一株拮抗放线菌的分类鉴定与发酵条件优化试验

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山东畜牧兽医2011年总目录(总第168-179期)

试验研究肌注ＰＨＡ对猪血清中补体Ｃ、４３Ｃ的影响…………… （— ）１１高效优质肉兔配套系杂交效果分析 ………………… （）卜５
一
鸡源性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验…………… （－）７９无角陶赛特杂交藏系羊的效果分析 ……………… （－０７１）Ｂ胡萝卜一素对母猪繁殖性能的影响 ……………… （－２７１）
禽流感灭活疫苗（９不同注射部位免疫Ｈ）效果的比较 ………………………………………… （０８１— ）
不同离心条件对犬精液冷冻保存质量的影响 …… （卜１１）肉鸡发酵床几个垫料指标的变化规律 …………… （卜３１）中药普朗头孢制剂治疗奶牛乳房炎效果试验 …… （卜４１）
同源建模研究 ……………………………………… （２３１— ）乳与乳制品中真假蛋白质的测定 ………………… （２５１— ）栀子提取物ｚ对大鼠血清生化指标的影响 ……… （２７Ｇ１－）４种生态制剂与其它药物的养鸡效果对比试验…… （２８１— ）无角陶赛特羊与青海半细毛羊杂交后代羊毛品质分析 … … … … … … … … … … … … … … … （２１）１ — ０畜牧生产
一
株犬细小病毒的分离及ＶＰ基因序列分析 ……… （）２卜６
猪多种疫苗分点同时注射的免疫抗体检测试验 … …… …… … … … … … … … … … … … … … （）卜９会东黑山羊羊肉氨基酸、重金属、药残分析 ……… （１卜１）高效优质肉兔配套系选育初报……………………… （－）２１

黄瓜灰霉病拮抗放线菌7-16的筛选及发酵条件优化

放线菌产生的抗生素及其次生代谢产物在植物病害防治中具有重要的作用。在目前已发现的１００多种微生物来源０
７０培养基３淀粉５０、生饼粉２５、母粉００％、．；：．％花．％酵．８葡萄糖００％、ＮＯ．８、ａＯ．２、ａ１．２（Ｈ）Ｓ００％ＣＣ３０３％ＮＣ
一
１４一１
江苏农业科学
２１０１年第３９卷第４期
关丽杰，国梁，谭杨迪，等．黄瓜灰霉病拮抗放线菌７—１６的筛选及发酵条件优化［］Ｊ．江苏农业科学，０１３（：１２１，９４）１４—１６１
黄瓜灰霉病拮抗放线菌７一ｌ６的筛选及发酵条件优化
分别调至３０、．５０６０、．、．、．，最佳发酵温度．４０、．、．７０８０９０在
基。（）酵时问对抑菌活性的影响：基础培养基ｐ值凋１发将Ｈ
为７０装样量为４（５Ｌ三角瓶）２１０ｒｍｎ分．，０ｍＬ２０ｍ，８ｏ５ｉＣ、／别发酵培养２３４、、７、ｄ生物测定确定最佳发酵时间。、、５６、８，（）酵温度对抑菌活性的影响：基础培养基ｐ值调为２发将Ｈ７０装样量为４Ｌ２０ｍＬ三角瓶）分别于２、４２、２．，０ｍ（５，０２、８３、３、０℃温度下培养，５ｍｎ发酵４ｄ，物测定确定最６４１０ｒｉ／后生佳发酵温度。（）始ｐ对抑菌活性的影响：装样量为３初Ｈ在４Ｌ２０ｍ０ｍ（５Ｌ三角瓶）条件下，基础培养基初始ｐ值的将Ｈ

产耐高温纤维素酶放线菌的筛选与鉴定及菌株发酵条件优化开题报告

产耐高温纤维素酶放线菌的筛选与鉴定及菌株发酵条件优化开题报告1.选题的背景和意义纤维素是植物细胞壁的主要构成成分，是一种难以降解的高分子物质，具有广泛的应用前景。

产耐高温纤维素酶的微生物可以在高温条件下分解纤维素，实现高效的纤维素降解，具有在生物质能源利用、造纸工业和食品加工等领域的重要应用价值。

因此，筛选和鉴定产耐高温纤维素酶的微生物菌株，优化其发酵条件，对于探究高效纤维素降解机制、开发高效生物质能源利用技术具有重要意义。

2.研究的目的和内容本研究的目的是通过对产耐高温纤维素酶的微生物菌株进行筛选和鉴定，分析其酶学特性，并通过优化发酵条件提高产酶量和酶活力。

具体内容包括：（1）从野外土壤或其他资源中筛选能够产生耐高温纤维素酶的放线菌。

（2）对筛选得到的菌株进行鉴定和分类，确定其真菌属及种类。

（3）分析所筛选菌株纤维素酶的酶学特性，如酶活力、热稳定性、pH稳定性等。

（4）采用单因素试验和响应曲面法等方法，优化所选菌株的发酵条件，提高酶产量和酶活力。

3.研究的方法和步骤（1）菌株筛选和鉴定：采用土样平板法、色谱法或PCR技术等方法筛选获得产耐高温纤维素酶的放线菌菌株，并通过形态学、生理生化和分子生物学分析，确定其真菌属及种类。

（2）酶学特性测定：通过基于联合胆囊素法的改进波动消光法或滴定法等方法，测定筛选菌株生产的耐高温纤维素酶的酶活力及其温度、pH值等影响因素。

（3）发酵条件优化：采用单因素试验和响应曲面法等方法，优化所选菌株的发酵条件，包括发酵温度、发酵时间、碳源和氮源等条件，提高酶产量和酶活力。

4.预期结果和意义本研究预期可以筛选出产耐高温纤维素酶的放线菌菌株，并确定菌株的酶学特性和最适发酵条件，从而建立一套有效的高效纤维素降解与利用技术，为生物质能源的可持续利用和开发提供具有参考价值的理论基础和实际应用技术。

放线菌的分离与筛选方法

放线菌的分离与筛选方法放线菌介于细菌和丝状真菌的一类丝状原核生物，多为腐生，少数寄生。

腐生型在自然界物质循环中起着重要作用。

放线菌突出特性产生抗菌素，常以孢子或菌丝状态存在，以土壤最多，常存在肥土农田土中性或偏碱性土壤中。

1.拮抗放线菌的筛选方法：1.1平板划线法：待测菌株与检测病原菌通用培养基制成平板，在平板中央划线接种待测菌株，28-30℃ 3-5d，将病原菌垂直方向划线于待测菌生长线的两侧，不能与待测菌相连，在37℃ 24h取出观察。

如果待测菌株对病原菌有抑制活性，病原菌靠近待测菌的一端生长会受到待测菌抑制产生抑菌带。

可根据抑菌带的长短来判断待测菌活性强弱。

选择抑制活性强的复筛。

1.2抑菌圈法或十字交叉法：常用的初筛方法将待测菌接种于平板，长出成熟菌落后，用打孔器将供试病原菌苔打成直径5-6mm小菌块，并将其移入到病原菌平板培养基中，将待测菌与病原菌呈十字交叉排列，即病原菌在中央，待测菌置于病原菌的四周，培养3-4d。

若有抑菌活性在待测菌周围形成一个没有生长病原菌抑菌圈。

若菌块厚度大小一致的，抑菌圈的大小可直观反应待测菌抑菌活性的强弱。

1.3纸片法或生长速率法：主要测定发酵液的抑菌活性，即将相同灭菌后的圆形滤纸片放于待测发酵液中，取出并黏贴在接种有病原菌的平板培养基，培养后观察有无抑菌圈或抑菌圈的大小。

2.放线菌分离与筛选.2.1培养基；2.1.1改良高1号：可溶性淀粉20g/L KH2PO40.5g/L NaC10.5g/L MgSO40.2-0.5g/L KNO3 1g/L FeSO40.01g/L 重铬酸钾（3%）3.3mL/L PH7.2-7.4（分离保存用）每100ml培养基加入1ml0.1℅的FeSO4溶液。

2.1.2淀粉培养基和秸秆腐解物培养基2.1.3拮抗试验培养基：高1号牛蛋 PDA改良培养基加3g牛肉膏2.2抑菌剂的选择：有效降低细菌真菌的数量，细菌扩散真菌蔓延速度迅速。

一株广谱拮抗放线菌的分离鉴定

第３卷第６期２
、ｏ．３，１２
临沂师范学院学报
ＪｕｎｌｆｎｉｒｌｉｅｓｔｏｒａｙｏＬｉＮｏｍａＵｎｖｒｉｙ
２１年１００２月
Ｄｅ．２０ｃＯ１
ＮＯ６．
一
株广谱拮抗放线菌的分离鉴定
ｍｉ，经０２ｍ滤膜过滤，到无菌滤液，ｎ再．５¨ 得利用杯碟法测定发酵液的抑菌活性．个牛津杯中加入每１０无菌滤液，０４℃ 过夜后，８℃培养７ｈ后用十字交叉法测量抑菌圈直径，以未接种培养基上清２２液作为空白对照，处理进行３次平行测定．每
察抑菌圈情况，最终筛选出具有广谱抗菌活性的放线菌１株．２菌
１．２培养基
马铃薯块培养基、高氏合成ｌ号琼脂培养基、氏琼脂培养基、氏合成１培养基、萄糖天察克号葡
门冬素琼脂培养基、淀粉琼脂培养基、明胶液化培养基、牛奶凝固胨化培养基、淀粉水解琼脂培养基、维素上生长培养基、源利用培养基，Ｄ纤碳ＰＡ培养基．见文献［】５．１．感菌株３敏一用于抑菌试验的敏感菌株有大肠杆菌（ｓｈｒｈｌ、黄色葡萄球菌（ｔｈｌｃｃｕａｒｕ）Ｅｃｅｉｉｃｉ金ｃａｏ）Ｓａｙｏｏｃｓｕｅｓ、ｐ黑曲霉（ｓｅｉｕｎｇｒ、Ａｐｒｌｓｉ）桔青霉（ｅｉｌｕｉｉｍ）高大毛霉（ｃｒｕｅｏ和黄曲霉（ｓｅｉｕｇｌｅＰｎｉｉｍｃｒｕ、ｃｌｔｎＭｕｏｍｃｄ）Ａｐｒｌｓｇｌｌｕ）ｆｖｓ，均为本实验室保藏菌种．ａ

一株辣椒内生拮抗细菌的筛选及初步鉴定

一株辣椒内生拮抗细菌的筛选及初步鉴定蔡长平;黄军;曾艳;毕世宇;黄彬彬;郭照辉;刘清术【期刊名称】《湖南农业科学》【年(卷),期】2018(000)007【摘要】从多年连作重茬的辣椒地采集健康植株,表面消毒后从根系中分离到1株内生拮抗细菌PEB-99,该菌株抗菌谱较广,对辣椒青枯雷尔氏菌、辣椒疫霉菌、辣椒炭疽病菌、辣椒镰刀枯萎病菌都有显著抑制效果,无菌发酵液亦具有抑制细菌和真菌的活性,通过16S rDNA测序对该菌株进行了鉴定,初步认为PEB-99菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),该菌能产生铁载体、吲哚-3-乙酸(IAA),还具有溶解有机磷的能力,显示了很好的抗病促生长潜力.【总页数】4页(P1-4)【作者】蔡长平;黄军;曾艳;毕世宇;黄彬彬;郭照辉;刘清术【作者单位】湖南省微生物研究院,湖南长沙 410009;湖南省微生物研究院,湖南长沙 410009;湖南省微生物研究院,湖南长沙 410009;湖南省微生物研究院,湖南长沙410009;湖南省微生物研究院,湖南长沙 410009;湖南省微生物研究院,湖南长沙410009;湖南省微生物研究院,湖南长沙 410009【正文语种】中文【中图分类】S476【相关文献】1.一株辣椒青枯病菌拮抗内生细菌的筛选鉴定与发酵条件优化 [J], 王玲;刘二明;周鑫钰;任佐华;陈娟芳2.辣椒内生菌拮抗细菌的筛选 [J], 黎起秦;卢继英;林纬;陈永宁;卢亭君;谢义灵;韦文亮3.辣椒根腐病内生拮抗细菌筛选及菌株Hj33-7的鉴定和抗菌活性 [J], 祁之秋;李兴海;王英姿;谷祖敏;纪明山4.烟草内生青枯病拮抗细菌的筛选和初步鉴定 [J], 彭细桥;刘红艳;罗宽;邓正平5.一株辣椒内生拮抗放线菌的筛选及初步鉴定 [J], 黄军;曾艳;蔡长平;毕世宇;黄彬彬;郭照辉;刘清术因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

缙云山土壤拮抗放线菌的分离、筛选与发酵条件优化

ｊ一２ｈｗｄｔｅｉｈｂｔｎｒｔｂｔｅｎ４．ｔ５７％．ＴｈｐｉｌｅｍｅｔｔｎｃｎｉＹ２ｓｏｅｈｉｉｏａｅｅｗｅ１９ｎｉｏ７．ｅｏｔｒｎａｉｏｄｍａｆｏ —
ｔｎｏｎｉａｔｒａｕｓａｃｒｄｃｉｎｏＹ一２ｒＨｅｎａｕａ．２ ℃ ｉｅｓｅ — ｉｓｆｒａｔｂｃｅｉｌｂｔｎｅｐｏｕｔｏｆｏｓｊ２ｗｅｅｐｂｉｇｎｔｒ１８ｎｙａｔｐｐ
小麦纹枯病菌、橘疮痂病菌、云纹叶枯病菌和柑橘青霉病菌都具有较强的拮抗作用，茵率达柑茶抑
４．％～７．。通过单因子和正交试验对拮抗放线茵Ｊ２１９５７Ｙ一２进行发酵条件的研究，结果表明，其
最佳培养基组成和培养条件为：０ｍＬ培养基中含葡萄糖２０、１００．玉米粉１５、．黄豆粉３０、．
ｎｒａａｌｅｎａｅ，Ｂｉｌｉｙｄｉａｉｔｒｔｐｏａｒｓｍａｓ，Ｆｕｓｉｍｘｙｓｒｍ，Ｃｅａｏａｉｕｃｒｇｅｕ，Ｓｐｈａｅａｒｕｏｐｏｕｒｔｂｓｄｉｍｏｎｉｒｍｃ—
ｌｍａｆｅｅｔ，ＣｏｌｔｔｉｈｍａｌａａｄＰｅｉｉｌｕｉａｉｕ．Ｔｈｅｕｔｎｉａｅｈｔｏｗｃｔｉｌｅｏｒｃｕｃｍｅｉｅｎｎｃｌｉｍｔｌｃｍｅｒｓｌｓｉｄｃｔｄｔａ
２１００年第８期

拮抗放线菌ZZ-9菌株发酵液的抑菌谱及稳定性测定

拮抗放线菌ZZ-9菌株发酵液的抑菌谱及稳定性测定范万泽;薛应钰;张树武;徐秉良【摘要】为探究拮抗放线菌ZZ-9(Streptomyces rochei)菌株发酵液的抑菌谱,并明确传代培养、温度、光照、pH及紫外线等理化因素对发酵液稳定性的影响.以15种植物病原真菌为供试菌,采用菌丝生长速率法测定发酵液的抑菌谱,并以苹果树腐烂病菌(Cytospora sp.)为指示菌,测定不同条件下发酵液的稳定性.抑菌谱结果表明:ZZ-9菌株发酵液对供试的15种病原真菌均具有不同程度的抑制作用,其中对苹果树腐烂病菌和立枯丝核菌抑制效果最好,生长抑制率可达96％以上,且效果持久;而对苹果轮纹病菌、蚕豆褐斑病菌、月季叶霉病菌等抑制效果较差,抑制率在27％以下.稳定性试验结果表明:菌株传接6代时,活性稳定,从第7代开始菌株活性下降显著;发酵液耐高温,对强酸强碱处理、可见光及紫外线照射均有较好的稳定性;且在4℃及室温(20～25℃)下可贮藏至少30 d而保持其抑菌活性几乎不变.因此,拮抗放线菌ZZ-9菌株次生代谢产物具有较广谱的抑菌活性和较强的稳定性,具有开发成微生物农药的潜力.%To study bacteriostatic spectrum of fermentation broth from actinomycetes strain ZZ-9 identified as Streptomyces rochei,and to verify the effect of it on stability of fermentation broth under biochemical and physical factors such as subculture,temperature,illumination,pH and ultraviolet conditions.As the tested phytopathogen,method of growth rate was used to determine antimicrobial spectrum of fermentation broth with 15 kinds of plant pathogenic fungus.With Cytospora sp.as indicator phytopathogen,the stability of fermentation broth under different conditions was measured.The bacteriostatic spectrum results showed that the fermentation broth of ZZ-9 strain had inhibitory effects at differentdegres on 15 kinds of pathogenic fungus.With growth inhibition rate of more than 96％ and the lasting effect,the fermentation broth of ZZ-9 strain had the best effect on Cytospora sp.and Rhizoctonia solani,and it had worse effect on Botryosphaeria piricola,Cladosporium cladosporioidesv and Ascochyta fabae,the inhibition rate was under 27 ％.The stability test showed that the activity of strain was stable until the 6th generation,it decreased significantly from the 7th generation,and the fermentation broth had high temperature resistance,good stability under strong acid and alkali,visible light and ultraviolet irradiation treatments.Moreover,the fermentation broth could be stored for at least 30 days at 4 ℃ and room temperature (20-25 ℃),the activity remained nearlyunchanged.Therefore,the secondary metabolites of antagonistic actinomycetes ZZ-9 strain had broad-spectrum antibacterial activity and strong stability,and the potential could be developed into the microbial pesticide.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2017(026)003【总页数】8页(P463-470)【关键词】拮抗放线菌;发酵液;抑菌谱;稳定性【作者】范万泽;薛应钰;张树武;徐秉良【作者单位】甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室,兰州730070;甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室,兰州730070;甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室,兰州730070;甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室,兰州730070【正文语种】中文【中图分类】S482.2+92中国是世界上农药和化肥污染最严重的国家之一，化学农药的滥用不仅对生态环境、人类健康产生影响，而且易造成病虫害抗性等问题。

拮抗放线菌F-15的生防作用及其初步分类鉴定

（．宁大学生命科学院动物资源与疫病防治重点实验室，阳１０３；．阳农业大学植物保护学院，阳１０６）１辽沈０６２沈１沈１１１
摘要：从沈阳东陵区蔬菜大棚土壤中分离到ｌ株拮抗放线菌，编号为Ｆ１。采用平板对峙培养法和温室盆栽一５
第４卷第４期８
农药
ＡＧＲ０ＣＨＥ￣ＣＡＬＳ Ⅱ
、０．８Ｎｏ．，１４．４Ａｐ ຫໍສະໝຸດ ０９１２０应用技术
拮抗放线茵Ｆ一１生防作用及其初步分类鉴定５的
朱春玉，李辉ｔ李立梅邹志远孟庆杰刘宏生，，，，
ａａｓ２ｏｅｆｈａｏｅｓＦｓｒｍｏｙｐｒｍａｄＦｌｉｆｌｈｉｏｔｌｆｃｏｒｉＦ１ａｌｇｉｔｎｓｅｔｇｎ，ｕａｉｓｏｕｎｕｖｕｖＴｅｏｎｒｆｔｆｔｎ一５ｔｌｆｎｏｔｐｈｕｘａａｂｃｏｅｅｓａｏｅｍｏｄ
ｏｏａｏｒａｈｅ３＿ｉｒｅｈｏｅ．ｃｄｉｇｔｔｈｒｃｅｉｔｃｆｍｏｈｏｇｃｌｃｌｕｒｌｐｈｉｌｇｉａｎｆｔｍｔｅｃｄ７２％ｎｇｅｎｕｓＡｃｏｒｎｏｈｅｃａａｔｒｓｉｓｏｒｏｌｉａ，ｕｔａ，ｙｓｏｏｃｌａｄｐｂｏｃｅｍｉａ，ｈｅｉａｏｍｐｅｓｏｆｃｌａｌｔｅｓｒｉ１ａｄｅｉｅｓＳｔｅｏｉｈｃｌｃｍｃｌｃｏｎｎｔｅｌｗｌ，ｈｔａｎＦ一５ｗｓｉｎｔｆｄａｒｐｔｍｙｃｓａｕｅｓｉｅｒｕ．

拮抗放线菌CF17发酵条件优化研究

（．ｏｅｅｏｏｅｔ，ｅｔｌｏｔｎｖｒｔ０ｏｅｔｎｅｈｏｇ，ｈｎｓａＨｕａ１０４Ｃｉａ１ＣｌｇＦｒｓｙＣｎｒｕＵｉｅｉｆｒｓｙａｄＴｃｎｌｙＣａｇｈ，ｎｎ４００，ｈｎ；ｌｆｒａＳｈｓｙＦｒｏ
酵培养液，接人种子发酵液的接种量为１％，３０在０℃ 、４・ｎ的条件下振荡培养７ｄ１０ｒｍｉ。关键词：拮抗放线菌Ｃ１；Ｆ７发酵培养基；发酵条件；优化中图分类号：９９１２￥１．３Ｑ３．３；７８８文献标识码：Ａ文章编号：０１３９（０２Ｉ一３５— ５１０ — ８Ｘ２１）Ｍ０５０
・
３６・５
福
建
林
学
院
学
报
第３２卷
膏培养液）Ａ葡萄糖蛋白胨培养液）Ａ（萄糖黄豆粉酵母膏培养液）Ａ（Ｂ培养液）Ａ（Ｐ；３（；４葡；５Ｌ；６ＢＹ培养液）Ａ（；７淀粉铵盐培养液）Ａ（；８葡萄糖天门冬酰氨培养液）Ａ（氏培养液）；９察。用于初始发酵液筛选。
ＫｅｒｓｎａｏｓｉｃｉｏｅｔｓＣＦ７；ｆｒｎａｉｎｍｅｉｅｍｅｔｔｎｃｎｉｏｓｐｍｉａｏｙｗｏｄ：ａｔｎｔａｔｍｙｅｅ１ｇｉｃｎｅｍｅｔｔｄａ；ｆｒｎａｉｏｄｔｎ；ｏｔｚｔｎｏｏｉｉｉ
１材料与方法
１１材料．

一株抗根癌菌的拮抗放线菌菌株的初步鉴定及培养条件研究

根癌病，名根头癌肿病，叫冠瘿病，由根癌又也是
土壤杆菌（ｒｂｃｒｍｔｍｆｃｎ）染引起的一种Ａｇｏａｔｉｅａｉｓ侵ｅｕｕｅ
超过２３的活性物质来自于放线菌的次生代谢物ｌ，／２］如新生霉素、中生菌素、抑霉菌素等，其都具有环境
ｔｅａｉｔｏｐｅ８／ｎ，ｔｅｖｌｍｅｏｕｔｖｔｄｌｕｄｉ５Ｌｃｎｃｂｔｌ０ｍＬ，ｔｅｉｉａＨｈｇｔｉｎｓｅｄ１０ｒｍｉａｈｏｕｆｃｌｉａｅｉｉｎ２０ｍｏｉｏｔｅ４ｑｈｔｌｎｉｐ
ｗｉｎｉｉｏｃｉｉｆｒｂｃｅｉｍｍｅａｉｎｔｉｈｂｔｎａｔｔｏｏａｔｒｕｔｆｃｅｓｈｉｖｙＡｇｕ
ＪＡＯｕｙｎＬＵｈ — ｉＭＡｕｎｐ，ＩＸｉ — ｉｇ，ＩＺｉｎ，ｍＨａ — ｕＺＨＡＮＧＭｅｇｎ
ＡｂｔａｔＡｎｎｔ— ｇｏｂｃｅｉｓｒｃ：ａｉＡｒａｔｒｕｍｔｕｍｅａｉｎｓａａｎｉｔｃａｔｎｏｙｅｅｓｒｅｄｒｍｔｅｏｌｗａｆｃｅｎｔｇｏｓｉｃｉｍｃｔｓｃｅｎｅｆｏｈｓｉｓｉｅｉｉｄｐｒｍｉｉｌｓｓｒｐｔｍｙｅｏｐｈｏｏａｈａａｔｒｓｉｓ，ｃｌｕｒｈａａｔｒｓｉｓ，ｐｄｎｔｆｅｉｔｖｅｙａｔｅｏｃｓｂｙｍｒｌｃｌｃｒｃｅｉｔｃｕｔｅｃｒｃｅｉｔｃｈｙｓｏｏｃｌｉｌｇｉａａｄｂｉｈｅｉａｈｒｃｅｉｔｃｎｄ１６ＤＮＡｅｕｎｃｎｇａｌｚｎｇＡｆｅｅｍｅａｉｎｓｒｅ ‘ ｇ，ｔｐｎｏｃｍｃｌｃａａｔｒｓｉｓａＳｒｓｑｅｉｎａｙｉ．ｔｒｆｒｎｔｔｏｃｅｎｍｈｅｏ — ｔｍａｏｎｔｏｓｔｅｉｉｌｃｄｉｉｎａｈｅｍｄｕｍｓＧａｅｓＮｏ．ｗａｕｓ＇１，ａｄｔｔｍｕｍｅｍｅｔｔｏｏｉｉｎｓｆｒｔｔａｎ：ｎｈｅｏｐｉｆｒｎａｉｎｃｎｄｔｏｏｈｅｓｒｉ

植物病原菌拮抗放线菌的分离筛选与鉴定

Kauffmann等[10]方法，琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统中平板法测定它们对2种植物病原细菌的拮抗作用，其中3株
检测其纯度。以基因组DNA为模板，采用细菌通用引物菌具有抑菌活性，结果(见图1)显示：W04、W01、W2R对水
27F(5'-AGAGTTTGATC CTGGCTCAG-3')和1527R(5'- 稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌都有不同程度的抑
cinerea 、菜豆炭疽病菌Colletotrichum sp.、黄瓜立枯病菌Fusarium solani 、烟草赤星病菌Alternaria alternata 、绿色木霉Trichoderma viride 、番茄叶霉病菌Fulvia falva 、水稻纹枯病菌R h i z o c t o n i a s o l a n i 、水稻白叶枯病菌 Xanthomonas oryzae pv. oryzae 、水稻细菌性条斑病菌 Xanthomonas oryzae pv. oryzicola 、镰刀霉菌Fusaria 、无名假丝酵母Candida famata ，以上均为浙江工业大学微生物实验室保存菌种。
1.2.2 放线菌菌体对植物病菌的拮抗作用
(bootstrap)为1 000次重复。
采用平板对峙法测Βιβλιοθήκη [5] 定放线菌对植物病原真菌的抑
3)培养特征及生理生化特性
菌效果：将培养好的植物病原真菌用打孔器打取直径
在部分培养特征培养平板上划线接种菌株W04，
为5 mm的菌块，然后将其倒置放在PDA平板中央，距中 28 ℃培养7~15 d后观察记录菌落特征[11]，并进行碳源、纤

一株拮抗放线菌GLP-27菌株发酵液抗菌谱及稳定性的研究

将保存的菌种接种于高氏一号平面培养基上，置２ ℃恒温培养箱培养４。将培养好的菌落取出８ｄ放入液体培养液中。转速１０／ｎ２ ℃ 三角瓶发５ｒｍｉ，８酵５ｄ后过滤，发酵液在４Ｃ冰箱中保存备用。￣２基。（）体培养基。小米１ｇ葡萄糖１ｇＣＣ。２液０，０，ａ０２，Ｎａ．ｇ，白胨３，馏水１００ｇ，Ｃ１５，蛋２ｇ蒸０ｍＬ，Ｈｐ
值７２７４１１ａ菌３ｍｉ。．～．， × ０Ｐ灭０ｎ２４发酵液的制备．
２１年７０１月
ＪｕａｏＧｅｃｎｅｎｅｎｌｙｏｒｌｆｒｎＳｅｄｃｏｇｎｅｉｃａＴｈｏ
绦色料技
第７期
一
株拮抗放线茵ＧＰ７菌株发酵液抗茵谱Ｌ一２
及稳定性的研究
侯勇，赵文华
（山职业技术学院，东中山５８０）中广２４４
２５１抑制菌丝生产速率法．．
２材料与方法
２１供试菌株．菌株ＧＬＰ一２７是从山东省鲁东地区采集的土壤中分离得到的一株放线菌。接种于试管斜面培养
取１ｍＬ发酵液与９ｍＬ已融化的Ｐ００ＤＡ培养基混合均匀，倒入无菌的培养皿中制成带药培养基平板。接种直径４ｍｍ的供试病原菌菌饼，处理３每次重复。置２ ℃ 恒温培养，无菌水处理为对照。８以４ｄ后用十字交叉法测量菌落直径，算抑制率ｌ。计＿３］菌丝生长抑制率（）一对照菌落生长直径一处理菌落生长直径ｖ。对照菌落生长直径一菌饼直径一～

葡萄霜霉病菌拮抗放线菌QH94的筛选及鉴定

葡萄霜霉病菌拮抗放线菌QH94的筛选及鉴定蒋欣陶;赵奎华;刘长远;梁春浩;臧超群【摘要】为筛选出葡萄霜霉病菌的拮抗放线菌,对采自辽宁省沈阳、葫芦岛、锦州、鞍山、朝阳等地区葡萄园的23份土样中的放线菌进行分离,并对获得的119株放线菌进行防效评价,得到1株拮抗放线菌菌株QH94,其田间防效可达68.83％～89.80％.采用平板对峙培养法进行抑菌谱的测定,QH94菌株对9种病原菌有抑制作用,其中对稻瘟病菌的抑制作用最强,抑菌带宽度为10.57am.根据菌株QH94的形态特征、培养特征、生理生化特性以及16S rDNA序列分析结果,将其初步鉴定为细黄链霉菌[Streptomyces microflavus (Krainsky) Waksman&Herici].【期刊名称】《沈阳农业大学学报》【年(卷),期】2015(046)003【总页数】6页(P303-308)【关键词】葡萄霜霉病菌;生物防治;放线菌;细黄链霉菌【作者】蒋欣陶;赵奎华;刘长远;梁春浩;臧超群【作者单位】沈阳农业大学植物保护学院,沈阳110161;辽宁省农业科学院植物保护研究所,沈阳110161;辽宁省农业科学院植物保护研究所,沈阳110161;辽宁省农业科学院植物保护研究所,沈阳110161;辽宁省农业科学院植物保护研究所,沈阳110161;辽宁省农业科学院植物保护研究所,沈阳110161【正文语种】中文【中图分类】S436.631.1.9葡萄霜霉病[Plasmopara viticola（Berk.et Curt.）Berl.et de Toni]是葡萄生产上的重要病害，世界各葡萄主要产区均有发生。

该病主要为害叶片，也为害新梢、叶柄、卷须、幼果、果梗和花序等幼嫩部分，可造成叶片早期干枯脱落，葡萄果穗不能正常发育，浆果不易成熟；同时影响枝条成熟、植株的抗寒性减弱，可造成第二年产量严重损失。

一般年份葡萄霜霉病可造成减产10%～20%，严重年份可达60%以上[1-2]。

放线菌327#的发酵培养基筛选及培养条件优化

ｔｍｐｒｔｒ０，ｎｔｌｐ７０ｃｌｒｏｕｍｌｎ２０ｍＬｓａｉｇｆｓ．ｄｒｔｅｅｃｎｉｏｓｈｅｉｈｂｔｎｚｎｉｍｅｅｆ３７ｅｅａｅ３％ｉｉａＨ．，ｕｔｅｖｌｍｅ１５ｈｋｎａｋＵｎｅｓｏｄｔｎ，ｔｎｉｉｏｏｅｄａｔｒｏ２ｕｉｕ５ｉｌｈｉｉ
ｏａｔｇｎｓｉｕｓａｃｓｙＡｃｉｏｃｔｓ３ｆｎａｏｉｔｓｂｔｎｅｂｃｔｍｙｅｅ２ｎ
ＷＡＮＧａｑｎ，ＸｉｏｉＧＯＮＧｎ，ＨＵｅｌｇ斗，ＩＢｉＺＷｉＭＡＯｉｏｇｎｉＬｈｎ
研究报告
中国酿
造
２１年第１期０００
总第２３期２・４７・
放线茵３７的发酵培养基筛选及培养条件优化２＃
王小琴１龚，斌１朱薇玲，，缪礼鸿２
（．１武汉工业学院生物与制药工程学院，湖北武汉４０２；．３０３２武汉工业学院省级生物学实验教学示范中心，湖北武汉４０２）３０３
Ａｂｓｒｃ：ＴｈｅｕｔｒｍｅｉｍａｄｅｍｅｔｔｏｃｎｄｔｏｓｅｅｎｅｔｇａｅｆｒｍｐｒｖｎｔｅｒｄｔｏｏｆａｔｇｉｔｃｕｔｎｃｓｙｔａｔｃｌｕｅｄｕｎｆｒｎａｎｏｉｎｗｒｉｖｓｉｔｄｏｉｉｉｏｉｇｈｐｏｕｃｎｉｎｏｎｓｓｂｓａｉａｅｂＡｃｉｍｙｃｔｓ３７ｎｓａｉｇｆａｋ．Ｂｙｓｎｇｅｆｃ０ｄｏｔｏｇｎｌｅｐｒｍｅ．ｔｐｉａｅｅｔｔｏｅｕ２ｗｅｅｏｂｉｅｓｔｎｏｅｅ２ｉｈｋｎｓｓｌｉｌａｔｒａｒｈｏａｘｅｎｉｎｔｈｅｏｔｌｆｒｎｉｎｍｄｉｍｍａｍｏｆ３７ｒｔｎｄａａ

一株阴沟肠杆菌的分离鉴定与发酵条件优化

一株阴沟肠杆菌的分离鉴定与发酵条件优化阴沟肠杆菌是一种以芽孢形式存在的革兰氏阳性菌，广泛分布于土壤、水体和动物肠道中。

它具有很强的蛋白水解、纤维素降解和生物活性产物生产能力，具有潜在的应用前景。

因此，对阴沟肠杆菌的分离、鉴定和发酵条件的优化具有重要意义。

首先，分离和鉴定一株阴沟肠杆菌。

从合适的环境样品（如肠道、土壤等）中选择适宜的培养基，进行菌种的分离和纯化。

常用的培养基可以是营养琼脂培养基、肉汤琼脂培养基等。

将样品进行适当的稀释后，均匀涂布于培养基上，通过孤立单菌的方法获得纯种。

对菌落形态、细胞形态、芽孢形态等进行初步鉴定。

进一步利用生物化学试验和分子生物学方法，如生理生化试验、16SrRNA基因测序等，对其进行鉴定，确定其分类学位置。

然后，优化阴沟肠杆菌的发酵条件。

发酵条件的优化是提高细菌产物的产量和纯度的关键。

发酵条件的优化包括培养基的配方、发酵参数（温度、pH、搅拌速度、发酵时间等）的调节等。

首先，优化培养基的配方。

根据阴沟肠杆菌的代谢特点和营养需求，合理选择培养基的组成，并进行优化。

例如，添加适量的氮源、碳源、矿物盐等，以满足其生长和代谢需求。

其次，优化发酵参数。

通过单因素试验和正交试验等方法，系统地考察温度、pH、搅拌速度、发酵时间等参数对生长和产物积累的影响。

根据实验结果，确定最佳的发酵条件，以提高产量和纯度。

在优化发酵条件时，还需要注意阴沟肠杆菌的生理特性。

例如，阴沟肠杆菌耐酸性较强，对低pH值比较耐受，但过低的pH值会抑制其生长和产物积累。

因此，在调节pH值时需要注意，避免pH值过低。

此外，阴沟肠杆菌对温度也有一定的适应范围，常规的生长温度一般为30-37摄氏度。

在实验中，可以在此范围内进行温度的优化，以求得最佳的发酵条件。

综上所述，阴沟肠杆菌的分离、鉴定和发酵条件的优化是提高其产物产量和纯度的关键。

通过合适的分离、鉴定方法和优化的发酵条件，可以为阴沟肠杆菌的应用研究提供坚实的基础。

拮抗放线菌菌株FS-4发酵工艺筛选

拮抗放线菌菌株FS-4发酵工艺筛选拮抗放线菌菌株FS-4是一株具有较强拮抗活性的菌株，对多种植物病原真菌具有抑制作用。

要想将其应用于植物病害的防治，首先需要解决的问题就是菌株的发酵工艺。

本文将重点对拮抗放线菌菌株FS-4的发酵工艺进行筛选，以期为其在农业生产中的应用奠定基础。

一、菌株特性拮抗放线菌菌株FS-4是从自然界中分离得到的一株拮抗活性较强的微生物菌株，具有较高的抗病活性。

经过初步的鉴定和筛选，确定了其为一株优质的拮抗放线菌菌株，有望成为一种潜在的生物农药资源。

为了更好地发挥其拮抗活性，需要对其进行深入的研究和开发利用。

而要进行菌株的深入研究和利用，首先要解决的问题就是菌株的发酵工艺，只有通过良好的发酵工艺，才能够大规模地生产出所需的拮抗活性物质。

二、发酵培养基的筛选发酵培养基是影响微生物发酵生长和代谢产物生成的重要因素之一，合适的培养基可以提供足够的营养物质和生长条件，从而促进微生物的生长和代谢过程。

为了确定拮抗放线菌菌株FS-4的最佳发酵培养基，本研究在初步的试验基础上，筛选了多种不同成分的培养基，包括液体培养基和固体培养基。

通过对不同培养基中菌株生长繁殖情况和拮抗活性物质产量的比较，最终确定了最佳的发酵培养基组成，为后续的发酵工艺提供了重要的基础。

三、培养条件的优化培养条件的优化对于微生物的发酵生产至关重要，包括温度、pH值、发酵时间和搅拌速率等因素。

在本研究中，我们通过单因素试验和正交试验的方法，对拮抗放线菌菌株FS-4的发酵条件进行了系统的优化。

通过对不同培养温度、不同初始pH值、不同发酵时间和不同搅拌速率下菌株生长和代谢产物生成的影响进行比较，最终确定了最佳的发酵条件，为进一步的大规模发酵生产提供了重要的参考。

四、发酵工艺的建立在优化发酵条件的基础上，我们建立了拮抗放线菌菌株FS-4的发酵工艺，包括预处理、接种、发酵、分离和提取等环节。

通过对每个环节的工艺参数进行合理的设计和调整，最终建立了一个高效稳定的发酵工艺，实现了对菌株生长和拮抗活性物质产量的有效控制和提高。

橡胶树炭疽病生防链霉菌DL5C发酵培养基筛选及发酵条件优化研究

热带农业科技2022,45(2)Tropical Agricultural Science &Technology检验，呈极显著性差异（t =7.453＞t 0.01=2.831，D.f=n-1=21，P =0.0001）；年均增粗1.40cm，较对照RRIM600低0.57cm （表2）。

2.2产量在生比区中，大丰95品种1—22割年平均株产干胶2.66kg，为对照RRIM600（5.75kg/株）的46.36%，经配对t 检验，差异极显著；单位面积产量856.62kg/hm 2，为对照RRIM600（1764.13kg/hm 2）的48.56%，达极显著差异（表2）。

1—22割年的产量鉴定结果表明，大丰95在云南省热作所生比区的产量中等，极显著低于对照RRIM600，这与刘作基等在大丰农场高比区测定的1—13割年株产5.24kg、每公顷1644kg 的产量［1］差距较大。

说明大丰95在本试验区产量表现较差，高产潜力没表现出来。

2.3主要副性状2.3.1干胶含量大丰95在生产适应性系比区1—22割年平均干胶含量为32.01%，比对照RRIM600（29.14%）高2.87个百分点，达极显著差异（t =8.419＞t 0.01=2.831，D.f=n-1=21，表2）。

2.3.2树皮生长在生产适应性系比区中，大丰95原生皮厚度为0.58cm，RRIM600为0.66cm。

对第2、4、6割年再生树皮测量结果表明：在割后第5年（6割年），两个品种的树皮生长才能恢复至原生皮厚度；5年平均生长厚度，大丰95为0.11cm，低于对照RRIM600（0.13cm）；两个品种在割后第3—4年生长速度较快，第5年生长减缓；经配对t 值检验，大丰95极显著低于对照RRIM600（t =12.50＞t 0.01=9.925，D.f=n-1=2），见表3。

表2 开割后生长量、1—22年的干胶产量与干胶含量情况1995年 51.90 52.00 1.76 1.87 690.00 801.00 31.80 30.16 1996年 52.60 54.50 1.69 2.17 664.50 960.90 33.37 30.00 1997年 53.50 55.60 1.95 4.34 766.35 1 693.95 34.20 30.00 1998年 54.80 57.10 2.76 4.06 1 053.00 1 744.50 36.90 33.00 1999年 56.40 58.70 3.65 5.29 1 348.50 1 596.00 34.70 30.10 2000年 57.60 60.20 3.20 6.64 1 186.80 1 862.40 33.20 28.88 2001年 60.50 62.90 3.99 6.82 1 478.85 1 904.40 35.62 33.10 2002年 61.80 66.40 3.97 8.47 1 536.30 2 650.35 32.81 28.84 2003年 62.90 69.70 3.92 8.92 1 529.10 2 851.80 36.71 34.48 2004年 63.70 70.00 3.83 4.73 1 534.65 1 555.20 33.12 30.60 2005年 64.60 71.10 1.76 4.13 648.98 1 154.30 37.72 35.52 2006年 65.40 72.30 1.14 7.40 386.28 1 714.31 32.88 30.35 2007年 66.30 74.10 0.98 4.95 380.70 1 586.25 27.67 25.05 2008年 67.50 76.00 1.37 9.89 428.85 1 753.95 22.58 21.45 2009年 68.80 77.40 1.31 8.31 419.40 1 529.25 24.95 20.80 2010年 70.90 79.30 2.93 6.16 847.57 2 269.48 26.60 24.97 2011年 72.30 82.50 3.75 11.02 1 006.07 3 058.01 26.62 26.62 2012年 73.90 83.90 3.89 4.44 770.41 2 207.67 30.73 31.33 2013年 75.20 85.40 2.45 9.46 655.60 2 968.73 30.79 26.39 2014年 77.10 87.20 3.18 2.65 444.56 1 048.18 32.43 30.71 2015年 78.10 88.403.54 3.22 485.77 1 405.29 34.80 31.68 平均/增粗 1.40 1.97 2.66**5.80 856.62** 1 764.10 32.01**29.14比值% 88.3 46.36 48.56 91.03 差值 -0.60 -3.14 -907.48 -2.87注：1.株产干胶t =5.201＞t 0.01=2.831，每公顷产干胶t =6.75＞t 0.01=2.831,D .f =n -1=21；2.*为显著差异，**为极显著差异。

烟草青枯病拮抗真菌烟曲霉发酵条件的优化

烟草青枯病拮抗真菌烟曲霉发酵条件的优化周晓见;查鑫垚;董夏伟;缪莉;董昆明;靳翠丽【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2011(040)012【摘要】烟曲霉(Aspergillus fumigatus)对烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)有稳定的拮抗作用,在验证其发酵液对烟苗生长无害的前提下,利用四因素(发酵温度、发酵时间、接种量、装液量)三水平三重复正交试验,测定该真菌的最佳发酵条件.结果表明,烟曲霉的最佳发酵条件为:发酵温度28℃、发醇时间96h、接种量5％、装液量50mL(150mL容器),此时真菌粗提物产量达301.3 tμg,且抑茵活性最高,青枯病菌OD630平均值为0.370.试验还证明,装液量和发酵温度是影响烟曲霉发酵效果的主要因素.【总页数】5页(P93-97)【作者】周晓见;查鑫垚;董夏伟;缪莉;董昆明;靳翠丽【作者单位】扬州大学环境科学与工程学院,江苏扬州 225127;扬州大学海洋科学与技术研究所,江苏扬州 225127;扬州大学环境科学与工程学院,江苏扬州 225127;扬州大学海洋科学与技术研究所,江苏扬州 225127;扬州大学环境科学与工程学院,江苏扬州 225127;扬州大学环境科学与工程学院,江苏扬州 225127;扬州大学海洋科学与技术研究所,江苏扬州 225127;扬州大学环境科学与工程学院,江苏扬州225127;扬州大学海洋科学与技术研究所,江苏扬州 225127;扬州大学环境科学与工程学院,江苏扬州 225127;扬州大学海洋科学与技术研究所,江苏扬州 225127【正文语种】中文【中图分类】S435.72【相关文献】1.真菌广谱拮抗菌GQ-17的鉴定、发酵液性质研究及发酵条件优化 [J], 闫建芳;刘秋;赵柏霞;刘志恒;齐小辉;刘长建;周济廷2.1株鱼类水霉病原真菌拮抗菌的发酵条件优化 [J], 梁永增;魏冬梅;王磊;王咏星3.烟草青枯病拮抗菌的筛选及发酵条件试验 [J], 许大凤;倪海军;季学军;李田;高正良;王芳;周本国4.抗真菌拮抗放线菌的筛选及摇床发酵条件的优化 [J], 刘翠娟;段琦梅;安德荣5.1株林下参内生拮抗真菌的鉴定及发酵条件优化 [J], 周春元; 许世泉; 闫梅霞; 崔丽丽; 华霜; 王英平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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２结果与分析
２１菌株鉴定．２１．．形态特征１在高氏１固体培养基，于２￣号８Ｃ培养
１．培养特征与生理生化特性将菌株接种到培养基．２２上，于２ ℃下恒温培养，观察并记录菌株的培养特征与８
生理生化特性，。
ＴＣＣＧＣ３，序列由上海生工生物工程技术服务ＣＡＧＣＡ．’ 有限公司合成。ＰＲ反应体系为：ｄＴｘｕｅ４ＣＮＰＭｉｔｒ山，５ＰｉＳＡＲＢｆｒ１ｕ，上下游引物各０６，基因组ｘｒｍｅＴｕｆ０ｌｅ．ｄｒ模板约０８ｔｒＳＡＨＳＤＮＰｌｍｒｓ．ａ．ｌｉＴＲＡｏｙｅａｅ０６，用ｒ，Ｐｍｅ０无菌去离子水补充至５ｍ。ＰＲ循环参数为：９ＯＣ５℃ ５ｉ；９ ℃ ｌｎ８１ｓ２２ｎ０循环；７ａｒｎ４ｍｉ，５ ℃ ５，７ ℃ ｍｉ，３个２ ℃ ｌｍｉ。将ＰＲ反应产物送上海桑尼生物科技有限公司ＯｎＣ测序，测序结果应用ＤＮｔ软件下的ＭｅＡｉｎＡＳａｒｇｌ子软件进ｇ
Ｆｓｙｓ进行分类鉴定，同时对其发酵液的抑菌活性进行了研究。结果表明，菌株Ｆｓｙｓ为链霉茵属，其发酵液对革兰氏阳性细菌具有抑制作用，适宜发酵条件为发酵培养基最适初始ｐ为８，培养时间５，培养温度２ ℃，培养转速２０ｐＨ．０ｄ８ｌｍ。ｒ关键词放线菌分类鉴定发酵液发酵条件
２１年第８（０１期总第１５７
一
株拮抗放线菌的分类鉴定与发酵条件优化试验
李丹陈静（山东宝来利来生物工程股份有限公司泰安２１０）７００
摘要
采用形态观察、培养特征、生理生化鉴定以７６ｒＮ序列分析方法，对本实验室筛选到的一株放线菌＆１ＳＤＡ
以金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌为指示菌，采用牛津杯法吲抑菌活性以抑菌圈直径来表示。
１发酵条件对发酵液抑菌活性的影响．６
本研究院菌种保藏中心提供。１．培养基．３１１１主要仪器．．４高氏一号培养基ＰＲ，扫描电镜，超净工作台，振荡Ｃ仪
行分析。１系统进化树的构建．４
别是对幼龄阶段、免疫前后会产生负面影响，而且容易使环境中的病原微生物产生耐药性。
本项目从畜禽舍周边土壤采样，筛选出能够抑制畜禽舍常见病原微生物的菌株，对其进行培养、形态观察、生理生化鉴定以及１ＳｒＮＡ序列分析，同时对其进６Ｄ行液体深层发酵并对其发酵液的抑制病原菌活性进行了
中图分类号：￥５．１９８２６文献标识码：Ａ文章编号：１０ —７３２１）８００ —３０７１３（０１０ —０７０（）菌体，ＮＡ的提取参￣Ｈｐｏ［等方法提取１￣Ｄ，ｏｗｏｄ菌体总ＤＮＡ。（）１ＳＤＮＰＲ增及扩增产物的纯２６ｒＡＣ扩化、测序：菌种鉴定采用１ＳＤ６ｒＮＡ保守序列的ＰＲ鉴定Ｃ法，细菌１ＳＤＮＡ扩增的引物序列为：上游：５－ＡＧ６ｒ＇ＡＧ
１材料与方法
１１材料．
１１１菌株．．
Ｆｓｙｓ采集泰安市畜禽舍周边土壤，实验室
建系统进化树。
１抑菌活性的测定．５
阴干后进行放线菌的筛选分离。１Ｉ供试菌．．２金黄色葡萄球菌（ｔｈｌｃｃｕｕｅｓ由Ｓａｙｏｏｃｓａｒｕ）ｐ
１１Ｓｒ．６３ＤＮＡＰＲ扩增Ｃ
１广ＧＡＣＴＣＣＧ．’ 下游：５－Ｇ］ｒＴＣＧＧＴＡ３，＇ＡＡＧＡＧＧＡＧＴ
现代畜禽集约化养殖中，动物养殖密度高、空间
小，动物舍内外微生物气溶胶浓度高［，舍内尘埃、微生１】物、有害气体的增加导致畜禽舍空气污染。这些物质直接刺激动物的呼吸器官，容易引起一些条件性致病病原体的感染【，抑制机体的免疫力，影响动物健康和生产性能的发挥，也使禽舍人畜共患病病原体向周边环境传播，给人畜带来感染威胁。传统改善环境的方法是喷洒消毒剂等方式，不仅对畜禽呼吸道黏膜产生刺激，特
采用摇瓶发酵培养，观察培养基初始ｐＨ、发酵时间、发酵温度、培养转速对放线菌发酵液抑菌活性的影
响。
培养箱，高压灭菌锅等。１菌株的初步鉴定．２
１．形态特征观察．１２
态特征。
采用插片法【，观察基内菌丝的形４】
研究，为开发畜禽舍新型、高效、无毒副作用的新型微
生态环境改良剂提供了基础资料。
将所得到的１ｓＤ６ｒＮＡ序列用ＢＡＴ软件在ＧｅＢｎＬＳｎａｋ数据库中进行相似性搜索，选取同源性较高的１ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱＤ６ｒＮＡ序列作为参比对象，用Ｄｍａ软件进行多序列比对，构ＮＡｎ