质粒细胞的管理细则-吉林大学国家级生物教学示范
2022年吉林大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年吉林大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、解释细菌细胞膜结构和功能的学说称为______，系1972年由______ 等提出。
2、病毒只有一种或少数几种酶，在寄主细胞外不能独立地进行______ 和______只有在活______中才表现生命活性，因而是严格的______生物。
3、呼吸链在传递氢或电子的过程中，通过与______反应相偶联，产生了生物的通用能源______，其形成机制可根据英国学者______的______ 学说来解释。
4、蓝细菌的培养可用______培养基。
5、真菌菌丝具有的功能是______和______。
6、微生物与人类关系的重要性，你怎么强调都不过分，微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在给人类带来______的同时也带来______。
7、酸菜、饲料贮存是利用______发酵产生的______抑制______，使之得以长久贮存。
8、微生物生态学是生态学的一个分支，它的研究对象是______与其周围的______和______环境条件间的相互作用规律。
9、普遍转导与局限转导主要区别在于：①普遍转导噬菌体是______噬菌体，而局限转导噬菌体是______噬菌体，②普遍转导噬菌体能转移供体菌的______基因，而局限转导噬菌体只能转移供体菌的______基因。
10、免疫应答过程可分三个阶段，即______、______和______。
二、判断题11、产芽孢细菌的种类很多，尤其是G－细菌更多。
（）12、培养营养缺陷型微生物的培养基必须同时加入维生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶。
（）13、在微生物细胞中，其诱导酶的种类要大大超过组成酶。
（）14、一步生长曲线是用于描述温和噬菌体生长规律的一种实验曲线。
（）15、产生在子囊内的孢子叫孢囊孢子，内生。
（）16、DNA（G＋C）mol%值是微生物（除少数以RNA为遗传物质的病毒）的一个基本遗传特征，它通常以RNA中鸟嘌呤（G）加胞嘧啶（C）的摩尔（mo1）数的百分、比，即（G＋C）mol%来表示。
2022年吉林大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年吉林大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、细、菌细胞中间体的功能主要是______、______、______以及______。
2、由一步生长曲线可获得病毒繁殖的两个特征性数据，即潜伏期和裂解量。
前者为______所需的最短的时间，后者为______的平均数目。
3、Calvin循环可分______、______和______3个阶段。
4、光能有机营养型微生物的能源是______，氢供体是______，基本碳源是______和______，这类微生物的代表如______等。
5、酵母菌有性繁殖一般通过邻近的两个形态相同而性别不同的细胞各自伸出一根管状的原生质突起相互接触、局部融合并形成一条通道，再通过______、______和______形成四个或八个子核，然后它们各自与周围的原生质结合在一起，再在其表面形成一层孢子壁，这样一个个子囊孢子就成熟了，而原有的营养细胞则成了子囊。
6、被誉为微生物学奠基人的是______世纪、______国的______；而细菌学的奠基人则为______国的______。
7、酸菜、饲料贮存是利用______发酵产生的______抑制______，使之得以长久贮存。
8、肠道中的正常菌群主要是厌氧菌，如______、______和______等都是其中的优势菌群。
9、细菌的质粒种类很多，其中接合性质粒如______，抗药性质粒如______，产细菌素质粒如______，诱癌质粒如______，诱生不定根的质粒如______，执行固氮的质粒如______，降解性质粒如______等。
10、在免疫学反应中，抗原抗体反应的一般规律是______、______、______、______、______。
二、判断题11、芽孢杆菌必须处于不利的环境下才形成芽孢。
（）12、Na＋，K＋-ATP酶利用ATP的能量将胞内K＋“泵”出胞外，而将胞外Na＋“泵”入胞内。
BL21(DE3)pLysS感受态细胞使用说明
BL21(DE3)pLysS感受态细胞使用说明BL21(DE3)pLysS感受态细胞使用说明感受态细胞在生物技术领域中扮演着重要的角色，能够有效地表达外源蛋白，并被广泛应用于蛋白质表达、抗体产生、酶工程等方面。
BL21(DE3)pLysS是一种常用的感受态细胞系，本文将对其使用说明进行详细介绍。
一、BL21(DE3)pLysS细胞的特点BL21(DE3)pLysS细胞是一种缺失棘突病毒抗性基因（lysozyme）的感受态大肠杆菌细胞系。
该细胞系具有以下特点：1. 能够高效表达外源蛋白，产量较高，适用于大规模蛋白质表达。
2. 具备感受态特性，能有效产生T7 RNA聚合酶，并且对T7启动子响应较高。
3. 细胞表面表达了T7 RNA聚合酶抑制蛋白（LysS），能够抑制内源性T7 RNA聚合酶的活性，避免了胞内T7 RNA聚合酶的自主大量表达。
二、感受态细胞的培养条件BL21(DE3)pLysS感受态细胞的培养条件与常规大肠杆菌细胞类似，但需要特别留意以下几点：1. 培养基的选择：常用的培养基有LB、TB等。
推荐使用TB培养基，因其含有较高浓度的氨基酸和糖源，可促进蛋白表达。
2. 抗生素选择：推荐添加适量的抗生素（如氨苄青霉素、克林霉素等）以维持感受态细胞的稳定性。
3. 培养温度和转入T7 RNA聚合酶的方式：通常将感受态细胞在37℃下培养至对数期后，加入适量IPTG等诱导剂，激活细胞中的T7 RNA聚合酶基因表达。
也可以在低温（如18℃）下诱导，有助于获得可溶性的重组蛋白。
4. 培养时程：培养时程根据不同的蛋白表达情况而定，通常是在对数期至滚筒培养的4-6小时内进行表达。
三、蛋白表达与纯化BL21(DE3)pLysS细胞的主要应用之一是进行外源蛋白的表达和纯化。
下面是一般的表达和纯化步骤：1. 定义目标蛋白：确定所需表达的外源蛋白序列，并构建相应的重组质粒。
2. 转化重组质粒：将构建好的重组质粒转化到感受态细胞中，通过进行抗生素筛选，获得含重组质粒的菌落。
高中生物选修3专题3《胚胎工程》单元测试(一)
31.对进行胚胎移植的优点叙述错误的是( )A.充分发挥雌性优良个体的繁殖能力B.大大缩短了供体本身的繁殖周期C.经移植可得到多个后代D.胚胎移植可以提取药物2.下列能正确表示高等动物胚胎发育顺序的是( )A.受精卵→ 卵裂→囊胚→ 原肠胚→ 组织器官的分化B.卵→ 卵裂→ 原肠胚→组织器官分化C.受精卵→囊胚→ 原肠胚→幼体D.受精卵→ 桑椹胚→囊胚→ 原肠胚→组织器官的分化3.判断卵子是否受精的标志是( )A. 当卵黄膜和透明带的间隙可以观察到一个极体时B. 当卵黄膜和透明带的间隙可以观察到二个极体时C. 当卵黄膜和透明带的间隙可以观察到三个极体时D. 当卵黄膜和透明带的间隙中极体消失时4.胚胎干细胞的特点是( )A.在形态上，表现为体积大，细胞核大，核仁明显；在功能上具有发育的全能性B.在形态上，表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上具有发育的全能性C.在形态上，表现为体积小，细胞核小，核仁不明显；在功能上不具有发育的全能性D.在形态上，表现为体积大，细胞核小，核仁明显；在功能上具有发育的全能性5.下列不是精子、卵子发生的区别的是( )A.初级精母细胞、卵母细胞的形成时间B.M Ⅰ和MⅡ的时间连续性C.成熟生殖细胞是否经过变形D.成熟生殖细胞中染色体的数量6.下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是( )A.受孕母畜体内的早期胚胎能够移植B.受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态C.超数排卵技术要使用一定的激素D.试管婴儿的受精及胚胎发育过程在试管内完成7.杜泊羊具有生长快、肉质好等优点，科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示。
下列问题叙述不正确的是：( )A.获取杜泊羊的卵母细胞时，可对供体母羊注射促性腺激素，使其排出更多的卵子B.为保持精子与卵母细胞活性，采集到卵母细胞与精子后马上进行体外受精C.体外培养受精卵时，合成培养基中通常需提供CO2 以维持pH 值D.在胚胎移植前要对接受胚胎的当地普通绵羊进行同期发情处理8.下列关于胚胎移植的叙述不正确的是( )A.胚胎移植属于无性繁殖，大大缩短了供体本身的繁殖周期B.可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力C.供体的主要职能变为只产生具有优良遗传特性的胚胎D.胚胎移植时“冲卵”是指把胚胎从子宫冲洗出来9.模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述。
2021年吉林大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2021年吉林大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、在细胞质内贮藏有大量聚-β-羟基丁酸（PHB）的细菌有______、______、______和______等。
2、纯化的病毒制备物应保持其______和______。
3、次级代谢是微生物生长至______或______，以______为前体，合成一些对微生物自身生命活动无明确生理功能的物质的过程。
次级代谢产物大多是分子结构比较复杂的化合物，如______、______、______、______、______及______等多种类别。
4、不能在人工培养基上生长的微生物称为______，例如______、______和______等。
5、真菌是不含有______素、______营养，以______进行繁殖的真核微生物。
6、著名的微生物学家Roger Stanier提出，确定微生物学领域不应只是根据微生物的大小，而且也应该根据有别于动、植物的______。
7、酵母菌经______作活体染色后，活细胞在光学显微镜下呈______ 色，死细胞呈______色；细菌经______染色后，活细胞在紫外光显微镜下会发出______色荧光，死细胞则发出______色荧光。
8、一般来说，在土壤中，各种微生物含量按递减顺序排列如下：______、______、______、______、______和______。
9、线粒体的核糖体在大小上类似于原核生物的核糖体，线粒体与细菌之间的近缘关系，支持真核的细胞器（线粒体、叶绿体）是由______演化出来的假设。
10、T细胞在识别抗原的同时也识别自身______。
二、判断题11、细菌的芽孢和孢囊都是休眠细胞，都具有相同的抗热性、抗辐射、抗干燥能力。
（）12、Na＋，K＋-ATP酶利用ATP的能量将胞内K＋“泵”出胞外，而将胞外Na＋“泵”入胞内。
（）13、环丝氨酸和青霉素抑制肽聚糖生物合成的机制，都属于代谢类似物对酶的活性中心发生竞争性抑制作用这一类。
2022年吉林大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年吉林大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、放线菌的代表属有______、______、______、______等。
2、烟草花叶病毒简称______，外形______状，外层衣壳粒以______时，针方向螺旋状排列成______，具有______功能；核心为______链______。
3、ED途径的四个主要特点是______、______、______和______。
4、实验室常用的培养细菌的天然培养基为______，培养酵母菌的天然培养基为______，培养放线菌的组合（合成）培养基为______等，培养真菌的组合培养基为______等。
5、蕈菌典型肉质子实体的构造包括______、______、______、______ 和______五个主要部分。
6、在经典遗传学发展至分子遗传学过程中，有四种模式微生物发挥了重大作用，它们是① ______，② ______，③ ______，④ ______。
7、微生物的细胞分裂有两种模式：______和______。
8、植物根际微生物对植物有益的方面有______、______、______和 ______等。
9、微生物菌种保藏有两个原则，一是在菌种方面必须选用______；二是设法创造一个优良的休眠条件，例如______、______、______、______、______和______等。
10、补体主要有______细胞和______细胞产生，其化学成分为______，它被______激活后具补充抗体的作用。
二、判断题11、细菌的鞭毛是通过其顶端生长而非基部生长而伸长的。
（）12、所有碳源物质既可以为微生物生长提供碳素来源，也可以提供能源。
（）13、在化能自养细菌中，呼吸链的递氢作用是不可逆的。
（）14、与其他微生物相似，同种病毒粒或噬菌体个体间，也存在生长期（即年龄）和形态上的差别。
（）15、无隔菌丝是多核的单细胞菌体，只有细胞核的分裂，没有细胞数量的增加。
大提质粒注意事项
大提质粒注意事项
提取质粒时需要注意以下几点：
1. 注意操作规范，避免污染：提取质粒的过程需要严格控制，避免交叉污染和外界杂菌的侵入。
在操作过程中要保证在无菌环境下进行，并按照操作规范进行每一步操作。
2. 注意使用试剂的纯度：提取质粒所使用的试剂要求纯度较高，避免使用过期或劣质的试剂，以免影响提取效果。
3. 注意控制温度和时间：在提取质粒的过程中，需要控制好温度和时间，保证DNA的完整性和纯度。
同时，对于不同的质粒需要采用不同的方法和条件进行提取。
4. 注意观察和记录实验结果：在实验过程中需要随时观察实验结果，如有问题及时调整操作步骤或更换试剂。
同时，实验结束后需要记录实验结果，以便后续的分析和处理。
5. 注意安全：提取质粒过程中使用的试剂和器具具有一定的危险性，需要注意安全防护措施，避免对人体造成危害。
6. 做好质粒的保存工作：提取出的质粒需要妥善保存，避免污染和降解。
在保存过程中要选择适当的保存条件和方法，以保证质粒的质量和稳定性。
7. 实验人员要求：进行此实验前需具备一定的分子生物学实验基础，且应熟悉质粒提取的相关知识。
以上是提取质粒时需要注意的几点事项，仅供参考。
中心管理附则(试行)
中心管理附则（试行）
第一条中心管理落实
中心委派徐淑华老师、陈亚光老师，代表中心主任全权负责中心管理制度落实、执行情况进行检查、监督和指导。
第二条中心管理责任制
按照岗位分工，主要负责人要自觉或主动组织开展相应工作，相关人员要积极配合。
中心实行问责制，即谁主管谁负责。
第三条中心成果署名
中心建设、管理、教学、改革等相关项目、成果、奖励申报名次顺序，按相关支撑材料多少排序。
第四条中心考勤
中心实验技术和管理人员实行坐班考核制。
中心作息时间按吉林大学作息时间执行，中心委派徐淑华、陈亚光老师或中心主任随时抽查，结果作为各项评比、考核指标之一。
第五条中心外出教学
中心派出到外校、外地承担教学任务，超过一个月以上的教学课时费收入分配比例为中心、个人各占50%。
吉林大学国家级生物实验教学示范中心 2014年2月26日
（修订人：孟庆繁）。
国家工程实验室细胞培养室的管理探索
国家工程实验室细胞培养室的管理探索孟祥玉1孙 博1谷铁军 赵兴红 石玉华 张海红 于 彬 苏维恒 张喜珍*（吉林大学生命科学院 吉林长春 130012）摘 要 细胞培养室是工程实验室的一个重要组成部分。
如何发挥细胞培养室的功能，使其最大限度服务于工程实验室，使各项科研课题有充分的研究发展空间，是值得思考的。
在日常管理中使细胞培养得到有效的提高，也一直是老师和学生共同期待的目标。
艾滋病疫苗实验室的细胞培养室通过规章制度的建立，环境的保持，细胞培养注意事项，细胞库管理，技能培训考核，备品的使用等几方面，充分发挥了其功能实验室的重要作用，使各项研究生实验得以顺利进行，培养了学生独立科研能力，增强了学生分析问题和解决问题的能力，为工程实验室奠定了更加良好的科研基础。
关键词 工程实验室；细胞培养；规范化管理；无菌操作Management exploration of cell-culture lab in National engineering laboratoryMeng Xiangyu 1; Sun Bo 1; Gu Tiejnu; Zhao Xinghong; Shi Y uhua; Zhang Haihong; Yu Bin; Su Weiheng; Zhang Xizhen *Abstract Cell culture lab is an important part in the national engineering laboratory. It ’s worthy to think deeply how to play its function adequately to serve the national engineering laboratory , and how to provide sufficient development space for every scientific study. It has been our expectation for every teacher and student all the time how to improve cell culture skill. Our cell culture lab fully exerted its effects of functional laboratory, through establishment of rules and regulations, maintenance of environment, attentions of cell culture operating, administration of cell bank, training and examing of skill, and preparation of cell culture apparatus , which made the students ’experiment go well, cultivated the students' practical ability and problem analyzing and solving ability, so that laid the foundation for better scientific research platform for engineering laboratory.Key words engineering laboratory; cell culture; standardized management; Aseptic processing随着国家越来越重视科研，各大高校均建设有自己独立的科研实验室。
免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南
免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南免疫细胞治疗是一种革命性的治疗方法，利用患者自身的免疫系统来对抗疾病。
而用质粒生产免疫细胞治疗产品是其中的重要环节。
质粒是一种DNA分子，可以在细胞内重复复制，是免疫细胞治疗产品生产的关键。
为了确保质粒的质量和安全性，需要进行严格的质量管理。
本文将介绍一份免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南。
一、质粒生产环境管理1. 生产区域：质粒生产应在符合GMP要求的洁净区域进行，保持清洁、无尘、无菌的环境。
应定期进行环境监测，确保环境符合质量要求。
2. 设备和工具：应使用符合GMP要求的设备和工具，定期进行检测和保养，确保设备和工具的正常运行。
二、质粒生产操作规程1. 原料检验：对所使用的原料进行检验，确保原料符合质量要求。
2. 批记录和标签：每一批质粒都应有相应的批记录和标签，记录质粒的生产过程和相关信息。
3. 生产工艺：质粒的生产应按照相应的工艺和操作规程进行，确保每一步都符合质量要求。
4. 操作人员培训：质粒生产的操作人员应接受相应的培训，熟悉生产工艺和操作规程，并具备相应的操作技能。
三、质粒质量控制1. 质粒纯度：对质粒进行纯度检测，确保质粒的纯度符合质量要求。
2. 质粒浓度：对质粒进行浓度检测，确保质粒的浓度符合质量要求。
3. 质粒稳定性：对质粒进行稳定性检测，确保质粒的稳定性符合质量要求。
4. 质粒的安全性评估：进行质粒的安全性评估，确保质粒没有可能引发潜在的安全风险。
四、质量风险管理1. 原料风险评估：对所使用的原料进行风险评估，确保原料的质量和安全性。
2. 生产过程风险评估：对质粒的生产过程进行风险评估，确保生产过程的质量和安全性。
3. 异常事件处理：对发生的异常事件进行及时处理和调查，以避免类似事件再次发生。
4. 记录和报告：对质粒生产过程进行记录和报告，确保质量管理的完整性和透明度。
五、文件和记录管理1. SOP和工艺文件：编制和管理质粒生产的操作规程（SOP）和工艺文件，确保操作的一致性和标准化。
免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南
免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南摘要：I.引言- 介绍免疫细胞治疗产品生产用质粒的重要性II.质粒生产质量管理指南概述- 质粒生产质量管理指南的目的和适用范围- 质粒生产质量管理指南的主要内容III.质粒生产质量管理指南的关键要素- 机构与人员- 厂房与设备- 生产管理- 物料管理- 细菌种子批- 工艺控制- 质量控制- 包装与贮存- 运输IV.指南的实施与意义- 生产企业如何按照指南要求规范质粒的生产质量管理- 指南对确保产品质量的作用V.结论- 总结质粒生产质量管理指南的重要性及其对免疫细胞治疗产品生产的意义正文：I.引言免疫细胞治疗是一种新型的治疗方式，通过将经过改造的免疫细胞重新注入患者体内，以达到治疗目的。
在这个过程中，质粒作为重要的载体，承担着传递基因信息的角色。
因此，质粒的生产质量对免疫细胞治疗产品的质量和效果有着直接的影响。
为此，我国制定了《免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南》，以规范和指导质粒生产的过程。
II.质粒生产质量管理指南概述《免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南》旨在规定质粒生产过程中的质量管理要求，确保质粒的质量符合临床使用的要求。
该指南适用于免疫细胞治疗产品生产用质粒的生产企业及其相关部门，对从事质粒生产的人员、厂房设施、生产管理、物料管理、细菌种子批、工艺控制、质量控制、包装与贮存、运输等方面进行了详细的要求。
III.质粒生产质量管理指南的关键要素1.机构与人员：企业应具备相应的组织机构、部门和人员，明确各部门的职责，为质粒生产提供必要的支持。
2.厂房与设备：厂房应满足生产要求，设备应满足生产工艺的需要，并定期进行维护和校验。
3.生产管理：企业应制定完善的生产计划、工艺文件和批记录，确保生产过程的可控和可追溯。
4.物料管理：企业应对原材料、辅料和成品进行严格的管理，确保其质量和安全性。
5.细菌种子批：企业应建立细菌种子批的管理制度，确保细菌种子批的质量。
免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南
免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南一、引言免疫细胞治疗是一种新兴的治疗方法，通过改变患者的免疫系统来对抗癌症和其他疾病。
其中，质粒是免疫细胞治疗产品中的重要组成部分，质粒的生产质量管理对于确保治疗产品的安全性和有效性至关重要。
本指南旨在提供免疫细胞治疗产品生产用质粒的质量管理指南，以帮助生产厂商确保产品质量和符合监管要求。
二、质粒生产质量管理流程质粒生产质量管理是一个系统性的过程，包括质粒设计、质粒构建、质粒纯化、质粒验证等多个环节。
以下是质粒生产质量管理流程的详细步骤：2.1 质粒设计质粒设计是质粒生产的第一步，它涉及到确定质粒的基本结构和功能。
在质粒设计阶段，需要考虑以下几个方面： - 质粒的载体选择：选择合适的载体来承载质粒，常用的载体包括质粒和病毒。
- 质粒的基因元件选择：选择适当的启动子、终止子和选择性标记等基因元件，以确保质粒的正常表达和功能。
- 质粒的目标基因选择：选择合适的目标基因，以满足治疗需求。
2.2 质粒构建质粒构建是将目标基因插入到质粒载体中的过程。
在质粒构建阶段，需要进行以下操作： 1. 目标基因的扩增：使用PCR等方法扩增目标基因的DNA序列。
2. 质粒载体的线性化：通过限制性内切酶切割质粒载体的DNA序列，得到线性化的质粒载体。
3. 质粒的连接：将目标基因的DNA序列与线性化的质粒载体进行连接，形成质粒。
2.3 质粒纯化质粒纯化是将质粒从细胞中提取和纯化的过程。
在质粒纯化阶段，需要进行以下步骤： 1. 细胞培养：将含有质粒的细胞进行培养，以增加质粒的产量。
2. 细胞破碎：使用化学物质或机械方法将细胞破碎，释放质粒。
3. 质粒提取：使用离心等方法将质粒从细胞提取出来。
4. 质粒纯化：通过离心、柱层析等方法将质粒纯化，去除杂质。
2.4 质粒验证质粒验证是确保质粒的质量和功能的过程。
在质粒验证阶段，需要进行以下操作：1. 质粒测序：对质粒进行测序，确保质粒的序列正确。
质粒保存规章制度
第一章总则第一条为确保实验室质粒资源的有效保存，提高科研工作的连续性和效率，特制定本规章制度。
第二条本规章制度适用于本实验室所有涉及质粒保存的科研人员、技术人员及管理人员。
第三条质粒保存工作应遵循以下原则：1. 安全性：确保质粒保存过程中的生物安全，防止环境污染和交叉污染。
2. 可靠性：确保质粒保存质量，保证科研工作顺利进行。
3. 经济性：合理使用资源，降低成本，提高效益。
第二章质粒保存条件第四条质粒保存应使用专用保存管，确保密封性能，防止质粒污染。
第五条质粒保存介质：1. TE缓冲液：0.01M Tris-HCl（pH 7.4）+ 0.1M EDTA，用于短期保存。
2. 50%甘油：用于长期保存，确保质粒在-80℃低温条件下稳定。
第六条质粒保存温度：1. 短期保存：4℃冰箱，适用于TE缓冲液保存。
2. 长期保存：-80℃冰箱，适用于50%甘油保存。
第七条质粒保存方法：1. 将质粒DNA用TE缓冲液稀释至所需浓度。
2. 将稀释后的质粒DNA转移至专用保存管，加入等体积的50%甘油。
3. 密封保存管，标记清楚质粒名称、浓度、保存日期等信息。
4. 将保存管放置于-80℃冰箱。
第三章质粒复苏第八条质粒复苏应在无菌条件下进行。
第九条质粒复苏步骤：1. 将保存管从-80℃冰箱取出，置于室温下解冻。
2. 将解冻后的质粒DNA转移至无菌离心管，加入适量的TE缓冲液。
3. 5000r/min离心5分钟，弃去上清液。
4. 用TE缓冲液洗涤沉淀，5000r/min离心5分钟，弃去上清液。
5. 加入适量的TE缓冲液，轻轻混匀，用于后续实验。
第四章质粒使用与归还第十条实验室科研人员使用质粒前，应详细了解质粒来源、保存条件等信息。
第十一条使用质粒时，应严格按照实验操作规程进行，确保实验结果的准确性。
第十二条使用完质粒后，应及时归还，并填写质粒使用记录表。
第五章监督与检查第十三条实验室负责人负责监督本规章制度的执行情况。
第十四条定期对质粒保存情况进行检查，确保质粒保存质量。
质粒室要求
质粒室要求
质粒室是分子生物学实验室中非常重要的设施，它通常用于存放和繁殖质粒。
质粒是一种很小的环形DNA分子，常用于基因克隆和基因工程实验中。
为了保证实验结果的准确性和可靠性，质粒室需要具备以下要求：
1. 温度控制：质粒室内的温度应该保持在适当的范围内，通常在18℃至25℃之间，以保证质粒的稳定性和活性。
2. 空气净化：质粒室需要具备良好的通风和空气净化设备，以保证实验环境的卫生和质粒的无菌状态。
3. 照明：质粒室内需要适宜的灯光，以方便实验操作和观察实验结果。
4. 设备和工具：质粒室需要配备适当的设备和工具，如冰箱、离心机、PCR仪等，以保证实验操作的顺利进行。
5. 安全措施：质粒室是一种特殊的实验室，需要注意安全事项，如佩戴手套、口罩等，以避免被污染物接触。
总之，质粒室是分子生物学实验室中不可或缺的设施，需要严格按照要求进行管理和操作，以保证实验结果的准确性和可靠性。
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免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南
免疫细胞治疗产品生产用质粒生产质量管理指南在免疫细胞治疗产品的生产过程中，质粒的生产质量管理是至关重要的环节。
质粒作为DNA分子的载体，在基因治疗和免疫细胞治疗中具有重要作用，其质量直接影响着治疗产品的安全性和有效性。
制定一套科学严谨的质粒生产质量管理指南对于保证治疗产品质量和临床疗效具有重要意义。
1. 审核供应商在质粒生产的起始阶段，首先需要对供应商进行审查。
只有经过严格筛选和审核的供应商才能保证提供高质量的原材料。
在审查供应商时，应该考察其生产设施、生产工艺、质量管理体系等方面，以确保供应商具备生产高质量质粒所需的条件。
2. 原材料的质量管理质粒的生产过程中涉及到许多原材料，如DNA酶、DNA聚合酶、质粒核酸等。
在质粒生产过程中，需要建立严格的原材料质量管理体系，确保原材料的来源可追溯、质量可控。
在原材料进厂后需要进行严格的验收检验，确保原材料符合质量要求。
3. 生产工艺的质量控制对于质粒的生产工艺，需要建立详细的操作规程和质量控制标准。
包括质粒提取、质粒纯化、质粒浓缩等环节都需要进行严格的质量控制，确保每个环节都符合标准要求。
在生产过程中还需要对关键步骤进行严格的监控和记录，以便追溯和溯源。
4. 设备的管理与维护质粒的生产需要借助各种设备和仪器，如离心机、PCR仪、电泳仪等。
设备的管理与维护也是质粒生产质量管理的重要环节。
定期对设备进行维护保养，确保设备的正常运转和准确性，是保证质粒生产质量的重要保障。
5. 质量记录与数据分析在质粒生产过程中，需要建立完整的质量记录系统，对生产过程中的各项数据进行记录和归档。
并且需要建立数据分析体系，对质量数据进行定期分析和评估。
通过对质量数据的分析，及时发现问题并采取纠正措施，确保产品质量的稳定性。
6. 废弃物处理在质粒生产过程中会产生一定量的废弃物，如过期原材料、废弃设备、废水废气等。
对于这些废弃物的处理需要符合环保要求，并且需要建立完善的废弃物处理制度，确保废弃物处理的安全和环保性。
实验室管理补充规定
目录实践教学人员（试行） (1)设备使用管理补充规定（试行） (2)129百级洁净区管理规定（试行） (5)129 GMP实验室管理规定（试行） (7)152实验材料与药品库管理规定（试行） (11)160离心室管理制度（试行） (12)162发酵室管理制度（试行） (13)227低温冷库管理规定（试行） (14)237值班室管理规定（试行） (15)248、262、264冰箱（超低温冰柜）管理规定（试行） (16)248灭菌室管理规定（试行） (17)248、264、341、343设计创新实验室管理规定（试行） (18)258多功能报告厅管理规定（试行） (20)262小型真空冻干机管理规定（试行） (21)329、350细胞室管理规定（试行） (22)354微生物菌种保藏库管理规定（试行） (23)352、466无菌室管理规定（试行） (25)356、435、454、456大型仪器室管理补充规定（试行） (26)431、433、454 HPLC管理补充规定 (27)545中心档案管理制度（试行） (29)549会议室使用管理规定（试行） (31)556仪器配件管理规定（试行） (32)619、621实验动物室管理规定（试行） (33)实践教学人员（试行）1、实践教学人员包括实验教师、实验技术教师、助教研究生和中心管理人员。
2、实践教学人员要有坚定正确的政治方向，忠诚于党的教育事业，贯彻国家教育工作方针；模范遵守国家各项法律法规和、中心的各项规章制度。
3、具有良好的思想品德素质，崇高的师德风范，娴熟的实验技能，严谨的治学态度，无私的奉献精神，强烈的责任和示范意识。
4、注重自身品德修养，尊重同志，团结协作，不散布不利于团结的言论；作风正派，举止端庄，语言文明，仪表整洁大方，妆饰适宜，在师生中树立良好形象。
5、要确立教书育人之信念，深入学生的内心，关心学生的生活，善做学生的良师益友；与学生交谈中语言要把握分寸，行为表情要把握有度；不得索要学生的馈赠，不得中伤学生的实验积极性；树立以学生为本的服务意识，努力做到寓德育于智育之中。
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质粒、细胞的管理细则
为进一步加强实验室规范化管理，保证实验工作的健康高效运转，特制定如下质粒、细胞管理细则，请实验室成员遵照执行。
第一条所有质粒、细胞均为实验室所有，其保存和使用由专人管理。
第二条所有质粒、细胞均保存双份，个人所构建的质粒等均需在实验室保留备份。
第三条质粒、细胞入库后，保管员应进行统一编号并记录质粒、细胞的详细信息，并录入质粒、细胞信息数据库。
第四条所有质粒、细胞实验室成员共享，均可领取使用。
第五条对于个人所构建的质粒，其他成员在使用时视为合作，文章发表时应有署名。
第六条实验室成员需领取使用质粒、细胞时，应遵循预约、领取、登记制度，质粒、细胞保管员只在固定时间段为使用者领取。
第七条质粒按用途分普通、优质和转染级，采取不同的纯化方式：普通级别使用传统的碱裂解方法进行纯化，主要用于构建载体阶段质粒的纯化；优质级别使用国产质粒DNA纯化试剂盒进行纯化，主要用于质粒保存和测序；转染级别使用Endotoxin-free质粒DNA纯化试剂盒进行制备，主要用于细胞转染、体外转录等。
第八条非本室成员使用本室质粒、细胞时，需签署文件，经实验室负责人同意后再由保管员交给使用者。
第九条毕业后离开本室的人员经实验室负责人同意可以领取商业化质粒及其个人所构建的质粒。
第十条以上条款自即日起试行，所有条款最终解释权归本实验室负责人所有，欢迎实验室成员提出宝贵意见进行完善、补充。
吉林大学国家级生物实验教学示范中心
2014年2月26日
（起草人：逯家辉；修订人：汤海峰）。