第四章基因检测相关的实验
遗传学实验
遗传学实验引言遗传学是研究遗传原理和规律的科学,通过实验可以帮助我们更好地理解和应用遗传学的知识。
本文将介绍几个常见的遗传学实验,并详细讨论实验的步骤和结果。
实验一:显性遗传实验实验目的通过观察后代表现形状确定亲代基因表达方式。
实验步骤1.选取一对昆虫作为实验对象,确保它们具有不同的表现形状。
例如,可以选择黑色翅膀的昆虫A和白色翅膀的昆虫B。
2.让昆虫A和昆虫B进行交配。
3.观察并记录交配后代的表现形状。
实验结果根据观察结果,如果后代中出现了黑色翅膀的昆虫,说明黑色翅膀是昆虫A的显性基因;如果后代全是白色翅膀的昆虫,说明黑色翅膀是昆虫B的隐性基因。
实验二:基因突变实验实验目的检测和观察基因突变对个体表现的影响。
实验步骤1.选择一种含有某个基因的生物作为实验对象。
2.通过诱变剂处理生物体,诱发基因突变。
3.观察和记录突变个体与正常个体的差异。
实验结果根据观察结果,突变个体与正常个体在某些性状上会有明显的差异。
这些差异可以帮助我们了解基因的功能和作用。
实验三:基因型分析实验实验目的通过遗传标记和DNA分析来判断个体的基因型。
实验步骤1.提取个体的DNA样本。
2.选择适当的遗传标记进行PCR扩增。
3.将扩增产物进行电泳分析,观察带型。
4.与已知基因型的样本进行比对,判断个体的基因型。
实验结果通过电泳分析,我们可以得到个体的基因型。
这对于遗传研究和疾病诊断非常重要。
实验四:基因转导实验实验目的通过将外源基因导入细胞中,研究基因的功能和调控机制。
实验步骤1.选择目标细胞,如细菌或植物细胞。
2.构建外源基因的载体。
3.将载体导入目标细胞。
4.观察和记录导入细胞中外源基因的表达情况。
实验结果通过观察外源基因在目标细胞中的表达情况,我们可以了解基因的调控机制,并进一步应用于基因工程和农业生产。
结论遗传学实验是研究遗传学的重要手段,通过实验可以帮助我们更好地理解遗传原理和基因的功能。
本文介绍了显性遗传实验、基因突变实验、基因型分析实验和基因转导实验的步骤和结果。
生物基因的实验报告(3篇)
第1篇一、实验名称生物基因的提取与鉴定二、实验目的1. 学习生物基因提取的方法和原理。
2. 掌握DNA提取、纯化及检测的基本操作。
3. 鉴定提取的DNA是否为纯DNA。
三、实验原理生物基因提取的原理是利用细胞破碎、蛋白质变性、DNA与蛋白质分离等方法,从生物细胞中提取出DNA。
实验中常用的提取方法有酚-氯仿法、柱层析法等。
DNA鉴定通常采用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法。
四、实验材料1. 植物材料:新鲜植物叶片(如水稻、玉米等)。
2. 试剂:酚-氯仿、NaCl溶液、Tris-HCl缓冲液、琼脂糖、DNA标准品、DNA酶、DNA荧光染料等。
3. 仪器:离心机、电泳仪、紫外分光光度计、显微镜等。
五、实验方法1. 植物材料的处理:将新鲜植物叶片洗净,剪成小块,加入适量液氮研磨成粉末。
2. DNA提取:(1)将研磨好的植物粉末加入酚-氯仿溶液,充分振荡,静置分层。
(2)取上清液,加入等体积的NaCl溶液,混匀后加入等体积的冷无水乙醇,充分混匀。
(3)室温静置30分钟,离心取沉淀。
(4)将沉淀溶于适量Tris-HCl缓冲液,得到粗提DNA。
3. DNA纯化:(1)将粗提DNA加入柱层析柱,用适量Tris-HCl缓冲液洗脱。
(2)收集洗脱液,加入适量无水乙醇,静置沉淀。
(3)离心取沉淀,溶于适量Tris-HCl缓冲液,得到纯化DNA。
4. DNA鉴定:(1)取适量纯化DNA,用紫外分光光度计测定其浓度。
(2)将纯化DNA与DNA标准品在同一琼脂糖凝胶电泳槽中电泳,观察DNA条带。
(3)对电泳后的凝胶进行紫外透射,观察DNA条带。
六、实验结果1. DNA浓度:通过紫外分光光度计测定,纯化DNA浓度为20ng/μl。
2. 琼脂糖凝胶电泳:纯化DNA在琼脂糖凝胶电泳中呈现清晰的条带,与DNA标准品对照,条带大小相符。
七、实验讨论1. 在实验过程中,注意避免DNA污染,如使用无DNA酶的试剂、操作过程严格无菌等。
2. 提取的DNA浓度受植物材料、提取方法等因素影响,可通过优化实验条件提高DNA浓度。
高中生物教学备课遗传实验技术总结
高中生物教学备课遗传实验技术总结遗传实验是高中生物课程中不可或缺的一部分,通过实验可以帮助学生深入理解遗传原理和相关技术。
本文将总结一些常用的遗传实验技术,以供高中生物教师备课参考。
一、基因型鉴定实验基因型鉴定实验主要通过观察个体的表现型以确定其基因型。
以下是几种常用的基因型鉴定实验技术:1. 显性和隐性基因型鉴定实验此实验基于孟德尔遗传法则,通过观察表现型来确定个体是否为纯合子或杂合子。
教师可设置实验组和对照组,对不同基因型的个体进行交叉配对,并观察后代的表现型以推断其基因型。
2. 基因突变鉴定实验基因突变鉴定实验可帮助学生了解基因突变对个体表现的影响。
教师可以选择已知有突变基因的果蝇,与野生型果蝇进行配对,观察后代的表现型并分析突变基因的效应。
二、基因转化实验基因转化实验用于将外源基因导入宿主细胞中,以实现转基因效果。
以下是几种常见的基因转化实验技术:1. 细菌转化实验该实验常使用大肠杆菌作为宿主细胞,将外源DNA导入细菌中。
可通过热激冷冲法、电穿孔法或化学法等方式实现细菌转化,然后通过抗生素筛选培养成功转化的细菌克隆。
2. 植物基因转化实验植物基因转化实验常用农杆菌介导法,通过注入携带外源基因的农杆菌,使其感染植物细胞并将外源基因导入植物基因组。
教师可选择适合的植物材料进行实验,如烟草、油菜等。
三、PCR实验PCR(聚合酶链式反应)是一种在分子生物学中广泛应用的技术,其通过扩增DNA序列,帮助学生了解基因的复制和分析。
以下是几种常见的PCR实验技术:1. 基因定性PCR实验该实验可用于检测特定基因是否存在于样本中。
通过设计引物及合适的PCR反应体系,教师可以引导学生进行基因定性PCR,观察PCR产物的存在与否,进而判断样本是否含有特定基因。
2. 基因定量PCR实验该实验可用于估计样品中特定基因的拷贝数。
通过与标准曲线对比,教师可以帮助学生计算目标基因在样品中的相对拷贝数,从而进一步分析基因表达量的差异。
检测基因实验报告
一、实验目的1. 了解基因检测的基本原理和常用方法。
2. 掌握PCR技术、基因芯片技术和测序技术在基因检测中的应用。
3. 分析基因检测结果,了解基因检测在疾病诊断、个体化治疗和遗传病预防等方面的应用。
二、实验原理基因检测是通过对生物样本中的DNA或RNA进行检测,分析基因序列、基因表达水平、基因突变等信息,以揭示基因与疾病、表型之间的关系。
常用的基因检测方法包括PCR技术、基因芯片技术和测序技术。
1. PCR技术:PCR(聚合酶链反应)是一种体外扩增DNA的技术,通过高温变性、低温复性和中温延伸等步骤,实现DNA序列的扩增。
2. 基因芯片技术:基因芯片技术是将成千上万的基因序列或单核苷酸多态性(SNP)位点固定在微小的芯片上,通过杂交反应,检测样本中特定基因或SNP位点的表达水平。
3. 测序技术:测序技术是通过直接测定DNA或RNA序列,获取基因信息。
目前,常用的测序技术有Sanger测序、高通量测序(如Illumina测序)等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 样本:健康人全血、肿瘤组织等- 引物:针对待测基因的特异性引物- PCR反应体系:包括dNTPs、模板DNA、引物、DNA聚合酶等- 基因芯片:包含待测基因或SNP位点的基因芯片- 测序试剂:包括测序模板、测序引物、测序荧光染料等2. 实验仪器:- PCR仪:用于PCR扩增- 紫外分光光度计:用于检测DNA浓度- 热循环仪:用于基因芯片杂交- 测序仪:用于DNA测序四、实验方法1. PCR技术检测基因:(1)设计特异性引物,针对待测基因设计上下游引物。
(2)配制PCR反应体系,包括dNTPs、模板DNA、引物、DNA聚合酶等。
(3)进行PCR扩增,包括变性、复性和延伸等步骤。
(4)琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,观察扩增结果。
2. 基因芯片技术检测基因:(1)将待测基因或SNP位点固定在基因芯片上。
(2)将样本DNA与基因芯片杂交,形成杂交信号。
基因学相关实验报告
一、实验目的通过本次实验,掌握PCR(聚合酶链式反应)技术的基本原理和操作方法,学会设计引物、配置PCR反应体系、进行PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳检测和结果分析等步骤,从而验证目的基因的扩增成功。
二、实验原理PCR技术是一种体外扩增DNA的方法,其原理是模拟DNA在细胞内复制的酶促过程。
在PCR反应中,利用一对引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,通过高温变性、低温复性和中温延伸三个步骤,使目的DNA片段在体外得到大量扩增。
三、实验材料1. DNA模板:目的基因片段2. 引物:上游引物和下游引物3. dNTPs(脱氧核糖核苷酸)4. Taq DNA聚合酶5. PCR反应缓冲液6. 琼脂糖凝胶7. 电泳缓冲液8. 染料:溴化乙锭(EB)9. 电泳仪10. 紫外灯11. 显微镜12. 移液器、吸头等实验器材四、实验步骤1. 引物设计与合成:根据目的基因序列,设计上下游引物,并在实验室进行合成。
2. PCR反应体系配置:按照以下比例配置PCR反应体系(以50μl反应体系为例):- DNA模板:2μl- 上游引物:0.5μl- 下游引物:0.5μl- dNTPs:4μl- Taq DNA聚合酶:0.5μl- PCR反应缓冲液:25μl- 加ddH2O至50μl3. PCR扩增:将配置好的PCR反应体系置于PCR仪中进行扩增,反应程序如下:- 预变性:95℃,5分钟- 退火:根据引物设计温度,进行30个循环,每个循环包括:- 退火:根据引物设计温度,1分钟- 延伸:72℃,1分钟- 最终延伸:72℃,10分钟4. 琼脂糖凝胶电泳检测:将PCR产物与适量电泳缓冲液混合,点样于琼脂糖凝胶孔中,加入适量溴化乙锭,在电泳仪上进行电泳。
电泳完毕后,在紫外灯下观察条带。
5. 结果分析:根据电泳结果,判断目的基因是否成功扩增。
若目的基因扩增成功,则在琼脂糖凝胶上可见一条与预期大小相符的条带。
五、实验结果实验中成功扩增了目的基因,在琼脂糖凝胶上可见一条与预期大小相符的条带。
测定基因功能的实验报告
一、实验背景基因是生物体内最基本的遗传单位,是生物体性状表达的遗传基础。
近年来,随着分子生物学技术的快速发展,基因功能的研究成为生物科学领域的重要研究方向。
本研究旨在通过实验方法测定基因的功能,以期为基因编辑、基因治疗等生物技术提供理论依据。
二、实验目的1. 了解基因功能测定的一般原理和方法;2. 掌握基因功能测定的实验操作技能;3. 通过实验验证某一基因的功能。
三、实验材料1. 基因克隆载体:pET-28a(表达载体);2. 基因片段:目的基因片段;3. 限制性核酸内切酶:EcoRI、XhoI;4. DNA连接酶;5. 菌种:大肠杆菌DH5α;6. 试剂:LB培养基、氨苄西林、IPTG;7. 仪器:PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、紫外可见分光光度计等。
四、实验方法1. 基因克隆:将目的基因片段通过PCR扩增,然后用EcoRI和XhoI进行酶切,将酶切后的目的基因片段与pET-28a载体连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆。
2. 表达验证:挑取阳性克隆接种于LB培养基中,加入氨苄西林,37℃培养过夜。
次日,将菌液按1:100的比例接种于新鲜的LB培养基中,37℃培养至对数生长期。
加入IPTG诱导表达,分别在0、1、2、4、6小时取样,测定菌液的光密度(OD600)。
3. 功能验证:通过酶活实验、细胞实验等手段验证目的基因的功能。
五、实验结果1. 基因克隆:通过PCR扩增获得目的基因片段,酶切后与pET-28a载体连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选得到阳性克隆。
2. 表达验证:在诱导表达后,菌液OD600值随时间推移逐渐增加,表明目的基因得到了有效表达。
3. 功能验证:通过酶活实验和细胞实验,验证了目的基因的功能。
六、实验讨论1. 本实验成功克隆了目的基因,并实现了其在大肠杆菌中的表达,为后续功能验证奠定了基础。
2. 在基因克隆过程中,需要注意酶切、连接、转化等操作步骤,确保实验的准确性。
3. 在表达验证过程中,通过测定菌液OD600值,可以初步判断目的基因的表达水平。
基因的实验报告
一、实验目的1. 理解基因的概念、结构及功能;2. 掌握基因克隆、表达及功能分析的基本实验技术;3. 分析基因表达与调控的关系。
二、实验原理基因是生物体内具有遗传信息的DNA片段,是生物遗传的基本单位。
基因通过转录和翻译过程,指导生物体内蛋白质的合成,从而实现生命活动的调控。
本实验主要涉及以下内容:1. 基因克隆:通过PCR技术扩增目的基因,将其克隆到载体上,构建基因表达载体;2. 基因表达:将构建好的基因表达载体转化到宿主细胞中,观察目的基因的表达情况;3. 基因功能分析:通过观察目的基因表达产物在细胞内的功能,分析基因的功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:(1)目的基因DNA模板;(2)PCR引物;(3)限制性核酸内切酶;(4)DNA连接酶;(5)克隆载体;(6)宿主细胞;(7)表达载体;(8)质粒提取试剂盒;(9)DNA电泳试剂;(10)Western blot试剂。
2. 实验仪器:(1)PCR仪;(2)电泳仪;(3)凝胶成像系统;(4)Western blot系统;(5)离心机;(6)PCR仪;(7)酶标仪。
四、实验步骤1. PCR扩增目的基因:设计特异性引物,以目的基因DNA为模板,进行PCR扩增。
2. 克隆载体构建:将PCR扩增的目的基因与克隆载体连接,构建基因表达载体。
3. 转化宿主细胞:将构建好的基因表达载体转化到宿主细胞中。
4. 质粒提取:从转化后的宿主细胞中提取质粒。
5. 阳性克隆鉴定:通过PCR和酶切鉴定阳性克隆。
6. 基因表达分析:通过RT-qPCR检测目的基因在细胞中的表达水平。
7. Western blot检测:通过Western blot检测目的蛋白的表达情况。
8. 基因功能分析:通过观察目的蛋白在细胞内的功能,分析基因的功能。
五、实验结果与分析1. PCR扩增结果:通过PCR扩增获得目的基因,大小与预期一致。
2. 克隆载体构建:通过酶切和PCR鉴定,成功构建基因表达载体。
与基因有关的实验流程
与基因有关的实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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实验材料:细胞样本基因特异性引物反转录酶PCR 试剂凝胶电泳设备测序仪(可选)实验流程:1. 细胞培养:将所需的细胞类型在适当的培养基中培养,以获得足够数量的细胞。
基因组测序实验报告
基因组测序实验报告一、实验背景随着生命科学的快速发展,基因组测序技术已经成为研究生物遗传信息的重要手段。
通过对基因组的测序,可以深入了解生物的基因组成、遗传变异、基因功能以及与疾病的关系等。
本次实验旨在对_____样本进行基因组测序,以获取其详细的遗传信息。
二、实验目的1、掌握基因组测序的基本原理和实验流程。
2、对_____样本进行全基因组测序,获得高质量的测序数据。
3、分析测序数据,查找可能存在的基因突变和遗传变异。
三、实验材料与方法(一)实验材料1、样本来源:_____2、试剂与仪器:DNA 提取试剂盒测序试剂盒测序仪离心机移液器等(二)实验方法1、 DNA 提取按照 DNA 提取试剂盒的说明书,从_____样本中提取高质量的基因组 DNA。
对提取的 DNA 进行浓度和纯度检测,确保其质量符合测序要求。
2、文库构建将提取的 DNA 进行片段化处理,使其大小适合测序。
对片段化的 DNA 进行末端修复和加接头等操作,构建测序文库。
3、测序将构建好的测序文库加载到测序仪上,进行测序反应。
选择合适的测序模式和参数,以获得高质量的测序数据。
4、数据处理与分析对测序得到的原始数据进行质量评估和过滤,去除低质量的数据。
使用专业的生物信息学软件对处理后的数据进行比对、组装和变异检测等分析。
四、实验结果(一)测序数据质量评估1、测序深度:平均测序深度达到_____X,覆盖度良好。
2、碱基质量:碱基质量值的分布符合预期,大部分碱基的质量值在 Q30 以上。
(二)基因组装结果成功组装出_____样本的基因组序列,与已知的参考基因组相比,具有较高的一致性。
(三)变异检测结果1、单核苷酸多态性(SNP):共检测到_____个 SNP 位点,分布在不同的染色体上。
2、插入缺失(InDel):检测到_____个 InDel 变异,其长度和位置分布具有一定的特征。
(四)功能注释与分析对检测到的变异进行功能注释,发现其中一些变异可能与_____疾病的发生发展相关。
基因组测序实验报告
基因组测序实验报告一、实验背景随着生命科学的迅速发展,基因组测序技术已成为研究生物遗传信息的重要手段。
通过对生物体基因组的测序,可以深入了解基因的结构、功能以及它们与生物表型之间的关系。
本次实验旨在对某特定生物样本进行基因组测序,以获取其完整的遗传信息。
二、实验目的1、掌握基因组测序的基本原理和实验流程。
2、对实验样本进行高质量的基因组测序。
3、分析测序数据,获取样本的基因信息。
三、实验材料与方法(一)实验材料1、待测序的生物样本(如细胞、组织等)。
2、基因组提取试剂盒。
3、测序试剂和仪器。
(二)实验方法1、样本采集与处理从生物体中采集合适的样本,并进行预处理,如去除杂质、细胞破碎等。
2、基因组 DNA 提取按照试剂盒说明书进行操作,提取高质量的基因组 DNA。
3、文库构建对提取的 DNA 进行片段化处理,并添加接头等构建测序文库。
4、测序使用选定的测序平台(如 Illumina 等)进行测序。
5、数据处理与分析对测序得到的原始数据进行质量控制和过滤。
利用生物信息学软件进行序列比对、组装和注释。
四、实验结果(一)测序数据质量评估1、测序深度和覆盖度测序深度达到了预期值,平均覆盖度较高,保证了数据的可靠性。
2、碱基质量分布碱基质量值分布符合正常范围,表明测序准确性较高。
(二)基因组装结果1、基因组大小和结构成功组装出样本的基因组,确定了其大致大小和结构特征。
2、基因预测与注释预测到了众多的基因,并对其功能进行了初步注释。
(三)变异检测1、单核苷酸多态性(SNP)检测检测到了一定数量的 SNP 位点,并对其在基因组中的分布进行了分析。
2、插入缺失(InDel)检测发现了一些 InDel 变异,探讨了其可能对基因功能的影响。
五、结果分析与讨论(一)实验结果的可靠性通过对测序数据质量的评估和多种分析方法的验证,本次实验结果具有较高的可靠性。
但仍可能存在一些局限性,如测序深度不足导致某些区域的信息缺失等。
初中生物教案基因与遗传的实验研究
初中生物教案基因与遗传的实验研究实验目的:通过本实验,帮助学生了解基因与遗传的基本概念,掌握遗传规律,并培养其实验操作和科学观察能力。
实验准备:1. 实验材料:- 实验动物:果蝇(即实验材料)- 实验器材:实验显微镜、显微操作刀、实验平台、草图纸、标本夹、玻璃片、封闭盛器、酒精灯等- 实验试剂:酒精、果蝇培养基、苹果等2. 实验步骤:- 正常交配实验- 羽化前死亡实验- 交配后代实验实验步骤:1. 正常交配实验:实验目的:观察不同性状的果蝇杂交后代的表现形式,了解基因的显性和隐性遗传规律。
a. 将雌性果蝇和雄性果蝇分别放入封闭盛器中,加入适量的果蝇培养基。
b. 观察果蝇的各项性状,对照模板标注果蝇性状表。
c. 用显微镜观察果蝇的性状变异。
d. 结果记录和分析。
2. 羽化前死亡实验:实验目的:观察果蝇在羽化阶段的死亡情况,了解不同基因型对果蝇羽化的影响。
实验步骤:a. 选取一组具有相同表型的果蝇(比如:红眼白色体),分为两组进行培养。
b. 一组放入正常培养基中,另一组放入添加适量酒精的培养基中。
c. 观察果蝇的羽化情况,记录存活数量。
d. 结果分析和总结。
3. 交配后代实验:实验目的:观察不同基因型果蝇的后代表现,并推测产生不同表型的遗传规律。
a. 将红眼白色体的个体与红眼黑色体的个体交配,由其后代反复自交培养。
b. 观察后代果蝇的表型和数量。
c. 根据观察结果推断遗传规律,记录和分析实验数据。
实验讨论和总结:通过本实验,我们了解到基因与遗传的关系以及基因的表达方式。
实验结果表明,遗传物质通过基因传递给后代,产生不同的表型。
同时,通过观察果蝇交配后代的实验,我们能推测出基因的显性和隐性遗传规律。
此外,在实验过程中,我们还培养了学生的实验操作技能和科学观察能力。
尽管本实验只是初步了解基因与遗传的相关概念,但它为学生理解生物学中的重要知识打下了坚实的基础。
希望通过此实验,能够引发学生对生物学的兴趣,培养他们的科学探究精神,并为他们今后的科学研究奠定基础。
测定基因的实验报告
一、实验目的1. 掌握DNA提取、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳等分子生物学技术;2. 学习基因的测定方法;3. 了解基因测序在生物研究中的应用。
二、实验原理1. DNA提取:利用细胞裂解、盐析等方法将DNA从细胞中提取出来;2. PCR扩增:通过设计特异性引物,利用DNA聚合酶在体外扩增目标DNA片段;3. 琼脂糖凝胶电泳:将PCR产物在琼脂糖凝胶上电泳分离,根据迁移率判断DNA 片段大小;4. 基因测序:利用DNA测序仪对目标DNA片段进行测序,获取基因序列。
三、实验材料1. 实验动物:小鼠;2. 试剂:DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、琼脂糖、DNA分子量标准、DNA测序试剂盒等;3. 仪器:PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、DNA测序仪等。
四、实验步骤1. DNA提取(1)取小鼠组织,加入DNA提取试剂盒中的裂解液,充分匀浆;(2)加入蛋白酶K,56℃水浴1小时,使蛋白质变性;(3)加入饱和NaCl溶液,混匀,室温静置10分钟;(4)12,000 r/min离心10分钟,取上清液;(5)加入异丙醇,混匀,室温静置10分钟;(6)12,000 r/min离心10分钟,弃上清液;(7)加入70%乙醇洗涤沉淀,12,000 r/min离心5分钟;(8)弃上清液,室温晾干;(9)加入TE缓冲液溶解DNA。
2. PCR扩增(1)设计特异性引物,针对目标基因;(2)配置PCR反应体系,包括DNA模板、引物、dNTPs、PCR缓冲液、Taq酶等;(3)PCR反应条件:94℃预变性5分钟,94℃变性30秒,退火温度根据引物设计,延伸温度72℃,延伸时间1分钟,共35个循环;(4)PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测。
3. 琼脂糖凝胶电泳(1)配置琼脂糖凝胶,加入DNA分子量标准;(2)将PCR产物与DNA分子量标准混匀,点样;(3)电泳条件:100 V,电泳1小时;(4)凝胶成像系统观察电泳结果。
4. 基因测序(1)将PCR产物纯化,送至测序公司进行测序;(2)获取基因序列,进行序列比对和分析。
植物基因检测实验报告
一、实验目的1. 掌握植物基因提取的基本原理和方法。
2. 了解植物基因检测的原理和操作步骤。
3. 通过实验,学会运用PCR技术检测植物基因。
二、实验原理植物基因检测是利用分子生物学技术,对植物基因进行定性或定量分析的方法。
实验中,首先提取植物基因组DNA,然后通过PCR技术扩增目标基因,最后对扩增产物进行检测。
本实验采用CTAB法提取植物基因组DNA,并利用PCR技术检测目标基因。
三、实验材料1. 植物样品:小麦、水稻、玉米等。
2. 试剂:CTAB裂解液、NaCl溶液、Tris-HCl缓冲液、蛋白酶K、SDS、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、琼脂糖凝胶、电泳缓冲液等。
3. 仪器:高速离心机、PCR仪、凝胶成像系统、显微镜等。
四、实验步骤1. 植物基因组DNA提取(1)取适量植物样品,加入CTAB裂解液,研磨充分。
(2)加入NaCl溶液,混匀。
(3)加入蛋白酶K和SDS,混匀。
(4)65℃水浴1小时,期间每隔10分钟混匀一次。
(5)加入等体积的酚/氯仿,混匀。
(6)12,000 rpm离心15分钟,取上清液。
(7)加入等体积的氯仿,混匀。
(8)12,000 rpm离心15分钟,取上清液。
(9)加入1/10体积的3 mol/L的NaAc溶液和2.5倍体积的无水乙醇,混匀。
(10)-20℃沉淀2小时。
(11)12,000 rpm离心15分钟,弃上清液。
(12)用75%乙醇洗涤沉淀。
(13)12,000 rpm离心5分钟,弃上清液。
(14)将沉淀溶于适量的TE缓冲液中。
2. PCR扩增(1)设计特异性引物,针对目标基因。
(2)配制PCR反应体系,包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶等。
(3)95℃预变性5分钟。
(4)95℃变性30秒,55℃退火30秒,72℃延伸30秒,共35个循环。
(5)72℃延伸10分钟。
3. PCR产物检测(1)取PCR产物,加入适量的琼脂糖凝胶电泳缓冲液。
小学生研究基因实验报告
一、实验背景随着生物科学的不断发展,基因技术逐渐成为研究的热点。
为了培养同学们的探究精神和科学素养,我们班级开展了基因实验活动。
通过本次实验,同学们了解了基因的基本概念,掌握了简单的基因实验操作方法,并学会了如何分析实验结果。
二、实验目的1. 了解基因的基本概念;2. 掌握简单的基因实验操作方法;3. 培养同学们的探究精神和科学素养;4. 提高同学们的团队合作能力。
三、实验材料1. 实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、酒精灯、镊子等;2. 实验试剂:盐酸、酒精、碘液等;3. 实验样本:洋葱鳞片叶、口腔黏膜细胞等。
四、实验步骤1. 洗净洋葱鳞片叶,取一小块放入载玻片中央;2. 用镊子轻轻压碎洋葱鳞片叶,使细胞散开;3. 在载玻片上滴加适量盐酸,然后用酒精灯加热,使细胞解离;4. 待溶液冷却后,滴加碘液,用盖玻片覆盖;5. 将载玻片放在显微镜下观察,观察细胞核、染色体等结构;6. 取口腔黏膜细胞样本,重复以上步骤进行观察;7. 分析实验结果,撰写实验报告。
五、实验结果与分析1. 观察洋葱鳞片叶细胞,可以看到细胞核、染色体等结构,细胞核内含有DNA,染色体是由DNA和蛋白质组成的;2. 观察口腔黏膜细胞,同样可以看到细胞核、染色体等结构,与洋葱鳞片叶细胞相似;3. 通过对比两种细胞的基因结构,可以发现它们具有一定的相似性,说明生物之间存在着共同的遗传信息。
六、实验总结本次基因实验活动,使同学们对基因有了初步的认识,掌握了简单的基因实验操作方法。
通过观察细胞核、染色体等结构,我们了解了基因在生物遗传中的重要地位。
在实验过程中,同学们积极参与,相互协作,提高了团队合作能力。
七、实验建议1. 实验过程中,注意安全操作,避免烫伤、化学伤害等;2. 在观察细胞时,要调整显微镜的焦距,使图像清晰;3. 实验结束后,对实验器材进行清洗、消毒,保持实验室卫生;4. 加强对基因知识的普及,提高同学们的科学素养。
通过本次实验,我们希望同学们能够将所学知识运用到实际生活中,关注生物科学的发展,为我国生物科技事业贡献自己的力量。
生物基因遗传的实验案例
生物基因遗传的实验案例1. 寻找基因突变:科学家们经常使用实验动物模型来寻找基因突变。
例如,在小鼠模型中,科学家通过将CRISPR-Cas9系统导入小鼠胚胎中,针对特定基因进行编辑和突变。
通过观察突变体小鼠的表型变化,科学家可以确定该基因在生物体中的功能。
2. 遗传交叉实验:遗传交叉实验是一种常见的实验方法,用于研究基因的遗传规律。
例如,在果蝇模型中,科学家可以通过交叉不同基因型的果蝇,观察和记录后代的表型及基因型。
这样可以帮助科学家确定某个性状的遗传方式,如显性遗传还是隐性遗传。
3. 基因表达实验:基因表达实验用于研究基因在不同组织或环境条件下的表达水平。
例如,科学家可以在实验室中培养细胞,并通过改变培养条件或添加特定的促进剂来观察特定基因的表达水平。
这可以帮助科学家了解基因在不同环境中的功能及调控机制。
4. 基因敲除实验:基因敲除实验是研究基因功能的常用方法。
通过使用CRISPR-Cas9系统或其他敲除技术,科学家可以将特定基因从生物体中删除。
然后,观察敲除体的表型变化,以确定该基因在生物体中的功能。
5. 基因转导实验:基因转导实验用于将外源基因导入目标细胞或生物体中。
例如,科学家可以将荧光蛋白基因导入小鼠胚胎中,以观察该基因在小鼠发育过程中的表达情况。
这有助于研究基因的功能和调控机制。
6. 基因组测序实验:基因组测序实验用于获取生物体的基因组序列信息。
通过测序技术,科学家可以获得生物体的基因组序列,并进一步研究基因的结构、功能和遗传变异。
7. 基因表达谱实验:基因表达谱实验用于测量不同基因在特定组织或条件下的表达水平。
例如,通过使用RNA测序技术,科学家可以获得细胞或组织样本中的转录本信息,并分析不同基因的表达量。
这有助于了解基因在不同组织中的功能及调控机制。
8. 基因突变鉴定实验:基因突变鉴定实验用于确定个体是否携带特定基因突变。
例如,通过PCR扩增和测序技术,科学家可以检测个体DNA中特定基因的突变,并进一步研究该突变对个体健康和疾病易感性的影响。
基因实验报告
一、实验目的1. 了解基因的概念和作用;2. 掌握基因实验的基本原理和方法;3. 通过实验,验证基因在遗传中的作用。
二、实验原理基因是生物体内决定生物性状的基本单位,基因的变异是生物进化的重要基础。
基因实验是通过分子生物学技术对基因进行操作和检测,以研究基因的结构、功能和调控机制。
本实验主要采用PCR(聚合酶链反应)技术,对目的基因进行扩增和检测。
三、实验材料1. 样本:水稻种子、DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、DNA模板、引物、缓冲液、dNTPs、Taq酶等;2. 仪器:PCR仪、离心机、电泳仪、凝胶成像系统等。
四、实验步骤1. 提取水稻种子DNA;2. 设计并合成目的基因的引物;3. 进行PCR扩增;4. 电泳检测PCR产物;5. 对目的基因进行测序。
五、实验结果与分析1. 提取水稻种子DNA通过DNA提取试剂盒,成功提取出水稻种子DNA。
2. 设计引物根据目的基因的序列,设计一对引物,分别位于目的基因的上下游。
3. PCR扩增将提取的DNA作为模板,加入引物、缓冲液、dNTPs、Taq酶等,进行PCR扩增。
扩增条件为:95℃预变性5分钟,95℃变性30秒,55℃退火30秒,72℃延伸1分钟,共进行35个循环。
4. 电泳检测PCR产物将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察电泳结果。
结果显示,目的基因扩增成功,大小与预期一致。
5. 目的基因测序对目的基因进行测序,测序结果与预期序列一致。
六、实验结论通过本实验,成功提取了水稻种子DNA,并扩增出目的基因。
结果表明,基因在遗传中起着重要作用,基因的变异是生物进化的重要基础。
本实验为基因研究提供了技术支持。
七、实验讨论1. 实验过程中,DNA提取、PCR扩增、电泳检测等步骤要严格按照操作规程进行,以确保实验结果的准确性;2. 引物设计要合理,避免引物二聚体和错配,以提高PCR扩增的特异性;3. 实验过程中,要控制好反应条件,如温度、时间等,以保证PCR扩增的效率;4. 实验结果分析要客观、严谨,避免主观臆断。
基因科学实验报告
一、实验背景基因是生物体的遗传信息载体,是生物体生长发育、生命活动的基础。
随着生物科学的不断发展,基因研究已成为当今科学领域的前沿。
为了深入了解基因的功能和调控机制,本实验以基因表达调控为研究对象,通过实验手段探讨基因表达调控的相关问题。
二、实验目的1. 学习基因表达调控的基本原理和方法;2. 探讨基因表达调控的相关因素;3. 分析基因表达调控在生物体生长发育中的作用。
三、实验材料1. 实验材料:大肠杆菌、大肠杆菌基因组DNA、质粒载体、PCR试剂、限制性内切酶、DNA连接酶、DNA标记物等;2. 实验仪器:PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、离心机、移液器、培养箱等。
四、实验方法1. 基因克隆:将目的基因从基因组DNA中分离出来,并将其克隆到质粒载体上;2. 转化:将构建好的质粒载体转化到大肠杆菌中;3. 表达:在大肠杆菌中表达目的基因;4. 诱导:通过添加诱导剂诱导目的基因的表达;5. 收集与纯化:收集表达产物,并进行纯化;6. 分析:通过Western blot、RT-PCR等方法检测目的基因的表达水平。
五、实验步骤1. 提取基因组DNA:采用CTAB法提取大肠杆菌基因组DNA;2. PCR扩增目的基因:设计特异性引物,通过PCR技术扩增目的基因;3. 限制性内切酶切割:将目的基因和质粒载体进行限制性内切酶切割;4. DNA连接:将目的基因与质粒载体连接;5. 转化:将连接好的质粒载体转化到大肠杆菌中;6. 诱导表达:在适宜条件下诱导目的基因的表达;7. 收集与纯化:收集表达产物,并进行纯化;8. Western blot检测:通过Western blot检测目的基因的表达水平;9. RT-PCR检测:通过RT-PCR检测目的基因的表达水平。
六、实验结果与分析1. Western blot结果:在目的基因的表达水平方面,诱导组表达量明显高于未诱导组,表明目的基因在大肠杆菌中成功表达;2. RT-PCR结果:在目的基因的mRNA水平方面,诱导组表达量明显高于未诱导组,进一步证实了目的基因在大肠杆菌中成功表达。
基因实验报告模板
一、实验名称二、实验目的三、实验原理四、实验材料与仪器五、实验方法1. 基因提取2. 基因扩增3. 基因克隆4. 基因表达分析5. 基因功能验证六、实验步骤1. 基因提取(1)取适量组织样本,加入提取缓冲液;(2)加入蛋白酶K,于60℃水浴中消化;(3)加入酚-氯仿,充分混匀,离心;(4)取上清液,加入等体积的异丙醇,混匀,静置;(5)离心,弃上清液,加入70%乙醇洗涤沉淀;(6)离心,弃上清液,风干沉淀;(7)加入适量TE缓冲液,溶解DNA。
2. 基因扩增(1)设计引物,根据基因序列,确定引物序列;(2)配置PCR反应体系,包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq聚合酶等;(3)进行PCR反应,包括变性、退火、延伸等步骤;(4)琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。
3. 基因克隆(1)选择合适的克隆载体,如pET、pGEX等;(2)将PCR产物与克隆载体连接;(3)转化宿主菌,如大肠杆菌;(4)筛选阳性克隆,进行测序验证。
4. 基因表达分析(1)构建表达载体,将目的基因克隆至表达载体;(2)转化宿主菌,如大肠杆菌;(3)提取表达蛋白,进行SDS-PAGE电泳;(4)检测蛋白表达水平。
5. 基因功能验证(1)根据基因功能,设计实验方案;(2)进行相关实验,如基因敲除、基因过表达等;(3)分析实验结果,验证基因功能。
七、实验结果1. 基因提取(1)琼脂糖凝胶电泳检测DNA,观察DNA条带;(2)记录DNA浓度。
2. 基因扩增(1)琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,观察条带;(2)记录PCR产物大小。
3. 基因克隆(1)测序结果与基因序列比对,验证克隆成功;(2)记录克隆载体序列。
4. 基因表达分析(1)SDS-PAGE电泳检测表达蛋白,观察条带;(2)记录蛋白表达水平。
5. 基因功能验证(1)根据实验结果,分析基因功能;(2)记录实验结果。
八、实验讨论1. 分析实验结果,讨论实验现象;2. 对实验结果进行解释,提出可能的解释;3. 分析实验中存在的问题,提出改进措施。
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第四章基因检测相关的实验人类基因组计划的完成以及后基因组学研究的不断深入,标志着现代医学的发展已逐步进入“基因组医学”的时代。
疾病分子机制的研究也将为包括疾病的分子诊断、分子治疗在内容的“分子医学”的发展提供动力。
其中分子诊断技术已在许多临床领域得到运用,这必将为二十一世纪人类医疗保健带来福音。
因此,从分子水平上了解医学遗传学相关的实验技术对于现代医学教育与医学实践具有十分重要的意义。
实验4-1 人基因组DNA的提取一、实验目的掌握人外周血基因组DNA的抽提方法。
二、实验原理从不同组织细胞或血细胞中提取高质量的DNA是进行基因诊断的先决条件。
制备高质量DNA的原则是:①将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净;②尽可能保持DNA分子的完整。
在提取DNA的反应体系中,蛋白酶K为广谱蛋白酶,其主要特征是能在SDS和EDTA存在的情况下保持很高的活性,可将蛋白质降解成小的多肽和氨基酸。
SDS是离子型表面活性剂,主要作用是:①破坏细胞膜及核膜;②解聚细胞中的核蛋白;③与蛋白质结合,使蛋白质变性而沉淀下来;④抑制DNA酶活性,使DNA分子尽量完整地分离出来。
三、实验用品和材料(一)试剂1.抗凝剂:EDTA 2%(W/V)生理盐水抗凝剂。
称取2g EDTANa2、0.85g NaC1,加双蒸水至100m1。
1ml该试剂可抗10ml 全血凝结;亦可用医用人ACD抗凝剂抗凝。
肝素能抑制限制性内切酶活性,因此一般不用肝素抗凝。
2.15mmo1/L Tris-HCl(pH8.0),15 mmo1/L EDTA(pH8.0),15 mmo1/L NaCl (简称TES溶液);用lmo1/L Tris-HCl(pH8.0),0.5 mmo1/L EDTA(pH8.0),3mo1/L NaCl稀释成15 mmo1/L TES溶液。
3.10%(W/V)SDS。
4.15mmo1/L TES饱和酚,重蒸酚在热水浴(100℃)中溶化后加入1/3体积的15 mmo1/L TES溶液,充分混匀后,放冰箱中静置6h以上。
酚层在下,水层在上。
吸掉上层多余的TES溶液,冰箱中避光保存备用。
为防止酚被氧化成酮,可加少量8-羟基喹啉(2 mmo1/L~5mmo1/L)。
5.氯仿/异戊醇(24:1,V/V),现配现用。
6.蛋白酶K。
7.10mmo1/L Tris-HCl,1mmo1/L EDTA(pH7.5)(简称TE溶液)。
用1mo1/L Tris-HCl(pH7.5),0.5mo1/L EDTA (pH 7.5~8.0)稀释配制。
(二)用品:Eppendorf试管、离心管、吸管、加样器、枪头、离心机、水浴箱、紫外分光光度计、电泳仪、电泳槽。
四、实验方法和步骤1.白细胞的分离(1)抗凝血用1~2倍的生理盐水或磷酸缓冲的生理盐水(PBS)稀释并混合。
(2)在50ml离心管中加入1倍体积淋巴细胞分离液(上海试剂二厂),在上面仔细铺一层2倍体积已稀释的血液。
(3)室温以2000rpm离心15min~20min,红细胞应沉于管底,而白色的淋巴细胞应分布于上层血浆与下层淋巴细胞分离液的界面。
(4)吸弃血浆,小心吸取淋巴细胞层,直至把淋巴细胞转移完全。
(5)用生理盐水或PBS洗淋巴细胞二次。
(6)最后得到的淋巴细胞沉淀,可立即用于DNA的提取,或冻存于超低温冰箱中,直至使用。
2.DNA的提取(1)在5 m1 15mo1/L TES中悬浮白细胞,加蛋白酶K 250μg~350μg(50μg/ m1~70μg/ m1),10%SDS至终浓度0.5%(加260μl左右)。
(2)充分混匀,放50℃水浴中保温3h~5h,其间振摇2~3次。
(3)冷却至4℃,加等体积15 mo1/L TES饱和酚。
(4)轻轻振摇,使水相和酚层充分混匀。
(5)4℃5000rpm~8000rpm离心15min~20min。
此时DNA溶液在上层,酚位于下层,中间是变性蛋白层。
(6)用吸管小心吸取上层粘稠溶液,移至另一离心管。
注意尽量不要带出中间蛋白层。
(7)DNA溶液再加等体积15 mo1/L TES饱和酚抽提一次,按(5)、(6)离心并吸至另一离心管。
(8)加等体积氯仿/异戊醇按步骤(4、5)抽提,离心5min。
(9)吸出DNA溶液后,再步骤(8)抽提一次。
(10)用吸管将DNA溶液移至Eppendorf中,冰浴至0℃。
(11)加2.5倍体积95%冷乙醇震摇,可见DNA白色沉淀析出。
(12)用75%冷乙醇清洗3~4次。
(13)室温干燥或冷冻干燥DNA。
(14)加适量TE溶液溶解DNA。
3.DNA的鉴定及定量(1)比色法:取DNA溶液20μl,用蒸馏水稀释至400μl。
以蒸馏水做空白,在紫外分光光度计上测定OD260、OD280、OD230三个数值。
对于纯DNA,1个OD260=50μg/mlDNA,因此DNA含量应为50μg/ml ×OD260×稀释倍数。
按上述稀释20倍样品读数,50μg/ml ×20倍等于1mg/m1,因此所读出的OD260数值即为样品稀释前的浓度(mg/m1)。
例如OD260数值为0.54,则DNA浓度为0.54mg/m1。
根根含量计算总DNA得量。
计算公式为:DNA浓度量(mg /m1)×体积(m1)例如DNA样品0.5m1,浓度为0.54mg/m1,则DNA总量为:0.54mg/m1×0.5 m1=0.27mg=270μg。
经上述方法制备的DNA OD260/OD280>1.7,OD260/OD230>2.0。
OD260/OD280比值太小,说明样品中残存蛋白质较多;OD260/OD230比值太小,说明样品中残存核苷酸、氨基酸或酚等有机杂质。
(2)电泳鉴定:取样品1μl,加电泳缓冲液5μl和加样缓冲液2μl(含溴酚蓝指示剂及甘油),在0.8%琼脂糖凝胶上进行水平板微型电泳。
用噬菌体λDNA作为标准。
DNA区带应比较集中,泳动速度与λDNA相同或稍慢,证明分子量均>50kb。
一般见不到泳动速度比溴酚蓝快的RNA区带。
如果DNA不成区带,而是散开分布在λDNA与溴酚蓝之间,则说明DNA已经被降解成小分子,不能再用来进行限制性内切酶图谱分析。
五、注意事项与实验报告(一)注意事项1.酚抽提时如果上清液太粘,不能和蛋白层分开时,可加入适量的TES稀释,然后再用酚抽提。
2.保温可在45℃~55℃范围内进行。
3.抽提DNA时动作不可过猛,以防机械震动将DNA分子打得太碎。
4.沉淀DNA时要小心操作,勿使纤维网断成小丝。
5.DNA溶于TE时可先浓一点,发现太浓时再加些TE。
这样能保证DNA样品不致于太稀而无法使用,一般来讲,DNA浓度为0.4 mg/ml~0.6mg/ml最为理想。
(6)溶于TE中的DNA样品比较稳定,可在4℃冰箱中存放一年而不会降解。
(四)预期实验结果及分析1.获得高质量的DNA;2.分析电泳结果,指出实验成功或不足的原因,形成实验报告后交老师。
(王培林)实验4-2 聚合酶链反应聚合酶链反应(polymeras chain reaction,简称PCR)是体外特异性扩增DNA分子的一项技术。
它是美国Cetus公司人类遗传学研究室的科学家Kary.B.Mullis在1985年发明的。
Mullis等在建立PCR方法初期,仅采用非常简单的三种温度的水浴进行实验,应用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段催化复性引物的延伸反应。
1988年Saiki等将耐热DNA聚合酶(Taq酶)引入PCR;随着自动化扩增仪的发明和发展PCR技术得到极大的推广应用,近年更是迅速渗透到生命科学的各个领域,成为分子生物学最重要的技术之一。
PCR主要用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段,其特异性主要由人工合成的与待扩增的DNA片段两条链两端已知序列分别互补的一对寡核苷酸引物决定。
PCR反应体系由引物、微量的DNA模板,四种脱氧核糖核苷酸(dNTP)溶液,耐热Taq DNA聚合酶,Mg2+及适量的缓冲液等组成。
反应时首先将上述溶液加热,使模板DNA在高温下变性,双链解开为单链状态;然后降低溶液温度,使合成引物在低温下与其靶序列配对,形成部分双链,称为复性或退火;再将温度升至中温,在Taq DNA聚合酶的催化下,以dNTP为原料,引物沿5′→3′方向延伸,合成新的DNA片段,该片段又可作下一轮反应的模板,如此重复改变温度,由高温变性、低温复性和适温延伸组成一个周期,反复循环,使目的基因得以迅速扩增(图4-1)。
从理论上讲,每经过一个循环,样本中的DNA量应该增加一倍,新形成的链又可成为新一轮循环的模板,经过25~30个循环后DNA可扩增106~109倍。
如此大量扩增的PCR扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳即可得以检测分析,另外PCR 产物还可用于核酸探针杂交、酶切图谱分析、单链构型多态性分析、核酸序列分析等。
由于该法操作简单,实用性强,特异性和灵敏度高,并可自动化,因而在分子生物学、基因工程研究、以及对遗传病、传染病和恶性肿瘤等的基因诊断和研究中得到广泛应用。
一、实验目的1.掌握PCR技术的基本原理;2.了解应用PCR技术检测性别决定基因的基本过程。
二、实验原理SRY基因位于人类Y染色体,是1990年Sinclair等克隆的睾丸决定基因,X染色体上没有相应的同源节段。
根据SRY基因序列合成一对特异性引物,通过PCR反应检查患者有无此基因相应扩增片段,以及患者的表型可对患者的真正性别和病因作出判断,另外对胎儿性别的产前诊断有利于防止性连锁遗传病患儿的出生。
三、实验准备(一)材料人体静脉血、注射器、微量加样器及吸头、1.5ml及0.5ml Eppendorf管。
引物序列:SRY1:5′-GATCAGCAAGCAGCTGGGATACCAGTG-3′SRY2:5′-CTGTAGCGGTCCCGTTGCTGCGGTG-3′(二)试剂(实验中有关试剂和器材要进行高压灭菌处理)1.生理盐水2.细胞裂解液50mmol Tris-HCl (pH 8.0)1mmol Na2 EDTA (pH 8.0)0.5% SDS0.1mmol NaCl3.10mg/ml蛋白酶K4.20%SDS5.水饱和酚(1mol/L Tris-HCl 抽提)6.酚:氯仿:异戊醇(25∶24∶1)7.氯仿:异戊醇(24∶1)8.8mol/L 醋酸钾9.无水乙醇10.70%乙醇11.TE(pH8.0)10 mmol/L Tris-HCl pH8.00.1 mmol/L Na2EDTA pH8.012.10×buffer500mmol/L KCl100mmol/L Tris·HCl(pH8.3,室温)15mmol/L MgCl20.1% 明胶13.4×dNTP1 mmol/L dATP、1 mmol/L dCTP、1 mmol/L dGTP、1 mmol/L dTTP14.Taq 酶1U/μl15.引物溶液10pmol/μl16.5×TBE缓冲液(1000ml):54g Tris碱、27.5g硼酸、20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)。