肠杆菌科细菌介绍
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肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
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临床意义
致病物质 所致疾病
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致病物质
菌毛或菌毛样结构 荚膜或微荚膜
外膜蛋白
内毒素 外毒素
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所致疾病
肠道感染 腹泻、食物中毒、旅行者腹泻、肠热症 肠道外感染 症等 (志贺菌除外)
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革兰氏阴性菌的病原能力通常与其细胞壁组成相关,具体 说来有脂多糖(lipopolysaccharide,又称为LPS或者 内毒素(endotoxin))层。在人体中,LPS可以激发一 种固有免疫反应(innate immune response)这种 反应是通过细胞素制造和免疫系统活化等来描述其特征的 。比如,红肿就是细胞素产生并释放导致的。因为脂多糖 在革兰氏阴性菌的细胞墙表皮,所以大多数或旧型抗生素 都不能有效抑制此类细菌。
抗原结构: O抗原、H抗原、表面抗原
O抗原
耐热,100 ℃不被破坏。
是肠道杆菌血清学分型和分群的主要抗原、如大肠杆菌O157,霍乱弧菌O139 。
IgM型抗体,凝聚反应 0抗原可分三部分:①多糖侧链,肠杆菌科细菌具有不同的糖成分,多糖 的排列也不相同,决定了0抗原的特异性;②核心部分,包括外核心区、 骨架和核心糖脂,肠杆菌科的核心部分相同;③类脂A,与内毒素有关, 可引起与内毒素血症相同的发热、炎症和血液动力学改变的各种临床表现 。
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1. 肠产毒性大肠杆菌 (ETEC)
ETEC 粘 定居因子(colonization factor) 附 又称粘附素(adhesin) 是细菌的特殊菌毛 CFAⅠ/CFAⅡ ( colonization factor antigenⅠ,Ⅱ) 小肠粘膜——以免被肠蠕动、肠分泌液所清除 释 放 肠毒素 由细菌的质粒DNA编码
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大肠埃希菌IMViC试验(++--)
右侧为对照(--++)
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大肠埃希菌抗原结构
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大肠埃希菌检验程序
标本
肠外感染:尿液;脓液;血液 肠道感染:粪便 计数培养
分离培养 纯培养 形态学检查 生化反应 报告结果
毒素检测
血清学试验
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EAggEC)
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引起腹泻的大肠埃希菌
菌株
ETEC
6、8、15、25、 27、78、148、159
作用 部位 小肠
疾病与症状
致病机制
EIEC
28ac、29、112ac 124、136、143。。。
大肠 小肠
EPEC
2、55、86、111、 114、119、125-128、 142、158
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H抗原:即细菌的鞭毛蛋白;
不耐热,60℃ 30分钟即被破坏;
其特异性取决于多肽链氨基酸的组成、排列顺序和空间构型 IgG型抗体
H抗原可能与细菌在尿路中的播散有关。多数肠杆菌科细菌 表面有菌毛,为一种蛋白成分,与细菌对粘膜表面的粘附能 力有关
不耐热肠毒素(heat labile enterotoxin,LT) 65℃30分钟失去活性 耐热肠毒素(heat stable enterotoxin,ST) Company Logo 100℃加热20分钟仍不被破坏
不耐热肠毒素(LT) B亚单位—— 受体:肠粘膜上皮细胞膜
表面的GM1神经节苷脂
A亚单位(毒性活性部分) 穿越细胞膜 活化
腺苷环化酶
ATP cAMP 水、电解质紊乱
腹泻
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LT 检测( CHO细胞培养)
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耐热肠毒素(ST)
鸟苷环化酶
GTP cGMP
水、电解质紊乱
腹泻
临床症状:轻度腹泻/严重的霍乱样症状 是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌
肠杆菌科细菌
主讲:戈红雨 2013-1-28
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革兰氏阴性菌(Gram-negative)
革兰氏阴性菌泛指革兰氏染色反应呈红色的细菌。在革兰氏染色实 验中,首先添加了结晶紫(crystal violet),再添入另一种复染 染料(通常使用番红(safranin)),从而将所有的革兰氏阴性 菌染成红色或粉色。 通过这种测试我们可以区分两种细胞壁结构不同的细菌。革兰氏阳 性菌在反应后的除色溶液中将呈现龙胆紫的颜色。 革兰氏阴性菌细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类含量高。当用乙醇处 理时,脂类物质溶解,细胞壁通透性增强,使结晶紫极易被乙醇抽 出而 脱色;再度染上复染液番红的时候,便呈现红色了。
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形态特征 细菌特性
培养特性
生化反应 抗原结构
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生物学性状
G— 小杆菌,有鞭毛、菌毛、多数菌株有多糖微荚膜。
发酵多种糖类,产酸并产气,大部分菌株迅速发酵乳糖,但引起 肠内感染的菌株(致病性大肠杆菌)不发酵或缓慢发酵乳糖;在
肠道鉴别培养基上呈现有色菌落;IMViC++--,脲酶试验阴
泌尿道感染、肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血
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治疗
在尚未有病原学报告时, 对泌尿道感染和腹膜炎--可按革兰氏阴性杆菌联合使用抗生 素, 对肺炎和败血症者--需兼顾革兰氏阴性和阳性菌。 氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗生素有较长的抗生素后效应, 与内酰胺类连用可增强抗菌活性,延长抗菌作用时间,有 利于感染组织内获得有效的药效浓度。
表面抗原
不耐热,60℃ 30分钟即被破坏; 可阻断O抗原与相应抗体的结合。 荚膜抗原能抑制细菌与0抗血清的凝集,并可促使细菌易于粘 附于粘膜表面,与细菌的侵袭力有关,如:大肠杆菌的Ki抗 原和伤寒杆菌的Vi抗原。
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易变异 通过
接合 转导 溶源性转换 耐药性变异
自发突变
引起
毒力性变异 生化反应性变异
致病菌
肠道正常菌群 条件致病菌 医院感染
肠杆菌科的共同特性
1. 形态染色相似 革兰阴性杆菌 (两端钝圆,无芽胞。多数
细菌有周身鞭毛,能运动,个别细菌有荚膜。多数细菌有菌毛。 本科细菌为需氧和兼性厌氧菌,营养要求不高,在普通培养基上 生长良好,各种细菌菌落大小相似,直径2~3μm。)
2. 培养特性相同 普通培养基上生长良好 3. 生化反应活泼 发酵葡萄糖,氧化酶阴性,触酶阳性 ,还原硝酸盐为亚硝酸盐,O/F试验为发酵型。 4. 抗原构造复杂 5. 抵抗力弱
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周质
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胞质膜(Cytoplasmic membrane): 存在于细胞质中各膜结合 细胞器中的膜,包括核膜、内质网膜、高尔基体膜、溶酶体膜、线粒 体膜、叶绿体膜、过氧化物酶体膜等。 肽聚糖薄层,比革兰氏阳性菌要薄得多 外层膜(outer membrane),是在肽聚糖层之外的膜,内含有脂 多糖,核糖,O抗原 外层膜中还有孔蛋白,允许特定的分子通过 周质(periplasmic space): 指肽聚糖层和外层膜之间的空间 S层直接与外层膜相连,而非肽聚糖层 如果有鞭毛,表毛有四个支撑环而不是两个 没有磷壁酸(teichoic acids)或者脂磷壁酸 多糖骨架上有脂蛋白 大多数革兰氏阴性菌中含有胞壁质脂蛋白(Braun's lipoprotein ),其作用为通过共价键连接外层膜和多糖
卫生学指标
在环境和食品卫生学上,常被用作粪便污染的检测指标 大肠菌群指数 细菌总数 每1000ml水中大肠菌群 数 每1ml或1g样品中细菌总 数
我国的卫生标准: ≤ 3个大肠菌群/1L饮水 ≤ 100个细菌总数/1ml饮水
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重要的实验材料和研究对象
在分子生物学和基因工程实验中
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大肠埃希菌
肠 杆 菌 科
肺炎克雷伯菌
沙门氏菌
痢疾志贺菌
阴沟肠杆菌
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埃希菌属鉴定
肠杆菌科:革兰氏染色阴性、触酶阳性、
氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。
定属和定种试验: KIA(K/AH2S-或A/AH2S-) IMViC(++--) MIU(-+-或++-) 多价血清和单价血清的凝集试验,确定血清型。 致病性大肠杆菌: ETEC-毒素
也是重要的实验材料和研究对象
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致病物质
侵袭力
菌毛、K抗原
内毒素
肠毒素 耐热肠毒素(ST) 不耐热肠毒素(LT)
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致病性
肠道外感染-------机会性感染以化脓感染最为常见:泌尿系统 感染、伤口感染、腹膜炎、阑尾炎、胆囊炎。 在婴儿、老年人:败血症、脑膜炎。 肠道内感染---------腹泻 肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenic E. coli ETEC)
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肠杆菌科
分布:是一大群寄居在人类和动物肠道中、生物学性状近似的 革兰氏阴性杆菌,可随人和动物排泄物广泛分布于土壤、水和 腐物中。其中部分为致病菌,如:沙门菌属、志贺菌属等;而多 数为肠道正常菌群,在一定条件下可以致病,故称为条件致病 菌。 致病:正常菌群--条件致病菌--致病菌、引起多器官、多组织 的病变。
肠侵袭性大肠杆菌(enteroinvasive E. coli
肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic E. coli 肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E. coli
EIEC)
EPEC) EHEC)
肠集聚型大肠杆菌(enteroaggregative E. coli
EIEC-侵袭力试验。
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大肠埃希菌
大肠埃希菌(E.coli)是埃希菌属典型代表。
分布:婴儿出生后数小时即进入肠道,并终生伴随,是人体 肠道正常菌群的重要构成菌。 A:分解代谢产物,抑制痢疾杆菌等致病菌的生长 B:合成 ViB、ViK等,供人体吸收利用。 C:天然抗原, 致病:正常菌群------------肠道外感染 特殊菌株------------肠道内感染
6. 易变异
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发酵型
O-F试验
氧化型
产碱型
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氧化酶试验 阳性:紫红色 阴性:无色
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硝酸盐还原试验 阳性:红色wenku.baidu.com阴性:淡黄色
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4、抗原构造复杂
鞭毛抗原(H)
K或Vi抗原
菌体抗原(O)
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ST检测(乳鼠灌胃试验)
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2、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)
无外毒素---肠毒素,但有强的侵袭力(类似痢疾杆菌) 定位于结肠 侵入肠粘膜上皮细胞,生长繁殖,产生内毒素。
破坏细胞形成炎症和溃疡,
引起腹泻,呈脓血便 ,有里急后重,
种类:肠杆菌科、种类众多,30个菌属、120多个菌种。
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包括 ——埃希菌属 ——志贺菌属 ——沙门菌属 ——耶尔森菌属 ——肠杆菌属 ——变形杆菌属 ——克雷伯菌属 ——摩根菌属 ——枸橼酸菌属 ——肠杆菌属 ——沙雷菌属 ——普罗2wei
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EHEC
157、26、111
大肠
EAggEC
42、44、3、86
小肠
旅行者腹泻,婴幼儿腹泻,LT 和(或)ST 肠毒素,大 水样便,恶心,呕吐,腹 量分泌液体和电解质 痛,低热 水样便,少量血便 ,腹痛, 质粒介导侵袭和破坏结肠粘 发热 膜上皮细胞 婴儿腹泻,水样便,恶心, 粘附和破坏上皮细胞 呕吐,发热 -I -II 水样便,大量出血,剧烈 SLT 或 SLT ,中断蛋白质 腹痛,低热或无,可并发 合成 HUS、血小板减少性紫癜 婴儿持续性腹泻,呕吐, 集聚性粘附上皮细胞,阻止 脱水,低热 液体吸收
性、硫化氢试验阴性。
三种抗原,血清型表示式-------- O:K:H
O111:K58:H2
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大肠埃希菌革兰染色
大肠埃希菌电镜图
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大肠埃希菌菌落特征(血平板)
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大肠埃希菌菌落特征(MAC)
大肠埃希菌KIA(AA+-)MIU(++-)