药物LD50的测定ppt课件
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药物LD50的测定ppt课件
20
21
新斯的明
【药理作用】可逆性抑制Ach E，使Ach蓄积而产生 Ｍ、Ｎ样作用。
１、对骨骼肌的兴奋作用最强。 ２、对胃肠道及膀胱平滑肌有较强的兴奋作用。 ３、对心血管、腺体、眼及支气管平滑肌作用较弱。
【临床应用】 １、重症肌无力 ２、腹气胀和尿潴留 ３、阵发性室上性心动过速 ４、非去极化型肌松药和阿托品过量中毒
法、加权机率单位法（Bliss氏法）、累计 法、序贯法及寇氏法等。 寇氏法较常用，计算简便，结果较准确。
5
LD50测定方法
寇氏法
孙瑞元改进的Kaerber(点斜法)
设计条件：
各组实验动物数相等 各组剂量呈等比数列 各组动物的反应率大致符合常态分布 不要求死亡率必须包括0%与100%
6
LD50测定方法
熟悉改良寇氏(Karber)法测定LD50。 了解急性毒性实验的相关内容及新药安
全性评价的内容。
3
实验原理
LD50是药物、毒物等毒性作用强度的一个标 志，是指在一定条件下，使半数动物出现死 亡的剂量，是描述药物安全性的指标之一。
4
实验原理
LD50越大，其毒性越小。 测定LD50的方法有很多，如目测机率单位
Σpi：各组反应率（即有效率或死亡率）的总和
Pi：各组动物的死亡率（以小数表示）
18
95％可信限：
log LD50 1.96s log LD50 LD50 4.5s log LD50 LD50
pi(1 pi)
s log lD50 d
n 1
S ㏒ LD50 为㏒ LD 50 的标准误
组距（d）＝
logD
m－logD n－1
n
本次实验n=7, r=0.76
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新斯的明
【药理作用】可逆性抑制Ach E，使Ach蓄积而产生 Ｍ、Ｎ样作用。
１、对骨骼肌的兴奋作用最强。 ２、对胃肠道及膀胱平滑肌有较强的兴奋作用。 ３、对心血管、腺体、眼及支气管平滑肌作用较弱。
【临床应用】 １、重症肌无力 ２、腹气胀和尿潴留 ３、阵发性室上性心动过速 ４、非去极化型肌松药和阿托品过量中毒
法、加权机率单位法（Bliss氏法）、累计 法、序贯法及寇氏法等。 寇氏法较常用，计算简便，结果较准确。
5
LD50测定方法
寇氏法
孙瑞元改进的Kaerber(点斜法)
设计条件：
各组实验动物数相等 各组剂量呈等比数列 各组动物的反应率大致符合常态分布 不要求死亡率必须包括0%与100%
6
LD50测定方法
熟悉改良寇氏(Karber)法测定LD50。 了解急性毒性实验的相关内容及新药安
全性评价的内容。
3
实验原理
LD50是药物、毒物等毒性作用强度的一个标 志，是指在一定条件下，使半数动物出现死 亡的剂量，是描述药物安全性的指标之一。
4
实验原理
LD50越大，其毒性越小。 测定LD50的方法有很多，如目测机率单位
Σpi：各组反应率（即有效率或死亡率）的总和
Pi：各组动物的死亡率（以小数表示）
18
95％可信限：
log LD50 1.96s log LD50 LD50 4.5s log LD50 LD50
pi(1 pi)
s log lD50 d
n 1
S ㏒ LD50 为㏒ LD 50 的标准误
组距（d）＝
logD
m－logD n－1
n
本次实验n=7, r=0.76
药物半数致死量(LD50)的测定
2
0.25
LD50= lg-1 [Xm-i(Σp-0.5)] =lg-1[2.3522-0.0457(3.375-0.5)]
序贯法
取10只小鼠编号、称重 从最大剂量开始给药(尼可刹米0.1ml/10g) ，
观察10min. 若死亡，则下一只小白鼠降低一级 剂量，若没死亡，则用高一级剂量，依次类推， 直至10只小白鼠全死. 记录结果 计算X·R、∑（X·R） 按公式计算尼可刹米的半数致死量
LD50(median lethal dose)：
药物引起半数实验动物死亡的剂量。
治疗指数(therapeutic index TI)：
LD50和ED50的比值，药物安全性指标。
安全范围(margin of safety)：
LD5/ED95的值或 LD5 ~ ED95之间的距离。
LD50 、ED50的意义
-⑧
0 1 1 2.535
LD50=lg-1( C/n ) = lg-1(30.675/11)
= (mg/kg)
注意事项
要对实验动物进行随机化分组 各组药物浓度不能搞错，给药剂量要准
确 注意选择正确的给药部位（腹腔注射），
进针的深浅要一致
实验后处理
列表显示实验数据 统计全班实验结果，计算出普鲁卡因和
实验设计书格式
题目（居中） 设计者（居中） 专业、班别（居中） 指导老师（居中） 1．实验目的 2．立题依据（包括参考文献） 3．实验方案
(1)实验材料 (2)实验分组 (3)观察指标 (4)实验方法与步骤 4．创新点 5．实验结果预测
实验设计书评分标准
1.设计内容为学生原创，有创新性 2.设计依据充分，阐述相关理论知
列表统计P值 按公式计算普鲁卡因的半数致死量 LD50＝lg-1 [Xm-i(Σp-0.5)]
药理学-半数致死量(LD50)测定
2020/7/28
半数致死量(LD50)
特点：1、是药物的剂量反应曲线上最敏感的 一点。
死亡率
50%
剂量
LD50
2、 测量简单，准确性高，误差小，易重复。
2020/7/28
实验目的
测定药物的LD50 了解常用的测定和计算方法
2020/7/28
实验方法
改良寇氏法 可直接用实验动物的死亡率进行计算，方法简 单，计算简便。
2 一组小鼠编号1-25，另一组小鼠编号26-50。 标签上排写编号，下排写体重，体重取整数。
3 根据Excell软件取随机数字,排序随机数字。 4 按随机数字取小鼠于另一鼠笼20/7/28
实验结果
解磷定LD50的实验结果
组别
1# 2# 3# 4# 5#
小白鼠 浓度
(只) （mg/ml）
10
1.5％
10
1.2％
10
0.96％
10
0.77％
10
0.61％
剂量 (mg/kg)
300 240 192 154 123
对数剂量
2.48 2.38 2.28 2.18 2.08
动物死亡数 死亡率
(只)
(％)
注：动物死亡数只统计给药后2小时内的死亡数
2020/7/28
3
1.5％
300
3
2#
3
0.75％
150
1
3#
3
0.375％
75
0
4#
3
0.188％ 35.5
0
2020/7/28
实验步骤
小鼠50只，称重，随即分为5组
1＃组10只
腹腔注射 1.5%的解 磷定溶液
半数致死量(LD50)
特点：1、是药物的剂量反应曲线上最敏感的 一点。
死亡率
50%
剂量
LD50
2、 测量简单，准确性高，误差小，易重复。
2020/7/28
实验目的
测定药物的LD50 了解常用的测定和计算方法
2020/7/28
实验方法
改良寇氏法 可直接用实验动物的死亡率进行计算，方法简 单，计算简便。
2 一组小鼠编号1-25，另一组小鼠编号26-50。 标签上排写编号，下排写体重，体重取整数。
3 根据Excell软件取随机数字,排序随机数字。 4 按随机数字取小鼠于另一鼠笼20/7/28
实验结果
解磷定LD50的实验结果
组别
1# 2# 3# 4# 5#
小白鼠 浓度
(只) （mg/ml）
10
1.5％
10
1.2％
10
0.96％
10
0.77％
10
0.61％
剂量 (mg/kg)
300 240 192 154 123
对数剂量
2.48 2.38 2.28 2.18 2.08
动物死亡数 死亡率
(只)
(％)
注：动物死亡数只统计给药后2小时内的死亡数
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3
1.5％
300
3
2#
3
0.75％
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3#
3
0.375％
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0
4#
3
0.188％ 35.5
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2020/7/28
实验步骤
小鼠50只，称重，随即分为5组
1＃组10只
腹腔注射 1.5%的解 磷定溶液
急性毒性试验PPT课件
编辑版pppt
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(二)安全性评价
(1)根据急性毒性试验结果判断供试药物毒性的强弱、类型。国内尚无统—规 定。
(2)急性毒性试验结果对临床研究有指导意义，可以为临床研究时探索安全有 效剂量避免出现急性不良反应提供依据。
但是，鉴于人体与各种动物对各类化合物的吸收、分布、代谢、排泄以及各 类型毒性反应的差异，尚无规律可循，现有化学药品统计数据表明，在进行临 床研究时，仍应根据实验结果参考文献资料报道进行由低到高的安全治疗剂量 的探索。
编辑版pppt
10
三、近似致死量试验
国外近年来有采用少量动物进行近似致死量测定的方法。其中有的类似 LD50的预试验或霍恩氏法。每组用3—4只动物，设多组，详细观察并汜 录动物毒性反应井进行血液学，血液生化以及病理组织学观察。有的采用 剂量递增法即—只动物一个剂量以几何级数递增，根据前个剂量的反应， 决定下—个剂量。或采用剂量累积法，同一批动物间隔一定时间、剂量由 小到大给药，观察毒性反应，同时结合血药浓度的测定，确定动物的急性 毒性反应、靶器官、中毒或致死剂量、毒性反应时的血药浓度。剂量递增 法类似于LD50测定的阶梯法(或称序贯法、上下法)，适用小动物而且毒性 反应出现快的试验，10—20只动物即可测定。剂量累积法则适用大动物， 利用大约6只合格动物即可进行急性毒性试验的全面观察。另外，国外还 有采用固定剂量给药观察近似致死剂量，以决定药物毒性大小者。
编辑版pppt
11
四、急毒试验结果评价 (一)可靠性评价
为保证急毒结果，实验条件应符合GLP的要求，供试品质量稳定， 动物合格，实验方案，实验原始记录，标准操作规程，总结报告应 符合要求。总结报告中应包括摘要、供试品、试验动物，试验环境、 给药方法、观察方法、毒性反应症状、体重变化、病理组织学变化、 雄性反应和死亡出现的时间、LD50和LD5及其可信限的计算方法、 结果讨论等。根据试验结果对急性毒性进行全面评价。
药物半数致死量(有效量)测定_图文
实验设计三大原则：随机、重复、对照
均衡随机法分组：先按易控制的因素（性别、年龄 、体重等）均衡分档。 然后在每一档随机取出等量的动 物分配到各组，使难控制的因素（活泼程度、饥饱、疲 劳程度等）得到随机安排。
作业：
实验测定的戊巴比妥钠ED50以及上 述例子LD50有关数据求出：
治疗指数 TI ＝ LD50/ED50 ＝ 安全指数 SI ＝ LD5/ED95 ＝
40
LD50 /ED50
20
0
ED50
LD50
质反应的量效曲线
剂量
Fig.2-3 The frequency curve and cumulative frequency curve of a drug action in a quantal-effect experiment.
质反应量效关系曲线
分工合作，统一计算
分组及给药
取小鼠50只（ 18～22克 ）， 雌雄各半， 不同性别动物按体重随机分成五组。每组 各动物称重，标记后分别按设计的容积和 浓度腹腔注射给药。ＬＤ50（或ＥＤ50 ）测 定时是否要设对照组，应视药物性质等情 况而定。
必须注意：正式实验如单人操作时宜从浓 度偏高的剂量组开始给药！起效快和对后 续实验有重要提示作用。思考！
正式实验：在此剂量范围内安排５～６个对数剂 量实验组，便于用对数剂量对死亡数百分率作图 和计算数据。
本实验备有：50, 40 ,32, 25.6 ,20.5,16.4 五个剂量 组(组间公比=0.8)；昆明小鼠120只雌雄各半。
每个同学做4～5个连续的浓度，每浓度一只小鼠 。
实施：规范操作，观察计时；
【实验要求】
1、掌握小白鼠半数致死量或半数有效量 测定的基本方法。
均衡随机法分组：先按易控制的因素（性别、年龄 、体重等）均衡分档。 然后在每一档随机取出等量的动 物分配到各组，使难控制的因素（活泼程度、饥饱、疲 劳程度等）得到随机安排。
作业：
实验测定的戊巴比妥钠ED50以及上 述例子LD50有关数据求出：
治疗指数 TI ＝ LD50/ED50 ＝ 安全指数 SI ＝ LD5/ED95 ＝
40
LD50 /ED50
20
0
ED50
LD50
质反应的量效曲线
剂量
Fig.2-3 The frequency curve and cumulative frequency curve of a drug action in a quantal-effect experiment.
质反应量效关系曲线
分工合作，统一计算
分组及给药
取小鼠50只（ 18～22克 ）， 雌雄各半， 不同性别动物按体重随机分成五组。每组 各动物称重，标记后分别按设计的容积和 浓度腹腔注射给药。ＬＤ50（或ＥＤ50 ）测 定时是否要设对照组，应视药物性质等情 况而定。
必须注意：正式实验如单人操作时宜从浓 度偏高的剂量组开始给药！起效快和对后 续实验有重要提示作用。思考！
正式实验：在此剂量范围内安排５～６个对数剂 量实验组，便于用对数剂量对死亡数百分率作图 和计算数据。
本实验备有：50, 40 ,32, 25.6 ,20.5,16.4 五个剂量 组(组间公比=0.8)；昆明小鼠120只雌雄各半。
每个同学做4～5个连续的浓度，每浓度一只小鼠 。
实施：规范操作，观察计时；
【实验要求】
1、掌握小白鼠半数致死量或半数有效量 测定的基本方法。
盐酸普鲁卡因半数致死量LD的测定ppt课件
❖ 实验药品：盐酸普鲁卡因 （Procaine hydrochloride）
精品课件
7
【实验步骤】
❖ 预备实验
1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小剂 量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，Dn）。
2．确定组数、计算各组剂量：
❖ 组数（n）：5组 ❖ 按公式求公比r:
剂量
动物数
（ml/10g） （只）
死亡数 （只）
死亡率 （%）
1
0.12
10
2
0.11
10
3
0.10
10
4
0.091
10
5
0.082
精品10课件
10
小鼠的腹腔注射方法
精品课件
11
抓好后将小鼠保持头低位
精品课件
12
精品课件
13
4.实验观察30min后进行数据统计
5.计算LD50及其95%可信限 采用Bliss法程序计算各参数步骤：
预试中Dm=344mg/kg， Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的平均体重为 20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg
C母
D 等容注射量
C1=344mg/kg / 10ml/kg=34.4mg/ml
每组药液量=每组动物总重×用药量=200g×0.1ml/10g=2ml
2.为何选择测定LD50作为衡量药物 毒性大小的指标?
精品课件
16
此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！
精品课件
17
测定ld50意义1是衡量药物毒性大小的指标评价药物优劣的重要参数2评价药物安全性治疗指数tild50ed503申报新药过程中必须提供的药理学资料盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药当被大量吸收后会产生全身性毒性反应主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑制初期表现为眩晕烦躁不安肌肉震颤进而发展为神经错乱惊厥昏迷呼吸抑制等
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7
【实验步骤】
❖ 预备实验
1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小剂 量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，Dn）。
2．确定组数、计算各组剂量：
❖ 组数（n）：5组 ❖ 按公式求公比r:
剂量
动物数
（ml/10g） （只）
死亡数 （只）
死亡率 （%）
1
0.12
10
2
0.11
10
3
0.10
10
4
0.091
10
5
0.082
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小鼠的腹腔注射方法
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11
抓好后将小鼠保持头低位
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13
4.实验观察30min后进行数据统计
5.计算LD50及其95%可信限 采用Bliss法程序计算各参数步骤：
预试中Dm=344mg/kg， Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的平均体重为 20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg
C母
D 等容注射量
C1=344mg/kg / 10ml/kg=34.4mg/ml
每组药液量=每组动物总重×用药量=200g×0.1ml/10g=2ml
2.为何选择测定LD50作为衡量药物 毒性大小的指标?
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17
测定ld50意义1是衡量药物毒性大小的指标评价药物优劣的重要参数2评价药物安全性治疗指数tild50ed503申报新药过程中必须提供的药理学资料盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药当被大量吸收后会产生全身性毒性反应主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑制初期表现为眩晕烦躁不安肌肉震颤进而发展为神经错乱惊厥昏迷呼吸抑制等
LD50上课用
山东天福制药厂，0303251
实验步骤
★ 动物称重，统计各体重的动物数，放好，记录在黑板 保证一个体重的小鼠在一起
动物分组（6个组，每组10只小鼠，分组原则）
★
同学分10组 每组取回6只小鼠，标记
10组10个标记部位写在黑板上
★ 同学组织，同剂量组的10只小鼠同时进行腹腔注射
每完成一个剂量组，送至前方鼠笼
11 11 11 11 11 11
0 4 4 8 10 11
0 4/11 4/11 8/11 10/11 1
∑
结果
最大浓度组死亡率低于100%（但不得低于80%) 最小浓度组存活率低于100%（但不得低于80%)
计算LD50：
专用公式： LogLD50 = Xk-d(∑P-0.5) 校正公式 LogLD50 = Xk-d[∑P-(3-Pm-Pn)/4]
感性小；距离小，则说明敏感性大。一般要求 d 应小于
0.155 ，多在 0.08 ～ 0.1 之间。
④确定各组剂量： 由 X 由 X
i k
逐次加 d 逐次减 d
得出各组剂量的对数值，再分别查反对数，
即得出各组剂量（呈等比级数排列）。
（ 3 ）配制等比药液，并使每只动物在给药
容量上相等（如 0.5ml/20g ）。
3. 校正公式：LogLD50 = Xk-d[∑P-(3-Pm-Pn)/4]
原 理
组别 剂 量 (mg/kg) 对数剂量 (Log) 动物数 （ n）
LogLD50 = Xk-d(∑P-0.5)
死亡数 (r) 死亡率 P(r/n) P(1-P)
1 2 3
0.2105 0.2770 0.3645
-0.6767 -0.5575 -0.4383
实验步骤
★ 动物称重，统计各体重的动物数，放好，记录在黑板 保证一个体重的小鼠在一起
动物分组（6个组，每组10只小鼠，分组原则）
★
同学分10组 每组取回6只小鼠，标记
10组10个标记部位写在黑板上
★ 同学组织，同剂量组的10只小鼠同时进行腹腔注射
每完成一个剂量组，送至前方鼠笼
11 11 11 11 11 11
0 4 4 8 10 11
0 4/11 4/11 8/11 10/11 1
∑
结果
最大浓度组死亡率低于100%（但不得低于80%) 最小浓度组存活率低于100%（但不得低于80%)
计算LD50：
专用公式： LogLD50 = Xk-d(∑P-0.5) 校正公式 LogLD50 = Xk-d[∑P-(3-Pm-Pn)/4]
感性小；距离小，则说明敏感性大。一般要求 d 应小于
0.155 ，多在 0.08 ～ 0.1 之间。
④确定各组剂量： 由 X 由 X
i k
逐次加 d 逐次减 d
得出各组剂量的对数值，再分别查反对数，
即得出各组剂量（呈等比级数排列）。
（ 3 ）配制等比药液，并使每只动物在给药
容量上相等（如 0.5ml/20g ）。
3. 校正公式：LogLD50 = Xk-d[∑P-(3-Pm-Pn)/4]
原 理
组别 剂 量 (mg/kg) 对数剂量 (Log) 动物数 （ n）
LogLD50 = Xk-d(∑P-0.5)
死亡数 (r) 死亡率 P(r/n) P(1-P)
1 2 3
0.2105 0.2770 0.3645
-0.6767 -0.5575 -0.4383
LD50的测定
– 3． 单击“计算”按钮计算LD50等参数。
实验材料
实验动物： 昆明种小鼠，体重18-22g， 雌雄兼用，实验前禁食12h，不禁水。
实验器材： 1ml注射器、电子秤、鼠笼、电子计算器
实验药品：
新斯的明、苦味酸
小鼠的基本操作技术
小鼠的捉持
小鼠的基本操作技术
小鼠的编号：
单 色
采用不同颜料涂擦背毛的方法来标 记或用油性记号笔在尾部标记。 染色剂：3－5％苦味酸溶液、
给药后观察记录1小时内小鼠死亡数 （呼吸停止），并记录中毒症状；
全班作为一个整体实验资料，分小组完成， 然后汇总结果。
3
组别 动物数 剂量D logD=X 死亡动 死亡率 pi
（只） （mg/k
物数 （%）
、
g）
（只）
结
1
10 0.2770 -0.5575
2
10 0.3645 -0.4383
果
logD
m－logD n－1
n
本次实验n=7, r=0.76
B、配液: 等比稀释法
并使每只动物在给药容量上相等
本次实验0.4ml/20g
2、正式实验
取小白鼠70只，雌雄各半，称重，随机 分成7组，每组10只，标记；
全班同学分成7组，每组10只小鼠，每 只小鼠i.p.给与一个剂量的新斯的明；
１、对骨骼肌的兴奋作用最强。 ２、对胃肠道及膀胱平滑肌有较强的兴奋作用。 ３、对心血管、腺体、眼及支气管平滑肌作用较弱。
【临床应用】 １、重症肌无力 ２、腹气胀和尿潴留 ３、阵发性室上性心动过速 ４、非去极化型肌松药和阿托品过量中毒
【不良反应】治疗量副作用较小。过量可产生恶心、 呕吐、腹痛、肌肉颤动和肌无力加重等，
实验材料
实验动物： 昆明种小鼠，体重18-22g， 雌雄兼用，实验前禁食12h，不禁水。
实验器材： 1ml注射器、电子秤、鼠笼、电子计算器
实验药品：
新斯的明、苦味酸
小鼠的基本操作技术
小鼠的捉持
小鼠的基本操作技术
小鼠的编号：
单 色
采用不同颜料涂擦背毛的方法来标 记或用油性记号笔在尾部标记。 染色剂：3－5％苦味酸溶液、
给药后观察记录1小时内小鼠死亡数 （呼吸停止），并记录中毒症状；
全班作为一个整体实验资料，分小组完成， 然后汇总结果。
3
组别 动物数 剂量D logD=X 死亡动 死亡率 pi
（只） （mg/k
物数 （%）
、
g）
（只）
结
1
10 0.2770 -0.5575
2
10 0.3645 -0.4383
果
logD
m－logD n－1
n
本次实验n=7, r=0.76
B、配液: 等比稀释法
并使每只动物在给药容量上相等
本次实验0.4ml/20g
2、正式实验
取小白鼠70只，雌雄各半，称重，随机 分成7组，每组10只，标记；
全班同学分成7组，每组10只小鼠，每 只小鼠i.p.给与一个剂量的新斯的明；
１、对骨骼肌的兴奋作用最强。 ２、对胃肠道及膀胱平滑肌有较强的兴奋作用。 ３、对心血管、腺体、眼及支气管平滑肌作用较弱。
【临床应用】 １、重症肌无力 ２、腹气胀和尿潴留 ３、阵发性室上性心动过速 ４、非去极化型肌松药和阿托品过量中毒
【不良反应】治疗量副作用较小。过量可产生恶心、 呕吐、腹痛、肌肉颤动和肌无力加重等，
最新药理实验LD50【PPT】PPT课件
第二节 产业集群的类型
第二节 产业集群的类型
（一）Shahid Yusuf的产业集群分类
第二节 产业集群的类型
(二)Lynn Mytdka和fuivia Farinelli 的产业集群分类
第二节 产业集群的类型
（三)Pete Knorringa和Jorg Meyer Stame的产业集群分类
15
小鼠的腹腔注射方法
16
抓好后将小鼠保持头低位
17
18
问题
1、为增加结果准确性需要注意哪 些问题？
19
问题
2、给药从哪组开始较好？为什么？
20
问题
3、实验时为何动物要按其体重分层随机分 配？
21
问题
4、LD50的测定为何常用动物死亡作为 判断药物毒性的指标？
22
问题
5、测定LD50为什么还要观察中毒症状及 时间过程？
[2] 黄世佐,明海霞等.单叶细辛的急性毒性观察及半数致死量的测定 〔J〕.中国中医药信息杂志, 2005 9 ,12 (9):23~24
[3] 李寅超, 赵宜红.辛夷挥发油半数致死量( LD50 ) 的测定〔J〕.Chin Hosp Pharm J , 2009 Nov, Vol 29, No. 21
第三节 产业集群的特征
二、集群的产业特征—产业地方专业化
集群产业的地方专业化表现在两个方面：一方面是 集群产业的经济规模占所在区域总体经济规模的较 大比重，它从微观角度显示地域专业化的程度；另 一方面是当地集群产业的经济规模或市场份额占全 国甚至世界此产业经济规模或市场份额的较大比重， 它通过描述集群产业在该地区的集中程度来从宏观 上显示经济的地域分工状况。
第四节 产业集群形成的因素及效应
临床药理学PPT药物半数有效量(ED50)和半数致死量(LD50)的测定课件
4只 6只
13只 12只 5只
A
B
C
D
E
1
2
3
4
5
5
1
2
3
4
4
5
1
2
3
3
4
5
1
2
2
3
4
5
1 # 10
方法和步骤
小鼠随机分成 5 组，每组10只、雌雄各半
戊巴比妥钠 (腹腔注射, 0.2ml/10g) 20、25、31、39、49 (mg/kg) 以翻正反射消失 (15S) 为入睡指标，记录给 药15分钟内各组睡眠鼠数。
引起半数动物死亡的剂量。LD50实际是以死亡为阳性药效反 应的ED50，是ED50的一个特例。是标志药物毒性大小的指标， LD50 越小，药物毒性越高。
求ED50和LD50的实验方法原则上相同。
#6
衡量药物安全性的指标
治疗指数（therapeutic index，TI）= LD50/ED50 安全系数（safety factor，SF） = LD5/ED95 可靠安全系数(certain safety factor, CSF) = LD1/ED99
作用。
# 19
实验动物和药品
• 动物：小鼠，体重20～25 g。 • 阿斯匹林：是一类解热镇痛抗炎药物，亦称为
非甾体类抗炎药。镇痛作用部位主要在外周， 也可通过脊髓和其他皮质下中枢起作用。 给药途径：灌胃（ig） • 0.6%醋酸溶液 给药途径：腹腔注射（ip）
# 20
取4只小鼠， 标记，称重， 均分为2组
实验方法
灌胃
2只 生理盐水（0.1ml/10g，ig） 20min后 2只 阿司匹林（0.1ml/10g，ig）
LD50测定.
讨论
测定LD50的意义？
讨论
药物毒性实验的目的在于暴露药物固有的毒 性，了解毒性的性质及程度，其损伤是否可逆， 能否防治，了解药物可能的作用部位和器官等。 为临床安全用药提供科学依据，也是研制新药的 基本要求。LD50为药物安全性指标之一，反映一 次大剂量给药后所产生的毒性反应和死亡情况。 LD50越大，药物毒性越小。
群养等均会影响实验结果，应维持一致。 3. 药物及给药途径：剂量成等比级数，组间剂量比值一般为0.65～0.85。
以静注、腹腔注射及灌胃为主，用药量以0.2ml/10g为宜。 4. 观察项
状及致死原因。随时取出已死动物进行尸检，并记录病变情况，若有 肉眼可见病变组织时，需进行该组织的病理形态学检查。 5. 报告LD50时注明实验动物的种属及品系、性别、体重范围、给药途径及 每个剂量组动物数等。还需注明受试药物的配制方法、给药剂量、各 组剂量间的比值、给药容积、观察时间及计算方法。除写出LD50外， 还需标出LD50的95%可信限等。
前言
急性毒性试验是指受试动物在一次大剂量给药 后所产生的毒性反应和死亡情况。药物毒性的 大小常用致死量（LD）表示。
致死量的测定常以半数致死量（ LD50 ） 为标准。LD50是指能够引起试验动物一半 死亡的剂量，LD50越大，药物毒性越小。
前言
LD50测定方法：
➢ 确定受试对象 ➢ 确定给药途径 ➢ 确定观察时间 ➢ 确定实验剂量 ➢ 药物试验 ➢ 用公式计算LD50 (Bliss几率单位法)
取1822g小白鼠50只按体重性别分层随机分为5组每组10只用苦味酸溶液标记按下述各剂量分别进行腹腔注射给药02ml10g给药后观察并记录死亡的动物数
节次：机能实验学（二 ）第1次课 内容：药物的LD50测定 学时：4h 主讲：
LD50测定
Injection volume (ml)
9
10
0.2ml/10g
16
注意事项
捉持小鼠动作坚决，防止咬伤。 小鼠称重及给药剂量力求准确。
18
Please hand in your reports before Friday to 3328. Put the mice to death and clean the cages The group on duty should clean the classroom
药物半数致死量（LD50）的测定 P164
药理教研室
1
实验目的
掌握LD50测定的意义 掌握LD50测定的方法、步骤和计算方法
2
急性毒性试验
指机体一次或短时间内（24 h）多次接 受大剂量某种药物后所产生的快速而剧 烈的中毒反应，包括死亡效应，是药物 安全性评价的第1道关卡。
3
What is LD50?
19Βιβλιοθήκη 82.剂量分组本次实验 剂量组已设置好，每组一个剂量 每组随机取10只小鼠给药
9
3.给药途径
新药报批要求2个，其中1个与临床给药 途径一致 本次实验：ip 0.2ml/10g
10
3. 皮下注射（ ip）
捉拿 给药 处死
11
4. 观察时间
正式实验：7~14d 本次实验：20min
50%
LD50
dose
5
LD50测定的意义
是药物筛选的第一步，药物安全性评价 的第1道关卡。 初步估计该药的安全性
TI=LD50/ED50 TI值越大，就越安全
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
DJY
2
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
剂量
累 积 死 亡 率 对数剂量
DJY
剂量 机 率 单 位 对数剂量
4
测定药物LD50的设计方法 1.预实验：摸索接近100%和0%死亡的剂量 2.按比例设5-7个剂量组（0.65~0.90） 3.随机分组，动物数不少于10只（小鼠） 4.实验条件均应相等
【注意事项】
1.动物应随机分组
2.各小组的动物标记要统一
3.剂量由小到大，注射量要准。
DJY
9
思考题
1.什么是LD50?
2.测定LD50的根据和意义何在?
DJY
10
【结果与统计】
对数剂量 动物数 死亡率 机率单位 死亡数 (mg/kg) (x) (n) (%) (y) 剂量 1 2 110.8 147.7 2.0445 2.1694
3 4
5
196.9 262.5
350.0
2.2942 2.4191
2.5441
y = a+bx
用直线回归法求 a, b, r
DJY 8
DJY
5
测定LD50的用药设计方法 同一浓度 不同浓度 不同剂量 同一剂量
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
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13
实验方法
1、预备实验 （1）摸索上下限：
即用少量动物粗摸索出使 全部动物死亡的最小剂量（LD100/Dm） 和 无一动物死亡的最大剂量（ LD0/Dn ）。
14
（2）等比溶液配制： A、确定组数、组间剂量比（r）：
一般地，设组数n＝5~8，r=0.7~0.85
r ( n1) Dn Dm
0.5%中性品红溶液
标 记 法
10
40
10
70
50
20 80
30 60 90
双色标记法
11
小鼠的基本操作技术
腹腔注射
1、针头刺入部位不宜太 接近上腹部或太深，以 免刺破内脏。针头与腹 腔的角度不宜太小，避 免刺入皮下。 2、使用针头不宜太粗， 避免药液注射后从注射 孔流出。
12
灌胃给药
1.用左手拇指和食指抓住鼠两 耳和头部皮肤，其他三指抓住 背部皮肤，将鼠抓持在手掌内， 固定好动物，头部和颈部保持 很平,右手取注射器进行灌胃。 2.灌时针头沿鼠口角通过食管 进入胃内。灌时如很通畅，则 表示针头已进入胃内；如动物 有呕吐动物或强烈挣扎，必须 拔出后按上述方法重新操作。 决不可进针不顺硬向里插。
（2）自身对照（给药前后）
23
均衡随机法分组：先按易控制的因素（性别、年 龄、体重等）均衡分档，然后在每一档随机取出 等量的动物分配到各组，使难控制的因素（活泼 程度、饥饱、疲劳程度等）得到随机安排。
给药后观察记录1小时内小鼠死亡数 （呼吸停止），并记录中毒症状；
全班作为一个整体实验资料，分小组完成， 然后汇总结果。
17
3
组别 动物数 剂量D logD=X 死亡动 死亡率 pi
（只） （mg/k
物数 （%）
、
g）
（只）
结
1
10 0.2770 -0.5575
2
10 0.3645 -0.4383
– 3． 单击“计算”按钮计算LD50等参数。
7
实验材料
实验动物： 昆明种小鼠，体重18-22g， 雌雄兼用，实验前禁食12h，不禁水。
实验器材： 1ml注射器、电子秤、鼠笼、电子计算器
实验药品：
新斯的明、苦味酸
8
小鼠的基本操作技术
小鼠的捉持
9
小鼠的基本操作技术
小鼠的编号：
单 色
采用不同颜料涂擦背毛的方法来标 记或用油性记号笔在尾部标记。 染色剂：3－5％苦味酸溶液、
结• 结论论: ：动物 给药途径
95％可信限
药品
LD50
19
注意事项
• 药物称量、配制及给药的准确程度是本实验成 功与否的关键；
• 观察期间室内应保持安静，减少对小鼠的刺激， 以免引起惊厥，加速死亡；
• 注意观察中毒症状及其发生时间、死亡时间； • 动物的种类、品系、体重范围、给药途径及观
察时间等因素均可影响LD50的结果，故在报告 中应加以说明；
组距（d）＝
logD
m－logD n－1
n
本次实验n=7, r=0.76
15
B、配液: 等比稀释法
并使每只动物在给药容量上相等
本次实验0.4ml/20g
16
2、正式实验
取小白鼠70只，雌雄各半，称重，随机 分成7组，每组10只，标记；
全班同学分成7组，每组10只小鼠，每 只小鼠i.p.给与一个剂量的新斯的明；
法、加权机率单位法（Bliss氏法）、累计 法、序贯法及寇氏法等。 寇氏法较常用，计算简便，结果较准确。
5
LD50测定方法
寇氏法
孙瑞元改进的Kaerber(点斜法)
设计条件：
各组实验动物数相等 各组剂量呈等比数列 各组动物的反应率大致符合常态分布 不要求死亡率必须包括0%与100%
6
LD50测定方法
• Bliss-Finney法：被认为是目前最精确的方法， 受到我国《新药临床前毒理学研究指导原则》 的推荐，计算相当复杂，应用计算机软件计 算则简单易行。
– 1． 启动微机，运行BL-410程序，进入其数据处 理选项，再进入半数致死量选项。
– 2． 一次输入各组剂量、动物总数、动物ห้องสมุดไป่ตู้亡数等 相关数据。
Σpi：各组反应率（即有效率或死亡率）的总和
Pi：各组动物的死亡率（以小数表示）
18
95％可信限：
log LD50 1.96s log LD50 LD50 4.5s log LD50 LD50
pi(1 pi)
s log lD50 d
n 1
S ㏒ LD50 为㏒ LD 50 的标准误
【不良反应】治疗量副作用较小。过量可产生恶心、 呕吐、腹痛、肌肉颤动和肌无力加重等， 22
分析与讨论
实验设计三大原则：重复、随机、对照 重复原则：用1个动物，做一次实验，不能就下结论，用第2 个动物，再做同样的实验，就是重复。科学实验要重复多次， 最大程度地减少偶然性。实验重复的次数越多，结论越正确、 越可靠。 随机原则：使每个实验对象在接受处理因素时，有相同的机 会，以减少主观因素所带来的偏性误差。 对照原则：研究必须有对照，实验室常用的对照有以下几种 形式。（1）组间对照（给药组与对照组）
药理学实验一
The determination of the median lethal dose(LD50) of drugs
1
主要内容
1
实验目的与原理
2
实验材料与方法
3
实验结果
4
实验讨论与分析
2
实验目的
学习和了解药物半数致死量（LD50）的 概念、测定方法、步骤及计算过程，理 解其药理学意义。
20
21
新斯的明
【药理作用】可逆性抑制Ach E，使Ach蓄积而产生 Ｍ、Ｎ样作用。
１、对骨骼肌的兴奋作用最强。 ２、对胃肠道及膀胱平滑肌有较强的兴奋作用。 ３、对心血管、腺体、眼及支气管平滑肌作用较弱。
【临床应用】 １、重症肌无力 ２、腹气胀和尿潴留 ３、阵发性室上性心动过速 ４、非去极化型肌松药和阿托品过量中毒
熟悉改良寇氏(Karber)法测定LD50。 了解急性毒性实验的相关内容及新药安
全性评价的内容。
3
实验原理
LD50是药物、毒物等毒性作用强度的一个标 志，是指在一定条件下，使半数动物出现死 亡的剂量，是描述药物安全性的指标之一。
4
实验原理
LD50越大，其毒性越小。 测定LD50的方法有很多，如目测机率单位
果
3
10 0.4796 -0.3191
记
4
10 0.6311 -0.1999
录
5
10 0.8303 -0.0807
及
6
10 1.0925 0.0384
计
7
10 1.4375 0.1576
算 log LD50 log Dm d ( pi 0.5)
Dm：最大剂量
d：相邻两剂量（D）对数之差（取绝对值）