脓汁中病原性球菌和粪便中致病性杆菌的鉴定43

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脓汁和粪便标本中病原菌的检测-3PPT课件

对于实验结果的分析和解读是病原菌检测的重要环节，需要根据患者的临床表现、标本类型、检测方法等多方面因素进行综合考虑。
未来发展趋势预测
01
新技术和新方法的应用
随着科技的不断进步，新的病原菌检测技术和方法将不断涌现，如基于
人工智能的图像识别技术、单细胞测序技术等，这些新技术和新方法将
进一步提高病原菌检测的准确性和效率。
仪器故障
遇到仪器故障时，应及时联系维修人员进行维修，并对之前的实验结果进行复查。
操作失误
对于操作失误导致的问题，应仔细分析原因，并采取相应措施避免类似问题再次发生。
06 总结与展望
本次课程重点内容回顾
病原菌检测的意义和重要性
脓汁和粪便标本中病原菌的检测对于疾病的诊断和治疗具有重要意义，能够提高医疗质量和患者生存率。
脓汁和粪便标本中病原菌的检测3ppt课件
目录
• 脓汁与粪便标本概述 • 病原菌检测方法及原理 • 各类病原菌检测实例分析 • 结果解读与临床意义探讨 • 实验操作注意事项与质量控制 • 总结与展望01 脓与粪便标本概述定义及来源
脓汁定义
来源
脓汁是机体组织炎症过程中形成的浓稠或稀薄的渗出物，包含坏死组织、细菌、细胞碎片等。
处理
标本采集后应立即送检，避免干燥、污染。在实验室中，脓汁和粪便标本需要经过适当的处理，如稀释、涂片、染色等，以便于后续的病原微生物检测。
临床意义
01
02
03
病原菌检测
通过对脓汁和粪便标本的检测，可以确定感染的病原菌种类，为临床诊断和治疗提供依据。
病情监测
通过对病原菌数量和种类的变化进行监测，可以评估患者的病情变化和治疗效果。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告

2016年秋季学期微生物学实验报告1、了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理。

2、熟悉常见病原性球菌及常见肠道致病菌的检查程序，掌握各检查实验操作。

3、了解脓汁和粪便标本中病原菌的检测的临床应用及临床意义。

4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。

5、熟悉抗生素对于不同细菌的作用机理。

6、树立牢固的无菌观念。

二、实验器材：1、培养基：营养琼脂平板、伊红美兰平板、斜面、营养肉汤、半固体琼脂2、标本：脓汁标本、粪便标本、空气细菌培养物、手指皮肤细菌培养物、细菌分离培养物、斜面培养物、营养肉汤培养物、药敏试验培养物3、器材：1）培养基的制备：天平、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、试管、试管架、刻度吸管、洗耳球、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、干粉培养基、酒精灯、火机。

2）细菌的分离培养：碘酒棉球，酒精棉球、眼科镊子、接种环。

3）细菌的纯培养: 接种环。

4）细菌的形态学检查：生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、结晶紫染液、芦戈氏碘液、95%酒精、稀释石炭酸复红、染色架、接种环。

5）细菌的生化试验:糖发酵管、抗菌素（青霉素、链霉素、庆大霉素）纸片、眼科镊子、接种针、接种环、小砂轮、葡萄糖发酵微量管、乳糖发酵微量管、兔血浆、生理盐水、载玻片。

6）结果分析：尺子。

三、方法与步骤1、营养肉汤培养基的制备取1.1g营养肉汤粉末于锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，摇晃锥形瓶使其几乎完全溶解。

将锥形瓶置于电陶炉上加热至沸腾，观察固体是否完全溶解，冷却后分装至试管内。

2、细菌的分离培养（平板划线分离法）甲→脓汁标本→营养琼脂平板乙→脓汁标本→营养琼脂平板丙→粪便标本→伊红美蓝平板丁→粪便标本→伊红美蓝平板1）接种环烧灼灭菌，以免污染标本。

2）取标本3～5ul。

3）转动平板，当看到平板表面象镜面有反光的时候，保持这个角度，划线时就能看清划线痕迹，以便控制划线。

4）接种环与平板呈30～40度角，在平板表面上方，以曲线的形式，作大幅度来回连续划线，边划边退，线段要划得长而密集，每区划线不少于30条5）甲、乙烧掉接种环上多余的标本。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告

脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告本实验旨在通过对脓汁和粪便标本的检测，确认其中的病原菌种类及数量，并提供合理的治疗建议。

一、实验原理病原菌是引起感染的主要原因之一，其种类和数量的检测是诊断和治疗感染的关键步骤之一。

本实验将通过培养、鉴定和计数脓汁和粪便标本中的病原菌，以确定感染的类型和程度，从而为治疗提供依据。

二、实验材料和试剂1. 脓汁标本和粪便标本；2. 消毒用具（酒精棉球、焊接器等）；3. 细菌培养基（营养琼脂、MacConkey琼脂、血琼脂）；4. 鉴定试剂（青霉素酶、氧化/还原试验等）；5. 光学显微镜；6. 均质器；7. 精密天平。

三、实验步骤1. 标本制备将脓汁标本和粪便标本均匀搅拌，取出适量标本（大约1克）并转移到无菌离心管中。

2. 标本清洗使用去离子水将标本管中的标本沉淀洗涤三次，去除杂质。

3. 均质标本使用均质器将标本转移到无菌均质袋中，并进行均质处理。

4. 鉴定菌落计数将均质标本分别接种在营养琼脂、MacConkey琼脂和血琼脂培养基上，并在37°C下培养24-48个小时。

随后使用光学显微镜进行菌落计数和观察颜色和形态。

根据颜色和形态等特征，初步确定病原菌的种类。

5. 鉴定试剂检测针对感染可能的病原菌种类，使用相应的鉴定试剂进行检测，以确定病原菌的确切种类。

6. 病原菌计数根据菌落计数结果，对病原菌进行定量计数，以进一步确定感染的程度。

四、结果分析经过实验分析，使用光学显微镜和鉴定试剂检测，可以初步确定脓汁标本中的病原菌可能为金黄色葡萄球菌。

通过菌落计数和定量计数，可以确定金黄色葡萄球菌的数量为10^6CFU/mL。

而粪便标本中则检测出大肠杆菌，其数量为10^5CFU/g。

五、诊断和治疗建议1. 脓汁标本中检测出的金黄色葡萄球菌，提示患者可能患有金黄色葡萄球菌感染，建议对患者进行进一步检查，以确认诊断。

2. 粪便标本中检测出的大肠杆菌，建议患者增加膳食纤维的摄入，加强个人卫生，避免感染传播。

标本中未知细菌的分离和鉴定

血平板生长现象形态学特征触酶试验甘露醇试验
结论：现象与论点、结论：现象与论点、论据
浓汁标本可疑菌药敏实验结果
药品名称
抑菌圈直径
结论：结论：
咽拭子
分离培养血平板）（血平板）
革兰染色
革兰染色
胆汁溶菌试验奥普托辛试验
荚膜染色石炭酸复红单染）（石炭酸复红单染）
？
粪便标本
SS平板 SS平板
结果观察
1、菌落观察 2、形态学观察
（二）生化反应触酶试验：触酶试验： H2o2
氧化氢酶
H2o + o2
(-) (+)
菌种：可疑菌落菌种：试剂：3%过氧化氢试剂：3%过氧化氢方法：方法：见右图结果：结果：见右图
甘露醇实验
甘露醇生化反应管
药敏实验
浓汁标本可疑菌生长现象及生化反应结果观察
玻片凝集试验
粪便标本可疑菌生长现象及生化、粪便标本可疑菌生长现象及生化、血清反应结果观察
SS平板 SS平板生长现象形态学特征单糖发酵试验血清学试验
葡萄糖乳糖
结论：现象与论点、结论：现象与论点、论据
粪便标本可疑菌药敏实验结果
药品名称
抑菌圈直径
结论：结论：
二、标本中未知肠道感染细菌的分离鉴定程序
脓血便、脓血便、肛拭子
标本 SS平板,EMB平板 SS平板,EMB平板平板选择/ 选择/鉴别培基
克氏双糖铁培养基, 克氏双糖铁培养基, 动力-靛基质动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基
血清学鉴定生化反应
玻片凝集试验
设计性实验
临床标本中病原菌的分离与鉴定
3.尿 3.尿标本：标本：尿液培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、动力-靛基质动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基其他：革兰染液、靛基质试剂、玻片等其他：革兰染液、靛基质试剂、 4.粪便 4.粪便标本：肛门拭子标本：培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、动力-靛基质动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基其他：生理盐水、靛基质试剂、沙门菌多价血清、其他：生理盐水、靛基质试剂、沙门菌多价血清、志贺菌多价血清、玻片等菌多价血清、

脓汁和粪便标本中病原菌的检验实验报告

脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。

了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。

二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W 电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：○1培养基的制备、消毒和灭菌:1.调配→溶化→矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。

2.干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。

②细菌的分离培养:采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。

③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。

挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→干燥→固定→革兰染色⑤细菌的生化试验等:糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1.在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测

脓汁和粪便标本中病原菌的检测（作者：bibi）目的从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。

方法培养基的制备、消毒和灭菌，细菌的分离与培养，细菌群体和个体形态特征的观察，细菌生化反应鉴定。

结果脓汁标本形成黄、白两种颜色菌落，均为革兰氏阳性菌，均对青霉素和链霉素敏感；粪便标本形成紫黑和粉红色两种菌落，均为革兰氏阴性菌，对青霉素不敏感，对链霉素敏感。

四种细菌均对广谱抗菌素庆大霉素敏感。

关键词：脓汁粪便微生物细菌菌落生化鉴定药敏试验引言：常见的化脓性病原菌有葡萄球菌、链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、肺炎链球菌、结核杆菌、假单胞菌、流感杆菌等。

浓汁标本在做细菌分离培养的同时，均须直接涂片检查，观察是否有典型形态的菌体，芽孢有无，为临床提供最初的诊治依据。

粪便标本中常见的病原菌有志贺氏菌属、致病性大肠杆菌属、弧菌属、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌等。

粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选择培养基（如SS、伊红美蓝平板、碱性蛋白胨水），尽可能抑制杂菌，以利于病原菌的检出。

这次实验我们从浓汁标本中检出的是金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌，从粪便标本中检出的是大肠埃希菌、痢疾志贺菌。

更重要的是我们了解了，医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握了微生物试验的基本技能和基本原理，树立了牢固的无菌观念。

同时培养学生自学能力、科学思维能力、动手能力和表达能力。

培养学生从临床标本中分离细菌以查找与疾病有关的病原体，为临床治疗预后调查提供一定的价值1.实验器材：接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、普通冰箱、冷藏室、隔水式电热恒温培养箱、奥林巴斯 CX21型生物显微镜、1500W电炉、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子2.实验方法：2.1培养基的制备、消毒和灭菌培养基制备的一般程序：①调配→溶化→矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。

【参考文档】粪便检查实验报告-范文word版 (12页)

本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==粪便检查实验报告篇一：脓汁和粪便标本中病原菌的检验实验报告脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。

了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。

二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯 CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：1培养基的制备、消毒和灭菌: ○1. 调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。

2. 干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。

②细菌的分离培养: 采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。

③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。

挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→ 干燥→ 固定→ 革兰染色⑤细菌的生化试验等 : 糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1. 在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。

脓汁中病原性球菌和粪便中致病性杆菌的鉴定(精)

脓汁中病原性球菌和粪便中致病性杆菌的鉴定
新乡医学院微生物学教研室
目的要求
1. 掌握血浆凝固酶试验和玻片凝集试验的操作方法； 2. 熟悉血浆凝固酶试验和玻片凝集试验的原理；
3. 了解病原性球菌和杆菌的一般鉴定过程。
脓汁中病原性球菌的鉴定
脓，痰，分泌物，穿刺物
血，尿，胆汁
葡萄糖酚红肉汤增菌培养涂片革兰染色镜检，如有菌生长
观察菌落特点
1 粪便标本在SS平板上经过24小时的培养，长出菌落，首先观察菌落的特点： 2 挑取可疑菌落，革兰染色，进行形态学检测，同时接种于双糖铁培养基。
肠道杆菌的生长结果
SS 大肠杆菌痢疾杆菌粉红色大菌落无色细小半透明菌落无色细小半透明菌落双糖铁黄色上红下黄
伤寒杆菌
上红下黄黑色沉淀
肺炎链球菌
胆汁溶菌；菊糖发酵；奥普托辛
A群链球菌
甲链乙链丙链
胆汁溶菌实验
• 肺炎双球菌 • 甲型溶血性链球菌
+
—
菊糖发酵实验
• 肺炎双球菌 • 甲型溶血性链球菌
+
—
奥普托辛实验
奥普托辛能干扰肺双叶酸的合成，故对肺炎双球菌的抑制作用比较大。
肺双的抑菌圈直径一般大于20mm为阳性；
甲链的抑菌圈直径小于12mm为阴性；如果介于12－20mm之间时应重复试验。
操作内容
1 革兰染色：每台2张玻片，染1张球菌和1张杆菌； 2 血浆凝固酶实验：每台1张玻片； 3 玻片凝集反应：每台1张玻片； 4 接种双糖铁培养基：每台2管双糖铁培养基（穿刺+斜面）。
观察内容
1 脓汁标本细菌在血平板上的生长现象； 2 肠杆菌在SS平板上生长的菌落特点； 3 肠杆菌在双糖铁培养基上生长的特点。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测

脓汁和粪便标本中病原微生物的检测[摘要]通过革兰氏染色并在油镜下观察细菌形态结构、细菌的生化反应和细菌的血清学反应等手段区别和鉴定脓汁标本中和粪便标本中细菌，检测病原微生物，并进行细菌药物敏感性试验。

[关键词]脓汁标本、粪便标本、分离培养、革兰氏染色、细菌生化反应鉴定、细菌动力学试验、细菌血清学试验、细菌药物敏感性试验前言医学微生物学检查的目的是通过病原体的分离鉴定及检测病人的免疫应答等，以达到对传染性疾病做出病原学诊断，并根据实验室检查结果进行合理的药物治疗与防护。

临床的标本常含有很多杂菌，必须进行分离和纯化。

常见的化脓性病原菌有葡萄球菌，链球菌脑膜炎球菌等。

脓汁标本在做细菌分离培养的同时，均需直接涂片检查，观察是否有典型形态的菌体、芽孢有无，为临床提供最初诊断。

粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选择培养基，尽可能抑制杂菌，以利于病原体的检出。

通过革兰氏染色并在油镜下观察细菌形态结构、细菌的生化反应和细菌的血清学反应等手段可以区别和鉴定细菌的种类。

细菌药物敏感性实验可以防止细菌产生耐药性和确保治疗效果，同时也为细菌种类的鉴别提供了佐证。

1.材料与方法1.1培养基制备1.11材料天平、称量纸、药勺、干粉培养基、酒精灯、三角烧瓶、量筒、试管、试管架、5ml吸管、吸头、棉塞、标签纸、牛皮纸、皮筋1.12方法称取一定量的肉汤培养基，至于三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮沸一次，趁热分装；称取一定量的营养琼脂培养基，至于三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮沸三次（煮至刚刚冒泡，立刻置于台面，半分钟后再煮），使完全溶解，趁热分装。

（平板培养基：以无菌操作，倾注平皿10ml，琼脂完全凝固后，平板倒放，4℃冰箱保存备用。

斜面培养基：培养基趁热斜放，培基不超过试管长度的2/3，琼脂凝固以后，4℃冰箱保存备用。

）贴上标签后灭菌使用。

1.2细菌分离培养1.2.1材料脓汁标本、粪便标本、普通营养琼脂培平板、伊红美蓝琼脂平板、接种环、酒精灯1.2.2方法接种前，接种环烧灼灭菌。

细菌分离鉴定

细菌分离鉴定细菌分离鉴定目的要求：熟悉临床标本中常见的病原性细菌的分离鉴定方法。

实验内容：一、脓汁、咽拭子等标本中病原性细菌的分离与鉴定(一)标本采集1.脓拭子：用无菌棉签蘸取患处深部脓液或分泌物少许，置入无菌空试管内，送检。

2.痰拭子：用消毒容器收集病人痰液，用无菌棉签挑取脓稠痰块，置入无菌空试管内，送检。

3.咽拭子：嘱病人把口张大，用压舌板压住舌根，用无菌棉签迅速蘸取咽部分泌物，置入无菌空试管内，送检。

4.血标本：疑为败血症患者，在严格无菌操作下，静脉采血，床旁直接加入含50ml的肉汤瓶内，立即摇匀后送培养。

5.脑脊液：对疑似流脑患者，作腰椎穿刺取脑脊液，立即行直接床旁接种(送检过程中应注意保温)。

6.尿道、阴-道分泌物：对可疑淋病患者，男性可从尿道取材，取材时导尿管应进入尿道1cm～2cm，如为刚排尿，应等待1h左右;女性则可以从宫颈口取分泌物，当内窥器插入宫颈口后应稍等片刻，再旋转取出，取材应立即送检，不可放置冰箱。

(二)分离鉴定程序待检标本可直接做涂片染色检查鉴定，必要时可做分离培养、生化反应及致病性鉴定。

常见的`致病性球菌检查程序如下。

直接涂片、革兰染色、镜检(形态、排列、染色性)脓、痰、咽拭子分泌物、脑脊液观察菌落性状、溶血性、色素血琼脂平板→ 涂片、染色、镜检↑ 挑取可疑菌落生化反应血液、穿刺液→肉汤培养基纯分离致病性测定药敏试验如培养液混浊时可涂片、染色、镜检(三)常见临床标本的检查方法1．脓拭子在脓汁中除了球菌外，也有杆菌存在，例如革兰阳性的有炭疽杆菌、白喉杆菌、结核杆菌、枯草杆菌等，革兰阴性的有大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等，此外尚可有真菌、放线菌、螺旋体等。

材料(1) 标本：脓拭子(2) 培养基：血琼脂平板(3) 兔血浆、白色滤纸片、无菌生理盐水、载玻片方法脓汁→ 革兰染色→ 镜检↑血琼脂平板→观察菌落形态及溶血情况致病力试验(1)将脓拭子作革兰染色，镜检(先作培养再涂片以免污染)。

医学微生物学实验脓汁和粪便标本中病原菌的检测

掌心对掌心搓擦
2.手指交错掌心对手背搓擦 3.手
指交错掌心对掌心搓擦
两手互握互搓指背 6.指尖在掌心中搓擦
5.拇指在掌中转动搓擦
医务人员洗手指征
0 1 接触传染病患者之后。 0 3 接触病人的血液、体液、分泌物
和排泄物之后。
0 5 接触旧钱币之后。 0 7 进行微生物操作或作血、尿等生
化、免疫测定之后。
器材准备
自然界中的微生物
01
已经发现的微生物大约13 万5千种，被认为非常危险的有600种，在人间传染的病原微生物380种。这些微生物存在于地球的各个角落，从寒冷的极地到炎热的赤道，从4.2千米地层深处到85千米高空（芽孢）,均有它们的踪迹。
02
空气、水、土壤、人体的体表以及与外界相通的腔道，均有不同种类和数量的微生物存在。
血琼脂平板培养
涂片染色镜检
挑取可疑菌落
生化反应
↑
纯培养动物实验
药敏实验
血液、穿刺液 → 肉汤增菌培养 → 培养液涂片染色境检
常见肠道致病菌的检查程序P48：
粪便 → SS琼脂、伊红美蓝平板培养 → 挑取可疑菌落
↑
↓ 血清学鉴定
血、骨髓 → 增菌培养
双糖铁培养基染色镜检
生化反应
0 1
平板划线分离法：
T：采样时间(分钟)。
组号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
空气的细菌学检查
地点
时间(min)
卫生间
15
食堂
15
门诊大厅
15
呼吸科病房
15
呼吸科ICU
15
外科病房
15
外科ICU
15

病原生物学综合性实验一脓汁和粪便标本中病原菌的检测解析

综合性实验一脓汁和粪便标本中病原菌的检测从临床标本中分离细菌的目的是为了查找与疾病有关的病原菌，这对于临床治疗及预后调查是很有价值的。

所以，在分离时应掌握以下原则，以便指导检出病原菌，避免漏诊误诊。

1．了解微生物在人体的分布。

人体的很多部位与外界相通，存在正常菌群，分离时应注意标本中的菌群是正常菌群的污染，还是致病菌。

另外，机体的某些部位(如血液、骨髓)是无菌的，如检出细菌，应视为致病菌。

2．了解标本来源及临床情况，以便有目的地检出病原菌。

3．根据标本来源和可能存在的病原菌确定选用各种分离培养基，以提高检出率。

如血平板可用于化脓性链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎球菌等的分离。

常见的化脓性病原菌有葡萄球菌、链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、肺炎链球菌、结核杆菌、假单胞菌、流感杆菌等。

脓汁标本在做细菌分离培养的同时，均须直接涂片检查，观察是否有典型形态的菌体，芽胞有无，为临床提供最初的诊治依据。

粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选择培养基(如SS、伊红美蓝平板，碱性蛋白胨水)，尽可能地抑制杂菌，以利于病原菌的检出。

粪便标本中常见的病原菌有志贺氏菌属、致病性大肠杆菌、弧菌属、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌等。

粪便标本中因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法分辩是否为病原菌，因此，粪便标本一般不作直接涂片检查，只有检查霍乱弧菌、结核杆菌、疑似葡萄球菌或艰难梭菌引起的伪膜性肠炎，以及菌群失调时，才作直接涂片检查。

细菌鉴定工作的原则及基本方法是：1、必须用纯的细菌培养物作鉴定。

因为不同的细菌生化反应结果相差较大，而反应结果是以阳性或阴性表示的，一旦用混合菌做生化反应，结果不可分析。

2、鉴定方法的选择。

测定细菌特征的实验方法很多，应根据鉴定目的选择有价值的、快速简便的试验项目，既能完成鉴定，试验项目又尽可能少。

一、培养基的制备Preparation of Culture Media【实验目的】1了解细菌生长的基本营养条件。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测

脓汁和粪便标本中病原菌的检测病原菌是引起多种疾病的微生物，包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等。

当人体感染病原菌时，常会产生脓汁和粪便等病理样本。

对病原菌进行检测可以帮助医生诊断疾病和进行治疗。

脓汁是由细胞、细菌、炎性介质和液体组成的炎症渗出物。

脓汁样本的检测可以帮助医生确定炎症发生的部位和病原菌种类，对于引起严重感染的病原菌，如金黄色葡萄球菌和链球菌等，及时检测非常重要。

脓汁样本的采集可以通过穿刺或切开取材。

采集样本前需要进行局部消毒，避免产生假阳性结果。

采集后需要将样本送到合格的实验室进行细菌培养和鉴定。

细菌培养是目前脓汁样本中病原菌检测的主要方法。

样本在培养基上进行检测，通过观察培养基的变化和菌落的形态、颜色等特征，可以初步判断病原菌种类。

此外，还可通过病原菌的生化试验和抗生素敏感试验等来进一步鉴定。

粪便样本中的病原菌检测是临床常用的方法之一。

胃肠道感染、痢疾等疾病常表现为腹泻、呕吐、腹痛等症状，这些症状通常伴随着粪便的改变。

检测粪便样本中的病原菌可以帮助医生确定疾病的病因，进而制定合理的治疗方案。

采集粪便样本需要注意消毒和避免受到多余杂质的干扰。

采集的样本应放入干燥、无菌的容器中，并在24小时内送到实验室进行检测。

粪便样本中的病原菌检测方法分为培养法和分子生物学方法两种。

培养法是常用的方法，具有价格低、操作简单、可检测多种病原菌等优点。

具体操作过程包括将样本放入培养基中，根据菌落形态、色素、大小等特征进行初步鉴定，进一步确定病原菌种类，最后进行抗生素敏感性试验。

分子生物学方法则通过检测病原菌的DNA或RNA序列进行鉴定，具有快速、灵敏、特异性高等优点。

目前已有多种分子生物学方法被应用于粪便样本中病原菌检测，如PCR、LAMP等。

综上所述，脓汁和粪便样本中病原菌的检测有助于医生确定疾病的病因，对于治疗方案的制定具有重要的指导意义。

在样本采集和实验室检测中需要严格遵守操作规程，以确保结果准确可靠。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测

微生物实验报告实验名称脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验者学号日期2016-11-25 指导老师一、实验目的1、掌握培养基制备的原则和一般方法。

2、掌握病原菌的分离与培养方法。

3、掌握油镜的正确使用、细菌涂片标本的制备、革兰氏染色法，熟悉细菌基本形态。

4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。

5、掌握血浆凝固酶试验的原理、方法及用途。

6、熟悉药物敏感性试验方法的种类、原理及应用，掌握纸片扩散法。

7、掌握玻片凝集试验的原理、方法、结果观察与判断。

二、实验器材1、天平、称量纸、干粉培养基、锥形瓶、量筒、15支试管、试管架、试管筐、5ml刻度吸管、平皿、洗耳球、酒精灯。

2、脓汁标本1支，粪便标本1支；碘酒棉球1瓶，酒精棉球1瓶，眼科镊子2把；伊红美兰平板2个，营养琼脂平板5个。

接种环，酒精灯。

3、斜面4支，空气、手指皮肤、细菌分离培养物（上次实验平板）。

4、斜面培养物4支，营养肉汤4支，生理盐水2支，镜油瓶、拭镜纸1套，吸水纸1 本，载玻片4张，染色瓶，染色架。

5、斜面培养物4支，营养肉汤培养物（菌液）4支，半固体琼脂4支，营养琼脂平板4 个，糖发酵管1套，抗菌素纸片1套，眼科镊子2把。

6、半固体培养物4支，药敏试验培养物4个，微量发酵管培养物1套。

三、方法与步骤流程图：1、培养基的制备：干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里，然后罩上硫酸纸、牛皮纸，用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到髙压蒸汽灭菌室→灭菌（用于倒平板的培养基不用加热溶解，摇匀即可）。

2、细菌的分离培养1）空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择采样地点（实验室、卫生间或任选地点），将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边，平板暴露于空气中15分钟，然后平板倒扣盖上，作标记。

37℃温箱培养24小时，观察结果。

2）手指皮肤的细菌学检查在普通平板上接种手指上的细菌。

上:甲、丙→常规洗手，下:乙、丁→标准洗手。

粪便标本中肠道致病菌的的分离鉴定

实验十粪便标本中肠道致病菌的的分离鉴定实验目的和要求1、掌握脓汁标本中常见病原菌分离和鉴定方法2、掌握药物敏感试验3、掌握肠道杆菌分离和鉴定的一般步骤4、熟悉肠道杆菌鉴定生化反应和血清学反应实验内容一、脓汁标本中未知病原菌的分离和鉴定二、粪便标本中肠道致病菌的分离和鉴定一、标本中未知病原性球菌的分离鉴定程序直接涂片染色镜检：观察细菌形态、排列、染色性观察菌落性状、溶血性、色素血琼脂平板涂片、染色、镜检挑取可疑菌落生化反应测定纯培养致病性测定（甘露醇、凝固酶等）标本血液脑脊液肉汤增菌培养涂片染色镜检二、标本中未知肠道感染细菌的分离鉴定程序标本脓血便、肛拭子选择/鉴别培基生化反应血清学鉴定克氏双糖铁培养基,动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基玻片凝集试验SS平板,EMB平板设计性实验临床标本中病原菌的分离与鉴定设计性实验1.脓汁标本：脓拭子培养基：血琼脂平板其他：3%H2O2、（兔血浆）、生理盐水、革兰染液、玻片等2.痰标本：咽拭子培养基：血琼脂平板其他：生理盐水、10%胆盐、革兰染液、玻片等3.尿标本：尿液培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基其他：革兰染液、靛基质试剂、玻片等4.粪便标本：肛门拭子培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基其他：生理盐水、靛基质试剂、沙门菌多价血清、志贺菌多价血清、玻片等脓拭子分离培养革兰染色（血平板）革兰染色触酶实验甘露醇实验方法：•1、分离培养、观察菌落特征：浓汁标本，用分离划线方法接种血平板，37℃培养18-24h以后观察结果。

重点：色素和溶血现象•2、革兰染色、观察形态学特征：取可疑菌落少许涂片，革兰染色、镜检。

结果观察•1、菌落观察•2、形态学观察（二）生化反应•触酶试验：(-) (+)H 2o 2H 2o o 2氧化氢酶+菌种：可疑菌落试剂：3%过氧化氢方法：见右图结果：见右图甘露醇实验•甘露醇生化反应管药敏实验浓汁标本可疑菌生长现象及生化反应结果观察形态学特征血平板生长现象触酶试验甘露醇试验结论：现象与论点、论据浓汁标本可疑菌药敏实验结果药品名称抑菌圈直径结论：咽拭子革兰染色革兰染色胆汁溶菌试验奥普托辛试验荚膜染色（石炭酸复红单染）分离培养（血平板）？粪便标本SS平板克氏双糖铁斜面培养基动力-半固体培养基生化反应管观察结果糖发酵试验玻片凝集试验革兰染色H2S试验尿液离心沉淀1500转，10分钟分离培养（EMB平板）革兰染色革兰染色克氏双糖铁斜面培养基动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基观察结果观察结果观察结果完成靛基质试验方法：•1、分离培养、观察菌落特征：粪便标本，用分离划线方法接种SS平板培养基37℃培养18-24h以后观察结果。

医学微生物学实验脓汁以及粪便标本中病原菌检测

医学微生物学实验脓汁以及粪便标本中病原菌检测
医学微生物学实验脓汁以及粪便标本中病原菌检测
医学微生物学实验脓汁以及粪便标本中病原菌检测
细菌的溶血现象
❖ 根据细菌对血平板中红细胞的溶解能力可分为以下三种溶血类型
α（甲型）溶血:产生溶血素，不完全性溶血，在血平板上菌落周围有1～2mm 半透明的草绿色溶血环。 β（乙型）溶血: 呈完全性溶血，在血平板上菌落周围有2～4mm宽，界限分明，无色透明的溶血环。 γ（丙型）溶血:不产生溶血素，在血平板上的菌落周围无溶血环。
医学微生物学实验脓汁以及粪便标本中病原菌检测
菌落特征P11 ❖ 大小：大(直径约3mm以上)，中(直径约1～3mm)，小(直
径约1mm以下)。
❖ 形状：圆形，卵圆形、假根形、丝状、不规则等。
❖ 边缘：整齐，锯齿状，波浪状，羽毛状。
❖ 表面：隆起、平坦、中心凸起、脐形凹陷；光滑或粗糙、湿润或干燥。
医学微生物学实验脓汁以及粪便标本中病原菌检测
细菌的纯培养
❖ 挑选单菌落: 脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落，菌落的色素是脂溶性的，是细菌本身的颜色。菌落直径 2mm左右、圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明。粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落，菌落颜色是水溶性的，不是细菌本身的颜色，颜色的产生是因为大肠埃希菌分解乳糖产酸，酸使伊红与美蓝结合，形成紫黑色具有金属光泽、大而隆起、不透明的菌落；菌落直径2～3mm。致病菌不分解乳糖，菌落呈伊红的颜色，很淡的粉红色，半透明，直径 1～2mm。 ※选择平板上相同的菌落数多的、典型的、容易挑取的单菌落，进行接种。
注意：只能横放，不得竖放。
医学微生物学实验脓汁以及粪便标本中病原菌检测