肌红蛋白定量测定-检验科免疫室作业指导书
肌红蛋白(Myoglobin)作业指导书
检验科免疫室分析项目作业指导书第页，共页版本：A/0生效日期：2008-02-01 111.分析原理采用双抗夹心法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步：15μl标本、生物素化的抗肌红蛋白单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗肌红蛋白单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。
·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
Elecsys自动将标本产生的光电信号与从肌红蛋白定标液得出的Cutoff值相比较。
2.标本要求血清：使用标准取样试管或含分离胶的试管采集。
血浆：肝素（锂、钠、铵）、EDTA-K3 、枸橼酸钠抗凝均可。
标本在2－8 度可稳定1 周，-20 度可稳定3 个月。
只可冻融一次。
含沉淀的标本使用前需离心。
标本和质控品禁用叠氮钠防腐。
标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。
3.试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。
试剂：M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。
粒子浓度0.72mg/ml，含防腐剂。
R1：生物素化的抗肌红蛋白单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml，浓度1.75mg/l，磷酸缓冲液85mmol/l，pH6.5, 叠氮钠<0.1%,含防腐剂。
R2：Ru(bpy)32+标记的抗肌红蛋白单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。
浓度1.75mg/l，磷酸缓冲液85mmol/l，pH 8.5, 叠氮钠<0.1%,含防腐剂。
校准品：Cal 1 阴性定标液（白盖），2*1ml血清, 含防腐剂Cal 2 阳性定标液（黑盖），2*1ml血清，含防腐剂质控品：Elecsys 肌红蛋白质控品1和2 （PreciControl Cardica II）货号03530477其他所需材料：Elecsys2010/cobas e 411分析仪需要Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号11662988Elecsys 测量池清洗液（CleanCell）货号11662970Elecsys 添加剂液（SysWash）货号11930346Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean)）货号11933159Elecsys 2010 反应杯（Assay Cup)货号11706802Elecsys 2010 吸样头（Assay Tip)货号11706799E170 /cobas e 601分析仪需要Elecsys 系统缓冲液（ProCell M）货号12135019Elecsys 测量池清洗液（CleanCell M）货号12135027Elecsys 系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）货号03023141探针冲洗液，12x70ml,用于最终保养及完成试剂吸样后冲洗，货号03005712Elecsys 反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M)货号12102137肌红蛋白(Myoglobin)检验科免疫室分析项目作业指导书第页，共页版本：A/0生效日期：2008-02-01 22Elecsys 废物盒(wasteliner)货号03023150Elecsys 系统清洗液支架(SysClean Adapter M))货号03027651各种分析仪均适用的材料Elecsys 系统清洗液（SysClean）货号112985004.仪器和校准使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准：每批肌红蛋白试剂盒必须用新鲜试剂和肌红蛋白 Cal 1,Cal 2定标一次。
肌红蛋白标准操作规程
肌红蛋白（Myoglobin ）标准操作规程1.【实验目的】为了保证肌红蛋白测定结果的准确性，以及可靠性。
2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【样品类型及实验前准备】3.1样本类型：不容血的血清、肝素抗凝的血浆或全血。
稳定性：2-8C可保存1天，如需存放大于6天时，请于-20C或更低的温度下保存。
3.2患者准备：实验前正常饮食，晨起空腹，安静状态下抽取静脉血，条件特殊情况下可非空腹抽血检测。
3.3容器，添加剂类型：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA三钾、肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本。
3.4仪器设备：中元生物免疫定量分析仪，低速离心机3.5实验试剂：肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶、肌红蛋白联合检测试机卡、干燥剂、铝箔袋、4.【实验原理】本实验采用免疫层析及双抗体夹心原理快速定量检测人血清/血浆/全血样本中的cTNI、CK-MB、Myo的含量。
试机卡检测线（T）处包被有抗cTNI、抗CK-MB、抗Myo的单克隆抗体，质控线处包被多克隆抗体，测试时样本中的待测物于胶体金标记的单克隆抗体形成抗原抗体复合物，借助毛细作用移行至检测线（T）及质控线（C）形成有色条带。
配合免疫定量分析仪使用，通过采集检测线及质控线图像进行分析处理，计算出样本中相应项目的含量。
5.【操作步骤】5.1撕开铝箔袋取出试剂卡，置于平整台面上，请立即使用，避免长时间暴露吸潮。
5.2以血清/血浆为样本时，样本量为70ul ,以全血为样本时，样本量为1ul。
5.3加样后立即置于免疫定量分析仪，选择“孵化检测”，仪器将自动在15 min时读取定量结果；或加样15 min时，选择“快速检测”读取定量结果。
6.【质控程序】同做样本一样，用质控品进行室内质控检测。
7.【结果计算与判断】免疫定量分析仪通过采集检测线及质控线图像进行分析处理，计算出样本中相应项目的含量。
免疫学检验室内质量控制操作程序-检验科免疫室作业指导书
免疫学检验室内质量控制操作程序1.目的：保证ELISA检测结果准确可靠,充分发挥其方法学的优点。
2.该SOP变动程序：本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
3.方法3.1分析前质控3.1.1人员培训实验是人操作的，因此检验人员需经过培训，熟练掌握本专业如下几方面的技术知识：检验项目的基本原理（ELISA原理）；临床意义；熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）；熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。
某些特殊项目检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班，考试合格后持证上岗。
3.1.2.室内质控血清的制备：质控血清每年列出计划报质控组采购，一般采用CutOff值附近的阳性值；⑵质控血清-20℃冻存备用；⑶使用前室温复融。
3.1.3试剂盒选择卫生部规定乙肝试剂，丙肝试剂，艾滋病试剂，梅毒试剂及血型试剂必须使用经卫生部生物制品检定所检定合格，并贴有防伪标签的产品。
试剂盒评价：根据该试剂生物制品鉴定所的批批检定报告，了解其质量水平，按照质量计划选择灵敏度高的或特异性高的试剂；通过询问试剂包被物的组成，如原料来源（基因工程或合成多肽），片段的组合（按比例混合或化学合成），片段的长短等判断试剂的优劣；参考室间质评报告中对试剂的评价结果，了解不同试剂的质控成绩。
根据权威部门发布的试剂评价结果，了解市场上试剂的质量优劣。
3.1.4仪器质控为使仪器保持最佳工作状态应建立维护和校正仪器的标准操作程序（SOP），所要控制的仪器包括移液器（加样枪），水浴箱（温箱），洗板机和酶标仪。
⑴移液器：ELISA加样量小（5-100ｕl），其准确性直接影响实验结果，利用称重法检查：吸取刻度指示量的水，万分之一天平称重后计算吸量是否准确，一般应在±10%以内；水浴箱：经常检查水浴箱温度计所示的温度和水中（或温箱内）实测温度是否一致，允许有±1℃的误差；洗板机：每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定一般不超过2ul，人工扣板时，垫纸不湿，定期检查管孔是否堵塞；酶标仪：经常维护其光学部分，防止滤光片霉变，定期检测校正，使其保持良好的工作性能。
ISO实验项目
乙肝病毒核酸扩增荧光检测
5.5
检验程序
29
尿亚硝酸盐定性测定（干法学法
29
血清二氧化碳酶试剂法测定
29
丙肝病毒核酸扩增荧光检测
5.6
检验程序的质量保证
30
凝血酶原时间（PT）测定
30
血清糖化蛋白四氮唑蓝法测定
30
结核杆菌核酸扩增荧光检测
5.7
检验后程序
31
活化部分凝血活酶时间测定
31
尿液或脑脊液总蛋白测定
9
检验试剂耗材控制程序
4
血清乙型肝炎病毒e抗体检测
56
AU1000 ISE分析仪操作维护规程
5
尿液采集
10
医疗咨询服务管理程序
5
血清乙型肝炎病毒核心抗体检测
57
AU1000生化分析仪操作维护规程
6
粪便采集
11
投诉处理程序
6
甲型肝炎病毒--IgM检测
58
电泳仪操作维护规程
7
前列腺液采集
12
不符合检验工作程序
1
患者采血前的准备
6
新检验项目管理程序
1
血清乙型肝炎病毒表面抗原检测
53
血气分析仪操作维护规程
2
静脉血采集
7
委托实验管理程序
2
血清乙型肝炎病毒表面抗体检测
54
Medical低温冰箱操作维护规程
3
末梢血采集
8
仪器设备采购控制程序
3
血清乙型肝炎病毒e抗原检测
55
MEDICA 90纯水机操作维护规程
4
动脉血采集
51
免疫学检验室间质量评价（EQA）
肌钙蛋白I定量测定-检验科免疫室作业指导书
肌钙蛋白I定量测定1.原理抗原或抗体包被的微粒子，是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，悬浮性极佳，微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。
标本与微粒子以一定比例混合，标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应，以反应终了后，反应液的一部分被移到玻璃纤维上，洗去未反应的被检物质与其它的不要成份，加入基质液，基质液被碱性磷酸所分解生成Methylumbelliferone。
当该物受荧光照射后就产生荧光，测定荧光强度的分化率，从而决定被测物质的浓度。
2.标本采集：2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2标本种类：血清或血浆。
2.3标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用.采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血3ml，收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。
3.标本储存：待测样本室温不超过8小时，4-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存，避免反复冻融。
4.标本运输：室温运输。
5.标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。
6.试剂：6.1试剂名称：肌钙蛋白-I诊断试剂盒。
6.2试剂生产厂家：美国雅培制药有限公司6.3包装规格：100Test/kit6.4试剂盒组成：肌钙蛋白-I诊断试剂。
6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存2-8℃条件，有效期12个月。
7.仪器设备：7.1仪器名称：AXSYM免疫自动分析仪7.2仪器厂家：美国雅培公司7.3仪器型号：AXSYMTm型7.4仪器校准：本仪器校准由厂家工程师负责校准。
8.操作步骤：8.1样本处理：取待测样本血清或血浆置于样本杯中（不能有纤维蛋白，不能有气泡）。
8.2仪器准备：检查纤维杯，反应杯数量满足实验需要，废物桶和废液桶是否连接好，仪器的光路是否正常，环境温度是否符合要求，打印机的连接。
CKMB定量测定-检验科免疫室作业指导书
CKMB定量测定1.原理抗原或抗体包被的微粒子，是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，悬浮性极佳，微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。
标本与微粒子以一定比例混合，标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应，以反应终了后，反应液的一部分被移到玻璃纤维上，洗去未反应的被检物质与其它的不要成份，加入基质液，基质液被碱性磷酸所分解生成Methylumbelliferone。
当该物受荧光照射后就产生荧光，测定荧光强度的分化率，从而决定被测物质的浓度。
2.标本采集：2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2标本种类：血清或血浆。
2.3标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用.采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血3ml，收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。
3.标本储存：待测样本室温不超过8小时，4-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存，避免反复冻融。
4.标本运输：室温运输。
5.标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。
6.试剂：6.1试剂名称：CK-MB诊断试剂盒。
6.2试剂生产厂家：美国雅培制药有限公司6.3包装规格：100Test/kit6.4试剂盒组成：CK-MB诊断试剂。
6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存2-8℃条件，有效期12个月。
7.仪器设备7.1仪器名称：AXSYM免疫自动分析仪7.2仪器厂家：美国雅培公司7.3仪器型号：AXSYMTm型7.4仪器校准：本仪器校准由厂家工程师负责校准。
8.操作步骤8.1样本处理：取待测样本血清或血浆置于样本杯中（不能有纤维蛋白，不能有气泡）。
8.2仪器准备：检查纤维杯，反应杯数量满足实验需要，废物桶和废液桶是否连接好，仪器的光路是否正常，环境温度是否符合要求，打印机的连接。
肌红蛋白测定SOP_MYO临床意义_检验科生化项目SOP
10~92ng/mL。
9临床意义
血清肌红蛋白检测时AMI早期诊断的最有用指标之一。在AMI发作后1~3h血清肌红蛋白开始升高，4
~12h达峰值，72h恢复正常。
肌红蛋白尿常见于急性心肌梗死、肌肉创伤、多发性肌炎、行军性肌红蛋白尿症、进行性肌营养不良、遗传性特发性肌红蛋白尿、海蛇咬伤等。
6.1质控品准备和储存
质控品为液体，可以直接使用。
6.2质控水平和分析批长度
每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。
6.3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
7性能参数
本法线性范围为1~1000ng/mL,对于超过测定线性范围的结果，用样本稀释液进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。
2.3注意事项
推荐选用血清。在含有草酸盐的血液可能引起铬颗粒积聚，不应该使用。抗凝剂不足的冷冻血浆样品可能引起铬颗粒积聚，不应该使用。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1孔为结合物0.09 mg/mL，液体；3孔为抗体-CrO21.8mg/ml，片剂；4 ~ 6孔为CPRG10.3mM，
10参考文献
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司肌红蛋白（MYO）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：352~353。
编写：审核：批准：
4操作程序
4.1检测过程流程
签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
4.2样品签收
FPSA定量测定-检验科免疫室作业指导书
FPSA定量测定1.原理抗原或抗体包被的微粒子，是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，悬浮性极佳，微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。
标本与微粒子以一定比例混合，标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应，以反应终了后，反应液的一部分被移到玻璃纤维上，洗去未反应的被检物质与其它的不要成份，加入基质液，基质液被碱性磷酸所分解生成Methylumbelliferone。
当该物受荧光照射后就产生荧光，测定荧光强度的分化率，从而决定被测物质的浓度。
2.标本采集：2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2标本种类：血清或血浆。
2.3标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用.采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血3ml，收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。
3.标本储存：待测样本室温不超过8小时，4-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存，避免反复冻融。
4.标本运输：室温运输。
5.标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。
6.试剂：6.1试剂名称：F-PSA诊断试剂盒。
6.2试剂生产厂家：美国雅培制药有限公司6.3包装规格：100Test/kit6.4试剂盒组成：F-PSA诊断试剂.6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存2-8℃条件，有效期12个月.7.仪器设备：7.1仪器名称：AXSYM免疫自动分析仪7.2仪器厂家：美国雅培公司7.3仪器型号：AXSYMTm型7.4仪器校准：本仪器校准由厂家工程师负责校准。
8.操作步骤：8.1样本处理：取待测样本血清或血浆置于样本杯中(不能有纤维蛋白，不能有气泡)。
8.2仪器准备：检查纤维杯，反应杯数量满足实验需要，废物桶和废液桶是否连接好，仪器的光路是否正常，环境温度是否符合要求，打印机的连接。
B12定量测定-检验科免疫室作业指导书
B12定量测定1.原理抗原或抗体包被的微粒子，是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，悬浮性极佳，微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。
标本与微粒子以一定比例混合，标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应，以反应终了后，反应液的一部分被移到玻璃纤维上，洗去未反应的被检物质与其它的不要成份，加入基质液，基质液被碱性磷酸所分解生成Methylumbelliferone。
当该物受荧光照射后就产生荧光，测定荧光强度的分化率，从而决定被测物质的浓度。
2.标本采集：2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹2.2标本种类：血清或血浆2.3标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。
采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血3ml，收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。
3.标本储存：待测样本室温不超过8小时，4-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存，避免反复冻融。
4.标本运输：室温运输。
5.标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。
6.试剂：6.1试剂名称：B12诊断试剂盒。
6.2试剂生产厂家：美国雅培制药有限公司6.3包装规格：100Test/kit6.4试剂盒组成：B12诊断试剂6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存2-8℃条件，有效期12个月。
7.仪器设备：7.1仪器名称：AXSYM免疫自动分析仪7.2仪器厂家：美国雅培公司7.3仪器型号：AXSYMTm型7.4仪器校准：本仪器校准由厂家工程师负责校准8.操作步骤：8.1样本处理：取待测样本血清或血浆置于样本杯中(不能有纤维蛋白，不能有气泡)。
8.2仪器准备：检查纤维杯，反应杯数量满足实验需要，废物桶和废液桶是否连接好，仪器的光路是否正常，环境温度是否符合要求，打印机的连接。
002 免疫组岗位职---检验科作业指导书
检验科作业指导书
检验科 作业指导书
免疫组岗位职责
文件编号： 版本： 生效日期： 页码： 第 2 页共 2 页
3.4.2 做好 HIV，梅毒的室内质控及登记工作。 3.4.3HIV 抗体检测阳性时，应按 HIV 阳性送检要求做好与临床的沟通工作，并应做好我科的各项书面 登记工作，材料准备齐全后方可通知司机送中山市疾病控制中心检测。 3.5 岗位 E：主要负责罗氏 E170 仪器检测项目的检测及 EB 病毒抗体检测。 3.5.1 负责肿瘤、内分泌等项目的定量检测及报告，EB 滴度阳性的耳鼻喉科病人应同时报 OD 值。 3.5.2 AFP、CEA、CA199、HCG、甲功五项每天做室内质控，性激素六项、CA125、CA153 每周至少做 2 次质控，PCT、T-MPO、anti-TG 每两周至少做一次质控。如遇定标则应在通过定标后同时做室内质控。 如遇失控，对于失控项目应认真填写失控报告，应立即向免疫室组长反映，以便及时排除并做好书面 记录。 3.5.3 当仪器故障时，应设法及时排除故障，如自已无法解决，应电话通知工程师来我科维修，并作好 详细书面记录。包括故障原因，排除方法，所更换的配件等，并向免疫室组长或科主任汇报。 3.5.4 按期完成省临检中心的室间质评。对于不理想的项目，应注意总结，并保存资料且作好书面总结 记录。 3.5.5 每日工作结束后必须在维修保养记录本和仪器运行记录本上书面记录仪器运行状况。 3.5.6 如遇仪器重大故障,当天不能出报告时,应及时免疫室组长至科主任汇报,以便通知临床，门诊病 人应向门诊服务台出具安民告示,耐心做好解释工作。
检验科作业指导书
检验科 作业指导书
免疫组岗位职责
文件编号： 版本： 生效日期： 页码： 第 1 页共 2 页
1 目的
免疫室作业指导书
免疫室作业指导书文件编号：ABCD-3-MY-01~52第A版编制：审核：批准：生效日期：2006年8月8日ABCD人民医院检验科目录修订页血清乙型肝炎病毒表面抗原检测（ELISA）1.原理在微孔条上预包被被纯化乙肝表面抗体，配以酶标记抗体（HBsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗（HBsAg）。
2.标本采集2.1 采集前病人准备：受检者应空腹2.2 标本种类：血清或血浆2.3 标本要求：采集病人静脉血3ml（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4小时，分离血清备用。
3.标本储存：2-8℃保存不应超过1周，-20℃不应超过3个月，-70℃长期保存，应避免反复冻融。
4.标本运输：密封，室温运输。
5.标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。
6.试剂6.1试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒6.2试剂生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司。
6.3包装规格：96Test/Kit6.4试剂盒组成：HBsAg微孔板，HBsAg酶标记抗体，HBsAg阳性对照血清，HBsAg阴性对照血清，浓缩洗涤液，底物A，底物B，终止液，封口膜，自封袋。
6.5试剂储存条件及有效期：2-8℃避光保存，有效期9个月。
7.仪器设备7.1仪器名称：自动酶标仪7.2仪器厂家：Rayto7.3仪器型号：RT-21008.操作步骤8.1平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25℃），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。
8.2配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。
8.3编号：将微孔条固定于支架，按序编号。
8.4加样：分别用加样器在对照孔中加入阴、阳性对照血清各50l 于相应孔中。
8.5加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50l，轻拍混匀。
8.6温育：置37℃温育60分钟，室温平衡5分钟。
8.7洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
肌红蛋白测定试剂盒说明书
肌红蛋白（MＹO）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）说明书【产品名称】通用名称：肌红蛋白(ＭYO)测定试剂盒（化学发光免疫分析法)英文名称：Ｍｙoglｏbin(ＣLIA）【包装规格】２×3０人份/盒、２×50 人份／盒、２×10０人份／盒【预期用途】用于体外定量测定人体血清或（与)血浆中肌红蛋白得含量。
肌红蛋白（MYO）分子量为１7、8 kD,由一个多肽链与一个亚铁血红素辅基组成，由人体骨骼肌与心肌细胞合成并贮存,不存在于其它细胞。
实验证明由骨骼肌与心肌来源得两种肌红蛋白无免疫学上得差异。
肌红蛋白得主要生理功能为携带氧气供细胞呼吸。
肌红蛋白就是检测急性心肌梗死（AMI) 得早期指标,具有极高得灵敏度但就是特异性较差,在AMI 早期心肌细胞受损,由于ＭYＯ得分子量小，可以很快从破损得细胞中释放出来,在AMＩ发病１~3小时后血中浓度迅速上升，6~７小时达峰值，１2 小时内几乎所有AMI 患者MYO 都有升高，升高幅度大于各心肌酶，因此可以作为AMI 得早期诊断标志物。
由于MＹO 也存在于骨骼肌中,而且仅从肾脏清除,所以急性肌损伤、急性或慢性肾衰竭、严重得充血性心力衰竭、长时间休克及各种原因引起得肌病患者、肌内注射、剧烈得锻炼、某种毒素与药物摄入后,ＭＹO 都会升高。
因此,采用血清MＹO 水平作为诊断ＡＭＩ得早期指标，仅限于没有上述相关疾病得患者。
在有急性症状得患者中,4小时内ＭＹO 水平不升高，AMI 得可能性极低.由于在AＭI 后血中MYO 很快从肾脏清除，发病ｌ8~30 小时内可完全恢复到正常水平.故MYO 测定有助于在AMＩ病程中观察有无再梗塞或者梗塞再扩展。
MYＯ频繁出现增高,提示原有心肌梗死仍在延续。
另外，在神经肌肉疾病如肌营养不良、肌萎缩与多肌炎时血清MYＯ水平亦升高。
心脏外科手术患者血清MY Ｏ升高，可以作为判断心肌损伤程度及愈合情况得一项客观指标。
【检验原理】肌红蛋白测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法，其检测原理如下：第一步:将样本与包被着抗肌红蛋白抗体得超顺磁性微粒(磁珠)以及抗肌红蛋白抗体—碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵育,样本中得肌红蛋白与包被在磁珠上得抗肌红蛋白抗体结合,同时抗肌红蛋白抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中肌红蛋白另一位点结合。
肌红蛋白测定SOP_MYO临床意义_检验科生化项目SOP
CrO2-Ab-MYO+ CrO2-Ab + CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+ CrO2-Ab
F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷+ F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷
CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+清洗CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+ CrO2-Ab
10参考文献
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司肌红蛋白（MYO）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：352~353。
编写：审核：批准：
肌红蛋白测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
片剂；7孔为底物稀释剂，缓冲液42 mg/mL，液体；8孔为稳定及，铬片剂，缓冲液，液体。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存，有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD质控液。
3.3校准品
西门子校准品。
3.4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。
CrO2-Ab+ F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷（转移到比色杯）
CPRG（在577nm处不吸收）CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-galCPR（在577nm处吸收）
2标本采集与处理
2.1采血方法
空腹不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
室温保存，及时送检和检测。样本在2~8℃下可存储7天，在–20℃下可保存28天。
肌红蛋白测定测定注意事项
肌红蛋白测定测定注意事项1. 肌红蛋白测定的时候啊，你可别不当回事儿。
就像开车得注意交通规则一样，这测定也有它的规矩。
比如说，测定前千万别剧烈运动啊，你要是刚跑完马拉松就去测，那结果就像被搅乱的一潭清水，准不准可就不好说了。
2. 做肌红蛋白测定，采血的时间也很关键呢。
这就好比种庄稼，啥时候播种啥时候收获都是有讲究的。
不能想啥时候采血就啥时候采。
要是不按照规定的时间，那测得的数据可能就像调皮的小孩，完全不按套路出牌。
3. 采血的部位得注意哦。
你想啊，要是在一个不合适的地方采血，就像在一个坑洼不平的地上盖房子，基础就没打好，那测出来的肌红蛋白能靠谱吗？比如有的地方血管太细或者容易受到挤压，这时候采血就可能影响结果。
4. 在做肌红蛋白测定之前，一定要告诉医生你的用药情况。
这就如同你去餐厅吃饭，要告诉服务员你有没有忌口一样重要。
有些药物可能会像捣蛋鬼一样，干扰测定结果，要是不告诉医生，那可就糟了。
5. 测定肌红蛋白的时候，样本的保存也不容小觑。
这好比保存珍贵的宝藏，得小心翼翼。
要是样本保存不当，就像把宝贝扔在潮湿的角落里，那结果肯定会受到影响，到时候得出个错误的结论，得多闹心啊。
6. 检测仪器的准确性可是重中之重啊。
这就像厨师做菜得有把好刀一样。
如果仪器不准，那就像用一把钝刀切菜，不管你怎么努力，切出来的东西都不会完美。
那测出来的肌红蛋白数值还能信吗？简直是天方夜谭嘛。
7. 操作人员的专业程度也对肌红蛋白测定有影响呢。
你看，就像一个好的领航员能让船顺利航行，一个专业的操作人员才能准确地进行测定。
要是操作人员不熟练，就像让一个新手开飞机，那结果能不出乱子吗？8. 自身的身体状态在做肌红蛋白测定时也得考虑。
比如说，要是你感冒发烧了，身体就像一个正在打仗的战场，内部情况很混乱。
这时候去测定肌红蛋白，结果可能就像战场上的烟雾弹，让人摸不着头脑。
9. 对于肌红蛋白测定的结果，咱可不能盲目相信。
这就跟听别人说话得动动脑子一样。
人肌红蛋白(MYO MB)酶联免疫吸附测定试剂盒 说明书
人肌红蛋白（MYO/MB）酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究研究使用预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中MB含量。
概述Mb是一种氧结合血红素蛋白，分子量17，800道尔顿，主要分布于心肌和骨骼肌组织，在急性心肌梗塞（AMI）时，心肌细胞坏死，Mb稀放入血液中。
在症状出现约2～3小时后，血中Mb可超出正常上限，9～12小时达到峰值，24～36小时后恢复正常。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中MB水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入MB、生物素化的抗人MB抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的MB呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，其浓度为250ng/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成250ng/mL，125ng/mL，62.5ng/mL，31.2ng/mL，15.6ng/mL，7.8ng/mL，3.9ng/mL，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0mg/mL，临用前15分钟内配制。
3.样品稀释液：1×10ml/瓶。
4.抗体稀释液A：1×10ml/瓶。
5.抗体稀释液B：1×10ml/瓶。
6.检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以抗体稀释液A1：100稀释。
7.检测溶液B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以抗体稀释液B1：100稀释。
8.底物溶液：1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
39肌红蛋白液体试剂盒AU400操作规程
肌红蛋白测定试剂【方法】颗粒增强免疫透射比浊终点法。
【原理】使用抗肌红蛋白抗体包被的胶乳颗粒和样品中的肌红蛋白进行抗原-抗体反应。
反应完成后，用透射比浊法检测吸光度的变化反映肌红蛋白浓度。
【操作步骤】R1（试剂1）R2（试剂2）S（TruCal Myoglobin校准品）μl，然后在30s内记录吸光度A1〃R1: 160 μlΔA=[(A2－A1) 校准品管或样品管] – [(A2－A1)空白管]【计算】按照公司配套校准品使用要求，用4个不同水平的校准液，并以9 g/L氯化钠溶液为空白，经校准测定，仪器自动对校准品响应量通过合适的数学模型如Logit/Log，拟合成校准曲线。
校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。
校准稳定期：4周【订货信息】货号试剂盒规格1 7039 99 10 730 试剂1 2×20ml＋试剂2 2×15ml1 7030 99 10 058 4×1 ml TruCal Myoglobin （肌红蛋白校准品）4个不同浓度水平的校准品【参考范围】成人< 70 μg/L（注：各实验室应有自己的参考范围。
）【性能指标】病人结果可报告范围本法的检测范围为3～600 μg/L。
如样品测定值超过600 μg/L 时，应用9 g/L氯化钠溶液将样品作1+ 2稀释，重新测定，结果乘以3。
前带限制血清肌红蛋白值≤ 15000 μg/L时，没有观察到前带效应。
特异性/干扰DiaSys公司提供的肌红蛋白试剂中的抗体只特异地与人肌红蛋白发生免疫反应。
当样品中抗坏血酸浓度≤ 1704 μmol/L，胆红素浓度≤ 684 μmol/L，血红蛋白浓度≤ 4.00 g/L，甘油三酯浓度≤ 11.3 mmol/L时没有观察到干扰。
灵敏度/检测限本试剂的检测限为3 μg/L。
方法学比较本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对62个样品进行MYO检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+14.1 μg/L；r = 0.995。
肌红蛋白测试标准操作流程
肌红蛋白测试标准操作流程一实验组成1 实验仪器及器具：Mini VIDAS全自动分析仪一台、洁净工作台、低速离心机、20~200µl加样器2 试剂盒组成：MYO试剂条说明：试剂条上有 10 个孔，用贴有标签的铝箔密封二实验原理一步免疫分析夹心方法（sandwich）和最后荧光检测（ELFA）样品被吸取到含有用碱性磷酸酶（共扼物）标记的抗肌红蛋白抗体的孔中。
样品/共扼物混合物在运行中进出固相包被针SPR数次。
该操作使抗原结合到固定在固相包被针 SPR内壁的免疫球蛋白上，并结合到共扼物上，以形成“夹心”。
没有结合的组分在冲洗步骤中清除。
在最后检测步骤中，将底物（磷酸4 甲基-伞形烷）循环进出固相包被针 SPR。
共扼物酶催化本底物水解成荧光产物（4-甲基伞形酮）。
该产物的荧光在 450nm下测量。
荧光强度与样品中出现的抗原的浓度成正比。
分析结束的时候，由VIDAS根据储存在存储器中的校正曲线，自动计算结果，然后打印输出三标本1 检测样本：150µl血清或血浆 (肝素锂)由于EDTA或柠檬酸钠引起所测量的数值的下降，所以不可使用在EDTA或柠檬酸钠上采集的血浆2 影响因素没有发现下列因素对分析有显著影响：（1）溶血 (用血红蛋白形成尖峰样品（spiking）之后：0到292 µmol/l 或 0 到 470 mg/dl)（2）脂血症(在用脂质形成尖峰样品（spiking）之后：0到 30 g/ml，等价于在三酸甘油酯中)（3）胆血症(在用胆红素形成尖峰样品（spiking）之后：0到540µmol/l)（4）肝素（最高达 50IU/ml）但无论如何,建议不要使用明显溶血、脂血症、胆血症的样本，如可能的话，重新收集样本。
四操作程序1 标准曲线条码(MLE)输入在每使用新一批试剂前，必须用每一试剂盒中都有的MLE卡（规格单）将规格（或工厂主校正曲线数据）输入仪器。
步骤如下：（1）按Master Lot Menu（2）放入MLE卡片（3）按Read Master Lot（4）按A或B读取完成后，仪器会自动打印相应信息2 校准曲线当新一批试剂开启时，在主批次数据 (MLE卡片)输入后，应用试剂盒中的两种校准液执行校准，然后每 14 天应重新校正一次。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
肌红蛋白定量测定
1.原理
抗原或抗体包被的微粒子，是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，悬浮性极佳，微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。
标本与微粒子以一定比例混合，标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应，以反应终了后，反应液的一部分被移到玻璃纤维上，洗去未反应的被检物质与其它的不要成份，加入基质液，基质液被碱性磷酸所分解生成Methylumbelliferone。
当该物受荧光照射后就产生荧光，测定荧光强度的分化率，从而决定被测物质的浓度。
2.标本采集：
2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2标本种类：血清或血浆。
2.3标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用.采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血3ml，收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。
3.标本储存：待测样本室温不超过8小时，4-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存，避免反复冻融。
4.标本运输：室温运输。
5.标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。
6.试剂：
6.1试剂名称：肌红蛋白诊断试剂盒。
6.2试剂生产厂家：美国雅培制药有限公司
6.3包装规格：100Test/kit
6.4试剂盒组成：肌红蛋白诊断试剂。
6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存2-8℃条件，有效期12个月。
7.仪器设备：
7.1仪器名称：AXSYM免疫自动分析仪
7.2仪器厂家：美国雅培公司
7.3仪器型号：AXSYMTm型
7.4仪器校准：本仪器校准由厂家工程师负责校准。
8.操作步骤：
8.1样本处理：取待测样本血清或血浆置于样本杯中（不能有纤维蛋白，不能有气泡）。
8.2仪器准备：检查纤维杯，反应杯数量满足实验需要，废物桶和废液桶是否连接好，仪器的光路是否正常，环境温度是否符合要求，打印机的连接。
8.3试剂准备与检查：从冰箱取1号液放入仪器，检查所有试剂和缓冲液量是否足够，是否在有效期内。
8.4定标
8.4.1定标步骤：输入主标正曲线（工厂定标），从MAINMENU选择STOREDRESULTS，选择CALIBRATIONREVIEW，选择F4-NEWLOT，选
择F4-SCAN用条码阅读器扫主梭正曲线或用键盘手工输入条码数据，选择F6-SAVE储存主梭正曲线数据.
8.4.2定标申请：从MAINMENU中选择ORDERLIST，选择F4-CAL，选择项目肌红蛋白，输入样品架位置，输入标准品的批号和有效期，选择F6-ADD确认，选择F1-EXIT追回。
8.4.3定标运行：检查试剂盒和消耗品，检查库存，按RUN运行.
8.5质控：质控品分高、中、低三种。
8.5.1质控定义：从MAINMENU中选择CONFIGURATION，选择CONTROL，选择肌红蛋白项目，输入质控名（每个质控名带一个质控水平，高、中、低），选择F2-ADDCONTROL，选择F6-CONTROLDETAILS，选择数据区域（2SD范围），输入质控信息，按ENTER键，选择F6-SAVE 保存质控信息。
8.5.2质控申请：从MAINMENU选择ORDERLIST，选择F5-CONTRL，选择项目肌红蛋白，输入样品架位置，选择分析的质控品水平，高、中、低，选择F6-ADD确认，按F1追加MAINMENU。
8.5.3质控运行：检查试剂，消耗和库存，按RUN键运行。
8.5.4质控浏览
8.5.4.1质控结果浏览：从MAINMENU选择STOREDRESULTS，选择VIEWSTOREDQCRESULTS，选择浏览肌红蛋白质控结果，选择F6-DETAILS。
8.5.4.2质控图浏览：从MAINMENU选择LEVERY-JENNINGSQC，选择项目肌红蛋白，选择质控水平，选择F5-GRAPH浏览。
8.5.5质控要求：所有质控水平必须控制在2SD范围内。
9.标本检测常规操作：
9.1申请病人样品测试
9.1.1单个病人样品申请：从MAINMENU选择ORDERLIST，选择F6-PATIENT，输入样品架位置编号和样品编号，可选择输入病人编号、病人姓名、病人说明等资料。
选择肌红蛋白项目，可选择是否急诊项目，选择F6-ADD确认。
9.1.2样品批处理申请：从MAINMENUT选择ORDERLIST，选择F6-PATIENT，选择F2-BATCH，输入起始样品等的位置，输入起始样品编号，输入测试的样品数，选择项目肌红蛋白，选择F6-ADD确认。
9.2检测结果查看：
从MAINMENU选择STOREDRESULTS，选择PATIENTREPORT，选择要查看的编号，选择F6-DETAILS。
9.3检测结果打印和保存：清单打印和详情单打印，结果硬盘保存，软盘保存，传输到PC电脑保存。
10.结果计算：利用点对点数据产生方法来产生标准曲线利用率A 的方法来产生主标准曲线，并根据标准曲线计算最终样品浓度.
11.参考范围：＜116.3ng/ml
12.临床意义：
12.1肌红蛋白是心梗病人出现最早的标志之一，一般在梗死后1-4小时开始升高，6-7小时达高峰，24小时恢复正常，对急性心梗诊断有较高特异性。
12.2MB峰值的高度与心肌损伤或坏死的范围成正比。
13.操作性能：FlexibleProtocolTMProcessing技术为免疫检测程序的
最优化步骤，此技术被运用于样本处理，试剂处理，吸样处理和分析处理等整个检测过程中，检测程序各步骤被处理或完全独立的分析基元，不同的分析技术，步骤和过程可在同一台仪器上同时进行，使整个分析表现（如灵敏度，特异性，精密度，准确性等）达到最佳状态，同时使分析过程成为真正的随机连读分析步序，达到最快出结果的速度。
14.超出范围结果处理：检测样本中肌红蛋白值在1000ng/ml范围内可直接报告，如结果大于1000ng/ml，可做相应的稀释后重测。
15.方法局限性：检测样本不能溶血，脂血或黄疽血，不同批量试剂不能混用，必须使用原厂试剂。
16.病危报警值的处理：当肌钙蛋白＞2.4ng/ml，肌红蛋白＞116.3ng/ml，立即复核，立即通知临床医生。
17.当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家代理商，进行紧急维修，如一时不能修好，如别实验室有同类仪器可到别的仪器上测试，如别的实验室无同类仪器，可改用其它方法进行检测（如酶联免疫法）。
18.参考文献：
朗江明等临床免疫诊断学，2003.03
19.其他：
19.1试剂只用于体外检测试剂。
19.2仪器必须严格按保养和维护进行。
19.3保持消耗品的清洁，消耗品必须在原包装条件下保存。
19.4样品中如有颗粒物质必须离心驱除，注意溶血，脂血或黄疸血
的可能干扰，如是冷冻样品，融解后必须彻底混匀，避免样品反复冻融。
19.5只有人源样品可用于检测。
19.6所有废品应进行相应的处理后装在专用塑料袋中，丢弃在指定地点。