差异较大的情况，但纯度较低。

2.2 离子交换离子交换是利用离子交换树脂上的功能基团与多糖分子间发生离子交换反应的方法。

树脂的功能基团可以选择性吸附或释放多糖分子。

离子交换适用于多糖的分子量差异较大的情况，例如海藻酸和壳聚糖的分离。

2.3 凝胶过滤凝胶过滤是利用凝胶的孔隙结构将分子按大小分离的方法。

多糖分子较大，可以被凝胶孔隙排除，而小分子可以通过凝胶透过。

凝胶过滤常用于多糖与其他小分子的分离，如蛋白质和核酸。

2.4 超滤超滤是利用超滤膜的孔隙结构将溶液分离的方法。

超滤膜的孔径可以根据需要选择，通常是分子量截留范围在1 kDa至100 kDa之间。

超滤适用于多糖与其他大分子的分离，如蛋白质和核酸。

2.5 逆流层析逆流层析是利用多糖与填料间的亲和作用进行分离的方法。

填料可以是具有特定亲和性的配体，如亲和树脂。

逆流层析适用于分子间相互作用较强的多糖分离。

2.6 电泳电泳是利用电场作用将分子按电荷和大小进行分离的方法。

多糖可根据电荷差异选择合适的电泳方法，如聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳。

电泳在多糖的分子量分析和负载量测定中广泛应用。

2.7 气相色谱气相色谱是利用样品在气相载体中的分配和迁移以实现分离的方法。

多糖需要经过甲硅烷衍生化处理后才可以进行气相色谱分析。

气相色谱适用于多糖的含量测定和结构分析。

多糖的分离纯化

1.2.2 离子交换层析鹿茸多糖初级分离纯化采用DEAE－52 离子交换柱。

称取鹿茸多糖80mg，溶于10mL 蒸馏水中，4000r /min 离心10min，取上清液样，依次用蒸馏水，0.3、0.5、0.7、1mol /L NaCl 溶液梯度洗脱，流速控制为0.5mL /min，分管收集，每管5mL，苯酚硫酸法跟踪检测多糖含量，绘制洗脱曲线，合并同一吸收峰的洗脱液，蒸馏水透析24h，减压浓缩，冷冻干燥，即得DEAE－52 纯化多糖。

1.2.3 凝胶排阻层析鹿茸多糖进一步分离纯化采用Sepharose CL－6B 凝胶排阻层析柱。

将经DEAE－52 分离后的多糖溶于蒸馏水，浓度为10mg /mL，以2mL /次上样，蒸馏水洗脱，流速控制为30mL /h，每管5mL，苯酚硫酸法跟踪检测，绘制洗脱曲线，收集、合并相同洗脱组分，透析，冷冻干燥即得SepharoseCL－6B纯化多糖。

1.2.4 鹿茸多糖紫外扫描将Sepharose CL－6B 纯化后精制多糖配成一定浓度溶液，190～400nm 下进行紫外光谱扫描，以蒸馏水作空白。

2.2.4粗多糖的分离纯化2.2.4.1粗多糖的离子柱层析取水提粗多糖样品和碱提水溶性多糖样品溶于蒸馏水中,配制成20mg/mL的溶液,4000印m离心10min,取上清液用DEAE一SepharoseFastFlow离子柱层析(2.6-40cm)进行初步分离,上样量为25mL"首先以蒸馏水洗脱,再用0.1,0.2,0.4,0.6,2mol几的NaCI进行梯度洗脱,自动部分收集仪分步收集流分,洗脱液每10mL收集一管,苯酚硫酸法检测,根据糖显色反应结果合并相同流分"2.2.4.2多糖的凝胶柱层析采用AK认explorer层析系统,Sephaeryl S100一1000凝胶柱层析对样品进行纯化"洗脱条件:凝胶柱Sephacryl S100-1000(2.6X100cm);洗脱液:蒸馏水;流速:1mL/min;样品浓度:10m留mL,上样体积5mL;洗脱液以5mL/管收集,示差折光检测器和苯酚硫酸法检测,以吸光度对洗脱体积作图。

杜仲多糖的提取、纯化和活性评价研究

杜仲多糖的提取、纯化和活性评价研究植物多糖作为一种重要的天然活性物质，具有广泛的生物活性和药用价值。

其中，杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）是一种中药材，也是中国传统药物的重要组成部分之一。

杜仲多糖作为杜仲的主要活性成分之一，已成为研究的热点之一。

一、杜仲多糖的提取方法提取杜仲多糖可采用常用的水煮法、醇沉法、酶解法等方法。

常用的水煮法是将杜仲粉末与适量的水混合，加热至沸腾后煮沸一段时间，然后离心或过滤得到提取液。

醇沉法是将杜仲粉末与适量的有机溶剂（如乙醇、甲醇等）混合，反复搅拌后静置沉淀，然后离心得到提取液。

酶解法是将杜仲粉末与适量的酶液（如纤维素酶、蛋白酶等）混合，经过一段时间的反应后，用热水提取液煮沸一段时间，最后离心得到提取液。

二、杜仲多糖的纯化方法提取得到的杜仲多糖常常需要进行纯化，以消除杂质和提高纯度。

常用的纯化方法包括离子交换层析、凝胶过滤层析、高效液相色谱等。

离子交换层析是利用离子交换树脂对杜仲多糖进行分离，树脂上的固定离子与多糖的带电部分发生吸附与解吸反应，从而实现对多糖纯化的目的。

凝胶过滤层析是利用凝胶基质对分子大小进行分离，通过溶液在凝胶颗粒之间的扩散来实现纯化。

高效液相色谱则是利用固定相与流动相的相互作用，根据化学性质和大小形状的差异进行分离。

三、杜仲多糖的活性评价杜仲多糖具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、免疫调节等。

因此，对其活性进行评价十分重要。

常用的评价方法包括细胞实验和动物实验。

细胞实验是通过孵育细胞株与不同浓度的杜仲多糖进行接触，观察细胞增殖、凋亡、迁移等指标的变化。

动物实验则是将杜仲多糖添加到动物饲料中，观察动物体内的生理指标变化，如免疫功能、抗氧化能力、抗炎能力等。

在细胞实验中，可以通过MTT法、DCFH-DA法、流式细胞术等进行测定。

MTT法是一种评价细胞增殖和细胞毒性的常用方法，根据细胞活力与还原剂MTT 的转化关系，通过检测产生的紫色产物的光密度来评估细胞的活力。

多糖的分离纯化及分析

多糖的分离纯化及分析一、多糖的提取方法（一）溶剂提取法1、水提法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法.多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水、醇等极性强的溶剂.用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70%左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置5h，多糖的质量分数和得率均较高.2、酸碱提法有些多糖适合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。

有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。

与酸提类似，碱提中碱的浓度也应得到有效控制，因为有些多糖在碱性较强时会水解。

3、超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术.（二）生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。

此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。

（三）超声提取法超声波是一种高频率的机械波，其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏，有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。

超声波提取与传统的提取方法相比，有提取效率高、时间短、耗能低等优点。

（四）微波提取微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波，微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部，由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来，传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。

二、多糖的分离纯化（一）多糖的分离采用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物，分级的方法可达到纯化的目的．可按溶解性不同进行分级、按分子大小和形状分级(如分级沉淀、超滤、分子筛、层析等)，也可按分子所带基团的性质分级．1、按溶解性不同分离（1）分步沉淀法分步沉淀法是根据不同多糖在不同浓度低级醇、酮中具有不同溶解度的性质，从小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮进行分步沉淀．（2）盐析法盐析法是根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同而将其分离的一种方法。

deae阴离子交换层析洗脱多糖

deae阴离子交换层析洗脱多糖
在deae阴离子交换层析洗脱多糖的过程中，我们需要明确几个关键点。

首先，DEAE（二烯丙基氨基乙基）是一种常用的阴离子交换树脂，具有较强的吸附能力和选择性。

其通过静电吸附来分离和纯化多糖。

在进行DEAE阴离子交换层析洗脱多糖的实验中，我们需要先将样品溶液加载到DEAE树脂柱上。

这一步骤可以使用缓冲溶液调节pH 值，以增强多糖与树脂的相互作用。

然后，我们通过缓冲溶液进行洗脱步骤，以去除非特异性吸附的杂质。

在洗脱过程中，我们可以使用不同浓度或pH值的盐溶液来改变DEAE树脂与多糖的相互作用，从而达到洗脱多糖的目的。

通过逐渐增加盐浓度或调整pH值，我们可以逐步提取出不同亲和性的多糖。

DEAE阴离子交换层析洗脱多糖的过程中，我们还需要注意一些关键因素。

首先，树脂的选择和操作条件的优化是成功进行阴离子交换层析的关键。

其次，控制样品的浓度和加载量也是非常重要的，以避免样品过浓或过稀而影响洗脱效果。

我们还需要根据样品的特性和要求，选择适当的缓冲溶液和洗脱条件。

要注意的是，洗脱过程中可能会发生多糖的降解或聚合，因此需要控制洗脱速度和温度。

总的来说，DEAE阴离子交换层析洗脱多糖是一种常用的纯化方法，可以根据多糖与树脂的相互作用来实现多糖的分离。

通过合理选择树脂、操作条件和洗脱方法，我们可以获得高纯度和高活性的多糖样品。

这一方法在生物医药领域的多糖研究中具有重要的应用价值。

deae-cellulose 柱在多糖分离纯化中的作用

deae-cellulose 柱在多糖分离纯化中的作用
deae-cellulose柱是一种常用于多糖分离纯化的色谱柱。

其主要成分是Deae-cellulose，这是一种阴离子交换树脂。

这种树脂具有特定的电荷特性，可以与带有负电荷的物质(如多糖)发生相互作用。

在多糖分离纯化中，deae-cellulose柱的作用主要体现在以下几个方面：
1. 电荷选择性:deae-cellulose柱的阴离子交换特性使其对带有负电荷的多糖有很高的亲和力。

因此，通过这种柱子，可以根据多糖的电荷特性进行有效的分离。

2. 纯化效果:由于deae-cellulose柱对带有负电荷的多糖有很高的亲和力，所以它可以有效地去除样品中的杂质，从而提高多糖的纯度。

3. 洗脱条件:使用deae-cellulose柱进行多糖分离时，需要根据多糖的电荷特性选择合适的洗脱条件。

例如，使用带有正电荷的盐溶液可以有效地将带有负电荷的多糖从柱子上洗脱下来。

4. 稳定性:deae-cellulose柱在特定的pH和离子强度下具有较好的稳定性，这使得它在多糖分离纯化中具有较高的可靠性。

总之，deae-cellulose柱在多糖分离纯化中起到了关键的作用，它通过其特定的电荷特性和稳定性，有效地实现了多糖的分离和纯化。

如果您还有其他关于这个主题的问题，欢迎继续提问。

化学反应中的生物大分子的分离纯化技术及应用研究

化学反应中的生物大分子的分离纯化技术及应用研究随着人类对生命科学的研究与深入，生物大分子在生命科学领域中发挥着越来越重要的作用。

然而，想要从复杂的生物体系中获取纯净的生物大分子是一项相当艰巨的任务。

在化学反应中，为了获取纯净的产物，我们可以通过一系列的化学反应、溶剂萃取、蒸馏、结晶等步骤来进行分离纯化。

类似地，生物大分子也需要专业的分离纯化技术来获得单一、纯净的样品。

本文将重点介绍当前常用的生物大分子分离纯化技术及其应用研究。

一、凝胶过滤层析法凝胶过滤层析法（Gel Filtration Chromatography）也称为分子筛层析法，是其中的一种分离技术，是利用分子筛过滤作用，通过大小分离生物大分子的方法。

也就是说，当一个混合物在溶液中进行层析时，它们将按大小顺序逐渐与凝胶内的微孔隔离出来。

而较大的生物大分子将无法通过凝胶微孔，而较小的物质则可随着溶液进一步深入凝胶内部，最终通过洗脱。

凝胶过滤层析法的主要优点是操作简单，具有较好的纯化效果。

它特别适用于大分子的纯化，例如酶、蛋白质、多肽、高分子以及其它具有不同分子量的物质混合物的分离。

凝胶过滤层析法被广泛应用于生物学、有机化学、生物制药等领域。

二、离子交换层析法离子交换层析法（Ion-exchange chromatography），是指利用固定正、负离子的功能基团，与可带电荷的分子间的相互作用力，实现对样品分离纯化的技术。

离子交换层析法的选择与离子交换柱的理化性质、样品离子性质和操作条件有关。

离子交换层析法的主要优点是它是一种高效、简便、快速并且基本上不损害生物大分子的分离纯化方法。

在生物大分子的纯化过程中，如果杂质物质与目标物质都带有电荷，离子交换层析是非常好的选择。

离子交换层析可以用于酸性、碱性、中等等多种环境下的分离纯化。

三、膜过滤分离技术膜过滤技术（Membrane Filtration）是指利用膜的结构及其物理化学理性，在分离过程中分离溶液体系。

离子交换层析技术在多糖分离纯化中的应用 (1)

TECHNOLOGY TREND离子交换层析（Ion-exchange chromatography ，简写IEC ）是发展最早的层析技术之一。

目前，离子交换层析已成为蛋白质分离纯化中最常用的手段，统计显示，在蛋白质的纯化方案中，使用到离子交换层析的占75％，其次是使用亲和层析和凝胶过滤层析。

但同时离子交换层析在除蛋白质以外物质（如多糖、核酸）的分离纯化中也得到了一定的应用。

由于壳聚糖脱乙酰度和相对分子质量是与壳聚糖应用相关的重要参数，在溶液中壳聚糖分子上带有正电荷的量与壳聚糖的脱乙酰度有关，而离子交换层析色谱是根据被分离分子的电荷差异来进行分离的，为此，通过研究离子交换层析色谱分离壳聚糖的方法，以期分离出分子链上含有不同电荷量的壳聚糖，即分离出不同脱乙酰度的壳聚糖组分。

离子交换色谱柱CM-sepharose-CL-6B 对壳聚糖分离纯化条件选择：1）不同离子交换柱柱长分离壳聚糖采用离子强度线性梯度，即0.05mol/L 、pH5.3乙酸-乙酸钠缓冲液，含NaCl 浓度0.2mol/L 。

分别用直径2.6cm 、高50cm ，直径2.6cm 、高30cm 的CM-sepharose-CL-6B 离子交换柱对脱乙酰度80%、质量浓度为2.5mg/mL 的壳聚糖溶液进行洗脱，起始缓冲液为0.05mol/L 、pH5.3乙酸-乙酸钠缓冲液。

线性梯度洗脱时，不含NaCl 和含2mol/LNaCl 的0.05mol/L 、pH5.3乙酸-乙酸钠缓冲液各200mL 。

不同柱高洗脱时体积流量：直径2.6cm 、高50cm 柱体积流量为1mL/min ；直径2.6cm 、高30cm 。

柱体积流量为2mL/min 。

直径2.6cm 、高50cm 柱上样液体积为100mL ；直径2.6cm 、高30cm 柱上样液体积为50mL 。

2）不同脱乙酰度壳聚糖的分离用直径2.6cm 、高30cm CM-sepharose-CL-6B 离子交换柱对质量浓度2.5mg/mL ，脱乙酰度分别为80%、90%的壳聚糖进行分离。

多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定

多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定以多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定为题，本文将介绍多糖的分离纯化方法、纯度鉴别及分子量测定的原理和常用技术。

一、多糖的分离纯化方法多糖是指由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的聚合物，常见的多糖有淀粉、纤维素、壳聚糖等。

多糖的分离纯化是指将多糖与其他杂质分离开来，得到纯净的多糖样品。

常用的多糖分离纯化方法包括溶剂沉淀法、离子交换色谱法和凝胶过滤法等。

溶剂沉淀法是通过在特定溶剂条件下，使多糖在溶液中沉淀，然后通过离心等方式分离沉淀物和上清液。

离子交换色谱法是利用多糖与离子交换树脂之间的电荷相互作用，通过调节溶液pH 值和离子强度等条件，实现多糖与其他组分的分离。

凝胶过滤法则是利用多糖分子的大小和形状差异，在凝胶柱中进行分离，大分子多糖难以进入凝胶颗粒内部，从而被留在柱上，小分子杂质则能够顺利通过。

二、多糖纯度的鉴别方法多糖的纯度鉴别是指确定多糖样品中多糖的含量以及杂质的种类和含量。

常用的多糖纯度鉴别方法包括光谱法、色谱法和凝胶电泳法等。

光谱法是通过多糖在特定波长下吸光度的变化来确定多糖的含量，如紫外吸收光谱法和红外光谱法。

色谱法是利用多糖与其他组分在色谱柱中的分离行为，通过检测样品中多糖峰的峰面积或峰高来确定多糖的含量。

凝胶电泳法是利用多糖在电场中的迁移行为，通过在凝胶上观察多糖的迁移距离和带电量来确定多糖的含量和电荷性质。

三、多糖分子量测定方法多糖的分子量是指多糖分子中单糖个数的总和，是评价多糖结构和性质的重要指标。

常用的多糖分子量测定方法包括凝胶渗透色谱法、粘度法和质谱法等。

凝胶渗透色谱法是通过多糖在凝胶柱中的分离行为，利用不同分子量的多糖在凝胶柱上的停留时间来确定多糖的分子量。

粘度法是通过测量多糖溶液的粘度和浓度，利用Mark-Houwink公式计算多糖的分子量。

质谱法是通过测量多糖分子在质谱仪中的离子质量来确定多糖的分子量。

多糖的分离纯化、纯度鉴别和分子量测定是研究多糖性质和功能的重要步骤。

deae-52在中药多糖分离纯化中的应用

化学工程师Chemical EngineerSum290No.112019年第11期DOI：10.16247/ki.23-l171/tq.2O191143综狀DEAE-52在中药述多糖分离纯化中的应用*野津，张文森,王知斌，杨春娟，匡海学(黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室;黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室，黑龙江哈尔滨150040)摘要:随着科学技术的迅猛发展，越来越多的新材料和新技术应用到多糖的分离纯化中，离子交换层析在中药多糖分离纯化中应用广泛,DEAE-52作为典型的离子交换剂，具有分离效率高、操作方便、应用范围广等优点，本文就DEAE-52在中药多糖分离纯化方面的应用进行综述，为相关的研究提供参考。

关键词:DEAE-52；多糖;分离纯化中图分类号:R284.2文献标识码:AApplication of DEAE-52in the separation and purification of polysaccharidesfrom Traditional Chinese Medicine*YE Jin,ZHANG Wen-seng,WANG Zhi-bin,YANG Chun-juan,KUANG Hai-xue (Key Laboratory of Basic and Applied Research in North Medicine,Ministry of Education,Heilongjiang Key Laboratory of Drug Efficacy Study Material of Traditional Chinese Medicine and Natural Product,Heilongjiang University of Chinese Medicine,Harbin150040,China)Abstract：W让h the rapid development of science and technology,more and more new materials and new technology are applied to the separation and purification of polysaccharides.Ion exchange chromatography has been widely used for separating Traditional Chinese Medicine polysaccharides.DEAE-52is a typical ion exchanger which has the advantages of high efficiency,wide application and easy operation.This paper reviews the application of DEAE-52in the separation and purification of Traditional Chinese Medicine polysaccharides which hopes to provide reference for related research.Key words:DEAE-52;polysaccharides;separation-purification多糖，天然大分子化合物，由10个以上的单糖通过糖昔键链接而成的多聚物，广泛存在于多种生物体中，主要分布在植物、动物细胞膜和微生物细胞壁中⑴,是维持生命活动的物质基础之一。

离子交换层析法在多肽分离纯化过程中的应用

离子交换层析法在多肽分离纯化过程中的应用离子交换层析法是一种常用的分离纯化技术，广泛应用于多肽分析和制备工作中。

本文将介绍离子交换层析法在多肽分离纯化过程中的应用，并探讨其原理、优势以及相应的实验设计。

一、离子交换层析法概述离子交换层析法是基于样品中带电离子与固定相上的离子交换基团之间的静电相互作用来完成分离的一种技术。

它利用固定在层析固相上的离子交换基团与溶液中带电离子之间的吸附和解吸作用，将样品中的不同离子种类分离开来。

离子交换层析法的原理基于离子的荷电性质和在不同条件下其与固定相之间的相互作用。

离子交换基团通常以有机阴离子或阳离子形式存在于层析固相上。

在具有相同荷电性质的情况下，强吸附离子优先与固定相结合，较弱吸附离子则以解吸的方式从固定相上解离。

二、离子交换层析法的优势离子交换层析法在多肽分离纯化过程中具有以下几个优势：1. 高选择性：离子交换层析材料可以通过调节溶液的pH值和离子强度来实现对多肽的选择性分离。

通过调整这些条件，可以改变多肽与固定相之间的静电相互作用，从而实现对目标多肽的高效分离。

2. 较大容量：离子交换层析法具有较大的样品处理量和负荷容量。

多肽样品可以批量进样，从而提高分析和制备的效率。

3. 操作简便：离子交换层析法操作相对简单，不需要复杂的仪器设备。

只需将固定相装填到层析柱中，通入样品和洗脱缓冲液，即可完成分离纯化过程。

4. 分离效果好：离子交换层析法可以实现对多肽的高效纯化，去除杂质和不同极性的肽段，提供高纯度的目标多肽。

三、离子交换层析法在多肽分离纯化中的应用离子交换层析法在多肽分离纯化中的应用涉及到样品预处理、层析条件优化和纯化效果评估等方面。

1. 样品预处理：多肽样品通常包含有机溶剂、无关组分和杂质等。

在离子交换层析之前，需要将样品进行适当的预处理，去除杂质和不相关的成分。

预处理方法可以包括溶剂调整、蛋白酶降解、酸碱处理等。

2. 层析条件优化：离子交换层析的分离效果和纯化效率与层析条件密切相关。

昆布多糖提取纯化工艺及应用

昆布多糖提取纯化工艺及应用昆布多糖是一种具有多种生物活性的天然多糖，其在医药、保健品、食品等领域的应用广泛。

本文将介绍昆布多糖的提取纯化工艺及其应用。

一、昆布多糖的提取昆布多糖的提取通常采用水提法或碱提法。

水提法是利用昆布多糖的可溶性，以水为溶剂，通过加热搅拌或超声波辅助提取昆布多糖。

碱提法则是利用碱处理昆布，使昆布中的蛋白质和酚类物质变性，从而释放出昆布多糖。

二、昆布多糖的纯化提取得到的昆布多糖往往含有杂蛋白和色素等杂质，因此需要进行纯化。

常用的纯化方法包括 Sevage 法、DEAE 纤维素柱层析法和凝胶柱层析法等。

1. Sevage 法Sevage 法是一种常用的脱蛋白方法，其原理是利用蛋白质和脂溶性物质在有机溶剂中溶解度的差异，将蛋白质和脂溶性物质分离。

具体操作方法是加入Sevage 试剂（三氯甲烷：正丁醇=4：1），在搅拌下生成蛋白质沉淀，然后离心分离，得到粗提的昆布多糖。

2. DEAE 纤维素柱层析法DEAE 纤维素是一种阴离子交换剂，可用于分离和纯化多糖。

将 DEAE 纤维素装入色谱柱中，用一定浓度的 NaCl 溶液洗脱，通过逐步增加 NaCl 浓度的方法，将不同极性的组分分离。

通过 DEAE 纤维素柱层析法，可以将昆布多糖分为不同的组分，进一步提高纯度。

3. 凝胶柱层析法凝胶柱层析法是一种根据分子大小进行分离的方法。

将昆布多糖溶液通过凝胶柱，大分子物质不能进入凝胶颗粒，而小分子物质可以进入凝胶颗粒并被洗脱出来。

通过凝胶柱层析法，可以去除昆布多糖中的低分子量杂质和小分子量杂质。

三、昆布多糖的应用1. 药品原料药和辅料昆布多糖具有显著的抗肿瘤、抗凝血、抗氧化、抗炎、抗病毒等作用，因此被广泛用作药品原料药和辅料。

例如，可以将昆布多糖与其他药物成分结合，制备成抗肿瘤药物、抗凝血药物、抗炎药物等。

2. 保健品添加剂昆布多糖具有多种生物活性，对人体健康有很好的保健作用。

因此，昆布多糖也被用作保健品添加剂，如增强免疫力、抗衰老、降血糖等保健品中都含有昆布多糖成分。