西尼罗病毒的病原学

——△室苎璺堕墨塑堕塑！窭堑堕墨笙塑西尼罗病毒的病原学魏荣王志亮（农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心山东青岛南京路３６９号２６６０３２）西尼罗河病毒分类上属于黄病毒科。

在黄病毒科中，本病毒与日本脑炎病毒、墨累河谷脑炎病毒和圣・路易斯脑炎病毒同属于抗原性密切相关的一个病毒群。

其所引发的疾病为西尼罗河病毒病，包括西尼罗河热和西尼罗河病毒性脑膜炎脑炎。

１．病毒形态学：病毒里球形，有二十四面体的核衣壳；直径大约４５ｎｍ；有囊膜，囊膜为单层结构，在囊膜上有一薄层突起，这些突起呈棒状结构，是以基底端嵌入囊膜的囊膜糖蛋白分子。

电镜观察可见，病毒粒子的衣壳被来源于细胞膜的囊膜所包被，囊膜上又插入了病毒ＲＮＡ编码的糖蛋白Ｅ（５３ＫＤａ）和一结构蛋白ｐｒＭ．（１８—２０ｋＤａ）。

病毒成熟后期，ｐｒＭ被切割成Ｍ蛋白，Ｍ蛋白组装于成熟的病毒粒子中。

其基因组还编码七个非结构蛋白：ＮＳＩ，ＮＳ２ａ，ＮＳ２ｂＮＳ３ＮＳ４ａＮＳ４以及ＮＳ５。

糖蛋白Ｅ为最重要的免疫学结构蛋白。

为病毒红血球凝集素并介导病毒一宿主的结合。

２．病毒基因组：线性单股正链ＲＮＡ，大小为３．８×ｉ０＂至４．２Ｘｉ０６道尔顿，１１０２９ｂｐ长，病毒ＲＮＡ３、端没有ｐｏｌｙ（Ａ）。

３病毒型别：世界各地的分离毒株有明显的差异，甚至在一个特定地理区域分离到的毒株也有差异。

西尼罗病毒现在分为两型，Ｉ型包括的毒株为来源于北非、欧洲、以色列、美国的所有毒株，以及来源于澳大利亚的昆京病毒。

ＩＩ型包括的毒株为：来源于西非、中非、东非和马达加斯加的毒株。

西尼罗河病毒有两个不同的抗原群，一个称作非洲一中东群，包括源于刚果、埃及、法国、以色列、巴基斯坦、乌干达、前苏联和南非的毒株，另一个为独立的一群，系来源于印度的毒株。

病毒株的遗传进化分析阐明了毒株问的亲缘关系。

以色列于２０００年从临床感染的人的血清中分离到四株病毒，其中两株完全相同。

这两株与俄国斯１９９９年从人脑中分离到的毒株和罗马尼亚１９９７年从尖音库蚊群分离到的毒株高度同源。

另外两株二者间仅有微小的差异，它们与美国纽约１９９９年从智利火烈鸟分离到的毒株亲缘关系最近，几乎相同：也与以色列１９９９年从白眼鸥分离到的毒株以及美国１９９９年从人、马和尖音库蚊分离到的毒株高度同源。

美国康涅狄格州于１９９９年从尖音库蚊、Ｖｅｘａｎｓ伊蚊（内陆洪水蚊）、美洲乌鸦和Ｃｏｏｐｅｒｓ山鹰分离到四个完全相同的毒株。

它们也与罗马尼亚１９９６年分离的毒株高度同源，差异仅有２．８％。

美国１９９９年分离到的毒株与以色列从死亡的家鹅分离到的毒株同源性相当高，超过９９．８％。

从尼日利亚分离到的七株病毒问存在差异，差异表现为在继代猴肾细胞上或者有细胞病变或者无细胞病变，另外，各毒株的病变形成时间和大小也不尽相同。

西尼罗河病毒的不同毒株对Ｙｅｒｏ细胞的感染性有差异，蚀斑大小也不同。

对于一个确定的宿主，各毒株的感染性存在差异。

对成年小鼠的致病性不同毒株也不相同，实验感染人后所造成的后果也不相同。

西尼罗河病毒从１９９８年开始发生了变异，这种变异导致了感染鸟的发病和死亡，而在１９９８年以前，只有一起鸟感染西尼罗河病毒发病的报道。

４病毒检测与鉴定４．１抗体检测酶联免疫吸附试验。

该技术用于西尼罗河病毒抗体的检测，在许多情况下代替了血凝抑制试验、补体结合试验和中和试验。

ＩｇＭ抗原捕捉ＥＬＩＳＡ（ＭＡＣ—ＥＬＩＳＡ）目前正用于西尼罗病毒抗体检测的复核工作。

血凝抑制试验。

尽管许多实验室尚在应用此技术检测病毒抗体。

但该技术正逐渐为ＥＬＩＳＡ所替代。

蚀斑减少中和试验，用于检测病毒抗体，尽管该技术费用昂贵，技术要求高，但该技术在鉴别两种抗原性相关病毒的感染中却非常有用。

间接免疫荧光抗体试验，用于检测抗体。

该方法一般不被采用，只在那些没有建立起ＥＬＩＳＡ方法的实验室使用。

补体结合试验，用于检测抗体。

该法难度很高，不过仍可用于病毒的补体结合抗体的检测。

对于抗体检测来说，黄病毒成员间会有交叉反应发生。

如果在感染其它黄病毒后又感染了西尼罗河病毒，那么ＩｇＭＥＬＩＳＡ所检测的ＩｇＭ抗体水平结果就无法解释。

４．２抗原检测西尼罗河病毒可在多种蚊子传代细胞系、哺乳动物传代细胞系和乳鼠上生长。

ＲＴ－ＰＣＲ（反转录聚合酶联反应）可用于检测脑脊髓液、脑组织中的西尼罗河病毒抗原，并且可与１３种其它病毒进行鉴别检测。

ＲＴ－ＰＣＲ与ＩｇＭ捕捉ＥＬＩＳＡ相比敏感性低，但ＲＴ—ＰｃＲ的特异性很高，当怀疑是其它病毒感染时，可直接应用ＲＴ—ＰＣＲ加以鉴别确诊。

间接血凝用于快速检测病毒血症。

但敏感性要比病毒分离低。

直接免疫荧光技术，用于检测细胞、组织触片和细胞培养物里的病毒抗原。

５．特定的宿主西尼罗河病毒可感染多种脊椎动物，不过，病毒血症持续的时间和发生的轻重程度则与动物种类有关，差异非常明显。

许多种鸟的病毒血症足以使感染进一步传播，而许多哺乳动物则被认为是终末宿主，其病毒症的时间和程度都不足以使病毒进一步发生传播。

５．１哺乳动物：据记载，通过病毒分离和抗体检测大部分哺乳动物都可感染西尼罗病毒。

除了马科动物和人以外，其它哺乳动物感染后基本都不发病。

哺乳动物的病毒血症不足以感染蚊子。

可感染的哺孔动物种类有：奇蹄目、有鼻目、食肉目、灵长目、翼手目、偶蹄目、啮齿目、兔目和食虫目动物。

５．２鸟类；在鸟类的２９个目中，有２４个目共２２５种鸟类已检测到西尼罗河病毒感染。

但是，一直到１９９７年才在一只鸽子上观察到由自然感染引发的临床疾病。

自那时起，鸟类的发病和死亡开始在以色列的家鹅中被发现。

鸟类大面积发病和死亡则在１９９９年西尼罗河病毒传入美国纽约地区后开始发生。

发病和死亡的多数鸟类以雀形目鸦科类的蓝冠鸦、短嘴乌鸦和松鸦为主。

中国分布有美国已经报道可以感染西尼罗河病毒的鸟类，具体包括：雁形日：鸭科：赤颈鸭、绿头鸭、灰雁、鸿雁、斑背潜鸭、帆背谱鸭、红胸黑雁、鹊鸭、雪雁、小天鹅、疣鼻天鹅、斑头敢沙鸭、普通秋沙鸭。

行鸟形目：鸥科：银鸥鹳形目：鹭科：大白鹭、夜鹭；鹳科：秃鹳；鸽形目：鸠鸽科：原鸽、灰斑鸠、欧斑鸠；隼形目；鹰科：苍鹰、秃鹫、金雕、毛脚狂、白尾鹞、白腹海雕：隼科：灰背隼、游隼、矛隼；鸡形目：雉科：石鸡、蓝马鸡（中国特有）、原鸡、绿尾虹雉（中国特有）、环颈雉、灰腹角雉、红胸角雉；鹤形目：鹤科：蓑羽鹤、沙丘鹤、丹顶鹤、白鹤、白头鹤、黑颈鹤、白枕鹤；雀形目：鸦科：渡鸦、小嘴乌鸦、松鸦、喜鹊：燕科：家燕：山雀科：杂色山雀：雀科：家麻雀；椋鸟科：紫翅橡鸟；画眉科：自冠噪鹛：鹪鹩科：鹪鹩；红鹳目：大红鹳；枭形目：鸥枭科：鬼枭、短耳枭、长耳枭、雪枭、灰林枭、乌林枭、猛枭；草枭科：仓枭鸵鸟目：鸵鸟科：非洲鸵鸟５．３两栖类和爬行类：虽然尚无两栖类和爬行类动物感染西尼罗河病毒发病的报道，但已从青蛙分离到了西尼罗河病毒，另外在一种湿地蛇（草蛇）体内检测到了西尼罗河病毒的血凝抑制抗体。

可感染病毒的两栖类和爬行类动物；两栖类：青蛙和蛤蟆：爬行类：有鳞爬虫目。

６．媒介：已发现多种库蚊属的蚊子可感染西尼罗河病毒，而且在实验室里能够传播疾病。

库蚊属的蚊子，特别是尖音库蚊和ｒｅｓｔｕａｎｓ库蚊这两种嗜吸鸟血的圣路易斯脑炎病毒的维持媒介以及ｓａｌｉｎａｒｉｕｓ库蚊是西尼罗河病毒在北美传播的主要媒介。

几种蜱（软蜱属和硬蜱属）是病毒的潜在媒介。

我国有多种库蚊属的蚊子，以下库蚊属的蚊子可以传播西尼罗河病毒。

Ｃｕｌｅｘｂｉｔａｅｎｉｏｒｈｙｎｃｈｕｓ，二带喙库蚊（麻翅库蚊），除内蒙古和青海以外的全国各省区都有分布，孽生于稻田、沼泽、池塘、苇塘、泉潭、浅井、沟渠、河床、水坑等有绿藻生长的积水。

此种库蚊除了是西尼罗河病毒的传播媒介外。

还是班氏丝虫、盖它病毒、辛德毕斯病毒等的媒介Ｃｕｌｅｘｐｉｐｌｅｎｓｃｏｍｐｌｅｘ尖音库蚊群该群库蚊总的来说，是西尼罗河病毒、班氏丝虫、日本乙型脑炎病毒、圣路易斯脑炎病毒、辛德毕斯病毒、西方马脑脊髓炎病毒的媒介。

ａ、Ｃｕ］ｅｘ脚≯ｉｏｎｓｆａｔｉｇａｎｓ致倦库蚊，致乏库蚊。

分布于北纬３０”左右及其以南地区，孽生的场所有污水坑、清水粪坑、浅潭、污水沟、容器积水等。

该种库蚊是班氏丝虫、圣路易斯脑炎病毒、辛德毕斯病毒、委内瑞拉马脑炎病毒，西方马脑脊髓炎病毒。

西尼罗河病ｂ、Ｃｕｌｅｘｍｏｄｅｓｔｕｓ凶小库蚊，分布于河北、山西、内蒙古、吉林、辽宁、山东、宁夏、甘肃、青海、新疆，其孽生场所为，芦苇塘、稻田、洼地积水、沼泽、水塘等。

该种库蚊是班氏丝虫、西尼罗河病毒的媒介。

Ｃ、Ｃｕ］ｅｘ｜口如ｉｅｎｓｐ印ｉｅｎｓ尖音库蚊，分布于新疆。

其孽生场所有，污水坑、浅水凹、水沟、稻田、芦苇塘等。

该种库蚊是西尼罗河病毒的主要媒介。

ｄ、Ｃｕｌｅｘｐｉｐｉｅｎｓｐａｌｌｅｎｓ淡色库蚊，尖音库蚊淡色变种，分布于北纬３００左右及其以北地区，主要的孽生场所有，污水坑、清水粪坑、污水沟、容器积水、洼地积水。

该种库蚊是西尼罗河病毒的媒介。

Ｃｕｌｅｘｐｓｅｕｄｏｖ］ｓｌｍｕｉ伪杂鳞库蚊，分布于除黑龙江、辽宁、内蒙古、青海和新疆以外的全国各省区。

其孳生场所为：稻田、池塘、水坑、溪流积水、沼泽、沟渠、洼地积水等。

该种库蚊是西尼罗河病毒的媒介。

Ｃｕ］ｅｘｔｅｒｒｉｔａｎｓ糠骇库蚊，分布于河北、新疆，其孽生场所为水坑，是西尼罗溺病毒的媒介。

Ｃｕ］ｅｘｔｈｅｉｌｅｒｉ纹腿库蚊，分布于安徽、浙江、福建、湖北、广西、四川、贵州、云南。

孽生场所有：稻田、水池、水塘、茭白塘、沼泽等。

该种库蚊是裂谷热病毒、辛德毕斯病毒、西尼罗河病毒的媒介。

ＣｕｌｅＪｔｒｉｔａｅｎｉｏｒｈｙｎｃｈｕｓ三骺喙库蚊，分布于除青海、新疆和西藏以外的全国各省区ａ孽生场所有：池塘、稻田、荒天、沟渠、浅潭、粪坑内污水、石穴、沼泽等。

该种库蚊是３型登革热病毒、日本乙型脑炎病毒、辛德毕斯病毒、西尼罗河病毒的媒介。

Ｃｕｌｅｘｖｉｓｈｎｕｉ杂鳞库蚊．魏仙库蚊，分布于南方各省区，孳生场所有：沼泽、水沟、池塘、稻田、洼地积水、水池、石穴、水井、盐场等。

该种库蚊是日本乙型脑炎病毒、西尼罗河病毒的媒介。

７．临床症状：临床上，人的西尼罗热是一种急性自限性发热性疾病，伴有头痛、多发性关节病变、皮疹和淋巴腺病变。

偶尔，有急性肝炎或胰腺炎的报道，老年病人有时并发有中枢神经系统感染。

绝大多数马匹感染西尼罗河病毒呈现无症状型。

发病的马匹往往表现出神经症状。

特别是在患西尼罗河病毒性脑炎的马匹身上可看到共剂失调的症状。

除共剂失调外，有时还可见到其他症状，诸如转圈、后肢软弱无力、不能站立、多肢麻痹、肌无力、瞎眼、嘴唇垂落或者麻痹、磨牙、急性死亡等。

鹅自然感染西尼罗病毒见于以色列。

对４只两周龄鹅雏进行皮下接种实验感染后发现，这些鹅子活动减少，精神沉郁，体重减轻。

有神经症状出现，表现为间歇性斜颈，角弓反张和有节奏地来回摇头。