体外溶血试验ppt课件

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实验五新生儿溶血病PPT课件

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临床研究进展
诊断技术
开发和应用新的诊断技术, 提高新生儿溶血病的早期 诊断准确率。
治疗方法
研究新的治疗策略和方法, 如免疫抑制剂、免疫调节 剂等,以改善患儿的预后。
并发症防治
针对新生儿溶血病可能引 发的并发症,如贫血、黄 疸、肾功能不全等,开展 防治措施的研究。
研究展望与挑战
深入探索发病机制
进一步揭示新生儿溶血病的发病 机制,为疾病防治提供理论依据。
案例三分析
ABO溶血病导致贫血的原因是母子血型不合,母体产生的抗体通过胎盘 进入胎儿体内,引发胎儿红细胞破坏,导致贫血。
案例总结与启示
总结
新生儿溶血病是由于母子血型不合,母体产生的抗体通过胎盘进入胎儿体内,引发胎儿红细胞破坏而导致的。
启示
对于新生儿溶血病的预防和治疗,需要加强产前检查和监测,及时发现和处理问题。同时,加强宣传教育,提高 公众对新生儿溶血病的认识和重视程度。
02
新生儿溶血病的治疗
药物治疗
免疫抑制剂
通过抑制免疫反应,减少红细胞 的破坏,从而控制溶血过程。常 见的免疫抑制剂包括环孢素、他 克莫司等。
糖皮质激素
具有抗炎、抗过敏和免疫抑制作 用,可以减轻溶血过程,缓解黄 疸和贫血等症状。常用的糖皮质 激素包括泼尼松、地塞米松等。
光照疗法
光照疗法是一种物理治疗方法,通过特定的波长和强度的蓝 光照射皮肤,使皮肤中的胆红素转化为水溶性的物质,从而 降低血清胆红素水平,缓解黄疸症状。
光照疗法通常在医生的指导和监测下进行,需要确保光疗的 安全性和有效性。在光疗过程中,需要注意保护宝宝的眼睛 和生殖器等敏感部位。
换血疗法
当新生儿溶血病严重时,可能需要采用换血疗法来快速降低血清胆红素水平,改 善贫血症状,预防并发症的发生。

溶血ppt课件

溶血ppt课件

开始溶血及完全溶血是氯化钠溶液的浓度 较正常对照提前两管(0.04%)或更高时,为脆 性增高。
红细胞渗透脆性试验
3.临床意义:
脆性: 见于遗传性球形红细胞增多症 脆性: 见于海洋性贫血等疾病
酸溶血试验
(Ham试验)
1.原理:
正常人红细胞与自身血清中,在弱酸性 (Ph6.6~6.8)条件下,经37C孵育1小时后不 发生溶血.PNH病人的红细胞对补体敏感,加 入稀盐酸酸化的血清中(内含补体及备解素), 经孵育后可呈现溶血现象.
3.珠蛋白合成异常的检验:
血红蛋白电泳 HbF检测 异丙醇沉淀试验 热变性试验 变性珠蛋白小体生成试验 红细胞镰变试验 ……
(三)溶血原因分析的有关检验
4.免疫性溶血的试验:
抗人球蛋白试验 冷热溶血试验 冷凝集试验 血型检验
三、 溶血性贫血 常用的实验室检查
1.红细胞膜缺陷的检验:
红细胞渗透脆性试验
孵育后渗透脆性试验
自身溶血试验及其纠正试验 酸溶血实验
蔗糖水溶血试验
(三)溶血原因分析的有关检验
2.红细胞内酶缺陷的检验:
自身溶血试验极其纠正试验 变性珠蛋白小体生成试验 高铁血红蛋白还原试验 …….
(三)溶血原因分析的有关检验
(一)溶贫确诊的实验检查
1.RBC破坏证据
胆红素代谢异常
血清总胆红素与非结合胆红素 尿胆原,尿胆红素(-)
RBC寿命缩短
用同位素测定、RBC形态改变、血清LDH
2.RBC代偿增生的证据
Ret 外周血片可见:
嗜多染红细胞、有核红细胞等形态学改变
骨髓像:增生性贫血
(二)溶血场所确立的实验检查

体外溶血试验

体外溶血试验
指红细胞膜破坏, 指红细胞膜破坏,或出现多数 小孔, 小孔,或由于极度伸展致使血 红蛋白从红细胞流出的反应 一种血清学反应。 一种血清学反应。颗粒性抗 原与相应抗体结合,在有电 原与相应抗体结合, 介质存在的条件下, 介质存在的条件下,出现肉 眼可见的凝集小块。 眼可见的凝集小块。
材料
动物:家兔 器材:离心机、水浴锅、试管、离心管、 蒸馏水、生理盐水,供试药品。
方法: 方法: 1、2%红细胞悬液的制备
取家兔1只自耳静脉采血(或心脏采血) 取家兔 只自耳静脉采血(或心脏采血) 只自耳静脉采血 10ml,置放有玻璃珠的三角瓶中,轻 ,置放有玻璃珠的三角瓶中, 微搅拌去除纤维蛋白 去除纤维蛋白。 微搅拌去除纤维蛋白。 将血移入有5-10ml生理盐水的离心管中 生理盐水的离心管中, 将血移入有5-10ml生理盐水的离心管中, 混匀后2500 r/min离心 离心5min,弃去上 混匀后 离心 , 清液,如此方法用生理盐水反复洗3-4 清液,如此方法用生理盐水反复洗 次至上清液呈无色透明为止。 上清液呈无色透明为止 次至上清液呈无色透明为止。 将洗涤好的红细胞用生理盐水配制成 2%的细胞悬液,备用。 的细胞悬液, 的细胞悬液 备用。
体外溶血试验
西南大学药学院
目的
观察注射剂的溶血反应,是注射剂的药物 观察注射剂的溶血反应, 注射剂的药物 安全性检查指标之一
原理
取一定量药物加到2%兔血生理盐水中, 取一定量药物加到 兔血生理盐水中, 兔血生理盐水中 在一定时间范围内,观察溶血 凝集反应 溶血和 在一定时间范围内,观察溶血和凝集反应 情况
方法: 方法: 2、药物体外溶血测定
空白对照 阳性对照
结果判定
全溶血:溶液澄明红色,管底无红细胞残 全溶血:溶液澄明红色, 留; 部分溶血:溶液澄明或棕色, 部分溶血:溶液澄明或棕色,管底有少量 红细胞残留; 红细胞残留; 无溶血:红细胞全部下沉,上层液体无色 无溶血:集, 凝集:不溶血,红细胞在试管底部凝集, 振摇后细胞不能分散。 振摇后细胞不能分散。

新生儿溶血病筛查PPT课件

新生儿溶血病筛查PPT课件
ABO新生儿溶血病筛查
新生儿溶血病
(hemolytic disease of the newborn,HDN)
是指母胎血型不合所致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。 胎儿从父方遗传所获ABO血型抗原为母方所缺乏,分娩过 程中该胎儿血型抗原进入母体,使母体产生抗该血型抗原的 抗体(IgG类)。当母体再次妊娠时,抗该血型抗原的抗体 (IgG类)可通过胎盘进入胎儿血液循环,使胎儿在宫内或 出生后发生大量红细胞破坏,出现一系列溶血性征象的疾病。 在我国以ABO血型不合最常见,约占85.3%,但预后良好。 RhD血型不合在我国发病率较低,约占14.6%,但往往出现 中等程度或重度HDN。其它如MN、Kell血型系强,通常意味着新生儿溶 血病的病情越重,这一特点也是释放实验 所不具备的。释放实验的特点是敏感度高, 由于释放实验所使用的红细胞比直抗实验 多几百倍,因此有可能达到较高的敏感度。 释放实验是“三项实验”中敏感度最高的 一项实验,也是判定新生儿溶血病最有利 的证据。
影响因素
放散试验的时间和温度:温度过高或时间 过长,抗体可能变性;温度过低或时间缩 短,抗体从红细胞上解离不完全。
被检标本:用EDTA抗凝血,避免出现假阳 性;红细胞标本一定不能被细菌污染,否 则出现假阳性反应;标本不宜久置,防止 红细胞上已致敏的抗体游离到血浆中,造 成假阴性或阳性程度降低,尽可能应用当 日采集的新鲜血做本实验。
诊断标准
直抗、游离、释放试验确定ABO新生儿溶血 病
(不包括O细胞阳性结果)见下表:
直抗实验 游离实验 释放实验
结论



不能证实为血型免疫抗体引起的
新生儿溶血病
+


可疑为新生儿溶血病

溶血性试验PPT课件

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实验结果与统计
试管 2%兔血混悬液(ml) 生理盐水(ml) 4% 桔梗煎液(ml) 柴胡注射液(ml) 37℃保温 1h 后 的结果 、2%兔血生理盐水混悬液的配制 10-20ml。 用竹签搅拌以除去纤维蛋白 签搅拌以除去纤维蛋白 注: 1) 2%兔血生理盐水混悬液的配制:取新鲜兔1020ml。用竹签搅拌以除去纤维蛋白,然后吸 、2% 兔血生理盐水混悬液的配 2ml, 摇匀即得。 取没有 发生凝血和溶血现象的全血 2ml,加生理盐水稀释至 100ml 摇匀即得。 、4%的桔梗煎液: 4%的溶液 的溶液。 2) 4%的桔梗煎液:取桔梗 4g ,按普通 煎煮法制成 4%的溶液。 、4%的桔梗煎液 结果判断依据: 完全溶血:溶液澄明,红色,管底无红细胞残留。 部分溶血:溶液澄明,红色或棕色,管底尚有少量红 细胞残留。 不 溶 血:红细胞全部沉淀,上层液体物色澄明。 凝 集:虽不溶血,但出现红细胞凝集,经振瑶后 不易分散或出现药物沉淀。
原理:溶血性试验是观察受试物是 否引起溶血和红细胞凝聚等反应。
目的:某些中药注射剂,由于含 有溶血成分或物理、化学及生物等方 面的原因,在直接注入血管后可产生 溶血作用;也有些注射剂中因含有杂 质等成分,注入血管后可产生血细胞 凝聚,引起血液循环功能障碍等不良 反应;另外,因中药制剂的成分复杂, 也存在因免疫反应引起的免疫性溶血。 因此,凡是注射剂和可能引起免疫性 溶血或非免疫性溶血反应的其他药物 制剂均应进行溶血性试验。
第1页/共8页
探究:因造成溶血反应的机制复杂,目前尚无全面的临 床前溶血试验方法。中药注射剂溶血性的测定,许多年来一 直采用常规的体外溶血试验,即试管观察法(见附录)。它 是通过肉眼来观察溶血情况,而有色泽中药注射剂对结果判 断的影响较大,难以评价溶血程度。 为了精确检查中药注射剂的溶血性,建议在常规方法的基础 上,结合以下或其他方法进行试验,如分光光度法、体外红 细胞计数法、体内红细胞计数及分析法。这些方法与常规法 比较,尽管前两者的操作相对复杂,影响因素较多,但当采 用常规法测定的结果有疑问或必要时,采用计数法和分光光 度法作为一种辅助方法,可帮助更精确的判断注射剂的溶血 性。 在进行长期毒性试验中,应注意溶血性指标的观察(如红细 胞数量及网织红细胞数的变化、胆红素、尿蛋白、肾炎、脾 脏淤血及骨髓象等)。 当受试物出现体外溶血阳性结果时,应进行体内溶血性试验, 不但可以判断是否存在药物诱发溶血性的可能,而且可以通 过对其他指标的测定提供更多的信息,如网织红细胞是否增 高、是否有血红蛋白尿、球形红细胞是否增多,以及骨髓检 查是否有溶血性贫血现象等。

溶血检验PPT课件

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六、阵发性睡眠型血红蛋白尿检测
• 〔二〕蔗糖溶血试验 • [原理]蔗糖溶液离子浓度低,经孵育可加强补体与
红细胞膜的结合,使PNH患者的红细胞膜上形成小 孔,遂使蔗糖进入红细胞而导致溶血。 • [参考值] • 阴性 • [临床意义] • PNH常为阳性。也可见于巨幼细胞贫血、AA、 AIHA和遗传性球形细胞增多症。可作为PNH的筛 选试验,阴性可排除PNH, 阳性应再做Ham试验。 • 〔三〕蛇毒因子溶血试验 • 蛇毒因子是以眼镜蛇毒中提取的一种分子量为 31
二、红细胞膜缺陷的检测
〔一〕红细胞渗透脆性试验
[原理] 红细胞在低渗氯化钠溶液中细胞逐渐膨胀甚 至破裂而溶血。该试验是测定红细胞对不同浓度 低渗氯化钠溶血的抵抗力,即红细胞渗透脆性。 将患者的红细胞加至按比例配置的不同浓度低渗 氯化钠溶液中观察其溶血的情况,结果以被检红 细胞最小抵抗力〔开场溶血时氯化钠溶液的浓度〕 和最大抵抗力〔完全溶血时氯化钠溶液的浓度〕
7
一、溶血性贫血的筛查试验:
〔二〕血浆结合珠蛋白:〔Hp〕 [参考值]0.7-1.5g/L(70-150mg/dL) [临床意义] 减低:见于各种溶血时,以血管内溶血减低为显
著。肝脏疾病、传单、先天性无结合珠蛋白血 症。 增高:见于感染、创伤、恶性肿瘤、SLE、糖皮
8
一、溶血性贫血的筛查试验
〔三〕血浆高铁血红素清蛋白测定 [正常值] 阴性 [临床意义] 阳性表示为严重血管内溶血 〔四〕红细胞寿命测定 用51Cr标记红细胞检测红细胞半衰期。正常红
• [临床意义]
• 1、阳性 见于新生儿溶血病、AIHA、SLE、RF、 恶性淋巴瘤、甲基多巴等药物性溶血反响。
• 2、AIHA大多属于温抗体型〔即于37℃条件下作 用最强,主要为IgG),但也有小局部属冷抗体型 〔IgM〕,必要时应用于4 ℃条件下进展试验,排 除假阴性反响。

医学免疫学实验课件-溶血实验

医学免疫学实验课件-溶血实验
在实验过程中,需要观察并记录每个试管的变化情况,如 有无溶血、凝集等。
在实验结束后,需要对每个试管进行拍照并记录实验结果 ,如红细胞有无凝集、有无溶血等。这些结果将用于后续 的分析和讨论。
03
实验数据分析
溶血反应阳性率计算
计算每个样本的溶血反应阳性率,即阳性样本数除以总样本 数。
判断溶血反应阳性率的参考范围为:健康人群 < 5%,患者 < 10%。
当红细胞表面抗原与相应抗体结合后,可形成抗原-抗体复合 物,激活补体,导致红细胞溶解破裂,释放出血红蛋白;
通过检测血清中游离的抗体或红细胞抗原,可对相关疾病进 行诊断和鉴别诊断。
实验试剂与器材
试剂
抗A、抗B标准血清、A型、B型、O型试剂红细胞、生理盐水等;
器材
试管、移液管、离心管等。
02
实验步骤
THANKS
感谢观看
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05
相关应用
临床应用场景
溶血实验是医学免疫学中一个重要的实验,常用于检测红 细胞表面抗原和抗体,以及红细胞表面受体的检测。
溶血实验还用于检测血清中游离的抗体或抗原,以及红细 胞表面受体的激活状态,对于诊断多种疾病具有重要意义 。
其他领域应用
溶血实验在生物学、药理学、病理学等领域也有一定的应用 。
在生物学中,溶血实验可以用于研究生物膜的结构和功能, 探究生物膜与细胞之间的关系等。
未来发展趋势
溶血实验未来的发展趋势主要集中在提高实验的灵敏度和 特异性,以及寻找新的溶血方法等方面。
此外,溶血实验还可以应用于研究肿瘤细胞对红细胞的作 用,以及在药物筛选等领域的应用也有待于进一步拓展。
实验数据统计分析

血液透析中溶血PPT课件

血液透析中溶血PPT课件

凝血
体外循环过程中,血液和各种塑料表面接触, 引起血小板粘附,内源性凝血途径激活,引起血栓 形成,血流速缓慢,高血色素,高超滤率,抗凝剂 用量不足,血流量不足,透析期间输血或补充含脂 质的肠外营养可以促进凝血。
凝血
判断凝血:
➢ 静脉管路中的血颜色变深; ➢ 透析器出现血迹条斑; ➢ 静脉管路中可视凝块; ➢ 透析器动脉端可视凝块; ➢ 如果透析器内形成凝块,静脉压力会下降,如果
起)。
溶血
临床表现
突然出现发冷、胸痛、腹痛和背痛、胸部压迫 感、头痛、恶心和不适。
溶血的应急流程示意图
透析中发生溶血
立即关泵暂停透析,丢弃管道内的血液
同时通知医生
吸氧、监测生命体征、协助医生做好抢救工作
采集血标本,做好输血前准备工作
注意给患者保暖,安慰患者,缓解其焦虑紧张的情绪
积极寻找诱发溶血的原因,加以解除
溶血处理Biblioteka 则:➢ 立即报告医师并中止透析; ➢ 同时将透析器及血路中的血液全部丢弃; ➢ 给予吸氧、监测生命体征变化; ➢ 排除原因后继续透析;
溶血
处理原则:
➢ 严格检测透析液浓度、温度,定时对机器进行检 修,加强对水处理系统的管理,定期对水质进行 检测;
➢ 必要时遵医嘱输血及留观; ➢ 告知家属并做好解释工作; ➢ 紧急寻找原因并作详细记录。
水源中断
水源中断时立即通知工程师及有关部门,将 透析改为旁路,安慰病人,必要时可回血下机, 保留血管通路,待水压正常后重新上机。
征; ➢ 手掌微曲,轻叩患者背部; ➢ 如情况无好转,遵医嘱进一步处理(心肺支持治疗,如面
罩吸纯氧,气管内插管); ➢ 分析原因并作详细记录。
漏血
当透析机出现漏血报警, 首先应判断是否为假报警。

医学免疫学实验课件-溶血实验

医学免疫学实验课件-溶血实验

溶血反应的机制
溶血反应的机制主要包括补体介导 的溶血、抗体介导的溶血和机械性 损伤导致的溶血。
溶血反应的临床表现
溶血反应的临床表现主要包括黄疸 、贫血和脾肿大等。
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医学免疫学的定义
医学免疫学是一门研究机体免疫系统结构和功能的科学,涉及免疫系统的各个方面,包括免疫器官、免疫细胞、免疫分子等 。
通过建立更加严格的动物模型和细胞株质量标准,减 少个体差异对实验结果的影响。
06
相关知识点链接
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溶血反应的定义
溶血反应是指红细胞破裂,导致血 红蛋白逸出,并刺激机体产生一系 列生理病理反应的过程。
溶血反应的分类
溶血反应可分为两种类型,即免疫 性溶血反应和非免疫性溶血反应。
医学免疫学实验课件-溶血 实验
xx年xx月xx日
目录
• 实验原理 • 实验材料 • 实验步骤 • 实验结果分析 • 实验结论与展望 • 相关知识点链接
01
实验原理
溶血反应定义
溶血反应是指红细胞破裂并释放出血红蛋白等细胞内物质的 过程。
红细胞破裂的原因是由于红细胞表面的膜结构受到破坏或改 变,导致红细胞内部的物质泄露出来。
实验试剂
抗红细胞抗体
用于引发溶血反应。
生理盐水
用于稀释红细胞和抗体。
补体
参与溶血反应。
pH试纸
用于监测反应过程中的pH变化。
实验仪器
试管
用于混合红细胞、抗体和补体。
pH计
用于测量反应过程中的pH值。
离心机
用于分离红细胞和血清。
显微镜
观察红细胞的溶解情况。
03
实验步骤
实验前准备

新生儿溶血病ppt课件

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4
血型抗体的基本知识
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5
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6
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7
引起新生儿溶血病抗体的种类
ABO-HDN IgG抗-A, IgG抗-B, IgG抗-A,B
Rh-HDN 抗-D,抗-E,抗-C,抗-e,抗-c
其它 抗-M, 抗-Fya ,抗- Jka
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15
孕妇存在与其胎儿不配合的ABO血型抗体是否都会引 起新生儿溶血病?其原因是什么?
在ABO新生儿溶血病的家庭中,可见到一个得病 婴儿之后又是ABO不配合的妊娠,但娩出的婴儿可不 发病。同样是高效价抗 A( B )的母亲,有的婴儿发 病,有的婴儿不发病,其原因与新生儿 A( B )抗原 强度、血浆中 A、 B 物质的存在有关。一般认为,由 于血型物质与胎儿红细胞争夺抗体而保护了婴儿,以 及胎盘的屏障作用和IgG亚类不同等。
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2
母子间同种免疫性溶血发生的原因
胎儿的血型基因一半来自母亲,一 半来自父亲。来自父亲的基因恰巧 是母亲所缺少的,胎儿的红细胞就 有可能刺激母体产生抗体,抗体又 可以通过胎盘到达胎儿体内,使胎 儿受害。
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3
发病机制
新生儿溶血病是由于孕妇体内存在针对 胎儿红细胞IgG性质的血型抗体,引起同 种被动免疫性疾病。
②用相应的细胞检测放散液中的抗体。
③放散下来的抗体针对新生儿的红细胞,才有临
床意义。只有当放散液中检出抗体,同时新生 儿红细胞上又存在相应抗原时才认为释放试验 是阳性。
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24
举例
例如:放散液中存在抗-A,只有当新生儿 是A 型或AB型时,才能证明新生儿患有溶 血病。如果新生儿红细胞上没有A抗原, 视为阴性。
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方法: 2、药物体外溶血测定
空白对照 阳性对照
结果判定
全溶血:溶液澄明红色,管底无红细胞残
留; 部分溶血:溶液澄明或棕色,管底有少量 红细胞残留; 无溶血:红细胞全部下沉,上层液体无色 澄明; 凝集:不溶血,红细胞在试管底部凝集, 振摇后细胞不能分散。

结论
在0.5h出现部分溶血、全溶血,或出现凝
体外溶血试验
目的
观察注射剂的溶血反应,是注射剂的药物
安全性检查指标之一
原理
取一定量药物加到2%兔血生理盐水中,
在一定时间范围内,观察溶血和凝集反应 情况
指红细胞膜破坏,或出现多数小 孔,或由于极度伸展致使血红蛋 白从红细胞流出的反应 一种血清学反应。颗粒性抗 原与相应抗体结合,在有电 介质存在的条件下,出现肉 眼可见的凝集小块。
集反应的制剂,不能静脉内用药。 在3h不出现溶血和凝集反应的制剂,判 断为溶血试验符合规定。
注意事项
受试药物为出厂浓度,不要稀释; 试管要干净。
材料
动物:家兔 器材:离心机、水浴锅、试管、离心管、
蒸馏水、生理盐水,供试药品。
方法: 1、2%红细胞悬液的制备
取家兔1只自耳静脉采血(或心脏采血)
10ml,置放有玻璃珠的三角瓶中,轻 微搅拌去除纤维蛋白。 将血移入有5-10ml生理盐水的离心管中, 混匀后2500 r/min离心5min,弃去上 清液,如此方法用生理盐水反复洗3-4 次至上清液呈无色透明为止。 将洗涤好的红细胞用生理盐水配制成 2%的细胞悬液,备用。
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