人类染色体核型报告解读PPT教学课件
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人类染色体非显带核型分析PPT课件
人类染色体 非显带核型分析
•1
一、实验目的
1、熟悉人类各对染色体的形态特征
(这是对常规标本进行核型分析的主要依 据)
2、掌握人类染色体核型分析的常用方法
•2
染色二体核、型实分析验是细意胞义遗传学研究的基本方法,是
研究染色体数目及形态的重要手段,是临床上用来 发现染色体异常和诊断由染色体异常引起的疾病常 用方法。
•3
三、实验原理
人类体细胞中的23对染色体都有各自特定的形 态结构(包括染色体的长度、着丝点位置、臂 比、随体大小等)特征,而且这种形态特征是 相对稳定的。而这些特征正是验操作步骤
照片来源:取外周血---体外培养---秋水仙素处理--- •5 低渗---固定---制片---染色---观察---显微摄影。
1、将照片中的染色体用剪刀逐个剪下。 2、将剪下的染色体依据主要特征,按人类细胞
遗传学命名的国际体制进行染色体配对,分组。 A组:1-3号染色体 D组:13-15号染色体 B组:4、5号染色体 E组:16-18号染色体 C组:6-12号、X染色体 F组:19、20号染色体
G组:21、22、Y染色体
3、将已配对和分组的染色体逐个粘贴在实验报 告纸上,并书写核型。
•6
•7
五、实验报告
人类染色体非显带核型分析报 告
实验完毕请班干部安排同学做好清洁
•8
•1
一、实验目的
1、熟悉人类各对染色体的形态特征
(这是对常规标本进行核型分析的主要依 据)
2、掌握人类染色体核型分析的常用方法
•2
染色二体核、型实分析验是细意胞义遗传学研究的基本方法,是
研究染色体数目及形态的重要手段,是临床上用来 发现染色体异常和诊断由染色体异常引起的疾病常 用方法。
•3
三、实验原理
人类体细胞中的23对染色体都有各自特定的形 态结构(包括染色体的长度、着丝点位置、臂 比、随体大小等)特征,而且这种形态特征是 相对稳定的。而这些特征正是验操作步骤
照片来源:取外周血---体外培养---秋水仙素处理--- •5 低渗---固定---制片---染色---观察---显微摄影。
1、将照片中的染色体用剪刀逐个剪下。 2、将剪下的染色体依据主要特征,按人类细胞
遗传学命名的国际体制进行染色体配对,分组。 A组:1-3号染色体 D组:13-15号染色体 B组:4、5号染色体 E组:16-18号染色体 C组:6-12号、X染色体 F组:19、20号染色体
G组:21、22、Y染色体
3、将已配对和分组的染色体逐个粘贴在实验报 告纸上,并书写核型。
•6
•7
五、实验报告
人类染色体非显带核型分析报 告
实验完毕请班干部安排同学做好清洁
•8
人类染色体核型报告解读
表现为无精症
特别注意:不能将这些改变与具体临床表现一一挂钩
(引自中山医科大学陈争教授讲义)
三、常见染色体异常核型报告解读
1.染色体数目异常 2.染色体结构异常
1.染色体数目异常
整倍体异常: 产生机率:双雄受精,双雌受精,核内复制,核内有丝分裂
正常人染色体数目 2n 46,XX(XY)
单倍体(生殖细胞)n 23,X(Y)
1、染色质与染色体 染色体 相关知识复习
染色体:细胞间核伸展开的DNA和蛋白质组 成的纤维状物质。
染色体:是染色质紧密盘旋折叠、高度螺旋 化的结果。 在细胞有丝分裂期容易被碱性染料染色, 因而得名。 染色体是遗传物质的载体。
人类有22对常染色体和1对性染色体。
染色体 相关知识复习
染色体 相关知识复习
详式:45,XX,ROB(14ter→14p11::21q11 →21qter)
染色体结构异常
染色体结构异常
倒位(inv): 染色体臂内或臂间发生二次断裂,中间的
片段旋转180度后重接。
染色体结构异常
臂内倒位: 染色体臂内发生二次断裂中间的片段旋转 180度后重接,称臂内倒位。
简式:46,XY,inv(1)(P22P34)
详式:46,xy,inv(1) (pter →p22::p34 →p22::p34 →qter)
染色体结构异常
• 臂间倒位:染色体的长、短臂各发生一次 断裂,中间带着丝粒的片段旋转180度后重 接称臂间倒位。
简式:46,xx,inv(2)(p15q21) 详式:46.xx,inv(2)(pter→p15::q21 →p15::q21
5.同源染色体与姐妹染色体
染色体 相关知识复习
同源染色体:分别来自父本及母本的一对具 有同样基因位点、形状和大小的染色体。
特别注意:不能将这些改变与具体临床表现一一挂钩
(引自中山医科大学陈争教授讲义)
三、常见染色体异常核型报告解读
1.染色体数目异常 2.染色体结构异常
1.染色体数目异常
整倍体异常: 产生机率:双雄受精,双雌受精,核内复制,核内有丝分裂
正常人染色体数目 2n 46,XX(XY)
单倍体(生殖细胞)n 23,X(Y)
1、染色质与染色体 染色体 相关知识复习
染色体:细胞间核伸展开的DNA和蛋白质组 成的纤维状物质。
染色体:是染色质紧密盘旋折叠、高度螺旋 化的结果。 在细胞有丝分裂期容易被碱性染料染色, 因而得名。 染色体是遗传物质的载体。
人类有22对常染色体和1对性染色体。
染色体 相关知识复习
染色体 相关知识复习
详式:45,XX,ROB(14ter→14p11::21q11 →21qter)
染色体结构异常
染色体结构异常
倒位(inv): 染色体臂内或臂间发生二次断裂,中间的
片段旋转180度后重接。
染色体结构异常
臂内倒位: 染色体臂内发生二次断裂中间的片段旋转 180度后重接,称臂内倒位。
简式:46,XY,inv(1)(P22P34)
详式:46,xy,inv(1) (pter →p22::p34 →p22::p34 →qter)
染色体结构异常
• 臂间倒位:染色体的长、短臂各发生一次 断裂,中间带着丝粒的片段旋转180度后重 接称臂间倒位。
简式:46,xx,inv(2)(p15q21) 详式:46.xx,inv(2)(pter→p15::q21 →p15::q21
5.同源染色体与姐妹染色体
染色体 相关知识复习
同源染色体:分别来自父本及母本的一对具 有同样基因位点、形状和大小的染色体。
染色体核型分析ppt课件
分裂相
细胞分裂过程中每个时期的细胞形态特征,包括细胞的 总体形状和遗传物质的变化。
一、名词解释
(中期)分裂相
核型
数量变异
(性染色体丢失/增加、近端着丝粒染色体三体)
结构变异
(缺失、重复、倒位、易位)
二、染色体标本制备
实验耗材
仪器设备: 超净工作台、恒温培养箱、恒温水浴箱、离心机、光学 显微镜、刻度离心管、乳头吸管、棕色试剂瓶、载玻片、 吹风机、玻片架、染色缸
三、染色体核型分析
染色体核型排列
三、染色体核型分析
染色体核型排列
三、染色体核型分析
染色体核型排列
三、染色体核型分析
染色体核型排列
正常:46,XY
大Y:46,XY,Y>18
小Y:46,XY,Y≤G组
三、染色体核型分析
核型检测的可重复性
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获 低渗处理 预固定
固定 制片
预热胰蛋白酶消化25-30s,Giemsa染色10min。 清水冲洗染液,用吹风机吹干。
SUCCESS
THANK YOU
2019/5/6
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获 低渗处理 预固定
固定 制片
要求:0.25%, pH6.8~7.2
作用:固定并维持染色体结 构的完整性
防护:甲醇→毒性, 冰乙酸→刺激性和腐蚀性
制片
离心弃上清,将细胞沉淀震荡悬浮或气泡吹打法轻柔 地重悬细胞。沿管壁缓慢加入固定液0.5-1.0 mL,边 滴加边震荡均匀,静置5 min后离心弃上清。
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获
低渗处理
预固定
固定
制片
细胞分裂过程中每个时期的细胞形态特征,包括细胞的 总体形状和遗传物质的变化。
一、名词解释
(中期)分裂相
核型
数量变异
(性染色体丢失/增加、近端着丝粒染色体三体)
结构变异
(缺失、重复、倒位、易位)
二、染色体标本制备
实验耗材
仪器设备: 超净工作台、恒温培养箱、恒温水浴箱、离心机、光学 显微镜、刻度离心管、乳头吸管、棕色试剂瓶、载玻片、 吹风机、玻片架、染色缸
三、染色体核型分析
染色体核型排列
三、染色体核型分析
染色体核型排列
三、染色体核型分析
染色体核型排列
三、染色体核型分析
染色体核型排列
正常:46,XY
大Y:46,XY,Y>18
小Y:46,XY,Y≤G组
三、染色体核型分析
核型检测的可重复性
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获 低渗处理 预固定
固定 制片
预热胰蛋白酶消化25-30s,Giemsa染色10min。 清水冲洗染液,用吹风机吹干。
SUCCESS
THANK YOU
2019/5/6
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获 低渗处理 预固定
固定 制片
要求:0.25%, pH6.8~7.2
作用:固定并维持染色体结 构的完整性
防护:甲醇→毒性, 冰乙酸→刺激性和腐蚀性
制片
离心弃上清,将细胞沉淀震荡悬浮或气泡吹打法轻柔 地重悬细胞。沿管壁缓慢加入固定液0.5-1.0 mL,边 滴加边震荡均匀,静置5 min后离心弃上清。
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获
低渗处理
预固定
固定
制片
人类染色体PPT优秀课件
分析。
该技术具有高灵敏度、高特异性和高分 辨率等优点,可以检测出微小的染色体 异常,如染色体易位、倒位、插入等。
荧光原位杂交技术在基因诊断、产前诊 断和遗传病研究等领域具有广泛的应用
价值。
基因测序技术
基因测序技术是一种基于高通量测序 的染色体检测技术,通过对基因组进 行全测序或目标区域测序,可以全面 了解染色体的结构和功能。
疾病诊断和治疗
通过研究染色体,可以更 准确地诊断和治疗遗传性 疾病和癌症等疾病。
生物进化研究
染色体变异是生物进化的 重要驱动力,对理解生物 多样性和进化历程具有重 要意义。
染色体研究的前沿技术
高通量测序技术
能够快速、准确地测定染色体的序列,为基因组学和遗传学研究 提供有力支持。
染色体构象捕获技术
能够检测染色体的高级结构,揭示染色体的三维构象和功能。
随着染色体研究的深入, 相关的伦理和法律问题将 引起更多关注和讨论。
THANKS
感谢观看
该技术需要制备染色体标本,通过显微镜观察染色体的形态、数目和排列顺序,从 而判断是否存在染色体异常。
染色体核型分析在产前诊断、遗传病诊断和肿瘤研究等领域具有广泛应用。
荧光原位杂交技术
荧光原位杂交技术是一种基于分子杂交 的染色体检测技术,通过特定的荧光标 记的探针与染色体上的靶序列进行杂交 ,从而对染色体进行定性、定量和定位
这些异常可能导致基因表达异常,促进细胞增殖、分化 和凋亡的异常。
染色体异常如染色体易位、扩增、缺失等与肿瘤的发生 密切相关。
肿瘤细胞中常见的染色体异常包括染色体数目和结构的 变异,如非整倍性、杂合性缺失等。
染色体异常与其他疾病
01
染色体异常与多种疾病的发生有关
该技术具有高灵敏度、高特异性和高分 辨率等优点,可以检测出微小的染色体 异常,如染色体易位、倒位、插入等。
荧光原位杂交技术在基因诊断、产前诊 断和遗传病研究等领域具有广泛的应用
价值。
基因测序技术
基因测序技术是一种基于高通量测序 的染色体检测技术,通过对基因组进 行全测序或目标区域测序,可以全面 了解染色体的结构和功能。
疾病诊断和治疗
通过研究染色体,可以更 准确地诊断和治疗遗传性 疾病和癌症等疾病。
生物进化研究
染色体变异是生物进化的 重要驱动力,对理解生物 多样性和进化历程具有重 要意义。
染色体研究的前沿技术
高通量测序技术
能够快速、准确地测定染色体的序列,为基因组学和遗传学研究 提供有力支持。
染色体构象捕获技术
能够检测染色体的高级结构,揭示染色体的三维构象和功能。
随着染色体研究的深入, 相关的伦理和法律问题将 引起更多关注和讨论。
THANKS
感谢观看
该技术需要制备染色体标本,通过显微镜观察染色体的形态、数目和排列顺序,从 而判断是否存在染色体异常。
染色体核型分析在产前诊断、遗传病诊断和肿瘤研究等领域具有广泛应用。
荧光原位杂交技术
荧光原位杂交技术是一种基于分子杂交 的染色体检测技术,通过特定的荧光标 记的探针与染色体上的靶序列进行杂交 ,从而对染色体进行定性、定量和定位
这些异常可能导致基因表达异常,促进细胞增殖、分化 和凋亡的异常。
染色体异常如染色体易位、扩增、缺失等与肿瘤的发生 密切相关。
肿瘤细胞中常见的染色体异常包括染色体数目和结构的 变异,如非整倍性、杂合性缺失等。
染色体异常与其他疾病
01
染色体异常与多种疾病的发生有关
染色体核型分析PPT课件
主要试剂: 秋水仙素、低渗液、卡诺氏固定液、吉姆萨染液、胰酶 、1N HCl、1N NaOH、MEF培养基、PBS
前期处理
样品要求:对数期生长, 状态良好,紧密度高,折 光性好,细胞量≥T25 / 60 mm平皿 差速贴壁法去除MEF(
KSR培养体系除外) 作用:破坏 终止培养前1~2小时,加入秋纺水锤仙素体(100ug/ml), 最终浓度为0.1~0.2ug/m防l。 护:有剧
染色体核型排列
染色体核型排列
染色体核型排列
染色体核型排列
正常:46,XY
大Y:46,XY,Y>18
小Y:46,XY,Y≤G组
核型检测的可重复性
染色体标本制备及核型分析
玻片标本质量评价
分裂相密度
足够 适当提高固定液中冰醋酸比 例;制备较多的玻片
玻片标本质量评价
分裂相形态-紧密度
过密
适中
过密:适当提高固定液中冰 醋酸比例;
玻片标本质量评价
分裂相形态
过密
适中
过密:适当提高固定液中冰 醋酸比例,增加滴片高度;
玻片标本质量评价
分裂相形态ຫໍສະໝຸດ 重叠尽量将细胞吹打 成单细胞悬液; 滴片时勿重复滴
低渗处理
预固定
固定
制片
用滴管吸取细胞悬液,高空滴在冰冻玻片上,立即在 酒精灯的火焰下过火几次,置80℃烤箱中烤片2h。
实验步骤
细胞收获 低渗处理 预固定
固定
要求:洁净、冰冻 处理:逐片清洗(洗洁精→ 超声波→自来水→纯水), 95%乙醇浸泡24 h,纯水逐片 刷洗,放置于装有纯水的器
皿中,4 ℃保存。
染色体标染本制色备体及核核型型分析分析
质量保障部 Faye
一、名词解释
前期处理
样品要求:对数期生长, 状态良好,紧密度高,折 光性好,细胞量≥T25 / 60 mm平皿 差速贴壁法去除MEF(
KSR培养体系除外) 作用:破坏 终止培养前1~2小时,加入秋纺水锤仙素体(100ug/ml), 最终浓度为0.1~0.2ug/m防l。 护:有剧
染色体核型排列
染色体核型排列
染色体核型排列
染色体核型排列
正常:46,XY
大Y:46,XY,Y>18
小Y:46,XY,Y≤G组
核型检测的可重复性
染色体标本制备及核型分析
玻片标本质量评价
分裂相密度
足够 适当提高固定液中冰醋酸比 例;制备较多的玻片
玻片标本质量评价
分裂相形态-紧密度
过密
适中
过密:适当提高固定液中冰 醋酸比例;
玻片标本质量评价
分裂相形态
过密
适中
过密:适当提高固定液中冰 醋酸比例,增加滴片高度;
玻片标本质量评价
分裂相形态ຫໍສະໝຸດ 重叠尽量将细胞吹打 成单细胞悬液; 滴片时勿重复滴
低渗处理
预固定
固定
制片
用滴管吸取细胞悬液,高空滴在冰冻玻片上,立即在 酒精灯的火焰下过火几次,置80℃烤箱中烤片2h。
实验步骤
细胞收获 低渗处理 预固定
固定
要求:洁净、冰冻 处理:逐片清洗(洗洁精→ 超声波→自来水→纯水), 95%乙醇浸泡24 h,纯水逐片 刷洗,放置于装有纯水的器
皿中,4 ℃保存。
染色体标染本制色备体及核核型型分析分析
质量保障部 Faye
一、名词解释
人类染色体及异常PPT课件
48
相 互 易 位
49
罗 式 易 位
50
染色体异常携带者
携有染色体易位、倒位的个体, 在没有遗传物质缺少或增加 时, 其表型往往正常,但他(她)们在 减数分裂形成配子过程中会出现问 题,产生不正常的配子,导致不孕、 流产、死胎或生育染色体异常后代
51
倒位环
52
倒位环、交换与分离
53
臂间倒位后在减数 分裂时形成的倒位环
65
正 位 插 入
66
重复(duplication):染色 体上某一区段多出一份,
易位及插入是其主要原因
67
30
异倍体或非整倍体
体细胞中的染色体数不 是染色体组的整倍数,而是 比二倍体少或多一条或几条 染色体,如亚二倍体,超二 倍体。是临床上最常见的染 色体异常
31
三体型(trisomy):某号染色体
比正常增多一条。除部分三体型 外,三体型多导致流产,但它是 最常见的染色体数目异常类型
单 体型 ( monosomy ) 某 号 染 色
人类染色体依次编为122号,并 分为7个组(A,B,C,D,E,F 和G组)
11
人类核型分组与 各组形态特征
组别 染色体 大小 着丝粒位置 副缢痕 随体 鉴别
编号
程度
A 13 最大 中央着丝粒 1常见
可鉴别
B 45
大 亚中着丝粒
不易鉴别
C 612,X 中等 亚中着丝粒 9常见
难鉴别
D 1315 Leabharlann 等 近端着丝粒人类染色体及异常
1
人类染色体 人类染色体畸变
2
人类染色体
一、人类染色体的数目、 结构和形态
二、核型及分组 三、染色体显带
相 互 易 位
49
罗 式 易 位
50
染色体异常携带者
携有染色体易位、倒位的个体, 在没有遗传物质缺少或增加 时, 其表型往往正常,但他(她)们在 减数分裂形成配子过程中会出现问 题,产生不正常的配子,导致不孕、 流产、死胎或生育染色体异常后代
51
倒位环
52
倒位环、交换与分离
53
臂间倒位后在减数 分裂时形成的倒位环
65
正 位 插 入
66
重复(duplication):染色 体上某一区段多出一份,
易位及插入是其主要原因
67
30
异倍体或非整倍体
体细胞中的染色体数不 是染色体组的整倍数,而是 比二倍体少或多一条或几条 染色体,如亚二倍体,超二 倍体。是临床上最常见的染 色体异常
31
三体型(trisomy):某号染色体
比正常增多一条。除部分三体型 外,三体型多导致流产,但它是 最常见的染色体数目异常类型
单 体型 ( monosomy ) 某 号 染 色
人类染色体依次编为122号,并 分为7个组(A,B,C,D,E,F 和G组)
11
人类核型分组与 各组形态特征
组别 染色体 大小 着丝粒位置 副缢痕 随体 鉴别
编号
程度
A 13 最大 中央着丝粒 1常见
可鉴别
B 45
大 亚中着丝粒
不易鉴别
C 612,X 中等 亚中着丝粒 9常见
难鉴别
D 1315 Leabharlann 等 近端着丝粒人类染色体及异常
1
人类染色体 人类染色体畸变
2
人类染色体
一、人类染色体的数目、 结构和形态
二、核型及分组 三、染色体显带
染色体核型分析讲课ppt课件
前期处理
样品要求:对数期生长, 状态良好,紧密度高,折 光性好,细胞量≥T25 / 60 mm平皿 差速贴壁法去除MEF ( KSR培养体系除外) 终止培养前1~2小时,加入秋水仙素(100ug/ml), 最终浓度为0.1~0.2ug/ml。
作用:破坏纺锤体 防护:有剧毒、无挥发性 染色体核型因分析素讲:课 时间、浓度
玻片标本质量评价
分裂相形态
√
过密
适中
过散
解决方案
过密:适当提高固定液中冰醋酸比例,增加滴片高度; 过散:适当降低固定液中冰醋酸比例,减小滴片高度。
染色体核型分析讲课
三、染色体核型分析
玻片标本质量评价
分裂相形态
重叠
解决方案 尽量将细胞吹打成单细胞悬液; 滴片时勿重复滴加同一区域。
染色体核型分析讲课
三、染色体核型分析
染色体核型分析
染色体标本制备及核型分析 质量保障部 Faye
染色体核型分析讲课
一、名词解释
二、染色体标本制备
实验耗材 前期处理 实验步骤
三、染色体核型分析
玻片标本质量评价 计数标准、合格指标 染色体核型排列 核型检测的可重复性
染色体核型分析讲课
一、名词解释
核型
一个体细胞中的全部染色体,按其大小、形态特征 顺序排列所构成的图像。
实验步骤
细胞收获
低渗处理
预固定
固定
制片
(1)加入3ml固定液,静置30min,离心弃上清; (2)再次加入3ml固定液,吹打均匀并静置30min
染色体核型分析讲课
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获
低渗处理
预固定
固定
制片
离心弃上清液,根据细胞数量情况,加入1~2 mL固定 液,吹打细胞制成悬液,悬液呈微白色时为最佳。
样品要求:对数期生长, 状态良好,紧密度高,折 光性好,细胞量≥T25 / 60 mm平皿 差速贴壁法去除MEF ( KSR培养体系除外) 终止培养前1~2小时,加入秋水仙素(100ug/ml), 最终浓度为0.1~0.2ug/ml。
作用:破坏纺锤体 防护:有剧毒、无挥发性 染色体核型因分析素讲:课 时间、浓度
玻片标本质量评价
分裂相形态
√
过密
适中
过散
解决方案
过密:适当提高固定液中冰醋酸比例,增加滴片高度; 过散:适当降低固定液中冰醋酸比例,减小滴片高度。
染色体核型分析讲课
三、染色体核型分析
玻片标本质量评价
分裂相形态
重叠
解决方案 尽量将细胞吹打成单细胞悬液; 滴片时勿重复滴加同一区域。
染色体核型分析讲课
三、染色体核型分析
染色体核型分析
染色体标本制备及核型分析 质量保障部 Faye
染色体核型分析讲课
一、名词解释
二、染色体标本制备
实验耗材 前期处理 实验步骤
三、染色体核型分析
玻片标本质量评价 计数标准、合格指标 染色体核型排列 核型检测的可重复性
染色体核型分析讲课
一、名词解释
核型
一个体细胞中的全部染色体,按其大小、形态特征 顺序排列所构成的图像。
实验步骤
细胞收获
低渗处理
预固定
固定
制片
(1)加入3ml固定液,静置30min,离心弃上清; (2)再次加入3ml固定液,吹打均匀并静置30min
染色体核型分析讲课
二、染色体标本制备
实验步骤
细胞收获
低渗处理
预固定
固定
制片
离心弃上清液,根据细胞数量情况,加入1~2 mL固定 液,吹打细胞制成悬液,悬液呈微白色时为最佳。
遗传学课件遗传学实验-人类染色体核型分析
[3] Smith J, Johnson M, Levine A. Karyotyping in clinical practice.
American Journal of Human Genetics, 2017, 91(6): 987-998.
附录:相关图表和数据
图1
人类染色体核型图谱
表1
染色体异常类型及临床表现
障碍等问题。
倒位
染色体倒位是指染色体局部发 生倒转的现象,可能导致胎儿 智力障碍、生长发育迟缓等问 题。
缺失
染色体缺失是指染色体部分缺 失的现象,可能导致胎儿智力 障碍、生长发育迟缓等问题。
重复
染色体重复是指染色体部分重 复的现象,可能导致胎儿智力 障碍、生长发育迟缓等问题。
染色体异常的遗传机制
染色体异常的遗传机制主要包括基因突变和染色体畸变。基因突变是指在基因序 列中发生碱基对的增添、缺失或替换等现象,可能导致胎儿发育畸形、智力障碍 等问题。
实验材料准备
准备好染色体标本、显微镜、染色剂、载玻片、 盖玻片、显微操作器等实验器材和试剂。
实验环境设置
确保实验室环境整洁、无尘,并保持适宜的温度 和湿度。
实验人员要求
实验人员应具备基本的遗传学知识和实验技能, 熟悉实验操作流程和注意事项。
实验操作流程
01
02
03
04
标本制备
采用适当的细胞培养和固定方 法,制备染色体标本。
遗传学课件-人类染色体核型 分析
目录
• 人类染色体介绍 • 染色体核型分析技术 • 人类染色体核型异常 • 染色体核型异常与疾病 • 实验操作和注意事项 • 参考文献和附录
01
人类染色体介绍
染色体的组成和功能
最新医学遗传学实验:人类染色体常规核型分析教学讲义ppt
轻轻吹打1~2min
一次固定: 5 加固定液至6ml,吹打2-
离心7min,弃上清
3min,室温静置20min
注意事项:
秋水仙素用量过大,时间过长,会使分裂细胞增 多,染色体过度收缩而短,乃至染色单体离散; 用量过小则影响分裂相,使分裂细胞少,染色 体细长。
低渗不够,则染色体分散不好;低渗过度,则 细胞破碎,染色体丢失。
离心7min,弃上清 7
滴片、干燥
低渗: 3 加KCL至6ml,轻轻吹打
1~2min,37℃,25min
离心7min,弃上清
二次固定: 6 加固定液至6ml,短暂吹
打,室温静置20min
预固定:
离心7min,弃上清
4 加固定液0.6~0.7ml,
轻轻吹打1~2min
一次固定: 5 加固定液至6ml,吹打2-
注意:
1.用镊子取冰片,千万不要用手摸冰片的表面, 以免染色体不能附着。
2.滴片时要有一定高度,且玻片要稍倾斜。
3.冰片一定要清洁湿冷,易于染色体的分散。
染色
1∶10 Giemsa染液(pH 6.8)染色10min。 流水冲洗,吹风机吹干,镜检。
1 采血、接种、细胞培养 8 终止培养前2小时,加入秋水仙素
4 案例分析
3)试桩
荷载 p / kPa
0
68
136
204
272
340
408
476
544
612
680
0
5
沉降 s / mm
10
15
20 S6
S7
25
S8
30
1#楼场地CFG桩复合地基的承载力特征值可取为200kPa,满
足设计要求。
一次固定: 5 加固定液至6ml,吹打2-
离心7min,弃上清
3min,室温静置20min
注意事项:
秋水仙素用量过大,时间过长,会使分裂细胞增 多,染色体过度收缩而短,乃至染色单体离散; 用量过小则影响分裂相,使分裂细胞少,染色 体细长。
低渗不够,则染色体分散不好;低渗过度,则 细胞破碎,染色体丢失。
离心7min,弃上清 7
滴片、干燥
低渗: 3 加KCL至6ml,轻轻吹打
1~2min,37℃,25min
离心7min,弃上清
二次固定: 6 加固定液至6ml,短暂吹
打,室温静置20min
预固定:
离心7min,弃上清
4 加固定液0.6~0.7ml,
轻轻吹打1~2min
一次固定: 5 加固定液至6ml,吹打2-
注意:
1.用镊子取冰片,千万不要用手摸冰片的表面, 以免染色体不能附着。
2.滴片时要有一定高度,且玻片要稍倾斜。
3.冰片一定要清洁湿冷,易于染色体的分散。
染色
1∶10 Giemsa染液(pH 6.8)染色10min。 流水冲洗,吹风机吹干,镜检。
1 采血、接种、细胞培养 8 终止培养前2小时,加入秋水仙素
4 案例分析
3)试桩
荷载 p / kPa
0
68
136
204
272
340
408
476
544
612
680
0
5
沉降 s / mm
10
15
20 S6
S7
25
S8
30
1#楼场地CFG桩复合地基的承载力特征值可取为200kPa,满
足设计要求。
染色体核型分析技术-PPT精选文档
应用
1、基因定位 2、检测染色体的数目和结构异常 3、遗传病的诊断和产前诊断
FISH 技术的发展
1、单色FISH 2、多色FISH(24种染色) 3、DNA纤维FISH 4、比较基因组杂交
光谱核型分析技术
SKY(spectral
karyotying)光谱染色体自动核 型分析是一项显微图像处理技术,SKY通过 光谱干涉仪,由高品质CCD获取每一个像素 的干涉图像,形成一个三维的数据库并得到 每个像素的光程差与强度间的对应曲线,该 曲线经傅立叶变换之后得到该像素的光谱, 再经由软件分析之后用分类色来显示图像或 将光谱数据转换成相应的红绿蓝信号后以常 规方式显示。
相对长度=——————————————×100% 22条常染色体+X的总长度
短臂指数 着丝粒指数=————————×100% 该染色体长度
长臂长度 臂率=——————×100% 短臂长度
2.常染色体按长度递减的次序以1~22编号,性 染色体则称X和y序和着丝粒位置 划分为7个易区分的组,即以字母A~G表示7组染色 体,并决定将副缢痕和随体作为识别染色体的辅助 指标。
特点
FISH技术作为非放射性检测体系,具有以下优点:1、 荧光试剂和探针经济、安全;2、探针稳定,一次 标记后可在两年内使用;3、实验周期短、能迅速 得到结果、特异性好、定位准确;4、FISH可定位 长度在1kb的DNA序列,其灵敏度与放射性探针相 当;5、多色FISH通过在同一个核中显示不同的颜 色可同时检测多种序列;6、既可以在玻片上显示 中期染色体数量或结构的变化,也可以在悬液中显 示间期染色体DNA的结构。 缺点:不能达到100%杂交,特别是在应用较短的 cDNA探针时效率明显下降。
核型的表示方法:
遗传学实验人类染色体的识别及核型分析.ppt
组型分析能进行染色体分组外,还能对染色体的各种 特征做出定量和定性的描述,是研究染色体的基本手 段之一。利用这一方法可以鉴别染色体结构变异、染 色体数目变异,同时也是研究物种的起源、遗传与进 化,细胞遗传学,现代分类学的重要手段。
2
遗传学实验 2008-3
二、实验原理——人类染色体
2.人类的单倍体染色体组〔n=23〕上约有3000040000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。 各染色体上的基因都有严格的排列顺序,各基因间的
4
遗传学实验 2008-3
表1 人类染色体的主要特征
组别 染色体序号 形态大小 着丝粒位置
次缢痕
随体
A
1-3
B
4-5
最大 次大
M(1、3) SM(2)
SM
I号染色体常见
C 6-12,X(介于7-8 中等 SM 之间)
D
13-15
中等 ST
9号染色体常见 有
E
16-18
F
19-20
小 次小
M(16) SM
9
遗传学实验 2008-3
3、关于剪贴、原那么排列
排列——原那么: 从大到小; 短臂向上; 着丝粒在一条线上; 性染色体单排。
10
遗传学实验 2008-3
五、实验要求
1、对给出的图象进行测量、配对填表2。 2、按照Denver体制规定,分组贴图。
表2 人类染色体分析数据
编号
绝对 长度
相对 长度
G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是 被Giemsa染料染色后而显带,故称之为G显带技术 ,其所显示的带纹分布在整个染色体上。
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遗传学实验 2008-3
G显带
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遗传学实验 2008-3
二、实验原理——人类染色体
2.人类的单倍体染色体组〔n=23〕上约有3000040000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。 各染色体上的基因都有严格的排列顺序,各基因间的
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遗传学实验 2008-3
表1 人类染色体的主要特征
组别 染色体序号 形态大小 着丝粒位置
次缢痕
随体
A
1-3
B
4-5
最大 次大
M(1、3) SM(2)
SM
I号染色体常见
C 6-12,X(介于7-8 中等 SM 之间)
D
13-15
中等 ST
9号染色体常见 有
E
16-18
F
19-20
小 次小
M(16) SM
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遗传学实验 2008-3
3、关于剪贴、原那么排列
排列——原那么: 从大到小; 短臂向上; 着丝粒在一条线上; 性染色体单排。
10
遗传学实验 2008-3
五、实验要求
1、对给出的图象进行测量、配对填表2。 2、按照Denver体制规定,分组贴图。
表2 人类染色体分析数据
编号
绝对 长度
相对 长度
G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是 被Giemsa染料染色后而显带,故称之为G显带技术 ,其所显示的带纹分布在整个染色体上。
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遗传学实验 2008-3
G显带
人类G显带染色体核型分析 ppt课件
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Байду номын сангаас
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A组
第1号染色体:短臂的近侧 部一半有二个深带,但中部 的深带较宽,在处理较好的 标本上,远侧段可见3~4条 浅染的深带。长臂的次缢痕 紧贴着丝粒,着色甚深。且 是多态性的。近侧部为一窄 的浅带,中段和远侧段各有 二条深带。
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第15号染色体:与 第13染色体一样, 着丝粒和短臂均为 深染。长臂近侧部 1/2处有一着色甚深 的宽带。近侧部可 有另一较狭的深带。 在几乎接近末端处 往往有一着色不很 深的带。
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三、实验用品
1、器械:光学显微镜、擦镜纸。 2、试剂:乙酸乙酯、香柏油。 3、材料:正常人染色体G显带标本
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三、实验的方法与步骤
低倍镜下寻 找分散良好 染色体
油镜下仔 细观察分 析染色体
先计数 染色体 总数
注明染色体 号及核型
标明染色 体的组别
描绘染色 体线条图
第7号染色体:着丝粒染色甚深。 短臂上有2~3条深带,处于中部 的那条带通常着色很浅,有时不 明显,远侧端的那条带着色很深, 宛如“并盖”,为一末端带。这 一特征对于鉴别7染色体最有价值。 长臂可见三条明显的深带,近侧 部和中部的二条带着色深,带型 也较宽。
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2020/12/11
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4.随体与端粒
染色体 相关知识复习
随体(s):
近端着丝粒短臂末端的小球状结构,随体 通过随体柄(stk)与短臂相连。
2020/12/11
13
染色体 相关知识复习
端粒:染色体两臂末端特化部位,为高度重 复的DNA序列。端粒是维持染色体稳定的 必要条件。
2020/12/11
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2020/12/11
4
1、染色质与染色体 染色体 相关知识复习
染色体:细胞间核伸展开的DNA和蛋白质组 成的纤维状物质。
染色体:是染色质紧密盘旋折叠、高度螺旋 化的结果。
在细胞有丝分裂期容易被碱性染料染色, 因而得名。
染色体是遗传物质的载体。
人类有22对常染色体和1对性染色体。
2020/12/11
• 染色体异态性一词仍用以说明在临床上没 有明显不良效应的形态变异,以区别城染 色体异常。
(引自周焕庚等《人体染色学》)
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染色体多态的临床意义
• 1,9,16染色体长臂次缢痕增加与不良妊娠有关 • D,G组近端着丝粒染色体的短臂增大与个体不良妊娠
史、出生21三体频率增高有关 • 大Y或小Y有可能导致流产、死胎及畸形儿的出生成
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2020/12/11
4.群体中异态性的频率 染色体的异态性
1qh+ 9qh+ 13s+ 14s+ 15s+ 16qh+ 21p+及s+ 22p+及s+
8.8% 3.7~27% 1.5% 3.5% 7.25% 10% 19% 17%
28
5.异态性的临床意义 染色体的异态性
• 异态性一般涉及遗传上不活跃、含高度重 复DNA的异染色质区,不含编码的基因, 故异态性通常没有不良的临床效应。
单倍体(生殖细胞)n 23,X(Y)
三倍体
Байду номын сангаас
3n 69,XXX(XXY)
46,XY/69,XXY(十余例活产)
四倍体
4n 92,XXXX(1例活产)
46,XY/92,XXYY(2例活产)
2020/12/11
2020/12/11
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人类染色体分组
染色体 相关知识复习
2020/12/11
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3.着丝粒与次缢痕
染色体 相关知识复习
着丝粒(cen):
染色体上一个狭小的结构,两条染色单体在 些部位彼此相连,是有丝分裂中纺缍丝附 着的部位。
次缢痕(h):
是染色体物质稀少或去螺旋化的结果,较常 见于1、9、16及Y染色体长臂近侧,紧靠着 丝粒。
2020/12/11
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3.异态性的常见部位及描述 染色体的异态性 近端着丝粒染色体短臂和随体区
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染色体的异态性
• 1、9、16号染色体异态性表现为次缢痕延 长(1qh+,9qh+,16qh+)
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染色体的异态性
• Y染色体异态性表现为长臂长度的变异 Yqh+(Y>18) Yqh-(Y<G) (为G组染色体长度的1/2以下,较罕见)
P 短臂 Q 长臂 R 环状染色(ring chrmosome) Rob 罗拍逊易位(robertsonian transiocation) S 随体(satellite) Stk 随体病 T 易位 Ter 末端(terminal) / 嵌合体中用于分开不同的细胞系
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二、染色体的异态性(多态性)
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常见异态性核型举例 染色体的异态性
• 46,XX,9QH+ • 46,XX,9qh+,9qh+ • 46,X,Yqh• 46,XX,21ps+ • 46,XY,22pstk+ • 46,XX,17ps • 46,X,Yqs • 46,XX,21pss • 46,Y,Xps
人类染色体核型报告解读
广东省计划生育科研所
2020/12/11
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一、基础知识复习 二、染色体异态性(多态性) 三、常见染色体异常核型报告解读
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人类细胞遗传学
国际命名体制 2005
(中文版)
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一、基础知识复习 1. 染色质与染色体 2. 核型与分组 3. 着丝粒与次缢痕 4. 随体与端粒 5. 同源染色体与姐妹染色体 6. G显带与染色体区常 7. 常用符号和缩写术语
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染色体 相关知识复习
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染色体 相关知识复习
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染色体 相关知识复习
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染色体 相关知识复习
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2.核型及分组
核型(karyotype):
将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排 列起来所构成的图像,称为染色体核型。 据此进行分析诊断,称核型分析。
表现为无精症
特别注意:不能将这些改变与具体临床表现一一挂钩
(引自中山医科大学陈争教授讲义)
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三、常见染色体异常核型报告解读
1.染色体数目异常 2.染色体结构异常
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1.染色体数目异常
整倍体异常: 产生机率:双雄受精,双雌受精,核内复制,核内有丝分裂
正常人染色体数目 2n 46,XX(XY)
染色体 相关知识复习
1、定义:染色体形态的微小变异称染色体的 异态性。主要表现为两条同源染色体的形 态或着色方面的不同。
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2、异态性的一般特征 染色体的异态性
• 按孟德尔方式遗传。 • 集中表现在染色体的一定部位。 • 通常不具有明显的表型或病理学意义。
(引自周焕庚《人体染色学》)
5.同源染色体与姐妹染色体
染色体 相关知识复习
同源染色体:分别来自父本及母本的一对具 有同样基因位点、形状和大小的染色体。
2020/12/11
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染色体 相关知识复习
姐妹染色体:有丝分裂中由一条染色体复制 而成的两条染色单体,仅在着丝粒部位相 连。
2020/12/11
16
6.G显带与染色体区带
染色体 相关知识复习
G显带:用胰蛋白酶处理固定于载玻片上的染 色标本,再用giemsa染液染色的显带技术。
2020/12/11
17
2020/12/11
18
7.常用符号和缩写术语
染色体 相关知识复习
→ 从…到 … : 断裂 :: 断裂与重接 + 增加 - 减少 Del 缺失(deletion) H 次缢痕 Inv 倒位(inversion) ; 重排中用于分开染色体