微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程
交叉配血试验标准操作规程
交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保输血安全。
2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。
4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应,使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。
4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集解散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能解散,以此来判断供、受者间血液的相容性。
4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶上端,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。
4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。
4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清,全血量3~5ml,在1760g条件下离心5分钟,离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。
4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血,全血量3~5ml,在1760g条件下离心5分钟,离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。
4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管,1支标明“主侧”;另一支标明“次侧”。
4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴;“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。
交叉配血质控品(微柱凝胶法)SOP
交叉配血质控品(微柱凝胶法)标准操作程序(SOP)一、用途本试剂盒用于长春博迅生物技术有限责任公司生产的抗人球蛋白检测卡(12卡/盒)交叉配血实验的室内质量控制。
二、准备工作1、将质控品从冰箱取出后平衡至室温。
2、观察检测卡外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡平衡至室温(18-25℃),再用专用离心机离心5分钟。
三、操作步骤1、取1张微柱凝胶检测卡,取四孔分别标记为组合1、组合2、组合3、组合4;2、交叉配血实验按照组合1(样本4+样本1)、组合2(样本4+样本2)、组合3(样本5+样本1)、组合4(样本5+样本3)进行加样,先加红细胞再加血浆,各1滴(50ul);3、加样完毕后,专用孵育器孵育15min;4、孵育完毕,专用离心机离心后判读结果。
结果判读样本组合检测结果检测作用组合1 样本4+样本1 + 检测IgM类抗原抗体反应组合2 样本4+样本2 0 检测IgM类抗原抗体反应组合3 样本5+样本1 + 检测IgG类抗原抗体反应组合4 样本5+样本3 0 检测IgG类抗原抗体反应“0”代表阴性,“+”代表阳性。
质控品检测结束后,用户可将检测结果与参考值进行比较,阳性质控结果与预期结果比较出现超过1+凝集强度的差异,或阴性质控出现阳性结果时,均视为失控。
失控后要分析查找原因,必要时重复实验,确认失控原因消除后开展正常检测工作。
特异性、抗原强度及效价:AB型RhD(+)红细胞抗原强度:与抗A、抗B、抗D抗体均发生凝集,无溶血及其他不易分辨现象;与抗A抗体凝集强度≥3+,与抗B抗体凝集强度≥3+,与抗D抗体凝集强度≥3+。
O型RhD(+)红细胞:与抗A、抗B不发生凝集,与抗D发生凝集,无溶血及其他不易分辨现象;与抗D抗体凝集强度≥3+。
RhD(-)红细胞:与抗D不发生凝集,无溶血及其他不易分辨现象。
O血清:与A1型红细胞、B型红细胞均发生凝集,间接抗人球蛋白试验阴性,无溶血及其他不易分辨现象;O血清与A1型红细胞反应,效价≥8,与B型红细胞反应,效价≥8。
BioVue交叉配血操作规程
BioVue交叉配血操作规程一、项目名称、检验方法名称1.项目名称:交叉配血2.检验方法名称:柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应,BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后,发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面,而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1.试剂卡品牌:美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2.代号:BioVue -poly Cassettes3.包装规格:400卡/箱试剂卡(707300);100卡/箱试剂卡(707350)4.试剂成分:抗人球蛋白(lgG,C3b/C3d)检测卡有6根微柱组成,每一柱中含有缓冲液,其成分为牛血清蛋白,大分子增强剂以及0.1%叠氮钠,0.01M的EDTA.成分描述第1~6柱:抗人球蛋白、抗-lgG、-C3d;多特异性抗-lgG(兔)抗-C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3) 抗-C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7) FD&C1#蓝色染料FD&C5#黄色染料5.试剂的储存与效期:储存条件:2~25℃环境保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中,也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源(如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等)很近或阳光直射的地方。
效期:试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机;BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备:在采集标本前对病人/献血者无特殊要求,血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行,应将标本置于2-8℃保存。
采集自脐带血的红细胞需用等渗生理盐水至少洗涤一次。
来自异常血清蛋白患者的红细胞样品,需使用洗涤过的红细胞混悬液。
抗凝全血标本以900-1000g离心5分钟,即可得到浓度约为80%的浓缩红细胞。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保输血安全。
(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集消散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能消散,以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶上端,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3),红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,玻璃微珠具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠,使其悬浮在玻璃微珠层的上端,未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
交叉配血(聚凝胺法、微柱凝胶法)
操作步骤:
按照试剂说明配制好献血者、受血者的红细胞悬液 以及分离血清。 主侧:25ul 受血者血清 + 50ul 1%献血者红细胞, 加入主侧管反应室内; 次侧: 25ul献血者血清+ 50ul 1%受血者红细胞, 加入到次侧管反应室内; 加样后的试剂卡放置专用孵育器37℃孵育15min; 取出试剂卡,放置专用离心机1000g离心9min; 取出试剂卡,肉眼观察结果。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
结果判断:
阴性结果:红细胞完全沉降于凝胶管底 部。 阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面 或凝胶中,和(或)出现溶血。
操作步骤:
抽取受血者静脉血3~4ml,枸橼酸钠抗凝,以生理盐 水洗涤受血者红细胞3次,配成3% 红细胞悬液,同样 方法处理献血者样本; 取洁净小试管2支,1支标记为主侧管,另1支标为次侧 管; 主侧管内加受血者血清2滴、献血者红细胞悬液1滴; 次侧管加献血者血清2滴、受血者红细胞悬液1滴; 每管各加LIM溶液0.6ml,混匀,室温孵育1min; 每管各加2滴聚凝胺溶液,混合后静置15s; 1300g离心15s,倾去上清液; 轻轻摇动试管,目测细胞有无凝集,如无凝集,必须 重做; 加入2滴重新悬浮液,并轻轻转动试管混合,肉眼观察 结果,必要时用显微镜观察结果。
结果判断:
主侧管和次侧管内红细胞凝集在1min散开, 则为聚凝胺引起的非特异性凝集,表示受血 者和献血者配血相容。 如果主侧管和/或次侧管内红细胞凝集不散开, 则表明两血不相容,献血者血液不可输注。
注意事项:
实验结果必须在3分钟内判读 在冬天气温较低时,某些病人血清中含有冷 凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用 37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶 中轻轻摇动,观察结果。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(抗人球蛋白法)一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(西班牙Diagnostic Grifols,S。
A公司生产)(二)设备:戴安娜专用离心机(型号:DG SPIN)、戴安娜专用孵育器(型号:DG THERM)、微量移液器(5—50ul)、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存:血液样本必须密封,2—8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤:(一)交叉配血前,先复检患者和献血者ABO和Rh血型.(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右,取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧,撕掉配血卡上的封条.(四)取试管两支,分别配制患者和献血者红细胞悬液(浓度为1%)待用。
)RN36837 8FE5 迥532903 8087 肇(五)交叉配血:主侧:用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ;次侧:用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。
(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟,移出放入离心机9分钟,取出观察结果.七、结果观察:(一)主侧和次侧均不凝集,细胞沉于反应卡的底部,配血相合,可以输血(二)主侧或次侧出现凝集,细胞悬挂于卡的中间或上部,配血不相合,不可以输血(三)若输注血液为红细胞,则只需主侧配血相合。
微柱卡式法凝集强度描述。
微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作规程
微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范输血科交叉配血试验的技术操作,确保鉴定结果准确及临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科进行交叉配血的操作技术的规范化管理。
3、职责:输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理4.1试验方法:凝胶测试法4.2原理:本微量定型系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。
当抗原抗体反应,抗人球试验时,血细胞发生凝集。
离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层,呈阳性反应,未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部,呈阴性反应。
5、样本采集和处理受血者血样为EDTA-K2抗凝血。
抽取受血者静脉血3~4ml于专用管(紫色头管)内,分离出血浆。
红细胞配成0.8%的悬液,供血者血样以同样方法分离血浆,并配制0.8%红细胞悬液。
配血所用受血者血样必需是输血前3天内的。
6、试剂:6.1 0.9%的生理盐水;6.2戴安娜合血卡;7、仪器:7.1XTL-4.7细胞洗涤离心机;7.2DiaMed-ID Incubator 37 SⅠ温育器;7.3DiaMed-ID Centrifuge 12 SⅡ8、操作程序:8.1工作准备:8.1.1生理盐水室温平衡。
准备样本。
标记合血卡。
8.1.2 0.8%-1%样本红细胞制备:加25μl样本压积红细胞悬浮液于2ml戴安娜2号稀释液中。
8.1.3于1号管中(主侧)加入50μl献血者红细胞(0.8%)。
25μl受血者血浆或血清。
8.1.4 2号管中(次侧)加入50μl受血者红细胞(0.8%)。
25μl献血者血浆或血清。
8.1.5 37℃孵育15分钟。
8.1.6 离心10分钟。
判断结果,并作好记录。
9、结果判断:1+至4+为抗人球配血不相容;—(0)为配血相容,可以输注。
10、医学解释:ABO交叉配血试验是检查供、受血者血液中是否含有不相合的抗原和抗体成分的试验。
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶)
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶抗人球蛋白法)1.目的为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用,保证检测结果准确及临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。
2.适用范围适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。
3.职责医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。
4.原理红细胞血型抗原与不完全抗体(IgG),在抗人球蛋白的桥梁作用下,经一定的离心力,产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体(IgM)直接产生的特异性免疫凝集复合物,被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中,判为阳性结果,表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体;红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部,即判断为阴性反应,表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。
5.所需设备和试剂普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡6.检测环境条件室湿应控制在18~27℃,湿度应保持30%~70%。
7.操作步骤先将供(受)血标本制备%红细胞低离子介质(LIM)悬液。
撕开卡的封膜,于反应胶中主(次)侧管加供(受)者 % 红细胞LIM悬液100μl,加入受(供)血者血浆或血清25μl(或50μl)。
将检测卡37℃孵育15min取出,置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。
取出,判定结果,结果判定标准按下表:(可参照结果判定示图)检验结果的解释:阳性结果,表示受(供)血者血浆或血清中含供(受)血者红细胞血型抗原相应的抗体(不完全抗体IgG或完全抗体IgM),供受血者血液不相容。
阴性结果,表示供受血者血液相容。
8.质量控制微柱凝胶试剂卡在有效期内使用,每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。
试剂质量控制方法即作阴、阳性对照试验:撕开检测卡的封膜,于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl。
医院交叉配血试验标准操作规程
交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。
2、适用范围适用于医疗机构输血科(血库)进行交叉配血试验。
3、职责医疗机构输血科(血库)技术人员负责交叉配血试验。
4、原理使受血者血清(血浆)和红细胞分别与献血者红细胞和血清(血浆)反应,采用盐水介质法、凝聚胺法、抗球蛋白法及微柱凝胶法等检测供、受者之间是否存在相应的红细胞血型抗原抗体反应,判定受血者与献血者血液之间红细胞血型免疫的相容性。
5、所需设备和试剂5.1设备普通离心机,血型血清学专用离心机,电热恒温水浴箱,普通显微镜。
5.2试剂凝聚胺试剂盒,抗球蛋白试剂。
6、检测环境条件6.1室温应控制在18~27℃,湿度应保持30%~70%。
7、步骤与方法7.1受血者、献血者血标本处理7.1.1将受血者血标本离心分离血清(血浆)及红细胞,取2支试管,分别标记受血者的唯一性标识,吸取离心后血标本血清(血浆)到一支已标识的试管内;吸取红细胞30μl 到另一支已标识的试管内,加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。
7.1.2受血者ABO和RhD血型鉴定,执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。
7.1.3受血者红细胞不规则抗体筛选及鉴定,执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程>。
7.1.4根据受血者ABO和RhD血型鉴定结果选择ABO和RhD相容血液成分,剪取献血者血袋上一段留样管,取1支试管标记献血者唯一性标识,将剪下的血标本盛入标识的试管中,离心分离血清(血浆)及红细胞;另取2支试管分别标记献血者唯一性标识,吸取献血者血标本血清(血浆)到一支已标识的试管内;吸取献血者血标本红细胞3μl到另一支已标识的试管内,加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。
7.1.5复检献血者ABO和RhD血型。
7.2盐水介质法交叉配血试验7.2.1取试管2支,分别标记为“主侧”、“次侧”,主侧加受血者血清(血浆)2滴、献血者3%红细胞悬液1滴,混匀;次侧加献血者血清(血浆)2。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(抗人球蛋白法)一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(西班牙Diagnostic Grifols,S.A公司生产) (二)设备:戴安娜专用离心机(型号:DG SPIN)、戴安娜专用孵育器(型号:DG THERM)、微量移液器(5—50ul)、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA。
K2)静脉血2—3ml, 在3000r/min 条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存:血液样本必须密封,2—8℃保存7天.(三)用于交叉配血必须是2—8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤:(一)交叉配血前,先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右,取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧,撕掉配血卡上的封条.(四)取试管两支,分别配制患者和献血者红细胞悬液(浓度为1%)待用。
(五)交叉配血:主侧:用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ;次侧:用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。
(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟,移出放入离心机9分钟,取出观察结果。
七、结果观察:(一)主侧和次侧均不凝集,细胞沉于反应卡的底部,配血相合,可以输血(二)主侧或次侧出现凝集,细胞悬挂于卡的中间或上部,配血不相合,不可以输血(三)若输注血液为红细胞,则只需主侧配血相合。
微柱卡式法凝集强度描述。
微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作程序
微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作程序1目的建立微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作程序,确保此试验操作的准确性和规范性。
2适用范围适用于所有临床输血前的交叉配血试验。
3职责输血科配血工作人员:负责交叉配血试验。
4原理微柱凝胶卡式法交叉配血是通过抗原-抗体在凝胶卡的反应室中反应后,离心通过预先填装有抗IgG的凝胶柱,凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或柱体中,而不凝集的红细胞将在凝胶柱的底部。
5设备与试剂5.1设备:BASO 2005-2台式离心机;FYQ型免疫微柱孵育器;TD-3A型血型血清学用离心机;微量移液器。
5.2试剂:低离子强度缓冲液(LISS);抗人球蛋白卡;一次性塑料试管(10×100mm);一次性吸头。
6 样本要求EDTA抗凝血3ml,无乳糜,无溶血。
7 环境条件室温应控制在18-27℃,湿度应保持30%-70%。
8 步骤和方法8.1离心受血者及供血者的标本:3000rpm/min,3min,分离红细胞和血清。
8.2制备红细胞悬液:用低离子溶液分别将受血者及供血者红细胞配成0.8%~1.2%的红细胞悬液。
8.3选择抗人球蛋白卡,撕去卡上的密封铝膜,做好标记。
8.4加样:吸取受血者血清50μL加入抗人球蛋白卡主侧孔中,红细胞50μL加入次侧孔中;再吸取供血者血清50μL加入次侧孔中,红细胞50μL加入次侧孔中。
8.5孵育:将卡置于37℃孵育箱中孵育15min。
8.6离心:将卡置于专用离心机中离心5min,取出,观察结果。
9 结果判定9.1阴、阳性判定9.1.1阴性结果:红细胞完全沉降于凝胶管底部,表明受血者与供血者交叉配血相合。
9.1.2阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中,表明受血者与供血者交叉配血不相合。
9.1.3阳性结果中出现的凝集强度判定见下表:反应强度红细胞在凝胶内的反应情况4+ 红细胞全部位于凝胶表面3+ 大部分红细胞位于凝胶表面,少部分位于凝胶中上部2+ 大部分红细胞位于凝胶中部,少部分位于凝胶中下部1+ 红细胞位于凝胶中下近底部±绝大部分红细胞沉积在管尖底部,极少部分位于凝胶中近底部- 红细胞完全沉积在凝胶管尖底部完全溶血凝胶和液体中无凝集或未凝集的红细胞,液体呈透明清澈红色不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部,液体呈透明清澈红色混合凝集同时存在两群细胞,分别位于凝胶表面和管尖底部10 注意事项10.1将送检的标本即刻离心,仔细检查标本质量,挑出严重溶血、脂血等影响检测结果的标本,及时通知临床科室重新采集,暂不使用的标本置于4℃冰箱保存。
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)交叉配血试验标准操作规程(微柱凝集法)一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法采用微柱凝集法;三、原理将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在微柱检测系统中进行。
微柱检测系统的上端为反应室,将葡萄聚糖凝胶作为凝集反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中,微柱凝集检测管中的凝胶的间隙起分子筛作用。
凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测管的上面或中间,反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙,沉积在微柱凝集检测管的底部。
四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备普通离心机;血型血清学多用离心机;37℃免疫微柱孵育器;六、试剂1、试剂名称:抗人球蛋白交叉配血卡(微柱凝集法)2、试剂生产厂家:长春博迅生物技术有限责任公司;3、批准文号:国药准字S2*******;4、包装规格:聚丙烯卡12卡×3检测人份/盒;5、贮藏条件;18-25℃避光保存。
6、有效期:自检定合格之日起12个月;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;2、分别配制受血者与献血者0.5%-0.8%红细胞悬液3、将受血者血清50ul与献血者红细胞悬液50ul加入主侧管中;4、将受血者红细胞悬液50ul与献血者血清50ul加入次侧管中;5、将加样后的试剂卡置37℃免疫微柱孵育器中孵育15分钟;6、使用血型血清学多用离心机900rpm离心2分钟,1500rpm 离心3分钟,取出肉眼观察结果。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(抗人球蛋白法)一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(西班牙Diagnostic Grifols,S.A公司生产)(二)设备:戴安娜专用离心机(型号:DG SPIN)、戴安娜专用孵育器(型号:DG THERM)、微量移液器(5-50ul)、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存:血液样本必须密封,2-8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤:(一)交叉配血前,先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右,取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧,撕掉配血卡上的封条。
(四)取试管两支,分别配制患者和献血者红细胞悬液(浓度为1%)待用。
(五)交叉配血:主侧:用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ;次侧:用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。
(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟,移出放入离心机9分钟,取出观察结果。
七、结果观察:(一)主侧和次侧均不凝集,细胞沉于反应卡的底部,配血相合,可以输血(二)主侧或次侧出现凝集,细胞悬挂于卡的中间或上部,配血不相合,不可以输血(三)若输注血液为红细胞,则只需主侧配血相合。
微柱卡式法凝集强度描述。
交叉配血操作规范(微柱凝胶法)
交叉配血操作规范(微柱凝胶法)【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】BYZ型血库血清学多用离心机,2002-2型血库专用离心机,FYQ免疫微柱孵育器。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改,可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】交叉配血微柱凝胶法检测的操作。
【原理、方法、用途】本品采用抗人球蛋白微柱凝胶免疫检测技术,用于交叉配血试验。
在微柱凝胶介质中,红细胞抗原与相应的不完全抗体结合后(致敏红细胞),凝胶中抗人球蛋白形成凝集块,离心后仍滞留在胶上或胶中,而未和抗体结合的红细胞则完全沉于凝胶底部。
该方法使试验更简单,更规范,结果更易判定。
本品系由聚丙烯塑料透明卡片的六支微柱型管中充满葡聚糖凝胶和抗人球蛋白,制成抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【标本采集和处理】1.由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml,作好标记,立即送检。
备血使用的受血者标本必须是输血前2天之内的血样。
采血时要防止溶血及多量组织液混入(多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时),在病人输液时采集标本,必须从未输液的一侧肢体抽取,绝不允许在输液管接头处采集。
2.非急症病人输血前,应事先采取血标本作血型鉴定,填写申请单配血单上,以便核对。
急症抢救输血,未能事先采血检测血型,则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。
确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。
并按日期索引进行登记。
4. 将标本置于2002-2型血库专用离心机内,放置保证平衡,以1500转/min 离心10分钟。
保证血浆于血球有效分离。
溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记,溶血性疾病应注明。
【试剂】抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【操作步骤】1.取出抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡,应注明病人姓名、科室和床号。
微柱凝胶卡实用标准操作程序
微柱凝胶卡标准操作程序(SOP)襄城县人民医院血库目录1、ABO.RhD血型抗原检测卡标准操作程序(SOP) (3)2、ABO、RhD血型检测卡标准操作程序(SOP) (5)3、不规则抗体筛检卡标准操作程序(SOP) (8)4、抗人球蛋白交叉配血卡标准操作程序(SOP) (10)5、新生儿溶血病检测卡标准操作程序(SOP) (11)6、新生儿溶血病母体IgG抗体效价检测卡标准操作程序(SOP).................................................... . (13)7、新生儿溶血病母体IgG抗体效价检测卡标准操作程序(SOP).................................................... . (15)8、微柱凝胶检测卡在实验室操作的注意事项 (17)一、ABO.RhD血型抗原检测卡标准操作程序(SOP)一、准备工作1、微柱凝胶试剂卡的准备:观察外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡放置室温(18-25℃)平衡,再用专用离心机离心5分钟。
2、检测标本的准备:红细胞悬液的制备:取被检者压积红细胞10微升,加入1毫升红细胞稀释液,此浓度大约为0.8%-1%。
外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。
二、操作步骤1.将准备好的微柱凝胶试剂卡做好标记。
2.将配制好的被检者红细胞悬液分别加入第1至第3管或第第4至第6管中,每管50微升。
3.即刻使用专用离心机离心5分钟(900rpm2分钟,1500rpm3分钟),取出肉眼判定结果。
三、注意事项1、检测标本必须为抗凝血。
2、红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应。
尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。
3、如在微柱凝胶管中出现溶血现象,强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应,也不排除其他原因所致溶血,故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论。
4、若结果为±或1+需进一步分析,可能为亚型或弱化抗原。
微柱凝胶法血型鉴定操作规程
微柱凝胶法血型鉴定操作规程(总2页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除微柱凝胶法1标本:EDTA-K2 抗凝血2.0ml2原理:2.1人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应(其本质为血凝反应);2.2检测系统是在微柱中(载体)装有的介质凝胶;2.3凝胶间隙具有分子筛作用。
凝集的红细胞(结合的)被留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。
未凝集的红细胞(即未结合、游离的)通过离心后沉入微柱的底部;2.4微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗A、抗B试剂检测红细胞上相应的血型抗原,从而鉴定红细胞的血型。
3操作:3.1在A1孔悬空加入50ul标准A1红细胞,在B孔悬空加入50ul标准B红细胞,再在两孔中各加入50ul样品血浆。
3.2在A、B、D、C、E、Ctrl六个孔内分别悬空加入5%病人红细胞悬液10ul3.3将卡放到戴安娜专用离心机中离心9分钟3.4离心结束后在白色背景前观察结果4结果判断:A孔阳性B孔阴性为A型;A孔阴性B孔阳性为B型;A孔阴性B孔阴性为O型;A孔阳性B孔阳性为AB型。
5.注意事项5.1严格按操作规程操作,认真核对标本并作好标记。
5.2应先加红细胞悬液,然后再加血浆。
5.3为了防止冷凝集现象的干扰,一般应在室温下进行试验。
5.4严格控制离心速度和时间,防止假阳性或假阴性结果。
5.5未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存,用完后放4℃冰箱保存1周。
5.6判断结果后应仔细核对,记录,避免笔误。
6.方法评价卡式法定型使用安全,操作简单,结果稳定可靠,灵敏度高,重复性好,但费用昂贵,需要特殊的仪器设备。
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微柱凝胶交叉配血卡标
准操作规程
公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]
微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程
一.准备工作
1.微柱凝胶试剂卡的准备
观察外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡放置室温(18-25℃)平衡,再用专用离心机离心5分钟。
2.检测标本的准备
3.红细胞悬液的制备
取被检者压积红细胞50微升,加入1毫升红细胞稀释液(盐水),外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。
二.操作步骤
1.将准备好的抗人球蛋白交叉配血卡做好标记。
2.将受血者血清1滴(或50μl)与献血者红细胞悬液10μl先后加入主侧管中。
3.将献血者血清1滴(或50μl)与受血者红细胞悬液10μl先后加入次侧管中。
4.加样后的试剂卡,置37℃孵育器中孵育15分钟。
5.使用专用离心机离心5分钟,取出肉眼观察结果。
三.结果判定
1.阴性结果:红细胞完全沉降于凝胶管底部,表明受血者与献血者血型相合。
2.阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中,表明受血者与献血者血型不相合。
四.注意事项
1.红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应。
尽可
能应用当日采集的新鲜血做本试验。
如不得不用过夜血或陈旧血,则必须首先用该标本做阴性对照试验,以确定该标本是否可以做本实验。
2.血清标本:血清标本必须充分去纤维蛋白,否则标本中纤维蛋
白在微柱凝胶中析出,阻碍阴性红细胞沉淀,呈假阳性反应。
3.如在微柱凝胶管中出现溶血现象,强烈提示为红细胞抗原抗体
阳性反应,也不排除其他原因所致溶血,故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。
4.每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。
5.试剂卡应放在18-25℃储存,如若长期放在4℃冰箱,建议每
1-2个月取出,用专用离心机离心一次,以防止干胶或产生气泡。