实验四_水中细菌总数的测定和土壤微生物的分离[1]
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3） 如果有两个稀释浓度的总菌落数落在了30—300范围 之内，则先计算两个浓度下每ml水体中细菌总数，如果 两个数值的比值大于2则取小的浓度，如若小于2则取两 值的平均值。
（二）土壤微生物的分离、培养
一、实验目的 掌握微生物分离纯化的基本操作技术
二、实验原理 从混杂的微生物群体中获得只含某一种或某一
4、培养
将高氏1号培养基平板和马丁氏培养 基平板倒置于28 ℃恒温培养箱中培养 3-5d，营养琼脂培养基平板倒置于37 ℃恒温培养箱中培养2-3d。
5、菌落形态观察 、（计数） 6、染色鉴定可疑菌落（细菌、放线菌、霉菌） （下次实验作）
思考题： 为什么马丁培养基中要加入链霉素？如果用牛 肉膏蛋白胨培养基分离一种对青霉素具有抗性 的细菌，你认为应如何做？
3. 将河水水样分别稀释成10-1、10-2、10-3三个连续 稀释浓度（注意：在稀释前后一定要充分混匀）、 自来水样不稀释。
注意：河水样的稀释，取1个灭菌空试管，加入9mL 灭菌水。用取过灭菌水的移液管取1mL河水样，放入 试管中，振荡试管混合均匀。
4.涂布平板法： 1）加热已经配制好的固体培养基（肉膏蛋白胨琼脂培养
称取土壤10g，放入盛有90ml无菌水中，剧 烈震荡20min，充分混合。用无菌吸管吸取1ml 土壤悬液加入9ml无菌水中，混匀，以此类推， 制备成10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6不同 稀释度的土壤溶液。
3、涂平板
将上述每种培养基的三个平板底面分别用记号笔 写上10-4，10-5，10-6种稀释度，再用无菌吸管分 别吸取10-4，10-5，10-6种稀释度的土壤稀释液 0.1ml，用无菌涂布棒涂布均匀后，静置5-10min。 （若平板数量不足， 减少10-6稀释度的平板）
6.菌落计数：
1）挑取无片状菌苔生长的平板作为计数平板，若片状菌 苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布很均 匀时，可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数。
2）选择平均菌落数在30～300之间的平板来计算该水样的 菌落总数。如果所有的平板的菌落总数都不在30—300 范围之内，则取最靠近30—300的平板进行计数
源自文库
好的事情马上就会到来，一切都是最 好的安 排。下 午5时1分36秒 下午5时 1分17: 01:3620.10.19
一马当先，全员举绩，梅开二度，业 绩保底 。20.10.1920.10.1917: 0117:01:3617: 01:36Oct-20
牢记安全之责，善谋安全之策，力务 安全之 实。2020年10月19日 星期一5时1分36秒Monday, October 19, 2020
基），使固体培养基溶化。 2）倒制平板：每个空平皿中倒约20mL的培养基，放置桌面
待其凝固。 3）用移液管吸取0.1mL水样，滴于平板中；将玻璃涂布棒
于酒精灯的外焰上加热，杀死表面微生物，然后耐心待其 冷却，然后用涂布棒将水滴均匀的涂满整个平板表面，尽 量将水涂干。 5. 倒置于37℃培养箱中培养24h。
株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用平板 分离法：包括两个方面：
1、选取适当的培养基 2、挑取单菌落
三、实验操作
1、倒平板 将营养琼脂培养基、高氏1号琼脂培养基、
马丁氏琼脂培养基，加热溶化，待冷至5560℃时，马丁培养基中加链霉素（终浓度为 30µg/ml），混匀后倒平板。
2、 制备土壤稀释液
本实验以普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，采用平 板菌落计数技术来分别测定自来水和河水中的细 菌总数。
1-7组河水，8-10组自来水
三、实验操作
1.水体取样： 应取距水面10～15cm的深层水样。先将灭菌
的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转 过来，除去玻璃塞，水立即流入瓶中，盛满后， 将瓶塞盖好，再从水中取出。 2. 自来水取样： 打开自来水龙头，让水流流出1min左右，用 烧杯接取自来水。
追求至善凭技术开拓市场，凭管理增 创效益 ，凭服 务树立 形象。2020年10月19日星期 一下午5时1分36秒17: 01:3620.10.19
严格把控质量关，让生产更加有保障 。2020年10月 下午5时 1分20.10.1917:01Oct ober 19, 2020
作业标准记得牢，驾轻就熟除烦恼。2020年10月19日星期 一5时1分36秒17:01:3619 October 2020
实验三 水中细菌总数的测定和土壤微 生物的分离
（一）水中细菌总数的测定
一 实验目的 1.学习水样的采取方法和水样细菌总数
测定的方法；
2.了解水源水的平板菌落计数的原则。
二.实验原理：
本实验应用平板菌落计数技术测定水中细菌总数。 由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长
条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在 一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖， 因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落， 计算出水中细菌总数仅是一种近似值。 目前一般是采用肉膏蛋白胨琼脂培养基。
加强交通建设管理，确保工程建设质 量。17: 01:3617:01:3617:01Monday, October 19, 2020
安全在于心细，事故出在麻痹。20.10.1920.10.1917: 01:3617:01:36October 19, 2020
踏实肯干，努力奋斗。2020年10月19 日下午5 时1分2 0.10.19 20.10.1 9
相信相信得力量。20.10.192020年10月 19日星 期一5时1分36秒20.10.19
谢谢大家！
树立质量法制观念、提高全员质量意 识。20.10.1920.10.19Monday, October 19, 2020
人生得意须尽欢，莫使金樽空对月。17:01:3617:01: 3617:0110/19/2020 5:01:36 PM
安全象只弓，不拉它就松，要想保安 全，常 把弓弦 绷。20.10.1917:01:3617:01O ct-2019-Oct-20
（二）土壤微生物的分离、培养
一、实验目的 掌握微生物分离纯化的基本操作技术
二、实验原理 从混杂的微生物群体中获得只含某一种或某一
4、培养
将高氏1号培养基平板和马丁氏培养 基平板倒置于28 ℃恒温培养箱中培养 3-5d，营养琼脂培养基平板倒置于37 ℃恒温培养箱中培养2-3d。
5、菌落形态观察 、（计数） 6、染色鉴定可疑菌落（细菌、放线菌、霉菌） （下次实验作）
思考题： 为什么马丁培养基中要加入链霉素？如果用牛 肉膏蛋白胨培养基分离一种对青霉素具有抗性 的细菌，你认为应如何做？
3. 将河水水样分别稀释成10-1、10-2、10-3三个连续 稀释浓度（注意：在稀释前后一定要充分混匀）、 自来水样不稀释。
注意：河水样的稀释，取1个灭菌空试管，加入9mL 灭菌水。用取过灭菌水的移液管取1mL河水样，放入 试管中，振荡试管混合均匀。
4.涂布平板法： 1）加热已经配制好的固体培养基（肉膏蛋白胨琼脂培养
称取土壤10g，放入盛有90ml无菌水中，剧 烈震荡20min，充分混合。用无菌吸管吸取1ml 土壤悬液加入9ml无菌水中，混匀，以此类推， 制备成10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6不同 稀释度的土壤溶液。
3、涂平板
将上述每种培养基的三个平板底面分别用记号笔 写上10-4，10-5，10-6种稀释度，再用无菌吸管分 别吸取10-4，10-5，10-6种稀释度的土壤稀释液 0.1ml，用无菌涂布棒涂布均匀后，静置5-10min。 （若平板数量不足， 减少10-6稀释度的平板）
6.菌落计数：
1）挑取无片状菌苔生长的平板作为计数平板，若片状菌 苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布很均 匀时，可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数。
2）选择平均菌落数在30～300之间的平板来计算该水样的 菌落总数。如果所有的平板的菌落总数都不在30—300 范围之内，则取最靠近30—300的平板进行计数
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1、选取适当的培养基 2、挑取单菌落
三、实验操作
1、倒平板 将营养琼脂培养基、高氏1号琼脂培养基、
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2、 制备土壤稀释液
本实验以普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，采用平 板菌落计数技术来分别测定自来水和河水中的细 菌总数。
1-7组河水，8-10组自来水
三、实验操作
1.水体取样： 应取距水面10～15cm的深层水样。先将灭菌
的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转 过来，除去玻璃塞，水立即流入瓶中，盛满后， 将瓶塞盖好，再从水中取出。 2. 自来水取样： 打开自来水龙头，让水流流出1min左右，用 烧杯接取自来水。
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（一）水中细菌总数的测定
一 实验目的 1.学习水样的采取方法和水样细菌总数
测定的方法；
2.了解水源水的平板菌落计数的原则。
二.实验原理：
本实验应用平板菌落计数技术测定水中细菌总数。 由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长
条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在 一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖， 因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落， 计算出水中细菌总数仅是一种近似值。 目前一般是采用肉膏蛋白胨琼脂培养基。
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安全在于心细，事故出在麻痹。20.10.1920.10.1917: 01:3617:01:36October 19, 2020
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