革兰氏染色技术关键操作步骤

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革兰氏染色机理

革兰氏染色机理介绍革兰氏染色是一种常用的细菌染色技术，能够将细菌分为革兰阳性和革兰阴性两类。

本文将详细介绍革兰氏染色的原理、步骤和应用。

原理革兰氏染色的原理是利用革兰阳性和革兰阴性细菌细胞壁的差异，通过染色后的颜色反映出两者的区别。

步骤革兰氏染色步骤如下：准备细菌样品1.取一份细菌培养液的样品。

固定细菌样品1.将细菌样品滴在洁净的玻璃片上。

2.用火焰将玻璃片加热，使细菌附着在玻璃片上。

染色1.用紫色碘溶液滴在固定的细菌样品上，静置1分钟。

2.用水冲洗碘溶液。

脱色1.将酒精滴在细菌样品上，直至从玻璃片上脱色。

染色1.用红色素溶液滴在细菌样品上，静置1分钟。

2.用水冲洗红色素溶液。

倒置晾干1.将玻璃片倒置在纸巾上晾干。

结果解读根据革兰氏染色的结果，可以得出以下结论：革兰阳性细菌革兰阳性细菌在染色后呈紫色，这是因为细菌细胞壁含有较多的革兰阳性染色颗粒。

革兰阴性细菌革兰阴性细菌在染色后呈红色，这是因为细菌细胞壁含有较少的革兰阴性染色颗粒。

应用革兰氏染色技术在微生物学领域有广泛的应用，包括但不限于以下方面：细菌分类革兰氏染色可以帮助鉴定不同类型的细菌，根据染色结果可以进行初步的分类和鉴定。

感染诊断医学上，革兰氏染色可以用于感染诊断，帮助医生判断细菌感染的类型和严重程度。

细菌研究在细菌研究领域，革兰氏染色常用于观察细菌形态和细胞壁结构的变化，为研究细菌的生长和繁殖机制提供基础数据。

食品安全革兰氏染色也可以用于食品安全领域，帮助检测食物中是否含有细菌污染物，保障食品的安全性和卫生标准。

总结革兰氏染色机理通过染色反映了革兰阳性和革兰阴性细菌细胞壁的差异。

通过上述步骤，我们可以得到染色后的细菌样品，并通过染色结果对不同类型的细菌进行初步分类和鉴定。

革兰氏染色在微生物学研究、临床医学和食品安全等领域有着广泛的应用。

革兰氏染色步骤6则

革兰氏染色步骤6则以下是网友分享的关于革兰氏染色步骤的资料6篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。

革兰氏染色步骤（1）革兰氏染色步骤步骤革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1、涂片固定。

2、草酸铵结晶紫染1分钟。

3、自来水冲洗。

4、加碘液覆盖涂面染约1分钟。

5、水洗，用吸水纸吸去水分。

6、加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。

7、蕃红染色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗。

干燥，镜检。

染色后，革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色。

细菌分类：革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、链球菌属（肺炎链球菌、草绿色链球菌、肠球菌等）、白喉杆菌、炭疽杆菌、破伤风杆菌、蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要等病原菌革兰氏阴性菌：埃希氏菌属、枸橼酸菌属、假单胞菌属（绿脓杆菌等）、莫拉菌属（卡他莫拉菌等）、奈瑟菌属（淋球菌、脑膜炎双球菌等）、不动杆菌属（鲍曼不动杆菌、罗菲不动杆菌等）、克雷伯菌属（主要是肺炎克雷伯杆菌）、沙门氏菌属、志贺氏菌属（痢疾杆菌等）、黄杆菌属、变形杆菌属、军团菌属、耶尔森菌属、嗜血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、产气杆菌属、霍乱弧菌、阴沟肠杆菌等。

革兰氏染色法的步骤（2）详细阐叙革兰氏染色法的步骤浏览次数：174次悬赏分：0 | 解决时间：2011-5-25 17:44 |提问者：肖箫2011shaw最佳答案革兰氏染色一、目的：在细胞发放之前，利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测，判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。

二、原理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

革兰氏染色的过程和原理

革兰氏染色的过程和原理
革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，通过此方法可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。

该染色方法基于不同细菌细胞壁组成的差异，通过特定的染色步骤使细菌在显微镜下呈现不同的颜色。

革兰氏染色的过程包括以下几个步骤：
1. 取一片细菌培养物，涂抹在玻片上，使其形成薄膜。

2. 将涂片在火焰中烘烤，以使细菌附着在玻片上。

3. 将烘烤后的涂片浸入革兰氏紫染色剂中，静置数分钟。

4. 用蒸馏水冲洗涂片，直至洗涤液不再有紫色溢出。

5. 在涂片上滴加碘酒，静置一段时间。

6. 用蒸馏水冲洗涂片，直至洗涤液不再有颜色溢出。

7. 滴加脱色剂（乙醇或乙醚）在涂片上，迅速冲洗。

8. 用蒸馏水冲洗涂片，直至洗涤液不再有颜色溢出。

9. 滴加革兰氏染色剂（碱性洋红）在涂片上，静置1-2分钟。

10. 用蒸馏水冲洗涂片，直至洗涤液不再有颜色溢出。

11. 用纸巾或吹风机轻轻吹干涂片。

12. 使用显微镜观察涂片下的细菌。

革兰氏染色的原理是基于细菌细胞壁的差异。

革兰氏阳性菌的细胞壁含有较厚的层状壁，并富含肽聚糖和穿孔蛋白，所以在革兰氏紫染色剂作用下会显现紫色。

而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，内层有脂多糖包裹，所以在革兰氏紫染色剂作用下不易显现出紫色。

革兰氏染色是一种常用的初步细菌分类方法，通过观察细菌在显微镜下的染色特性，可以初步判断细菌的类型，对于临床诊断和细菌研究都有重要意义。

革兰氏染色实验步骤

革兰氏染色一．实验流程：1、取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。

涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。

2、涂片：液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。

固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀。

3、晾干：让涂片在空气中自然干燥。

4、固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。

5、染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min。

6、水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。

简单染色结束可观察细胞形态。

7、媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。

8、脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗。

9、复染：滴加蕃红复染3-5min，水洗。

至此，革兰氏染色结束。

二．染色结果：革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色。

备注：1.革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、链球菌属（肺炎链球菌、草绿色链球菌、肠球菌等）、白喉杆菌、炭疽杆菌、破伤风杆菌、蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要等病原菌。

2.革兰氏阴性菌：埃希氏菌属、枸橼酸菌属、假单胞菌属（绿脓杆菌等）、莫拉菌属（卡他莫拉菌等）、奈瑟菌属（淋球菌、脑膜炎双球菌等）、不动杆菌属（鲍曼不动杆菌、罗菲不动杆菌等）、克雷伯菌属（主要是肺炎克雷伯杆菌）、沙门氏菌属、志贺氏菌属（痢疾杆菌等）、黄杆菌属、变形杆菌属、军团菌属、耶尔森菌属、嗜血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、产气杆菌属、霍乱弧菌、阴沟肠杆菌等。

革兰氏染色关键步骤

革兰氏染色关键步骤革兰氏染色是一种广泛应用于微生物学研究中的染色方法，通过染色使细菌分为革兰阳性和革兰阴性两类，这对于鉴定和分类细菌非常重要。

下面将详细介绍革兰氏染色的关键步骤。

一、准备工作1.1 培养基选择首先需要选择适合的培养基进行培养。

不同种类的细菌需要不同的培养基，例如大肠杆菌需要在LB培养基上生长。

1.2 细菌培养将选好的培养基加入试管中，接种适量的细菌，在恒温摇床上进行培养。

通常情况下，需要在24小时内达到足够数量的细菌。

二、制备干片2.1 净化玻璃片用肥皂水或其他清洁剂清洗玻璃片，并用去离子水冲洗干净。

然后用96%乙醇消毒玻璃片。

2.2 制备干片取出消毒好的玻璃片，在干燥无尘环境下放置至少30分钟。

然后用铅笔在玻璃片上标记编号。

三、染色步骤3.1 固定细菌将培养好的细菌取出，滴在制备好的玻璃片上。

然后用火焰将玻璃片加热，使细菌固定在玻璃片上。

3.2 染色将固定好的细菌涂上革兰紫染料，静置1分钟。

然后用去离子水冲洗干净。

3.3 醋酸洗涤将涂有革兰紫染料的细菌加入醋酸中浸泡30秒钟。

然后用去离子水冲洗干净。

3.4 染色再次涂上碘化钾溶液，静置1分钟。

然后用去离子水冲洗干净。

3.5 酒精洗涤将涂有碘化钾溶液的细菌加入95%乙醇中浸泡30秒钟，直到颜色变浅。

然后立即用去离子水冲洗干净。

3.6 洗涤和对比染色最后将细菌涂上对比染料（如苏丹红），静置1分钟。

然后用去离子水冲洗干净，并将玻璃片倒立在滤纸上晾干。

四、观察结果4.1 革兰阳性细菌革兰阳性细菌在染色后呈紫色或紫红色，因为它们的细胞壁含有大量的多糖和类脂质。

4.2 革兰阴性细菌革兰阴性细菌在染色后呈粉红色或红色，因为它们的细胞壁只含有一层较薄的多聚肽和脂质。

总结革兰氏染色是一种简单而有效的方法，用于鉴定和分类微生物。

通过以上步骤可以得到清晰可见的结果，从而为微生物学研究提供了重要依据。

革兰染色的原理及操作步骤

革兰染色的原理及操作步骤
革兰染色是一种细菌分类方法，它将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。

下面是革兰染色的原理及操作步骤：
原理：
革兰染色是利用细菌细胞壁的化学特性，即细菌细胞壁中革兰染色阳性菌为厚壁菌，细胞壁中有大量的多聚糖-激霉素并具有蓝紫色的染色反应；革兰染色阴性菌则为薄壁菌，细胞壁中不含有多聚糖-激霉素，故革兰染色阴性菌染色后反应为粉红色。

操作步骤：
1. 在洁净的玻璃片上涂上待测菌液。

2. 用火铅笔或者蜡烛在玻璃片上制作标记，然后将标记的位置在火焰中消毒。

3. 将玻璃片放在草绿色三角内，加上革兰染色试剂1号溶液（结晶紫），滴加约1滴并静置1分钟。

注意不要让液滴外溢到盛有菌液的位置。

4. 用蒸馏水冲洗一下涂片表面，然后用吸水纸擦干。

5. 加上革兰染色试剂2号溶液（碘化钾），滴加约1滴并静止1分钟，注意不要让液滴外溢到盛有菌液的位置。

6. 用蒸馏水冲洗一下涂片表面，然后用吸水纸擦干。

7. 倒掉残留的水分，用酒精（乙醇或己烷）直接把片子全覆盖约30s，然后倾倒掉酒精，再使用蒸馏水冲洗。

8. 用吸水纸轻轻擦干玻璃片上的细菌。

9. 加上革兰染色试剂3号溶液（碱性洗涤液），在玻璃片上滴加约1滴，静置约20秒钟。

10. 用蒸馏水冲洗一下涂片表面，然后用吸水纸擦干。

11. 在涂片上滴上碧绿色的对比染色剂（也称为胡萝卜素溶液），把液滴均匀地覆盖到涂片上，以使简化后的革兰染色细菌能更显著地显现出来。

12. 用蒸馏水冲洗一下涂片表面，然后用吸水纸擦干。

13. 用显微镜观察玻璃片上的细菌，革兰染色阳性菌显示为蓝紫色，而革兰染色阴性菌则显示为粉红色。

革兰氏染色实验步骤

革兰氏染色一．实验流程：1、取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。

涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。

固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀。

3、晾干：让涂片在空气中自然干燥。

4、固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。

5、染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min。

6、水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。

简单染色结束可观察细胞形态。

7、媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。

8、脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗。

9、复染：滴加蕃红复染3-5min，水洗。

至此，革兰氏染色结束。

二．染色结果：革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色。

如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！。

革兰氏染色法操作规程

革兰氏染色法操作规程一、实验准备1.工作台、培养瓶、试管、移液器等必需设备材料的清洁和消毒。

2.需要的培养基、试剂和染色剂的准备。

3.微生物实验室内的操作区域消毒。

4.需要检测的细菌样本，应是新鲜培养的活菌。

二、实验步骤1.将培养的细菌接种物涂布于平板培养基上，培养时间一般为16小时到24小时，以获得足够数量的活菌。

2.取一到两个细菌菌落，用无菌吸铬钢线将菌落挑取，加入到新鲜制备的无菌蒸馏水中制备细菌悬浮液。

3.将细菌悬浮液分装到无菌试管中，并对其进行标记以便辨别。

4. 将试管放入无菌离心机进行离心处理，离心速度一般为3000rpm，离心时间约为5分钟。

5.取出离心后的试管，将离心液倾倒掉，保留细菌沉淀。

6.用无菌注射器吸取一定量的蒸馏水，在细菌沉淀中做三次洗涤，每次洗涤后进行离心处理。

7.吸尽洗涤液后，用吸水纸吸去残余水分，使细菌沉淀尽量干燥。

8.用火焰消毒的铅笔划定干净试验玻片两侧的带标记区域。

9.取少量细菌沉淀用铅笔将其在试验玻片上涂成条状。

10.将涂有菌液的玻片放置在火焰中加热烘干，将菌液固定在玻片上。

11.将固定好的玻片依次进行以下操作：(1)滴加革兰氏碘液，静置1分钟。

(2)用蒸馏水清洗草绿色的碘液，盖过玻片的边缘。

(3)滴加酒精洗涤剂(80%)，使玻片浸泡在酒精中，30秒内亮紫色的溢出。

(4)用蒸馏水冲洗玻片，直至玻片溢出无色为止。

(5)滴加索式葡萄染料，使玻片完全覆盖，静置30秒。

(6)用蒸馏水冲洗玻片，直至落出少量菌落。

12.用吸水纸将玻片表面水分吸干，然后放置在通风处晾干。

13.晾干后的玻片放到显微镜下，用油镜检测。

14.观察和记录细菌的形态特征，包括革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌的结构差异。

三、实验注意事项1.所有的试剂和设备都要经过严格消毒处理，防止外部污染。

2.操作过程中要注意无菌操作，避免细菌受到污染。

3.离心过程中要注意离心机的平衡，以免产生震动。

4.细菌沉淀尽量干燥，以便于后续染色步骤。

革兰氏染色及镜检操作规范培训

革兰氏染色及镜检操作规范培训革兰氏染色及镜检是微生物学研究中最重要的技术之一。

正确的操作规范和技巧是保证实验结果正确、可靠的前提。

本文将对革兰氏染色和镜检的操作规范进行详细的介绍和讲解。

一、革兰氏染色操作规范革兰氏染色是一种常用的染色方法，可以将细菌分为两类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，这种染色方法可以用于细菌鉴定、分类和定量分析。

革兰氏染色的操作规范如下：1. 革兰氏染色的准备（1）将玻璃片用肥皂水仔细清洗，然后用去离子水冲洗干净，用80％的酒精擦干。

（2）在玻璃片上滴上一滴细菌培养物。

（3）用火焰将铁钳消毒，将铁钳夹住玻璃片浸入火焰中烘烤，使其彻底干燥。

2. 革兰氏染色的染色步骤（1）在烘干的玻璃片上滴上革兰染色液，使细菌培养物全部被液体覆盖。

（2）在额外的碟子中加入足量的甲醇作为脱色剂。

（3）将染色液在加蓝色的染色液中浸泡30秒至1分钟，取出后用去离子水洗净，然后在加甲醇的碟子里沉浸，30秒后取出。

（4）清洗后，用去离子水将杯中剩余的脱色液去掉。

（5）将玻璃片在空气中自然干燥。

3. 革兰染色的阅读和解读（1）使用100倍镜镜头检查染色玻璃片，涂片上应该存在细胞的形态。

（2）使用油浸镜头检查涂片，检查细胞壁的结构是否为革兰染色阳性或阴性。

（3）如果菌体足够大，细菌的形态、形状、链式、聚集形式以及革兰染色的反应都可以被观察到。

（4）革兰氏阳性菌有一个厚实的细胞壁，可以染成紫色，而革兰氏阴性菌则具有薄壁，染成红色。

二、镜检操作规范镜检是一种对微生物学病原体进行快速鉴定的技术。

操作规范和技巧可以确保正确和可靠的结果。

具体操作规范如下：1. 采样采集样本时，必须注意卫生、清洁，并且使用合适的采集器具。

采集后，要尽快送样检测，以避免细菌的生长和多余的外来细菌。

2. 具体操作规范（1）使用洁净的显微镜台面，并将物镜和目镜放在正常位置上。

（2）将样本涂在玻璃片上，加入一滴清洗液，进行均匀的混合。

（3）旋转盖片，适当使样本均匀涂展在玻璃片上。

革兰氏染色的机理及步骤

革兰氏染色的机理及步骤
革兰氏染色法是一种根据细胞内细菌细胞壁的结构特征来辨别和鉴定
细菌的一种常用技术。

该技术最初是由德国科学家哈尔·革兰 (Hans Christian Gram)于1884年提出的，故称为“革兰氏染色”，也称为“革
兰氏分解染色”。

一、去颗粒步骤
1、将标本涂在热型固定片上，然后用容积为100毫升的细菌液，在
塑料滤膜上均匀涂抹；
2、把固定片置于热水浴中，把表面上的涂片分散成微小的颗粒，然
后用蒸汽烘烤，使其溶解，就是所谓的“去颗粒”步骤；
3、在一定的时间（一般是3-5分钟）内，把标本从热水中取出，放
入水槽中，用温水洗去多余的染色剂和固定液。

二、染色步骤
1、把每张固定片均匀地涂上革兰氏染料，一般为淡蓝色的彩色染料；
2、将染色后的固定片置于热水浴中，使其溶解，形成颗粒；
3、先把标本从热水中取出，放入水槽中，然后再放入5%（或更低）
的硫酸银溶液中，这时，染色料会依据细菌细胞的结构特征不同或较快或
较慢地被硫酸银离解，而细菌细胞也会被银离解；
4、当硫酸银完全离解掉时，将固定片取出。

1.归纳革兰氏染色法操作步骤、注意事项和实验结果

1.归纳革兰氏染色法操作步骤、注意事项和实验结果下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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革兰氏染色的关键步骤

革兰氏染色的关键步骤
革兰氏染色是一种常用于细菌诊断和鉴定的染色方法。

革兰氏染色(Gram's staining)是1884年由Hans Christian Gram发明的一种染色技术，它实现了细菌的初步分类，帮助识别细菌类型以及培养媒介中细菌的存在。

革兰氏染色可将细菌分为两大类：革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，它们的染色特征不同，
由此可以比较出被染色的细菌的形态。

革兰氏染色的关键步骤包括：
1. 从培养液或培养基中获取样本，采用玻片或薄层染色，将涂有细菌的玻片放入热水浴
管中，然后用湿拭的纱布将热水浴管罩住，使玻片與浴液形成密封，然后在76~87℃的恒
温水浴中，持续加热、搅拌和蒸汽保温蒸汽毛，将湿拭蒸汽毛玻片水分蒸发，让固有菌滴
凝结成膜，凝结后将其拿出热水浴，放置冷凝室，冷凝至室温。

2. 用碘酒至少涂抹玻片两次，每次熄灭火焰，一次空气浸泡1~2分钟，一次水浸泡1~2
分钟。

3. 采用革兰氏染色液，将染色液倒入密封干净的染色管中，然后加热，使其升温至50度，保持恒温约15~20分钟，然后把玻片浸入其中，放在恒温器中调整温度至25度，充份搅拌，浸泡2~4分钟。

4. 将玻片拿出，用蒸气浸泡一次然后用水冲洗，最后待玻片干燥后即可观察细菌的形态，对比染色后的过程，以判断是Gram阳性菌还是Gram阴性菌。

革兰氏染色是一种初步筛查细菌感染的实验技术，其步骤很简单，无需昂贵的设备。

有效
的实施革兰氏染色，可以帮助诊断师在细菌病诊断中获得更好的结果。

革兰染色步骤及其注意事项

革兰染色的步骤包含初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是，加上结晶后，染色一分钟，水洗。

加上碘液后染色一分钟，水洗。

加上95%酒精，摇动玻片。

根据厚度脱色约20到60秒，水洗，吸去水分。

加上番红后染色一分钟，水洗。

吸干或在空气中晾干后，可以进行油镜镜检。

革兰染色的关键在于掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性仅可以被误染为阴性，而脱色不够时，阴性菌可以误染为阳性菌。

操作中的注意事项，标本涂片不能太厚，玻片通过火焰的温度不能太高，碘液变透明，则不能使用，水洗时动作要轻柔。

革兰氏染色法的步骤

革兰氏染色法的步骤革兰氏染色法的步骤革兰氏染色法是一种常用的细菌分类和鉴定方法。

它根据细菌细胞壁的结构和化学成分，将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。

下面将详细介绍革兰氏染色法的步骤。

一、准备工作1.1 器材准备首先要准备好必要的器材，包括显微镜、无菌玻璃片、无菌钢笔、灯笼或 Bunsen 灯、草酸洗涤液、碘酒、脱色剂（95% 乙醇）、甲苯或二甲苯等。

1.2 样品准备样品可以是从患者体内采集的分泌物或组织样本，也可以是实验室中培养出来的纯种菌株。

无论哪种样品，都需要进行处理以获得高质量的染片。

二、染色操作2.1 制备涂片将无菌玻璃片取出并标记，然后用无菌钢笔在玻璃片上滴上一滴水或生理盐水。

取一小部分样品，用钢笔或无菌棉签将其涂抹在涂片上，制成薄而均匀的染片。

2.2 固定细胞将涂片用灯笼或 Bunsen 灯加热，使其完全干燥。

然后将涂片固定，可以使用草酸洗涤液或甲醛等固定剂进行固定。

2.3 染色操作（1）革兰阳性菌的染色操作① 将碘酒滴在涂片上，静置 1 分钟。

② 用脱色剂（95% 乙醇）冲洗涂片，直到洗出的颜色不再变深。

③ 用甲苯或二甲苯清洗干净，并在空气中晾干。

（2）革兰阴性菌的染色操作① 将甲基红溶液滴在涂片上，静置 1 分钟。

② 用脱色剂（95% 乙醇）冲洗涂片，直到洗出的颜色不再变深。

③ 将碘酒滴在涂片上，静置 1 分钟。

④ 用脱色剂（95% 乙醇）冲洗涂片，直到洗出的颜色不再变深。

⑤ 用甲苯或二甲苯清洗干净，并在空气中晾干。

三、观察和解释结果使用显微镜观察染色后的涂片。

革兰阳性菌会呈现紫色或暗紫色，而革兰阴性菌则会呈现红色或粉红色。

根据细菌的染色结果，可以推断出其细胞壁的结构和化学成分，进而进行分类和鉴定。

总结革兰氏染色法是一种简单而可靠的细菌分类和鉴定方法。

其步骤包括制备涂片、固定细胞、染色操作以及观察和解释结果。

通过这种方法，可以将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌，并推断出其细胞壁的结构和化学成分，为临床诊断和治疗提供重要参考依据。

革兰染色步骤

革兰染色步骤
革兰染色步骤
利用革兰染色可以鉴定致病菌的种类。

它是一种很受欢迎的微生物学技术。

革兰染色的步骤如下：
（1）将细菌涂在滑片上，并将滑片放在壁炉上蒸发。

（2）将滑片放入70 %乙醇中浸泡1-2 分钟。

（3）将滑片放入革兰染料液中浸泡2-3 分钟，以完成染色。

（4）将滑片中细菌洗涤2-3 次，然后放在空气中除去残余染料。

（5）将滑片放入抗原性活性剂溶液中浸泡2-3 分钟。

（6）在细胞壁上进行自然染色，以显示应用的血清中的抗体。

（7）用氙气灯或显微镜观察滑片上的细菌。

革兰染色是一种非常有效的技术，用于记录准确的学习或诊断结果，并可以帮助专业人士有效地识别样本中存在的微生物类型和特定抗原。

在使用革兰染色过程中，可以根据所染色的不同部位分析细菌的形态结构，发现新的抗药性株，大大提高了测试的准确性和诊断的区隔度。

另外，革兰染色还能检测样本中的抗原，提供抗原-抗体反应的正确结果。

总之，革兰染色是一种灵活的技术，能够有效地对细菌种类进行鉴定。

使用这种技术有助于准确地识别致病菌类型，改善人们的活动体验和质量，为改善健康水平提供坚实的基础。

革兰氏染色实验步骤

革兰氏染色【2 】一．试验流程：1. 取载玻片用纱布擦干,载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致肯定菌液滴的地位）.涂菌的部位在火焰上烤一下,除去油脂.2. 涂片：液体造就基：左手持菌液试管,在酒精灯火焰邻近5cm阁下打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在干净无脂的载玻片上涂直径2mm 阁下的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体造就基：先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而平均.3. 晾干：让涂片在空气中天然湿润.4. 固定：让菌膜朝上,经由过程分焰2-3次固定（以不烫手为宜）.5. 染色：将固定过的涂片放报纸上,滴加草酸铵结晶紫液,染1min.6. 水洗：用水迟缓冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干.简略染色停止可不雅察细胞形态.7. 媒染：滴加1滴碘液,染1min,水洗.8. 脱色：吸去残留水,持续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色,立刻水洗.9. 复染：滴加蕃红复染3-5min,水洗.至此,革兰氏染色停止.二．染色成果：革兰氏阳性菌都呈紫色,革兰氏阴性菌都呈红色.备注：1.革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主如果金黄色葡萄球菌.表皮葡萄球菌等）.链球菌属（肺炎链球菌.草绿色链球菌.肠球菌等）.白喉杆菌.炭疽杆菌.破感冒杆菌.蜡样芽孢杆菌等,个中,金黄色葡萄球菌.肠球菌等为临床重要等病原菌.2.革兰氏阴性菌：埃希氏菌属.枸橼酸菌属.假单胞菌属（绿脓杆菌等）.莫拉菌属（卡他莫拉菌等）.奈瑟菌属（淋球菌.脑膜炎双球菌等）.不动杆菌属（鲍曼不动杆菌.罗菲不动杆菌等）.克雷伯菌属（主如果肺炎克雷伯杆菌）.沙门氏菌属.志贺氏菌属（痢疾杆菌等）.黄杆菌属.变形杆菌属.军团菌属.耶尔森菌属.嗜血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌.流感嗜血杆菌等）.产气杆菌属.霍乱弧菌.暗沟肠杆菌等.。

简述革兰氏染色原理

简述革兰氏染色原理革兰氏染色的原理是基于细菌细胞壁的化学成分不同。

革兰氏阳性菌细胞壁主要由肽聚糖和胆固醇类脂质组成，形成坚固且厚重的细胞壁。

而革兰氏阴性菌则主要由脂多糖、蛋白质和少量肽聚糖等组成，其细胞壁较为薄弱。

在染色过程中，革兰氏阳性菌能够保留染料，显现为紫色，革兰氏阴性菌则不同。

二、革兰氏染色步骤1. 首先取一枚已生长完好的菌落，用滴管加入一滴蒸馏水，将菌落悬浮均匀。

2. 然后将菌液滴于玻片上，用铅笔在玻片上标记菌液位置。

3. 把玻片上的菌液放在一点燃的火焰上进行固定烘烤，待玻片上的菌液干燥。

4. 将玻片浸泡于庚醇中，将玻片上的脂类物质去除。

此步骤是为了让菌液更容易吸收染料。

5. 倒掉庚醇后，用水清洗干净玻片。

6. 将玻片浸泡于丹酚溶液中，用丹酚染菌液。

丹酚是一种碱性染料，能够渗透细菌细胞壁并与其核酸结合。

7. 然后用碘酸钾溶液进行固定，使丹酚染料与菌细胞结合。

8. 再将玻片用乙醇洗去多余的染料。

9. 最后用干燥纸将玻片上的余液吸掉。

10. 将玻片在光学显微镜下进行观察。

三、革兰氏染色的注意事项1. 染色液要均匀涂抹在玻片上，不要太多或太少，以免影响观察。

2. 所使用的所有器材必须清洗干净，不要有任何杂质。

3. 庚醇必须在燃烧时完全蒸发，剩余液体会影响染色效果。

4. 玻片上的菌液需要均匀，否则在染色后会出现漏染现象。

5. 染色后的玻片必须在显微镜下观察，且不要晾干，否则菌色会退色。

革兰氏染色是一种基础的细菌染色方法。

通过对细菌细胞壁的化学成分进行染色，能够快速鉴别出细菌的类型。

对于细菌学研究和微生物学的诊断有着重要的意义。

但在操作过程中需要注意技巧，才能够获得良好的实验结果。

革兰氏染色不仅可以用于鉴别细菌的分类，还可以用于药物敏感性试验，也就是通过不同药物对不同类型的细菌细胞的反应情况，确定不同药物对细菌的杀菌作用。

革兰氏染色还可以用于检测环境中的微生物，比如水样中的细菌、食品中的细菌等。

革兰氏染色原理步骤结果2

革兰氏染色原理：
G＋菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。

呈紫色。

Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

步骤：
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定。

2）草酸铵结晶紫染1分钟。

3）自来水冲洗。

4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。

5）水洗，用吸水纸吸去水分。

6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。

7）蕃红染色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗。

干燥，镜检。

染色结果：
革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色。

大肠杆菌显红色，为革兰氏阴性菌；葡萄球菌显紫色，为革兰氏阳性菌。