林可霉素-大观霉素复方混悬注射液中有效成分含量的HPLC法测定
HPLC法测定盐酸林可霉素注射液的含量
理 论 板 数 ：５ ３ ２ ６ 录色谱 图。以峰面积 Ａ为纵坐标 ， 浓度 Ｃ为 横 坐 标 进 行 线 性 回归 ， 得 检 测 波 长 的 确 定 ： 密 称 取 林 可 霉 素 对 照 品 １ ６３ ｇ 置 ２ ｍｌ 精 ２ ．ｍ ． ５ 量 线 性 回归 方 程 ： ＝ ８ ２ Ｃ １７ ． （＝ ．９ ９。说 明 林 可 霉 素 在 浓 度 Ａ ３ ０４ ＋ ９ ０３ ｒ ０９ ９ ） ２ 瓶 中 ， 流 动 相 溶 解 并 稀 释 至 刻 度 ， 匀 ， 密 吸 取 ２０ ｌ置 １ｍｌ 加 摇 精 ．ｍ ， ０ 容 ０２ ２ ｍ ／ ～ ．２ ８ ／ 范 围 内 线 性 关 系 良好 。 ．５６ ｇｍｌ２０ ０ ｍｇ ｍｌ 量 瓶 中 ， 流 动 相 溶解 并 稀 释 奎 刻度 ， 匀 。以流 动 相 为 空 白 ， ２ ０ ２５ 精 密 度 试 验 取 盐 酸林 可 霉 素 注 射 液 的供 试 品 溶 液 ，在 上 述 色 加 摇 在 ０～ ．
色谱法测定盐酸林可霉 素的含量 ， 验表明该方法 简便 ， 速 ， 敏 ， 实 快 灵 准 确 ， 为 盐 酸 林 可 霉 素 注 射 液 的 质 量 控 制 提 供 参 考 ， 可作 为 企 业 可 并
的 内控 指 标 。
１ 仪 器 与试 药
Ａｇｅ ｔ１０ ｉ ｎ １０高 效 液 相 色谱 仪 ，ｇｌｎ １０高效 液 相 色 谱 化 学 工 ｌ Ａ ｉ ｔ１０ ｅ 作 站 ， ｏａ ｐ ｋＣ８ 谱 柱 （． Ｎ ｖ — ａ ｌ色 ３ ｍｍｘ ５ ｍｍ）Ｗａｅｓ公 司 ）ｕＶ １ Ｏ ９ １０ （ ｔ ｒ ， 一 ２１ 型 紫 外 可见 分光 光 度 计 Ｆ 一 ０ ４型 电子 天 平 （ 海 精 密 分 析 天 平 仪 器 厂 ） Ａ ２０ 上 超声 波振 荡 器 （ 海 科 导 超 声 仪 器 有 限 公 司 生 产 ） 型 号 ：２ ０ 上 １０ Ｈ 林 可 霉 素 对 照 品 （ 国 药 品生 物 制 品 检 定 所 ， 号 ：４ ２ ９ ０ ， 中 批 ０ ３ — ５６含
高效液相色谱法测定盐酸林可霉素预混剂中林可霉素的含量
高效液相色谱法测定盐酸林可霉素预混剂中林可霉素的含量作者：朱曦刘引兰董文婷来源：《湖北畜牧兽医》2012年第10期摘要:兽药盐酸林可霉素预混剂含量测定收载于《进口兽药质量标准》1999年版,是采用生物效价管碟法测定,该方法操作步骤复杂,影响因素多,检测时间长。
参考《中国兽药典》2010年版收载的盐酸林可霉素检测方法,利用HPLC法进行检测,使用C18色谱柱,柱温(30±5)℃,以0.05mol/L硼砂溶液∶甲醇(1∶1)为流动相,检测波长为214nm。
林可霉素峰与林可霉素B峰分离良好,林可霉素峰与相邻杂质峰的分离度符合要求,变异系数(RSD)小于1.5%。
结果表明通过高效液相色谱法(HPLC)能快速准确地测定兽药盐酸林可霉素预混剂中林可霉素的含量。
关键词:高效液相色谱;盐酸林可霉素预混剂;含量测定中图分类号:S859.79+6 文献标识码:B 文章编号:1007-273X(2012)10-0004-02盐酸林可霉素(Lincomycin Hydrochloride)又称洁霉素,化学式C18H34N2O6S,为林可胺类药物,属窄谱抗生素。
作用机理为抑制细菌细胞蛋白质的合成,有较好的抗革兰氏阳性菌作用,特别是对葡萄球菌、溶血性链球菌和肺炎链球菌有较强的抑制作用,但其作用效果不及青霉素类和头孢类[1]。
临床主要用于敏感菌引起的各种感染,如呼吸系统、免疫系统、皮肤及泌尿系统等组织的感染。
用作饲料添加剂时可促进肉鸡和育肥猪生长,提高其饲料利用率。
随着兽药行业的发展,其监督制度日益完善,为了适应兽药生产单位质量自控与监督检验机构逐渐增加的监督检验任务的需要,本试验利用高效液相色谱(HPLC)检测原理,建立了快速、准确的用高效液相色谱(HPLC)法测定兽药盐酸林可霉素预混剂中林可霉素含量的方法。
1 材料与方法1.1 主要仪器与试剂2 结果2.1 适应性试验结果适应性试验结果表明林可霉素与林可霉素B两峰完全分离,相邻之间的分离度为4.35(表1)。
HPLC法测定盐酸林可霉素含量__省略__和美国药典_27版_方法的比较_朱义舟
2. 3. 1 中 国 药 典 ( 2005 版 ) 的 色 谱 条 件 采 用 Turner 2. 7 重复性试验 同一批样品取 5份 ,分别依照中国药典
B1164J1229601 C1 8 色谱柱 ( 5 μm , 4. 6 mm ×200 mm ) ,柱温 : 室温 ,以 0. 05 mol·L - 1 硼砂溶液 2甲醇 (4∶6)为流动相 ,检测
( The Pha rm aceu tica l CO. L TD of N orthern A nhu i, S uzhou, A nhu i P rovince 234000) Abstract: A im To determ ine he content of L incomycin Hydrochloride by HPLC and compare the determ ination method of ChP ( 2005 version) and USP ( 27 version). M ethods The content of L incomycin Hydrochloride was determ ined by HPLC. The chromatographic conditions at the ChP included C1 8 colμmn and the mobile phase was composed of 0. 05 mol·L - 1 borax2methanol (4∶6) , the detection wavelength at 214 nm , and the detection concentration was 2. 0 g·L - 1. The chromatographic conditions at the USP included C8 column and the mobile phase was composed of phosphate2methanol - acetonitrile ( 780∶150 ∶150) w ith the detection wavelength at 210 nm , and the detection concentration was 1. 2 g·L - 1. Results The linearity was obtained over 1. 606 ～2. 404 g·L - 1 ( r = 0. 9999) for lido2 caine at ChP (2005 version) and the linear relation was good. A t the USP (27 version) the linearity was obtained over 0. 944～1. 388 g· L - 1 ( r = 0. 9997) and the linear relation was good. The average recovery ranged between 99. 0% ～101. 0% , RSD less than 0. 5%. Conclusion The two linear relations was very good with the density and the peak area. By comparison w ith the USP (27 version) , the
HPLC法测定盐酸林可霉素注射液含量的不确定度分析
HPLC法测定盐酸林可霉素注射液含量的不确定度分析左登平【摘要】目的建立HPLC法测定盐酸林可霉素注射液含量的不确定度分析方法.方法按照测量步骤,根据<测量不确定度评定与表示>(JJF1059-1999)中有关规定评估其不确定度.结果盐酸林可霉素注射液中林可霉素含量测定的合成不确定度为0.3%,扩展不确定度分别为0.6%(K=2).结论测量不确定度可用于对盐酸林可霉素注射液含量测定结果的评定.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2013(017)011【总页数】3页(P1871-1873)【关键词】盐酸林可霉素注射液;HPLC法;不确定度分析【作者】左登平【作者单位】安徽省宿州市食品药品检验所,安徽,宿州,234000【正文语种】中文盐酸林可霉素是一类用于治疗敏感葡萄球菌属、链球菌属、肺炎链球菌及厌氧菌所致的呼吸道感染、皮肤软组织感染、女性生殖道感染和盆腔感染及腹腔感染等的抗生素，有较强抗菌活性，常用于对青霉素过敏的患者。
《中国药典》2010年版采用HPLC法测量本品的含量［1］，药品的治疗效果与药品含量的高低有着直接关系，由于许多不确定因素的存在导致含量的测定结果存在一定的偏差，测量结果越准确的，不确定度相对越小，其结果的使用价值也愈高［2］。
笔者参考《测量不确定度评定与表示》，将不确定度的评定与方法引入到HPLC法测定盐酸林可霉素注射液含量中，通过建立数学模型，找出影响测量结果不确定度的各种因素，并对这些因素进行了逐项分析及评定［3］。
1 仪器与试药高效液相色谱仪(美国Waters公司);电子天平(XP20型，d=0.01 mg/0.1 mg，梅特勒-托利多仪器有限公司);pHS-25型pH计;经标定的A级25 mL、A级200 mL单标容量瓶、A级2 mL单标移液管。
林可霉素对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号:130432-200908，纯度:86.7%);盐酸林可霉素注射液(生产厂家:上海现代哈森药业有限公司，批号:11052871，规格:0.2 g·mL-1);水为纯化水，甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。
HPLC法测定盐酸林可霉素注射液含量的不确定度分析
ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｂ ｌ ｅ ｔ ｏ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｃ ｙ ｏ ｆ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ｏ ｆ ｌ ｉ ｎ ｃ ｏ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｄ ｅ ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ．
即得 对 照 品溶 液 。
２ ． ３ 供试 品溶液的 制备
用２ ｍ Ｌ的单标 移液 管精 密量取
样 品适量 （ 样品 １ ： ２ ｍＬ ， 样品２ ： ２ ｍ Ｌ ） ， 置于 ２ ０ ０ ｍ Ｌ量 瓶 中，
强抗菌活性 ， 常用于对青霉 素过敏 的患者 。《 中国药典 ｝ ２ ０ １ ０
定度相对越小 ， 其结 果 的使 用价值 也 愈 高 。笔者 参考 《 测 量不确定度评定 与表 示》， 将 不 确定 度 的评定 与 方法 引入 到 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法测定盐酸林 可霉 素注 射 液含 量 中 ， 通 过建 立 数学 模 型， 找 出影 响测 量结果不确定度 的各种 因素 ， 并对这些 因素进
ｈ ｖ ｄ ｒ ０ ｃ ｈ ｌ ０ ｒ ｉ ｄ ｅ ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗｉ ｔ ｎ ｇ
（ Ｓ ｕ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｉ ｎ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｆ ｏ ｒ Ｆ ｏ ｏ ｄ ａ ｄ ｎ Ｄ ｒ ｕ ｇ Ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ， Ｓ ｕ ｚ ｈ ｏ ｕ ， Ａ ｎ ｈ ｕ ｉ ２ ３ ４ ０ ０ ０， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ） Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｏ ｆ ｕ ｎ ｃ ｅ ｒ ｔ ａ ｉ ｎ ｌ ｙ ｅ ｖ ｌｕ ａ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｆ ｏ ｒ ｌ ｉ ｎ ｃ ｏ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｄ ｅ ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ｉ ｔ ｈ ＨＰ Ｌ Ｃ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ａ
HPLC法检测饲料中林可霉素的含量
江西饲料
饲料检测
ＨＰＬＣ法检测饲料中林可霉素的含量
广东温氏食品集团有限公司 陈 丽 冯建文 谭宝玲
摘 要： 利用ＨＰＬＣ法检测饲料中林可霉素的含量。采用Ｃ１８色谱柱（ １５０ ｍｍ ×４．６ ｍｍ， ５ μｍ） ， 以 乙腈－ 水－ 三乙胺（ １０∶９０∶０．３， 磷酸调ｐＨ值至３．５） 为流动相， 流速为１ ｍＬ·ｍｉｎ－１， 波长２１４ ｎｍ。线性回归方 程为Ｙ＝１．８０５５Ｘ＋６．２０５５ （ Ｒ２＝０．９９９４） ， 林可霉素在浓度为５０～５００ μｇ ／ｍＬ范围内的峰面积与浓度呈良好
的线性关系。平均回收率９９．２７％， ＲＳＤ％为０．６０。
关键词： ＨＰＬＣ； 林可霉素； 饲料
中图分类号： Ｓ８１６．３２
文献标识码： Ａ
文章编号： １００８－ ６１３７（ ２００７） ０２－ ００２６－ ０１
林可霉素（ ｌｉｎｃｏｍｙｃｉｎ） 是 一 种 高 效 广 谱 抗 生 素 。 于 １９６２ 年 由 美 国 人 Ｍａｓｏｎ 等 首 先 从 链 霉 菌 林 可变种培养液中获得， 从此获得广泛应用。林可 霉素的分子式为Ｃ１８Ｈ３４Ｎ２Ｏ６Ｓ， 分子量为４０６．５６。林 可霉素对革兰氏阳性菌有较强的抑菌作用， 特别 是 对 链 球 菌 、金 黄 色 葡 萄 球 菌 及 厌 氧 菌 的 抗 菌 作 用尤其明显， 在许多感染症的治疗中疗效显著。
林可霉素（ 简称Ａ） 由反－ ４’－ 正丙基古液酸与 甲基α－ 硫林可霉糖经酰胺键结合而成。在其发酵 过程中同时伴生少量的林可霉素Ｂ（简称Ｂ）以及痕 量的差向林可霉素（ 简称Ｅ） 。而Ａ与Ｅ的区别则只 在于林可霉糖结构式的７位上， Ａ为Ｒ构型羟基； Ｅ 为Ｓ构型羟基。因此， 英、美等国药典均用气相色 谱法测定Ｂ， 并规定Ｂ峰面积不得超过Ａ、Ｂ两峰面 积之和的５％。由于ＧＣ法测定时样品必须硅烷化， 柱温及检测器温度均较高， 操作亦较繁琐。
高效液相色谱法测定林可霉素利多卡因凝胶中盐酸利多卡因含量
第２５卷第１期２０１９年３月分析测试技术与仪器ＡＮＡＬＹＳＩＳＡＮＤＴＥＳＴＩＮＧＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＡＮＤＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴＳＶｏｌｕｍｅ２５Ｎｕｍｂｅｒ１㊀㊀㊀㊀Ｍａｒ.２０１９分析测试新成果(０３９~０４２)收稿日期:２０１８－１２－１３ꎻ㊀修订日期:２０１９－０１－２４.作者简介:欧阳晓玫(１９６４－)ꎬ女ꎬ主任药师ꎬ研究方向:药物分析ꎬＥ－ｍａｉｌ:７６７７８９２２８＠ｑｑ.ｃｏｍ.高效液相色谱法测定林可霉素利多卡因凝胶中盐酸利多卡因含量欧阳晓玫ꎬ牟建平ꎬ滕宝霞ꎬ贺晓文(甘肃省药品检验研究院ꎬ甘肃兰州㊀７３００５０)摘要:建立了高效液相色谱法(ＨＰＬＣ)测定林可霉素利多卡因凝胶中盐酸利多卡因含量的方法.优化后的试验条件如下:色谱柱为Ａｇｉｌｅｎｔ５Ｔｃ－Ｃ１８(２)(２５０ｍｍˑ４.６ｍｍꎬ５μｍ)ꎬ流动相为０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液(ｐＨ＝６.０)－甲醇－乙腈(体积比为６８ʒ１９ʒ１３)ꎬ紫外检测波长为２１４ｎｍꎬ流速１.０ｍＬ/ｍｉｎꎬ柱温３０ħꎬ进样量２０μＬ.试验结果表明:利多卡因的线性范围为４０.１~２４０.６μｇ/ｍＬ(ｒ＝０.９９９４)ꎬ加样回收率为９７.６％.建立的方法操作简便ꎬ可用于制剂中盐酸利多卡因的质量控制.关键词:高效液相色谱法ꎻ利多卡因ꎻ林可霉素利多卡因凝胶中图分类号:Ｏ６５７.７＋２文献标志码:Ｂ文章编号:１００６￣３７５７(２０１９)０１￣００３９￣０４ＤＯＩ:１０.１６４９５/ｊ.１００６－３７５７.２０１９.０１.００８ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｉｄｏｃａｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎＬｉｎｃｏｍｙｃｉｎＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄＬｉｄｏｃａｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅＧｅｌｂｙＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＯＵＹＡＮＧＸｉａｏ－ｍｅｉꎬＭＵＪｉａｎ－ｐｉｎｇꎬＴＥＮＧＢａｏ－ｘｉａꎬＨＥＸｉａｏ－ｗｅｎ(ＧａｎｓｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌꎬＬａｎｚｈｏｕ７３００５０ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｉｄｏｃａｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎｌｉｎｃｏｍｙｃｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄｌｉｄｏｃａｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｇｅｌｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ(ＨＰＬＣ)ｉｓｓｅｔｕｐ.Ａｇｉｌｅｎｔ５Ｔｃ－Ｃ１８(２)(２５０ｍｍˑ４.６ｍｍꎬ５μｍ)ｃｏｌｕｍｎｗａｓｕｓｅｄ.Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆ０.０５ｍｏｌ/ＬＢｏｒａｘ(ａｄｊｕｓｔｅｄｔｏｐＨ６.０ｗｉｔｈｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄ)－ｍｅｔｈａｎｏｌ－ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ(６８ʒ１９ʒ１３).ＴｈｅＵＶｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓａｔ２１４ｎｍꎬｗｉｔｈａｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１ｍＬ/ｍｉｎａｎｄｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３０ħ.Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｉｔｙｗａｓｇｏｏｄｆｏｒｌｉｄｏｃａｉｎｅｗｉｔｈｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ４０.１~２４０.６μｇ/ｍＬ(ｒ＝０.９９９４)ꎬｔｈｅｓａｍｐｌｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｗａｓ９７.６％.Ｔｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｍｅｔｈｏｄｉｓｏｐｅｒａｔｉｖｅａｎｄｓｉｍｐｌｅꎬａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆｌｉｄｏｃａｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＨＰＬＣꎻｌｉｄｏｃａｉｎｅꎻｌｉｎｃｏｍｙｃｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅꎻｌｉｄｏｃａｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｇｅｌ㊀㊀林可霉素利多卡因凝胶是由盐酸林可霉素㊁盐酸利多卡因组成的复方制剂ꎬ曾用名绿药膏ꎬ主要用于外科烧伤及蚊虫叮咬引起的各种皮肤感染ꎬ在我国广泛使用.２００２年收载于«化学药品地标升国标第２册»ꎬ国外药典无收载ꎬ现行质量标准中未对盐酸利多卡因的含量进行控制[１]ꎬ因此ꎬ该制剂的质量和疗效无法得到有效保证.本文参照相关文献[２－５]ꎬ采用高效液相色谱法测定凝胶中盐酸利多卡因的含量ꎬ建立的方法操作简单易行ꎬ符合«中国药典»２０１５年版检测要求ꎬ排除了样品中凝胶基质和其他杂质干扰ꎬ并考察了全国１０家生产企业２１４批次样品中盐酸利多卡因的含量.分析测试技术与仪器第２５卷１㊀试验部分１.１㊀仪器与试剂高效液相色谱仪(日立Ｃｈｒｏｍａｓｔｅｒ５４３０型ꎬ带ＤＡＤ检测器)ꎻ酸度计(梅特勒ꎬ型号:ＦＥ２８)ꎻ电子天平(梅特勒精密电子天平ꎬ型号:ＤＵ２０５).利多卡因对照品(来源:中国食品药品检定研究院ꎬ批号:１００３４２－２０１３０４ꎬ质量分数:９９.８％)ꎻ甲醇(ＬｉＣｈｒｏｓｏｌｖꎬ色谱纯)ꎻ乙腈(ＬｉＣｈｒｏｓｏｌｖꎬ色谱纯)ꎻ四硼酸钠(国药集团ꎬ优级纯)ꎻ磷酸(科密欧ꎬ分析纯).林可霉素利多卡因凝胶为国家评价性抽检样品.１.２㊀色谱条件色谱柱:Ａｇｉｌｅｎｔ５Ｔｃ－Ｃ１８(２)柱(２５０ｍｍˑ４.６ｍｍꎬ５μｍ)ꎻ流动相:０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液(用磷酸调节ｐＨ值至６.０)－甲醇－乙腈(体积比为６８ʒ１９ʒ１３)ꎻ流速:１.０ｍＬ/ｍｉｎꎻ检测波长:２１４ｎｍꎻ柱温:３０ħꎻ进样量:２０μＬ.１.３㊀对照品溶液的配制准确称取利多卡因对照品０.０１６０ｍｇ置１００ｍＬ容量瓶中ꎬ用０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液溶解并稀释至刻度ꎬ摇匀备用.准确称取利多卡因对照品０.０２４０６ｇ置１００ｍＬ量瓶中ꎬ用０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液溶解稀释至刻度ꎬ摇匀ꎬ作为对照储备液ꎬ该溶液质量浓度为２４０.６μｇ/ｍＬ.取２０μＬ进样ꎬ所得色谱图如图１(ａ)所示.１.４㊀供试品溶液的配制称取样品４ｇ置于烧杯中ꎬ加入少量０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液ꎬ用玻璃棒充分搅拌使其分散均匀并溶解后ꎬ转移至１００ｍＬ容量瓶中ꎬ加０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液稀释至刻度ꎬ摇匀备用.该溶液过滤后取２０μＬ进样测定ꎬ所得色谱图如图１(ｂ)所示.图１㊀利多卡因液相色谱图Ｆｉｇ.１㊀Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆｌｉｄｏｃａｉｎｅｌｉｑｕｉｄ(ａ)利多卡因对照品溶液ꎬ(ｂ)利多卡因供试品溶液２㊀结果与讨论２.１㊀流动相的选择林可霉素利多卡因凝胶是水性凝胶剂ꎬ水性凝胶基质大多在水中溶胀成水性凝胶而不溶解.选用磷酸盐缓冲液溶解样品ꎬ结果林可霉素利多卡因凝胶样品分散不均一㊁溶解较差.选取０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液溶解样品ꎬ结果林可霉素利多卡因凝胶样品中凝胶基质干扰小ꎬ样品溶解性较好.２.２㊀系统适用性试验色谱柱的理论板数㊁分离度㊁重复性符合 高效液相色谱法 (中国药典２０１５年版四部通则０５１２)项下的要求.理论板数按利多卡因峰计算不低于２０００ꎬ待测峰与其它峰的分离度应不小于１.５.０４第１期欧阳晓玫ꎬ等:高效液相色谱法测定林可霉素利多卡因凝胶中盐酸利多卡因含量２.３㊀重复性分别精密吸取利多卡因对照品溶液２０μＬꎬ按上述色谱条件测定ꎬ各进样６次ꎬ测定峰面积积分值ꎬ利多卡因对照品溶液的ＲＳＤ为０.６０％.２.４㊀线性关系分别量取对照储备液适量ꎬ用０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液稀释成质量浓度为４０.１㊁８０.２㊁１２０.３㊁１６０.４㊁２００.５㊁２４０.６μｇ/ｍＬ的系列浓度标准溶液ꎬ按 １.２ 节色谱条件进样测定ꎬ以质量浓度(μｇ/ｍＬ)为横坐标ꎬ峰面积为纵坐标ꎬ绘制标准曲线ꎬ结果如图２所示.曲线方程:ｙ＝６２９６４ｘ＋６９４６７ꎬｒ＝０.９９９４.结果图２㊀利多卡因标准曲线Ｆｉｇ.２㊀Ｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅｏｆｌｉｄｏｃａｉｎｅ表明ꎬ在４０.１~２４０.６μｇ/ｍＬ之间与峰面积呈良好线性关系.２.５㊀精密度试验取质量浓度为１６０.４μｇ/ｍＬ的对照溶液ꎬ按１.２ 节色谱条件连续进样６次ꎬ结果其峰面积的ＲＳＤ为０.５％ꎬ表明本文所建立的方法具有较好的精密度.２.６㊀回收率试验准确吸取１.００ｍＬ样品各３份ꎬ分别置于５０ｍＬ量瓶中ꎬ加入质量浓度为１６０.４μｇ/ｍＬ的利多卡因对照储备液０.４㊁０.５㊁０.６ｍＬꎬ用０.０５ｍｏｌ/Ｌ硼砂溶液稀释至刻度ꎬ摇匀ꎬ按 １.２ 节色谱条件进样测定ꎬ计算回收率ꎬ结果如表１所列.由表１可见ꎬ平均回收率为９７.６％ꎬ表明加样回收率良好.２.７㊀盐酸利多卡因含量测定根据建立的含量测定方法ꎬ对我院承担的国家评价性抽检品种林可霉素利多卡因凝胶的２１４批次样品中盐酸利多卡因含量进行测定ꎬ结果２１４批次样品中盐酸利多卡因含量分布在８４.０％~１０１.５％之间ꎬ平均值９３.９％(ｎ＝２１４)ꎬ结果如图３所示.制剂中盐酸利多卡因的含量基本呈正态分布ꎬ部分批次的含量较低ꎬ说明部分生产企业对盐酸利多卡因投料及工艺控制不理想.表１㊀回收率试验结果Ｔａｂｌｅ１㊀Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｒｅｃｏｖｅｒｙｔｅｓｔ名称样品质量/μｇ对照品质量/μｇ测得质量/μｇ回收率/％平均回收率/％利多卡因１６１.４６４.１６２２４.４１９８.２９７.６８０.２０２３９.２７９７.１９６.２４２５５.２３９７.５１６５.８６４.１６２２９.１３９８.７８０.２０２４４.５６９８.２９６.２４２５９.０６９６.９１５８.２６４.１６２２０.４４９７.０８０.２０２３６.８８９８.１９６.２４２５１.２６９６.７１４分析测试技术与仪器第２５卷图３㊀２１４批次样品盐酸利多卡因含量的频数分布图Ｆｉｇ.３㊀Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆ２１４ｂａｔｃｈｅｓｏｆｌｉｄｏｃａｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ３㊀结论本文采用高效液相色谱法测定林可霉素利多卡因凝胶中盐酸利多卡因的含量ꎬ建立了盐酸利多卡因的含量测定方法.通过建立的方法对国家评价性抽检的１０家生产企业的２１４批次林可霉素利多卡因凝胶中盐酸利多卡因的含量进行测定ꎬ结果发现部分企业生产的制剂中盐酸利多卡因的含量较低ꎬ制剂的质量和疗效未得到有效保证.参考文献:[１]㊀国家药典委员会.化学药品地方标准上升国家标准[Ｓ].第二册ＷＳ－１０００１－(ＨＤ－０１４０)－２００２:Ｐ１４７[２]㊀涂晓真.ＨＰＬＣ法测定林可霉素利多卡因凝胶的含量[Ｊ].中国药品标准.２００５(２)ꎬ２４－２５[ＴＵＸｉａｏ－ｚｈｅｎ.ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｓｓｙｏｆｌｉｃｏｍｙｃｉｎａｎｄｌｉｄｏｃａｉｎｅｇｅｌｂｙＲＰ－ＨＰＬＣ[Ｊ].ＤｒｕｇＳｔａｎｄａｒｄｓｏｆＣｈｉｎａꎬ２００５(２)ꎬ２４－２５][３]㊀郑丽芬.林可霉素利多卡因凝胶含量测定方法的改进[Ｊ].江苏药学与临床研究ꎬ２００４ꎬ１２(４):２３－２４.[ＺＨＥＮＧＬｉ－Ｆｅｎｇ.Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｎｔｈｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｉｎｃｏｍｙｃｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄｌｉｄｏｃａｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｇｅｌ[Ｊ].ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２００４１２(４)ꎬ２３－２４.][４]㊀余小平.高效液相法测定林可霉素利多卡因凝胶中盐酸利多卡因的含量[Ｊ].中国医院药学杂志ꎬ２００５ꎬ２５(８):７２３－７２４.[ＹＵＸｉａｏ－ｐｉｎｇ.ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｌｉｄｏｃａｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎｌｉｎｃｏｍｙｃｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄｌｉｄｏｃａｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｇｅｌｂｙＨＰＬＣ[Ｊ].ＣｈｉｎＨｏｓｐＰｈａｒｍＪꎬ２００５２５(８):７２３－７２４.] [５]㊀易文琳.ＨＰＬＣ法同时测定林可霉素利多卡因凝胶中２组分的含量[Ｊ].中国药房ꎬ２００７ꎬ１８(１６):１２５８－１２５９.[ＹＩＷｅｎ－ｌｉｎ.Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ２ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅａｎｄｌｉｄｏｃａｉｎｅｇｅｌｂｙＨＰＬＣ[Ｊ].ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃꎬ２００７ꎬ１８(１６):１２５８－１２５９.]２４。
用反相高效液相色谱法测定克林霉素磷酸酯注射液中克林霉素及有关物质含量的效果分析
用反相高效液相色谱法测定克林霉素磷酸酯注射液中克林霉素及有关物质含量的效果分析董宏伟，李新军，王晓光（福安药业集团烟台只楚药业有限公司，山东 烟台 264002）[摘要]目的：分析用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定克林霉素磷酸酯注射液中克林霉素及有关物质含量的效果。
方法：本次实验采用RP-HPLC 法测定克林霉素磷酸酯注射液中克林霉素及有关物质的含量。
本次实验使用的色谱柱为C18色谱柱（150×4.6mm，5 μm），使用的填料为ODS 填料，流动相为pH 2.5的磷酸二氢钾溶液-乙腈（775:225），流动相的流速为1.0ml/min，运行时间为三倍主峰保留时间，加样量为20 μl，检测波长为273 nm。
在该色谱条件下对克林霉素磷酸酯注射液中克林霉素及有关物质的含量进行测定。
结果：克林霉素的含量在0.07475～0.67363 mg/L 区间时，呈现出良好的线性关系，r=0.9992。
本法测得回收率的平均值为99.8%，RSD 值为0.7%。
克林霉素磷酸酯注射液中克林霉素的含量为99.3%～104.4%，相关物质的含量为2.7%～3.0%。
结论：用RP-HPLC 法测定克林霉素磷酸酯注射液中的克林霉素及有关物质含量的效果较为理想。
[关键词]反相高效液相色谱法；克林霉素磷酸酯注射液；克林霉素的含量；有关物质[中图分类号]R446 [文献标识码]A [文章编号]2095-7629-（2021）02-0013-02呼气样品中13C 的含量）。
若结果＞4表示对研究对象进行13C-尿素呼气试验的结果为阳性，若结果≤4表示对研究对象进行13C-尿素呼气试验的结果为阴性。
进行血清Hp 抗体分型检测的方法为：在清晨，采集研究对象的空腹肘静脉血3 ml。
将静脉血静止放置2 h 后进行血清分离。
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法从血清中分离出vacA 基因、cagA 基因、尿素酶A、尿素酶B 等Hp 抗原。
HPLC法对林可霉素利多卡因凝胶中二组分及有关物质的含量测定
·药品质量及检验·HPLC法对林可霉素利多卡因凝胶中二组分及有关物质的含量测定△胡楠裴科秦楠*（山西中医药大学中药与食品工程学院太原030619）摘要：目的：建立林可霉素利多卡因凝胶中的二组分及有关物质测定方法。
方法：Agilent1260Infinity高效液相色谱仪，0.05M 硼砂-0.01%三氟乙酸-水：甲醇：乙腈（70∶10∶20），检测波长210nm，流速1.0mL/min，柱温40℃，进样量10μL，洗脱时间30min。
结果：林可霉素利多卡因凝胶中的主峰与杂峰分离度均大于1.5，林可霉素、利多卡因、2，6-二甲基苯胺的定量限分别为80ppb、40ppb、40ppb，且在各自的线性范围内线性关系良好（n=6，R2>0.999），RSD分别为1.3%、1.1%、1.3%。
结论：该测定方法专属性较好，灵敏度较高，能同时有效测定林可霉素利多卡因凝胶中的两个主要成分和有关物质。
关键词：林可霉素利多卡因凝胶2，6-二甲基苯胺有关物质中图分类号：R927.2文献标识码：A文章编号：1672-8351（2020）03-0001-02林可霉素利多卡因凝胶又被称作绿药膏，主要成分为利多卡因和林可霉素，在民间广泛应用于蚊虫叮咬和各种皮肤烧伤感染，疗效显著。
但是现行的国家标准化学药品地标升国标中只规定了林可霉素的HPLC含量测定方法，并未对利多卡因和有关杂质的含量测定方法作出说明[1]。
而2015版《中国药典》只对利多卡因凝胶的含量测定方法做出了说明，并未收录林可霉素利多卡因凝胶[2]。
国内缺少同时测定林可霉素利多卡因凝胶两个主要成分的标准方法，并且尚未见测定有关物质含量的方法。
因此，本文参照已报道的相关文献[3-5]，采用对照品法对已知杂质进行定性和定量，建立了林可霉素利多卡因凝胶中2个主成分及有关物质含量测定方法，确定了有关物质2，6-二甲基苯胺。
本论文建立的方法可以有效分离各主成分和杂质，对国内林可霉素利多卡因凝胶生产可以提供质量控制参考。
高效液相色谱法测定化妆品中林可霉素类药物
高效液相色谱法测定化妆品中林可霉素类药物陈张好;方继辉;刘小娟【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2014(050)002【总页数】3页(P252-254)【作者】陈张好;方继辉;刘小娟【作者单位】广东省食品药品检验所,广州510180;广东省食品药品检验所,广州510180;广东省食品药品检验所,广州510180【正文语种】中文【中图分类】O657.72林可霉素类药物属抗菌药物中的小类别，临床上广泛用于除神经系统之外的敏感菌所致的各种感染，主要有以盐酸盐或磷酸酯形式存在的林可霉素和克林霉素类制剂。
其不良反应也不容忽视［1］，可引起胃肠道反应、肝脏损害、心血管反应等［2］，我国在《化妆品卫生规范》中已将抗生素类药物列入化妆品禁用组分。
近年来，祛痘或抑制粉刺化妆品中非法添加抗生素事件频发，建立一种快速、简便、稳定的化妆品中林可霉素类药物含量的测定方法对化妆品监管具有重要意义。
目前，林可霉素类药物的检测集中在药品、饲料或食品等行业，主要采用液相色谱法、液相色谱－串联质谱法等［3－7］，多为单组分或针对包括林可霉素、克林霉素在内多组分的测定，克林霉素磷酸酯的检测方法鲜见报道，化妆品中更无相关检测标准。
本工作采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定化妆品中林可霉素、克林霉素及克林霉素磷酸酯的含量，并建立了高效液相色谱法－串联质谱（HPLC－MS／MS）确证方法，发现了化妆品中确实存在非法添加上述3种禁用组分的现象，亟需制定法定标准。
1 试验部分1.1 仪器与试剂Alliance e2695型高效液相色谱仪，配2998二极管阵列检测器，API 3000MS／MS型串联质谱检测器；KQ－300DE型数控超声波清洗器，XS 205DU型电子分析天平，Centrifuge 5810R型高速离心机，Direct－Q3型超纯水发生器。
林可霉素（纯度为86.2%，中检所，批号:30432－200407）、克林霉素（纯度为86.5%，中检所，批号:30422－200404）、克林霉素磷酸酯（纯度为79.0%，中检所，批号:130486－200502）。
林可霉素-大观霉素注射液在猪体内的残留消除研究
林可霉素-大观霉素注射液在猪体内的残留消除研究高艳;岳静;黄显会;曾振灵【摘要】[Objective]The residue depletion of lincomycin hydrochloride-spectinomycin sulfate injection in pigs was investigated in this study , and its withdrawal time was estimated .[Method] In routine breed-ing conditions , thirty healthy pigs were randomly allocated to six treatment groups .All of them were trea-ted with lincomycin hydrochloride-spectinomycin sulfate injection at a dosage of 15 mg/kg ( 5 mg linco-mycin and 10 mg spectinomycin ) once daily for 5 consecutive days .Five medicated pigs were slaughtered at 8, 24, 72, 144, 240 and 336 h after intramuscular administration, and muscle, liver, kidney, fat and injection site tissues were sampled .The tissue concentration of lincomycin and spectinomycin was ana-lyzed respectively by liquid chromatography-mass spsectrometry ( LC-MS/MS) and high-performance liq-uid chromatography ( HPLC ) .[Result and conclusion] At 6 days postmedication , all observations of spectinomycin and lincomycin were below the corresponding MRLs .In all of the detected tissues , kidney had the highest drug concentration followed by liver , injection site , muscle and fat with the lowest drug concentration , indicating that kidney was target tissue for spectinomycin and lincomycin .Based on the MRLs, which were established by the Chinese Agriculture Ministry , the withdrawal time in pigs was ana-lyzed by WT1.4 software.The results indicated that the withdrawal time of lincomycin hydrochloride-spectinomycin sulfateinjection should be 8 days after intramuscular administration of 15 mg/kgin pigs.%[目的]对一种盐酸林可霉素-硫酸大观霉素注射液在猪组织中的残留消除进行研究，并制订该制剂在猪体内的休药期．[方法]常规饲养条件下，将30头健康猪随机分为6组，按猪体质量以15 mg/kg （即林可霉素5 mg/kg和大观霉素10 mg/kg）剂量颈部肌内注射盐酸林可霉素-硫酸大观霉素注射液，每天1次，连用5 d，于最后一次给药后8、24、72、144、240、336 h各宰杀1组猪，分别采集每头猪的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪和注射位点5种组织，采用LC-MS/MS 法和HPLC-UV法分别对林可霉素和大观霉素进行残留量测定．[结果和结论]林可霉素在猪组织中消除较快，大观霉素消除较慢，给药后第6天所有检测组织中的林可霉素和大观霉素已全部低于最高残留限量，林可霉素和大观霉素在猪体内各组织器官的残留浓度大小顺序均为：肾脏＞肝脏＞注射部位＞肌肉＞脂肪，表明肾脏是二者的靶组织．结合农业部规定的林可霉素、大观霉素在猪体内的最高残留限量和WT1.4休药期软件计算结果，建议该制剂在猪体内的休药期为8 d．【期刊名称】《华南农业大学学报》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】4页(P106-109)【关键词】残留;猪;林可霉素;大观霉素【作者】高艳;岳静;黄显会;曾振灵【作者单位】华南农业大学，国家兽药残留基准实验室，广东广州510642;华南农业大学，国家兽药残留基准实验室，广东广州510642;华南农业大学，国家兽药残留基准实验室，广东广州510642;华南农业大学，国家兽药残留基准实验室，广东广州510642【正文语种】中文【中图分类】S859.79林可霉素为林可胺类抗生素，主要抗革兰阳性菌，大观霉素为氨基糖苷类抗生素，主要抗革兰阴性菌，两者联用可从不同环节阻碍细菌蛋白质的合成，具有较好的协同作用.林可霉素与大观霉素配伍常用于防治猪沙门菌病、支原体肺炎和敏感菌引起的母猪乳腺炎-子宫炎-无乳综合症等疾病，临床上还可用于治疗猪密螺旋体性痢疾［1］.随着该复方制剂在畜牧业中的广泛使用，不可避免地引起动物组织或其产品中药物的滞留或蓄积，不仅影响了动物性产品的生产加工，而且还会以残留的方式进入人体和生态系统，严重影响消费者的身体健康［2］.本文对一种盐酸林可霉素-硫酸大观霉素注射液在猪组织中的残留消除进行研究，旨在为临床上合理使用该制剂提供理论依据和指导，并为制订该制剂在猪体内的休药期和正确执行休药期的规定提供科学依据.1.1 主要药品与试剂15 %盐酸林可霉素-硫酸大观霉素注射液(其中含林可霉素50 mg/mL，大观霉素100 mg/mL)，批号120614，由上海公谊兽药厂提供.Bond Elut C18固相萃取小柱(6 mL，500 mg)，美国安捷伦公司.甲醇(色谱纯)，乙腈(色谱纯)，正己烷(分析纯)，二氯甲烷(分析纯)等.水为符合GB/T 6682规定的二级水.1.2 主要溶液配制提取液：称取磷酸二氢钾1.36 g，加水溶解并稀释至1 000 mL，磷酸调节pH至4.0，加入三氯乙酸20 g溶解即得.十二烷基磺酸钠溶液：称取十二烷基磺酸钠2.78 g，加水溶解并稀释至50 mL，静置24 h后备用.十二烷基磺酸钠缓冲液：称取十二烷基磺酸钠2.78 g，用水溶解，加入乙酸1 mL，并用水稀释至500 mL.1.3 仪器美国应用生物系统公司API4000型串联质谱仪(配ESI离子源).戴安UltiMate 3000高效液相色谱仪(配四元泵、自动进样器、柱温箱等).德国Eppendorf公司高速离心机.色谱柱：Hypersil BDS C18(5 μm，4.6 mm×250 mm)，大连伊利特分析仪器有限公司.超声机：HS10260D型，BENCHTOP公司.1.4 动物试验流程32 头健康猪，其中，2头为空白对照，其余的随机分为6组.按猪体质量以15mg/kg(林可霉素5 mg/kg和大观霉素10 mg/kg)剂量颈部肌内注射盐酸林可霉素-硫酸大观霉素注射液，每天给药1次，连续给药5 d，分别在给药后第8、24、72、144、240、336小时的时间点各宰杀1组猪，采集肌肉、肝脏、肾脏、脂肪及注射位点等5种组织，做好标记、包装，保存于-20℃冰箱，待测.1.5 组织样品前处理1.5.1 含林可霉素的样品前处理准确称取匀质试样(肌肉和脂肪各1 g，肝脏和肾脏各0.5 g)，置于15 mL离心管中，加入2 mL乙腈涡旋混匀，超声10 min，振荡10 min，于4℃条件下8 000 r/min离心10 min，转移上清液，残渣用1 mL乙腈重复提取1次，合并上清液，蒸馏水稀释至10 mL.用4 mL正己烷除脂3次，8 000 r/min离心10 min，弃正己烷层，水层过0.22 μm滤膜，进行LC-MS/MS测定.1.5.2 含大观霉素的样品前处理含大观霉素的样品前处理过程包括提取、净化和衍生化.其中，提取和净化过程参照我国农业部已颁布的动物性食品中林可霉素和大观霉素残留检测气相色谱法(农业部1163号公告-2-2009);衍生化过程如下：洗脱液用氮气吹干，加100 μL水复溶，加入400 μL体积分数为6%的三氟乙酸-乙腈溶液和400 μL 5 mg/mL 2，4-二硝基苯肼-乙腈溶液，涡旋混匀，70℃衍生化1h，取出，冰浴2 min，加入100 μL丙酮，混匀后于70℃加热10 min终止反应，冷却至室温，过0.22 μm滤膜，进行HPLC测定.1.6 检测林可霉素和大观霉素的色谱条件1.6.1 检测林可霉素的高效液相色谱-串联质谱条件液相色谱条件：色谱柱：Hypersil GOLD C18(5 μm，150 mm×2.1 mm);流速：0.25 mL/min;柱温：35℃;进样量：5.00 μL;流动相：A为体积分数0.1%的甲酸水溶液，B为乙腈;洗脱梯度：流动相B的比例在1.5 min内由4%线性提高到85%，然后保持4 min，再在0.5 min内降至4%，柱平衡时间6 min.质谱条件：ESI+离子化模式;雾化气压力(GS1)：344 kPa;辅助气压力(GS2)：241 kPa;气帘气压力(CUR)：68 kPa;喷雾电压(IS)：5 500 V;离子源温度：650℃.1.6.2 检测大观霉素的高效液相色谱条件检测器：紫外检测器，检测波长500 nm;色谱柱：Hypersil BDS C18柱(5 μm，4.6 mm×250 mm);流动相：乙腈-四氢呋喃-水(体积比30∶35∶35);流速为1 mL/min;柱温30℃;进样量：50 μL.2.1 方法学考察在本试验色谱条件下，林可霉素和大观霉素与组织中其他组分分离良好，色谱峰峰形较佳，林可霉素在猪肌肉、肝脏、肾脏、脂肪中的检测限为3 μg/kg，定量限为10 μg/kg，保留时间6.5 min左右，大观霉素在各组织中的检测限均为50μg/kg，定量限为100 μg/kg，保留时间8.2 min左右.林可霉素在猪不同组织中的线性范围为1～200 ng/mL，大观霉素在猪不同组织中的线性范围为0.1～10μg/g，相关系数均在0.99以上，线性关系良好.林可霉素在猪不同组织中的回收率为70.00%～106.20%，批内变异系数为3.57%～11.18%，批间变异系数为4.13%～10.42%.大观霉素在猪不同组织中的回收率为85.64%～99.38%，批内变异系数为3.12%～6.17%，批间变异系数为4.09%～7.19%.2.2 组织中药物残留将冷冻保存组织样品自然解冻，依据上述建立的方法，对试验组猪在不同屠宰时间点采集的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪及注射位点5种组织进行测定，以测得的组织样品药物峰面积代入标准曲线计算出药物残留量.结果见表1.2.3 数据处理我国农业部规定的林可霉素在猪组织中的最高残留限量为肌肉、脂肪100 μg/kg，肝脏500 μg/kg，肾脏1 500 μg/kg;大观霉素在猪组织中的最高残留限量为肌肉500 μg/kg，脂肪、肝脏2 000 μg/kg，肾脏5 000 μg/kg.经WT1.4休药期软件处理药物浓度-时间数据，计算得到林可霉素在各组织的休药期分别为：肌肉24 h、肝脏24 h、肾脏61.69 h、注射位点为42.26 h、脂肪24 h;大观霉素在猪各组织的休药期分别为：肌肉34.61 h、肝脏54.44 h、肾脏176.62 h、注射位点为67.58 h、脂肪8 h.根据农业部规定的最高残留限量标准及上述分析结果，可知该制剂以15 mg/kg肌注(每天1次，连用5 d)时在猪体内的休药期为8 d.3.1 检测方法先前报道的关于大观霉素的检测方法有高效液相色谱-电化学检测法［3-5］，高效液相色谱-安培检测法［6］，高效液相色谱-柱前/柱后衍生化法，薄层色谱分析法/密度测定法［7］，以及气相色谱分析法［8-10］.本研究中，大观霉素的检测采用的是高效液相色谱柱前衍生化法，选取2，4-二硝基苯肼作为衍生化试剂，该试剂可与大观霉素的羰基反应生成苯腙化合物二硝基苯肼-大观霉素［11］，衍生过程及衍生产物均比较稳定.反应需在酸性条件下进行，故用三氟乙酸控制反应过程中的酸性条件.已报道三氟乙酸-乙腈溶液的体积分数有3%［12］和6%［11］，通过比较发现体积分数为6%的三氟乙酸-乙腈溶液作为酸性条件控制反应过程时效果较好，因此本研究中大观霉素的衍生化反应采用体积分数为6%的三氟乙酸-乙腈溶液.此外，也有报道采用反相高效液相色谱法测定林可霉素在肾脏、肝脏、肌肉和牛奶中的残留［13］，离子对反相高效液相色谱法测定林可霉素在鲑鱼肌肉和皮肤中的残留［14］，但是这些方法都涉及到繁琐的样品提取及净化程序.Sin 等［13］报道了使用液相色谱电喷雾电离串联质谱法测定林可霉素在动物组织和牛奶中的残留，该方法准确、精确、灵敏，且样品制备过程简单.基于此，本研究依据实验室的实际状况对该方法进行了优化，用于测定林可霉素在猪组织的含量.3.2 残留消除及休药期林可霉素和大观霉素在猪组织中均以肾脏的残留量最高，其次是肝脏、注射位点、肌肉、脂肪，因此，肾脏是该2种药物在猪体内的靶组织.诸多对林可霉素在猪和鸡体内残留和消除规律研究表明，林可霉素在肝脏和肾脏中的残留量最高，其次为肌肉和脂肪;对大观霉素在畜禽体组织残留和消除规律研究表明，大观霉素在肾脏的残留量最高，其次为肝脏，肌肉和脂肪的残留量较低.Hornish等［16］利用原子示踪技术研究了给猪连续3 d饲喂含不同水平林可霉素的饲料，结果表明，林可霉素在肝脏及肾脏中的残留量远高于肌肉和脂肪中，但其消除速度很快.Hornish 等［16］对猪和肉鸡的研究均证明，猪、鸡组织中林可霉素的残留量与饲料中林可霉素的浓度呈强线性相关.因此，在实际应用中，超量添加可导致林可霉素在动物性食品中残留超标.Bergwerff等［17］的研究也证实了肾脏中大观霉素的残留量最高.兽药使用指南规定盐酸林可霉素硫酸大观霉素可溶性粉和预混剂在猪体内的休药期为5 d［18］，但并未对复方注射液作出具体规定.根据农业部规定的林可霉素和大观霉素的最高残留限量和WT1.4休药期软件的计算结果，建议该制剂按猪体质量以15 mg/kg肌注(每天1次，连用5 d)时的休药期为8 d.【相关文献】［1］AIELLO S E.The merck veterinary manual［M］.8th ed.Whitehouse Station(NJ)：Merck Sharp＆Dohme Corp，1998：2032-2033.［2］朱蓓蕾.动物性食品药物残留［M］.上海：上海科学技术出版社，1994.［3］SCHERMERHORN P G，CHU P，KIJAK P J.Determination of spectinomycin residuesin bovine milk using liquid chromatography with electrochemical detection［J］.J Agric Food Chem，1995(43)：2122-2125.［4］ELROD L J，BAUER J F，MESSNER S L.Determination of spectinomycin dihydrochloride by liquid chromatography with electrochemical detection［J］.Pharm Res，1988，5 (10)：664-667.［5］DEBREMAEKER D，ADAMS E，NADAL E，et al.Analysis of spectinomycin by liquid chromatography with pulsed electrochemical detection［J］.J Chromatogr A，2002，953 (1/2)：123-132.［6］PHILLIPS J G，SIMMONDS C.Determination of spectinomycin using cation-exchange chromatography with pulsed amperometric detection［J］.J Chromatogr A，1994，675 (1/2)：123-128.［7］KRZEK J，KWIECIEN A，STAREK M，et al.Identification and determination of oxytetracycline，tiamulin，lincomycin，and spectinomycin in veterinary preparations by thin-layer chromatography/densitometry［J］.J AOAC Int，2000，83(6)：1502-1506. ［8］HOEBUS J，YUN Liming，HOOGMARTENS J.An improved gas chromatographic assay for spectinomycin hydrochloride［J］.Chromatographia，1994，39(1/2)：71-73. ［9］陶燕飞，于刚，陈冬梅，等.动物可食性组织中林可霉素和大观霉素残留检测方法：气相色谱法［J］.中国农业科技导报，2008，10(S2)：63-68.［10］TAO Yanfei，CHEN Dongmei，YU Gang，et al.Simultaneous determination of lincomycin and spectinomycin residues in animal tissues by gas chromatography-nitrogen phosphorus detection and gas chromatography-mass spectrometry with accelerated solvent extraction［J］.Food Addit Contam：Part A：Chem Anal Control Expo Risk Assess，2011，28(2)：145-154.［11］金燕华.大观霉素分析检测方法的比较与壮观链霉菌原生质体的制备［D］.杭州：浙江工业大学，2008.［12］BURTON S D，HUTCHINS J E，FREDERICKSEN T L，et al.High-performance liquid chromatographoc method for the determination of spectinomycin in turkey plasma［J］.J Chromatogr B：BiomedSci Applications，1991，571 (1/2)：209-216.［13］MOATS W A.Determination of lincomycin in milk and tissues by reversed-phase liquid chromatography［J］.J Agric Food Chem，1991，39(10)：1812-1816.［14］LUO Wenhong，YIN Binzhi，ANG C Y W，et al.Determination of lincomycin residues in salmon tissues by gas chromatography with nitrogen-phosphorus detection ［J］.J Chromatogr B：Biomed Appl，1996，687(2)：405-411.［15］SIN D W，WONG Y C，IP A C.Quantitative analysis of lincomycin in animal tissues and bovine milk by liquid chromatography electrospray ionization tandem massspectrometry［J］.J Pharm Biomed Anal，2004，34(3)：651-659.［16］HORNISH R E，GOSLINE R E，NAPPIER J parative metabolism of lincomycin in the swine，chicken，and rat［J］.Drug Metab Rev，1987，18(2/3)：177-214.［17］BERGWERFF A A，SCHERPENISSE P，HAAGSMA N.HPLC determination of residues of spectinomycin in various tissue types from husbandry animals［J］.Analyst，1998，123(10)：2139-2144.［18］中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典：兽药使用指南：化学药品卷［M］.2010版.北京：中国农业出版社，2011：63-64.。
HPLC法测定两种剂型的盐酸克林霉素
HPLC法测定两种剂型的盐酸克林霉素周武杰;徐凤;曹屹【摘要】目的:采用高效液相色谱法测定盐酸克林霉素的含量.方法:色谱柱为Alltiam-C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为磷酸二氢钾溶液∶乙腈(55∶45),检测波长为210 nm,流速为1.0 mL/min,进样量为10 μL.结果:盐酸克林霉素浓度在4~10 mg/L范围内时与峰面积呈良好的线性关系,A=637 62c,r=0.998 2(n=7).结论:本方法准确可靠,可用于盐酸克林霉素干冻粉针剂和胶囊的质量控制.【期刊名称】《包头医学院学报》【年(卷),期】2011(027)003【总页数】2页(P24-25)【关键词】高效液相色谱;盐酸克林霉素;干冻粉针剂;胶囊【作者】周武杰;徐凤;曹屹【作者单位】内蒙古医学院第三附属医院,内蒙古,包头,014010;内蒙古医学院第三附属医院,内蒙古,包头,014010;内蒙古医学院第三附属医院,内蒙古,包头,014010【正文语种】中文盐酸克林霉素为林可霉素的衍生物，对各种厌氧菌作用突出。
且盐酸克林霉素是克林霉素磷酸酯和盐酸克林霉素棕榈酸酯的合成原料，三种均被临床广泛应用，因此，对其进行质量控制非常重要。
盐酸克林霉素的分析检测，一般均采用高效液相色谱法(HPLC)［1－3］，本研究按照中国药典［4］所提供的HPLC法，对盐酸克林霉素干冻粉针剂和胶囊进行了分析检测。
1 材料与方法1.1 仪器与材料高效液相色谱仪(Alltiam色谱柱，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;规格:5 μm，250 mm×4.6 mm);盐酸克林霉素对照品(中国药品生物制品检定所，含克林霉素87.2%);乙腈(色谱纯，天津市光复精细化工研究所);磷酸二氢钾(分析纯，中国医药集团上海化学试剂公司);盐酸克林霉素冻干粉针剂(0804114，海南利能泰制药有限公司，规格以克林霉素计0.6 g);盐酸克林霉素胶囊(090301，安徽仁和药业有限公司，规格以克林霉素计0.15 g/粒)。
林可霉素-大观霉素复方混悬注射液中有效成分含量的HPLC法测定
林可霉素-大观霉素复方混悬注射液中有效成分含量的HPLC法测定王忠;王立琦;刘小琴;范惠敏;黄显会;曾振灵【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2011(032)009【摘要】建立了测定林可霉素-大观霉素复方油混悬注射液中盐酸林可霉素与盐酸大观霉素含量的高效液相色谱(HPLC)方法.采用C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),检测林可霉素的流动相为0.05mol/L硼砂溶液(用850 mL/L磷酸调节pH至5.0)-甲醇-乙腈(60∶36∶4),检测波长为214 nm；检测大现霉素的流动相为乙腈-四氢呋喃-水(30∶35∶35),检测波长为415 nm.结果表明,在10μg/mL～40μg/mL 浓度范围内,林可霉素和大观霉素均呈良好线性关系,二者平均回收率分别为98.68％和99.10％,平均批内变异系数分别为0.93％和0.86％,批间变异系数分别为1.68％和0.98％.本方法操作简便、准确,可用于林可霉素-大观霉素复方油混悬注射液含量的测定.【总页数】5页(P58-62)【作者】王忠;王立琦;刘小琴;范惠敏;黄显会;曾振灵【作者单位】华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642【正文语种】中文【中图分类】S859.7【相关文献】1.盐酸林可霉素-硫酸大观霉素混悬注射液在猪体内的药动学研究 [J], 范惠敏;王忠;王立琦;叶严锋;黄显会;曾振灵2.RP-HPLC法测定头孢噻呋混悬注射液含量 [J], 昌莉丽;张春辉;肖传斌;兰尊海3.HPLC法测定复方盐酸林可霉素滴鼻剂中盐酸林可霉素和利巴韦林 [J], 秦黎明;李启彬4.HPLC法测定复方盐酸林可霉素凝胶中盐酸林可霉素的含量 [J], 周小红;黄巧玲5.HPLC法测定复方盐酸林可霉素滴鼻剂中盐酸林可霉素和利巴韦林 [J], 秦黎明; 李启彬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定复方克林霉素磷酸酯溶液中主药的含量
HPLC法测定复方克林霉素磷酸酯溶液中主药的含量
罗东;王章阳;夏培元;代青;冉光炳;彭蓓
【期刊名称】《第三军医大学学报》
【年(卷),期】2003(25)23
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定复方克林霉素磷酸酯溶液中克林霉素磷
酸酯含量和同时测定甲硝唑、水杨酸的含量。
方法克林霉素磷酸酯紫外检测波长为 2 10nm ,流动相为磷酸二氢钾—乙腈( 75∶2 5 ) ;甲硝唑、水杨酸的紫外检测
波长为 2 90nm ,流动相为磷酸二氢钾—乙腈( 80∶2 0 )。
结果克林霉素磷酸酯、甲硝唑和水杨酸的平均回收率分别为 10 0 2 5 %、10 1 2 2 %、10 0 90 %,RSD
分别为 2 3 4%、1 3 4%、1 0 4%。
结论本方法简单易行 ,快速准确。
【总页数】3页(P2135-2137)
【关键词】HPLC;克林霉素磷酸酯;甲硝唑;水杨酸
【作者】罗东;王章阳;夏培元;代青;冉光炳;彭蓓
【作者单位】第三军医大学附属西南医院药学部;沙坪坝区人民医院药剂科
【正文语种】中文
【中图分类】R917;R927.2
【相关文献】
1.RP-HPLC法测定复方外用消毒溶液中主药的含量 [J], 谈芳;蒋锋
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变异 系数 分别 为 ０ ９ 和 Ｏ ８ ， 间变异 系数 分别 为 １ ６ ％和 Ｏ ９ ％。本 方 法操 作 简便 、 确 ， ．３ ．６ 批 ．８ ．８ 准 可用 于
林 可霉素一 大观 霉素 复方油 混悬 注射 液含 量 的测定 。
关键词 ： 林可霉素一 大观霉素复方油混悬注射液 ； 盐酸林可霉素 ； 大观霉素； 盐酸 高效液相 色谱 法； 含量测定
液相 色 谱 仪 ； ｉｎ ｘＵ－０ ｏ紫 外 检 测 器 ，ｈ ｏ — Ｄ ｏ ｅ ３ ｏ ｃ ｒｍｅ
பைடு நூலகம்
方， 二者 配伍 有协 同作 用 ， 仔 猪 腹 泻 、 的支 原 体 ｌｏ 谱工作 站 ， 对 猪 ｅ ｎ色 为美 国 Ｄ ｏ ｅ 司产品 。 ｉｎ ｘ公 １ １ ２药 品 盐 酸 林 可霉 素对 照 品 ， 量 ８ ． ％ ， ．． 含 ７９ 的复方剂 型有 预混剂 与可溶 性 粉［ 。笔 者研制 的 盐 批 号 ： ０ ｏ ７ ８ 大观霉 素精 制 品 ， ２ ］ ｋ １０ ０ ； 含量 ９ ％， 号 ： ９ 批 酸 林可霉 素一 酸 大观 霉 素 油 混 悬 注 射 液 振摇 易分 ￥ ０ ７ Ｓｇ 公 司分 装 。２ ４二硝 基苯胼 （ ＮＰ 、 盐 ９ ０ ， ｉｍａ ，一 Ｄ Ｈ） 散， 各项质 量 指 标 符合 药 剂 学 要 求 。 中 国兽 药典 三 氟 乙酸 （ Ｆ 为化 学 纯 ， ］ Ｔ Ａ） 乙腈 、 甲醇 、 四氢 呋哺 均 与 美 国药典 ［检测 林可霉 素均 采用 高 效液 相 色谱法 为色 谱纯 。 ４ ３ 。 （ Ｌ 。大观霉 素极 性 强 ， 发 色集 团 ， 外 最大 １ ２ 方 法 ＨＰ Ｃ） 无 紫 ． ’ 吸 收波长 在 １ ０ｎ 附近 ， 于末 端 吸 收 区， 量分 １ ２ １对照 品溶液 的制备 准 确称 取 盐酸林 可 霉索 ９ ｍ 属 含 ．． 析 较为 困难［ 。 目前 ， 观霉 素 含 量 的测 定 有微 生 对 照 品适量 ， 水定 容 ， 到 １ｍｇ ｍＬ的标 准储 备 ５ ］ 大 加 得 ／ 物 法 、 相色谱法 、 气 薄层 色 谱法 嘲 、 高效 液 相色 液 。准确称 取大 观霉素精 制品适 量 ， 水定 容 ， 到 加 得 谱一 电化 学检测法 （ Ｌ － Ｃ ） ］ 高效 液 相色谱一 １ｍｇ ｍＬ的标 准液 ， ＨＰ Ｃ Ｅ Ｄ ［ 、 ／ 现配现用
王 忠 ， 立 琦 ， 小琴 ， 王 刘 范惠 敏 ， 显会 ， 黄 曾振 灵
（ 南 农业 大学 兽 医学 院 ， 东 广 州 ５ ０ ４ ） 华 广 １ ６ ２
摘
要： 建立 了测定林 可霉 素一 大观霉 素复方 油混 悬注射 液 中盐酸 林 可霉 素与 盐酸 大观霉 素含 量 的高效
液相 色谱 （ Ｌ 方 法 。采 用 Ｃ ８色谱 柱 （ ．６ｍｍ ×２ ０ ｍｍ， ｍ） 检 测 林 可 霉 素 的 流 动 相 为 Ｏ Ｏ ＨＰ Ｃ） １ ４ ５ ５ ， ．５ ｍｏ／ 硼 砂 溶液（ ８ ０ｍＬ Ｌ磷 酸 调节 ｐ 至 ５ ｏ － ｌＬ 用 ５ ／ Ｈ ． ） 甲醇一 乙腈 （ ０： ６： ） 检测 波长为 ２ ４ｎ 检 测 大观 ６ ３ ４， １ ｍ； 霉素的 流动相 为 乙腈一 氢呋喃一 （０： ５： ５ ， 测 波长 为 ４ ５ｎ 四 水 ３ ３ ３ ）检 １ ｍ。结 果表 明 ， １ ｌ ｍＬ －４￣ ／ 在 ０｜ － ０ ｇ ｍＬ － 浓度 范围 内， 可霉素 和大观 霉素 均呈 良好线性 关 系， 者平均 回 收率分 别为 ９ ． ８ 和 ９ ． Ｏ ， 林 二 ８６ ９ １ 平均批 内
动 物 医 学 进 展 ，０ １ ３ （ ） ５ —２ ２ １ ， ２ ９ ：８６
Ｐｒ ｇ ｅ ｓ ｉ ｅ ｅ ｉ ａ ｙ Ｍ ｅ ｉ ｉ ｅ ｏ ｒ ｓ ｎ Ｖ ｔ ｒｎ ｒ ｄｃｎ
林 可 霉 素一 观 霉 素 复 方 混悬 注 射 液 中 大 有 效 成 分 含 量 的 ＨＰ Ｃ法测 定 Ｌ
中 图 分 类号 ：８ ９ ７ ￥ ５ ． 文 献 标 识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ７ ３ （ ０ １ ０ —０ ８０ ｉ ０ ￣０ ８ ２ １ ） ９０ ５ － ５
林 可 霉素 与 大 观 霉 素 合 用 为 兽 医 临 床 常 用 复 肺 炎和 鸡慢性 呼吸道 病具 有很 好 的疗效 ［ 。其 现 有 １ ］
杂 。本文采 用 ＨＰ Ｃ法 对 林 可 霉 素一 观霉 素 复 方 过滤 ， 行 ＨＬ Ｃ检 测 ； Ｌ 大 进 Ｐ 大观 霉 素样 品稀 释 适 当倍 混悬 注射 液 中林 可 霉 素 和 大 观 霉 素 的 含 量 进 行 测 数后 取 ０ １ ． ５ｍＬ进行 衍生化 处理 。
定 ， 之微 生物法 和 气 相 色谱 法 简 单 、 济 ， 较 经 为此 复 １ ２ ３ 大观 霉素 的衍 生化 大 观 霉素 衍 生化 参照 ． ．
蒸发 光 散 射 检 测 法 （ Ｌ ＿ Ｌ Ｄ）１ ２、 效 液 相 ＨＰ Ｃ Ｅ Ｓ ［－］ 高 １ １ 色谱 荧光法Ⅱ 高效 液 相 色谱一 、 串联 质 谱 法［ Ｍ ， １ ］ 这 １ ２ ２ 供试 品 溶液的 制备 ．． 精 密 量取林 可霉 素一 大 观霉 素复方 混 悬注 射液 １ｍＬ， 加入 １ ＯｍＬ超 纯水 ， 些方法 或者 缺乏特 异性 ， 者对 仪器 要 求较 高 ， 于 涡旋 ， 或 对 振荡 ， 然后 ５０ ０ｒ ｍｉ ０ ／ ｎ离心 １ ｎ 林 可霉素 ０ｍｉ ， 普通 的药物 制剂 含 量 的测 定 而 言 ， 本 较 高或 较 复 样品取 水相 用超 纯 水 稀 释适 当倍 数 ，． ２ ｍ 滤膜 成 ０ ２