氨基酸态氮的测定

FSPTWPJY003 酱油 氨基酸态氮的测定 中和滴定法

F_SP _TWP_JY _003

酱油—氨基酸态氮的测定—中和滴定法

1 范围

本方法采用滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量。

本方法适用于各种类型酱油中氨基酸态氮含量的测定。以g/100mL 报告其结果，测定值保留两位小数。

2 原理

利用氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，用氢氧化钠标准溶液滴定后定量，以酸度计测定终点。

3 试剂

3.1 甲醛溶液，体积百分数为37~40。

3.2 氢氧化钠标准溶液，c (NaOH)＝0.1mol/L

3.2.1 配制

将氢氧化钠配成饱和溶液，注入塑料瓶（或桶）中，封闭放置至溶液清亮，使用前虹吸上层清液。量取5mL 氢氧化钠饱和溶液，注入1000mL 不含二氧化碳的水中，混匀。

3.2.2 标定

称取0.6g 于105～110℃烘至恒量的基准邻苯二甲酸氢钾，精确至0.0001g 。溶于50mL 不含二氧化碳的水中，加入2滴酚酞指示剂溶液，以新制备的氢氧化钠标准溶液滴定至溶液呈微红色为其终点。同时做空白试验。

3.2.3 计算

按下式计算氢氧化钠标准溶液的浓度：

C ＝2042

.0)(1×−V V m 式中：C —氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L ；

m —基准邻苯二甲酸氢钾的质量，g ；

V —滴定时所消耗氢氧化钠溶液的体积，mL ；

V 1 —空白试验消耗氢氧化钠溶液的体积，mL ；

0.2042—与1.00mL 氢氧化钠标准溶液[c (NaOH)=1.000mol/L]相当的，以克表示的

邻苯二甲酸氢钾的质量。

3.3 氢氧化钠标准滴定溶液，c (NaOH)＝0.05mol/L

将配制的0.1mol/L 氢氧化钠标准溶液准确稀释一倍。

4 仪器

4.1 分析天平，感量0.1mg 。

4.2 酸度计，附磁力搅拌器；

4.3 碱式滴定管，25mL 。

5 操作步骤

5.1 仪器校准

按仪器使用说明书校正pH 计，并注意校正温度使其与测定时保持一致。

将玻璃电极和甘汞电极事先用pH 9.22标准缓冲溶液校准。

5.2 样品的测定

吸取酱油样品5.0mL 置于100mL 容量瓶中，加水至刻度，混匀后吸取20.0mL ，置于200mL 烧杯中，加水60mL ，插入玻璃电极和甘汞电极，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准滴定溶液

滴定至酸度计指示pH=8.2。

加入10.0mL 甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至酸度计指示pH=9.2，计下消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数。

同时取80mL 水，先用氢氧化钠标准滴定溶液调节pH 为8.2，再加入10.0mL 甲醛溶液，混匀。用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至酸度计指示pH=9.2，同时做试剂空白试验。 6 结果计算

样品中氨基酸态氮的含量按下式计算：

100100

5014.0)(31121××××−=V c V V X 式中：X 1—样品中氨基酸态氮的含量（以氮计），g/100mL ；

V 2—滴定样品稀释液消耗0.05mol/L 氢氧化钠标准滴定溶液的体积，mL ；

V 1—空白试验消耗0.05mol/L 氢氧化钠标准滴定溶液的体积，mL ；

V 3—样品体积，mL ；

c 1—氢氧化钠标准滴定溶液的浓度，mol/L ；

0.014—1.00mL 氢氧化钠标准滴定溶液[c (NaOH)=1.000mol/L]相当于氮的质量，g 。 6 精密度

同一样品两次平行测定值之差，不得超过0.03g/100mL 。

7 参考文献

GB/T18186－2000 “酿造酱油” 中“6.4 氨基酸态氮”。