消化系统疾病动物模型

Breaks down urea (NH2CONH2) to NH3 and HCO-3
Stomach acidity
Chassaing B. Gastroenterology, 2011,140(6):1720–8
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王慷慨
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实验动物
小鼠（18-22g），蒙古沙鼠（55-60g），仔犬、仔猪
溃疡的形成主要由于防御因素和致溃疡因素的 平衡失调所致。
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急性胃溃疡动物模型
常用的方法
① 应激法 ② 幽门结扎法
乙醇 组胺 促胃液素 肾上腺类固醇
③ 药物法 ④ 醋酸法
水杨酸盐 血清素 利血平
保泰松
……
在抗溃疡药物药效学试验中，应激法、幽门结
扎法和醋酸法制备的胃溃疡模型为必做实验，利血
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一、四氯化碳急性肝损伤模型
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造模机制
CCl4急性肝损伤模型
CCl4在肝内经NADPH和肝微粒体细胞色素P450混合功
能氧化酶的作用，生成活泼的三氯甲基自由基（CCl3•）和氯
自由基（Cl3•） 。 这些自由基能与细胞内和细胞膜上大分子发生共价结合，
引起富含不饱和脂肪酸的生物膜发生脂质过氧化，导致膜 结构和功能完整性的破坏，肝细胞损伤坏死；
PCR：特定基因或炎症因子 Western：特定激酶或信号分子，特定基因等 ……
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第二节 急性胃溃疡动物模型
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溃疡病的病因
致溃疡因素:胃酸、胃蛋白酶、非甾体抗炎药 不合理应用、幽门螺杆菌感染等。
防御因素：粘液-碳酸氢盐屏障、粘膜屏障、 粘膜血流量、胃上皮细胞的更新、表皮生长因 子和内生性前列腺素等。
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HP法
Helicobacter pylori
Spiral-shaped Gram-negative, oxidase and catalase-positive motile bacterium with 4-6 flagella (Thruster and anchor)
2~3cm。在左侧肋缘部位用手指轻轻上推暴露 胃。 3.在胃幽门与十二指肠连接处用结扎线将幽门结 扎，注意勿将邻近的其他器官、血管结扎。同 时经十二指肠给予受试药。缝合腹壁切口，用 纱布包扎切口。
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幽门结扎法胃溃疡模型
4. 幽门结扎后，停止供水供食，术后18h处死大鼠， 取胃固定、剖检。
常用的方法
① 应激法 ② 幽门结扎法 ③ 药物法 ④杨酸盐 血清素 利血平 保泰松
……
阳性对照药：
H2受体拮抗药——西咪替丁，雷尼替丁，法莫替丁等 加强胃黏膜防御功能——甘珀酸，果胶铋，硫糖铝
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研究抗胃溃疡药物
胃黏膜形态观察 胃分泌试验 胃黏膜血流量测量 胃粘液测定 抗炎镇痛试验 抑制幽门螺杆菌试验等
操作方法
HP标准菌株灌胃（109-1010CFU/ml）法 实验前12小时禁食禁水
实验前1小时，0.1mol/L 碳酸氢钠0.5ml灌胃
0.5ml /只/次 每两天一次（隔天灌胃） 8周时模型成功率90% 保证HP活性及浓度
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H. Pylori induces inflammation
3. 形态学上表现为肝小叶中央区坏死和脂肪变性。
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CCl4急性肝损伤模型
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模型评价与注意事项
CCl4急性肝损伤模型
1．CCl4肝损伤模型是最常用的急性肝损伤模型，
造模方法简单，成功率高，重复性好，价格低廉。
2．CCl4剂量不宜过大，以免造成动物中毒死亡。
平法和乙醇法可任选其一。
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常用的方法
① 应激法 ② 幽门结扎法 ③ 药物法 ④ 醋酸法
急性胃溃疡动物模型
乙醇 组胺 促胃液素 肾上腺类固醇 水杨酸盐 血清素 利血平 保泰松
……
治疗性给药——醋酸法复制的模型 预防性给药——其他模型
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急性胃溃疡动物模型
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幽门结扎法胃溃疡模型
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造模机制
幽门结扎法胃溃疡模型
幽门结扎后，可刺激胃液分泌并使高酸度 胃液在胃中潴留，损伤胃黏膜造成胃溃疡。
实验动物 成年大鼠，雄雌均可。
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操作方法
幽门结扎法胃溃疡模型
1.给药3天。实验前大鼠禁食(24h)不禁水。 2.自胸骨剑突下沿腹中线切开腹壁，切口约
式中S为溃疡面积，d1为通过溃疡中心量取的最大纵 径，d2为通过溃疡中心量取的最大横径。
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幽门结扎法胃溃疡模型
病变程度的评价2—溃疡指数
可计数前胃部溃疡面积，以其总和作为溃疡 指数。
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幽门结扎法胃溃疡模型
病变程度的评价3—溃疡程度（Okabe法）
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Barry J. Marshall and J. Robin Warren got the Nobel Prize in 2005
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Produces adhesins which bind to membraneassociated lipids and carbohydrates and help its adhesion to epithelial cells
动物
(CCl4)剂量 (ml/kg体重)
用法
形成肝损伤 所需时间
0.5% 10 颈背部皮下注射1次 约24h
小鼠
0.1% 10 腹腔注射1次
约24h
0.2% 10
12~24h
于1、4、7日各灌胃1次 末次后
25% 5 皮下注射1次
1~8d
大鼠
25% 5 皮下注射2次,间隔4日
1~8d
15% 1 每隔3日灌胃1次，共3次 末次后16h
第八章 消化系统疾病动物模型
The animal models of digestives system diseases
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讲授内容
胃炎动物模型 消化性溃疡模型 病毒性肝炎模型（乙型肝炎） 脂肪肝、肝硬化模型 胰腺炎模型
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第一节 急性胃炎动物模型
三氯甲基自由基还能抑制细胞膜和微粒体膜上钙泵的活性， 使Ca2+内流增加，从而引起细胞中毒死亡；
三氯甲基自由基能与蛋白质形成共价键，损害线粒体使 NADH及ATP在肝内生成减少，脂肪酸氧化受抑制，影响肝 脏能量生成障碍，并使三酰甘油和脂肪酸在肝细胞内蓄积。
CCl4急性肝损伤模型
常用实验动物CC l4致急性肝损伤所需剂量和用法
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模型评价与注意事项
幽门结扎法胃溃疡模型
1.该模型是Shay等创立的模型，方法简单，溃 疡发生快，发生率达97%，主要用于观察药物对溃 疡形成的预防作用。
2.原法规定大鼠禁食48~72h。一般经验是：
体重小于180g，禁食24~48h，这样动物可以耐受手术； 体重超过180g，禁食48~72h，可提高溃疡发生率。
3.对笼具的要求。
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模型评价与注意事项
幽门结扎法胃溃疡模型
4.术中要求。
5.观察药物对溃疡的影响时，动物应预先给 药或同时给药，若粗制剂可采用灌胃给药，应确 认胃内已排空后方能结扎幽门。粗制剂可在幽门 结扎的同时采用十二指肠内注入给药较好。
6.阳性对照药:灌胃给予
西咪替丁（甲氰咪胍）1.0g/kg体重 雷尼替丁0.135g/kg体重
在解剖显微镜下测量溃疡面积，将每只 鼠溃疡面积的总合分为5个等级作为溃疡指数：
溃疡面积(mm2)： 1-12 13-25 26-37 38-50 ≥50mm2或穿孔
溃疡指数: 1级 2级 3级 4级 5级
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幽门结扎法胃溃疡模型
病变程度的评价3—溃疡程度（Okabe法）
模型组溃疡指数－给药组溃疡指数
家兔
50% 0.5 皮下注射1次，共3次 4~7d
33% 1.5 隔日灌胃1次，共2次 7d
结果
CCl4急性肝损伤模型
1. 根据所用CCl4剂量和时间的不同，肝脏的损伤程度 不同；
2. 一般在给予CCl4后16~24 h血清丙氨酸氨基转移酶 （ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性 升高，并能反映肝损伤的程度；
Microaerophilic, i.e. it requires oxygen but at lower levels than those contained in the atmosphere (5-8%)
With its flagella and its spiral shape, the bacterium drills into the mucus layer of the stomach, and can either be found suspended20in05th诺e贝ga尔s医tri学c m奖u，coWsaarorrena和ttaMcharesdhtaollepithelial cells