肠杆菌科细菌4
肠杆菌科细菌4
摩根摩根菌菌落特征（MAC）
总结
• 引起传染病的： *鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门氏菌 • 腹泻和肠道感染：
*埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森
菌属
总结
• 共同生物学特性： *G-b or G-cb;无芽胞； 多数有鞭毛，能运动； 需氧或兼性厌氧，营养不高； 主要生化特性（四大反应）—发酵葡萄糖、 H2O2+、OXI-、可将硝酸盐还原至亚硝 酸盐。 • Stool SOP
粘质沙雷菌菌落特征（普通琼脂平板）
• 粘质沙雷菌、液化沙雷菌和深红沙雷菌 都是已证实的条件致病菌，其中粘质沙 雷菌是医院感染的重要条件致病菌之一， 是引起肠道外感染的主要病原菌，可导 致肺部感染、脑膜炎、心内膜炎、泌尿 道感染、败血症、输血和外科手术后感 染等。
第十节 变形杆菌属、普罗威登斯 菌属、摩根菌属 一、变形杆菌属 二、普罗威登斯菌属 三、摩根菌属
根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性， KIA为KA++，IMViC为-/++--，可鉴定为变形杆菌。
二、普罗威登斯菌属
（一）分类 （二）细菌特性 （三）临床意义 （四）微生物学检验
雷氏普罗威登斯菌菌落特征（MAC）
三、摩根菌属
（一）分类 （二）细菌特性 （三）临床意义 （四）微生物学检验
第八章
肠杆菌科
华中科技大学附属同济 医院检验科
第九节 沙雷菌属
一、分类 二、细菌特性 三、临床意义 四、微生物学检验
粘质沙雷菌（S.marcescens） 沙雷菌液化群（S.lique faciens group） 臭味沙雷菌（S.odorifera） 普城沙雷菌（S.plymuthica） 深红沙雷菌（S.rubidaea） 无花果沙雷菌（S.ficaria） 嗜虫沙雷菌（S.entomophila） 居泉沙雷菌（S.fonticola）
列出肠杆菌科细菌的检验程序 -回复
列出肠杆菌科细菌的检验程序-回复“肠杆菌科细菌的检验程序”是一个包含多个步骤的过程，用于鉴定和识别肠杆菌科细菌的存在。
这些步骤通常是通过实验室检测和分析细菌样本来完成的。
以下是一种可能的肠杆菌科细菌检验程序的步骤和详细解释。
第一步：实验前准备在进行肠杆菌科细菌的检验之前，需要进行一些必要的实验前准备工作。
这包括准备培养基和培养基的配制工作，准备相应的实验室设备和试剂，并确保实验室符合相关的安全规定。
第二步：制备细菌样本为了进行肠杆菌科细菌的检验，首先需要制备细菌样本。
这可以通过多种途径来完成，例如从患者的样本（如血液、尿液或组织样本）中分离出细菌，或者从环境中分离出细菌。
制备细菌样本的过程可能会包括细菌培养、分离和纯化。
第三步：细菌培养为了得到大量的细菌进行后续实验，需要将细菌样本培养在适当的培养基上。
肠杆菌科细菌通常被培养在大肠杆菌培养基上，该培养基含有包括营养物、香精素和其他必需元素的成分。
将细菌样本接种在培养基上，并在适当的环境条件下（如氧气、温度和湿度）培养细菌。
第四步：形态学特征观察在肠杆菌科细菌的检验过程中，观察和描述细菌的形态学特征是非常重要的。
这包括观察细菌的形状、颜色、大小和结构等。
通过肉眼观察或显微镜观察，可以对细菌的形态学特征进行初步识别，进而帮助确定细菌属于肠杆菌科。
第五步：革兰染色革兰染色是一种常用的检验方法，用于区分细菌是否属于革兰氏阳性或阳性。
它基于细菌细胞的结构和化学组成差异。
通过染色的过程，革兰阳性细菌会呈现紫色，而革兰阴性细菌则会呈现粉红色。
判断细菌是否为肠杆菌科细菌的一种方法是根据其静态染色结果进行初步判断。
第六步：生理和生化特性测试肠杆菌科细菌的检验过程中，对其生理和生化特性进行测试也是必不可少的。
这包括测试细菌在特定环境条件下的生长特性，以及其对特定营养物质和化学反应的反应。
常用的生理和生化特性测试方法包括氧气需求、温度耐受性、酶活性测试和碳水化合物使用。
肠杆菌科细菌的培养与鉴定
－
＋＋
－
－
普通变形杆菌 K/A ＋ ＋ ＋ F ＋ ＋ － －/+ ＋
＋
＋－
－
－
奇异变形杆菌 K/A ＋ ＋ ＋ F － ＋ +/－ +/－ ＋
＋
＋－
＋
－
志贺菌
K/A － － － F －/＋ ＋ － － ＋
－
－－
－
－
沙门菌
K/A ＋ ＋ ＋ F － ＋ － ＋ ＋
－
－＋
＋ +/－
注：A：产酸；K：产碱；+：90%以上菌株阳性；-：90%以上菌株阴性；+/-： （50-90）%菌株阳性；-/+：（50-90）%菌株阴性；沙门菌与志贺菌除鉴定到种以 外，还应进行和特异性血清凝集实验鉴定血清型。
大肠埃希菌生化鉴定反应结果
肺炎克雷伯菌(K. Peumoniae)
革兰染色为阴性杆菌，大小为(0.3-1.5) μm×(0.66)μm。单个、成双或短链状排列。可见透明环状荚膜。
革兰阴性杆菌荚膜
肺炎克雷伯菌(K. Peumoniae)
在血琼脂平板上培养18-24h，形成较大、粘、圆形、凸 起、灰白不溶血的大菌落。
沙雷菌属(Serratia)
血平板上形成光滑、湿润、圆形、中心呈颗粒状的菌落。 大多不透明，可呈现白色、粉色、红色菌落。
血平板上黏质沙雷 菌落形态
巧克力平板上黏质 沙雷菌落形态
总
结
肠杆菌科细菌生化鉴定反应选择：氧化酶、触酶、克氏双 糖铁、半固体、甲基红、V-P、枸橼酸盐、苯丙氨酸脱氨 酶、硝酸盐、尿素、赖氨酸脱羧酶(LYS)、鸟氨酸脱氨酶 (ORN)、精氨酸脱氨酶(ARG)。
第四节 肠道杆菌
S.S.琼脂平板
其它肠道致病菌：淡 黄色半透明小菌落
大肠杆菌在双糖铁培养基中表现：
上层： 乳糖、 硫酸亚铁 下层： 葡萄糖 动力
记录：
葡萄糖 +
乳糖 +
动力 +
H2S
未接种管
大肠杆菌 生长管
—
IMViC试验
靛基质(吲哚、I)实验、甲基红(MR、M)实 验、乙二酰(VP、V)实验、枸橼酸盐利用(C) 试验的合称缩写，常用于鉴定肠道杆菌。 尤其对形态、革兰染色反应和培养特性相 同或相似的细菌更为重要(主要用于鉴别大 肠杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌检 验)。
肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)
黏附素 侵袭素
肠出血性大肠埃希菌(EHEC) 1. 出血性结肠炎
溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome HUS) 2. O157:H7
3. 志贺毒素(shiga toxin,Stx) →糖脂受体 (肠绒毛和肾上皮细胞)
→终止蛋白质合成
肠出血性大肠埃希菌(EHEC)
肠杆菌科的主要代表菌
属 代 表 疾病
埃希氏菌属
大肠杆菌
肠内/外感染
志贺氏菌属
沙门氏菌属 变形杆菌属
痢疾杆菌
伤寒杆菌 变形杆菌
细菌性痢疾
肠热症 尿路感染
耶尔森氏菌
鼠疫杆菌
鼠疫
克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肺炎，气管炎 沙雷菌属 黏质沙雷菌 肺炎
发酵型
氧化型
产碱型
葡萄糖氧化发酵试验 （O-F试验）
氧化酶试验 阳性：紫红色 阴性：无色
分离培养
大肠埃希菌检验程序
分离培养 * 病料—麦康凯平板、血平板上划线分离培养—可疑菌落
肠杆菌科的分类与鉴定
2021/3/24
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粘质沙雷菌在营养琼脂平板上的菌落特征（18—24h）
2021/3/24
40
4、 哈夫尼亚菌属的分类鉴定
该菌属只有一个种,即:蜂房哈夫尼亚菌。其 特点是;不分解乳糖;发酵葡萄糖产酸产气; 动力“+”;I “—” ;V-P “+”;C “+”;赖 氨酸“+” ;鸟氨酸“+” ;H2S “—” ;山梨 醇“—” ;棉籽糖“—” 。
约克纳菌属 Yokenella 肠道菌 58 群 Enteric group 58 肠道菌 59 群 Enteric group 98 肠道菌 60 群 Enteric group 60 肠道菌 63 群 Enteric group 63 肠道菌 64 群 Enteric group 64 肠道菌 68 群 Enteric group 68 肠道菌 69 群 Enteric group 69 肠道菌 137 群 Enteric group 137
沙雷氏菌属中具有临床意义的有三个种,即:粘质 沙雷氏菌、液化沙雷氏菌、深红色沙雷氏菌。
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生化反应 山梨醇 阿拉伯糖
粘质沙雷氏菌 + —
液化沙雷氏菌 + +
深红色沙雷氏菌 — +
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+ —
粘质沙雷氏菌
沙雷氏菌属
山梨醇
+ 阿拉伯糖
—
+
+
液化沙雷氏菌
深红色沙雷氏菌
肠杆菌科的分类与鉴定
2021/3/24
1
肠杆菌科是临床上最常见的一类革兰氏 阴性杆菌,它主要存在于人或动物的肠道 以及自然界的水源、土壤中。在正常情 况下,多数肠杆菌科细菌对人是无害的,有 些菌种还是人体所必需的,这是因为肠杆 菌科在正常寄生部位和正常寄生数量的 条件下对人体具有重要的生理作用:
大肠杆菌属
血流。
新生儿脑膜炎 泌尿道感染：特殊血清型UPEC
（1）肠产毒性大肠杆菌
（Enterotoxigenic E. coli,ETEC）：
引起婴幼儿（小于5岁）和旅游者腹泻。
致病因素；LT或/和ST，定居因子。
常见：O6：K15：H16、O25：K7：H42。 鉴定ETEC主要测定大肠杆菌肠毒素，血 清型有一定参考意义。
一、生物学性状
（一）形态与染色：大小0.4～0.7×1～3um,
无芽胞,大多数 菌株有鞭毛、有菌毛，有些菌 株有多糖类包膜，革兰氏阴性杆菌。
（二）培养特性：
兼性厌氧 ，圆形光滑型菌落。 生化反应：克氏双糖产酸产气 大部分菌株发酵乳糖产酸产气，IMViC试
验为“+、+、-、-”。 即为典型大肠杆菌。
毒素。有神经毒素、细胞毒素和肠毒素性。
血清型为O157：H7 儿童感染量低于100个
夏季多见
(5) 肠集聚型大肠埃希菌 (enteroaggregative E.coli, EAEC)
• 婴儿持续性腹泻 • 致病因子 – 肠集聚耐热毒素（EAST） – 菌毛 – α溶血素
引起胃肠炎的大肠埃希菌
菌株 作用部位 疾病与症状 致病机制
（1）不耐热肠毒素（Heat labile enterotoxin, LT）：对热不稳定， 65℃经30分钟即失活。为蛋
白质，分子量大，有免疫原性。 A1：是毒素的活性部分，与腺苷酸环化 A单位 酶作用。
A2：穿过细胞膜
B单位：与小肠粘膜上皮细胞膜表面的GM1
神经节苷脂受体结合
（2）耐热肠毒素（Heat stable enterotoxin ,ST）：
对热稳定，
分子量小，免疫原性弱。
肠杆菌科的分类与鉴定
志贺氏 菌属
— — —/+ — — — — —
沙门氏 菌属
+ + — +/— +/— —
+ +/—
枸橼酸 杆菌属
+ + —/+
+ +/— +/— —
+
爱德华 氏菌属
+/—
+ + —
+ —
+ —
小肠结肠炎 耶尔森氏菌
—
+ +/— +/— —
+ — +/—
苯丙氨酸脱氨酶试验阴性；葡萄糖酸盐利用试验阴性菌群
四、苯丙氨酸脱氨酶试验阳性 菌群的分类鉴定
苯丙氨酸脱氨酶试验阳性菌群共包括三 个菌属，即：变形杆菌属、摩尔根氏菌 属、普罗维登斯菌属。
生化反应 H2S 鸟氨酸脱羧酶 枸橼酸盐利用 尿素酶 迁徙生长
变形杆菌属 摩尔根氏菌属 普罗维登斯菌属
+
—
—
+/—
+
—
+
—
+
+
—
+/—
+
—
—
苯丙氨酸脱氨酶试验阳性菌群
4、 生物拮抗作用：
肠杆菌科的生物拮抗作用主要靠与病原菌争夺 营养和占据空间位置来实现。此外，大肠埃希 氏菌还产生大肠菌素和酸性物质，抑制志贺氏 菌和金葡菌的生长。
由此可见，肠杆菌科在正常寄生部位和正常寄 生数量的情况下，不仅对人体无害，并且有益， 但如果其寄生部位和寄生数量发生变化，同样 可引起机体的各类病变。因此，肠杆菌科的多 数细菌又被称为“条件致病菌”。
肠杆菌科细菌归纳总结
肠杆菌科细菌归纳总结肠杆菌科（Enterobacteriaceae）是一类常见的革兰氏阴性菌，它包括了许多与人类和动物相关的致病菌，同时也包括了许多与环境和食品卫生相关的菌株。
肠杆菌科细菌的特点是在普通培养基上能够产生气体，并且在革兰染色中呈现棒状。
1. 肠杆菌属（Enterobacter）肠杆菌属是肠杆菌科中的一个重要属，常见的菌株包括粪肠杆菌（Enterobacter cloacae）和黄色肠杆菌（Enterobacter aerogenes）等。
这些菌株广泛存在于土壤、水体以及人及动物的肠道中，有些种类具备耐药性，并且可能引发医院感染。
2. 大肠杆菌属（Escherichia）大肠杆菌属是肠杆菌科中的另一个重要属，其中最著名的是大肠杆菌（Escherichia coli），它一般存在于人和动物的肠道中。
大肠杆菌是一种常见的致病菌，可以引起腹泻、尿路感染等疾病。
此外，某些大肠杆菌菌株还产生毒素，如致命的肠毒性大肠杆菌产生的毒素可以引起严重的食物中毒。
3. 鲍曼不动杆菌属（Klebsiella）鲍曼不动杆菌属是肠杆菌科中的另一个重要属，常见的菌株包括肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）等。
这类菌株是常见的医院感染病原菌，可以引起肺炎、尿路感染以及败血症等严重疾病。
而产超强粘多糖的黏质性肺炎克雷伯菌更是具有高度的传染性和致病性，是医疗环境中的重要威胁之一。
4. 沙门氏菌属（Salmonella）沙门氏菌属是肠杆菌科中的一类重要致病菌，它包括众多血清型，其中一些血清型可以引起食物中毒和沙门氏菌感染。
这些菌株主要存在于动物及其产品中，比如家禽、牛奶和蛋等。
如果不注意食品的卫生状况，摄入被污染的食物可能导致人体感染引起胃肠炎等症状。
5. 艰难梭菌属（Clostridium）虽然肠杆菌科主要是指肠道相关的菌属，但在其中也包括一些与人体肠道无关或者少数与肠道关联不紧密的菌株。
艰难梭菌属是其中之一，该属的细菌广泛存在于土壤和水体中。
肠杆菌科生化鉴定实验
肠杆菌科生化鉴定实验
肠杆菌科是一类常见的革兰氏阴性细菌，可以通过一系列
生化鉴定实验来进行鉴定。
以下是一些常用的肠杆菌科生
化鉴定实验：
1. 硫代硫酸亚铁（TSI）琼脂糖培养基实验：在TSI琼脂
糖培养基上培养菌株，观察菌落的颜色和气体产生情况。
肠杆菌科细菌在该培养基上产生酸和气体，导致培养基中
的pH下降，产生黄色酸性反应。
2. 尿素水解试验：将菌株接种到尿素水解培养基上，观察
培养基的颜色变化。
肠杆菌科细菌中的一些种类能够产生
尿素酶，将尿素水解为氨和二氧化碳，导致培养基变为粉
红色。
3. 大肠杆菌甲醛试验：将菌株接种到含有甲醛的培养基上，观察培养基的颜色变化。
肠杆菌科细菌中的大肠杆菌能够
利用甲醛作为唯一的碳源，产生酸和气体，导致培养基变
为黄色。
4. 气体产生试验：将菌株接种到气体产生管中，观察管内
气体的产生情况。
肠杆菌科细菌中的一些种类能够产生气体，如氢气和二氧化碳。
5. 青霉素酶试验：将菌株接种到含有青霉素的培养基上，
观察菌落的形成情况。
肠杆菌科细菌中的一些种类能够产
生青霉素酶，使得培养基中的青霉素失活，导致菌落形成。
需要注意的是，肠杆菌科细菌的鉴定通常需要结合多个实验结果进行综合判断，单一实验结果可能不足以确定菌株的分类。
此外，不同的肠杆菌科细菌种类可能在生化反应上有差异，因此具体的实验步骤和判断标准可能会有所不同。
4.肠杆菌科
分离培养
标本接种血琼脂和（或）MAC培养 基，37℃孵育过夜，挑选血琼脂上 灰白色、大而粘的菌落和,MAC上红 色、大而肥厚、粘液型光亮且形成 菌丝的菌落。
肠杆菌科
2020年5月28日
肠杆菌科
肠杆菌科是一大群生物学性状相似 的革兰阴性杆菌，长栖居在人和动 物的肠道内，亦存在于水、土壤和 腐败的物质中。肠杆菌科细菌种类 繁多，根据生化反应、抗原结构、 核酸序列分析，目前确定的有44个 属，170多个种，临床标本中约有 40个种可以检出。
肠杆菌科
共同特性 埃希菌属 沙门菌属 志贺菌属 克雷伯菌属 变形杆菌属
抵抗力
肠杆菌科细菌抵抗力不强，加热 60℃、30min既被杀死，不耐干燥， 对一般化学消毒剂如漂白粉、酚、 甲醛和戊二醛等均敏感。对低温有 耐受力。能耐胆盐，并在一定程度 上能抵抗染料的抑菌作用，次特性 已被用于制作肠道选择培养基。
变异性
1.S-R变异：自标本中初次分离的细 菌，菌体抗原上都有特异性多糖链， 菌落为光滑型。在人工培养基中反 复传代或保存日久时，其细胞壁上 的特异性多糖链消失而核心多糖仍 保留，菌落变为粗糙型。
D群为宋内志贺菌（S.sonnei）而沿 用至今。但在最近的CDC分类系统 （1989）中将生化性状相近的A、B、 C群归为一群，统称为志贺菌A、B、 C血清群；而将生化特征与之相异， 鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳 性的宋内志贺菌单列出来。志贺菌 属的DNA G+Cmol%为49~53.
以福氏志贺菌为例
革兰阴性直短杆 状，1.1~1.5μm ×2.0~6.0μm， 多数有鞭毛，能 运动，某些菌株 尤其是引起肠外 感染的菌株有荚 膜（微荚膜）和 周身菌毛
培养特性
在血琼脂平 板上菌落呈 圆形，直径 为2~3mm， 稍凸，边缘 整齐，灰白 色，不透明， 少数菌株产 生β溶血环；
肠杆菌科概述、分类与特性
3. 其中鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌对 人致病性较强。此外，许多细菌既 是正常菌群，也是条件致病菌。在 机体抵抗力下降，寄居部位的改变 或菌群失调时能引起机会感染。
肠杆菌科概述、分类和特性
二、临床意义
占临床分离菌总数的50％和Ｇ-总数的 80％, 将近50％的败血症70％以上的泌尿 道感染和大量的肠道感染是由肠杆菌科 细菌引起的。 1. 人类肠道外感染 除志贺菌较少引起肠外 感染，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产 酸克雷伯菌、奇异变形杆菌、产气肠杆 菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌等均可引 起泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系 统的感染;
⑵ 内毒素 具有发热、休克、DIC等病理作用。
⑶ 肠毒素 产生不耐热和耐热肠毒素两种肠 毒素：均可使肠道细胞中cAMP 的水平升高，引起肠液大量分泌 而导致腹泻。
肠杆菌科概述、分类和特性
二、临床意义 ⑵ 2. 所致疾病 ⑴ 肠道外感染 是临床分离的G-杆菌中最常见的 菌种，可引起泌尿系等各种类型的感染。 引起泌尿系感染的菌株以血清型01、 2、6为多见，本菌还可引起菌血症、 胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎等。 常 见于腹腔内脓肿、肠穿孔继发腹膜炎、 肠道手术后继发感染或大面积灼伤创面 感染。
肠杆菌科概述、分类和特性
4. 培养和生化特性 营养要求不高，在普通培养基上生长
良好；兼性厌氧，主要生化特性包括发 酵葡萄糖(产酸或产酸产气)，触酶阳性, 氧化酶阴性，可将硝酸盐还原至亚硝酸 盐。 5. 抵抗力
抵抗力不强，加热60℃30min即被杀 死，不耐干燥，对一般化学消毒剂均敏 感。对低温有耐受力。能耐胆盐，能抵 抗染料的抑菌作用。
毛，能运动。致病性菌株有菌毛。 2. 抗原成分
⑴Ｏ抗原是细胞壁成分脂多糖。以核 心多糖为中心的三层结构，内侧是脂类 A, 为内毒素的毒性成分。外侧是由重复 的特异多糖，决定Ｏ抗原的特异性。
肠杆菌科
第九章肠杆菌科肠杆菌科（Enterobacteriaceae）细菌是一大群生物学性状近似的革兰阴性杆菌，常寄居在人和动物的肠道内，亦存在于土壤、水和腐物中。
其中大多数是肠道的正常菌群，但当宿主免疫力降低或细菌移位至肠外部位时可成为条件致病菌而引起疾病；少数为病原菌，例如伤寒杆菌、志贺菌、致病性大肠杆菌等。
肠杆菌科细菌种类繁多。
根据生化反应、抗原结构、核酸杂交和序列分析，目前至少有30个菌属，120个以上的菌种。
与医学有关的有埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、变形杆菌属、摩根菌属、枸橼酸菌属、肠杆菌属、沙雷菌属和耶尔森菌属10个菌属，包括25个菌种。
肠杆菌科细菌具有下列共同生物学特性：1．形态与结构0.3-1.0×1-6um中等大小的革兰阴性杆菌。
无芽孢。
多数为周毛菌。
少数有荚膜或包膜。
大多有菌毛。
2．培养兼性厌氧或需氧。
营养要求不高，在普通琼脂平板上生长繁殖后形成湿润、光滑、灰白色的直径2-3mm中等大小菌落。
在血琼脂平板上，有些菌可产生溶血圈。
在液体培养基中，呈均匀浑浊生长。
3．生化反应活泼，分解多种糖类和蛋白质，形成不同代谢产物，常用以区别不同菌属和菌种。
乳糖发酵试验在初步鉴别肠杆菌科中致病菌和非致病菌上有重要价值，一般非致病菌能分解乳糖，而致病菌多数不能。
4．抗原构造复杂，主要有菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原和荚膜（K）或包膜抗原。
其他尚有菌毛抗原。
（1）． O抗原：存在于细胞壁脂多糖（LPS）层，具有属、种特异性。
其特异性取决于LPS分子末端重复结构多糖链的糖残基种类的排列。
O抗原耐热，100℃不被破坏。
从病人新分离菌株的菌落大多呈光滑（S）型，在人工培养基上多次传代移种保存日久后，LPS失去外层O特异性侧链，此时菌落变成粗糙（R）型，是为S-R型变异。
R型菌株的毒力显著低于S型株。
（2）．H抗原：存在于鞭毛蛋白。
不耐热，60℃30分钟即被破坏。
H 抗原的特异性决定于多肽链上氨基酸的排列顺序和空间结构。
临床常见细菌 肠杆菌科
--
苯丙氨酸试验（+） 变形杆菌
摩根菌等
葡萄糖酸盐试验（+） 克雷伯菌 肠杆菌 沙雷菌等
埃希菌 沙门菌 志贺菌 耶尔森菌等
KIA、MIU、IMVC试验等 血清学试验分型
✓食物中毒：粪便、呕吐物、可疑食物 ✓败血症：血 ✓带菌者：粪便
➢分离鉴定
✓增菌（血、骨髓）→EMB、SS→生化反应→血清鉴 定
、
沙门菌检验程序
血清学诊断——肥达反应（Widal）
➢ 原理 用已知伤寒沙门氏菌O抗原及H抗原，以及引起副伤寒 的沙门氏菌H抗原与待检血清作凝集试验，测定待检血 清中有无相应抗体及其效价（TO、TH、PA、PB）
➢抵抗力不强
✓ 耐受胆盐，抵抗多种染料的抑菌作用
➢易出现各种变异
✓ 耐药性 ✓ H-O变异 ✓ S-R变异 ✓ 毒力变异
一、埃希菌属（ Escherichia）
(一）生物学特性
➢ 形态染色 ✓ 符合肠杆菌特点，周鞭毛菌，有菌毛
➢ 培养特性：符合肠杆菌特点 ✓EMB平板——紫黑色有金属光泽 ✓S-S平板——桃红色
➢培养特性
✓肠道鉴别培养基上的无色透明
➢生化反应
✓乳糖（-）（宋内志贺菌迟缓发酵乳糖）、甲基 红（+）、动力（-）
乳糖发酵试验
志贺菌KIA（K A－－） MIU（－－－）
志贺菌IMViC试验（－＋－－）
➢抗原分类——根据O抗原分4群，40余型
✓A群——痢疾志贺菌（10） ✓B群——福氏志贺菌（13） ✓C群——鲍氏志贺菌（18） ✓D群——宋氏志贺菌（1）
、乙型伤寒沙门菌、丙型伤寒沙门菌 食物中毒——鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌
、肠炎沙门菌 败血症——猪霍乱沙门菌最常见
肠杆菌科细菌鉴定
肠杆菌科细菌鉴定1. 引言肠杆菌科（Enterobacteriaceae）是一类常见的革兰氏阴性杆状细菌，广泛存在于自然界中，包括土壤、水体、动物和人体内。
肠杆菌科细菌对人类和动物的健康具有重要影响，它们可以引起多种疾病，包括胃肠道感染、尿路感染、呼吸道感染等。
因此，准确鉴定肠杆菌科细菌对于预防和治疗相关疾病具有重要意义。
本文将介绍肠杆菌科细菌的鉴定方法、常见的鉴定技术以及其在临床和环境领域中的应用。
2. 肠杆菌科细菌的鉴定方法2.1 形态学特征肠杆菌科细菌通常为革兰氏阴性，呈杆状或梭形，并且具有运动性。
它们在营养琼脂平板上形成灰白色至粉红色的圆形或不规则形状的菌落。
2.2 生理生化特性肠杆菌科细菌具有一系列特殊的生理生化特性，可以通过对其代谢产物和酶活性的检测来进行鉴定。
常见的生理生化特性检测包括氧需求、产气、发酵糖类、蛋白质分解等。
2.3 分子生物学方法随着分子生物学技术的发展，PCR和DNA测序等方法在肠杆菌科细菌鉴定中得到了广泛应用。
通过特定基因序列的扩增和比对，可以快速准确地确定细菌的种属和亚种。
3. 肠杆菌科细菌鉴定技术3.1 常规培养法常规培养法是最常用的肠杆菌科细菌鉴定技术之一。
它包括对细菌进行纯培养、观察形态学特征和进行一系列生理生化试验。
这些试验可以通过使用不同培养基和指示剂来检测氧需求、发酵糖类、产气等特征。
3.2 快速鉴定方法为了提高肠杆菌科细菌的鉴定速度和准确性，快速鉴定方法逐渐得到广泛应用。
其中包括基于生化反应的API系统、基于荧光的VITEK 2系统和基于质谱的MALDI-TOF技术。
这些方法可以在短时间内对大量样品进行鉴定，并且具有较高的准确性和可靠性。
3.3 分子生物学方法分子生物学方法在肠杆菌科细菌鉴定中发挥着越来越重要的作用。
通过PCR扩增特定基因序列，如16S rRNA基因，可以快速确定菌株的种属和亚种。
此外，DNA测序技术可以提供更详细的遗传信息，帮助进一步确定细菌的亲缘关系和种类。
肠杆菌科生化鉴定实验
肠杆菌科生化鉴定实验
肠杆菌科（Enterobacteriaceae）是一类革兰氏阴性杆菌，包括许
多人类和动物肠道中常见的细菌。
肠杆菌科的生化鉴定实验是通过
一系列生化反应来确定细菌属的方法。
以下是肠杆菌科生化鉴定实
验的详细步骤：
1. 外观观察：观察菌落形态和颜色，以及菌液的浑浊度和颜色。
2. 革兰染色：将细菌制备的涂片进行革兰染色，观察细菌的形态和
染色反应。
3. 氧需求：通过培养细菌在氧气条件下的生长来确定其氧需求。
肠
杆菌科中的许多细菌是好氧菌，可以在氧气存在下生长。
4. 糖发酵：使用糖盐培养基，如肉汤糖盐琼脂培养基（TSI）或亚
硝酸盐葡萄糖琼脂培养基（GNB）等，观察细菌对不同糖类的发酵情况。
常用的糖类包括葡萄糖、乳糖、蔗糖等。
5. 气体产生：观察细菌在糖盐培养基中是否产生气体，如二氧化碳
和氢气等。
6. 硫代硫酸盐还原：使用含有硫代硫酸盐的培养基，观察细菌是否
能够还原硫代硫酸盐，产生黑色沉淀。
7. 非糖类物质利用：观察细菌对非糖类物质的利用情况，如酪蛋白、尿素等。
8. 酸碱产生：使用酸碱指示剂，观察细菌在糖盐培养基中是否产生
酸碱。
9. 氧化还原酶：使用氧化还原酶试剂，观察细菌是否具有氧化还原
酶的活性。
通过以上步骤，可以根据细菌的生化反应特点来确定其属于肠杆菌科中的哪个属。
需要注意的是，这只是一种初步的鉴定方法，最终的确定还需要进一步的分子生物学鉴定。
肠杆菌科细菌最常见的耐药机制
肠杆菌科细菌最常见的耐药机制摘要：1.肠杆菌科细菌概述2.肠杆菌科细菌的耐药机制3.碳青霉烯类抗菌药物对肠杆菌科细菌的耐药性分析4.肠杆菌科细菌耐药性的变迁特点5.探讨肠杆菌科细菌耐药机制的研究方法正文：1.肠杆菌科细菌概述肠杆菌科细菌是一类广泛存在于自然环境中的细菌，主要生活在水和土壤中。
其中，大部分肠杆菌科细菌对人体无害，但部分细菌可引起人类疾病，如腹泻、败血症等。
近年来，随着抗生素的广泛使用，肠杆菌科细菌的耐药性问题日益严重，给临床治疗带来了很大困难。
2.肠杆菌科细菌的耐药机制肠杆菌科细菌的耐药机制多种多样，主要包括以下几个方面：（1）产β-内酰胺酶：β-内酰胺酶是一类可以水解β-内酰胺类抗生素的酶，如头孢菌素、青霉素等。
肠杆菌科细菌通过产生β-内酰胺酶，降低抗生素的活性，从而产生耐药性。
（2）药物外排泵：药物外排泵是一种可以将抗生素从细胞内泵到细胞外的膜转运蛋白，通过增强抗生素的排出，降低细胞内抗生素浓度，从而产生耐药性。
（3）靶位改变：抗生素通常通过作用于细菌的特定靶位，干扰细菌的正常生理功能，从而达到抑菌或杀菌作用。
部分肠杆菌科细菌通过改变抗生素作用靶位，降低抗生素的抑菌效果，产生耐药性。
（4）增强药物代谢：肠杆菌科细菌通过增强药物代谢酶的活性，加速抗生素在体内的代谢，降低抗生素浓度，从而产生耐药性。
3.碳青霉烯类抗菌药物对肠杆菌科细菌的耐药性分析碳青霉烯类抗菌药物，如亚胺培南、美罗培南等，具有较好的通透性和广谱抗菌活性，但对部分肠杆菌科细菌的耐药性较高。
近年来，对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率逐渐上升，给临床治疗带来了很大挑战。
4.肠杆菌科细菌耐药性的变迁特点肠杆菌科细菌耐药性的变迁特点主要表现在以下几个方面：（1）对不同抗生素的耐药率有所不同：部分肠杆菌科细菌对某些抗生素的耐药率较高，而对另一些抗生素的耐药率较低。
（2）耐药率随时间的推移逐渐上升：随着抗生素的广泛使用，肠杆菌科细菌的耐药率逐渐上升，部分细菌甚至对多种抗生素产生了多重耐药性。
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摩根摩根菌菌落特征（MAC）
总结
• 引起传染病的： *鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门氏菌 • 腹泻和肠道感染：
*埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森
菌属
总结
• 共同生物学特性： *G-b or G-cb;无芽胞； 多数有鞭毛，能运动； 需氧或兼性厌氧，营养不高； 主要生化特性（四大反应）—发酵葡萄糖、 H2O2+、OXI-、可将硝酸盐还原至亚硝 酸盐。 • Stool SOP
一、变形杆菌属
（一）分类 （二）细菌特性 （三）临床意义 （四）微生物学检验
细菌特性
• 形态特征
• 培养特性
• 生化反应
变形杆菌革兰染色
变形杆菌鞭毛染色
变形杆菌迁徙生长现象（普通琼脂平板）
变形杆菌菌落特征（MAC）
变形杆菌KIA（K A+ + ）MIU（+ +/- +）
变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验（＋）
粘质沙雷菌菌落特征（普通琼脂平板）
• 粘质沙雷菌、液化沙雷菌和深红沙雷菌 都是已证实的条件致病菌，其中粘质沙 雷菌是医院感染的重要条件致病菌之一， 是引起肠道外感染的主要病原菌，可导 致肺部感染、脑膜炎、心内膜炎、泌尿 道感染、败血症、输血和外科手术后感 染等。
第十节 变形杆菌属、普罗威登斯 菌属、摩根菌属 一、变形杆菌属 二、普罗威登斯菌属 三、摩根菌属
第八章
肠杆菌科
华中科技大学附属同济 医院检验科
第九节 沙雷菌属一、分类 二、细菌源自性 三、临床意义 四、微生物学检验
粘质沙雷菌（S.marcescens） 沙雷菌液化群（S.lique faciens group） 臭味沙雷菌（S.odorifera） 普城沙雷菌（S.plymuthica） 深红沙雷菌（S.rubidaea） 无花果沙雷菌（S.ficaria） 嗜虫沙雷菌（S.entomophila） 居泉沙雷菌（S.fonticola）
根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性， KIA为KA++，IMViC为-/++--，可鉴定为变形杆菌。
二、普罗威登斯菌属
（一）分类 （二）细菌特性 （三）临床意义 （四）微生物学检验
雷氏普罗威登斯菌菌落特征（MAC）
三、摩根菌属
（一）分类 （二）细菌特性 （三）临床意义 （四）微生物学检验