肺癌细胞特异性结合肽的体内筛选及初步鉴定

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从噬菌体随机肽库中筛选及鉴定肺癌特异性多肽

ＥＩＡ和免疫组化疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞ＮＩＣ
—
Ｈ１９２９为靶细胞，肺二倍体成纤维细胞ＭＣ一Ｒ５为吸附细胞，３￣在７Ｃ下对噬茵体随机十二肽库进行四轮减性筛
经ＥＩＡ初步鉴定，ＬＳ随机
ＴＤ生物技术中心；Ｂ胰蛋白酶、ＭＩＴ、ｇ等其ＴＢ、Ｇ，ＸａＰｌ
他试剂均购于北京鼎国公司。
前，临床上所采用的诊断方法主要为传统的胸片、支气
管镜、细胞学检查等，痰缺乏足够的特异性和敏感性，大多数肺癌患者确诊时已为晚期。因此，寻找一种灵
邓伟雄，罗时敏蓝代颜，，梁伟灿，臧林泉。
广东省广州市第一人民医院综合外科（１ｌ０；广东省佛山市西樵山人民医院（２２１；５８）０５８１）广东药学院药科学
院药理教研室（州５００）广１０６
【摘要】目的利用Ｐａｅｄｓｌｙ随机肽库筛选出与肺癌ＮＩｈｇｉａｐＣ —Ｈ１９２９细胞特异性结合的多肽，通过并
者出现症状时多为晚期，预后较差，总的５年生存率不
超过１％，症状者 ≤１％。但在早期诊断的肺癌５有０
患者中，以及时进行手术治疗的患者，可其预后较中晚
期肺癌明显改善，３～其５年生存率可达７％。目０
・
５４・２
广东医学２０年４月第３０９０卷第４期ＧａｇｏｇＭｅｉｌｏｒａｐ．０９Ｖ１３，ｏ４ｕｎｄｎｄｃｕｎｌｒ２０，ｏ０Ｎ．ａＪＡ．

噬菌体展示技术筛选小细胞肺癌细胞特异性结合多肽

ｃｉｎｅ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｎｇ１００００５，Ｃｈｉｎａ
ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｔａｉｎｔｈｅｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ，ｗｈｉｃｈｓｐｅｃｉｉｆｃａｌｌｙｒｅｃｏｇｎｉｚｅｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ（ＳＣＬＣｓ）ｆｒｏｍｐｅｐｔｉｄｅ
ｊｉａｏ，ｅｔａ１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ＆Ｓｃｈｏｏｌ０厂ＢａｓｉｃＭｅｄｉ —
摘要目的利用噬菌体七肽库，筛选出与小细胞肺癌细胞系Ｈ４４６细胞特异性结合的多肽。方法利用噬菌体展示技
术和小细胞肺癌细胞系Ｈ４４６细胞，经过多次３轮筛选，每次挑取１２个噬菌体单克隆进行ＤＮＡ测序，分析得到多肽序列，并利用免疫组织化学技术验证多肽的特异性。结果多肽ＡＦ（ＡＧＡＬＨＱＦ）与小细胞肺癌病理组织有较高的亲和性。结论噬菌体展

SGC7901-VCR细胞特异性内化噬菌体多肽的筛选和初步鉴定

ｒｔ８ｏｅｐａｅ＾托ｃｌｕａｅ．Ｉｔｌｅｈｇｓｒｓｓｎｎｏｏａｅｒｄｔｎｗｅｅｓｌｃｅａ＆ｒｄｎｎｅｎｌｅｅｕｔｗｅｅａｅｆｔｈｇｓ、ｈａｃｌｔｄｎｅｉｄｐａｅｅｉｉｅｄｓｍｌｄｇａａｉｒｅｅｔｒｎｒｙａｄｉｔａｉｄｒｓｌｍａｚｔｇｏｄｒｚｒｉｅｔｅｙｃｌｃｅｓｒ．Ｃｍｐｔｉｅｉｔｒａｉｄｅｃｎｙｏｅｗｅｅｔｓ．ＲｅｕｔＡｆｒ３ｒｕｄ．ｔｅｒｃｖｒａｅｏｔｒａｉｄｄｎｉｄｂｅｌｈｍｉｔｉｆｙｏｅｉｖｅｎｌｅｉｃｆｔｍｒｅｔｔｎｚｅｈｄｅｓｌｓｔｏｎｓｈｅｏｅｙｒｔｆｉｅｎｌｅｅｎｚ
・论著・异性－＿－内化噬菌体多肽的筛选和初步鉴定＊
张科东朱彩侠郭新宁，，，杨力
［摘要】目的
实验基础。方法
筛选能够特异性内化入ＳＣ９１ＶＲ耐药细胞的噬菌多肽，Ｇ７０一Ｃ为肿瘤的靶向性药物治疗提供
ｐ￣ｅｗｅｅｆｍ２９Ｘ１ｔｇａｓｒｒｏ．０一ｔ３Ｘ１～，ｈｃａｓｔａｐｃｆｎｉ￣ｎｎａｅｎａｈｅｅ．Ｆｕｈｇｌｎ￣ａｈｈｄｂｅｔｒｏ９．０ｗｉｈｍｅｎｔｓｅｉｃｅｒｈｉｃｅｔｄｂｅｃｉｖｈｄｏｒｐａｅｃｅｏｓｉａｅｎｉｅ．ｃｎｎｌｅｔＣ７０ａｉｄｉｏ９３９１一Ｖ（ｒ４ｋ舡ｒｒｌｃｅａｄｒｄｎｅｌｈｍｉｒｈ￣ｑｅｚｎＲｆｏ２ｓｗｅｅｓｅｄｒｎｃｒｙａｄｃｌｃｅｓｙｓｏｅｔｔｈｔ

肺癌患者血清特异性核酸适配体的筛选及鉴定

ｏｂｔａｉｎｅｄ９ｔｈｒｏｕｎｄｅｎｒｉｃｈｅｄｌｉｂｒａｒｙｗａｓａｍｐｌｉｆｉｅｄｔｏ ห้องสมุดไป่ตู้ｓＤＮＡａｎｄｓｅｎｔｔｏＳａｎｇｏｎＢｉｏｔｅｃｈ（Ｓｈａｎｇｈａｉ），ｗｈｅｒｅｔｈｅｓｃｒｅｅｎｅｄ
ｌｉｂｒａｒｙｏｆａｐｔａｍｅｒｓｗｅｎｔｔｈｒｏｕｇｈｈｉｇｈ—ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．ＲｅｓｕｌｔｓＡｆｔｅｒｆｏｕｒｒｏｕｎｄｓｏｆｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，ｆｏｕｒａｐｔａｍｅｒｓｗｉｔｈｈｉｇｈｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆｓｅｒｕｍｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｙｗｅｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｅｑｕｅｎｃｅｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆｓｃｒｅｅｎｅｄａｐｔａｍｅｒｉｎｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｗｉｔｈｓｅｒｕｍｏｆｌｕｎｇｃａｎｃｅｒｗａｓｔｅｓｔｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｃｏｎｓｔａｎｔｓｏｆｓｅｒｕｍａｐｔａｍｅｒａｎｄｌｕｎｇｃａｎｃｅｒｓｅｒｕｍｗｅｒｅａｌｌｗｉｔｈｉｎｎａｎｏｍｏｌａｒｌｅｖｅ１．Ｓｅｑ一２，Ｓｅｑ一３，Ｓｅｑ一６ａｎｄＳｅｑ一１９ｃａｎｂｉｎｄｔｏｔｈｅｓｅｒｕｍｏｆｌｕｎｇｃａｎｃｅｒｗｉｔｈｈｉｇｈｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ｂｕｔｎｏｔｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｈｕｍａｎｓｅｒｕｍ．Ｕｓｉｎｇｔｈｅｓｅｒｕｍｏｆ２００ｃａｓｅｓｏｆｌｕｎｇｃａｎｃｅｒａｎｄｎｏｒｍａｌｈｕｍａｎｓｅｒｕｍｏｆ２００ｃａｓｅｓ，ｉｔｗａｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｌｕｎｇｃａｎｃｅｒｓｂｙｔｈｅｓｅｆｏｕｒｓｅｒｕｍａｐｔａｍｅｒｓｏｆｌｕｎｇｃａｎｃｅｒｓｃｏｕｌｄｒｅａｃｈ９１％ｏｒｅｖｅｎｈｉｇｈｅｒ，ｔｈｕｓｐｒｏｖｉｄｉｎｇａｎｅｗｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｌｕｎｇ

应用肺癌细胞株筛选抗肺癌多肽的研究

ＷＮＺｅｓｅｇ，Ｅｅｄｎ，ＨＮＸａ—ｉ，ｔ１ＳｔＫｙＬｂｒｔｙｏｎｏｇｏｔｅｈｎＣｎｅＣｎｒＥｈ— ｎＷＩＷｉｏｇＣＥｉｏｑｅａ．ｔｅｅａｏａｏＯｔｌｙｉＳｕｒＣｉｈ — ｎａｒｆｏｎｈｎａ，ａｃｒｅｔｅｏｆ
ｆｏａｄｓｇｅａｄｍｉｒｒｉｆｎｔｏＮＣ — ６．ｙｔｅｉｅｔｅｒｍｈｓｎｃｅｅｔｄｓａｄｃｅｋｄｉｎｉｒｍｅｉｎｄｒｎｏｌａｙｗｔａｆｉｔＩＨ４０Ｓｎｈｔｐｐｉｓｆｂｈｉｙｃｄｏｔｅｅｅｒｈｄｐｐｉｅｎｈｃｅｔａｔｉｓ —
ｃｎｅｃｌＮＩ４０ｃｍｉｅｉｏｏｅｓｓｍ．ｔｏｓＰｒｆｒｎｅｔｅＭａｔ１ｎｓｐｒｎｅｅｃｏｅｓａｃｒｅｌ（Ｃ — ６）ｏｂｎｄｒｓｍｙｔＭｅｈｄｏｅｏｇｐｐｉｓｄＭａｔａａＸｗｒｈｓｎａＨｂｅｍｉｄ２ａｏ
【关键词】肺癌细胞株；核糖体表达法；抗肺癌细胞多肽筛选
中图分类号：７．６；７４２Ｒ３３１Ｒ３．文献标识码：Ａ文章编号：０ｌ９０２０）５３４４１０一３（０８０４４１３５４
ＲｉｓｍｅＤｉｐｌｙＳｓｅｍｂｉｎｇＣａｃｒＣｅｌＳｒｅｎｇＵｐＳｃｆｃｂｏｏｓａｙｔｍＣｏｎｅＬｕｎｅｌｃｅｎｉｐｅｉｉＡｎｉｔ－ＬｕｎｇＣａｃｒＣｅｌＰｅｔｄｓｎｅｌｐｉｅ

肺癌细胞的诊断分子标志物的鉴定和应用

肺癌细胞的诊断分子标志物的鉴定和应用近年来，肺癌这种常见疾病受到了广泛的关注和研究。

肺癌是一种高度致命的癌症，其高度侵袭性和恶性程度使其成为全球范围内的多种癌症之一。

在治疗肺癌疾病的过程中，分子生物学技术已经成为了一个不可或缺的工具。

最近，人们越来越多地研究肺癌细胞的生物化学标志物，这些标志物不仅有助于确定肺癌的类型和严重程度，还可以为其治疗提供了更具体的信息。

一、肺癌细胞的鉴定方法肺癌细胞鉴定的基本方法是病理学，这是一种通过显微镜下观察组织切片和标本的方法，可以使用荧光显微镜、定位技术和免疫组织化学技术（IHC）来确诊。

通过肺癌组织的检查，可以对各种类型的肺癌进行鉴定：腺癌和鳞癌是肺癌的两种主要类型，但还有其他类型如小细胞肺癌、大细胞肺癌、混合癌等，每种类型都有不同的治疗方法。

IHC技术通过检测组织切片中特定分子的表达，可以确定细胞的类型和病情。

IHC技术是一种高度特异和敏感的方法，可以识别癌症细胞和肿瘤组织，这使得这种方法在肺癌的鉴定和诊断中非常重要。

二、肺癌的分子标志物肺癌细胞的分子标志物是一种特定的分子或化合物，可以检测癌症细胞的存在和生长。

这些标志物和病情的严重程度密切相关，是肺癌分子诊断和治疗的关键指标。

目前，已经发现了一些肺癌标志物，如神经内分泌素、癌胚抗原（CEA）和糖类抗原（CA125）。

最近，研究人员在肺癌的分子标志物中发现了一种新的化合物，叫做Carcinoma-associated Fibroblasts（CAFs）。

CAFs是一种由肺癌细胞诱导的细胞类型，分泌了高水平的肿瘤细胞生长因子，这可导致肿瘤细胞的生长和扩散。

因此，CAFs在肺癌的诊断和治疗中非常重要，可以帮助人们发现肺癌并确定其治疗方式。

三、肺癌细胞的分子标志物的应用分子标志物在肺癌治疗中扮演了重要的角色。

许多研究显示，使用分子标志物可以辨识出怎样的肺癌患者更可能从哪些疗法中获得批准的效果。

通过了解肿瘤的类型和癌细胞的行为，可以根据具有特异性的生物标志物选择最有效并个性化的治疗方案。

肺癌分子标志物的筛选及其在诊断中的应用

肺癌分子标志物的筛选及其在诊断中的应用肺癌是一种常见的恶性肿瘤，对人们的健康和生命构成严重威胁。

准确地诊断和及时治疗是提高患者生存率的关键因素。

在肺癌的早期诊断中，分子标志物在筛选和应用上发挥着重要作用。

本文将就肺癌分子标志物的筛选及其在诊断中的应用进行阐述。

一、肺癌分子标志物的筛选1. 基本原理在寻找肺癌分子标志物时，科研人员会根据不同的机制来寻找具有差异表达的基因、蛋白质等分子。

常见方法包括基因芯片技术、质谱技术等，这些技术可以快速而精确地检测大量样本中特定基因或蛋白质的表达情况。

2. 常见分子标志物近年来，许多研究已经鉴定出一系列与肺癌相关的具有潜力的分子标志物。

例如，在血清样本中检测到的CEA、NSE以及Cyfra21-1等指标可作为非小细胞肺癌诊断和预后判断的重要参考。

其他一些基因或蛋白质，如EGFR、HER2、PD-L1等，也被发现与肺癌的发生和发展密切相关，在靶向治疗中起到了重要作用。

3. 筛选方法针对分子标志物的筛选，可以采用不同的实验手段和策略。

比如，透过大规模的基因表达谱分析，结合生物信息学方法鉴定差异表达的基因。

同时，也可以通过筛查已知启动子和调控序列区域来寻找可能参与癌症过程的潜在标志物。

二、肺癌分子标志物在诊断中的应用1. 癌症早期诊断早期诊断是提高肺癌患者生存率的关键。

分子标志物在肺癌早期诊断方面具有很大潜力。

通过检测血清中特定蛋白质或核酸分子的水平变化，可以帮助及时发现患者体内可能存在的肿瘤信号。

2. 癌症类型识别不同亚型的肺癌对于治疗反应和预后都存在差异。

使用特定的分子标志物，可以对患者的肺癌类型进行识别，从而为个体化治疗和精确用药提供依据。

例如，EGFR阳性表达与靶向治疗药物的应用密切相关。

3. 肿瘤分期和预后判断分子标志物在肺癌分期和预后判断中起到了重要作用。

通过检测肿瘤标志物在血清或组织中的含量或改变情况，可以帮助评估肿瘤的临床分期以及预测患者的生存期。

这对于制定合理的治疗方案具有重要意义。

用于肺癌早期筛查的标志物及其检测方法

用于肺癌早期筛查的标志物及其检测方法肺癌，是一种常见的发病率和死亡率都非常高的恶性肿瘤。

早期检测肺癌，是目前肺癌治疗的重要手段之一。

随着科学技术的发展，越来越多的标志物及其检测方法被应用到肺癌早期筛查中。

一、血清标志物1. CYFRA21-1CYFRA21-1是一种抗原，其水平在很多类型的恶性肿瘤中都会显著升高，包括肺癌。

CYFRA21-1测定常规使用免疫荧光法或免疫化学发光法。

一项研究表明，如果250 ng/mL被视为判定值，则该标志物可以识别大部分的肺癌早期示踪物。

2. CEACEA是一种糖蛋白，也是血浆中的一种肿瘤标志物。

肺癌患者的CEA水平通常较正常人高。

CEA检测方法包括免疫荧光、免疫测定法等。

一些研究表明，CEA与CYFRA21-1的联合使用可以提高肺癌诊断的准确性。

二、尿液标志物尿液标志物作为肺癌早期筛查的工具也备受关注。

其中，NMP22是最先应用的尿液标志物之一。

它是一种细胞增生诱导蛋白。

在肺癌患者中，NMP22的表达量会显著升高。

目前，NMP22的检测方法主要是免疫测定法。

三、呼出气标志物呼出气中的VOCs（挥发性有机化合物）是另一种被广泛关注的潜在标志物。

不同的肿瘤类型会产生不同的VOCs样式，因此VOCs可以作为一种可靠的生物标志物。

近年来，用于检测VOCs的技术不断发展，如气相色谱质谱联用技术、水蒸气析出质谱等。

总的来看，肺癌早期诊断需要多指标的综合评估。

不同标志物在肺癌早期筛查中可能有不同的优势和局限性，需要针对不同的患者群体进行选择。

除此之外，肺癌早期筛查还需要配备高通量检测设备及高精度的检测方法，以便更准确、更快速地检测出肺癌早期信号。

肺癌早期诊断的生物标志物筛选

肺癌早期诊断的生物标志物筛选概述：肺癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，其可怕之处在于往往在晚期才能被发现，导致治疗效果大不如前。

因此，寻找肺癌早期诊断的生物标志物显得尤为重要。

本文将就肺癌早期诊断的生物标志物筛选进行探讨和总结。

一、背景介绍：肺癌是一种来源于肺组织的恶性肿瘤，在全球范围内造成了极高的死亡人数。

近年来，科技的进步和医学研究者对该领域的关注使得我们对于早期诊断有了新的认知和希望。

然而，目前仍缺乏敏感且特异性良好的手段用以早期检测肺癌。

因此，通过寻找合适的生物标志物可以有效地提升早期诊断准确率及幸存率。

二、生物标志物筛选方法：1. 基因组学方法基因组学方法应用了高通量技术，在DNA、RNA或蛋白质水平上筛选出与肺癌相关的生物标志物。

基因组学方法利用了高通量测序、芯片技术等手段，可以全面而迅速地分析大量样本。

例如，通过比较肿瘤组织和正常组织之间的基因表达差异，寻找潜在的关键基因作为早期诊断标志物。

2. 代谢组学方法代谢组学方法研究细胞内代谢产物的变化情况，通过检测血液、尿液或呼气中的代谢产物以确定其与肺癌间是否存在关联。

代谢组学方法具有非侵入性和可重复性等优点，能提供较高灵敏度和特异性，对于早期诊断具有潜在价值。

3. 蛋白质组学方法蛋白质是生命活动的关键组成部分，其异常变化往往与疾病发生率密切相关。

蛋白质组学方法通过质谱技术检测肿瘤标本中蛋白质水平的变化，并与正常对照进行比较分析。

这种方法可以有效地发现与肺癌早期相关的特定蛋白质标志物。

三、已经发现的肺癌早期诊断生物标志物：1. 血清中的CEA和CYFRA21-1癌胚抗原（CEA）和细胞角质化蛋白21-1（CYFRA21-1）是目前临床上应用较广泛的肺癌早期诊断生物标志物。

它们都是通过血清学方法测定，具有一定的敏感性和特异性。

然而，它们的应用仍受到某些非肺癌因素干扰，因此需要进一步优化和验证。

2. DNA甲基化标志物DNA甲基化指的是DNA序列中甲基团的添加或去除，影响了基因的转录和表达。

人肺腺癌细胞特异性结合多肽TL-1的鉴定研究

人肺腺癌细胞特异性结合多肽TL-1的鉴定研究
欧渤
【期刊名称】《中国社区医师（医学专业）》
【年(卷),期】2012(014)016
【摘要】目的:鉴定多肽TL-1对人肺腺癌细胞A549的特异性.方法:利用细胞免疫荧光和组织免疫荧光化学鉴定FITC标记TL-1对A549的特异性和亲和力.结
果:TL-1与人肺腺癌细胞和组织具有较强的特异性,与正常人肺细胞、正常人肺组织、的结合力很弱.结论:TL-1对人肺腺癌细胞具有较高的特异性.
【总页数】1页(P273)
【作者】欧渤
【作者单位】523325,广东东莞市石龙博爱医院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.抗人FXYD6特异性多肽单克隆功能性抗体制备及生物学作用鉴定 [J], 陈雄飞;
袁俊建;张执全;郭忠健;郭尧;刘汝海;李凤山
2.肺癌特异性结合多肽的体外筛选和鉴定 [J], 潘雪刁;何冰;王桂香;刘金泳;曹成明;
臧林泉
3.耐紫杉醇宫颈癌细胞株Hela特异性结合多肽的筛选及其功能鉴定 [J], 李倩;左璇;邓成程;尹东锋
4.人肺腺癌细胞特异性结合多肽TL-1的鉴定研究 [J], 欧渤
5.RGD特异性结合多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因的克隆表达及其抑瘤
活性 [J], 王慧;颜真;赵宁;张英起
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肺癌特异性结合多肽的体外筛选和鉴定

肺癌特异性结合多肽的体外筛选和鉴定潘雪刁;何冰;王桂香;刘金泳;曹成明;臧林泉【摘要】目的应用噬菌体随机肽库技术筛选出与肺癌细胞特异性结合的多肽.方法以人肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,人胚肺细胞MRC-5为吸附细胞,对噬菌体随机12肽库进行3轮全细胞减性筛选后,随机挑取噬菌体克隆进行ELISA鉴定;对亲和力较高的阳性克隆进行DNA测序并翻译为氨基酸序列;化学合成异硫氰酸荧光素标记的多肽(FITC-ZS-5),采用细胞和组织免疫荧光法鉴定FITC-ZS-5与肺癌细胞的亲和力及特异性.结果通过3轮减性筛选后,与NCI-H1299细胞结合的噬菌体克隆得到有效的富集:ELISA结果显示5号克隆对CI-H1299细胞亲和力最高,将其命名为Phage ZS-5:测序结果显示Phage ZS-5所表达的多肽序列在国内外均未见报道,细胞及组织免疫荧光实验结果显示FITC-ZS-5 对肺癌细胞及组织具有较高的亲和力和特异性.结论应用噬菌体随机肽库技术筛选到肺癌靶向性多肽ZS-5,为肺癌的靶向治疗和诊断奠定基础.%Aim In vitro phage display was used to screen and identify a polypeptide specifically targeting lung cancer cells. Methods The lung cancer NCI-HI 299 cell line and the normal lung MRC-5 cell line were used for the subtractive screening in vitro with a phage display-12 peptide library at 37℃. After thr ee rounds of panning, a group of phage clones specifically binding to the NCI-H1299 cells were obtained, then the affinity of these clones binding to the targeted cells was studied by cell-based ELISA. The phage clones with high affinity was sequenced, thus the amino acid sequence was deduced and the peptide was synthesized and identified by immunofluorescence. Results After three rounds of panning, there was an obvious enrichment for the phage clones specifically bindingto thernNCI-H1299 cells. A phage clone named phage ZS-5 with high specificity and affinity to NCI-H1299 cells was identified by a cell-based ELISA. More importantly, the synthetic FITC-labeled peptide ZS-5, which corresponded to the sequence of the inserted fragment of phage ZS-5 , demonstrated a high specificity to lung cancer cells and tissues, but not to normal lung cell and tissue samples, or other different cancer cells. Conclusion The peptide ZS-5 specifically binding to lung cancer has been screened from phage display peptide libraries , which can be used for targeted drug delivery in therapy or in early diagnosis of lung cancer.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2013(029)003【总页数】5页(P342-346)【关键词】肺癌;噬菌体展示技术;多肽;减性筛选;NCI-H1299细胞;肽库【作者】潘雪刁;何冰;王桂香;刘金泳;曹成明;臧林泉【作者单位】广东药学院药科学院药理系,广东,广州,510006;广东药学院药科学院新药筛选与药效学评价中心,广东,广州,510006;广东省分子流行病学重点实验室,广东,广州,510310【正文语种】中文【中图分类】R341.6;R394.3;R734.204;R734.205;R977.6肺癌是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一［1］，化学药物治疗是肺癌综合治疗主要措施之一，然而多数肺癌患者确诊时已为晚期，预后较差，常规以铂类药物为基础的细胞毒性化疗已无法进一步提升晚期肺癌患者的生存率，因此开发新型抗肺癌药物是当前肿瘤界学者努力探索研究的热点之一［2-4］。

基于肺癌细胞特异性结合肽检测肺癌的免疫酶法

基于肺癌细胞特异性结合肽检测肺癌的免疫酶法张云;王华素;夏觅真;王怡;薛绍礼【摘要】以肺腺癌A549细胞为筛选靶标，人胚肺二倍体helf细胞作反相吸附细胞，从噬菌体随机十二肽库中筛选出与肺癌细胞特异性结合的噬菌体多肽，用其替代一抗，酶标抗噬菌体抗体作二抗，建立检测肺癌细胞的免疫酶染色法。

对噬菌体随机十二肽库进行4轮筛选和ELISA鉴定后，用亲和力和特异性最好的5号噬菌体克隆建立了检测肺癌细胞的免疫酶法。

%With A549 cells serving as target cells and helf cells as absorber cells, polypeptides specifically binding to lung cancer cells were screened out from Ph. D. -12TM Phage Display Peptide Library. Establish the immu-noenzymatic assay ( IEA) with the screened polypeptides replacing primary antibody, and the enzyme-marked anti phage antibody working as secondary antibody. After four rounds of panning and ELISA identification, the phage clone with best affinity and specificity to A549 cells was applied in the new method.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2014(000)009【总页数】5页(P1329-1332,1333)【关键词】噬菌体展示肽库;A549细胞;肺癌;免疫酶法【作者】张云;王华素;夏觅真;王怡;薛绍礼【作者单位】安徽医科大学基础医学院，合肥230032; 安徽医科大学生物工程教研室，合肥230032;安徽医科大学基础医学院，合肥230032; 安徽医科大学生物工程教研室，合肥230032;安徽医科大学生物工程教研室，合肥230032;安徽医科大学生物工程教研室，合肥230032;安徽医科大学生物工程教研室，合肥230032【正文语种】中文【中图分类】R-331噬菌体展示技术指利用分子生物学技术将外源蛋白质分子或肽段的基因插入噬菌体基因组DNA中，使外源基因编码的分子表达于噬菌体衣壳表面［1］。

人肺癌细胞特异性结合肽的筛选与验证

人肺癌细胞特异性结合肽的筛选与验证樊敏杰;金瑾;韩化敏【摘要】目的筛选人肺癌细胞特异性结合肽,为肿瘤诊断试剂及肿瘤药物的研制提供依据.方法以正常人支气管上皮细胞16HBE为吸附细胞,人肺癌细胞A549为靶细胞,利用噬菌体展示肽库经4轮差减吸附淘筛,采用细胞ELISA鉴定噬菌体与肺癌细胞结合的特异性并测序获得多肽序列.结果经4轮筛选噬菌体富集率逐级递增,共挑选394株噬菌体利用ELISA验证,将特异性较好的5株噬菌体克隆基因测序,获得重复率最高的序列(4/5).结论利用噬菌体展示技术筛选出了与人肺癌细胞癌特异性结合的小分子多肽,为肺癌患者的早期诊断和靶向治疗奠定了基础.【期刊名称】《肿瘤基础与临床》【年(卷),期】2017(030)006【总页数】4页(P472-475)【关键词】噬菌体展示;肺癌;特异性结合多肽【作者】樊敏杰;金瑾;韩化敏【作者单位】拜西欧斯(北京)生物技术有限公司,北京100070;拜西欧斯(北京)生物技术有限公司,北京100070;拜西欧斯(北京)生物技术有限公司,北京100070【正文语种】中文【中图分类】R734.2;R730.23肺癌发生于支气管黏膜上皮，发病率和死亡率增长最快，近50 a来肺癌的发病率显著增高，在欧美工业发达国家和我国的一些工业大城市中，肺癌发病率在男性恶性肿瘤中已居首位，在女性中发病率也迅速增高，是对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一[1-2]。

由于发病隐匿，早期多无症状，几乎2/3的肺癌患者在就诊时已是晚期(Ⅲ～Ⅳ期)，我国肺癌早期诊断率较低，患者5 a生存率仅有10%，国外发达国家是15%～20%[3-4]，这个差距就是早期诊断问题。

临床上传统的诊断方法如胸片、支气管镜、痰细胞学检查等方法，缺乏足够的特异性和敏感性，因此市场上急需开发出一种用于临床诊断方法。

1 材料与方法1.1 实验材料随机十二肽噬菌体展示试剂盒购自美国New England Biolabs公司，包括随机十二肽噬菌体展示文库(1.5×1013 pfu·mL-1)、E.coli ER2738 宿主菌、-96 gⅢ测序引物5’-HO CCC TCA TAG TTA GCG TAA CG-3’；人支气管上皮细胞16HBE购自广州吉妮欧生物技术有限公司；人肺癌细胞A549由中国科学院生物物理研究所赠送；M13单克隆抗体购自北京义翘神州科技有限公司。

噬菌体随机肽库筛选肝癌细胞特异性结合肽的实验研究

噬菌体随机肽库筛选肝癌细胞特异性结合肽的实验研究杨璞;何剪太;王吉伟;胡玉;于丽;金鑫;张阳德【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2009(029)009【摘要】目的利用噬菌体随机肽库筛选特异性靶向人肝癌细胞的短肽,为肝癌的靶向治疗提供理论依据.方法以人肝癌细胞HepG2为靶细胞,对噬菌体随机十二肽库进行3轮筛选.建立Hep62荷瘤裸鼠实验动物模型,并在裸鼠体内对经过体外3轮筛选的肽库再进行1轮筛选.随机挑取30个阳性噬菌体克隆进行序列测定及同源性分析.通过免疫细胞化学染色、免疫组织化学染色鉴定噬菌体展示肽的特异性.结果经过3轮体外筛选和1轮动物体内筛选.噬菌体在靶细胞HepG2上出现明显富集,随机挑选克隆测序结果表明十二肽VRKRSECLGAHD出现次数最多,免疫细胞化学染色、免疫组织化学染色进一步证明该噬菌体能特异结合于肝癌细胞.结论筛选得到的短肽能够特异性与肝癌细胞结合,为进一步研制用于治疗肝癌的高靶向性药物奠定实验基础.【总页数】4页(P1806-1808,1815)【作者】杨璞;何剪太;王吉伟;胡玉;于丽;金鑫;张阳德【作者单位】中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心/中南大学生物医学工程研究院,湖南长沙410008;中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心/中南大学生物医学工程研究院,湖南长沙410008;中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心/中南大学生物医学工程研究院,湖南长沙410008;中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心/中南大学生物医学工程研究院,湖南长沙410008;中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心/中南大学生物医学工程研究院,湖南长沙410008;中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心/中南大学生物医学工程研究院,湖南长沙410008;中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心/中南大学生物医学工程研究院,湖南长沙410008【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.噬菌体随机肽库中与神经胶质瘤细胞系SWO-38特异性靶向结合短肽的筛选 [J], 王冰;钟雪云;秦艳芳;钟瑛2.利用噬菌体多肽库筛选卵巢癌细胞特异性结合肽 [J], 王乐丹;李文桔;胡越3.噬菌体肽库在筛选及鉴定高转移性肝癌特异性结合肽中的应用及其意义 [J], 黄维莉;吕永晨;迟宝荣4.噬菌体展示肽库筛选大肠癌细胞特异性结合肽的实验研究 [J], 廖康雄;姚学清;吴承堂;林锋;吴伍林;曾穗德;罗育其;雷尚通5.利用噬菌体七肽库筛选获得阿尔茨海默病β-分泌酶特异性结合肽的研究 [J], 朱瑞;刘莉;金丽娟;高小芳;王方因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

肝癌细胞特异性结合短肽的噬菌体肽库筛选的开题报告

肝癌细胞特异性结合短肽的噬菌体肽库筛选的开题报告1. 研究背景肝癌是全球公认的高度恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率不断上升，对人类健康和生命安全造成威胁。

在肝癌的治疗中，常常采用靶向治疗方法，而肝癌细胞特异性结合短肽则可以作为肝癌靶向治疗的重要手段之一。

噬菌体肽库筛选技术是一种高效的肽库筛选技术，其可以通过体外筛选得到针对特定细胞或组织的结合肽。

因此，通过使用肝癌细胞特异性结合短肽，可以应用噬菌体肽库筛选技术，得到具有对肝癌细胞特异性结合能力的噬菌体肽，并为肝癌的治疗提供新的靶向治疗方法。

2. 研究目的本研究旨在利用噬菌体肽库筛选技术，筛选出具有肝癌细胞特异性结合能力的噬菌体肽，并对其具体的结合机制进行研究，为肝癌靶向治疗提供新的思路和方法。

3. 研究方法【1】准备肝癌细胞表面抗原样本：将肝癌细胞提取的膜蛋白进行纯化、结晶等处理，制备成肝癌细胞表面膜蛋白片段。

【2】制备噬菌体肽库：选取适合筛选的噬菌体肽库作为载体，将其与核酸库连接起来，构建噬菌体肽库。

【3】生物学筛选：将由上述肝癌细胞表面膜蛋白片段作为抗原，将噬菌体肽库进行生物学筛选。

【4】去除假阳性：通过多次生物学筛选，去除假阳性肽。

【5】鉴定肝癌细胞特异性结合肽：通过细胞结合实验，筛选出具有肝癌细胞特异性结合肽。

4. 预期结果通过本研究，我们预期可以筛选得到肝癌细胞特异性结合的噬菌体肽，并可以对其进行鉴定和分析。

这将为探索肝癌治疗的新靶点和制定靶向治疗药物提供新的思路和方法。

5. 研究意义本研究采用噬菌体肽库筛选技术，得到肝癌细胞特异性结合的肽，将为肝癌靶向治疗提供新的思路和方法。

同时，该研究也为细胞表面膜蛋白精细化分析、噬菌体肽库筛选技术的研究和应用提供了有效的手段和方法。

肺癌血清中特异性结合多肽的筛选

肺癌血清中特异性结合多肽的筛选周捷;臧林泉;冯文彬;潘雪刁;王军业;郭桐;王秀芳;田亮;刘海洋【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2010(31)8【摘要】目的以肺癌血清从噬菌体展示肽库中筛选出能够用于血清学筛查和肺癌病理分型的多肽.方法利用M13噬菌体随机12肽展示肽库对24例临床确诊肺癌患者的血清和24例体检者的血清进行4轮吸附-洗脱的筛选.挑取筛选后的噬菌体单克隆,皆以血清和细胞株进行试验,选出特异性及确诊率较高的单克隆.目标单克隆通过DNA测序确定其所表达的多肽序列,进而人工合成带FITC标记的多肽,以肺癌细胞、正常肺细胞和肺癌组织切片进行荧光成像检测.结果随机挑取30个经过4轮筛选的噬菌体单克隆,通过血清和细胞株的试验,筛选出6个特异性和确诊率较高的单克隆,其中单克隆ZZ-8肺癌血清确诊率达到41.6%,且鳞癌的比例较高.ZZ-8经DNA测序分析,确定其表达的多肽序列为: APTPSTQMNLLP.FITC标记的多肽在细胞和组织切片的荧光成像检测中,均显示良好的特异性.结论人工合成的多肽ZZ-8能够为研发肺癌诊断试剂奠定基础.【总页数】4页(P936-939)【作者】周捷;臧林泉;冯文彬;潘雪刁;王军业;郭桐;王秀芳;田亮;刘海洋【作者单位】广东药学院药科学院新药筛选中心,药理学教研室,广州,510006;广东药学院药科学院新药筛选中心,药理学教研室,广州,510006;广东药学院药科学院新药筛选中心,药理学教研室,广州,510006;广东药学院药科学院新药筛选中心,药理学教研室,广州,510006;中山大学附属肿瘤医院,510060;广东药学院药科学院新药筛选中心,物理化学教研室,广州,510006;广东药学院药科学院新药筛选中心,物理化学教研室,广州,510006;广东药学院药科学院新药筛选中心,物理化学教研室,广州,510006;华南理工大学化学科学学院,广州,510641【正文语种】中文【相关文献】1.噬菌体肽库与NCI-H1299细胞筛选肺癌特异性结合多肽ZS-9的初步研究 [J], 王军业;石磊;戴淑琴;潘琴;巫玮;臧林泉;戎铁华2.肺癌特异性结合多肽的体外筛选和鉴定 [J], 潘雪刁;何冰;王桂香;刘金泳;曹成明;臧林泉3.利用肺癌特异性结合多肽ZS-6筛选肺癌相关标志物 [J], 冯文彬;潘雪刁;周捷;石磊;罗军强;李询;臧林泉4.噬菌体展示技术筛选小细胞肺癌细胞特异性结合多肽 [J], 梁珍;姜尧;石姣姣;侯春英;张蕊;杨楠;刘雁勇;左萍萍5.基于特异性结合多肽ZS-1的肺癌新肿瘤标志物的筛选 [J], 王素军;潘雪刁;臧林泉;王桂香;石磊;谢海棠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。