荧光原位杂交技术产前诊断非整倍体的研究
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ｆｌｕｉｄ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ
ａｍｎｉｏｔｉｃ （一）Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ａｎａｌｙｓｉｓ：１ ０９ ｃｕｌｔｕｒｅｄ
ｏｎｅ
ａ１１ ｓｕｃｃｅｓｓｆＬｌｌ ｉｎ ｏｔｈｅｒ
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ｔｉｍｅ．６ ａｂｎｏｒｍａｌ ｋａｒｙｏｔｙｐｅｓ（３ ｏｆ ｔｒｉｓｏｍｙ ２ １，２ ｏｆ ｍｏｓａｉｃ，ｔｈｅ
１ ０３
ｉｓ
４７，ＸＸ，＋ｍａｒ）ａｎｄ
ｎｏｒｍａｌ
ｋａｒｙｏｔｙｐｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ
ａｎａｌｖｓｉｓ．（－－）Ｔｈｅ ｒｅｓｕｉｔｓ
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ｏｆＦＩＳＨ：Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ
ｏｆｊｕｄｇｅｍｅｎｔ：（１）Ｔｈｅ
ｆｉｒｓｔ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ＤＮＡ ｃｅｌｌ；ｉｆ ｔｈｅｒｅ ａｒｅ ３
（Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ）。二倍体在单个细胞核中１３号染色体显示为２个绿色信号，２１号
染色体显示为２个橘红色信号；若１３．三体综合征，显示３个绿色信号；若ＤＳ 显示３个橘红色信号。（２）第二组：ＣＳＰ １８探针定位于１８ｐ１１．１－ｑ１１．１，杂交信 号为天蓝色（ＤＥＡＣ）；ＣＳＰＸ探针定位于Ｘｐｌｌ．１．ｑ１１．１，杂交信号为绿色（ＦＩＴＣ）；
１例４５，Ｘ／４６，ＸＸ；１例４５，Ｘ／４６，ＸＹ），与核型分析结果完全一致。ＦＩＳＨ对于所有
发现的非整倍体敏感性为８３．３％，特异性为１００％，与核型分析的符合率为９９％ （１０４／１０５），但对于本研究中的１３、１８、２１、Ｘ和Ｙ染色体特异性探针来说，
天津医科大学硕士学位论文
敏感性、特异性以及与核型分析的符合率均为１００％。 结论：１、ＦＩＳＨ技术用于产前诊断常见染色体非整倍体，敏感性高、特异性 强、结果稳定。 ２、ＦＩＳＨ技术可以在２４，一４８ｈ内得出结果，且具有操作简单、杂交信 号容易判读、所用样本量少等优点，在临床上有广阔的应用前景。
ｃａｎ
ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＦＩＳＨ、ｆｏｒ
ａｉｍ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｉｓ
ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａｌｌ ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｒａｐｉｄ
ｃｏｍｍｏｎ ｃｌｌｒｏｍｏｓｏｍｅ ａｎｅｕｐｌｏｉｄｉｅｓ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃ，ＳＯ ｔｈａｔ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｄｉｓｅａｓｅ．
ｌｏｗｅｒ ｔｈｅ ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ
ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ
ｃｅｎｔｒｅ
Ｔｉａｎｊｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．２－－－３ｍＬ
ｕｎｃｕｌｔｕｒｅｄ ａｍｎｉｏｔｉｃ
ＤＮＡ ｐｒｏｂｅｓ ｏｆ １ ３，１ ８，２ １，Ｘ ｆｌｕｉｄ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＦＩＳＨ ｕｓｉｎｇ ｃｈｒｏｍｏｓｅ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ａｎｄ
天津医科大学硕士学位论文
中文摘要
目的：探讨荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）技术在产前诊断常见染色体非整倍体中 的可行性与实用性，建立一种准确、快速、适合临床应用的分子遗传学方法， 用于产前诊断常见染色体非整倍体，从而降低染色体病患儿出生率。 方法：采用ＧＬＰ ＤＬＥＵｌ／ＧＬＰ ＤＳＣＲ２和ＣＳＰ
１ ８／ＣＳＰ Ｘ／ＣＳＰ Ｙ ２组染色体特
ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ Ｙ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ．１ ５ｍＬ ａｍｎｉｏｔｉｃ ｆｌｕｉｄ ｗａｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｆｏｒ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
ｔｉｍｅ．ＦＩＳＨ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ
Ｒｅｓｕｌｔｓ
ｔｏ
ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ａｎａｌｙｓｉｓ・
异性探针，对２００８年３月＂－＇２００８年７月在天津医科大学总医院产前诊断中心因 ＤＳ血清学筛查高风险、孕２０＂－＇２５周的１０９例孕妇，在Ｂ超引导下行羊膜腔穿 刺术抽取羊水２０ｍＬ，２＂－－－＇３ｍＬ未培养羊水直接用于ＦＩＳＨ检测，１５ｍＬ羊水培养 行羊水细胞染色体核型分析。ＦＩＳＨ的诊断结果与核型分析结果进行比较。 结果：１、核型分析 １０９例羊水细胞培养均一次性成功。共检出异常核型
示１个绿色信号提示为Ｘ染色单体。１０９例被检羊水中有１０５例出现清晰的杂交 信号并成功分析得出结果，成功率为９６．３％。染色体数目正常１００例（５８例为
４６，ＸＸ；４２例为４６，ＸＹ），其中染色体数目正常中的９９例与核型分析结果一致， ｌ例ＦＩＳＨ结果为４６，ＸＸ，而核型分析为４７，ＸＸ，＋ｍａｒ，由于标记染色体来源不是 １３、１８、２１、Ｘ和Ｙ染色体，故未能诊断。染色体数目异常５例（３例４７，ＸＸ，＋２１；
关键词：荧光原位杂交
产前诊断
非整倍体
来自百度文库
羊水ＤＮＡ探针
ＩＩ
Ａｂｓｔｒａｃｔ
ｏｂｉｅｃｔｉｖｅ ｓｉｒｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ｕｓｉｎｇ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍ ｏｆ ｃｏｍｍｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ａｎｅｕｐｌｏｉｄｉｅｓ・ｌ ｈｅ ｐｒｅｎａｔａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｇｅｎｅｔｉｃ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｆｏｒ
６例：３例４７，ＸＸ，＋２１；１例４５，Ｘ／４６，ＸＸ的嵌合体；１例４５，Ｘ／４６，ＸＹ的嵌合体； １例４７，ＸＸ，＋ｍａｒ；余１０３例均为正常核型（５８例为４６，ＸＸ；４５例为４６，ＸＹ）。 ２、ＦＩＳＨ检测结果判断：（１）第一组：ＤＬＥＵｌ ＤＮＡ探针定位于１３ｑ１４，杂交 信号为绿色（ＦＩＴＣ）；ＤＳＣＲ２ ＤＮＡ探针定位于２１ｑ２２，杂交信号为橘红色
ｏｆ
Ｍｅｔｈｏｄｓ
Ａｍｎｉｏｃｅｎｔｅｓｉｓ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ
ｏｎ
１ ０９ ｗｏｍｅｎ ａｔ
２０＂＇２５ ｗｅｅｋｓ ｏｆ
ｉｎ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｔ ｐｒｅｎａｔａｌ Ｄｒｅｇｎａｎｃｙ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈ ｒｉｓｋ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ
ＣＳＰ
Ｙ探针定位于Ｙｐｌｌ．１．ｑ１１．１，杂交信号为橘红色（Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ）。二倍体在单
个细胞核中１８号染色体显示为２个天蓝色信号；正常男性Ｘ染色体显示为１个
绿色信号，Ｙ染色体显示为１个橘红色信号；正常女性ｘ染色体显示为２个绿
色信号，无橘红色信号出现；若１８．三体综合征，显示３个天蓝色信号；若只显
ａｍｎｉｏｔｉｃ （一）Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ａｎａｌｙｓｉｓ：１ ０９ ｃｕｌｔｕｒｅｄ
ｏｎｅ
ａ１１ ｓｕｃｃｅｓｓｆＬｌｌ ｉｎ ｏｔｈｅｒ
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１ ０３
ｉｓ
４７，ＸＸ，＋ｍａｒ）ａｎｄ
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ｏｆｊｕｄｇｅｍｅｎｔ：（１）Ｔｈｅ
ｆｉｒｓｔ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ＤＮＡ ｃｅｌｌ；ｉｆ ｔｈｅｒｅ ａｒｅ ３
（Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ）。二倍体在单个细胞核中１３号染色体显示为２个绿色信号，２１号
染色体显示为２个橘红色信号；若１３．三体综合征，显示３个绿色信号；若ＤＳ 显示３个橘红色信号。（２）第二组：ＣＳＰ １８探针定位于１８ｐ１１．１－ｑ１１．１，杂交信 号为天蓝色（ＤＥＡＣ）；ＣＳＰＸ探针定位于Ｘｐｌｌ．１．ｑ１１．１，杂交信号为绿色（ＦＩＴＣ）；
１例４５，Ｘ／４６，ＸＸ；１例４５，Ｘ／４６，ＸＹ），与核型分析结果完全一致。ＦＩＳＨ对于所有
发现的非整倍体敏感性为８３．３％，特异性为１００％，与核型分析的符合率为９９％ （１０４／１０５），但对于本研究中的１３、１８、２１、Ｘ和Ｙ染色体特异性探针来说，
天津医科大学硕士学位论文
敏感性、特异性以及与核型分析的符合率均为１００％。 结论：１、ＦＩＳＨ技术用于产前诊断常见染色体非整倍体，敏感性高、特异性 强、结果稳定。 ２、ＦＩＳＨ技术可以在２４，一４８ｈ内得出结果，且具有操作简单、杂交信 号容易判读、所用样本量少等优点，在临床上有广阔的应用前景。
ｃａｎ
ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＦＩＳＨ、ｆｏｒ
ａｉｍ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｉｓ
ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａｌｌ ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｒａｐｉｄ
ｃｏｍｍｏｎ ｃｌｌｒｏｍｏｓｏｍｅ ａｎｅｕｐｌｏｉｄｉｅｓ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃ，ＳＯ ｔｈａｔ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｄｉｓｅａｓｅ．
ｌｏｗｅｒ ｔｈｅ ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ
ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ
ｃｅｎｔｒｅ
Ｔｉａｎｊｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．２－－－３ｍＬ
ｕｎｃｕｌｔｕｒｅｄ ａｍｎｉｏｔｉｃ
ＤＮＡ ｐｒｏｂｅｓ ｏｆ １ ３，１ ８，２ １，Ｘ ｆｌｕｉｄ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＦＩＳＨ ｕｓｉｎｇ ｃｈｒｏｍｏｓｅ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ
ａｎｄ
天津医科大学硕士学位论文
中文摘要
目的：探讨荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）技术在产前诊断常见染色体非整倍体中 的可行性与实用性，建立一种准确、快速、适合临床应用的分子遗传学方法， 用于产前诊断常见染色体非整倍体，从而降低染色体病患儿出生率。 方法：采用ＧＬＰ ＤＬＥＵｌ／ＧＬＰ ＤＳＣＲ２和ＣＳＰ
１ ８／ＣＳＰ Ｘ／ＣＳＰ Ｙ ２组染色体特
ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ Ｙ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ．１ ５ｍＬ ａｍｎｉｏｔｉｃ ｆｌｕｉｄ ｗａｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｆｏｒ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
ｔｉｍｅ．ＦＩＳＨ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ
Ｒｅｓｕｌｔｓ
ｔｏ
ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｋａｒｙｏｔｙｐｅ ａｎａｌｙｓｉｓ・
异性探针，对２００８年３月＂－＇２００８年７月在天津医科大学总医院产前诊断中心因 ＤＳ血清学筛查高风险、孕２０＂－＇２５周的１０９例孕妇，在Ｂ超引导下行羊膜腔穿 刺术抽取羊水２０ｍＬ，２＂－－－＇３ｍＬ未培养羊水直接用于ＦＩＳＨ检测，１５ｍＬ羊水培养 行羊水细胞染色体核型分析。ＦＩＳＨ的诊断结果与核型分析结果进行比较。 结果：１、核型分析 １０９例羊水细胞培养均一次性成功。共检出异常核型
示１个绿色信号提示为Ｘ染色单体。１０９例被检羊水中有１０５例出现清晰的杂交 信号并成功分析得出结果，成功率为９６．３％。染色体数目正常１００例（５８例为
４６，ＸＸ；４２例为４６，ＸＹ），其中染色体数目正常中的９９例与核型分析结果一致， ｌ例ＦＩＳＨ结果为４６，ＸＸ，而核型分析为４７，ＸＸ，＋ｍａｒ，由于标记染色体来源不是 １３、１８、２１、Ｘ和Ｙ染色体，故未能诊断。染色体数目异常５例（３例４７，ＸＸ，＋２１；
关键词：荧光原位杂交
产前诊断
非整倍体
来自百度文库
羊水ＤＮＡ探针
ＩＩ
Ａｂｓｔｒａｃｔ
ｏｂｉｅｃｔｉｖｅ ｓｉｒｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ｕｓｉｎｇ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍ ｏｆ ｃｏｍｍｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ａｎｅｕｐｌｏｉｄｉｅｓ・ｌ ｈｅ ｐｒｅｎａｔａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｇｅｎｅｔｉｃ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｆｏｒ
６例：３例４７，ＸＸ，＋２１；１例４５，Ｘ／４６，ＸＸ的嵌合体；１例４５，Ｘ／４６，ＸＹ的嵌合体； １例４７，ＸＸ，＋ｍａｒ；余１０３例均为正常核型（５８例为４６，ＸＸ；４５例为４６，ＸＹ）。 ２、ＦＩＳＨ检测结果判断：（１）第一组：ＤＬＥＵｌ ＤＮＡ探针定位于１３ｑ１４，杂交 信号为绿色（ＦＩＴＣ）；ＤＳＣＲ２ ＤＮＡ探针定位于２１ｑ２２，杂交信号为橘红色
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Ａｍｎｉｏｃｅｎｔｅｓｉｓ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ
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ｉｎ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｔ ｐｒｅｎａｔａｌ Ｄｒｅｇｎａｎｃｙ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈ ｒｉｓｋ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ
ＣＳＰ
Ｙ探针定位于Ｙｐｌｌ．１．ｑ１１．１，杂交信号为橘红色（Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ）。二倍体在单
个细胞核中１８号染色体显示为２个天蓝色信号；正常男性Ｘ染色体显示为１个
绿色信号，Ｙ染色体显示为１个橘红色信号；正常女性ｘ染色体显示为２个绿
色信号，无橘红色信号出现；若１８．三体综合征，显示３个天蓝色信号；若只显