血细胞计数板的使用课件
合集下载
血球计数板PPT课件
方格又分成25个小方格；另一种是一个计数
区分成25个中方格（中方格之间用双线分
开），而每个中方格又分成16个小方格。但
是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个
共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为
1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。盖
上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以
6．测数完毕，取下盖玻片，用水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗 刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入 盒内保存。
7.对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵 母菌个数。
-
5
计算公式 (1)16格×25格的血球计数板计算公式： 酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数
血球计数板
-
1
基本构造
• 血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片 上有四个槽构成三个平台。中间的平台较宽， 其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上 面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大 方格，中央的一大方格作为计数用，称为计数 区。
-
2
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16
个中方格（大方格用三线隔开），而每个中
-
4
5．计数时若计数区是由16个中方格组成，按对角线方位，数左上、左下、 右上、右下的4个中方格（即100小格）的菌数。如果是25个中方格组成的计 数区，除数上述四个中方格外，还需数中央1个中方格的菌数（即80个小 格）。为了保证计数的准确性，避免重复计数和漏记，在计数时，对沉降在 格线上的细胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方格的双线上，计数时 则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。即位于本格上线和左线 上的细胞计入本格。
血细胞计数板的使用
评估治疗效果
抗生素治疗效果评估
通过血细胞计数板监测白细胞数量变 化，有助于评估抗生素治疗效果，指
导抗生素的合理使用。
贫血治疗效果评估
通过血细胞计数板监测红细胞参数变 化，有助于评估贫血治疗效果，指导
贫血治疗方案的调整。
血液肿瘤治疗效果评估
通过血细胞计数板监测异常细胞数量 变化，有助于评估血液肿瘤治疗效果，
02
血细胞计数板使用步骤
准备阶段
01
02
03
04
清洁与准备
确保计数板和盖玻片清洁，无 污渍和尘埃。
标记与编号
在血细胞计数板的每个大方格 上标记样本编号，以便后续识
别。
样本制备
将待测血液样本进行稀释，通 常使用等量稀释法，即将一滴 血液加入等量的稀释液中。
温度与时间
确保实验室温度适宜，避免温 度波动影响实验结果。
03
血细胞计数板使用注意事 项
清洁度要求
清洁计数板
每次使用前，应确保计数板清洁 无污染，避免杂质干扰计数结果 。
清洗方法
使用温和的洗涤剂清洗，然后用 清水冲洗干净，最后用干净的纱 布擦干。
操作规范
样本制备
将待测血液样本稀释至适当浓度，以便在计数板 上进行准确计数。
计数步骤
按照规定的操作步骤，逐格进行计数，并记录每 个格子中的血细胞数量。
血细胞计数板使用原理基于血细胞的体积和数量之间的关系 。由于不同种类的血细胞具有不同的体积，因此可以通过测 量一定体积的血液样本中包含的血细胞数量来计算各种血细 胞的浓度。
通过将血液样本滴入计数板的网格中，并使用显微镜观察， 可以计算每个小格中血细胞的数量。然后，通过计算整个血 液样本中包含的血细胞数量，可以得出各种血细胞的浓度。
血球计数板计数法培训课件
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
计数室的刻处度，一请般联系有网两站或种本规人格删除，。一种是一个 大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25 个小方格，共400小格；另一种是一个大方格分 成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格， 总共也是400小格。所以无论是哪种规格的计数 板，每一个大方格中的小方格数都是相同的。 每一个大方格边长为1㎜，则每一大方格的面积 为1㎜2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的 高度为0.1㎜，所以计数室的容积为0.1㎜3。
a×105×b
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
例4、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若 计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个小方格组成， 如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 ▲ 后 再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5 个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 ▲ 个。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
血球计数板处，，请通联常系是网站一或块本人特删制除的。 载玻片，其上 由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽 隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每 个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数 室，微生物的计数就在计数室中进行。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
推导：1mm×1m处m，方请联格系的网计站或数本人删除。
血球计数板的使用(有图指导)
血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.。
血球计数板的使用(3-4)
1毫升菌液中的总菌数=A/4×16×10000×B=40000A·B（个） 四个中方格的总菌数为A,菌液稀释倍数为B
血球计数板的使用——清洗血球计数板
流水冲洗计数板，切勿用硬物洗刷，洗完 后自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察 每小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。 若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。
血球计数板的适用范围
这种方法适用于个体较大细胞或颗粒，除霉菌孢子外，还比如酵母细胞，血 细胞等。不适用于细菌等个体较小的细胞，因为细菌细胞太小，不易沉降； 在油镜下看不清网格线，超出油镜工作距离。 这种方法能快速，准确计数，对酵母菌可同时测定出芽率，或在菌悬液中加 入展
• 样品计数还有哪些方法可以完成？
血球计数板的使用注意事项
1. 血球计数板的清洗方法 2.计数规则计数时若遇位于中格线上的菌体遵循计上不计下，计左不计右原则，
防止重复计数。 3.对同一样品重复计数两次，取其平均值；若两次数据相差太大，则需重复计数。 4.加样时不能产生气泡，如有菌液粘在计数区内的盖玻片上表面，则应弃去盖玻
片，洗净计数板后重新加样。
中格（可选4个角和中央的中格）中的菌体进行计数。计数一个样品要从两个 计数室中计得的值求平均。
光强调节
显微镜10倍物镜下观察的25个中方格 显微镜40倍物镜下观察到的16个小方格
血球计数板的使用——计算
各中格中菌数
A
1
2
3
4
5
第一室
B
菌数/mL 二室平均数
第二室
1毫升菌液中的总菌数=A/5×25×10000×B=50000A·B（个） 五个中方格的总菌数为A,菌液稀释倍数为B
血球计数板的使用——加样
将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细管将菌悬液由 盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入并充满计数室。
血球计数板的使用——清洗血球计数板
流水冲洗计数板，切勿用硬物洗刷，洗完 后自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察 每小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。 若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。
血球计数板的适用范围
这种方法适用于个体较大细胞或颗粒，除霉菌孢子外，还比如酵母细胞，血 细胞等。不适用于细菌等个体较小的细胞，因为细菌细胞太小，不易沉降； 在油镜下看不清网格线，超出油镜工作距离。 这种方法能快速，准确计数，对酵母菌可同时测定出芽率，或在菌悬液中加 入展
• 样品计数还有哪些方法可以完成？
血球计数板的使用注意事项
1. 血球计数板的清洗方法 2.计数规则计数时若遇位于中格线上的菌体遵循计上不计下，计左不计右原则，
防止重复计数。 3.对同一样品重复计数两次，取其平均值；若两次数据相差太大，则需重复计数。 4.加样时不能产生气泡，如有菌液粘在计数区内的盖玻片上表面，则应弃去盖玻
片，洗净计数板后重新加样。
中格（可选4个角和中央的中格）中的菌体进行计数。计数一个样品要从两个 计数室中计得的值求平均。
光强调节
显微镜10倍物镜下观察的25个中方格 显微镜40倍物镜下观察到的16个小方格
血球计数板的使用——计算
各中格中菌数
A
1
2
3
4
5
第一室
B
菌数/mL 二室平均数
第二室
1毫升菌液中的总菌数=A/5×25×10000×B=50000A·B（个） 五个中方格的总菌数为A,菌液稀释倍数为B
血球计数板的使用——加样
将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细管将菌悬液由 盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入并充满计数室。
实验二--血细胞计数PPT课件
避免漏数或重复计数。
2021/3/12
9
感谢您的阅读收藏，谢谢！
2021/3/12
10
2021/3/12
5
2021/3/12
6
2021/3/12
7
2021/3ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ12
8
注意事项
1. 保证计数板和盖玻片清洁；以防影响计数结果的准确 性。
2. 一次完成充池，如充池过少、过多、有气泡或出现任何 碎片，应拭净计数板及盖玻片后重新操作。
3. 充池后平放计数板，不能移动盖玻片。 4. 计数板中细胞如果严重分布不均，应重新充池计数。 5. 凡压线的细胞应按照数上不数下、数左不数右的原则，
实验二 血细胞计数
2021/3/12
1
2021/3/12
2
2021/3/12
3
2021/3/12
4
实验操作
1．熟悉并清洗计数板和盖玻片 2．稀释血液：取血：20l （一定要准确）
红细胞稀释液：肝素生理盐水 200x 白细胞稀释液：冰醋酸 20x 3．充池：（混匀，从中间取） 4．静置计数板 2min 5．计数 6．计数原则：数上不数下、数左不数右 7. 计算：红细胞数/L=N*25/5*10*106*200=N*1010 白细胞数/L=N/4*10*20*106=N*5*107
2021/3/12
9
感谢您的阅读收藏，谢谢！
2021/3/12
10
2021/3/12
5
2021/3/12
6
2021/3/12
7
2021/3ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ12
8
注意事项
1. 保证计数板和盖玻片清洁；以防影响计数结果的准确 性。
2. 一次完成充池，如充池过少、过多、有气泡或出现任何 碎片，应拭净计数板及盖玻片后重新操作。
3. 充池后平放计数板，不能移动盖玻片。 4. 计数板中细胞如果严重分布不均，应重新充池计数。 5. 凡压线的细胞应按照数上不数下、数左不数右的原则，
实验二 血细胞计数
2021/3/12
1
2021/3/12
2
2021/3/12
3
2021/3/12
4
实验操作
1．熟悉并清洗计数板和盖玻片 2．稀释血液：取血：20l （一定要准确）
红细胞稀释液：肝素生理盐水 200x 白细胞稀释液：冰醋酸 20x 3．充池：（混匀，从中间取） 4．静置计数板 2min 5．计数 6．计数原则：数上不数下、数左不数右 7. 计算：红细胞数/L=N*25/5*10*106*200=N*1010 白细胞数/L=N/4*10*20*106=N*5*107
血细胞计数板课件 高中生物
抽样检测法
J
消耗
积 累
改 变
S
时间
酵母菌数量
培养液的体积等
二、探究实验设计
1.实验目的：初步学会酵母菌等微生物的计数及种群数量变化曲线的绘制。2.实验原理：用液体培养基（培养液）培养酵母菌，种群的增长受培养液的成分、空间、pH、温度等因素的影响。3.提出问题：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？4.材料用具：酵母菌、无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血细胞计数板、滴管、显微镜等。
抽样检测
有氧
出芽
培养液的成分、空间、pH、温度
液体培养基
真核
二、培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？
怎样进行酵母菌计数培养液中的酵母菌数量一开始呈“______”型增长；随着时间推移，由于营养物质的______、有害代谢产物的__________、pH的_________，酵母菌数量呈_________型增长。自变量：________________________因变量：________________________无关变量：_______________________
只计相邻两边及其顶角上的酵母菌，一般遵循“计上不计下，计左不计右”的原则。
死亡细胞多集结成团；可以借助台盼蓝染色（死亡细胞呈蓝色）
注意事项
取样时间需一致，且应做到随机取样（每天同一时间取样，或者每隔相同一段时间取样）；计数时应不时调节焦距，才能观察到不同深度的菌体。按公式计算每1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。活酵母有出芽生殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。
C
思考讨论
1、从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？2、如果一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清，应当采取什么措施？3、对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数?4、怎么分辨死亡细胞和有活性的细胞？
J
消耗
积 累
改 变
S
时间
酵母菌数量
培养液的体积等
二、探究实验设计
1.实验目的：初步学会酵母菌等微生物的计数及种群数量变化曲线的绘制。2.实验原理：用液体培养基（培养液）培养酵母菌，种群的增长受培养液的成分、空间、pH、温度等因素的影响。3.提出问题：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？4.材料用具：酵母菌、无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血细胞计数板、滴管、显微镜等。
抽样检测
有氧
出芽
培养液的成分、空间、pH、温度
液体培养基
真核
二、培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？
怎样进行酵母菌计数培养液中的酵母菌数量一开始呈“______”型增长；随着时间推移，由于营养物质的______、有害代谢产物的__________、pH的_________，酵母菌数量呈_________型增长。自变量：________________________因变量：________________________无关变量：_______________________
只计相邻两边及其顶角上的酵母菌，一般遵循“计上不计下，计左不计右”的原则。
死亡细胞多集结成团；可以借助台盼蓝染色（死亡细胞呈蓝色）
注意事项
取样时间需一致，且应做到随机取样（每天同一时间取样，或者每隔相同一段时间取样）；计数时应不时调节焦距，才能观察到不同深度的菌体。按公式计算每1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。活酵母有出芽生殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。
C
思考讨论
1、从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？2、如果一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清，应当采取什么措施？3、对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数?4、怎么分辨死亡细胞和有活性的细胞？
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
计数室
血细胞计数板的使用
3
计数室的规格
（400小格）
中2格5x1小6格
16x25（400小格）
中格 小格
血细胞计数板的使用
4
二、血细胞计数板的使用步骤
1．镜检计数室 在加样前，先对计数
板的计数室进行镜检。
若有污物，则需 清洗，
吹干后才能进行计数。
3．计数 稍待片刻，待酵母
菌全部沉降到计数室底，部后 将计数板放在载物台的 中央，先在低倍镜下找
到 计数室 ，再换高倍
2．加样品
镜观察、计数并记录。
先将盖玻片放在计数室上,
用吸管吸取培养液,滴于盖玻
片 边缘,让培养液自行渗入 。
多余培养液用 滤纸 吸去。
血细胞计数板的使用
5
注意事项
1、计数时要求每小格内约有 4—5 个菌
体为宜。因此培养后期需要对菌液进
行 稀释 。
2、若选用25×16规格的计数板则选
血细胞计数板的使用
1
1 血细胞计数板的结构 2 血细胞计数板的使用 3 5 血细胞计数板的计算
血细胞计数板的使用
2
一、血细胞计数板的结构
中间平台分为两半， 各刻有一个方格网。
方格网
方格网内有九个大方 格，中间的一个大方格就 是计数室。
计数室的边长一般为 1mm,计数室的高度为 0.1mm，因此计数室的 容积为0.1mm3。
因此要想统计活菌数，必须对菌体 染色 (如台盼 蓝）。 未被染色的为活菌！
5、血细胞计数板洗涤方法： 先浸泡后冲洗 ， 不能用试管刷。
血细胞计数板的使用
7
三、利用血细胞计数板进行计算
2如5x何1计6规算格1m：l培4养个液中中方格（8通0小过格1个）小中方酵格母中菌酵数目 酵母菌的数目（N ）？ 母菌的80数目去推算
血细胞计数板的使用
10
16x25规格：4个中方格（100小格）中酵母菌数目 100
1个小方格中酵母菌
的平均数 X 稀释倍数
1个小方格的体积
0.11x1/400m2m3 1
=N
1ml
2
1ml=1cm3=103mm3 0.1x1/5400x10-3 ml
3
4 3 血细胞计数板的使用
4
8
血细胞计数板的使用
9
此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！
5
个
中方格（共 80 小格）计数，若选用
16×25规格的计数板则选 4 个中方格（共 100 Nhomakorabea格）计数。
1
2
1
5
3
4
3
血细胞计数板的使用
2
4
6
注意事项
3、位于小方格边界线上的菌体一
般只数 上方和左边 线上的。
如遇酵母出芽，芽体大小达到母细
胞的一半时，即作 两 个菌体计数。
4、在显微镜下观察到的菌体有活菌也有死菌。