天麻共生萌发菌栽培种生产工艺条件优化
天麻的种植技术
天麻的种植技术天麻种植生态气候条件及增产技术1 生态气候条件1．1 菌天麻有性繁殖必须与萌发菌和蜜环苗共生，即天麻胚胎生长(早期生长)靠萌发菌，当胚胎形成后必须与蜜环菌共生。
因此，种植天麻首先要选优质萌发菌和蜜环菌。
1．2 温度天麻喜凉爽环境，最适宜生长温度10—25℃，8℃开始萌动生长，30℃就会停止生长。
超过30℃时蜜环菌和天麻生长受到抑制。
1．3 湿度天麻喜湿润，它适宜生长在疏松的沙质土壤中，一般腐殖土含水量达50％一60％，天麻生长良好。
土壤湿度过大会引起块茎腐烂。
1．4 光照天麻从种到收，阳光对其影响不大，适宜室内栽培。
院外培育天麻种子，箭麻出土后，太阳光直接辐射会灼伤茎秆，需搭棚遮荫避光防风。
1．5 风氧气对天麻及蜜环菌生长繁育极为重要。
室内及地下室栽培必须留通风口，以保证空气流通，种植天麻的土质要疏松，利于通气渗水。
1．6 土质土壤质地不同对天麻生长影响很大，天麻及蜜环菌适宜在较疏松的沙质土壤中生长，粘重的土壤排水性差易积水，影响透气，导致块茎死亡，沙性过大的土壤，保水性能差，易引起土壤缺水，同样影响块茎和蜜环菌生长。
土壤pH以5．5—6．0，在微酸性土壤中栽培为宜。
2 增产技术2．1 场地选择太阳直接辐射较差的地方是种植天麻的最佳场地。
室内、室外、地下室三种不同的环境下均可进行种植，可人工为其创造适宜的生长条件。
有性繁殖的麻种，一穴产的麻种可分栽10—15穴，在山上种植省工、省料。
高寒区，海拔1000m以上要选择阳坡种植。
海拔500m以上选择半阴半阳坡种植。
500m以下最好选择阴坡种植。
2．2 最佳播期播期原则主要考虑温度，应选在天麻种已进入休眠而蜜环菌可以继续萌发生长的阶段：在商南地区即日平均气温已降到10℃以下，5℃以上为最佳播期。
天麻有性繁殖最佳播期：浅山区(海拔800m以下)在3—4月；高寒山区(海拔800m以上)在4—5月。
无性繁殖最佳播期，浅山区在11月，高寒山区在3月，超过3月底海拔1500m以下地区不能种植。
天麻萌发菌、蜜环菌培养技术规程
天麻萌发菌、蜜环菌培养技术规程ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB62 甘肃省地方标准DB 62/ XXXXX—XXXX陇南市天麻萌发菌、蜜环菌培养技术规程点击此处添加标准英文译名点击此处添加与国际标准一致性程度的标识文稿版次选择2014-XX-XX发布2014-XX-XX实施目次前言 (III)1 范围 (1)2 规范性引用文件 (1)3 术语和定义 (1)3.1 萌发菌 (1)3.2 蜜环菌 (1)3.3 菌材 (1)3.4 母种 (1)3.5 原种 (1)3.6 栽培种 (1)4 萌发菌、蜜环菌的培养 (2)4.1 培养条件 (2)4.2 菌种培养 (2)4.2.1 萌发菌、蜜环菌一级菌种（母种）培养 (2)4.2.1.1 PDA培养基制备 (2)4.2.1.2 菌种选择 (2)4.2.1.3 分离方法 (2)4.2.1.4 菌种纯化 (3)4.2.2 萌发菌、蜜环菌二级菌种（原种）培养 (3)4.2.2.1 萌发菌二级菌种培养 (3)4.2.2.2 蜜环菌二级菌种培养 (3)4.2.3 萌发菌、蜜环菌三级菌种（栽培种）培养 (3) 4.2.3.1 萌发菌三级菌种培养 (3)4.2.3.2 蜜环菌三级菌种培养 (3)4.2.4 菌种保藏 (3)4.2.4.1 一级菌种保藏 (3)4.2.4.2 二级菌种和三级菌种保藏 (3)4.3 蜜环菌枝培养 (4)4.3.1 树种选择 (4)4.3.2 培养时间 (4)4.3.3 培养方法 (4)4.4 蜜环菌材培养 (4)4.4.1 菌种准备 (4)4.4.2 树种选择 (4)4.4.3 培养时间 (4)4.4.4 木材准备 (4)4.4.5 场地选择 (4)4.4.6 培养方法 (4)4.4.7 培养管理 (5)4.4.7.1 调节湿度 (5)4.4.7.2 调节温度 (5)5 菌种质量 (5)5.1 母种质量 (5)5.1.1 直接观察 (5)5.1.2 显微镜检查 (5)5.1.3 观测菌丝长速 (5)5.1.4 耐高温测试 (5)5.1.5 吃料能力鉴定 (5)5.2 栽培种质量 (5)5.2.1 质量指标 (5)5.2.2 验收规则 (6)6 标志、包装、运输、贮藏 (6)6.1 标志 (6)6.2 包装 (6)6.3 运输 (6)6.4 贮藏 (6)前言本标准根据GB/T1.1－2009给出的规则编制。
天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术
菌种选育是利用生物技术手段对微生物进行筛选、培 育和改良的过程，以提高其产量、品质和抗逆性。在 选择蜜环菌和萌发菌的菌种时，应采用科学、合理的 选育方法和技术，以保证所获得的菌种具有优良的性 状和性能。
在进行菌种选育时，还需采用一系列技术手段对菌种 进行培育和改良。例如，可以采用诱变育种、基因工 程育种等方法对菌种的遗传物质进行改造，以提高其 产量、品质和抗逆性。
除了促萌发效果外，萌发菌对天 麻生长的促进效果也是选择时需 要考虑的因素。一些萌发菌能够 促进天麻的生长速度和生长量， 而另一些则对其生长没有明显促 进作用。应选择对天麻生长具有 明显促进效果的萌发菌种类，以 提高天麻的产量和品质。
菌种选育方法与技术
常规的菌种选育方法包括孢子分离法、组织分离法、 噬菌体分离法等。在选择蜜环菌和萌发菌的菌种时， 应根据其生长特性和生活习性，选择合适的分离方法 进行分离和筛选。
总结词
为了提高菌种的生产能力和质量，可以采取一系列措施对培养基进行优化。
详细描述
优化培养基的方法包括：通过添加适量的微量元素或有机成分，以满足菌种的营养需求；调节培养基的pH值和 温度等参数，以适应菌种的生长特性；采用不同的灭菌方法和保护剂，以保持培养基的无菌状态和提高菌种的抗 逆性。
03
菌种培养与繁殖
蜜环菌培养与繁殖
培养基质
培养温度
蜜环菌培养使用阔叶树锯木屑、麦麸、蔗 糖等为主要原料，添加适量的水和琼脂， 制成固体或半固体培养基。
最佳培养温度为25℃左右，温度范围为1530℃，避免高温和低温。
空气湿度
光照条件
蜜环菌对空气湿度要求不高，一般保持相 对湿度70%左右即可。
培养过程中需保持黑暗环境，避免光照对 菌丝生长的影响。
天麻人工栽培及加工技术探讨
天麻人工栽培及加工技术探讨天麻是著名的中药材，其药用价值与食用营养价值非常高。
受到供求关系影响，天麻产品价格通常较高，生产周期比较短。
春季和冬季均可以采挖天麻，其中冬至前采挖的天麻为“冬麻”，品质比较高；立夏前采挖的天麻为“春麻”，品质相对较差。
通过对天麻成分的测试表明其含有天麻素等高达 27 种对人类有益的微量元素，在预防与治疗眩晕、头疼、高血压等多种疑难杂症中具有良好功效。
随着天麻种植专家对天麻有性繁殖、蜜环菌培养等方面的研究，天麻人工栽培已从陆地栽培、地下室栽培发展到了瓶栽、袋栽，实现了对天麻的立体化生产。
为了实现天麻人工栽培高质量发展，需要抓好栽培场地选择，科学选择材料、菌材培养，还要加强管理，适时采收。
1 天麻的特点及生长习性天麻属于多年生寄生草本，在腐殖质较多且湿润的林下、向阳灌木丛、草坡等存在。
天麻自身不含有叶绿素，不能够进行光合作用，只能够依靠萌发菌、蜜环提供营养而共生。
天麻生长分两个阶段：（1）有性繁殖阶段，该阶段天麻种子无胚乳，需要萌发菌提供营养而生长；（2）无性繁殖阶段，该阶段靠蜜环菌提供营养而生长。
天麻块茎肥厚，长度约 10 cm，直径 3～4.5 cm，没有比较明显的环节。
天麻的生长与蜜环菌的生长不同，要考虑二者的搭配，选择湿润、凉爽、土壤腐殖质含量高的疏松沙质壤土种植。
适宜天麻生长的温度为 15℃~28℃，在环境温度为 8℃的情况下开始萌动。
如果天麻存在的环境低于 8℃或高于 30℃，就会停止生长。
天麻从种子繁殖到成长成种子的周期大概为 2 年，在整个生育期内，块茎抽薹开花授粉至蒴果种子成熟是在地表形成，该生育期在绿塘乡自然条件约为 82 d，天麻多以块茎的形式潜居在土内生长。
野生天麻在我国分布十分广泛，云南、贵州、湖南、湖北、四川等省份都有野生天麻。
天麻人工栽培是为了满足市场需要，也能够有效带动当地经济快速发展。
2 天麻人工栽培技术2.1 场地及材料选择选择合适的场地进行天麻人工栽培是提高成活率、促进天麻快速生长的关键。
天麻萌发菌种制作和应用技术的改进
天麻萌发菌种制作和应用技术的改进作者：游中华来源：《湖北林业科技》2016年第05期我国天麻生产之所以能产业化、规模化发展，归功于上世纪80年代发现萌发菌及工厂化生产的实现，及人们在科研和生产上用纯菌种培植蜜环菌菌材。
天麻的有性栽培和有性繁殖既离不开蜜环菌，也离不开萌发菌。
蜜环菌菌种的生产技术和配方目前已经成熟，萌发菌菌种的生产技术工艺虽趋于成熟，但其栽培种的生产及应用还有一些问题。
本文现就存在的问题和规范后的技术方法简要介绍如下。
1存在的问题1.1萌发菌培养基配方仍较单一目前萌发菌培养基配方主要是：①树叶78%，麸皮20%，石膏1%和白糖1%，含水量60%。
②树叶58%，杂木屑25%，麸皮15%，石膏1%和白糖1%，含水量60%。
③棉籽壳68%，杂木屑20%，麸皮10%，石膏1%和白糖1%，含水量60%。
树叶以壳斗科中的栎树类叶最好。
栎树类叶是指栓皮栎（别名花栎树、粗皮栎）、麻栎（别大橡子树、橡树）和槲栎（别名细皮青冈、青冈、白栎）。
目前陕西萌发菌的产量占国内的60%以上，大多以配方②生产，其原因为：一是该省是萌发菌种生产的发源地，二是其生产配方中的树叶成分就是以栓皮栎为主。
1.2制袋发菌管理较粗放萌发菌生产一般在11月～下1年2月进行。
因在冬季生产时温度低、生长慢，多采用集中多层堆放，并加热升温以促进菌丝生长。
如温度控制不当，通风不良，常发生菌种烧料现象，并容易感染杂菌。
1.3搬运及运输不规范从萌发菌种的生产厂家到栽培场地少则十几公里，多达上千公里。
菌种要经过出库包装、中途运输、存储备用等多个阶段。
经常出现因搬运导致破损或漏气，从而感染杂菌，以及在运输途中气温过高和透气不良而烧菌的问题。
1.4播种及拌播天麻种子的方法欠科学用萌发菌拌播天麻种子，首先要将萌发菌袋中的萌发菌种培养基处理成小块或撕碎。
现在撕碎的方法有三种：手撕、刀剁、粉碎机粉碎。
但以用刀剁成小块为最优，既省时、省力，还对萌发菌菌丝体损伤少。
天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术
天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术菌种培养是微生物工程领域的重要课题。
本文将介绍天麻蜜环菌和萌发菌母种的生产技术。
天麻蜜环菌的生产技术天麻蜜环菌的概述天麻蜜环菌（Ophiocordyceps sinensis）是寄生于青藏高原特有的天麻上的真菌，是一种重要的药用菌。
天麻蜜环菌具有滋补强身、亢进元气、活血止痛等功效。
因其生长在青藏高原上，种植难度大，市场价格高昂。
天麻蜜环菌的生产技术目前，国内的天麻蜜环菌生产主要依靠菌株保藏和菌丝体发酵的方式。
因为菌体繁殖周期长，生长条件较苛刻，中间环节多，所以天麻蜜环菌的制备工艺比较复杂。
菌株的保藏为了确保天麻蜜环菌的品种质量，要进行菌丝株的保藏。
保藏分为以下两类：1.把天麻蜜环菌菌丝体保存在深冷存储箱中：将培养出的天麻蜜环菌菌丝体经过特殊处理之后，放入深冷存储箱中保存。
这种方法适用于长期保存。
2.把天麻蜜环菌直接保藏在天麻上：将天麻收获后，用纱布包裹好，将培养好的天麻蜜环菌菌丝体涂抹在天麻上。
这种方法适用于短期保存。
菌丝体发酵生产在这个过程中，需要按照固态培养的方式来进行，主要步骤如下：1.选择营养和含水量适宜的基质：天麻蜜环菌具备较好的耐受性，可以在多种质地的基质上生长发酵，如：大豆糖蜜/麸皮、食用菌庚二酸盐、玉米棒芯、稻草粉等。
2.检查基质水分含量：盐度过高，水分过少都会对菌丝体的生长发酵产生不利影响，因此在进行发酵之前一定要检查基质含水量的状态，并根据实际情况进行调整。
3.中种菌丝体：此处使用的是固体素、甘油、自来水组成的液态培养基，在选择好基质材料后，使用液态培养漿的方法进行预处理。
将微生物发酵完的发酵漿液挖出来，与基质材料混合在一起，又使之均匀铺开。
4.发酵过程：将芽胞菌杂菌加入；约在18℃附近为最佳生长温度下。
待繁殖至一定程度后，取出菌丝体，进行后续处理。
5.活性炭喷涂处理：为了去除细菌杂质以及其他的污染物，去掉附着物表面上的细菌、外物等杂质。
在菌丝体发酵完成后的表面，喷涂一定量的活性炭。
天麻小菇属萌发菌生产技术
天麻小菇属萌发菌生产技术天麻又名神草、仙仙根、定风草、离合草、仙人脚、鬼督邮、还筒子、赤箭、离母、四龙子、鬼箭杆、盗人脚、山萝卜、水洋芋, 其地下球茎是我国名贵的传统中药。
兰科天麻属,多年生草本植物,无根、无绿色叶片,在其生活史中大部分时间在地下度过, 既不能从土壤中吸收无机矿物元素, 也不能进行光合作用自养生活, 其生长发育所需营养主要依靠同化侵入其体内的一些真菌而获得。
种子需要同化小菇属等真菌才能获得营养而发芽, 发芽后形成的球茎又必须同化蜜环菌才能正常生长发育形成成体球茎（箭麻）[1] 。
从目前已用于生产的萌发菌看, 萌发菌为弱腐生菌, 培养条件苛刻、技术要求较高, 一般由专业生产厂提供。
现将萌发菌生产技术介绍如下。
1生活特性到目前为止, 文献报道的可促使天麻种子发芽的真菌有12 种, 用于生产的萌发菌均属于小菇属真菌, 其生活特性如下。
1.1 腐生为主, 兼性寄生萌发菌对树叶中的纤维素有强烈的分解和消化能力, 多腐生于高山林间落叶上。
当天麻种子落入感染了萌发菌的树叶上时, 萌发菌又可侵入具有生命力的天麻种子。
因此, 萌发菌主要营腐生生活, 但也有兼性寄生的特性。
1.2萌发菌生长对空气的要求在自然条件下, 主要分布在枯枝落叶层及疏松的表层土壤中。
在培养过程中如果培养料装得太多或瓶盖太紧, 菌丝生活力减弱甚至死亡。
说明萌发菌是一类好气性真菌, 需要有足够的氧气才能正常的生长发育。
1.3萌发菌生长对温度的要求在自然条件下,萌发菌子实体一般在夏季出现, 说明其菌丝生长需要有较高的温度。
试验表明，萌发菌在15〜30C温度范围内均能生长，以25C时菌丝生长为最快，低于20C或高于28C菌丝生长速度明显减漫，高于30C以上24h,菌丝将失去生活力，甚至死亡。
1.4萌发菌生长对基质含水量的要求在自然条件下, 萌发菌多生长在湿度较高的环境中。
试验结果表明, 不同的萌发菌对水分的要求不同, 但都喜欢生长在基质含水量在1 00%〜200%的高湿环境中, 基质含水量过高和过低都会导致菌丝生长速度减缓, 甚至停止生长。
天麻萌发菌种制作和应用技术的改进
１ 存在 的问题
１ ． １ 萌发菌 培 养基 配方仍 较 单一
目前 萌 发菌 培养 基配 方 主要 是 ： ①树 叶 ７ ８ ， 麸皮 ２ ０ ， 石膏 １ 和 白糖 １ ， 含水量 Байду номын сангаас Ｏ 。② 树叶 ５ ８ ， 杂木屑 ２ ５ ９ ／ ６ ， 麸皮 １ ５ ， 石膏 １ 和白
菌袋 堆放几 层 出现烧 料 现象 。
２ 萌发菌种制作 和应用技术 的改 进
２ ． １ 培 养基 配方
产 的发源 地 ， 二是 其生 产配方 中的树 叶成 分就 是 以
栓 皮栎 为主 。 １ ． ２ 制袋 发菌 管理 较粗 放
栎树 叶是萌 发菌 培养基 的主要 成分 ， 主要 是 因 为 这类树 叶耐腐 ， 第二 个原 因是 应用 的几 乎是 整 片
次， 再 到 菌长 到 菌 袋 １ ／ ２时清 杂 １次 ， 最后 到 菌种
长 满菌 袋 时 ， 结合 装箱 检查 １ 次。
２ ． ３ 搬运 或运 输技 术
发效 果 。此 配方 的优点 是 萌发菌 丝恢 复力 强 ， 拌 播 面积 大 ， 萌发 率 高 ， 萌发个体 （ 原球 茎） 大， 耐 腐 性
２ ０ １ ６ 年 １ ０月
Ｈｕ ｂ ｅ ｉ Ｆｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ
Ｏｃ ｔ ． ， ２ ０ １ ６
天 麻 萌 发 菌 种 制 作 和 应 用技 术 的 改进 ＊
游 中华
（ 三峡旅游职业技术 学院 宜昌 ４ ４ ３ １ ０ ０ ）
我 国天麻 生 产 之 所 以能产 业 化 、 规模 化 发 展 ， 归 功于 上世 纪 ８ ０年代 发现 萌发 菌及 工 厂化生 产 的 实现 ， 及 人们 在科 研 和生产 上 用纯菌 种 培植蜜 环 菌
天麻萌发菌种制作和应用技术的改进
天麻萌发菌种制作和应用技术的改进作者：孙孝全来源：《广东蚕业》 2021年第3期DOI：10.3969/j.issn.2095-1205.2021.03.30孙孝全（彝良县科技开发服务站云南邵通 657600）作者简介：孙孝全（1979- ），男，云南彝良人，本科，研究方向：科技情报开发服务与应用。
摘要天麻是一种贵重的药材，对心脑血管、四肢麻木等多种疾病具有良好的治疗效果。
目前，我国天麻生产逐渐实现规模化和产业化的发展。
天麻的有性栽培和繁殖需要萌发菌和蜜环菌的支持和保障。
文章对天麻萌发菌制作和应用技术的改进进行分析。
关键词天麻萌发菌；制作；应用技术；改进措施中图分类号:S567.23+9 文献标识码:A 文章编号:2095-1205(2021)03-63-02现阶段，我国萌发菌菌种的生产技术和配方还不太成熟。
因此，我国对天麻有性栽培和繁殖的过程中，需要进一步研究萌发菌菌种的生产技术和配方，改进其制作和应用技术，解决其种植中的生产和应用问题。
1 萌发菌生长条件萌发菌主要是采用菌丝的形态向天麻种胚内部侵入，为其生长提供充足的营养成本，提高种子的萌发率。
萌发菌自身能够分泌出酶，有效分解木质素纤维素，在枯萎枝叶和植被腐根上腐生，同时侵入天麻种子，和生命力较强的天麻种子进行共同萌发，大大提高了种子的萌发率。
萌发菌属于一种真菌品种，具有好气性。
在栽培的过程中，培养料过于压实，就会对萌发菌的菌丝体发育产生严重影响。
萌发菌培养中，需要做好通风换气工作，为其生长发育提供更加良好的环境条件。
萌发菌侵入天麻种子种胚内部，对其块茎没有浸染性能，属于一种寄生菌。
天麻种子的栽培需要蜜环菌的支持，当其向原球茎生长出的营养繁殖茎内部侵入之后，萌发菌和蜜环菌就会在相同的营养繁殖茎中共同存在，蜜环菌逐渐代替萌发菌，对天麻块茎不会造成病害。
萌发菌在黑暗环境条件下进行培养中，其会发出一定的荧光[1]。
天麻萌发菌种在制作过程中，温度范围和基质含水量对其生长发育具有重要影响。
天麻种植生态气候条件及增产技术
·71·1.种植天麻生态气候条件 1.1与菌共生作为一种高度特化的兰科植物，天麻属于真菌异养型，其在种植过程中需要和蜜环菌、萌发菌一起存在才能生长起来。
天麻的高度特化表现在两方面，首先天麻没有根、没有叶子，在生长中既不需要根系从土壤中吸收营养，也无法通过叶子进行光合作用，因此需要与蜜环菌共生，进而为生长吸取营养。
其次天麻的种子是由胚和种皮两部分组成，没有胚乳，因此种子需要和萌发菌进行共生，从中吸取营养进而得到萌发。
菌的存活情况直接影响着天麻的生长质量和产量。
1.2 温度、湿度温度对中草药的种植起到重要的作用，温度对天麻的生长也有重要的影响作用。
天麻一般是在冬季不是很寒冷、夏季比较凉爽的环境下生长。
因天麻萌发温度一般为8摄氏度，在30摄氏度下天麻会停止生长，同时蜜环菌的活性也会降低，进而影响到天麻的生长，所以 10到25度时天麻生长的最佳温度。
除温度外，湿度也会影响到天麻的生长，一般选择含水量在50%到60%之间的疏松砂质土壤或者是腐殖土中种植天麻，能够更好提高天麻的生产效率。
1.3 光照、风吹一般说来，天麻受到光照的影响比较小，这主要是因为天麻没有根没有叶子，其大部分生长时间是在地下，从种植到后来的收获阶段，天麻主要是在室内生长，只要在培育天麻的有性种子过程中要特别注意光照问题。
有性繁殖栽培技术下的天麻花茎具有明显的趋光性，然而过多的阳光直射也不利于天麻的生长，所以可以搭建大棚保护天麻的生长。
1.4 土质、土壤酸碱度天麻生长发育的重要环境生态要求就是土壤的质地选择，土壤对天麻的生长和发育提供源源不断的温度、水分、养料、空气和微生物。
一般来说，天麻的生长土壤应该要满足能够及时对天麻提供肥料、谁、热、气、菌等要求，这样天麻的质量和产量才能得到保证。
选择疏松的壤土，原因在于其质地比较均匀，物理性好，同时含有黏粒、砂粒、粉粒等混合物，既能通气透水，也能保证土壤的水肥效益。
另外土壤的酸碱度也会影响到天麻的生长，天麻一般是在pH 值为5到6之间的微酸性土壤中生长为宜。
天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术
天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术人工栽培天麻，在有性繁殖过程中，需要萌发菌和蜜环菌两种共生菌。
笔者在生产实践中，摸索出两种共生菌都能生长的培养基及生产技术。
具体做法如下。
1培养基配制1.1液体培养基马铃薯（挖去芽眼、去皮、切片）100g，硬杂木屑、麦麸、玉米面各50g，自来水或天然水1300mL，在双重锅内煮沸30分钟后用双层纱布过滤。
取滤液补水至1000mL，加葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、蛋白胨0.5%、10mLVB1。
全部溶解摇均后，分装于500mL的三角瓶或罐头瓶内，每瓶装150mL左右，也可装于试管内，装入量为试管容积的1/4。
三角瓶和试管用棉花塞口，罐头瓶用2层牛皮纸或4层报纸上盖一层塑料布封口后，用皮筋扎口。
特点：技术含量高，繁殖快，长好即可应用，但不能长期保存。
1.2固体斜面培养基是食用菌生产中常用的培养基，按照“1.1”的操作程序制取滤液，在滤液中加入琼脂18g，加热溶化并补水至1000mL，趁热加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、蛋白胨5g、10mgVB1，全部溶解摇均，分装于试管内，装量为试管容量的1/4，然后用棉花塞口。
1.3木屑培养基硬杂木屑50%、玉米芯（粉碎成小颗粒状）25%、麦麸15%、玉米面10%，外加葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、石膏1%、石灰0.5%、磷酸二氢钾0.2%、硫酸镁0.1%、2%VB1。
将原料和石膏、石灰等干料拌均，再将上述可溶解的所有辅料溶于水中并拌入原料中，使之含水量为70%，充分拌均后装入试管，并适当压实。
装入量为试管容积的1/2，然后用棉花塞口。
特点：耐贮藏，便于邮寄。
2灭菌用手提式高压灭菌锅，也可用民用高压锅代替。
2.1液体和斜面固体培养基灭菌时，蒸汽压力为1.4kg/平方厘米时稳定保持30分钟，待锅内温度降到50～70℃时出锅。
液体培养基出锅后直接放入接种箱中，待温度降到25℃以下时接种；斜面固体培养基需趁液体状态时倾斜成斜面（斜面长度约占试管长的3/5），待培养基自然凝固后移入接种箱。
天麻萌发菌种植技术
天麻萌发菌种植技术
天麻萌发菌的种植技术包括以下几个方面：
菌材准备：选择直径约5～10厘米的杂木，去掉树皮，锯成约40厘米长的木段，然后放入水中浸泡2～3天，捞出后在室外晒干。
菌种制作：将杂木锯成约2厘米长的小段，然后将其放入菌种瓶中，加入适量的萌发菌菌种，用报纸封口，放入恒温箱中培养。
一般培养3个月左右，当木段上长满白色菌丝时即可取出备用。
种植方法：将已经长满菌丝的木段平放在地面上，然后在每个木段上放上天麻种子，再将准备好的沙土覆盖在木段和天麻种子上，轻轻压实。
一般每平方米可摆放10个左右的木段。
日常管理：种植后保持沙土湿润，注意防涝、防旱、防病虫害。
在生长过程中要适时浇水和施肥，并注意清除杂草和老菌丝。
采收：一般种植后1～2年即可采收。
当天麻长度达到30厘米左右时即可挖取。
采收时要小心地将天麻挖出，去掉泥土和杂物，洗净后晒干或烘干。
天麻萌发菌菌种制作技术食用菌,栽培技术
天麻萌发菌菌种制作技术食用菌,栽培技术
1．萌发菌的种类
现已报道的天麻种子萌发菌均属口蘑科、小菇属的4种真菌，它们的名称是：一是紫萁小菇；二是兰花小菇；三是石斛小菇；四是开唇兰小菇。
XX年，专家分离、培养出另一类天麻种子萌发的真菌，为多孔科的大白栓菌。
此菌在较高温季节生产和应用要优于上述四种菌类。
2．萌发菌的制作技术
①采取紫萁小菇、石斛小菇、大白栓菌等子实体，用子实体的组织或孢子分离法获得菌种。
萌发菌的孢子分离法与蜜环菌种的孢子分离法完全相同。
②用天麻种子形成的原球茎作分离材料。
但从原球茎上分离获得的菌种，一定要进行生产试验后才能用于生产。
这是因为帮助天麻种子萌发的真菌，现已知道不只是一属或一科的几个种类，而是多个属、科的多个种类。
而且有些种类真菌的菌丝体对促进天麻种子萌发的效果较差。
所以，建议要从科研单位或正规的菌种厂家购买萌发菌母种或原种用于扩大生产。
3.栽培种配方
①将树叶粉碎后配制。
②用完整的树叶配制的。
无论是用碎叶，还是整叶，均要将其放入清水中浸泡3～4小时后，捞出沥去浮水，再撒入麸皮20％，石膏1％，蔗糖1％。
拌和均匀后即可装瓶或塑料袋、灭菌、接种。
也有用锯木屑、棉籽壳配制萌发菌栽培种的。
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天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术
天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术
杨儒钦
【期刊名称】《特种经济动植物》
【年(卷),期】2006(009)002
【摘要】人工栽培天麻，在有性繁殖过程中，需要萌发菌和蜜环菌两种共生菌。
笔者在生产实践中，摸索出两种共生菌都能生长的培养基及生产技术。
具体做法如下。
【总页数】1页(P28)
【作者】杨儒钦
【作者单位】吉林省蛟河市白石山林业局,132503
【正文语种】中文
【中图分类】S6
【相关文献】
1.天麻栽培中萌发菌及蜜环菌的简易培养技术 [J], 谢学强
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天麻共生萌发菌栽培种生产工艺条件优化
天麻共生萌发菌栽培种生产工艺条件优化程立君;段相程;胡志芳;李世辉;赵艳娟;师睿【摘要】The best production process conditions for Gastrodia elata seed-germinating strain MY-001 were opti⁃mized. The results showed that the best liquid fermentation conditions were pressure of 0.020MPa,ermented liquid of brown sugar 10g/L,wheat bran 15g/L,peptone 1g/L. The number increasing ofhypha biomass over time accords with the Logisticgrowth model,the observations fit with the logistic equation fitting thehigher value(R2=97.7%),bio⁃mass tends to be stable after fermentation 144h. The optimum cultivation of the substrate were determined fagaceae plant leaves60%,broadleaf sawdust 30%,and wheat bran 10%.%经试验对天麻共生萌发菌MY-001的栽培种生产的工艺条件进行了优化，结果显示，既能降低生产成本又能提高生产效率的液体发酵条件为：液体菌种培养器的气压为0.020MPa，发酵液主要成分中红糖、麦麸和蛋白胨的最佳比例为红糖10g/L、麦麸15g/L、蛋白胨1g/L，萌发菌菌丝生物量随时间的变化符合逻辑斯蒂增长模型，其观测值与逻辑斯蒂方程拟合值的拟合度较高（R2=97.7%），发酵培养144h后生物量趋于稳定，栽培种基质最合适的比例为壳斗科植物树叶60%、阔叶树木屑30%和麦麸10%。
天麻共生菌简易培养技术
天麻共生菌简易培养技术摘要介绍了利用居室一角、蒸煮食品用压力锅等家用设施设备,进行天麻共生萌发菌和共生蜜环菌的简易培养技术,以期为天麻的栽培提供参考。
关键词天麻;萌发菌;蜜环菌;简易培养技术天麻(Gastrodia elata Bl.)人工栽培有无性繁殖和有性繁殖2种方法。
无性繁殖栽培是播种米麻、白麻生产天麻的方法,有性繁殖栽培是播种天麻种子生产天麻的方法。
前者需要蜜环菌(Armillariella mellea)作为共生菌为天麻提供营养,后者先要萌发菌后要蜜环菌作为共生菌为天麻提供营养。
培养这2种共生菌,常需要一些能保证无杂菌感染的专用设施设备,如高压蒸汽灭菌锅、接种室、超净工作台或接种箱等。
现将天麻共生菌简易培养技术总结如下。
1袋装或瓶装共生菌培养1.1培养基配制1.1.1萌发菌培养基配制。
主要配方为阔叶树树叶78%、麦麸20%、石膏1%、白糖1%。
树叶以壳斗科的为好,如板栗、麻栎、青冈等。
首先将树叶用水预湿,再将石膏、白糖溶于水中,加入麦麸搅拌均匀后浇入预湿的树叶中,充分拌匀,并调节含水量至60%~65%(用手抓一把并用力握捏,指缝有水溢出但不滴水即可)。
培养基配制好以后,分装到菌袋或罐头瓶中。
菌袋用耐高温的聚丙烯或低压聚乙烯塑料袋。
装料时,用大拇指稍加按压,使培养基松紧适度,并用木锥从袋口或瓶口向里打一孔,扎紧袋口或用耐高温薄膜封瓶口。
培养基装填不宜过少和过多,袋装以封口后料袋长15cm为宜,瓶装以装至瓶颈为宜。
1.1.2蜜环菌培养基配制。
枝段准备:选用阔叶树尚未萌发的树枝,尤其是壳斗科、桦木科植物的树枝,如麻栎、槲栎、青冈、桦木等,其他如野樱桃、樗树等,这些植物呈灌丛样生长的,可进行择伐,乔木类可进行修剪,利用择伐株或修剪枝做枝段,可做到资源的永续利用。
将直径1~2cm的树枝,斜砍成3cm长的小段,放入0.25%硝酸铵溶液中浸泡20min后,捞出装入罐头瓶,装填紧实。
培养基主要配方:1号为去皮去芽眼马铃薯200g、白糖20g、黄豆粉5g、磷酸二氢钾1g、琼脂16g,加水定容至1 000mL,pH值自然;2号为玉米粉20g代替马铃薯,其他成分同1号。
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天麻共生萌发菌栽培种生产工艺条件优化作者：程立君段相程胡志芳李世辉赵艳娟师睿来源：《安徽农学通报》2016年第06期摘要：经试验对天麻共生萌发菌MY-001的栽培种生产的工艺条件进行了优化，结果显示，既能降低生产成本又能提高生产效率的液体发酵条件为：液体菌种培养器的气压为0.020MPa，发酵液主要成分中红糖、麦麸和蛋白胨的最佳比例为红糖10g/L、麦麸15g/L、蛋白胨1g/L，萌发菌菌丝生物量随时间的变化符合逻辑斯蒂增长模型，其观测值与逻辑斯蒂方程拟合值的拟合度较高（R2=97.7%），发酵培养144h后生物量趋于稳定，栽培种基质最合适的比例为壳斗科植物树叶60%、阔叶树木屑30%和麦麸10%。
关键词：天麻；萌发菌；液体发酵；工艺优化中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）06-17-03Optimizing the Gastrodia elata Seed-germinating Strains Production ProcessCheng Lijun1 et al.（1College of Chemistry and Life Sciences，Zhaotong University，Zhaotong 657000，China）Abstract：The best production process conditions for Gastrodia elata seed-germinating strain MY-001 were optimized. The results showed that the best liquid fermentation conditions were pressure of 0.020MPa，ermented liquid of brown sugar 10g/L，wheat bran 15g/L，peptone 1g/L. The number increasing ofhypha biomass over time accords with the Logisticgrowth model，the observations fit with the logistic equation fitting thehigher value（R2=97.7%），biomass tends to be stable after fermentation 144h. The optimum cultivation of the substrate were determined fagaceae plant leaves60%，broadleaf sawdust 30%，and wheat bran 10%.Key words：Gastrodia elata；Germinating strain；Liquid fermentation；Process optimization天麻（Gastrodia elata Blume）为名贵的传统中药，云南省昭通市是我国公认的天麻道地药材产地，特别是昭通市彝良县小草坝所产的天麻，以优良的品质而驰名中外[1]。
天麻属兰科多年生草本植物，无根、无绿色叶片，不能进行光合作用营自养生活，其种子发芽必需依靠小菇属（Mycena）一类萌发菌侵染后才能正常发芽[2-5]。
笔者前期对昭通小草坝分离的萌发菌进行了筛选和萌发对比实验，并将筛选出的菌株在昭通实施了推广[3]。
随着天麻产业的发展，为加快萌发菌的扩繁，降低生产成本，同时为深入开发利用萌发菌奠定基础，有必要对萌发菌的深层发酵条件进行研究。
1 材料和方法1.1 实验材料供试萌发菌菌株为MY-001由昭通学院提供；供试药品磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钠等均为化学纯。
液体发酵设备使用辽宁全禾生物科技有限公司生产的CQY-130型液体菌种培养器。
1.2 实验方法1.2.1 菌丝生物量测定方法将培养基配置（马铃薯200g、葡萄糖15g、红糖10g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、泡敌0.3mL、维生素B1 0.005g）后装入培养器中，124℃灭菌30min，冷却至25℃后接种1L液体母种，根据实验要求设计的条件培养完成后，接出1L培养液，摇至菌球在培养液中均匀分布时量取100mL，抽滤、干燥称取菌丝体的重量，每处理设3个重复。
1.2.2 气压对萌发菌MY-001菌丝生长的影响分别设置液体菌种培养器内的气压为0.020MPa、0.035MPa、和0.050MPa，参照1.2.1的方法，培养120h后，观察菌球的形态，称取菌丝体的重量，每处理设3个重复。
1.2.3 发酵液成分及比例对萌发菌MY-001菌丝生长的影响根据前期的研究成果，以1L培养基马铃薯100g、葡萄糖15g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1g、泡敌0.3mL、维生素B 0.005g为基础，分别添加红糖0、10g、20g，麦麸10g、15g、20g、25g及蛋白胨0、1g、2g，参照1.2.1的方法，培养120h后，称量菌丝体的生物量，每处理设3个重复。
1.2.4 萌发菌MY-001菌丝生物量生长曲线在以上筛选获得的菌丝最佳条件下培养，48h后每隔12h参照1.2.1的方法，称取菌丝体的重量，以培养时间为横坐标，菌丝体生物量为纵坐标绘制生长曲线。
数据分析用软件SPSS13.0进行。
1.2.5 栽培种基质比例对萌发菌MY-001菌丝生长速度的影响萌发菌栽培种培养基质主要由壳斗科植物树叶、阔叶树木屑及麦麸混合组成，为节省生产成本同时方便野外种植时的使用，以壳斗科植物树叶含量60%为基础，参照表1中的比例调整木屑和麦麸。
在17cm×33cm 的聚丙烯食用菌袋中装入定量的培养基质，灭菌冷却后，每袋接种20mL液体菌种，25℃培养7d后用记号笔在聚丙烯食用菌袋上划出菌丝的生长线，并以此为基线，一个月后记录菌丝生长速度和菌落生长特征，每处理设5个重复。
表1 培养基质中树叶、木屑和麦麸比例（%）[序号＼&树叶＼&木屑＼&麦麸＼&1#＼&60＼&20＼&20＼&2#＼&60＼&25＼&15＼&3#＼&60＼&30＼&10＼&4#＼&60＼&35＼&5＼&5#＼&60＼&40＼&0＼&]2 结果与分析2.1 气压对萌发菌MY-001菌丝生长的影响液体菌种培养器的气压对萌发菌MY-001菌丝生物量的影响见表2。
表2显示，气压对菌丝生物量具有显著影响，在低气压状态时菌球生长状况较好，具有明显的毛刺，静止后悬浮于培养液中，当气压在0.020～0.035MPa时菌丝生物量之间不存在显著差异，气压在0.020MPa时达到（0.53±0.03g）。
表2 气压对菌丝生长的影响[培养器内气压（MPa）＼&菌丝生物量（g）＼&菌球生长形态＼&0.020＼&0.53±0.03A＼&菌球形态正常，具有明显的毛刺，静止后悬浮于培养液中，少量菌丝分散而不成球状。
＼&0.035＼&0.50±0.02AB＼&菌球形态均匀，具有明显的毛刺，但分散菌丝较多。
＼&0.050＼&0.49±0.03B＼&菌丝易老化，大量菌丝分散浮于发酵液表层。
＼&]注：菌丝生物量由平均值±标准误差（SE）表示；不同大写字母表示差异显著（P2.2 发酵液成分及比例对萌发菌MY-001菌丝生物量的影响发酵液主要成分红糖、麦麸和蛋白胨对萌发菌MY-001菌丝生物量的影响见表3。
由表3可知，在液体菌种培养器中随着红糖、麦麸和蛋白胨的增加菌丝生物量也在增加，但为降低生产成本又不影响生长效果，最佳比例为红糖10g/L、麦麸15g/L、蛋白胨1g/L。
表3 发酵液成分及比例对萌发菌MY-001菌丝生物量的影响[红糖（g/L）＼&菌丝生物量（g）＼&麦麸（g/L）＼&菌丝生物量（g）＼&蛋白胨（g/L）＼&菌丝体重量（g）＼&0＼&0.45±0.03A＼&10＼&0.56±0.03A＼&0＼&0.63±0.01A＼&10＼&0.53±0.04B ＼&15＼&0.59±0.02AB＼&1＼&0.72±0.03B＼&20＼&0.55±0.03B＼&20＼&0.63±0.02B＼&2＼&0.74±0.02B＼&＼&＼&25＼&0.65±0.03B＼&＼&＼&]注：菌丝生物量由平均值±标准误差（SE）表示；不同大写字母表示差异显著（P2.3 萌发菌MY-001菌丝生物量生长曲线由图1可知，萌发菌菌丝生物量生长随时间的变化呈“S”型增长，84h以前为增长延迟期，84～144h为对数增长期，144h以后进入稳定期。
因此，在萌发菌发酵工艺生产过程中，在发酵培养144h即可获得较高的生物量。
采用SPSS13.0进行分析，平均生物量（Y）与发酵时间（X）的关系符合逻辑斯蒂曲线模型（F=426.203，P=0.000Y=[10.87+126.75×0.951x]，产孢量的实际观测值与数学模拟值能够较好的重合（图1），模型确定系数R2达97.7%，所获得的参数能通过t检验（t=3.418，P=0.007图1 菌丝生物量观测值与逻辑斯蒂方程拟合值的比较2.4 栽培种基质比例对萌发菌MY-001菌丝生长速度的影响栽培种基质的不同比例对萌发菌MY-001菌丝生长速度的影响见表4。
表4显示，基质主要成分壳斗科植物树叶、阔叶树木屑和麦麸各占60%、25%和15%时菌丝生长速度最快，达（0.52±0.02）cm/d，但考虑到降低生产成本又不显著影响菌丝生长效果，当壳斗科植物树叶、阔叶树木屑和麦麸各占60%、30%和10%时，菌丝日均生长速度为（0.48±0.05）cm/d，与1#相比不存在显著差异，但成本较低。
表4 栽培种基质比例对萌发菌MY-001菌丝生长速度的影响[序号＼& 基质成分比例（%）＼&菌丝日均生长速度（cm/d）＼&差异显著性＼&树叶＼&木屑＼&麦麸＼&1#＼&60＼&20＼&20＼&0.51±0.04＼&A＼&2#＼&60＼&25＼&15＼&0.52±0.02＼&A＼&]（下转176页）（上接18页）[序号＼& 基质成分比例（%）＼&菌丝日均生长速度（cm/d）＼&差异显著性＼&树叶＼&木屑＼&麦麸＼&3#＼&60＼&30＼&10＼&0.48±0.05＼&AB＼&4#＼&60＼&35＼&5＼&0.43±0.03＼&B＼&5#＼&60＼&40＼&0＼&0.33±0.05＼&B ＼&]注：菌丝生物量由平均值±标准误差（SE）表示；不同大写字母表示差异显著（P3 讨论与结论目前在各天麻产区菌种的需求量日益扩大，随着生物发酵工程技术的发展，由于液体发酵具有生产成本低、时间短、生产快、污染少等特点，将取代传统、朴素的固体制种技术成为趋势[6]。