合欢树内生细菌HHY-3的生防作用研究
合欢树病虫害的种类及防治
防治的重要性
保护生态环境
有效的病虫害防治可以保证合 欢树林的健康生长，维护生态
平衡，保护生态环境。
提高经济效益
合欢树是重要的观赏和药用植物 ，防治病虫害可以保护合欢树的 品质和产量，提高经济效益。
促进可持续发展
通过科学合理的防治方法，可以促 进合欢树种植业的可持续发展，为 社会提供更多的生态、经济和社会 效益。
合理用药
针对不同的病害类型，选 用相应的农药进行防治， 注意使用方法和浓度，避 免对合欢树造成药害。
虫害防治的实践应用
虫害种类识别
对合欢树的虫害进行准确识别 ，包括害虫种类、生活习性、 危害部位等，为防治提供基础
信息。
生物防治
利用天敌、寄生性昆虫等生物手 段对合欢树的虫害进行防治，减 少化学农药的使用。
药用价值
合欢树的树皮和树叶具有一定的药 用价值，可治疗失眠、头痛等病症 。
合欢树病虫害的危害
叶片损伤
合欢树的病虫害会导致叶片出 现病斑、卷曲、枯萎等现象。
枝干腐烂
病虫害还会引起枝干腐烂，严 重时会导致树冠倾斜，甚至整
棵树死亡。
果实损失
合欢树果实也会受到病虫害影 响，造成果实品质下降，损失
营养和经济价值。
虫害的种类
01
02
03
蝗虫
以叶片为食，严重时将整 株树的叶片吃光，影响树 木的正常生长。
木虱
以树叶和嫩芽为食，严重 时导致叶片失绿和树势衰 弱。
天牛
幼虫在树干内部蛀食，严 重时引起树木枯萎和风折 。成虫以花粉和嫩枝为食 ，导致树木生长不良。
03
合欢树病虫害的症状识别
病害的症状识别
叶片病害
合欢树的叶片出现病斑、 枯萎、黄化、脱落等症状 ，可能患有叶斑病、锈病 等病害。
合欢属植物中三萜皂苷及药理活性研究进展
合欢属植物中三萜皂苷及药理活性研究进展介绍合欢属三萜类化学成分及其药理活性的研究进展。
综述了该属90多个三萜皂苷化合物及其抗肿瘤、抗生育、镇静安神、抗菌等方面的药理活性。
[Abstract] To introduct triterpenoid chemical constituents of albizia and its pharmacological activity in progress. To summary 90 triterpenoid saponin and its anti-tumor and anti-fertility, calm soothe the nerves, antibacterial activity, such as the pharmacological activites.[Key words] Albizia; Titerpene saponin; Pharmacological activites合欢属（Albizia Durazz.），含羞草科，全世界不下150种，广布于全世界的热带和亚热带地区。
我国有16种，主要分布在南部和西南部。
其中最常见的有合欢A. julibrissin Durazz，楹树 A. chinensis（osbeck）Merr.和大叶合欢A. lebbeck （L.）Benth. 等[1]。
合欢的皮、花、叶均可入药，性味甘平，有安神解郁、活血清肿、生肌续骨之功。
《中国药学大辞典》写道“合欢树植之庭院，使你解忿而欢乐，故有‘萱草忘忧，合欢解忿’之称”。
合欢花有安神解郁疗效，可用于七情所伤而致的忿怒忧郁、虚烦不安、健康失眠等症，常服可以健脑益智。
合欢皮也是神经系统的强壮调节剂，许多安神药中均有合欢成分。
合欢嫩叶富含维生素C，为佐餐佳品。
目前国内外研究的合欢属植物中含的化学成分很多，三萜皂苷就是其中的一种，结构复杂，有抗肿瘤、镇静催眠、抗抑郁、抗生育等药理活性。
合欢树病虫害的种类和防治
合欢树病虫害的种类和防治2023-11-10•合欢树常见病虫害种类•病虫害的症状及危害•病虫害的防治方法目录•防治效果与注意事项•合欢树的健康维护建议01合欢树常见病虫害种类症状识别锈病是合欢树较为常见的一种病害，主要危害叶片和嫩枝。
感染后，叶片会出现黄色的斑点，并逐渐扩大，形成圆形或椭圆形的病斑，叶片背部也会隆起。
严重时，会导致叶片枯萎脱落，嫩枝死亡。
防治方法加强合欢树的栽培管理，提高植株的抗病能力。
定期修剪枝条，保持通风透光。
在发病初期，可以使用三唑酮、苯醚甲环唑等杀菌剂进行喷洒防治。
锈病枯萎病是合欢树的另一种常见病害，主要危害树干和根系。
感染后，树干会出现褐色斑点，并逐渐扩大，导致树皮开裂、脱落。
根系也会变黑腐烂，整棵树逐渐枯萎。
症状识别选择抗病性强的品种进行种植，加强栽培管理，增强植株的抗病能力。
在发病初期，可以采取药剂灌根的方法进行防治，常用的药剂有恶霉灵、甲霜灵等。
防治方法枯萎病黑斑病也是一种常见的合欢树病害，主要危害叶片。
感染后，叶片上会出现圆形或椭圆形的黑斑，导致叶片早落。
严重时，会导致枝条枯死。
防治方法加强栽培管理，定期修剪枝条，保持通风透光。
在发病初期，可以使用代森锰锌、百菌清等杀菌剂进行喷洒防治。
症状识别介壳虫是一种常见的合欢树害虫，主要危害枝条和叶片。
它们通常寄生在树干或枝条上，吸取植物的汁液，导致树势衰弱。
介壳虫分泌的蜜露还会诱发煤污病等病害。
防治方法加强栽培管理，定期修剪枝条，增强植株的抗虫能力。
在若虫孵化期，可以使用吡虫啉、呋虫胺等杀虫剂进行喷洒防治。
对于少量介壳虫，可以使用人工刮除的方法进行防治。
蚜虫症状识别蚜虫是一种常见的合欢树害虫，主要危害叶片和嫩枝。
它们通常群集在叶片背面或嫩枝上，吸取植物的汁液，导致叶片卷曲、皱缩，严重时会导致枝条枯萎。
蚜虫还会分泌蜜露诱发煤污病等病害。
防治方法加强栽培管理，定期修剪枝条，增强植株的抗虫能力。
在若虫孵化期或成虫期，可以使用吡蚜酮、烯啶虫胺等杀虫剂进行喷洒防治。
合欢树病虫害的种类及防治
合欢树病虫害的种类及防治合欢树病虫害的种类及防治一、合欢树病害分类及防治方法1.1 合欢树炭疽病合欢树炭疽病是合欢树主要的病害之一，可导致合欢树的叶片和嫩枝出现圆形或椭圆形的黑褐色病斑。
防治方法包括定期清除枯叶和病斑，保持树体通风透气，适度施肥增强合欢树的抵抗力。
1.2 合欢树霉病合欢树霉病是由霉菌引起的，可导致合欢树的叶片和嫩枝表面出现黑色绒毛状霉斑。
防治方法包括适度修剪合欢树的枝干和叶片，减少湿度，保持树体通风，同时可使用防霉剂进行喷洒。
1.3 合欢树疮痂病合欢树疮痂病是由细菌引起的，可导致合欢树的树皮出现疮痂状病斑，严重时会引发树体衰弱和死亡。
防治方法包括及时清除感染的树皮，保持树体干燥，适度施肥增加养分供应，同时可使用抗菌剂进行喷洒。
1.4 合欢树根腐病合欢树根腐病是由真菌引起的，可导致合欢树根部腐烂，严重影响树体的生长和发育。
防治方法包括选择健康的种苗，合理排水，避免过度浇水，及时清理根系病变部分，同时可使用杀菌剂进行处理。
二、合欢树常见虫害及防治方法2.1 合欢树叶螨虫合欢树叶螨虫会以寄生方式吸取合欢树的叶片汁液，导致叶片黄化、干枯和掉落。
防治方法包括定期检查树叶，发现虫害立即剪除受害部分，可使用杀虫剂进行喷洒。
2.2 合欢树瘿螨合欢树瘿螨可导致合欢树的叶背、芽端、嫩枝等部位形成肿瘤状膨大，严重时会影响树体的生长和发育。
防治方法包括剪除受害部分，适度修剪树枝，定期清洗合欢树的叶面，可使用杀虫剂进行喷洒。
2.3 合欢树叶蝉合欢树叶蝉会以食叶方式危害合欢树，导致叶片呈现银白色斑点和蜂窝状小孔，严重时会导致合欢树的叶片凋落。
防治方法包括及时清除受害叶片，可使用杀虫剂进行喷洒。
2.4 合欢树蛀幼虫合欢树蛀幼虫会在合欢树的树干和枝干内钻洞，导致树体形成虫孔，树皮开裂并脱落。
防治方法包括及时剪除感染的树干和枝干，保持树体干燥，可使用杀虫剂进行喷洒。
三、附件本文档所涉及的附件包括合欢树病虫害的图片和防治方案的详细说明，请参阅附件。
合欢树病虫害的种类及防治
合欢树病虫害的种类及防治合欢树是一种常见的观赏树木，其叶片翠绿，花朵鲜艳，枝干娇柔，但在生长过程中也会受到一些病虫害的影响。
下面将对合欢树常见的病虫害种类及防治方法进行介绍。
一、合欢树病害1.合欢树霜霉病霜霉病是合欢树常见的病害之一，主要表现为叶片出现白色霉斑，后期叶片逐渐褪色干枯。
防治措施包括及时清理病叶，减少病害的扩散。
可使用波尔多液、六亚甲基四胺等杀菌剂进行喷洒。
2.合欢树炭疽病炭疽病主要通过合欢树的疮痂及叶和果实等部位的皮肤裂口进行侵入，引起叶片发黄、脱落以及果实腐烂等症状。
防治方法包括合理修剪树枝，增强合欢树的抗病性，同时也可以使用草铵膦等杀菌剂进行喷洒控制。
3.合欢树立枯病合欢树立枯病主要由土壤中的真菌引起，导致根系受损，进而导致树木枯死。
防治措施主要是选择耐病虫害的合欢树品种，并合理掌控土壤湿度，避免过湿导致病害的发生。
二、合欢树虫害1.合欢树毛虫合欢树毛虫主要以树叶为食，严重时会导致树叶被全部吃光。
防治措施包括定期检查树木，发现毛虫时可用氯氰菊酯等农药进行喷洒。
同时也可以放养一些天敌，如花蛛和天牛，帮助控制毛虫数量。
2.合欢树粉虱合欢树粉虱吸食叶片汁液，导致叶片出现黄斑，甚至萎缩凋谢等症状。
防治方法包括喷洒马拉硫磷、嘧菌酯等杀虫剂进行控制，同时也可以适时修剪病虫害严重的枝条。
3.合欢树象甲虫合欢树象甲虫以幼苗和嫩枝为食，导致树木生长缓慢。
防治方法包括使用敌敌畏、乐果等农药进行喷洒，也可以在树干上涂抹一些黄板以吸引虫害，然后进行人工捕杀。
以上是合欢树常见的病虫害种类及防治方法的介绍。
为了更好地保护合欢树，我们可以加强树木的管理，保持环境卫生，合理施肥，增强树木的抗病虫害能力。
同时，在使用农药时要注意使用剂量和方法，避免对环境和人体健康造成损害。
合欢树病虫害的种类及防治
合欢树病虫害的种类及防治之阳早格格创做合欢树枯萎病为系统性熏染病，是合欢树上的一种毁灭性病害.该病正在幼树、大树均可爆收，1年死苗收病少，3—5年死树收病多而宽沉，死少势强的植株收病多，收病速度快，易枯死.1．1收病症状幼苗染病叶片变黄，根茎基部变硬，易猝倒，终尾齐株枯死.成株染病，先从1~2根枝条出现症状，病枝上的叶片萎蔫下垂，叶色呈浓绿色或者浓黄色，后期搞枯脱降，随后部分枝条启初搞枯，逐步扩展到整株，至牺牲.截启主搞断里，可睹一整圈变色环，树根部断里呈褐色或者乌褐色.1．2做用条件合欢枯萎病受气候条件、土量战时势、栽培环境及栽植管制的做用.下干、多雨季节收病宽沉；土量粘沉、时势矮洼、排火没有良，积火天易收病；正在草坪中培植的合欢，易受草坪中镰刀菌根腐病病本的接叉熏染，收病较多；移栽或者建剪等管制历程中制成的伤心，会减少镰刀菌侵染机会，使植株收病；管制历程中，忽搞忽干，缺肥少火，大火漫灌，排火没有即时等均会做用植株死少，降矮抗病力而加沉收病.1．3防治一是采用抗病性强的品种，如浅色花的驰闻、深红色花的夏洛特等，正在培植形式上，最佳采与单株或者几株粉饰培植于绿化戴、花园、庭院，没有宜大里积或者正在街讲上搞止讲树，果为街讲土壤脆真，排火没有良.二是搞佳合欢幼苗的病虫害防止.当幼苗少出2—3片真叶时，喷1次甲胺磷2000倍液，防止蚂蚁等害虫妨害幼苗，以来定时定量正在叶里上喷洒叶里肥，普及苗木抗病本领. 三是采用相宜死少的栽植天. 以土壤疏紧、排火条件较佳的场合培植，切忌矮洼积火.四是缩小伤心.正在凡是保护管制中，尽管少剪枝，剪心要适合涂抹呵护剂.移栽时，以移栽小苗为宜，果大树移栽中的伤根多，为病本侵染提供了可乘之机；大树移栽时，缩小起苗与输送、定植时间，栽前对付根部举止杀菌消毒，可喷洒40％多菌灵可干性粉剂500倍液，或者65％代森锌可干性粉剂500倍液；移栽时，可用10％硫酸铜溶液蘸根处理，也可共时喷施死根粉等死少安排剂，以促进根系萌爆收少.对付于已截过的枝搞断里，涂抹呵护剂，通过绑草加以呵护，防治病菌侵进.栽后加强管制，坐时灌透火，促进伤心即时愈合，正在凡是浇火、施肥等管制历程中尽管缩小创伤心.涝时浇火，雨后排涝，定期施肥，巩固植株少势，普及抗病本领.五是缩小菌本熏染.合欢树尽管没有正在草坪中栽植，果草坪携戴菌本对付合欢会制成接叉熏染；对付栽进草坪中的合欢树，要扫除树四里的草坪及纯草.正在移栽前，尽管提前掘坑，下温晾晒，用40％五氯硝基苯处理栽植坑土，更加是对付枯萎病下收区，必须举止土壤灭菌处理.六是药剂处理.对付症状沉微的病株，正在调换土壤的共时分离药剂处理举止统制.可采与70％甲基托布津可干性粉、60％多·祸可干性粉100倍液喷洒树搞或者涂抹；或者使用14．5％多效灵火溶性粉剂、40％五氯硝基苯粉剂300倍液，以及抗枯宁、甲基托布津、多菌灵等农药惯例浓度灌溉土壤，每8天安排灌1次，连绝3～4次可灵验遏止病情扩展，并使植株逐步回复；而使用70％基托布津可干性粉剂300倍液，通过输液的办法输进植株内，可普及疗效.正在采与以上步伐的共时，对付树穴及周围相邻土壤灌溉40％祸好胂50倍液、40％五氯硝基苯粉剂300倍液，举止消毒，防止病菌伸张.2 合欢锈病2．1收病症状收病后叶背出现没有明隐的浓黄色乌面，乌面爆收红色疱状物.早期正在疱状物中集出锈褐黄色粉终，即病本菌的夏孢子堆.后期正在疱状物中集出暗褐色粉状物，即病本菌的冬孢子.为金合欢球锈菌，担子菌亚门、冬孢菌目、锈菌目.每年收病正在lo月下旬至第2年4月间，病部爆收的疱状物启初时惟有夏孢子堆，约1个月后，出现冬孢子堆.2．2防治喷洒0．3 Beo石硫合剂，或者75％百菌浑可干性粉剂400倍液，10～15天喷1次，连喷2~3次.3 合欢凶丁虫鞘翅目，凶丁虫科.成虫体少3．5~4．Omm，铜绿色，稍戴光芒，幼虫老死时体少5~6 mm，头很小，乌褐色，胸部较宽，背部较细，无脚.蛀于害虫，幼虫蛀食树皮战木量部边材部分，损害树木输导功能，宽沉时制成树木牺牲.3．1爆收顺序 1年l代，6月下旬以老死幼虫正在被害树搞内过冬.次年正在隧讲内化蛹，6月上旬合欢树花蕾期成虫启初羽化出门，常正在树皮上爬动，并到树冠上咬食树叶.多正在搞战枝上产卵，每处产卵一粒，幼虫孵化潜进树皮为害，到9、10月份被害处流出乌褐色胶，向来为害到11月幼虫启初过冬.3．2防治要领一是6月上旬成虫羽化期往树冠、搞、枝上喷1500~2000倍的20％菊杀乳油等杀成虫.二是正在5月成虫羽化前举止树搞涂黑，防止产卵.三是幼虫初正在树皮内为害时，往被害处涂煤油溴氰菊酯混同液(1：1)，杀树皮内幼虫.四是注意栽前苗木的检疫处事，栽后加强管制，趁早创制虫害，即时扫除枯株，缩小虫源及伸张.4 单条合欢天牛成虫22—26mm，宽5～6mm，体棕色或者黄棕色.背板中央及二侧有金绿色纵纹.鞘翅色较浅，每翅中央有一条蓝绿色纵纹.鞘翅刻面细稀.每翅有3条纵脊纹.老死幼虫体少50mm安排，乳红色；前胸背板前缘有6个灰褐色花纹，胸脚3对付.妨害时，可制成瞅赏树木的大批牺牲，降矮木料利用战绿化瞅赏效验.4．1爆收顺序 2年1代，翌秋越冬幼虫正在树皮下洪量为害，成虫6—8月出现，有趋光性，卵产正在树皮漏洞处.树皮脱降处，暴露的木量部有幼虫蛀人时的少圆形孔.4．2防治要领一是人为捕杀成虫，成虫羽化期，可于早上8面安排捕杀.二是正在幼虫孵化期，可正在树搞上喷洒杀螟紧.三是正在树搞基部等距离挨小孔3-4个，孔深3～5cm，注进50％的暂效磷1～3倍稀释液，效验较佳.四是正在幼虫妨害期，树盘灌溉250～400倍的氧化乐果乳油，防治效验也比较理念.5 合欢巢蛾鳞翅目，巢蛾科.成虫体少6 mm安排，翅展12 mm安排.前翅银灰色，有许多没有太准则的乌面.卵椭圆形，乌绿色，成片.老幼虫体少9～13 mm，初孵时黄绿色，渐变乌绿色，背中央战侧有五条纵止黄绿线.受惊后非常活跃，往后跳动，吐丝下垂.蛹少6 mm安排，黑褐色，包正在灰红色丝茧中.主要食叶，宽沉时，谦树虫巢，洪量叶片叶肉被啃光或者残破没有齐.树冠浮现一片枯搞情形.5．1爆收顺序普遍1年2代，蛹多正在树皮缝里、树洞里、附近兴办物上，特天是正在墙檐下过冬.次年6月中、下旬(中龄合欢衰花期)成虫羽化，接尾后产卵正在叶片上，叶片上出现灰红色网状斑，稍少大后吐丝把小枝战叶连缀所有，集体躲正在巢内咬食叶片为害.7月下旬启初正在巢内化蛹.8月上旬第l代成虫羽化.8月中旬第2代幼虫孵化为害，那时易出现灾害，树冠出现枯搞局里.9月尾幼虫启初做茧化蛹过冬.5．2 防治要领一是正在幼虫期喷1500～2000倍的50％辛硫磷乳油，或者2000倍的20％菊杀乳油，或者1000～1500倍的90％敌百虫晶体等杀幼虫.二是正在秋、冬、秋刷除树木枝搞战附近兴办物上的过冬茧蛹并消亡.三是正在幼虫做巢期，虫心已几的可剪掉虫巢，消亡幼虫.。
合欢主要病虫害及其防治
2023-10-30•合欢病虫害概述•病害种类及防治•虫害种类及防治目录•防治方法与技术•防治实践与效果•结论与展望01合欢病虫害概述是指对合欢树造成危害的各种生物和非生物因素。
这些因素会导致合欢树的生长不良、产量下降，甚至死亡。
合欢病虫害根据危害来源的不同，可以将合欢病虫害分为病害和虫害。
分类定义与分类危害合欢病虫害会导致树木生长缓慢、枝叶枯黄、落叶、落花、落果等现象，严重时甚至整株死亡，给林业和园林生产带来重大损失。
影响合欢病虫害不仅对树木本身造成危害，还会对周围环境产生影响，如传播病毒、污染环境等。
危害与影响防治意义有效的防治合欢病虫害可以减少经济损失，保护生态环境，维护森林和园林的美观和生态平衡。
现状目前，对于合欢病虫害的防治，主要采取以预防为主，综合治理的策略。
通过加强树木检疫、提高树木抗性、科学合理的使用农药等措施来控制和减少病虫害的发生和危害。
防治意义与现状02病害种类及防治锈病叶片上出现黄色或锈色的粉末状或点状病斑，导致叶片枯萎、脱落。
防治方法：定期喷洒波尔多液或代森锰锌等杀菌剂，并加强环境通风，减少湿度。
炭疽病叶片上出现圆形或椭圆形的病斑，中心为灰白色，边缘为暗红色，后期病斑上产生黑色小点。
防治方法：及时清除病叶，加强植物检疫，定期喷洒苯醚甲环唑、甲基硫菌灵等杀菌剂。
腐皮病树皮出现褐色坏死症状，严重时会导致枝条枯死。
防治方法：加强树木管理，定期施肥浇水，提高树木抗病能力。
同时要及时清除病枝，并喷洒甲基硫菌灵等杀菌剂。
溃疡病树皮上出现圆形或椭圆形的溃疡斑，中心有纵裂纹，严重时会导致整株死亡。
防治方法：加强树木管理，定期施肥浇水，提高树木抗病能力。
同时要及时清除病枝，并喷洒苯醚甲环唑、甲基硫菌灵等杀菌剂。
根部出现腐烂症状，严重时会导致整株死亡。
防治方法：加强土壤管理，定期松土、排水，避免过度浇水。
同时要及时清除病株，并喷洒甲基硫菌灵等杀菌剂。
立枯病幼苗出土后不久出现枯萎现象，严重时会导致大量死苗。
怎样防治和治疗合欢枯萎病
怎样防治和治疗合欢枯萎病什么是合欢枯萎病合欢枯萎病，又称为合欢树虫伤病，是由合欢树上的寄生性线虫引起的一种严重的植物疾病。
这种疾病主要影响合欢树种植园和合欢树的自然生态环境。
病因分析合欢枯萎病的病因是寄生性线虫引起的，主要有以下几个方面的原因：1.线虫传播：合欢枯萎病的主要病原是合欢线虫（Meloidogyne parasitica），它通过感染合欢树的根部，从而引起病害。
这种线虫存在于土壤中，当合欢树的根系与感染线虫的土壤接触时，线虫就能侵入根部，导致病害发生。
2.病原扩散：合欢枯萎病的病原能够通过多种途径进行扩散，包括土壤、种子、病株、嫩枝等。
这种病原扩散速度快，且容易在合欢树的种植园内传播。
预防与防治措施要有效预防和防治合欢枯萎病，可以采取以下措施：1.种植合欢抗病品种：选择抗寄生性线虫的合欢品种进行种植，这是预防合欢枯萎病最简单、最经济、最有效的方法之一。
2.土壤处理：合欢枯萎病病原主要存在于土壤中，因此，进行土壤处理是非常重要的。
可以采用退化方法，如光照熏蒸、草灰处理和深翻等，可以有效减少线虫的数量。
3.合理施肥：合欢枯萎病对合欢树的生长发育有很大的影响。
为了提高合欢树的抵抗力，应合理施用有机肥料和矿质肥料，保持适宜的土壤肥力。
4.栽培管理：加强合欢树的栽培管理，保持树冠疏松，及时修剪枝条，清除积水，保持良好的通风环境，有助于防治合欢枯萎病。
5.防治虫害：虫害也是导致合欢枯萎病发生的原因之一。
采取综合防治措施，如喷洒无毒杀虫剂、利用天敌等方式控制虫害的发生，有助于减少合欢枯萎病的发生。
治疗合欢枯萎病的方法合欢枯萎病在发生时需要及时进行治疗。
以下是治疗合欢枯萎病的几种常见方法：1.疏伐治疗：对于出现合欢枯萎病的感染树木，应及时将其疏伐，以防止病害扩散。
同时，对于严重感染的树木，应及时移除，以控制病害发展。
2.药剂处理：可以使用有效的药剂进行合欢枯萎病的治疗。
具体的治疗药剂需要根据植株病情和病害类型来选择，可以咨询相关专业人士进行选择和使用。
桦木内生真菌的分离与代谢产物的抑菌活性
色葡萄球菌 Ｓ ｐ ｙ ｃｏｕ ａｒＵ 、枯草芽孢杆菌 ｔ ｈｌ ｃｃｓ ｕｅＳ ａ ｏ Ｂ ｃｌｓｓｂｉｓ ａｉｕ ｕｔｉ、大肠杆 菌 Ｅ ｃｅｉ ｉ ｃｌ ｌ ｌ ｓｈｒ ｈａ ｏｉ ｃ 、啤酒 酵 母 Ｓ ｃｈ ｒｍ ｃｓ ｅｅｉ ａ 链 格 孢 Ａｔｒａｉ ａ ｃａｏ ｙ ｅ ｃｒｖｓ ｅ、 ｉ ｌ ｎｒ ｅ ａ ａｔｒａａ和树状 多节孢 Ｎ ｄ ｌｐ ｒ ｍｓｌ￣删 Ｐ 菌 ｌ ｎｔ ｅ ｏｕｉ ｏｉ ｙｖ ｓ ｕ ， 株保藏于绍兴文理学院生命科学学院实验室。 １ 内生真菌 菌株 的分离和鉴 定 ． ２ ２０ 年 ５ ０９ 月和 １ 月 ， ０ 在黑龙江省伊春市丰林国 家级 自然保护区采集健康 白桦 、棘皮桦 、硕桦和柴 桦的 １３年生枝条用于菌株分离。内生真菌的分离 ～ 和鉴 定参 照孙剑秋 等 【的方法进 行 。 １ Ｊ
ｌ 内生真菌 代谢产 物抑茵 活性 的检 测 － ３
１３１ 琼 脂 块 法 ．．
们
将分 离到 的内生 真菌 接种 在 Ｐ Ａ 平 板 上培养 Ｄ １ 形 成菌落 ，用 直径 ０８ｃ 打孔 器在菌 落 中心位 ０ｄ ． ｍ
置取 出含内生真菌代谢产物的琼脂块 ，分别置于涂 有相 应 指示 菌株 的牛 肉膏 蛋 白胨 培 养基 、麦 氏培养 基或 Ｐ Ａ 培养 基平板 上 ，恒 温培养 ２￣ ２ ｈ Ｄ ４ ７ ，观察 抑菌 圈形成 情况并测 定大小 。
摘要 ：通过琼脂块法和滤纸片法 ，对 白桦 Ｂ ｔｌｐａ ｐ ｙｌ、棘皮桦 Ｂ ｄ ｈ ｒ ａ ｅｕａ ｌｔ ｈ ｌ ｙ ａ ． ａ ｕ ｉ 、硕桦 Ｂ ｃｓ ｔ ｃ ． ｏｔ ａ和柴桦 Ｂ ｆｕｉ ｓ） 内生真 ａ ．ｒ ｔｏａ的 ｃ 菌产生抑菌物质的特性进行研究 ， 结果表明分离 自白桦 ３ 年生枝条的内生真菌拟茎点霉 Ｐ ｏ ｏ ｓ ． Ｐ ０ ３ １ ｈ ｍ ｐ ｉｓ Ｂ １３ ８ 表现 出较强 的 ｓｐ 抑菌物质形成能力 。采用 正交设计优化 了 Ｂ １３ ８ Ｐ ０ ３ １的培养条件 ，在含有 ４ ／ ０ｇＬ蔗糖 、３ｇ ＮＯ３ ／ ／ Ｎａ 、ｌ ＬＭｇ Ｏ 的改 良查 Ｌ ｇ Ｓ４ 氏液体培养基 中，在 ｐ Ｈ值 ６５ ８℃条件下发酵培养 ９ｄ ．、２ ，有利于抑菌活性物质 的形成。Ｂ １３ ８ 产生的抑菌活性物质具有 Ｐ ０３１ 较好 的温度稳定性 ，但是酸碱变化对抑菌物质 的活性影响较大 ，Ｂ １３ ８ 产生 的抑菌物质在 ｐ Ｐ０３ １ Ｈ为 ５ｏ ７０ ．￣ ．时活性较强。 关 键词 ：内生真菌 ；抑菌活性 ；白桦 ；棘皮桦 ；硕桦 ；柴桦
一种合欢叶片中的内生菌H6菌株分离方法及其应用[发明专利]
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专利名称：一种合欢叶片中的内生菌H6菌株分离方法及其应用
专利类型：发明专利
发明人：曲田丽,金玉兰,肖琳,李秀岚
申请号：CN201310365784.3
申请日：20130821
公开号：CN103555607A
公开日：
20140205
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种合欢叶片中的内生菌H6菌株分离方法及其应用，该分离方法包括：采用75%（体积分数）酒精浸泡2min，再用10%次氯酸钠溶液浸泡3min，无菌水冲洗2-3次，可达到合欢叶片表面最佳的消毒效果和内生菌H6分离的最适条件。
本发明经试验证明H6菌株、发酵液、无菌株发酵液及其从H6发酵液中分得的活性组分对供试的植物病原菌苹果腐烂病菌，葡萄黑痘病菌、西瓜枯萎病菌、小麦赤霉病菌等均具有较强的抑制作用。
本发明采用液-液萃取法对内生菌H6的代谢液提取，得10个组分，其中活性高的组分1、2和8样品硅烷化衍生后进行GC-MS检测，鉴定出其中脂肪酸、芳香酸、环二肽、甾醇类等25种具抗菌活性的物质。
申请人：青岛农业大学
地址：266109 山东省青岛市城阳区长城路700号青岛农业大学化学与药学院
国籍：CN
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植物内生细菌及其生防作用研究进展
第３８卷㊀第６期２０１４年１１月南京林业大学学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．３８，Ｎｏ．６Ｎｏｖ．，２０１４ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０１４．０６．０２９㊀收稿日期：２０１３－１２－３１㊀㊀㊀㊀修回日期：２０１４－０３－２０㊀基金项目：国家林业公益性行业科研专项项目（２０１３０４４０４）；国家自然科学基金项目（３１２７０６８４）；江苏高校优势学科建设工程资助项目（ＰＡＰＤ）㊀第一作者：何玲敏，博士生㊂∗通信作者：叶建仁，教授㊂Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｊｒｙｅ＠ｎｊｆｕ．ｅｄｕ．ｃｎ㊂㊀引文格式：何玲敏，叶建仁．植物内生细菌及其生防作用研究进展［Ｊ］．南京林业大学学报：自然科学版，２０１４，３８（６）：１５３－１５９．植物内生细菌及其生防作用研究进展何玲敏，叶建仁∗（南京林业大学林学院，江苏省有害生物入侵预防和控制重点实验室，江苏㊀南京㊀２１００３７）摘要：植物内生细菌定殖于健康植物体内，与寄主植物在长期进化过程中形成了和谐联合关系，对寄主植物具有防病㊁促生㊁固氮和生物修复等生物学作用，目前已被广泛应用于植物病害的生物防治㊂近年来，通过基因工程手段对植物内生细菌进行基因改造，增强了内生细菌的生防潜能和综合防治效果㊂笔者从植物内生细菌的概念㊁分类鉴定方法㊁与寄主植物的互作等方面概述了植物内生细菌的国内外研究成果，并着重探讨了内生细菌的植物修复能力和内生细菌在农林业病虫害防治上的应用潜力以及存在的问题㊂关键词：内生细菌；生物防治；生物修复；基因工程中图分类号：Ｓ４３５㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀文献标志码：Ａ文章编号：１０００－２００６（２０１４）０６－０１５３－０７Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ：ｒｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅｓａｎｄｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓＨＥＬｉｎｇｍｉｎ，ＹＥＪｉａｎｒｅｎ∗（ＪｉａｎｇｓｕＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄＭａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆＩｎｖａｓｉｖｅＳｐｅｃｉｅｓ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ，ＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００３７，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｃｏｌｏｎｉｚｅｓｉｎｈｅａｌｔｈｙｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅ，ａｎｄｆｏｒｍｅｓａｈａｒｍｏｎｉｏｕｓｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗｉｔｈｔｈｅｉｒｈｏｓｔｓｄｕｒｉｎｇａｌｏｎｇｃｏｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｐｒｏｃｅｓｓ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｈａｓｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｏｆｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅｄｕｅｔｏａｖａｒｉｅｔｙｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓ，ｓｕｃｈａｓｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｏｎ，ｎｉｔｒｏｇｅｎｆｉｘａｔｉｏｎ，ｂｉｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎａｎｄｓｏｏｎ．Ｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ，ｔｈｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｐｏｔｅｎｔｉａｌａｎｄｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｃｏｎｔｒｏｌｅｆｆｅｃｔｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｈａｖｅｂｅｅｎｅｎ⁃ｈａｎｃｅｄｂｙｔｈｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｇｅｎｅｔｉｃｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ．Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｓｕｍｍａｒｉｚｅｄｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈａｃｈｉｅｖｅｍｅｎｔｓｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａａｔｈｏｍｅａｎｄａｂｒｏａｄ，ｉｎｖｏｌｖｉｎｇｔｈｅａｓｐｅｃｔｓｏｆｃｏｎｃｅｐｔ，ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ，ａｎｄｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｗｉｔｈｔｈｅｉｒｈｏｓｔｓ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｐｈｙｔｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎｃａｐａｃｉｔｙｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ，ｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓａｎｄｐｒｏｂｌｅｍｓｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｏｎａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄｆｏｒｅｓｔｒｙｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌｗｅｒｅｍａｉｎｌｙｄｉｓ⁃ｃｕｓｓｅｄ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ；ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ；ｂｉｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎ；ｇｅｎｔｉｃｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ㊀㊀植物内生细菌是一类一生或一生中的某个阶段能进入活体植物组织内，并且不引起植物发生明显组织变化的微生物［１］㊂内生细菌普遍存在于植物体内，与寄主植物在长期进化过程中建立了和谐联合关系，是植物微生态系统中巨大而宝贵的资源库［２］㊂自２０世纪９０年代起，植物内生细菌的研究已成为微生物学家关注的热点［３－４］㊂首先，内生细菌具有丰富的种群多样性，对寄主植物具有内生固氮㊁促生㊁抗病虫害㊁杀线虫等多种作用［５－１２］；其次，内生细菌在植物体内占据稳定的生存空间，不易受植物外环境的影响，在植物体内独立地繁殖和传递，并与植物病原菌竞争相似的生态位，是具有生防潜力的微生物菌群；此外，国外已有许多报道称内生细菌能够降解环境中的污染物，具有生物修复能力［１３－１７］；同时内生细菌可作为潜在的生防载体菌加以利用［１８］㊂植物内生细菌种类多㊁繁殖快㊁代谢产物丰富㊁易于培养，在化学农药引起的一系列环境污染的当下，植物内生细菌显然具有重要的应用前景［１９］㊂笔者就植物内生细菌的国内外研究动态及其在农林业病虫害生物防治上的应用潜力以及存在的问题进行阐述和讨论㊂南京林业大学学报（自然科学版）第３８卷１㊀植物内生细菌及其分类鉴定方法植物内生细菌名称经历了近百年的发展，但内生细菌的概念至今尚未统一㊂１８６６年ＤｅＢａｒｙ首先将生活在植物组织内的微生物与那些生长在植物表面的表生菌（ｅｐｉｐｈｙｔｅ）相区别，提出了内生菌（ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ）的概念，认为凡是在植物体内的微生物均为内生菌［２０］㊂１９２６年Ｐｅｒｏｔｔｉ等［２１］在许多健康植物根部组织发现了细菌，并用 ｂａｃｔｅｒｉｏｒｒｈｉｚａ （菌根）一词对它们进行描述，改变了人们关于 植物体内无细菌 的认识㊂这一发现被确定为 植物组织内存在细菌 的起始点㊂此后大量研究进一步证实了 植物健康组织内存在内生细菌 的观点㊂１９８６年Ｃａｒｒｏｌ［２２］将内生菌定义为生活在地上部分㊁活的植物组织内而不引起明显病害症状的微生物㊂１９９２年Ｋｌｏｅｐｐｅｒ等［２３］认为，植物内生菌是指能够定殖于健康植物的各种组织和器官的细胞间隙或细胞内，并能与寄主植物建立和谐联合关系的一类微生物㊂１９９５年Ｗｉｌｓｏｎ［１］将内生菌的定义扩展为一生或一生中的某个阶段能进入活体植物组织内，并在植物组织内不引起明显组织变化的真菌或细菌㊂１９９７年Ｈａｌｌｍａｎｎ等［１２］将植物内生细菌重新定义为：从表面消毒后的植物组织中分离到的或从植物内部获得的细菌，但它们的存在并不引起植物的表观性状和功能的改变㊂随着植物内生细菌研究的不断深入，人们对内生细菌的概念也在逐渐完善，目前以Ｗｉｌｓｏｎ［１］提出的内生菌的概念被大多数研究者所支持和普遍采用㊂植物内生细菌的传统分离方法是研磨表面消毒后的植物组织，将匀浆液稀释涂布平板，然后进行分离和纯化［２４］㊂传统的内生细菌分离方法具有简便㊁易操作㊁费用低等优点，但该方法也存在一定的局限性㊂首先，由于部分内生细菌难以模拟其生长繁殖的真实条件而不能获得纯培养，导致非可培养细菌的种类和数量被忽视［２５］；其次，传统方法分离内生细菌时植物组织表面消毒方法以及消毒时间都会影响内生细菌种类和数量调查的准确性［２６］；再次，分离内生细菌时所选用的培养基以及所用抗生素对内生细菌的数量和种类也存在一定的影响［２７］；此外，传统的分离培养技术人为地改变了内生细菌本身的生境㊁微生物的群落结构以及内生细菌与寄主之间的相互作用，因此用传统方法研究植物内生细菌的种群结构及多样性时存在较大的局限性［２８］㊂很多情况下传统分类方法难以区分种内的相似或相近菌株，随着分子生物学技术的不断发展，通过对植物组织中细菌１６ＳｒＤＮＡ基因序列来鉴定植物组织中的内生细菌的种类［２９］，该方法不需要对内生细菌进行分离培养，直接以植物组织的基因组ＤＮＡ为材料，减少了复杂的分离过程，并且其灵敏度和准确性远远高于传统分类方法，可全面地了解植物内生细菌多样性的真实水平［３０－３１］，该方法主要包括扩增ｒＤＮＡ限制性分析（ＡＲＤＲＡ），限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ），随机片段扩增多态性（ＡＦＬＰ），变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ），温度梯度凝胶电泳（ＴＧＧＥ）及构建１６ＳｒＤＮＡ克隆文库等［３２］㊂分子生物学方法为内生细菌种群多样性㊁动态分布及其与根际土壤微生物的关系等的研究提供了更有效的技术手段［３３］㊂Ｃｏｎｎ等［３４］对澳大利亚小麦内生细菌多样性的研究发现，与传统的分离培养法相比，用分子手段得到的内生细菌的多样性较为丰富㊂２㊀植物内生细菌与寄主植物的互作植物体是一个复杂的微生态系统，在这个系统中多种微生物与植物体形成营养和竞争的小生境㊂在长期的协同进化过程中，内生细菌之间㊁内生细菌与植物之间形成了一系列互利共生关系，这使得内生细菌能够长期稳定地定殖于植物体，并与植物体和谐共处［３，３５］㊂植物内生细菌同根际细菌一样，都受生物因子和非生物因子的限制［３６］，但植物内生细菌抵御生物和非生物胁迫的能力比根际细菌要强［１２］㊂Ｓｉｃｉｌ⁃ｉａｎｏ等［３７］研究发现，在污染地区对难降解物具有降解能力的细菌中，内生细菌所占比例高于根际细菌，暗示了内生细菌在这些难降解物的新陈代谢中发挥着重要作用㊂同时，许多内生细菌还参与土壤中磷元素的代谢，为植物提供有效磷素营养，促进植物生长，提高作物产量㊂Ｋｕｋｌｉｎｓｋｙ⁃Ｓｏｂｒａｌ等［３８］认为大豆内生细菌参与了磷的同化作用，表明内生细菌具有溶磷能力，从而能有效促进植物生长㊂内生细菌在植物体中的定殖效率是其生防能力的一个关键性因素，然而，在自然环境中内生细菌的定殖效率受到许多因素的影响㊂研究发现，植物内生细菌的定殖效率不仅与植物体本身有关［３９］，还与内生细菌自身的基因组［４０］及在植物体内定殖的先后次序有关㊂在接种早期，内生细菌的定殖效率因植物体不同而异；而到接种后期，内生细菌在不同植物体中的定殖效率则无明显差异［３９］㊂此外，Ａｒａｕｊｏ等［４１］还发现，内生细菌在植物体内的定殖将抑制其他内生真菌的定殖，反之亦４５１㊀第６期何玲敏，等：植物内生细菌及其生防作用研究进展然㊂因此，在生物防治过程中，应当充分考虑到这些影响因素，尽可能地使内生细菌的定殖效率处于一个最佳状态，充分发挥其应有的生防作用㊂植物体中内生细菌的种群和数量呈动态分布，受植物生理机能的影响㊂内生细菌与寄主之间存在双向选择，即内生细菌的多样性和群落结构会随环境因子及寄主基因型的不同而发生改变；同时寄主植物也会根据环境的变化选择合适的内生细菌，来适应环境的选择压力［３７，４２－４３］㊂Ｆｕｅｎｔｅｓ⁃Ｒａｍíｒｅｚ等［４４］研究发现，与施低氮肥的甘蔗相比，施高氮肥的甘蔗中重氮营养葡糖酸醋杆菌（Ｇｌｕｃｏｎａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）的数量减少㊂这是由于施加氮肥后甘蔗的生理机能发生改变，蔗糖量下降，从而抑制了内生细菌的生长和繁殖㊂Ｔａｎ等［４５］的研究表明，对水稻施加氮肥后，水稻的内生细菌种群结构随之发生急剧变化㊂同时，内生细菌的接种方式及植物体的健康状况对内生细菌在植物体内的成功定殖并发挥功能起着决定性作用［４６］㊂因此，在实验室内进行内生细菌的定殖研究时应避免选择生长状态不良的植株，并且要选用合适的接种方式，以期获得可靠的结果㊂Ｒｅｉｔｅｒ等［４７］发现，与未被感染的马铃薯相比，被软腐病菌（Ｅｒｗｉｎｉａｃａｒｏｔｏｖｏｒａ）侵染后的马铃薯中内生细菌多样性偏高㊂这可能是由于在内生细菌体外定殖实验中，土壤固有细菌与内生细菌之间的竞争较小，因此与自然界中内生细菌的定殖能力相比，所得结果略微偏高［４８］㊂Ａｆｚａｌ等［４６］对柴油污染地区的黑麦草进行内生细菌Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａｐｈｙｔ⁃ｏｆｉｒｍａｎｓＰｓＪＮ接种试验，采取４种不同的接种方式，最终发现灌根接种能够使ＰｓＪＮ菌株实现最佳生防效果㊂３ 植物内生细菌在植物病虫害防治上的应用㊀㊀内生细菌可长期稳定地定殖于植物体，通过自身产生的拮抗物质和酶类，与病原菌竞争营养物质和生态位，诱导寄主植物产生系统抗性及防卫信号来持续抑制病原菌的生长和入侵［７，４９－５３］㊂当前，内生细菌已被广泛应用于农作物病害的防治㊂如Ｇａｏ等［５４］发现枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｅｍ７是油菜茎腐病的有效生防因子，温室盆栽试验表明，菌株Ｅｍ７对由核盘菌引起的油菜茎腐病的防治效果达到５０％ ７０％㊂Ａｒａｖｉｎｄ等［５５］将假单胞菌接种于黑胡椒干部和根部发现Ｐｉｐｅｒｃａｐｓｉｃｉ的侵染率降低了９０％；在根部接种绿脓杆菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）㊁恶臭假单胞菌（Ｐ．ｐｕｔｉｄａ）和巨大芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）后Ｐ．ｃａｐｓｉｃｉ的侵染率降低６０％㊂在根部接种藤黄短小杆菌（Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｕｔｅｕｍ）和巨大芽孢杆菌（Ｂ．ｍｅｇａ⁃ｔｅｒｉｕｍ）后土壤中线虫数量减少７０％以上㊂这些内生细菌在防治病害的同时还对黑胡椒扦插苗的生长有促进作用㊂同时，内生细菌还可用于林木病害的防治㊂Ｒｅｎ等［５６］自杨树树干分离到１株对杨树溃疡病菌有较强抑制作用的内生细菌Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉ⁃ａｐｙｒｒｏｃｉｎｉａＪＫ－ＳＨ００７，该菌株能够长期定殖于杨树体内，并对杨树的生长有一定的促进作用㊂Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ对小麦全蚀病菌（Ｇａｅｕｍａｎｎｏｍｙｃｅｓｇｒａｍｉｎｉｓｖａｒ．ｔｒｉｔｉｃｉ（Ｇｇｔ））有较强抗性，温室灌根接种试验表明，将Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ灌根接种于小麦根部后小麦全蚀病的发生率显著降低，并对小麦有一定的促生作用；野外试验表明，Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ对小麦全蚀病的防治效果达５５．３％［５７］㊂因此，在农业上可将Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ用于防治小麦全蚀病的发生和危害㊂此外，内生细菌在果蔬保鲜和果蔬采摘后腐烂病害的防治上也发挥着一定作用［５８－５９］㊂与植物病害的防治相比，内生细菌在害虫防治上的应用相对较少㊂Ｒａｊｅｎｄｒａｎ等［６０］在温室条件下测定了棉花内生细菌对美洲棉铃虫的防治效果㊂发现所分离的１０３株内生细菌中有２株芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）和１株荧光假单胞菌（Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）对美洲棉铃虫的防治效果最为明显㊂将这３株内生细菌制成生物菌剂，喷施棉花的种子㊁叶片及根际土壤，结果显示美洲棉铃虫的发生率显著降低，因此可将这３株内生细菌作为生防菌来有效防治棉花虫害㊂同时，内生细菌可作为构建工程菌的理想载体，将外源固氮㊁抗病㊁杀虫等基因导入植物体中，增强植物的生长和抗逆能力㊂因此，对植物内生细菌的基因工程研究受到越来越多的关注［６１］㊂目前，国内外已经对内生细菌的基因工程改造开展了大量研究㊂相关研究表明，将Ｂｔ基因导入甘蔗［６２－６３］㊁玉米［６４］㊁棉花［６５－６６］㊁水稻［６７－６８］等内生细菌中后，植物本身具备了显著的杀虫能力，并且改造后的内生细菌保持了固有的固氮㊁促生㊁抗病能力㊂黄玉杰等［６９］将枯草芽孢杆菌的几丁质酶基因导入伯克氏菌Ｂ４１８，所得工程菌对大丽花轮枝胞㊁立枯丝核菌㊁麦根腐长蠕胞㊁禾谷丝核菌的抑菌效果显著提高，并保持了原有的固氮㊁解磷㊁解钾和促生作用，提高了菌株Ｂ４１８的生防能力㊂由此可见，基因改造后的内生细菌具有更强的生防能力，５５１南京林业大学学报（自然科学版）第３８卷能够更好地应用于植物病虫害的生物防治㊂４㊀植物内生细菌的植物修复能力植物内生细菌具有净化有毒废弃物和环境污染物的能力，这种能力可能与生俱来，也可能后期由特定功能基因编码获得［１５，３７，７０］㊂Ｎｅｗｍａｎ等［１５］发现内生细菌能增强植物对甲苯的耐受力以及抑制甲苯的挥发，表明内生细菌可以通过降解有毒物质来补救植物㊂因此，可将某些内生细菌开发为有毒物质降解剂来加以利用㊂此外，内生细菌还具有降解石油及其衍生物的能力［１６－１７］㊂ｄｅＯｌｉｖｅｉｒａ等［１３］调查了沥青泥污染地区的植物内生细菌，测定了这些内生细菌降解石油及其衍生物的能力㊂结果发现６个实验菌株均具有一定的降解能力，但随降解时间不同，细菌的降解能力也随之变化，且降解能力与时间不存在一定的相关性，但多数成分在４８ ７２ｈ基本都能被降解，这一结果可能与石油衍生物组分的复杂程度有关㊂大量研究还发现，植物体内存在着抗各类重金属的内生细菌，内生细菌的存在增加了植物体内重金属的含量，提高了超积累植物富集重金属的能力，促进植物对土壤环境中重金属的去除［７１－７３］㊂此外，植物内生细菌作为良好的外源基因载体已在植物修复中用于改善植物吸收㊁转运和固定重金属特性，有望快速提高超积累植物抗性，提高植物修复效率［７４－７６］㊂５㊀植物内生细菌作为生防因子的发展前景及存在的问题㊀㊀内生细菌几乎存在于所有植物体内，在植物体内长期稳定定殖并传导，不易受外界环境条件干扰，并能促进植物体的生长和发育㊁抵御病虫侵袭，是宝贵的天然生物资源㊂随着人们对自然环境保护意识的不断加强及现代农业逐步向生态型农业发展，将内生细菌替代化肥和农药来防治植物病㊁虫害，既保持了植物微生态系统的生物多样性，又实现了农业的可持续发展㊂植物内生细菌作为生防因子在实验室研究中取得了一定的成效，但将其释放到自然环境中尚需解决一些问题㊂首先，当前所研究的植物生防内生细菌大多是在实验室平板上筛选得到的，在筛选内生细菌时人们常以一种或少数几种病原菌作为筛选条件，导致所筛选的内生细菌生防能力单一，综合防治效果差，应用范围窄等问题㊂因此，在筛选生防菌时我们应当选取多种病原菌作为筛选目标，并将多种菌剂配合使用，来提高植物内生细菌的综合防治效果㊂其次，不同植物或不同组织中内生细菌的数量㊁种类和基因型不尽相同，寄主植物对某种特殊内生细菌基因型的敏感性会随环境的变化而改变，生态环境和植物体微生态系统中的许多因子都会影响内生细菌生防作用的稳定发挥，从而在一定程度上制约了内生细菌的生防效果㊂因此，利用内生细菌进行生物防治时不仅要考虑内生细菌的生物稳定性，还要考虑植物体自身的微生态环境及其所处的自然条件等因素㊂此外，目前内生细菌的研究主要集中在农业上，而在林业上的研究和应用则较少，在今后的研究中应当将内生细菌的研究工作扩展到林业上，推动植物内生细菌防治林业病㊁虫害工作的发展㊂最后，虽然内生细菌定殖于健康植物体内不引起植物组织病变，但当其生态或生理环境发生变化时也有可能被激发为病原因子，对植物的生长造成一定的影响［７７－７８］㊂因此，在利用内生细菌进行生物防治前必须对它们的安全性及风险性进行严格评估㊂相关研究还发现，内生细菌与人类致病菌密切相关，是人体的致病菌或机会致病菌［７９］㊂某些生防菌虽然具有很强的生防潜能，但同时也是人体条件致病菌，因此将不能被释放到环境中㊂例如洋葱伯克氏菌群（ＢＣＣ）广泛分布于植物根际㊁土壤和水中，作为生防菌能够防治多种植物土传病害㊂但是由于它存在多种基因型，某些基因型的菌株是人体条件致病菌，因此，ＢＣＣ菌株在应用前必须充分评估它们释放到环境中的风险性㊂同时，抗病工程菌㊁固氮工程菌㊁抗虫工程菌等有益内生细菌工程菌的不断涌现，增强了内生细菌的生防潜力，提高了其综合防治效果，但其潜在的生物安全问题尚需慎重对待㊂综上所述，植物内生细菌能够长期稳定地定殖于植物体内，占据有利的生态位，并对寄主植物有多种生物学作用㊂同时，不同植物体中内生细菌的区系具有不同的特点，因而从植物内生细菌中获得新资源的可能性是巨大的㊂今后在植物内生细菌的研究和应用过程中，应当解决目前所存在的问题，提高植物内生细菌在农㊁林业植物病㊁虫害生物防治上的有效性㊁广谱性和安全性㊂参考文献（Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ）：［１］ＷｉｌｓｏｎＤ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ：ｔｈｅｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆａｔｅｒｍ，ａｎｄｃｌａｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｉｔｓｕｓｅａｎｄｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｏｉｋｏｓ，１９９５，７３（２）：２７４－２７６．［２］鲍敏，康明浩．植物内生菌研究发展现状［Ｊ］．青海草业，２０１１，２０（１）：２１－２５．６５１㊀第６期何玲敏，等：植物内生细菌及其生防作用研究进展ＢａｏＭ，ＫａｎｇＭ．Ｔｈｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｏｎｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｂａｃｔｅ⁃ｒｉａ［Ｊ］．ＱｉｎｇｈａｉＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒｅ，２０１１，２０（１）：２１－２５．［３］ＷａｎｇＹ，ＤａｉＣＣ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ：Ａｐｏｔｅｎｔｉａｌｒｅｓｏｕｒｃｅｆｏｒｂｉｏｓｙｎ⁃ｔｈｅｓｉｓ，ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ａｎｄｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｎｎａｌｓｏｆｍｉ⁃ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１１，６１（２）：２０７－２１５．［４］ＱｉｎＳ，ＸｉｎｇＫ，ＪｉａｎｇＪＨ，ｅｔａｌ．Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｂｉｏａｃｔｉｖｅｎａｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｓａｎｄｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｐｌａｎｔ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｅｎｄｏ⁃ｐｈｙｔｉｃａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，８９（３）：４５７－４７３．［５］ＤｕｉｊｆｆＢＪ，ＧｉａｎｉｎａｚｚｉＰｅａｒｓｏｎＶ，ＬｅｍａｎｃｅａｕＰ．Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｔｈｅｏｕｔｅｒｍｅｍｂｒａｎｅｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｉｎｔｈｅｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｃｏｌｏｎｉ⁃ｚａｔｉｏｎｏｆｔｏｍａｔｏｒｏｏｔｓｂｙｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓｓｔｒａｉｎＷＣＳ４１７ｒ［Ｊ］．ＮｅｗＰｈｙｔｏｌｏｇｉｓｔ，１９９７，１３５（２）：３２５－３３４．［６］ＫｒｉｓｈｎａｍｕｒｔｈｙＫ，ＧｎａｎａｍａｎｉｃｋａｍＳ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｏｆｓｈｅａｔｈｂｌｉｇｈｔｏｆｒｉｃｅ：Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｓｙｓｔｅｍｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｒｉｃｅｂｙｐｌａｎｔ⁃ａｓ⁃ｓｏｃｉａｔｅｄＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｐ．［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，１９９７，７２（５）：３３１－３３４．［７］ＳｔｕｒｚＡ，ＭａｔｈｅｓｏｎＢ．Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｗｈｉｃｈｉｎｆｌｕｅｎｃｅｈｏｓｔ⁃ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏＥｒｗｉｎｉａ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｂａｃｔｅｒｉａｌｓｏｆｔｒｏｔｉｎｐｏｔａｔｏｔｕｂｅｒｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔａｎｄＳｏｉｌ，１９９６，１８４（２）：２６５－２７１．［８］ＡｚｅｖｅｄｏＪＬ，ＭａｃｃｈｅｒｏｎｉＪｒＷ，ＰｅｒｅｉｒａＪＯ，ｅｔａｌ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ：Ａｒｅｖｉｅｗｏｎｉｎｓｅｃｔｃｏｎｔｒｏｌａｎｄｒｅｃｅｎｔａｄｖａｎｃｅｓｏｎｔｒｏｐｉｃａｌｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０００，３（１）：１５－１６．［９］ＢｅｎｔＥ，ＣｈａｎｗａｙＣＰ．Ｔｈｅｇｒｏｗｔｈ⁃ｐｒｏｍｏｔｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｂａｃｔｅｒｉａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｏｎｌｏｄｇｅｐｏｌｅｐｉｎｅａｒｅｐａｒｔｉａｌｌｙｉｎｈｉｂｉｔｅｄｂｙｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｏｔｈｅｒｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉ⁃ｏｌｏｇｙ，１９９８，４４（１０）：９８０－９８８．［１０］ＣｈａｎｗａｙＣ．Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｒｅｅｒｏｏｔｓｗｉｔｈｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｎｇｓｏｉｌｂａｃｔｅｒｉａ：ａｎｅｍｅｒｇｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｆｏｒｒｅｆｏｒｅｓｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＦｏｒｅｓｔＳｃｉｅｎｃｅ，１９９７，４３（１）：９９－１１２．［１１］ＨａｌｌｍａｎｎＪ，Ｑｕａｄｔ⁃ＨａｌｌｍａｎｎＡ，ＫｌｏｅｐｐｅｒＪ．ＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎＭｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｉｎｃｏｇｎｉｔａａｎｄｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｉｎｃｏｔｔｏｎａｎｄｃｕｃｕｍｂｅｒ［Ｊ］．ＳｏｉｌＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９８，３０（７）：９２５－９３７．［１２］ＨａｌｌｍａｎｎＪ，Ｑｕａｄｔ⁃ＨａｌｌｍａｎｎＡ，ＭａｈａｆｆｅｅＷ，ｅｔａｌ．Ｂａｃｔｅｒｉａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｉｎａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｃｒｏｐｓ［Ｊ］．ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉ⁃ｏｌｏｇｙ，１９９７，４３（１０）：８９５－９１４．［１３］ｄｅＯｌｉｖｅｉｒａＮＣ，ＲｏｄｒｉｇｕｅｓＡＡ，ＡｌｖｅｓＭＩ，ｅｔａｌ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｗｉｔｈｐｏｔｅｎｔｉａｌｆｏｒｂｉｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎｏｆｐｅｔｒｏｌｅｕｍｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎｓａｎｄｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ［Ｊ］．ＡｆｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，１１（１２）：２９７７－２９８４．［１４］ＧａｌｌｅｇｏＪＬ，ＬｏｒｅｄｏＪ，ＬｌａｍａｓＪＦ，ｅｔａｌ．Ｂｉｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎｏｆｄｉｅｓｅｌ⁃ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｓｏｉｌｓ：Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｐｏｔｅｎｔｉａｌｉｎｓｉｔｕｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｂｙｓｔｕｄｙｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ，２００１，１２（５）：３２５－３３５．［１５］ＮｅｗｍａｎＬＡ，ＲｅｙｎｏｌｄｓＣＭ．Ｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｐｈｙｔｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎ：ｎｅｗｕｓｅｓｆｏｒｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＴｒｅｎｄｓｉｎＢｉｏｔｅｃｈ⁃ｎｏｌｏｇｙ，２００５，２３（１）：６－８．［１６］Ｓｏｌａｎｏ⁃ＳｅｒｅｎａＦ，ＭａｒｃｈａｌＲ，ＣａｓａｒéｇｏｌａＳ，ｅｔａｌ．Ａｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉ⁃ｕｍｓｔｒａｉｎｗｉｔｈｅｘｔｅｎｄｅｄｃａｐａｃｉｔｉｅｓｆｏｒｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｇａｓｏｌｉｎｅｈｙ⁃ｄｒｏｃａｒｂｏｎｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０００，６６（６）：２３９２－２３９９．［１７］ＷｏｎｇｓａＰ，ＴａｎａｋａＭ，ＵｅｎｏＡ，ｅｔａｌ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａ⁃ｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌｓｔｒａｉｎｓｏｆＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｎｄＳｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓｐｏｓｓｅｓｓｉｎｇｈｉｇｈｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｔｏｄｅｇｒａｄｅｇａｓｏｌｉｎｅ，ｋｅｒｏ⁃ｓｅｎｅ，ｄｉｅｓｅｌｏｉｌ，ａｎｄｌｕｂｒｉｃａｔｉｎｇｏｉｌ［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，４９（６）：４１５－４２２．［１８］ＢｅｒｇＧ，ＥｂｅｒｌＬ，ＨａｒｔｍａｎｎＡ．Ｔｈｅｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅａｓａｒｅｓｅｒｖｏｉｒｆｏｒｏｐｐｏｒｔｕｎｉｓｔｉｃｈｕｍａｎｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉ⁃ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００５，７（１１）：１６７３－１６８５．［１９］严婉荣，赵廷昌，肖彤斌，等．生防细菌在植物病害防治中的应用［Ｊ］．基因组学与应用生物学，２０１３，３２（４）：５３３－５３９．ＹａｎＷＲ，ＺｈａｏＴＣ，ＸｉａｏＴＢ，ｅｔａｌ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌｂａｃｔｅｒｉａｉｎｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅｃｏｎｔｒｏｌ［Ｊ］．ＧｅｎｏｍｉｃｓａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｌ⁃ｏｇｙ，２０１３，３２（４）：５３３－５３９．［２０］ＤｅＢａｒｙ．ＡＭｏｒｐｈｏｌｏｇｉｅ，ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｅｄｅｒＰｉｌｚｅ，ＦｌｅｃｈｔｅｎｕｎｄＭｙｘｏｍｙｃｅｔｅｎ［Ｍ］．Ｌｅｉｐｚｉｇ：Ｅｎｇｅｌｍａｎｎ，１８６６．［２１］ＰｅｒｏｔｔｉＲ．Ｏｎｔｈｅｌｉｍｉｔｓｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｎｑｕｉｒｙｉｎｓｏｉｌｓｃｉｅｎｃｅ［Ｊ］．ＰｒｏｃＩｎｔＳｏｃＳｏｉｌＳｃｉ，１９２６，２：１４６－１６１．［２２］ＣａｒｒｏｌｌＧ．Ｂｉｏｌｏｇｙｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｓｍｉｎｐｌａｎｔｓｗｉｔｈｐａｒｔｉｃｕｌａｒｒｅｆｅｒ⁃ｅｎｃｅｔｏｗｏｏｄｙｐｅｒｅｎｎｉａｌｓ［Ｊ］．ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙｏｆｔｈｅＰｈｙｌｌｏｓｐｈｅｒｅ，１９８６：２０５－２２２．［２３］ＫｌｏｅｐｐｅｒＪＷ，ＢｅａｕｃｈａｍｐＣＪ．Ａｒｅｖｉｅｗｏｆｉｓｓｕｅｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｍｅａｓｕｒｉｎｇｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｐｌａｎｔｒｏｏｔｓｂｙｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９２，３８（１２）：１２１９－１２３２．［２４］方中达．植病研究方法［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２００７．［２５］ＴｈｏｌｏｚａｎＪ，ＣａｐｐｅｌｉｅｒＪ，ＴｉｓｓｉｅｒＪ，ｅｔａｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒ⁃ｉｚａｔｉｏｎｏｆｖｉａｂｌｅ⁃ｂｕｔ⁃ＮｏｎｃｕｌｔｕｒａｂｌｅＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９９，６５（３）：１１１０－１１１６．［２６］ＬｏｄｅｗｙｃｋｘＣ，ＶａｎｇｒｏｎｓｖｅｌｄＪ，ＰｏｒｔｅｏｕｓＦ，ｅｔａｌ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｔｈｅｉｒｐｏｔｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＣｒｉｔｉｃａｌＲｅｖｉｅｗｓｉｎＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００２，２１（６）：５８３－６０６．［２７］ＴａｂａｃｃｈｉｏｎｉＳ，ＣｈｉａｒｉｎｉＬ，ＢｅｖｉｖｉｎｏＡ，ｅｔａｌ．Ｂｉａｓｃａｕｓｅｄｂｙｕ⁃ｓｉｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｓｏｌａｔｉｏｎｍｅｄｉａｆｏｒａｓｓｅｓｓｉｎｇｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆａｎａｔｕｒａｌｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＭｉｃｒｏｂｉａｌＥｃｏｌｏｇｙ，２０００，４０（３）：１６９－１７６．［２８］陈泽斌，夏振远，雷丽萍，等．烟草可培养内生细菌的分离及多样性分析［Ｊ］．微生物学通报，２０１１，３８（９）：１３４７－１３５４．ＣｈｅｎＺＢ，ＸｉａＺＹ，ＬｅｉＬＰ，ｅｔａｌ．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆｃｕｌｔｉｖａｂｌｅｅｎｄｏ⁃ｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｏｂａｃｃｏ［Ｊ］．ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＣｈｉｎａ，２０１１，３８（９）：１３４７－１３５４．［２９］ＶｅｎｄａｎＲＴ，ＬｅｅＳＨ，ＹｕＹＪ，ｅｔａｌ．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｍ⁃ｍｕｎｉｔｙｉｎｔｈｅｇｉｎｓｅｎｇｓｏｉｌｕｓｉｎｇｄｅｎａｔｕｒｉｎｇｇｒａｄｉｅｎｔｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏ⁃ｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＤＧＧＥ）［Ｊ］．ＩｎｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１２，５２（２）：２８６－２８８．［３０］ＳｅｓｓｉｔｓｃｈＡ，ＲｅｉｔｅｒＢ，ＰｆｅｉｆｅｒＵ，ｅｔａｌ．Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ⁃ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｏｐｕｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｉｎｔｈｒｅｅｐｏｔａｔｏｖａｒｉｅｔｉｅｓｂａｓｅｄｏｎｅｕｂａｃｔｅｒｉａｌａｎｄＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ⁃ｓｐｅｃｉｆｉｃＰＣＲｏｆ１６ＳｒＲＮＡｇｅｎｅｓ［Ｊ］．ＦＥＭＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＥｃｏｌｏｇｙ，２００２，３９（１）：２３－３２．［３１］ＭｉｙａｍｏｔｏＴ，ＫａｗａｈａｒａＭ，ＭｉｎａｍｉｓａｗａＫ．Ｎｏｖｅｌｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｎｉ⁃ｔｒｏｇｅｎ⁃ｆｉｘｉｎｇｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｆｒｏｍｔｈｅｇｒａｓｓＭｉｓｃａｎｔｈｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓａｓｒｅ⁃ｖｅａｌｅｄｂｙｔｅｒｍｉｎａｌｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙ⁃ｓｉｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，７０（１１）：６５８０－６５８６．［３２］王瑫，李永，朱天辉，等．植物内生细菌及其研究方法［Ｒ］．成都：中国医学科学院医药生物技术研究所，２０１２．ＷａｎｇＹ，ＬｉＹ，ＺｈｕＴＨ，ｅｔａｌ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｔｈｅｍｏｔｈｏｄｓｏｆｒｅｓｅａｒｃｈｉｎｇ［Ｒ］．Ｃｈｅｎｇｄｕ：ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄ⁃ｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２．［３３］张则君，张晓宇，刘宏，等．植物内生细菌分离鉴定方法概述［Ｊ］．农业技术与装备，２０１２，１１（２５０）：７５－７７．ＺｈａｎｇＺＪ，ＺｈａｎｇＸＹ，ＬｉｕＨ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ７５１南京林业大学学报（自然科学版）第３８卷ａｎｄＥｑｕｉｐｍｅｎｔ，２０１２，１１（２５０）：７５－７７．［３４］ＣｏｎｎＶＭ，ＦｒａｎｃｏＣＭ．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｒｏｏｔｓｏｆｗｈｅａｔ（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）ｂｙｔｅｒｍｉｎａｌｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎｄｓｅ⁃ｑｕｅｎｃｉｎｇｏｆ１６ＳｒＲＮＡｃｌｏｎｅｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，７０（３）：１７８７－１７９４．［３５］黄静，盛下放，何琳燕．具溶磷能力的植物内生促生细菌的分离筛选及其生物多样性［Ｊ］．微生物学报，２０１０，５０（６）：７１０－７１６．ＨｕａｎｇＪ，ＳｈｅｎｇＸＦ，ＨｅＬＹ．Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆｐｈｏｓｐｈａｔｅ⁃ｄｉｓｓｏｌｖｉｎｇａｎｄｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈ⁃ｐｒｏｍｏｔｉｎｇｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｏｆｔｗｏｃｒｏｐｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，２０１０，５０（６）：７１０－７１６．［３６］ＳｅｇｈｅｒｓＤ，ＷｉｔｔｅｂｏｌｌｅＬ，ＴｏｐＥＭ，ｅｔａｌ．ＩｍｐａｃｔｏｆａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｐｒａｃｔｉｃｅｓｏｎｔｈｅＺｅａｍａｙｓＬ．ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｃｏｍｍｕｎｉｔｙ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，７０（３）：１４７５－１４８２．［３７］ＳｉｃｉｌｉａｎｏＳＤ，ＦｏｒｔｉｎＮ，ＭｉｈｏｃＡ，ｅｔａｌ．Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆｓｐｅｃｉｆｉｃｅｎ⁃ｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｌｇｅｎｏｔｙｐｅｓｂｙｐｌａｎｔｓｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｓｏｉｌｃｏｎｔａｍｉ⁃ｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，６７（６）：２４６９－２４７５．［３８］Ｋｕｋｌｉｎｓｋｙ⁃ＳｏｂｒａｌＪ，ＡｒａúｊｏＷＬ，ＭｅｎｄｅｓＲ，ｅｔａｌ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｏｙｂｅａｎ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｔｈｅｉｒｐｏｔｅｎｔｉａｌｆｏｒｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｏｎ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，６（１２）：１２４４－１２５１．［３９］ＰｉｌｌａｙＶ，ＮｏｗａｋＪ．Ｉｎｏｃｕｌｕｍｄｅｎｓｉｔｙ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ａｎｄｇｅｎｏｔｙｐｅｅｆｆｅｃｔｓｏｎｉｎｖｉｔｒｏｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｏｎａｎｄｅｐｉｐｈｙｔｉｃａｎｄｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｏｍａｔｏ（ＬｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍＬ．）ｓｅｅｄｌｉｎｇｓｉｎ⁃ｏｃｕｌａｔｅｄｗｉｔｈａｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄｂａｃｔｅｒｉｕｍ［Ｊ］．ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９７，４３（４）：３５４－３６１．［４０］ＲｏｓｅｎｂｌｕｅｔｈＭ，ＭａｒｔíｎｅｚＬ，ＳｉｌｖａＪ，ｅｔａｌ．Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｖａｒｉｉｃｏｌａ，ａｎｏｖｅｌｓｐｅｃｉｅｓｗｉｔｈｃｌｉｎｉｃａｌａｎｄｐｌａｎｔ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｉｓｏｌａｔｅｓ［Ｊ］．Ｓｙｓ⁃ｔｅｍａｔｉｃａｎｄＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，２７（１）：２７－３５．［４１］ＡｒａúｊｏＷＬ，ＭａｃｃｈｅｒｏｎｉＪｒＷ，Ａｇｕｉｌａｒ⁃ＶｉｌｄｏｓｏＣＩ，ｅｔａｌ．Ｖａｒｉａ⁃ｂｉｌｉｔｙａｎｄｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｆｕｎｇｉｉｓｏ⁃ｌａｔｅｄｆｒｏｍｌｅａｆｔｉｓｓｕｅｓｏｆｃｉｔｒｕｓｒｏｏｔｓｔｏｃｋｓ［Ｊ］．ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，４７（３）：２２９－２３６．［４２］易有金，罗宽，刘二明．内生细菌在植物病害生物防治中的作用［Ｊ］．核农学报，２００７，２１（５）：４７４－４７７．ＹｉＹＪ，ＬｕｏＫ，ＬｉｕＥＭ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｏｎｂｉｏｌｏｇｉ⁃ｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｏｆｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００７，２１（５）：４７４－４７７．［４３］ＵｌｒｉｃｈＫ，ＵｌｒｉｃｈＡ，ＥｗａｌｄＤ．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓｉｎｐｏｐｌａｒｇｒｏｗｎｕｎｄｅｒｆｉｅｌｄｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＦＥＭＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＥｃｏｌｏｇｙ，２００８，６３（２）：１６９－１８０．［４４］Ｆｕｅｎｔｅｓ⁃ＲａｍíｒｅｚＬＥ，Ｃａｂａｌｌｅｒｏ⁃ＭｅｌｌａｄｏＪ，ＳｅｐúｌｖｅｄａＪ，ｅｔａｌ．ＣｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｕｇａｒｃａｎｅｂｙＡｃｅｔｏｂａｃｔｅｒｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓｉｓｉｎｈｉｂｉｔｅｄｂｙｈｉｇｈＮ⁃ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＦｅｍｓＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＥｃｏｌｏｇｙ，１９９９，２９（２）：１１７－１２８．［４５］ＴａｎＺ，ＨｕｒｅｋＴ，Ｒｅｉｎｈｏｌｄ⁃ＨｕｒｅｋＢ．ＥｆｆｅｃｔｏｆＮ⁃ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ｐｌａｎｔｇｅｎｏｔｙｐｅａｎｄｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｎｎｉｆＨｇｅｎｅｐｏｏｌｓｉｎｒｏｏｔｓｏｆｒｉｃｅ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，５（１０）：１００９－１０１５．［４６］ＡｆｚａｌＭ，ＫｈａｎＳ，ＩｑｂａｌＳ，ｅｔａｌ．Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄａｆｆｅｃｔｓｃｏｌｏ⁃ｎｉｚａｔｉｏｎａｎｄａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａｐｈｙｔｏｆｉｒｍａｎｓＰｓＪＮｄｕｒｉｎｇｐｈｙｔｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎｏｆｄｉｅｓｅｌ⁃ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｓｏｉｌ［Ｊ］．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＢｉｏｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ＆Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ，２０１３，８５：３３１－３３６．［４７］ＲｅｉｔｅｒＢ，ＰｆｅｉｆｅｒＵ，ＳｃｈｗａｂＨ，ｅｔａｌ．ＲｅｓｐｏｎｓｅｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓｉｎｐｏｔａｔｏｐｌａｎｔｓｔｏｉｎｆｅｃｔｉｏｎｗｉｔｈＥｒｗｉｎｉａｃａｒｏｔｏｖｏｒａｓｕｂｓｐ．ａｔｒｏｓｅｐｔｉｃａ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉ⁃ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００２，６８（５）：２２６１－２２６８．［４８］ＣｏｏｌｅｙＭＢ，ＭｉｌｌｅｒＷＧ，ＭａｎｄｒｅｌｌＲＥ．ＣｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎｏｆＡｒａｂｉ⁃ｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａｗｉｔｈＳａｌｍｏｎｅｌｌａｅｎｔｅｒｉｃａａｎｄｅｎｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７ａｎｄｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎｂｙＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒａｓ⁃ｂｕｒｉａｅ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，６９（８）：４９１５－４９２６．［４９］ＷｈｉｐｐｓＪＭ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓａｎｄｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌｉｎｔｈｅｒｈｉｚｏ⁃ｓｐｈｅｒｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＢｏｔａｎｙ，２００１，５２（Ｓ１）：４８７－５１１．［５０］ＲａｍｅｓｈＲ，ＪｏｓｈｉＡ，ＧｈａｎｅｋａｒＭ．Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄｓ：ｍａｊｏｒａｎｔａｇｏ⁃ｎｉｓｔｉｃｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｔｏｓｕｐｐｒｅｓｓｂａｃｔｅｒｉａｌｗｉｌｔｐａｔｈｏｇｅｎ，Ｒａｌｓｔｏｎｉａｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍｉｎｔｈｅｅｇｇｐｌａｎｔ（ＳｏｌａｎｕｍｍｅｌｏｎｇｅｎａＬ．）［Ｊ］．ＷｏｒｌｄＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２５（１）：４７－５５．［５１］ＡｍａｒｅｓａｎＮ，ＪａｙａｋｕｍａｒｃＶ，ＫｕｍａｒｂＫ，ｅｔａｌ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｆｒｏｍｔｏｍａｔｏａｎｄｃｈｉｌｌｉ，ｔｈｅｉｒｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃｐｏｔｅｎｔｉａｌａｇａｉｎｓｔＲａｌｓｔｏｎｉａｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ［Ｊ］．ＡｒｃｈｉｖｅｓｏｆＰｈｙｔｏ⁃ｐａｔｈｏｌｏｇｙａｎｄＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，２０１２，４５（３）：３４４－３５５．［５２］ＲａｍａｍｏｏｒｔｈｙＶ，ＶｉｓｗａｎａｔｈａｎＲ，ＲａｇｕｃｈａｎｄｅｒＴ，ｅｔａｌ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｓｙｓｔｅｍｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｂｙｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｎｇｒｈｉ⁃ｚｏｂａｃｔｅｒｉａｉｎｃｒｏｐｐｌａｎｔｓａｇａｉｎｓｔｐｅｓｔｓａｎｄｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］．ＣｒｏｐＰｒｏ⁃ｔｅｃｔｉｏｎ，２００１，２０（１）：１－１１．［５３］ＮｏｗａｋＪ，ＳｈｕｌａｅｖＶ．Ｐｒｉｍｉｎｇｆｏｒｔｒａｎｓｐｌａｎｔｓｔｒｅｓｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｉｎｖｉｔｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＩｎＶｉｔｒｏＣｅｌｌｕｌａｒ＆ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌＢｉｏｌｏｇｙ⁃Ｐｌａｎｔ，２００３，３９（２）：１０７－１２４．［５４］ＧａｏＸ，ＨａｎＱ，ＣｈｅｎＹ，ｅｔａｌ．ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｏｆｏｉｌｓｅｅｄｒａｐｅＳｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｓｔｅｍｒｏｔｂｙＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｓｔｒａｉｎＥｍ７［Ｊ］．ＢｉｏｃｏｎｔｒｏｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１４，２４（１）：３９－５２．［５５］ＡｒａｖｉｎｄＲ，ＫｕｍａｒＡ，ＥａｐｅｎＳ．Ｐｒｅ⁃ｐｌａｎｔｂａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ：ａｓｔｒａｔｅｇｙｆｏｒｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｐｒｏｄｕｃ⁃ｔｉｏｎｏｆｄｉｓｅａｓｅ⁃ｆｒｅｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｏｆｂｌａｃｋｐｅｐｐｅｒ（ＰｉｐｅｒｎｉｇｒｕｍＬ．）［Ｊ］．ＡｒｃｈｉｖｅｓｏｆＰｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙａｎｄＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，２０１２，４５（９）：１１１５－１１２６．［５６］ＲｅｎＪ，ＹｅＪ，ＬｉｕＨ，ｅｔａｌ．ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａｎｅｗＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａｐｙｒｒｏｃｉｎｉａｓｔｒａｉｎＪＫ⁃ＳＨ００７ａｓａｐｏｔｅｎｔｉａｌｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌａｇｅｎｔ［Ｊ］．ＷｏｒｌｄＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，２７（９）：２２０３－２２１５．［５７］ＬｉｕＢ，ＱｉａｏＨ，ＨｕａｎｇＬ，ｅｔａｌ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔａｋｅ⁃ａｌｌｉｎｗｈｅａｔｂｙｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＥ１Ｒ⁃ｊａｎｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｏｄｅｏｆａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｎｔｒｏｌ，２００９，４９（３）：２７７－２８５．［５８］吴忠红，杜鹃，王刚霞，等．植物内生菌在果蔬保鲜中的研究进展［Ｊ］．生物技术进展，２０１３，３（６）：３９９－４０２．ＷｕＺＨ，ＤｕＪ，ＷａｎｇＧＸ，ｅｔａｌ．Ｒｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅｏｎｐｌａｎｔｅｎ⁃ｄｏｐｈｙｔｅｓｉｎｆｒｕｉｔａｎｄｖｅｇｅｔａｂｌｅｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈ⁃ｎｏｌｏｇｙ，２０１３，３（６）：３９９－４０２．［５９］石晶盈，刘爱媛，冯淑杰，等．番木瓜内生细菌ＭＧ－Ｙ２的鉴定及其生防作用［Ｊ］．果树学报，２００７，２４（６）：８１０－８１４．ＳｈｉＪＹ，ＬｉｕＡＹ，ＦｅｎｇＳＪ，ｅｔａｌ．ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌｅｆｆｅｃｔｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｌｓｔｒａｉｎＭＧ⁃Ｙ２ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｐａｐａｙａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｒｕｉｔＳｃｉｅｎｃｅ，２００７，２４（６）：８１０－８１４．［６０］ＲａｊｅｎｄｒａｎＬ，ＳａｍｉｙａｐｐａｎＲ，ＲａｇｕｃｈａｎｄｅｒＴ，ｅｔａｌ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｍｅｄｉａｔｅｐｌａｎｔｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｇａｉｎｓｔｃｏｔｔｏｎｂｏｌｌｗｏｒｍ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，２００７，２（１）：１－１０．［６１］ＡｎｄｒｅｏｔｅＦＤ，ＧｕｌｌｏＭＪＭ，ｄｅＳｏｕｚａＬｉｍａＡＯ，ｅｔａｌ．ＩｍｐａｃｔｏｆｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅｏｎｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｃｏｍｍｕｎｉｔｙｏｆＣｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓｓｅｅｄｌｉｎｇｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，４２（３）：１６９－１７３．［６２］ＨｅｒｒｅｒａＧ，ＳｎｙｍａｎＳＪ，ＴｈｏｍｓｏｎＪＡ．Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆａｂｉｏｉｎｓｅｃ⁃８５１㊀第６期何玲敏，等：植物内生细菌及其生防作用研究进展ｔｉｃｉｄａｌｓｔｒａｉｎｏｆＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓａｃｔｉｖｅａｇａｉｎｓｔｔｈｅｓｕｇａｒ⁃ｃａｎｅｂｏｒｅｒ，Ｅｌｄａｎａｓａｃｃｈａｒｉｎａ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９４，６０（２）：６８２－６９０．［６３］ＤｏｗｎｉｎｇＫＪ，ＬｅｓｌｉｅＧ，ＴｈｏｍｓｏｎＪＡ．ＢｉｏｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔｈｅＳｕｇａｒｃａｎｅＢｏｒｅｒＥｌｄａｎａｓａｃｃｈａｒｉｎａｂｙｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅＢａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓｃｒｙ１Ａｃ７ａｎｄＳｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎｓｃｈｉＡｇｅｎｅｓｉｎｓｕｇａｒ⁃ｃａｎｅ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉ⁃ｏｌｏｇｙ，２０００，６６（７）：２８０４－２８１０．［６４］徐静，张青文，田海月．玉米内生杀虫工程菌对玉米螟的离体及活体生物测定［Ｊ］．昆虫学报，１９９８，４１（１）：１２６－１３１．ＸｕＪ，ＺｈａｎｇＱＷ，ＴｉａｎＨＹ．Ｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｐｌａｎｔｂｉｏａｓｓａｙｓｏｆｅｎｇｉ⁃ｎｅｅｒｅｄｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉｕｍｉｎｃｏｒｎｗｉｔｈｃｏｒｎｂｏｒｅｒ［Ｊ］．ＡｃｔａＥｎｔｏｍｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，１９９８，４１（１）：１２６－１３１．［６５］徐静，张青文，丁军，等．ＢｔｃｒｙⅠＡ（ｃ）杀虫基因向棉花内生细菌Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ染色体中整合的研究［Ｊ］．农业生物技术学报，２００２，１０（２）：１８９－１９３．ＸｕＪ，ＺｈａｎｇＱＷ，ＤｉｎｇＪ，ｅｔａｌ．ＣｌｏｎｉｎｇＢｔｃｒｙⅠＡ（ｃ）ｇｅｎｅｉｎｔｏｔｈｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｏｆｃｏｔｔｏｎｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉｕｍＢａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｒａｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００２，１０（２）：１８９－１９３．［６６］段灿星，张青文，徐静，等．杀虫荧光假单胞工程菌的构建及其杀虫效果［Ｊ］．昆虫学报，２００２，４５（４）：４１９－４２４．ＤｕａｎＣＸ，ＺｈａｎｇＱＷ，ＸｕＪ，ｅｔａｌ．Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄｓｔａｉｎｓｏｆｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓａｎｄｔｈｅｉｒｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．ＡｃｔａＥｎｔｏｍｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，２００２，４５（４）：４１９－４２４．［６７］陈中义，张杰，曹景萍，等．杀虫防病基因工程枯草芽孢杆菌的构建［Ｊ］．生物工程学报，１９９９，１５（２）：２１５－２２０．ＣｈｅｎＺＹ，ＺｈａｎｇＪ，ＣａｏＪＰ，ｅｔａｌ．ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄｓｔｒａｉｎｓｏｆＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓａｇａｉｎｓｔｉｎｓｅｃｔｐｅｓｔｓａｎｄｐｌａｎｔｐａｔｈｏｇｅｎｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９９，１５（２）：２１５－２２０．［６８］罗楚平，陈志谊，刘永锋，等．杀虫晶体蛋白基因ＣｒｙｌＡｃ在生防菌Ｂ－９１６中的表达［Ｊ］．江苏农业学报，２００７，２３（４）：３０６－３１１．ＬｕｏＣＰ，ＣｈｅｎＺＹ，ＬｉｕＹＦ，ｅｔａｌ．ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌｃｒｙｓｔａｌｐｒｏｔｅｉｎＣｒｙ１ＡｃｇｅｎｅｉｎｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｓｔａｉｎＢ⁃９１６［Ｊ］．ＪｉａｎｇｓｕＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００７，２３（４）：３０６－３１１．［６９］黄玉杰，杨合同，周红姿，等．芽孢杆菌几丁质酶基因的克隆㊁序列分析及其在伯克氏菌Ｂ４１８中的表达［Ｊ］．中国生物防治，２００６，２２（Ｓ１）：７２－７７．ＨｕａｎｇＹＪ，ＹａｎｇＨＴ，ＺｈｏｕＨＺ，ｅｔａｌ．ＣｈｉｔｉｎａｓｅｇｅｎｅｆｒｏｍＢａ⁃ｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ：ｃｌｏｎｉｎｇ，ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａＢ４１８［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｍｔｒｏｌ，２００６，２２（Ｓ１）：７２－７７．［７０］ＲｙａｎＲＰ，ＧｅｒｍａｉｎｅＫ，ＦｒａｎｋｓＡ，ｅｔａｌ．Ｂａｃｔｅｒｉａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ：ｒｅｃｅｎｔｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＦＥＭＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＬｅｔｔｅｒｓ，２００８，２７８（１）：１－９．［７１］ＩｄｒｉｓＲ，ＴｒｉｆｏｎｏｖａＲ，ＰｕｓｃｈｅｎｒｅｉｔｅｒＭ，ｅｔａｌ．Ｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｍｍｕｎｉ⁃ｔｉｅｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｆｌｏｗｅｒｉｎｇｐｌａｎｔｓｏｆｔｈｅＮｉｈｙｐｅｒａｃｃｕｍｕｌａｔｏｒＴｈｌａｓｐｉｇｏｅｓｉｎｇｅｎｓｅ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００４，７０（５）：２６６７－２６７７．［７２］ＳｈｅｎｇＸＦ，ＸｉａＪＪ，ＪｉａｎｇＣＹ，ｅｔａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｅａｖｙｍｅｔａｌ⁃ｒｅｓｉｓｔａｎｔｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｆｒｏｍｒａｐｅ（Ｂｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓ）ｒｏｏｔｓａｎｄｔｈｅｉｒｐｏｔｅｎｔｉａｌｉｎｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｌｅａｄａｃｃｕｍｕ⁃ｌａｔｉｏｎｏｆｒａｐｅ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＰｏｌｌｕｔｉｏｎ，２００８，１５６（３）：１１６４－１１７０．［７３］ＳｕｎＬＮ，ＺｈａｎｇＹＦ，ＨｅＬＹ，ｅｔａｌ．Ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄｃｈａｒ⁃ａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｅａｖｙｍｅｔａｌ⁃ｒｅｓｉｓｔａｎｔ⁃ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｆｒｏｍｔｗｏｃｏｐｐｅｒ⁃ｔｏｌｅｒａｎｔｐｌａｎｔｓｐｅｃｉｅｓｏｎｃｏｐｐｅｒｍｉｎｅｗａｓｔｅｌａｎｄ［Ｊ］．ＢｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，１０１（２）：５０１－５０９．［７４］ＬｏｄｅｗｙｃｋｘＣ，ＴａｇｈａｖｉＳ，ＭｅｒｇｅａｙＭ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｒｅｃｏｍ⁃ｂｉｎａｎｔｈｅａｖｙｍｅｔａｌ⁃ｒｅｓｉｓｔ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合欢树病虫害的种类及防治
案例五：合欢红蜘蛛的防治
总结词
红蜘蛛是合欢树的常见害虫，可导致叶片出 现黄色或红色的斑点，严重时可使叶片脱落 。
详细描述
红蜘蛛的防治方法包括喷洒杀螨剂、定期修 剪等。
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种子和幼苗处理
对购买的种子和幼苗进行消毒处理，如使用杀菌剂等，以减少潜在 的病原体。
合理施肥
定期施用有机肥料和微量元素，以提供均衡的营养，增强植物的抗 病能力。
定期修剪和维护
定期修剪
定期修剪过长或受损的枝条和树叶，以保持树冠 通风透光，减少病虫害的发生。
清除枯叶和死枝
及时清除掉枯叶和死枝，以减少病菌的滋生和传 播。
一些昆虫会传播病毒，导 致合欢树感染病毒病，对 其生长和观赏效果产生不 良影响。
03
合欢树病虫害防治方法
病害防治方法
真菌性病害
这类病害通常由真菌引起，如白粉病、锈病等。防治时需要 定期观察合欢树的叶片和枝条，一旦发现病症，及时采取措 施。可以使用杀菌剂进行防治，如三唑酮、甲基硫菌灵等， 按照说明书正确使用。
食叶性害虫
这类害虫以合欢树的叶片为食，如金龟子、螟虫等。防治时需要在合欢树周围 设置陷阱或者使用灯光诱杀等方法进行防治。可以使用胃毒剂进行防治，如辛 硫磷、敌敌畏等，按照说明书正确使用。
04
合欢树病虫害预防措施
提高植物抗病性
选择健康种子和幼苗
从信誉良好的种子和幼苗供应商购买合欢树种子和幼苗，确保其 健康无病。
引发树皮腐烂
一些病害会导致合欢树的 树皮腐烂，影响其美观和 价值。
造成落叶
患有病害的合欢树会出现 落叶现象，影响其正常生 长和观赏效果。
虫害对合欢树的影响Fra bibliotek咬食树叶
合欢树病虫害的种类及防治
合欢树病虫害的种类及防治合欢树枯萎病为系统性传染病，是合欢树上的一种毁灭性病害。
该病在幼树、大树均可发生，1年生苗发病少，3—5年生树发病多而严重，生长势弱的植株发病多，发病速度快，易枯死。
1．1发病症状幼苗染病叶片变黄，根茎基部变软，易猝倒，最后全株枯死。
成株染病，先从1~2根枝条出现症状，病枝上的叶片萎蔫下垂，叶色呈淡绿色或淡黄色，后期干枯脱落，随后部分枝条开始干枯，逐步扩展到整株，至死亡。
截开主干断面，可见一整圈变色环，树根部断面呈褐色或黑褐色。
1．2影响条件合欢枯萎病受气候条件、土质和地势、栽培环境及栽植管理的影响。
高湿、多雨季节发病严重；土质粘重、地势低洼、排水不良，积水地易发病；在草坪中种植的合欢，易受草坪中镰刀菌根腐病病原的交叉感染，发病较多；移栽或修剪等管理过程中造成的伤口，会增加镰刀菌侵染机会，使植株发病；管理过程中，忽干忽湿，缺肥少水，大水漫灌，排水不及时等均会影响植株生长，降低抗病力而加重发病。
1．3防治一是选择抗病性强的品种，如浅色花的驰闻、深红色花的夏洛特等，在种植形式上，最好采取单株或几株点缀种植于绿化带、花园、庭院，不宜大面积或在街道上做行道树，因为街道土壤坚实，排水不良。
二是做好合欢幼苗的病虫害预防。
当幼苗长出2—3片真叶时，喷1次甲胺磷2000倍液，防止蚂蚁等害虫危害幼苗，以后定时定量在叶面上喷洒叶面肥，提高苗木抗病能力。
三是选择适宜生长的栽植地。
以土壤疏松、排水条件较好的地方种植，切忌低洼积水。
四是减少伤口。
在日常养护管理中，尽量少剪枝，剪口要适当涂抹保护剂。
移栽时，以移栽小苗为宜，因大树移栽中的伤根多，为病原侵染提供了可乘之机；大树移栽时，减少起苗与运输、定植时间，栽前对根部进行杀菌消毒，可喷洒40％多菌灵可湿性粉剂500倍液，或65％代森锌可湿性粉剂500倍液；移栽时，可用10％硫酸铜溶液蘸根处理，也可同时喷施生根粉等生长调节剂，以促进根系萌发生长。
对于已截过的枝干断面，涂抹保护剂，通过绑草加以保护，防治病菌侵入。
合欢树病虫害防治
《合欢树病虫害防治》xx年xx月xx日CATALOGUE 目录•合欢树的基本信息•合欢树的主要病虫害•合欢树病虫害的防治方法•合欢树病虫害防治的实践应用01合欢树的基本信息合欢树为落叶乔木，树冠呈伞形或圆锥形，树皮灰褐色。
树形叶为二回羽状复叶，羽片通常为4-12对，小叶镰状披针形，由10-30对具柄的小叶片组成。
叶子头状花序，黄绿色，多数小花呈伞形排列，花冠为漏斗形。
花序合欢树适应性强，喜阳光充足的环境，耐瘠薄，不耐水湿。
生长环境生长速度较慢，寿命长。
生长速度繁殖以播种、分株为主。
繁殖方式合欢树的树冠优美，花色鲜艳，具有较高的观赏价值。
观赏价值合欢树的树皮、花、叶均可入药，具有安神解郁、活血消肿等功效。
药用价值木材纹理美观，可制作家具、工艺品等。
经济价值02合欢树的主要病虫害感染后叶片出现褐色病斑，湿度大时病斑上产生灰色霉层，严重时病斑融合导致叶片枯死。
防治方法是加强修剪，保持通风透光，喷洒百菌清等杀菌剂。
锈病叶片背面产生黄色或锈色的夏孢子堆，导致叶片变形、早落。
防治方法是清除落叶并烧毁，喷洒粉锈宁等杀菌剂。
灰斑病VS溃疡病树干上出现褐色病斑，病斑逐渐扩大并凹陷，导致枝干枯死。
防治方法是加强水肥管理，增强树势，及时清理病枝并集中烧毁，涂抹溃腐灵等杀菌剂。
腐朽病树干上出现褐色或黑色病斑，随后病斑扩大并深入树干内部，导致树木腐朽。
防治方法是加强树木的养护管理，增强树势，在树干上涂抹石硫合剂等杀菌剂。
合欢树上常见的介壳虫有红蜡介壳虫和吹绵介壳虫等，它们会吸取树液并排泄蜜露，导致煤污病等病害。
防治方法是人工刮除或喷洒杀扑磷等杀虫剂。
介壳虫天牛天牛幼虫在树干内部蛀食，导致树木生长不良甚至枯死。
防治方法是人工捕捉成虫或幼虫，用敌敌畏等杀虫剂灌注虫孔。
虫害03合欢树病虫害的防治方法水肥管理合理施肥，控制氮肥用量，增加磷、钾肥的比例，保持树木健康生长。
合理修剪定期修剪树枝，清理枯枝落叶，保持树冠通风透光，降低病虫害发生的风险。
2021年上海市青浦区第一中学高三生物第二次联考试题及参考答案
2021年上海市青浦区第一中学高三生物第二次联考试题及参考答案一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1. 下列杂交组合属于测交的是（）A.EeFfGg×EeFfGgB.EeFfGg×eeFfGgC.eeffGg×EeFfGgD.eeffgg×EeFfGg2. 2018年我国科学家对酿酒酵母16条染色体进行重新设计并合成为1条染色体，这1条染色就可以执行16条染色体的功能，最终成功创建了只有一条线型染色体的酿酒酵母——酿酒酵母菌株SY14，这也是国际首例人造单染色体细胞。
下列关于酿酒酵母菌株SY14的叙述正确的是（）A.没有以核膜为界的细胞核B.遗传信息储存在RNA中C.在核糖体中合成蛋白质D.葡萄糖为其直接能源物质3. 下列关于细胞膜结构模型的叙述，错误的是（）A.磷脂双分子层是细胞膜的基本支架B.膜两侧的物质分子排列不一定是对称的C.细胞膜内侧的糖被都与识别功能有关D.蛋白质分子或覆盖或镶嵌或贯穿于磷脂双分子层4. 下图1、2、3所示为光合作用探索历程中的经典实验的分析及拓展过程（图1中叶片黄白色部分不含叶绿体）。
下列分析错误的是（）A. 图1所示的实验可以证明光合作用需要叶绿体和光照B. 图2所示的实验目的是探究光合作用产物O2的来源C. 图3所示的实验中好氧细菌的分布与水绵产生的O2和ATP有关D. 图3所示的实验选择水绵作为实验材料与其叶绿体的形状有关5. 某农场面积约140 hm2，农场丰富的植物资源为黑线姬鼠提供了良好的生存条件，鼠大量繁殖吸引鹰前来捕食。
某研究小组采用标志重捕法调查该农场黑线姬鼠的种群密度，第一次捕获了100只，标记后全部放掉，第二次捕获了280只，发现其中有2只带有标记。
下列叙述错误的是（）A. 鹰的迁入率增加会影响黑线姬鼠的种群密度B. 该农场黑线姬鼠种群密度约为100只/hm2C. 由于黑线姬鼠被捕捉一次后再难以捕捉，则实际种群密度比估算结果偏小D. 此调查方法也可用来调查跳蝻的种群密度6. 下图是细胞核的结构模式图。
合欢树病虫害的种类及防治
合欢树病虫害的种类及防治
合欢树病虫害的种类及防治
一、病害种类及防治措施
1-扁蓟马
扁蓟马是合欢树上常见的害虫之一，其幼虫在合欢树的叶片上取食，严重影响合欢树的生长发育。
防治措施包括喷洒低毒、高效杀虫剂进行防治，定期清理合欢树周围的杂草，以减少扁蓟马的滋生地。
2-根腐病
合欢树根腐病是由土壤中的真菌引起的，会导致合欢树的根部腐烂。
防治措施包括选用抗病品种种植，在种植前对土壤进行消毒处理，避免土壤污染，及时修剪感染的树枝。
3-针叶枯萎病
针叶枯萎病是一种由真菌引起的病害，会导致合欢树的叶片枯萎并最终死亡。
防治措施包括定期清理合欢树的落叶和树枝，保持树冠通风良好，及时喷洒杀菌剂进行防治。
4-蚜虫
蚜虫是合欢树上常见的害虫之一，会吸食合欢树的汁液，导致
树叶黄化、卷曲等现象。
防治措施包括定期检查合欢树的叶片，如
发现有蚜虫，可采用喷洒生物农药或合成农药进行防治。
5-白粉病
白粉病是由真菌引起的病害，会在合欢树的叶片上形成白色的
粉状物。
防治措施包括及时除去感染病叶，避免叶片过于密集，保
持合欢树的通风良好，喷洒杀菌剂进行防治。
二、附件
本文档附带的附件包括病虫害防治的实施方案、合欢树病虫害
的图片示例以及相关疫情报告。
三、法律名词及注释
1-植物检疫法：指用于预防和控制植物病害、虫害以及其他植
物有害生物的法律法规。
2-农药：指用于预防和控制农作物、果树等农业生产中的害虫、病菌和杂草的化学物质。
3-生物农药：指利用植物提取物、微生物或其他生物制剂来防
治害虫、病菌等的农药。
三种水生植物内生真菌多样性及其抗真菌活性
表 1 从 3 种水生植物中分离得到的内生真菌数量、种类及其分离频率 Table 1 No. of isolates, taxa and colonization frequency of endophytic fungi from three aquatic plants
分类单元 Taxa
外壳孢属 Aposphaeria sp. 壳二孢属 Ascochyta sp. 曲霉属 Aspergillus sp. 革壳孢属 Catinula sp. 头孢霉属 Cephalosporium sp. 毛茎点霉属 Chaetophoma sp. 枝孢属 Cladosporium sp. 1 枝状枝孢 C. cladosporioides 镰孢霉属 Fusarium sp. 1 镰孢霉属 Fusarium sp. 2 壳梭孢属 Fusicoccum sp. 地霉属 Geotrichum sp. 盘长孢属 Gloeosporium sp. 叶痣菌属 Melasmaia sp. 毛霉属 Mucor sp. 头珠霉属 Oedocephalum sp. 青霉属 Penicillium sp. 盘多毛孢属 Pestalotia sp. 叶点霉属 Phyllosticta sp. 链格孢属 Sirodesmium sp. 痂圆孢属 Sphaceloma sp. 色串孢属 Torula sp. 木霉属 Trichoderma sp. 无孢类群 1 组 Sterile mycelia 1 无孢类群 2 组 Sterile mycelia 2 无孢类群 3 组 Sterile mycelia 3 总分类单元数 Total taxa recovered 菌株总数 No. of isolates recovered 定殖内生真菌的植物组织块数 No. of segments yielding fungi(≥1) 总植物组织块数 Total fragments plated 总分离频率 Total CF (%)
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银合欢( Albizzia julibrissin ) 又称绒花树等，属豆科类植物，在我国华北地区、黄河流域及华南各地均有广泛种植，另外在朝鲜、越南、印度、日本等亚洲地区也有分布，且合欢品种资源非常丰富。
合欢不仅在绿化园林中运用广泛，作为行道树美化环境；而且它在原材料和中医药中也有很高的经济价值。
目前，人们在对合欢防治病害的研究中主要是对其组织内的有机化合物的分离、纯化和鉴定。
Han等对合欢汁液进行提取和初步鉴定，发现它含有20余种化合物，包括甾醇、苷黄酮类化合物、有机酸、神经酰胺及苷等多种活性物质，在中药药理中具有抗过敏、抗氧化、抗癌、抗炎、杀菌、增加免疫力等多种作用。
如合欢叶组织的提取物可以很好地预防黄瓜霜霉病（Pseudoperonospora cubensis）；合欢粗提物对根结线虫（Meloidogyne spp）有较强的抑制作用；此外还可以防治油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）；合欢茎叶含有的有效物质对腐烂病菌（Valsa mali）、炭疽病菌（Colletotrichum capsici）均有一定程度的抑制作用效果，说明合欢组织里存在许多抑菌活性物质，而且抑菌谱较广。
而关于从合欢组织中分离内生菌进行病害防治的研究鲜为报道。
目前已经证实内生细菌广泛存在于健康植物体内，可以提高植物抗逆能力，改善系统生态平衡；具有多种特性，使之成为植物微生态系统中的重要组成部分；同时内生细菌还是良好的外源基因载体，为抗病、杀虫和固氮等外源基因导入植物体内提供了新的途径和方法。
当前植物内生菌的研究在深度及广度上都有很大进展，对于植物内生菌植物资源的研究更是宽泛，从作物、果蔬到中草药、野生植物等。
说明我国植物资源分布广泛，植物内生菌资源种类丰富。
本试验根据合欢的药用性及较强的环境适应性和抗病能力，以内生细菌的研究技术为基础，对合欢的内生细菌进行生防研究，以期为园林及药用植物内生细菌开发利用、生防机制的研究提供理论基础。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 供试菌株合欢树内生细菌HHY-3，分离于山西农业大学校园里的合欢树叶片，4℃保存，菌体存放在50%的甘油中可于-20℃长期保存。
苹果腐烂病菌（Valsa mali ）、梨黑星病菌（Venturia piritna）、合欢枯萎病菌（Fusarium oxysporwm schl.f.sp.perndiosium）、珍珠梅褐斑病菌（ Sorbaria sorbifolia）、银杏叶枯病菌（Alternaria alternata）以上菌株均由山西农业大学化保实验室提供。
1.1.2 供试合欢种子合欢为品种银合欢（Leucaena leucocephala）（星河双叶种业）。
1.1.3 供试培养基NA培养基和PDA培养基的制作参照方中达所述方法。
1.2 使用方法及步骤1.2.1 菌种活化及发酵液的制备将HHY-3菌种从4℃冰箱取出，用灭菌的挑针挑取单菌落，在新的LB培养基上划线，放于37℃培养箱中培养2-3 d即可。
将合欢枯萎病菌等5种病原菌用直径为4mm打孔器，打成菌饼，将菌饼接入到新的PDA培养基中，5 d待用。
将活化后HHY-3菌株，用打孔器在细菌生长旺盛的地方打孔，用接种针挑取良好的菌饼，放置于NA培养基里，每6块菌饼放置在一个三角瓶（含50 mL液体NA）中，放在30℃摇床中，在160 r/s条件下，发酵培养7 d。
通过三层纱布过滤发醇液，去掉菌丝，过滤后的液体用小孔径纤维素膜抽滤，得到细菌的无菌发酵液。
1.2.2 合欢种植将合欢种子在0.3%甲醛溶液中浸泡15 min，用清水洗净，用80℃热水浸泡30 min。
种植含有基质的育苗钵中（每个小钵边长为5 cm），放到室温下（20-30℃）生长，根据生长情况补充水分。
1.2.3 细菌的对峙抑制试验菌株采用平板对峙法筛选，对内生细菌进行抑菌测定，计算抑制率。
以不接细菌为对照，3次重复。
抑制率（%）=（1-处理菌落直径/对照菌落直径）×100。
1.2.4 接种与防治进行灌根接种，使菌液均匀展布在叶片正反面，罩上塑料棚布，保湿24 -36 h。
7-14 d后合欢陆续发病，开始调查病情，然后喷施相关药剂进行防治，以喷施无菌水为对照。
分别于14和21 d时2 结论与讨论生物农药不仅具有提高作物抗逆性，而且在维持生态平衡方面也有很大的作用。
随着国家落实可持续发展战略的进程，加上人们对环境和生态保护的密切关注，生物农药的研究开发越来越受到全社会的重视。
我国政府也越来越重视可持续性发展，环境保护生态平衡，生产优质安全的农副产品是必然趋势。
微生物农药具有种类多，易控制，能规模化生产等特点，且占生物农药的绝大部分，是生物控制的重要方法。
政府对微生物农药的研发政策支持和经费投入都不断加大，使科研人才尖端化设备先进化，科研人员对微生物农药的研究逐渐深入。
本试验中，在合欢叶片中分离提取出的内生细菌HHY-3能够抑制多种植物病原真菌。
通过盆栽试验表明，内生细菌HHY-3发酵液在一定水平上能够防治合欢枯萎病害。
虽然通过盆栽试验证明菌株HHY-3（下转35页） 合欢树内生细菌HHY-3的生防作用研究赵秀芳（山西省管涔山国有林管理局羊圈沟林场，山西 忻州 036200）［摘 要］本试验通过对分离自合欢树叶片中的一株内生细菌HHY-3的生防作用进行了初步研究。
通过对峙培养测定了该细菌对5种病原真菌的抑制作用；利用其发酵液进行了合欢枯萎病的防治。
结果显示：该菌对苹果树腐烂病菌、梨黑星病菌、合欢枯萎病菌有较好的抑制作用，抑制率分别为75.2%、70.3%和68.5%，而对银杏褐斑病菌、珍珠梅叶枯病菌的抑制率只为43.8%和35.6%。
3种不同接种方法对合欢枯萎病的防治效果不同，其中同时接种防治效果最好为70.1%。
［关键词］合欢树；内生细菌；抑制作用；防效［中图分类号］S641.2 ［文献标识码］A［收稿日期］2018-05-18［作者简介］赵秀芳（1973-），女，2007年山西大学毕业，现任山西省管涔山国有林管理局羊圈沟林场助理工程师。
灯进行诱导捕杀就是采用了大部分昆虫对于光能的趋向特性。
此方式具备了专一性以及无公害还有就是对其天敌进行保障，它已经缓步变成对农林当中出现的害虫进行全面预防治理中不能缺少的一种方式。
比较常见的应用是对于舞毒蛾以及杨树透翅蛾还有小蠹虫等进行捕杀。
2.4 化学防治2.4.1 较低容量此项进行喷雾治理病虫害的技术其内涵是喷洒的药液的数量大约为每亩3.33～13.33L，采用喷雾的方式进行农药的喷洒工作。
因为喷洒的药液的数量大范围降低，其优势在于省水、省力，其功效扩大大约10倍，农药的使用数量减少了20%～30%。
因为对于农药的施用效率极高，因此极易达成适时使用农药，充分确保农药的使用效果。
2.4.2 静电此项进行喷雾的技术是对于使用极低的容量进行喷雾技术的优化改良。
其优势为：雾滴的粒径（普遍是20～50μm）相对小，且分布相对均衡；雾滴留存有同种类型的负电荷，在空间当中进行运动期间，二者之间互相排斥，不会出现凝聚问题，对于农药整体附着于农作物之上提供条件。
3 结语林业当中存在的病虫害问题同普遍意义上说的自然灾害不同，它极难开展预防治理工作，同时也不具备进行预先估测的规律。
目前，中国对于林业当中出现的病虫害问题进行预防治疗的方式相对落后，还有就是其资金的投入量严重匮乏。
在对于森林当中存在的病虫害问题进行预防治理期间，必须要使用科学高效的方式，加大对于所有项目的资金投入，一定要坚持将预防当作主要治理方向，同时要将领先的防治方式引入进我国，实施高效全面的治理工作。
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加强配套的政策法规发布，对企业的长远发展和整个社会的可持续发展有重要的意义，只有加强国家监管，企业才不敢逾越法律的底线。
第二，提高企业的社会责任意识。
提高企业的社会责任意识必须提高公司管理人员的社会责任意识，加强对管理队伍的监管与督促，通过对管理人员的培训、教育和学习提高管理人员的觉悟，这是在短期内避免企业出现忽视社会责任行为的方法。
第三，建立合理的激励机制鼓励企业主动进行社会责任信息披露。
对企业主管社会责任的管理人员建立社会考核制度，政府对做出突出贡献的企业和相关管理人员应该有相关奖励政策，激励相关管理人员和企业进行社会责任披露。
第四，加快第三方鉴证机构与企业的合作进程。
第三方鉴证机构对企业提升社会责任报告信息披露的可信度有重要的意义，对促进社会责任报告的规范性和提高社会责任报告内容的可比性有积极的意义。
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