实验二 果蝇成虫的形态观察与幼虫唾腺染色体观察
果蝇唾液腺染色体的制片与观察
果蝇唾液腺染⾊体的制⽚与观察果蝇唾液腺染⾊体的制⽚与观察121140083 朱琪璋⼀实验⽬的1观察果蝇的唾腺染⾊体，练习果蝇幼⾍唾腺分离技术及唾腺染⾊体的制⽚⽅法2观察了解果蝇唾液腺染⾊体的形态特征3了解果蝇唾腺染⾊体在遗传学研究中的意义⼆实验原理（预备知识）1果蝇唾液染⾊体的介绍果蝇、摇蚊幼⾍唾液腺细胞中的巨⼤染⾊体。
双翅⽬昆⾍的唾液腺细胞发育到⼀定阶段之后就不再进⾏有丝分裂，⽽永久停留在分裂间期。
但随着幼⾍的⽣长，唾液腺染⾊体仍不断地进⾏⾃我复制⽽且不分开，经过许多次的复制形成约 1 000—4 000拷贝的染⾊体丝，合起来直径达5µm，长度达400µm，⽐普通细胞中期染⾊体约⼤100～150倍，所以⼜称为多线染⾊体或巨⼤染⾊体。
唾液腺染⾊体的另⼀特点是体细胞中同源染⾊体处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋⽩纤维丝唾液腺染⾊体是⼀类存在于双翅⽬昆⾍，如果结合在⼀起，紧密盘绕。
所以细胞中染⾊体只呈单倍数。
⿊腹果蝇的染⾊体数⽬2n=8其中第Ⅱ、第Ⅲ染⾊体为中部着丝粒染⾊体，第Ⅳ染⾊体和第IX染⾊体为端着丝粒染⾊体。
唾液腺染⾊体形成时，染⾊体着丝粒和近着丝粒的异染⾊质区聚于⼀起形成⼀个染⾊中⼼，所以在光学显微镜下可见从染⾊中⼼处伸出6条配对的染⾊体臂，其中5条为长臂，l条为紧靠染⾊中⼼的很短的臂。
唾液腺染⾊体经染⾊后，呈现深浅不同，疏密各异的横纹。
这些横纹的数⽬，位置，宽窄及排列顺序都具有物种的特异性。
研究认为这些横纹与染⾊体的基因是有⼀定关系的。
通过⼀定的实验⽅法使果蝇唾液腺染⾊体各臂分散开，并且使带纹、膨突等特征不受杂质影响清晰地显⽰出来，是进⾏果蝇遗传学研究的很重要的⼀个环节．果蝇唾液腺染⾊体在不同种间的共同点是染⾊体的着丝点位于⼀个染⾊区域，但不同的种类往往其染⾊体臂数⽬不同．每条染⾊体臂上分布着染⾊深浅不同、粗细各异的磺纹，这些横纹的宽窄疏密程度以及排列顺序和数⽬⼜都有种的特异性和种内的差异．由此，果蝇唾液腺染⾊体近⼏⼗年来，已⼴泛⽤于种内系统发⽣和种间亲缘关系的研究中，因为种间及种内不同品系和近缘种中的遗传差异经常反映在唾液腺染⾊体的不联会、形成泡、缢虞和间带区的伸缩性以及顶体的形态等多⽅⾯的差异，⽽特别重要的是研究它的基因序列的差异(观察是否产⽣了例位以及染⾊体的断裂、融合和重排)。
果蝇唾腺教学
脂肪体
解剖针
解剖针
果蝇唾腺教学
第11页
3、腺体解离：
剥离脂肪体及其它杂物，分离出纯净唾腺 ，用吸水纸小心吸去生理盐水。加1滴1N HCl，浸2—3分钟，使组织疏松，方便压片时细胞分散，染色体散开。
果蝇唾腺教学
第12页
4、染色：
用吸水纸吸去盐酸，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干，重复3～4次，洗净残留盐酸。加2滴石炭酸品红染液，染色10—20分钟（此过程应保持腺体一直处于染液浸泡中）。
果蝇唾腺教学
果蝇唾腺教学
第1页
一、试验目标 二、试验材料 三、试验原理 四、试验用具药品 五、试验步骤
果蝇唾腺教学
第2页
一、试验目标
了解果蝇唾液腺染色体形态学及遗传学特征；学习分离果蝇幼虫唾液腺技术
果蝇唾腺教学
第3页
二、试验材料
图1 果蝇生活史1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫
野生型果蝇三龄幼虫
果蝇唾腺教学
第4页
果蝇不一样生活周期形态观察
蛹
果蝇唾腺教学
第5页
三、试验原理
果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体； 正常：间期DNA复制 两条染色单体 着丝点裂开 子染色体 核分裂 胞质分裂 果蝇：有丝分裂停顿在分裂间期，DNA不停自我复制，着丝点不 裂开同源染色体紧密配对：体细胞联会，所以染色体只展现单倍数； 形成染色中心，从染色体中心处伸出5条长臂，1条短臂；染色后，出现一系列宽窄不一样、染色深浅不一横纹；
果蝇唾腺教学
第8页
五、试验步骤
1、选取幼虫；2、腺体剖取 ；3、腺体解离 ；4、染色；5、压片；6、观察；
果蝇唾腺教学
滴加一滴生理盐水，观察幼虫结构：具一钝尾和带黑色口器尖头端
果蝇唾液腺染色体观察课件
实验应在恒温、恒湿条件下进行， 以保持果蝇健康并获得准确的观察 结果。
唾液腺染色体的特
03
点与观察
唾液腺染色体的形态特征
唾液腺染色体呈长带状，具有 明显的带纹和着丝粒。
染色体数目较少，通常为4条， 分别为X染色体、常染色体1、 常染色体2和常染色体3。
染色体上含有大量的重复序列 和基因，这些基因与果蝇的性 别、代谢和行为等密切相关。
的着色反应。
结果分析
染色体结构完整性
观察到的染色体形态完整，没有出现断裂或异常 结构，说明果蝇的体数目与果蝇的染色体数目相 符，表明实验中染色体的计数是准确的。
染色质活性分析
通过染色深浅程度，可以初步判断染色质活性， 为后续研究染色质功能提供依据。
结果讨论
实验方法优化
虽然本次实验取得了较为理想的结果，但仍可考虑采用更先进的 观察技术，如荧光原位杂交技术，以提高分辨率和准确性。
染色体功能研究
根据观察到的染色体形态和着色情况，可以进一步探讨染色体在果 蝇唾液腺中的功能和作用机制。
异常染色体的识别
通过比较正常和异常染色体的形态、数目和着色反应，有助于识别 和诊断染色体异常相关的遗传疾病。
果蝇具有复眼、触角和三 对足，与其他昆虫相似。
果蝇在遗传学研究中的应用
遗传学模型
果蝇作为遗传学研究的模 型生物，有助于揭示基因 与表型之间的关系。
基因定位
果蝇的染色体数目少，易 于进行基因定位和染色体 分析。
基因表达
果蝇唾液腺染色体的观察 有助于研究基因表达和调 控机制。
果蝇的唾液腺染色体
染色体特点
实际应用价值
遗传疾病诊断与治疗
通过研究染色体结构和功能，有助于深入了解遗传疾病的 发病机制，为遗传疾病的诊断和治疗提供理论依据和技术 支持。
实验二：遗传基本规律的验证一果蝇形态观察与杂交
实验二：遗传基本规律的验证一
（果蝇形态观察与杂交）
1、目的与要求：
了解果蝇的生活周期及各发育阶段的形态特征，熟悉雌雄果蝇的鉴别及常见突变性状的鉴定；掌握杂交方法。
2、方法原理：
果蝇的生活周期、成虫雌雄的鉴别及常见突变性状。
3、主要实验仪器及材料：
解剖镜、毛笔、镊子、放大镜、指形管、培养箱、乙醚、麻醉瓶、毛笔、吸水纸。
4.掌握要点：
雌雄成虫果蝇特征的区分。
5.实验内容：
（1）果蝇生活周期及各发育阶段的形态特征（2）雌雄果蝇的鉴别（3）常见几种性状的观察（4）果蝇杂交。
《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告
DOI：10.16661/ki.1672-3791.2020.17.204《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验综述报告①叶玉娟 宁丙乾 陈艳荣(黄山学院生命与环境科学学院 安徽黄山 245041)摘 要：该文阐述了本科院校遗传学实验课程中难度较大的《果蝇唾腺染色体的制备及观察》实验，从培养材料起，对唾腺的剥离、解离、染色、压片，再到观察唾腺染色体的实验步骤和注意事项都进行了详细的叙述。
该实验对本科院校生物学专业学生具有非常重要的意义，不仅能帮助学生掌握剥离果蝇幼虫唾腺的关键技术，也使学生更直观地了解到多线染色体的形态特征和遗传学特征。
关键词：唾腺染色体 染色 实验综述中图分类号：Q243 文献标识码：A 文章编号：1672-3791(2020)06(b)-0204-02Abstract:This paper describes the experiment of "preparation and observation of salivary gland chromosome of Drosophila melanogaster", which is very diff icult in the course of genetics experiment in undergraduate colleges.From the point of culture materials, the experiment steps and precautions of salivary gland chromosome observation are described in detail. This experiment is of great signif icance to biology students of undergraduate colleges. It can not only help students master the key technology of stripping salivary gland of Drosophila larvae, but also help students understand the morphological and genetic characteristics of multiline chromosomes more directly.Key Words: Salivary gland chromosome; Dyeing; Experimental overview1 实验目的（1）掌握剥离果蝇幼虫唾腺的技术，并学习制作果蝇唾腺染色体标本的方法。
遗传实验报告 果蝇观察
4. 突变性状的鉴别
表三 各突变品系的表型特征
品系
表型
特征
基因符号 染色体
18 号
野生型
灰、长、红、直等特征 ＋＋＋＋ 各染色体
W号
白眼
复眼白色
w
X
14 号
黑檀体 残翅
身体黑亮 翅退化
e
Ⅲ
vg
Ⅱ
白眼
复眼白色
w
X
6号
小翅
翅小
m
X
卷刚毛
刚毛弯曲
sn3
X
棒眼果蝇
棒眼
复眼棒状
B
X
FM7a/B
棒眼
复眼棒状
B
X
2. 如何准确鉴别果蝇的雌雄个体？ 主要是看大小及有无性梳。雌果蝇通常比雄果蝇大；雄果蝇第一对胸足附节的第一亚节基
部有性梳。其他特征见第 2 页表二。 3. 将野生型和几种突变型性状观察的结果填表。
见第 3 页表三。 4. 为什么说果蝇是遗传学研究的模式生物？
1) 生活周期短； 2) 体型小易于饲养； 3) 染色体数目少（2n=8）； 4) 具有多线染色体 幼虫的唾腺染色体具有体细胞联会的特点，且唾腺染色体是一种巨
黑檀体、翅退化
6 号果蝇（左为 6 号）
白眼、小翅、卷刚毛
棒眼果蝇
FM7a/B
第 5 页 共 8 页 山东大学遗传学实验报告
山东大学实验报告
2016 年 09 月 20 日
姓名 科目
班级
同组人
遗传学实验
题 目 果蝇的雌雄鉴别与突变型观察
学号
—————————————————————————————————————————————————————
11《遗传学》实验指导
实验一果蝇生活史及其外部形态观察一、实验目的1、掌握雌雄果蝇的外部形态区别。
2、了解果蝇生活史及其培养方法。
二、实验材料19#：野生型（红眼、长翅、直刚毛）6#：三隐性纯合体（白眼、小翅、焦刚毛）W：（白眼））黑檀体：唾腺染色体观察材料三、实验仪器、药品放大镜、双目解剖镜、镊子、白瓷盘、毛笔、乙醚等四、实验步骤1、于培养瓶中，肉眼观察果蝇成虫、幼虫及蛹的形态。
2、用乙醚麻醉成虫后，置于双目解剖镜下观察（翅膀、眼色、刚毛、体色、平衡棒）。
3、在解剖镜下，识别雌雄成虫。
4、肉眼识别雌雄成虫。
5、肉眼区分死、活成虫。
6、了解果蝇培养基的配制方法及其转管步骤。
7、列表描述果蝇雌雄成虫的区别附录一果蝇的饲养果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的好材料，尤其在基因分离、连锁、交换等方面，对果蝇的研究更是广泛而充分。
一、果蝇的生活史果蝇属于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种。
它的生活史包括卵→幼虫→蛹→成虫。
果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度20-25℃。
从表中可以看出25℃时，从卵到成虫约10天；在25℃时成虫约活15天。
果蝇一般是培养在恒温箱内，盛夏时，要注意降温。
果蝇有雌雄之分，幼虫期区别较难，成虫区别容易（图1）。
雄性的腹部环纹5节，末端钝而圆，颜色深。
第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳（sexcombs）。
雌性腹部环纹7节，末端尖，颜色浅，跗节前端无黑色鬃毛流苏（图2）。
二、果蝇的繁育果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为生，而是食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料。
目前果蝇饲料较好的配方如下：A：糖6.2克，加琼脂0.62克，再加水38毫升，煮沸溶解。
B：玉米粉8.25克，加水38毫升，加热搅拌均匀后，再加0.7克酵母粉。
A和B混合加热成糊状后，加0.5毫升丙酸，即可分装到培养瓶中。
实验二普通果蝇形态与生活史观察
专业班级：2016级生物技术（1）班学号：142姓名：王堽实验二普通果蝇形态结构和生活史观察一、目的1．了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点；区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征；掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术；2．掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法，熟悉常见突变型；了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化；3．掌握实验果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法；4．掌握果蝇的麻醉方法，熟悉使用体视显微镜观察果蝇的形态特征；二、原理果蝇（fruit fly）是双翅目昆虫，属果蝇属，广泛存在于温带及热带地区，主食为腐烂水果中的酵母菌约有2500个种。
通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇。
用果蝇作为实验材料有许多优点：1. 饲养容易。
在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖；2. 生长迅速。
十二天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析；3. 染色体数少。
只有4对；4. 唾腺染色体制作容易。
横纹清晰，是细胞学观察的好材料；5. 突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察；6.果蝇的生活史：果蝇是完全变态昆虫，它的生活史包括卵、幼虫、蛹及成虫四个发育时期；7.果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。
一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，一般在20-25℃下培养最为合适。
在适宜的温度下，大约经过10-15天即可繁殖一代；8.果蝇染色体组成。
果蝇为二倍体2n＝8。
核内有丝分裂：不涉及细胞分裂和核分裂的染色体分裂方式。
体联会：一些特殊的体细胞中（如果蝇唾腺细胞）的染色体经多次复制却不分开，依旧紧密地排列在一起就象减数分裂中的联会现象一样。
染色体组：来自二倍体生物的正常配子的所有染色体。
连锁群：来自配子中的每条染色体及其携带的基因。
雌雄基因平衡理论：对果蝇而言，X染色体上有决定雌性的基因，常染色体上有决定雄性的基因存在，其比值决定果蝇的雌或雄，Y染色体只与育性有关，而与性别无关；9.果蝇的性别决定。
果蝇唾液腺染色体制片和观察
实验报告课程名称遗传学实验实验名称果蝇唾液腺染色体制片和观察一、实验原理果蝇唾腺染色体是永久间期染色体，只发生DNA复制，不发生有丝分裂。
在幼虫唾腺细胞内，每条染色体进行了10次左右的复制，形成了约210=1024条染色体拷贝，再结合同源染色体的配对，共用约2048条同源染色体拷贝进行体细胞联会，形成比正常有丝分裂中期的染色体大200倍的、巨大的多线染色体。
这些染色体的着丝点聚集在一起，形成染色中心，同源染色体的两臂向外伸展。
经过染色，唾腺染色体的显示出独具本染色体特色的带和间带模式。
这个模式是恒定的，可用用于基因的定位，如果发生染色体的结构变异，则可以通过模式的改变而发现出来。
不同的染色体，其端部不同，可以用于鉴别染色体。
在观察唾腺染色体时，会发现膨胀泡结构，这是强烈的基因转录迹象。
二、实验结果图一：果蝇幼虫解剖针分离后效果图图二：剥离的腺体一共分离了3条果蝇幼虫才分离出较清晰的唾液腺体，在分离出带腺管的2侧腺体时，上面还有其他东西，因为想剥离的干净一点，所以没急着拍照，结果分离到一半时，一条腺体丢失，所以照片仅显示剥离中期时剩的一条腺体。
图三：唾腺染色体（借用）图四：唾腺染色体——图片放大（借用）带与间带、染色中心、膨胀泡、3R端部（僧帽）特点如上图标示。
三、总结反思从挑取果蝇幼虫，到幼虫的头身分离和剥离腺体，再到染色，这些操作的较为顺畅，并没有出现大的失误。
虽然刚开始分离的两条幼虫因为手法生疏，并没有分离出完整的腺体，但是第三次尝试时就分离出带腺管的2侧腺体，剥离后还剩一条较为完整的腺体。
染色时操作也较为小心，并未让腺体随水流被滤纸吸走。
就剥离腺体这个操作而言，我觉得这是一个需要耐心、眼力和方向感的事情，可以在剥离的时候将载玻片放在显微镜下，同时2根解剖针也进入显微镜的视野内的两侧，用解剖针判断该划掉哪个方向的一部分，一点点去掉不要的东西，最后就可以留下需要的腺体了。
但是操作一定要细心，腺体特别小，划的时候如果一不小心粘到解剖针上也弄不下来，那条腺体也就没用了。
果蝇唾液腺染色体的分离及观察
果蝇唾液腺染色体的分离及观察山东大学实验报告 2013年 03 月 22 日姓名班级同组人科目遗传学实验题目果蝇唾腺染色体标本制备和观察组别一、研究背景1.发现1881年，意大利的细胞学家巴尔比尼(Balbiani)在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了一种巨大的染色体，由于存在于唾腺细胞中，所以又称为唾腺染色体。
1933年，美国学者贝恩特(Painter)等又在果蝇核其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体。
这种染色体宽约5μm，长400μm，相当于普通染色体的100-150倍，因而又称为巨大染色体。
2.原因(1)染色体螺旋化程度不高。
(2)果蝇幼虫的唾腺细胞在发育过程中，细胞核内的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体DNA也不分开，形成了多线染色体。
(3)同源染色体相互靠拢在一起呈现一种联会状态，使其比一般的体细胞染色体粗大。
3.基本概念核内有丝分裂:不伴随核分裂和细胞分裂的染色体分裂。
核内复制;不伴随细胞内核分裂的染色体复制现象。
体联会:唾腺细胞中的染色体复制后，所有同源染色体一直处于紧密配对的前期状态，如同减数分裂的联会，这种现象称为体联会。
4.果蝇的染色体组成由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒相互连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称为明带和暗带的横纹，这些横纹的位置、宽窄、数目都具有物种的特异性，不同物种，不同染色体的不同部位形态和位置是固定的，因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹的特征能准确识别各条染色体。
在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的界旋、膨大形成的疏松区和巴尔比尼环，其富含转录出来的RNA ，因此不着色，是基因活动的区域。
在个体发育的不同阶段，疏松区或巴尔比尼环在染色体上出现的部位不同，因此可以研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。
果蝇唾液腺染色体观察课件
唾液腺染色体的遗传学特征
染色体数目与形态特征
染色体数目
果蝇的唾液腺染色体数目为8，这与其他类型的染色体数目不同。
形态特征
唾液腺染色体的形态较大，具有明显的带纹和着丝粒等特征。
染色体上的基因定位与功能分析
基因定位
唾液腺染色体上已知的基因定位 包括多个基因簇和单一基因，这 些基因涉及多种生物学功能。
识别标志
唾液腺染色体的识别标志包括染色体的形状、大小、颜 色和位置。此外，还可以观察染色体的结构特征，如核 仁、染色质和染色体臂等。
观察结果记录与分析
记录
观察唾液腺染色体时，需要记录观察结果，包括 染色体的形态、颜色、大小、位置等。
分析
根据观察结果，可以对唾液腺染色体的特征和变 化进行分析，推断出果蝇的生物学特征和遗传信息。
实验总结与展望
实验总结与收获
实验原理
实验方法
实验结果
果蝇唾液腺染色体观察实验涉及了染 色体复制、转录和翻译等关键生物学 过程，通过观察唾液腺染色体的形态 和结构，可以深入理解这些过程的相 互关系和调控机制。
本实验采用了活体观察和组织固定观 察两种方法，能够清晰地展示唾液腺 染色体的动态变化。此外，利用荧光 染色技术对染色体进行染色，使得观 察更为直观。
目录
• 果蝇简介 • 果蝇唾液腺染色体的提取 • 唾液腺染色体的观察与识别 • 唾液腺染色体的遗传学特征 • 实验总结与展望
果蝇简介
果蝇的生物分类
动物界
节肢动物门
昆虫纲
双翅目
果蝇科
果蝇的生活习性
喜好腐食 01
繁殖速度快 02
生命周期短 03
果蝇的遗传学研究价值
基因型和表现型易于鉴定 01
简介果蝇唾液腺染色体PPT课件
2R
2L
3R
3L
X
4
果蝇唾腺染色体的观察
着丝粒
果蝇染色体模式图
果蝇唾腺染色体的观察
2R
2L
3R
3L
X
4
2R
2L
3R
3L
X
4
染色中心
着丝粒
实验原理
染色中心（chromocenter）：四对多线染色体的着丝粒区聚合成为一个，从此中心伸出5个长臂和１个短臂。 具有横纹： 多线染色体中平行排列的染色质在各段凝缩紧密程度不同形成（85%呈带纹区［深染］，15%呈间带区［浅染］）。
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺染色体显微照片
果蝇唾腺染色体的观察
带纹
间带
每一臂上所有的横纹的大小和位置是恒定的，即具有种的特征。 整个唾腺染色体划分为102区。 6个段/区：A-F 。 若干条横纹/段：1、2、3… 。 如3C7表示第三区C段第7条横纹。
果蝇唾腺染色体的观察
示X-染色体分区、段、条
蛹
果蝇唾腺
果蝇唾腺染色体的观察
实验步骤
解剖（生理盐水） 染色（15-20min） 压片 镜检
果蝇唾腺染色体的观察
注意事项
1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 2. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃。如水多了，请再剥离唾腺前吸走些，唾腺剥离后请勿吸水，以防将唾腺一起吸走。 3. 清除脂肪组织时要量力而行。 4. 染色液勿过多，否则压片时唾腺易随染色液漂走。如染色时间到后，染色液已干，应再少加些染色液，再盖上盖波片，避免气泡产生。 5. 压片时要均匀用力，轻敲盖片。
果蝇唾腺染色体的观察
如染色体有缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。
果蝇唾腺染色体的观察一 实验目的1练习取出果蝇幼虫唾腺的技术_OK
玻片上，滴１～2滴0.7％生理盐水，找到具有口器的头部
（有一小黑点），一手用解剖针刺入（或压住）头部，将
虫固定，一手用摄子夹紧幼虫下半部（尾端1/3处），轻
轻向两端拉开，唾腺随头部拉出。唾腺是一对透明的棒状
腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组
织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
11
的染色体——唾液腺染色体（salivary gland chromosome s）。由于它具有许多重要特点而成为细胞遗传学、发生 遗传学、进化遗传学和分子遗传学研究中不可多得的好 材料。
2
➢果蝇是双翅目昆虫，幼虫期具有很大的唾腺细胞， 其中的染色体是巨大的唾液腺染色体。
➢唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开，经 过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝， 合起来达5mm宽，400mm长，比普通中期相染色体 大得多（约100～150倍），所以又镊子，
解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸等。
0.7％氯化钠（NaCl），1mol/L HCl；改良
苯酚品红染色液；果蝇培养基等。
6
五 实验方法
1．培养果蝇三龄幼虫 将果蝇放在营养丰富的培养基 中，15℃～18℃下饲养，幼虫要生长肥大，才能获得 较大的唾腺。
7
8
培养要求：
实验九 果蝇唾腺染色体的观察
一 实验目的
1．练习取出果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺染
色体标本的方法。
2．了解体细胞染色体联会现象，观察果蝇唾腺
染色体的形态特征，并根据唾腺染色体上横纹的
形态和排列，识别不同的染色体。
3．识别染色体结构变异的细胞学表现。
1
二 实验原理
本世纪初，D.Kostoff用压片法首先在果蝇（Drosophi la melanogaster）幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大
2 果蝇幼虫唾液腺染色体标本的制备与观察
果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察摘要果蝇幼虫唾腺细胞染色体是一种特化的巨大染色体，由于其外形具横纹与胀泡等结构，可作为物种区别标志与基因定位标志。
实验采用普通果蝇的三龄幼虫，剥离出其唾腺，通过固定、染色与压片等步骤制成果蝇幼虫唾腺染色体标本，在显微镜下观察，最终对果蝇幼虫唾腺染色体的外形、结构、特征做出简要描述。
引言果蝇三龄幼虫的唾腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。
加之唾腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般分裂中期体细胞中的染色体长100~150倍。
由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心，以及同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称作明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
另外某染色体上出现的变异，在唾腺染色体相应的臂上就能反映出来，这样这些横纹就成了精确基因定位的“坐标”。
将野生型果蝇的带纹与缺失、重复、倒位等突变体的带纹进行比较，就可以将一些基因定位在染色体上。
[1]在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区胀泡，其中最大的一个胀泡叫做巴尔比尼氏环。
胀泡富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。
在个体发育的不同阶段，胀泡或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。
本次实验将通过对果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察，了解并掌握果蝇三龄幼虫唾腺的剖离技术，掌握唾腺染色体标本的制备方法，了解唾腺染色体的形态结构特点。
二 果蝇形态观察与雌雄鉴别
三、实验步骤：
1）流入瓶内）再塞上 橡皮塞。将要 麻醉的果蝇试管在海绵板上敲击 几下，使其都集中在底部。然后迅速拔去棉塞， 插入麻醉瓶大口，拍打试管和麻醉瓶。使果蝇 全都倒入麻醉瓶。然后迅速盖上麻醉瓶口盖子。 麻醉到一定程度把果蝇倒在白磁板上。当果蝇 翅膀上翘45°时，表示已经死亡。 2）鉴别果蝇各品系及统计雌雄果蝇数目。
4.果蝇品系的鉴别 眼色 红 红 白 红 白 翅膀 长翅 残翅 小翅 长翅 小翅 刚毛 直 直 焦刚毛 直 直 体色 灰 灰 灰 黑檀体 灰
野生型 残翅 小翅 黑檀体 白眼
5.雌雄果蝇的 鉴别：
体型 腹部末端 雌 大 雄 小 背部条纹 性梳
无色、端尖 7条（可见5条） 无 黑色、鈍园 5条（可见3条) 有
雄果蝇前第5节附节上有10根象梳子的 棕毛
果蝇雌雄外形辨别 雌果蝇体型大于雄果蝇
雌果蝇有6节体节，腹部底部为产卵管，呈現圆 锥狀凸出。
雄果蝇有4节体结，腹部底部为交尾器，呈 現黑色圆形外观。雄果蝇在前肢先端第二 節具有性梳。
刚毛 野生型，头胸部以及复眼的周围具有平直，先端
略弯的长型粗黑硬毛。
实验二 果蝇的麻醉、主要性状 观察和雌雄的鉴别
实验目的
1.掌握果蝇的麻醉方法。 2.不同品系果蝇的识别，雌、雄果蝇的鉴别， 从而为以后进行以果蝇为材料的遗传试验作 好准备。
二、实验材料：果蝇
1.果蝇的生活史： 昆虫纲双翅目昆虫，生活史经过： 卵－幼虫－蛹－成虫，是完全变态的昆虫。 2.果蝇的生活周期和温度的关系： 20－25C是果蝇的最适生长温度，生活周期 为10天。 3.果蝇的培养基： 果蝇的食物主要是酵母，凡是能使酵母发酵 的基质都能做培养基，最常用、效果最好的是 玉米粉培养基。
作业
果蝇幼虫唾液腺观察
果蝇幼虫唾液腺染色体标本的制备与观察【实验目的】练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法。
观察了解果蝇唾腺学特征。
【实验原理】本世纪初，D Kostoff 用压片法首先在D Melanogaster果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体——唾液腺染色体。
事实上，双翅目昆虫（如摇蚊、果蝇等）的幼虫期都具有很大的唾腺细胞，其中的染色体就是巨大的唾液腺染色体。
这些巨大的唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。
双翅目昆虫的整个消化道细胞发育到一定阶段之后就不再进行有丝分裂，而停止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，细胞核中的染色体，尤其是唾液腺染色体仍不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5μm宽， 400μm长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体和巨大染色体。
唾液腺染色体形成的最初，其同源染色体即处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋白纤维丝合在一起，紧密盘绕。
所以配对的染色体只呈现单倍数。
黑腹果蝇的染色体数为2n=2×4，其中第II、第III染色体为中部着丝粒染色体，第IV和第I（X染色体）染色体为端着丝粒染色体（图21-1）。
而唾液腺染色体形成时，染色体着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚于一起表成一染色中心，所以在光学显微镜下可见从染色体中心处伸出6条配对的染色体臂，其5条为长臂，1条为紧靠染色中心的很短的臂（图21-2）。
由于唾腺细胞在果蝇幼虫时期一直处于细胞分裂的间期状态，所以每条核蛋白纤维丝都处于伸展状态，因而不同于一般有丝分裂中期高度螺旋化的染色体。
唾腺染色体经染色后，呈现深浅不同，疏密各异的横纹。
这些横纹的数目、位置、宽窄及排列顺序都具有种的特异性。
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果蝇唾腺染色体核型图 果蝇唾腺染色体模式图
From: Robert J. Brooker. Genetics analysis & principles, 3rd edition.
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From: Robert J. Brooker. Genetics analysis & principles, 3rd edition.
雄性果蝇
雌性果蝇
4片 3条 腹尖饨圆 顔色较深
6片 5条 腹尖稍大 顔色较浅
第一对脚跗节前端有黑色鬃毛梳苏 无性梳
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.tw/newsphoto/96news/hotnews-960509.php
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六、作业： 画出你所看到的雄果蝇（含性梳）
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多线染色体的几个特征： • 唾腺染色体巨大，超过一般染色体。 • 唾腺细胞始终处于分裂前期状态，染色配对如粗线期，故
染色体为n。 • 在各染色体上，具异染色质的着丝粒部分，相互靠拢，形
成染色体中心。 • 有横纹处，DNA双链螺旋化程度稍高或稍低，故疏密有致
，深浅有别，对应排列，这意味着基因的排列。
唾腺染色体： 摇蚊（Chironomns）和果蝇（Drosophila）等双翅目昆虫幼虫 的唾腺细胞都很大，为普通染色体的100-150倍。经多次复制 而不分开，是具有100-4000条染色丝的复制品。 又称多线染色体。经染色后可见深浅，疏密有致的横纹，横纹 （或称带）的数目与位置恒定，具有种的特征，染色体的畸变 中的缺失、倒位、重复、易位等都可在唾腺染色上识别出来。 因此，是研究染色体畸变的好材料。
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三、实验材料 黑腹果蝇的三龄幼虫。
四、实验仪器及用具 显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、油镜瓶
、 擦镜纸
五、药品和试剂
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A、辨认头部： 将幼虫放在载玻片上滴加一小滴0.7%Nacl，将此载玻片置于实体镜下，取 载物台板黑色的一面观察。
辨认头部的方法： ①有黑点（口器）者是头部 ②幼虫蠕动方向一端是头部 ③与有二黄色突起相对的一端为头部。
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实验三（二） 果蝇唾腺染色体的观察
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主要内容
• 一 实验目的 • 二 实验原理 （掌握） • 三 实验材料 • 四 实验仪器及用具 • 五 药品和试剂 • 六 实验步骤 （理解） • 七 作业
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一、 实验目的 练习果、实验原理
头部
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B、拉出腺体： 双手各持一解剖针，用左手将所持的解剖针按在虫体头部稍前（约在虫 体前三分之一处），用右手将所持的解剖针按在头部口器（黑色）稍后 处，轻轻向前拨动，将头部与虫体扯开，腺体随即拉出，漂在生理食盐 水中。 若头部扯开后，未找见唾腺，可针解剖针在虫体前三分之一处轻轻向前 挤压，唾体也可漂出。
果蝇唾腺成球棍状，由单层细胞构成，在实体镜下边缘常附有一小泡沫 状脂肪，腺体经确认后，应尽量将脂肪剔去。
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C、染色压片： 将虫体&0.7%的生理盐水用吸水纸拭去 腺体上加一滴1NHCl，2-3’后，吸去 加蒸馏水，吸去 加改良苯酚品红一滴，15’后，可在酒精灯上稍微加热（注意： 不能将改良苯酚品红烘干） 加盖玻片+以吸水纸盖住，用解剖针木柄垂直轻敲数下后，再用 拇指用力揿压，以唾腺细胞核已压破，染色体已伸展开来，但又 不支离破碎为度。
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二、实验原理
果蝇作为遗传学实验 材料的优点 ：
① 生活史短； ② 繁殖频率高； ③ 饲养方便。
果蝇的生活史： 卵→幼虫→蛹→成 虫
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三、实验材料 黑腹果蝇的成虫。
四、实验仪器及用具 解剖镜、镊子、解剖针。
五、药品和试剂 乙醚。
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腹片数目 腹部条纹 腹尖形状 腹尖顔色 有无性梳
实验三（一） 果蝇形态和生活史
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主要内容
• 一 实验目的 • 二 实验原理 （掌握） • 三 实验材料 • 四 实验仪器及用具 • 五 药品和试剂 • 六 实验步骤 （理解） • 七 作业
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一、 实验目的 1、掌握果蝇生活史中各阶段形态与特征 2、区别果蝇性别 3、学习实验中果蝇的培养和繁殖技术
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六、作业： 画出你所看到的果蝇唾腺染色体
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植物细胞有丝分裂观察作业： 思考题： 植物材料中，除根尖细胞外，还有哪种、哪些 组织的细胞可用于有丝分裂的观察？（茎尖、 形成层细胞） 哪些动物材料，适合于进行有丝分裂的观察？ （马蛔虫受精卵，子宫，骨髓细胞）
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