干眼症动物模型实验研究
干眼症的虎红染色实验≥4
干眼症的虎红染色实验≥4
目的观察0.8%黄精多糖滴眼液对实验性干眼症模型的治疗效果。
方法将实验性干眼症日本大耳白兔随机分为空白对照组(模型组)、受试药物组(治疗组)和阳性药物对照组(对照组)，分别用溶媒、0.8%黄精多糖滴眼液和泪然滴眼液治疗。
观察Schirmer I试验和角膜结膜虎红染色点数，每周1次，共5周。
结果各组模型动物Schirmer I 试验滤纸湿长度和角结膜虎红染色点数分别在用药2周后和3周后差异有显著性，治疗组在用药2周后Schirmer I试验滤纸湿长明显增加，用药3周后虎红染色点数减少。
结论 0.8%黄精多糖滴眼液对实验性干眼症有明显疗效。
在有孔虫生态学研究中，区分底栖有孔虫活体与死亡壳体多使用虎红染色方法，但关于具体的染色时长、处理方式等方法描述比较简单，如仅有"采用虎红酒精染色"，其具体方法常语焉不详。
荧光素钠、虎红、丽丝胺绿三种活体染料是目前临床诊断、评估眼表损伤状况的重要染色剂，尤其是对具有干眼症状的患者。
近年来干眼症患者呈逐年上升的趋势。
干眼病临床发病机制及与动物模型的相关性研究进展
综述评论世界临床药物WORLD CLINICAL DRUGS Vol.42 NO.4综述干眼病临床发病机制及与动物模型的相关性研究进展宋硕u,王若男h2，谢金华u，孟永3，熊亚妮2，钱仪敏2，李华2'3*(1.中国医药工业研究总院国家上海新药安全评价研究中心，上海201203: 2.上海益诺思生物技术股份有限公u+j,上海201203;3.益诺思生物技术南通有限公司，江苏南通226133)摘要：干眼病（dry eye disease, D ED)是一种多因素的眼表疾病，其发病机制复杂，发病率逐年升高，临床上只能针对症状 进行缓解，严重影响患者生活质量。
本文介绍了D ED的多种病因、发病机制和目前常见的动物模型，并重点介绍了动物模 型与临床DED发病机制的相关性，以期为DED动物模型的发展和改进提供思路。
关键词：干眼病；病因：发病机制：动物模型中图分类号：R749.3; R971_'.41 文献标志码： A 文章编号：1672-9丨88(2021)04-0296-07DOI：10.136B3/j.wph.2021.04.012Research progress on the clinical pathogenesis ofdry eye disease and its correlation with animal modelsSONG Shuo1'2, WANG Ruonan12, XIE Jinhua1'2, MENG Yong3, XIONG Yani2, QIAN Yitnin2, LI Hua2'3*(1. National Shanghai Center f or New Drug Safety Evaluation and Research o f C hina State Institute o f P harmaceutical Industry,Shunghai 201203, China; 2. Shanghai InnoStar Bio-tech Co., Ltd., Shanghai 201203, China;3. IimoStar Bio-tech Nantong Co., Ltd., Nantong 226133, Jiangsu Province, China)Abstract: Dry eye disease (DED) is a multi-factor ocular surface disease with complex pathogenesis and an increasing incidence rate. Clinical treatment can only relieve symptoms, which seriously affects the quality of patients' life . This paper introduces etiologies, pathogenesis and animal models of DED, and focuses on the correlation between animal models and clinical pathogenesis of DED, in order to provide ideas for the development and improvement of DED animal models.Key words:dry eye; cause of disease; pathogenesis; animal models干眼又称“角结膜干燥症”，是指任何原因引起 的泪液质和量异常或动力学异常导致的泪膜稳定性 下降，并伴有眼部不适，导致眼表组织病变为特征 的多种疾病的总称，包括干眼症、干眼病（dry eye disease,DED)和干眼综合征。
实验性破坏主泪腺诱发干眼症动物模型制作和发病机制的研究
中文摘要实验性破坏主泪腙诱发干眼症动物模型制作及发病机制的研究【摘要】目的通过不同方法建立干眼症动物模型，即摘除主泪腺干眼症动物模型、硬化剂破坏主泪腺干眼症动物模型及同时破坏主、副泪腺干眼症动物模型（实验性严重干眼症动物模型），确证主泪腺破坏与干眼症的关系，并比较单纯破坏主泪腺与同时破坏主、副泪腺两种动物模型的差异。
同时，运用传统的检查方法对动物模型的眼表损害作出诊断，观察干眼症动物模型角膜、结膜、险板腺及泪腺的组织病理学及超微结构的改变，探讨干眼症发病过程中眼表不同组织结构的损害。
在此基础上进一步观察动物模型角膜、结膜上皮细胞及睑板腺腺泡细胞凋亡相关基因表达与眼表干变及组织损伤的关系，并对其发病机制进行初步的研究，为该病的诊断和治疗提供理论依据。
材料与方法实验动物４２只分为四组，实验组每组１０只，对照组１２只：一组为摘除主泪腺干眼症动物模型，二组为硬化剂破坏主泪腺干眼症动物模型，三组为严重干眼症动物模型，余为正常对照组，于手术前和手术后３天、１周、２周、４周、８周、１２闽行Ｓｃｈｉｒｍｅｒ实验、泪膜破裂时间检测、角膜上皮荧光素染色检测，对各组的实验结果进行对比。
于手术后４周处死实验三组严重干眼症动物模型，手术后８周处死实验一组摘除主泪腺干眼症动物模型及实验二组硬化剂破坏主泪腺千眼症动物模型，取各实验组５只动物模型及６只正常大鼠的角膜、结膜、睑板腺及泪腺组织，对各组标本进行光学显微镜观察和透射电镜观察。
另取各实验组动物模型５只及正常对照大鼠６只，取其角膜、结膜上皮细胞及睑板腺腺泡细胞，采用免疫组织化学方法对各组织细胞中Ｂａｘ和ｂｃｌ一２等相关基因蛋白的表达进行检测。
结果１、实验ｉ组于手术后３天起、实验一组及实验二组于手术后２周起Ｓｃｈｉｒｍｅｒ实验、泪膜破裂时问明显小于手术前，且随观察时间的延长差异有显著性（Ｐ＜００５），实验三组与实验一组及实验二组相比其差异亦有显著性（Ｐ＜００５）。
角膜上皮荧光素染色实验前为阴性，实验后显示阳性。
去势大鼠干眼症模型眼表损伤的研究
盖熊盖盛怒。
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眦h2013-32(2)．97～100J oum al0f B i om e di ca l E n面ne er i n gR es earch…。
一-、。
，二～…去势大鼠干眼症模型眼表损伤的研究张燕1△，谢军2，徐艺玫1，史深1，贵友军1(1．新疆维吾尔自治区实验动物研究中心，乌鲁木齐830002；2．新疆乌鲁木齐市眼耳鼻喉专科医院，鸟鲁木齐830002)摘要：建立去势大鼠干眼症模型并对其眼表损伤进行研究。
60只W i st a r大鼠随机分为6组，每组10只。
A组为雌性对照组，B组为雌性假手术组，C组为雌性去势组，D组为雄性对照组，E组为雄性假手术组，F组为雄性去势组。
A组与D组大鼠正常饲养，不作处理。
C组大鼠去除卵巢，B组重复手术过程但不去除大鼠卵巢，F组大鼠去除双侧睾丸及附睾，E组大鼠重复手术过程但不去除睾丸及附睾。
所有大鼠均与术前及术后2、4、6月进行泪液分泌量、角膜上皮荧光素染色和泪膜破裂时间检测。
A、B、D、E组大鼠泪液分泌量、角膜上皮荧光素染色和泪膜破裂时间检测均差异不显著(P>0．05)。
去势组大鼠(组c和组F)角膜荧光染色在术后2月起为阳性，并随时间增加而加重。
去势6月后，去势组(组C和组F)的泪液分泌量、泪膜破裂时间与其他组相比差异极显著(P<O．01)，并且c组与F组相比差异极显著(P<O．01)。
大鼠去势后造成眼表损伤可能是干眼症原因之一。
关键词：去势大鼠；干眼症；眼表损伤；角膜上皮荧光素染色；泪液分泌量；泪膜破裂时间中图分类号：R318文献标识码：A文章编号：1672—6278(2013)02．0097讲I l I l pa i r m e nt of O cl l l ar Sur f ace i n C as t r at i onI ht M0del s of X er opht hal m i aZ H A N G Y an，XⅢJ岫，X U Y i II Iei，Sm Shen，G U I Y ouj岫(1．如6Dr咖可Ani砌z＆舭r旷凰，洳昭，岫i830002，吼缸n；2．0￡D如甲印锄咖nZ日唧姚f矿艇，洳凡g，踟‘唧i830002)A b s t r act：To es t abl i s h a n xem pht l l al l f I l i a m odel i n ca st r a t i on r at，a nd expl or e t he I m pai瑚ent of0cul ar Sur fa ce i n t I les e m odel s．Si x t y W i s t ar r at s w er e湖doI I l ly di vi ded i nt o6gr oups，each妨t h10r at s：山e no舯al f em a l e r at s gr oup(A)，t he烈se opef at i on f em a l e r at s gr oup(B)，t he ca st r at e d f em a l e r at s gm up(C)，tI l e noⅡna l m al e r at s gm up(D)，t he f甜se oper at i on m al e r at s gm up(E)，t he c aL s t ra—t e d m al e r at s gm up(F)．N ot hi ng w a s perf bm l ed on gr oup A and gm up D．gr oup C w e re s ubj ect ed t o ov撕ectom y，w hil e t he伊oupB w a s not m er6ndi ng t he oVar y．B i l at er a l t est i s and epi di dym i s of印roup F w er e r es ect ed；gm up E w e re pe而册e d s cm t al i nc i si on oIl l y衍t hout f em oV i ng t het est i cl es．Schi珊er t est，t he t i m e of t ea r f i l m br e“一up锄d com eal nuo r es cen ce st a i ni ng w e re pe d．o硼e d i n aIl m t s be南re 锄d2，4锄d6m ont}l s撕er t he oper at i on．ne com eal nuo r es cen ce s t ai ni ng，Schi瑚er t est彻d t ear矗l m br eak—up：G r oup A，B，D and E had not obV i ousl y(P>O．05)．C om eal nuo r es cen ce st a i ni ng w a s po si t i v e i n ca st r at e d gr oup(gm up C and gr oup F)2m ont hs出er t heope r at i on，a nd ag目|e gat e d w i th“m e．Schi册er t est and t he t i m e of t e ar f i l mbreak—up：t he ca st r at e d r at s gr oup(gr oup C and gm up F)com p ar ed w i t h ot he r gm up，t l l e di&r enc e w a s s i gni f i caI l t(P<0．01)．G r oup C com par ed w i t h F，t|1e di雎r encew as si印i f i cant(P<O．01)．The i m pai册ent of oc ul ar s udhce m ay be on e of t he m echa ni s m s l ea di ng t o t he de st r uc t i on i n xem pht ha l m i a．K ey啪r ds：C ast r at i on rat；X er oPht}l al m i a；I m pai瑚ent of O cul ar Su血ce；，nl e com eal nuo r es cen ce s tai ni ng；S chi肋ert es；ne t i m e of t ea r f i l m br eak—uD△通信作者E m a i l：493396477@qq．com98生物医学工程研究第32卷1引言干眼症是最常见的眼表疾病之一，病因及病理相当繁杂。
一种睑板腺功能障碍动物模型的造模药物、构建方法与应用
一种睑板腺功能障碍动物模型的造模药物、构建方法与应用摘要：一、睑板腺功能障碍动物模型的背景及研究意义二、造模药物的选择与配制三、构建方法与步骤1.动物选择与饲养2.药物给药与观察3.睑板腺功能障碍评估四、应用与展望正文：睑板腺功能障碍（Meibomian Gland Dysfunction，MGD）是一种常见的眼表疾病，表现为睑板腺分泌物异常、睑板腺结构破坏等，可能导致干眼症、眼睑炎等并发症。
为了深入研究睑板腺功能障碍的发病机制、诊断和治疗方法，建立一个可靠的动物模型具有重要意义。
本文主要介绍一种睑板腺功能障碍动物模型的造模药物、构建方法与应用。
一、睑板腺功能障碍动物模型的背景及研究意义睑板腺功能障碍动物模型是研究睑板腺功能障碍病因、发病机制和治疗手段的重要工具。
通过对动物进行造模，可以模拟人类睑板腺功能障碍的病理生理过程，为研究睑板腺功能障碍提供实验基础。
此外，该模型还可为评估治疗措施的有效性提供实验平台，有助于推动睑板腺功能障碍治疗的发展。
二、造模药物的选择与配制为了制备睑板腺功能障碍动物模型，需要选择一种合适的造模药物。
本文选用某种药物（如：环磷酰胺、强的松等）进行配制。
根据实验目的和动物体重，确定药物剂量，采用口服或注射给药方式，以达到诱发睑板腺功能障碍的效果。
三、构建方法与步骤1.动物选择与饲养：选用健康动物（如：大鼠、小鼠等），根据实验要求进行分组。
动物饲养过程中，要保持室内清洁、通风，控制温度和湿度。
确保动物饮水和食物充足，以保证实验的可靠性。
2.药物给药与观察：根据实验设计，给动物定期给予造模药物。
在给药期间，密切观察动物的一般状况，如食欲、精神状态等。
同时，关注动物眼部症状，如睑板腺分泌物变化、眼睑炎等。
3.睑板腺功能障碍评估：通过以下方法评估动物睑板腺功能障碍程度：（1）眼部检查：观察动物眼部症状，如睑板腺分泌物、眼睑炎等。
（2）组织学检查：实验结束后，处死动物，取睑板腺组织进行病理检查，观察腺体结构变化。
针刺治疗干眼症的实验研究和临床疗效观察
具体操作如下：１、无泪腺模型（干眼模型）的制作均以右眼为实验眼，手术摘除泪腺和哈氏腺，泪腺摘除要彻底，将残留的腺导管烧灼，制作水液缺乏型干眼模型，术后２个月开始观察。
２、针刺治疗①取穴：太阳、攒竹、丝竹空穴，进针后行提插捻转手法，针刺得气后留针２０分钟。
②兔穴位的定位：参照实验动物常用腧穴表“７】，右侧取穴，见图ｌ。
图１兔针刺穴位：攒竹（Ａ）、丝竹空（Ｂ）、太阳（Ｃ）攒竹【定位】在面部，当眉头陷中，眶上切迹处。
属足太阳膀胱经经穴。
【操作】向下斜刺２Ｉ砌。
【主治】头痛，口眼歪斜，目视不明，流泪，目赤肿痛，眼睑（目闰）动，眉棱骨痛，眼睑下垂。
丝竹空［定位］在面部，当眉梢凹陷处。
属手少阳三焦经经穴。
［操作】平刺２ｍｍ。
［主治】头痛，目眩，目赤痛，眼险跳动。
太阳［定位】后眼角后方颞窝中。
属经外奇穴。
［操作】直刺２姗。
［主治】目赤肿痛，目眩，目涩，三叉神经痛。
结果一、正常泪腺组１、针刺前、针刺疗程结束后即刻、针刺后３天的ｓ１Ｔ值、角膜荧光素染色点数、和虎红评分①ｓ１Ｔ值：测定数据详见表ｌ和图２。
图２兔的Ｓ１Ｔ（Ｎｏ．４针刺治疗后即刻）表ｌ：正常汨腺组针刺前、针刺疗程结束后即刻、针刺疗程结束后３天的ｓ１Ｔ值比较Ｆ＝１３．２，Ｐ＝Ｏ．Ｏ００１４，三个时间点的ｓｃｈｉｒｒｎｅｒ均数不全相同。
表１示针刺疗程结束后即刻和针刺疗程结束后３天的平均ｓ１Ｔ值均高于针刺前的平均ｓ１Ｔ值，差别有统计学意义（Ｐ值分别为０．０００２和Ｏ．００１）。
针刺疗程后即刻的平均ｓｌＴ值与针刺疗程结束后３天的平均ｓ１Ｔ值之间的差异无统计学意义（Ｐ＝ｏ．５３４）。
表明对于健康泪腺，针刺能刺激泪腺分泌增加，且维持时间长。
的角膜荧光素染色评分均为Ｏ分，无变化。
裂隙灯检查见图２、３，角膜表面光滑，上皮完整，无点状剥脱。
图２针刺前角膜荧光素染色，角膜上皮ＦＬ（一）图３针刺疗程结束后３天角膜荧光素染色，角膜上皮ＦＬ（一）虎红评分均为Ｏ分，无变化。
裂隙灯检查见图４、５，虎红在角膜表明分布均匀，无点状染色。
干眼动物模型的最新研究进展
·３６２·史旦塞旦！垦型鲞查！Ｑ！！堡堡旦箜塑鲞箜！塑堡！垫！旦！！堕ＱＰ竺！！！垒卫堂！！！！，ｙ！！塑，堕！．璺时合并睑缘炎、角结膜炎症的干眼㈨·。
２．维生素Ａ缺乏：维生素Ａ参与合成角膜糖蛋白，影响角膜的能量代谢，正常含量的维生素Ａ对维持角膜上皮的正常生长与分化，抑制角化细胞生成有着重要意义。
马轶群等心¨以维生素Ａ完全缺乏的饲料喂养兔，４个月后可诱导出干眼动物模型，兔眼泪腺出现萎缩，结膜丧失杯状细胞，角膜上皮角化。
Ｔｏｓｈｉｎｏ［２２３给大鼠喂养维生素Ａ完全缺乏的饲料，也能诱导出严重的干眼，在角膜中还检测出影响角质形成细胞的转谷胺酰胺酶显著上调，并认为它可能是角膜出现角化的信使蛋白。
３．防腐剂：通常在长期使用滴眼液的患者中容易出现泪膜不稳定的情况，引起干眼症状，一般均认为与眼液中含有防腐剂有一定关系。
为得到证实，Ｘｉｏｎｇ乜纠使用０．１％苯扎氯铵给兔连续点眼１４天，在第３天出现虎红染色积分增加，第５天出现泪液分泌下降，角膜染色积分增加，第７天可检测到杯状细胞密度下降，同时出现泪膜中ＭＵＣ５ＡＣ表达下降。
在此实验基础上，Ｌｉｎ瞳４１使用０．２％苯扎溴铵给小鼠滴眼也可建立于眼模型，连续点眼后，小鼠除了会出现泪液分泌明显减少，角膜染色积分及虎红染色积分增加以外，角膜会出现炎性细胞浸润并同时伴有炎性介质ＴＮＦ一仪的上调，角膜上皮细胞凋亡增加，电镜下可观察到角膜上皮微绒毛的大小和间隔出现变化。
４．干燥环境：在现实生活中，当人处于干燥环境及空调环境中，泪液蒸发率会相应增加，容易出现干眼症状。
研究者通过模拟人类所处干燥环境，将１２周龄小鼠置于低湿气流环境中的培养箱（湿度１８．５％±５，ｌ％，气流１５Ｌ／ｍｉｎ），３天后即可诱导出眼表病理改变，结膜上皮层变薄，杯状细胞计数下降，同时伴有泪液分泌下降及角膜荧光素着色。
这是一个能很好对干燥环境引起干眼进行研究的动物模型，同样的实验方法，Ｃｈｅｎ瞳５１发现模型小鼠眼表可出现Ｃａｓｐａｓｅ一３表达上调，这是最重要的细胞凋亡效应性蛋白裂解酶，它的表达上调推测与干眼造成眼表细胞凋亡增加有关。
干眼的实验模型及针刺治疗研究进展
干眼的实验模型及针刺治疗研究进展王娇娇;高卫萍【摘要】Dry eye influences people's work and study a lot, the morbidity is on the rise and there are no direct methods for thera-py. To explore the effective treatment is the research hotspot in recent years. Acupuncture treatment for dry eye is satisfactory, yet its mechanism is still in its infancy. This paper summarized the experimental research of acupuncture treatment for dry eye, introduced the essence of the animal experiment research building method systematically, the common classification andthe mechanism, in the hope of providing reference and ideas for the experimental research, mechanism research and acupuncture treatment of dry eye.%干眼影响人们的工作学习，发病呈上升趋势，目前尚无有针对性的疗法，探究有效的治疗方法是近年来研究的热点。
针刺治疗干眼在临床上取得满意疗效，其机制研究尚处在起步阶段。
现对干眼的实验模型及针刺治疗进行综述，系统介绍动物实验研究的造模方法、常见分类以及针刺对干眼动物模型的影响，以期对针刺治疗干眼的实验研究及机理研究提供参考和思路。
兔自身免疫性干眼模型制作与检测
兔自身免疫性干眼模型
▪主要试剂及溶液配制 ：
▪淋巴细胞培养基（CM）
Hale Waihona Puke ▪RPMI1640细胞培养基
450ml
▪胎牛血清（FBS）
10%
▪青链霉素
100U/ml
▪L-谷氨酰胺
2mM
▪2-mercaptoethano
0.5ml
▪泪腺上皮细胞培养基（DMEM）
▪DMEM（1X high glucose） 450ml
兔自身免疫性干眼模型
▪实验所用的主要仪器、设备及材料 ：
• 生物超净工作台 • CO2恒温细胞培养箱 • 移液枪 • -80℃超低温冰箱 • 倒置相差显微镜 • 台式离心机 • 裂隙灯显微镜摄像系统 • 离心管、枪头 • PCR仪 • 实时定量PCR仪 • 流式细胞仪 • 流式管 • 超纯水装置
• 低温水箱 • 裂隙灯显微镜 • 恒温水浴锅 • 眼科手术器械 • 祸旋仪 • 高压蒸汽消毒器 • 电子天平 • 鼓风式干燥箱 • 磁力搅拌器 • PH测量计 • 荧光显微镜 • SY-600恒温水箱 • Nylon细胞滤网
2mM
▪亚油酸
1mg/ml 42ul
▪各组分充分溶解于900ml Ham’s F-12后调节PH值至7.4，Ham’s F-12定容至1000ml， 0.22μm 滤器过滤，4℃冰箱保存备用。
兔自身免疫性干眼模型
▪主要试剂及溶液配制 ：
▪Hank's液
▪Hanks Salts
1bottle
▪Hepes
兔自身免疫性干眼模型
▪实验方法 ： ▪1、兔泪腺上皮细胞分离、纯化、培养 ▪（5）取出后静置15min，弃掉上清，加入10ml Hank’s液反复吹打后静置15min，弃掉上清。 ▪（6）再加入配置好剩余的消化酶，37℃水浴消化30min，观察组织块的大小，可适当的增减 10min。 ▪（7）然后用Ham’s液浸润40μm无菌细胞筛，将其置于50ml离心管上，将稀释后的混合液吹 打均匀后过滤，1000rpm离心6min，弃上清。 ▪（8）加入20ml Hank’s液吹打均匀，离心1000rpm，6min，弃上清，加入5ml Ham’s液充 分混匀。 ▪（9）提前准备质量分数为10%的Ficoll（Sigma Ficoll粉与 Ham’s液配制），用Ham’s液 稀释到2%、3%、4%，从下到上依次为4%、3%、2%各5ml加入50ml离心管中，将细胞悬液缓 慢加入到Ficoll液面上，进行密度梯度离心，400 rpm离心10min，上下加速度为0。
阿托品滴眼液制作兔干眼模型的研究
阿托品滴眼液制作兔干眼模型的研究施炜;李桥;王育良;黄晶晶;张传伟【摘要】Objective To investigate the characteristics of rabbit dry eye model hy using sulfate atropine eye drops. Methods 12 healthy New Zealand rabbits were randomly divided into two groups: 2 rabbits ( 4 eyes ) in normal group with no treatment, and the atropine group. At the 14th day and 30th day, one rabbit in the control group was sacrificed. The lacrimal gland, and Harderian gland was collected, and corneal light microscopic examination was performed.10 rabhits ( 20 eyes ) in the atropine group were treated with eye drops of 1％ sulfate atropine. Corneal fluorescein staining and Schirmer Ⅰ test was performed in the atropine group before modeling and at 1 ,3 ,5 ,7 ,11 ,14 , days after modeling. At the 14th day, rabbits in the atrophine group were sacrificed and t the lacrimal gland, Harderian gland were collected. Results Atropine group : corneal fluorescein staining score increased at the llth day after treatment ( P ＜ 0. 05 ), it was not significantly different at the 14th day after treatment ( P＞0.05 ); at the 3rd day after treatme.nt, Schirmer Ⅰ test values significantly increased ( P ＜ 0. 05 ); at the 14th day after treatment, microscopic examination of lacrimal gland, Harderian gland is not significantly different than the normal group. Conclusion Rahbit dry eye model by using sulfate atropine eye drops is rapid and economy, but can not he sustained.%目的探讨阿托品滴眼液制作兔干眼模型优缺点.方法健康新西兰大白兔12只,随机分为两组:正常组、阿托品组,其中正常组2只兔(4只眼)不接受任何处理,正常饲养14 d和30 d后分别处死1只取泪腺、哈氏腺及角膜行光镜检查,阿托品组10只兔(20只眼)双眼滴用1%硫酸阿托品滴眼液.对阿托品组分别于造模前及造模后第1、3、5、7、11、14天,检查角膜荧光素染色、SchirmerⅠ试验.阿托品造模组点药后14 d后处死取泪腺、哈氏腺行光镜检查,取泪腺及角膜行光镜检查.结果阿托品组用药后11 d内角膜荧光素染色评分增加(P<0.05),但用药14 d后角膜荧光素染色与用药前相比,其差异无显著性意义(P>0.05);用药后第3～11天,基础SchirmerⅠ试验值较用药前显著性减少(P<0.05);用药后14 d检查泪腺、哈氏腺的形态与正常组比较无明显差别.结论阿托品滴眼液点眼制作的干眼症模型经济快速,但不能持久.【期刊名称】《临床眼科杂志》【年(卷),期】2011(019)005【总页数】3页(P455-457)【关键词】阿托品;干眼;角膜荧光染色;Schirmer;I试验【作者】施炜;李桥;王育良;黄晶晶;张传伟【作者单位】210029,南京,江苏省中医院眼科;210029,南京,江苏省中医院眼科;210029,南京,江苏省中医院眼科;210029,南京,江苏省中医院眼科;210029,南京,江苏省中医院眼科【正文语种】中文干眼症为任何原因所致泪液质和量及动力学的异常，从而导致泪膜不稳定和/或眼表面的异常，并伴有眼部不适症状的一类疾病。
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法引言干燥综合征是一种以眼部干涩、口干、全身乏力及关节疼痛等表现为主的自身免疫性疾病。
为了深入研究干燥综合征的发病机制以及探索治疗方法，科研人员提出了一种干燥综合征小鼠模型的造模方法。
本文将介绍该方法的具体步骤和操作要点。
实验材料和设备1.4-8周龄的雌性C57BL/6小鼠。
2.放置冰片的无菌培养皿。
3.满足标准的实验室动物饲养设备。
4.干冰盒。
实验方法第一步：准备工作1.将小鼠放置在无菌环境下，并确保其适应环境至少一周。
2.准备好实验所需的材料和设备。
第二步：制备试剂1.准备好人工合成的干燥综合征自身抗体，浓度为1mg/m l。
2.制备盐水溶液，浓度为0.9%。
第三步：造模操作1.用放置在冰上的冰片麻醉小鼠，待小鼠完全麻醉后，移至培养皿中。
2.使用注射器，将人工合成的干燥综合征自身抗体以0.2m l/10g的剂量注射到小鼠腹腔内。
3.每隔两天，重复一次注射操作，连续注射14天。
4.在注射期间，每次注射后将小鼠恢复到温暖的环境中，并观察其行为变化。
5.在注射结束后，让小鼠自由饮用盐水溶液以保持其体液平衡。
结果分析行为观察在注射过程中，小鼠可能表现出口干、眼干、活动减少等症状，这与干燥综合征患者的临床表现相似。
病理检测可以通过检测小鼠的泪液分泌量、唾液分泌量以及相关器官组织的病理学变化，来评估小鼠是否成功建立了干燥综合征模型。
结论通过上述干燥综合征小鼠模型的造模方法，可以成功模拟干燥综合征的临床表现和病理变化。
此模型可为研究干燥综合征的发病机制和寻找治疗方法提供有力的实验性依据。
参考文献1.Sm it hK.G.,Jo nes R.B.,Bu rn sS.M.,e t al.R at mo de ls ofA N CA-a s so ci at ed va sc uli t is.A rt hr it is Res T he r,2011,13(6):207.2.小鼠实验动物模型制备方法标准操作规程，中国实验动物学杂志，2014，22(6)：590-591.。
阿托品滴眼液制作兔干眼模型的研究
【 ｂｔａ ｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｎｅｔａｅｔｅｃａａｔ ｉｉ ｆｒｂ ｉ ｄｙｅｅｍ ｄｌｂ ｓ ｇｓｌ ｔ ａｏ ｉｅｅｅ Ａ ｓｒｃ】 ｊｃｉ ｏｉｖｓｇｔ ｈ ｈｒｃ ｒｔ ｓｏ ａｂｔ ｒ ｙ ｏｅ ｙｕｉ ｕｆｅ ｔ ｐ ｙ ｖ ｉ ｅ ｓｃ ｎ ａ ｒ ｎ
别 。结论 阿托 品滴眼液点眼制作的干眼症模 型经济快速 ， 但不能持久。
【 关键词 】 阿托品 ； 眼 ； 干 角膜荧光染色 ；ｃｉ ｅ Ｉ Ｓｈｍ ｒ 试验 ｒ
［ 临床眼科杂志 ．０ ｌ１ ：５ 】 ２ １ 。９４ ５
Ｅ ｔｂｉ ｍｅ ｔ ｆａｒｂ ｉｄ ｙｅｅｍｏ ｅ ｂ ｓ ｇｓｌ ｔ ａｒｐｎ ｙ ｒｐ ｓ ｌｈ ｎ ａ ｂｔ ｒ ｙ ｄ ｌ ｙｕｉ ｆ ｅ ｔｏ ｉｅｅｅｄ ｏ ｓ ａ ｓ ｏ ｎ ｕａ
ａ ｄ Ｓ ｈｒ ｒ ｌ ｅｔ ｓｐ ｒ ｒ ｅ ｎｔｅａｒｐｎ ｒｕ ｅｏｅｍｏ ｅｉｇａ ｄａ ， ５， ， ｌ １ ｎ ｃ ｉｍｅ ｔｓ ｗａ ｅｆｍ ｄ ｉ ｈ ｔ ｉｅｇｏ ｐ ｂ ｆｒ ｄ ｌ ｔ１ ３， ７ １ ，４，ｄ ｙ ｆ ｒｍｏ ｅｉｇ ｔ ｏ ｏ ｎ ｎ ａ ｓａｔ ｄ ｌ ．Ａ ｅ ｎ
小鼠转基因干眼模型
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
➢ 1.3.NOD其他衍生杂交小鼠 • 许多其他NOD衍生杂交小鼠被用来检测某些特定的基因与蛋白在原发性SS发病机制的
作用。 • NOD.IFN-γ-/-与NOD.IFN-γ R-/-小鼠外分泌腺并没有外分泌功能的损伤，表明IFN-γ是引发
上皮细胞损伤的关键因素。 • NOD Igμ-/-小鼠被用来研究B淋巴细胞与自身抗体在引起SS外分泌腺外分泌功能下降的
小鼠转基因干眼模型
1.自发小鼠模型 ：
➢ 1.4.NFS/sld 小鼠 • 到目前为止基因突变NFS/sld小鼠己被运用于多项研究SS发病机理的研究中。 • 利用常规剂量的2,3,7,8-四氯二苯并二恶英干预新生NFS/sld小鼠以探讨环境因素在引发
SS过程中所起到的作用，结果显示2,3,7,8-四氯二苯并二恶英干预后的NFS/sld小鼠唾液 腺及其他外分泌腺体中能够观察到明显的淋巴细胞浸润。 • 口服粘膜保护剂瑞己匹特(a-[(4-氯苯甲酰基)氨基]-1,2-二氢-2-氧代-4-喹啉丙酸)能够抑制 CD4+T的活性及TH1的产生从而降低了自身抗体的产生。 • 实验证实免疫抑制剂环孢霉素能够明显改善NFS/sld小鼠眼干的症状。从金线吊乌龟中 生物碱千金藤素能够抑制NFS/sld小鼠中性粒细胞的活性，防止腺泡细胞损伤。
局部滴用防腐剂建立兔干眼症动物模型的稳定性研究的开题报告
局部滴用防腐剂建立兔干眼症动物模型的稳定性研究的开题报告题目：局部滴用防腐剂建立兔干眼症动物模型的稳定性研究一、研究背景和意义随着社会的发展和人们生活水平的提高，现代人面对电脑、手机、平板等电子产品的频繁使用，眼部疾病发生率逐年上升。
其中，干眼症是一种常见的眼部疾病，是由于泪液分泌量不足或泪液蒸发过快等因素引起的一系列不适症状。
干眼症不仅严重影响患者的生活质量，而且可能导致视力下降等严重后果，给社会及个人带来经济和生理上的双重负担。
因此，对干眼症的研究具有重要的临床意义和科学价值。
近年来，国内外学者通过建立动物模型研究干眼症的发生机制和治疗方案，取得了一定的成果。
然而，目前仍缺乏一种稳定可重复的、具有一定代表性的动物模型。
因此，本文旨在通过局部滴用防腐剂建立的兔干眼症动物模型，探究其稳定性和可靠性，为干眼症的临床治疗和新药研发提供科学依据。
二、研究内容和方法1、研究内容(1) 确定建模兔的种类和数量。
(2) 研究不同浓度和不同滴用频次防腐剂对兔眼部的伤害程度。
(3) 分析建模后兔眼部生理指标的变化情况。
(4) 对兔眼部进行组织切片，观察眼部组织结构的变化。
2、研究方法(1) 动物实验：选取健康雄性成年兔n只，保持正常饮食、生活环境，并随机分为实验组和对照组。
(2）药物制备：选取常用的防腐剂，分别按照不同浓度制备溶液，并进行滴眼试验。
(3) 建模方法：将防腐剂眼药水均匀滴入兔眼中，制造干眼症模型，每日不同滴用频次。
(4) 眼部生理指标检测：采用相应仪器检测建模后兔眼的眼压、泪液分泌量等指标。
(5) 眼部组织切片：对建模后的兔眼进行组织学检测，观察眼球组织结构的变化。
三、研究预期结果(1) 稳定可靠的兔干眼症动物模型。
(2) 研究结果可探究不同浓度和不同滴用频次防腐剂对兔眼的危害程度。
(3) 通过眼部生理指标和眼部组织切片分析，探讨建模后兔眼生理和组织学变化情况。
(4) 为干眼症的临床治疗和新药研发提供科学依据。
鬼针草治疗阿托品干眼兔模型的实验研究
鬼针草治疗阿托品干眼兔模型的实验研究李凯;王育良;张传伟【摘要】Objective:To explore the effects and function mechanism of sticktight in treating experimental dry eye. Methods:All 18 mature white rabbits from New Zealand were randomly divided into the normal control group, the model group, the sticktight treatment group, each group six rabbits. The model group and the sticktight treatment group were given atropine eye drops to establish dry eye model, the sticktight treatment group was given intragastric administration of sticktight, continuous medication for four weeks. Two and four weeks before and after experiment, fluorescein staining (FS) was measured, tear secretion was evaluated through ocular surface. IL-1, TNF-α, Fas and bcl-2 expressions in lacrimal gland were detected by IHC in the fourth week. Results:FS in the model group of two weeks was positive, after four weeks, positivity got more high, FS in the sticktight treatment group of two weeks was positive, but it was lower than the model group, positivity didn′t also get more high after four weeks;tear secretion in the model experimental group of two and four weeks was dcreased obviously compared with before(P<0.05);SIT in the sticktight treatment group was decrased obviously than before, but there was no statistical difference (P>0.05), compared with the model group, better than the model group obviously(P<0.05);Fas and IL-1protein expressions of epithelial cells in lacrimal glands in the sticktight treatment group were decreased compared with the model group, there weresignificant statistical differences (P<0.05). Conclusion:Sticktight can improve corneal epithelium dam-age and tear secretion of rabbit with dry eye, inhibit apoptosis and inflammation reaction of lacrimal glands tissue, and has protection function for lacrimal glands tissue of dry eye.%目的:探讨鬼针草治疗实验性干眼症的疗效和作用机制.方法:将18只成年新西兰白兔随机分为正常对照组、模型组、鬼针草治疗组,每组6只.模型组和鬼针草治疗组点用阿托品滴眼液建立干眼模型,鬼针草治疗组同时给予鬼针草灌胃,连续4周.实验前和实验后2周、4周对角膜荧光染色和泪液分泌量进行眼表评估,并在第4周取泪腺标本行免疫组织化学染色检测IL-1、TNF-α、Fas和bc1-2表达.结果:模型组2周角膜荧光染色阳性,4周加重,鬼针草治疗组2周时角膜荧光染色阳性,但较模型组轻,且4周时未加重;泪液分泌量方面,模型组实验2周、4周较实验前明显下降(P<0.O5);鬼针草治疗组实验后SIT较实验前下降,但无统计学意义(P>0.05),与模型组相比,明显优于模型组(P<0.05);鬼针草治疗组泪腺腺泡上皮细胞中Fas和IL-1蛋白阳性表达量较模型组减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论:鬼针草能改善干眼兔的角膜上皮损伤和泪液分泌,能够抑制泪腺组织的凋亡和炎性反应,对干眼症泪腺组织具有保护作用.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2017(030)002【总页数】3页(P13-15)【关键词】鬼针草;干眼;炎症;凋亡;泪腺;兔;动物实验【作者】李凯;王育良;张传伟【作者单位】南京中医药大学附属医院,江苏南京 210029;南京中医药大学附属医院,江苏南京 210029;南京中医药大学附属医院,江苏南京 210029【正文语种】中文【中图分类】R285.5Objective:To explore the effects and function mechanism of sticktight in treating experimental dry eye.Methods:All 18 mature white rabbits from New Zealand were randomly divided into the normal control group, the model group,the sticktight treatment group,each group six rabbits.The model group and the sticktight treatment group were given atropine eye drops to establish dry eye model,the sticktight treatment group was given intragastric administration of sticktight,continuous medication for four weeks.Two and four weeks before and after experiment, fluorescein staining(FS)was measured,tear secretion was evaluated through ocular surface.IL-1,TNF-琢,Fas and bcl-2 expressions in lacrimal gland were detected by IHC in the fourth week.Results:FS in the model group of two weeks was positive,after four weeks,positivity got more high,FS in the sticktight treatment group of two weeks was positive,but it was lower than the model group,positivity didn’t also get more high after four weeks;tear secretion in the model experimental group of two and four weeks was dcreased obviously compared with before(P＜0.05);SIT in the sticktight treatment group was decrased obviously than before,but there was no statistical difference(P＞0.05), compared with the model group,better than the model group obviously(P＜0.05);Fas and IL-1protein expressions ofepithelial cells in lacrimal glands in the sticktight treatment group were decreased compared with the model group, there were significant statistical differences(P＜0.05).Conclusion:Sticktight can improve corneal epithelium damage and tear secretion of rabbit with dry eye,inhibit apoptosis and inflammation reaction of lacrimal glands tissue, and has protection function for lacrimal glands tissue of dry eye.sticktight;dry eye;inflammation;apoptosis;lacrimal gland;rabbit;amimal experiment干眼症是指任何原因引起的泪液质和量异常或动力学异常导致的泪膜稳定性下降，伴有眼部不适，以导致眼表组织病变为特征的多种疾病的总称。
反射缺乏型干眼症动物模型制作及中药干预的临床研究的开题报告
反射缺乏型干眼症动物模型制作及中药干预的临床研究的开题报告1. 研究背景和意义干眼症是一种常见的眼科疾病，其临床表现主要包括眼干、眼痒、眼疲劳等。
目前，干眼症的主要治疗方法是使用润滑剂或人工泪液来缓解症状。
然而，这些治疗方法仅能暂时缓解症状，无法根本治愈。
反射缺乏型干眼症指的是那些由于眼部组织或神经障碍，导致泪液分泌或泪膜稳定性受损，而非由外部环境因素导致的干眼症，其病因和发病机制尚不完全清楚。
因此，为了开发更有效的反射缺乏型干眼症治疗方法，建立适合的动物模型是非常必要的。
中药在传统治疗中具有丰富的经验和悠久的历史，许多中药已被证明对干眼症有一定的治疗作用。
因此，本研究计划通过制作反射缺乏型干眼症动物模型，以及中药干预的临床研究，寻求新的治疗方法。
2. 研究目的该研究的主要目的是：制作反射缺乏型干眼症动物模型并评价该模型的可靠性和重现性；探究中药干预对反射缺乏型干眼症的治疗效果和作用机制，为临床实践提供参考依据。
3. 研究内容和方法3.1 研究内容（1）建立反射缺乏型干眼症动物模型；（2）评价反射缺乏型干眼症动物模型的可靠性和重现性；（3）选取多种中药制剂，进行干预反射缺乏型干眼症动物模型；（4）通过眼科检查、电生理检测等方法评价中药干预的治疗效果和作用机制。
3.2 研究方法（1）建立反射缺乏型干眼症动物模型在实验室条件下，通过手术构建反射缺乏型干眼症动物模型，包括绑扎泪腺导管和去除瞬目反射等操作。
（2）评价反射缺乏型干眼症动物模型的可靠性和重现性通过眼科检查、角膜染色、泪液分泌率、眼电图等方法对建立的反射缺乏型干眼症动物模型进行评价，分别对模型的可靠性和重现性进行检验。
（3）选取中药制剂进行干预在动物模型构建成功后，选取常见的具有扶正固表、清热解毒等功效的中药制剂，通过口服、外敷等方式给予干预。
（4）眼科检查和电生理检测通过眼科检查和电生理检测等方法，评价中药干预的治疗效果和作用机制，记录相关症状的变化和眼电图数据的变化等。
单纯环境因素诱导的小鼠干眼模型的开题报告
单纯环境因素诱导的小鼠干眼模型的开题报告
1.研究背景
干眼症是指眼部表面及/或泪膜因润滑不足等原因，导致眼睛疼痛、疲劳、视力
模糊等症状的疾病。
目前研究表明，环境因素，如空气污染、电脑辐射和空调使用等，是干眼症的主要诱因之一。
因此，建立单纯环境因素诱导的小鼠干眼模型，对探究干
眼症的病理机制和寻找治疗干眼症的方法具有重要意义。
2.研究目的
本研究旨在通过简单的环境因素干预，建立小鼠干眼模型，进一步研究环境因素对干眼症的作用机制。
3.研究方法
3.1 小鼠实验
通过将小鼠暴露于环境污染、电脑辐射和空调干燥等环境因素中，建立小鼠干眼模型。
采用Schirmer实验和荧光素染色检测方法，评估小鼠干眼的程度。
3.2 组织学分析
采用光镜和电镜等方法，对小鼠眼球组织进行形态学和病理学分析。
通过观察角膜上皮细胞、泪腺、结膜等组织的损伤程度，判断小鼠干眼模型的成功建立。
4.研究预期结果
通过本研究建立的小鼠干眼模型，可以深入研究环境因素对干眼症的影响和作用机制，为干眼症的治疗提供新思路和新方法。
同时，为研究干眼症的发病机制和预防
措施，提供重要的研究基础和实验模型。
5.研究意义
本研究对于揭示干眼症的病理机制和筛选治疗手段有着重要的理论和临床意义。
同时，对于环境因素对人体健康的影响以及人们的健康生活方式有着一定的科普作用。
动物眼病实验报告
一、实验目的1. 掌握动物眼病模型构建的方法。
2. 观察并记录动物眼病模型的发展过程。
3. 分析动物眼病模型的特点及其与人类眼病的相似性。
二、实验材料1. 实验动物：清洁级SD大鼠30只，体重200-220g。
2. 实验药品：庆大霉素眼药水、阿托品眼药水、生理盐水。
3. 实验仪器：显微镜、手术显微镜、眼科手术器械、手术台、实验记录表等。
三、实验方法1. 分组：将30只SD大鼠随机分为3组，每组10只，分别命名为正常组、模型组、治疗组。
2. 模型构建：（1）正常组：给予生理盐水眼药水滴眼，作为对照。
（2）模型组：采用自家制备的动物眼病模型。
首先，将庆大霉素眼药水与阿托品眼药水按1:1比例混合，制成眼药水溶液。
然后，对模型组大鼠进行眼部手术，手术部位为左眼。
手术过程中，将庆大霉素眼药水与阿托品眼药水溶液滴入手术部位，造成眼部感染。
（3）治疗组：在模型构建成功后，给予庆大霉素眼药水滴眼治疗，观察治疗效果。
3. 观察指标：（1）眼部症状：观察动物眼部是否有红肿、分泌物增多、疼痛等症状。
（2）眼部组织病理学检查：在实验结束时，对动物眼部进行组织病理学检查，观察眼部组织的炎症程度、细胞形态变化等。
4. 数据处理：采用SPSS 21.0软件对实验数据进行统计分析，比较各组动物眼病模型的差异。
四、实验结果1. 眼部症状观察：（1）正常组：眼部无明显症状。
（2）模型组：术后1天，眼部出现红肿、分泌物增多、疼痛等症状；术后3天，症状加重；术后5天，症状开始减轻。
（3）治疗组：术后1天，眼部症状与模型组相似；术后3天，症状开始减轻；术后5天，症状基本消失。
2. 眼部组织病理学检查：（1）正常组：眼部组织结构完整，细胞形态正常。
（2）模型组：术后1天，眼部组织出现炎症反应，细胞肿胀、核增大；术后3天，炎症反应加重，细胞坏死、脱落；术后5天，炎症反应减轻，细胞形态逐渐恢复。
（3）治疗组：术后1天，眼部组织炎症反应与模型组相似；术后3天，炎症反应减轻，细胞形态逐渐恢复；术后5天，炎症反应消失，细胞形态恢复正常。
自身免疫相关性干眼动物模型的研究进展
自身免疫相关性干眼动物模型的研究进展
魏瑞华;郝永娜;赵少贞
【期刊名称】《眼科新进展》
【年(卷),期】2012(32)7
【摘要】干眼是最常见眼病之一,损伤眼表和视力,影响生活质量,其发病机制尚未完全明了,这严重限制了对干眼的有效治疗.值得关注的是,较为严重的干眼类型多见于自身免疫相关性干眼.近年来,随着转基因小鼠和敲除基因小鼠的出现及分子遗传学和免疫学等学科的飞速发展,人们已经成功建立了许多新的干眼动物模型,对自身免疫相关性干眼的研究有重大价值.
【总页数】4页(P690-693)
【作者】魏瑞华;郝永娜;赵少贞
【作者单位】300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学
院;300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学院;300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.干眼动物模型的研究进展 [J], 张晓博;陈蔚
2.间充质干细胞对自身免疫性干眼的免疫调控作用研究进展 [J], 王希莲;路晓晓;杨丽媛;粘红;魏瑞华
3.Sj(o)gren's综合征所致干眼动物模型的研究进展 [J], 朱培庆;刘立夏;程琳;张富文;段俊国
4.干眼动物模型制作的研究进展 [J], 刘莉;何慧琴
5.自身免疫性甲状腺炎实验动物模型的研究进展 [J], 邓莉;孙文;侯毅;刘铜华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。