人感染H7N9禽流感病毒病原学特点及实验室检测要求
人感染H7N9采样方法及实验室检测策略
采集鼻咽拭子注意事项
• 1、采样时用干拭子采，不能蘸采样液，因为采样 液中有抗菌素，防止过敏。
• 2、采样液平时保存在-20℃或-70℃，采样前融化 到4℃。
• 3、采样液颜色呈紫色时失效不能用了。
人感染H7N9禽流感病毒鼻咽拭子标本 采集方法（2）
• 三、标本运送：
• • 新鲜的临床采集标本应在4℃条件下随样品送检单24小时
（二）标本转送和检测
• 1.H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照《人间传染 的病原微生物名录》中高致病性禽流感病毒进行管理。病 例的临床标本采集后，县级疾病预防控制机构和病例收治 的医疗机构要密切配合，按照生物安全的相关规定进行包 装，在24 小时内送到当地流感监测网络实验室进行检测。
• 2.当地流感监测网络实验室收到标本后24 小时内，立即对 呼吸道标本开展甲、乙型流感病毒通用引物、H5、H7亚型 的检测。
内运送至市CDC流感检测实验室。未能24小时内送至实验 室的，应置-70℃或以下保存；冻存的标本应在冻存条件 下，低温送至实验室。
• 四、采样时的生物安全防护：
• 采样时应带口罩，穿隔离衣，带一次性手套及帽子。若在 现场进行快速检测，应将现场用过的所有废物带回销毁。
谢谢，祝大家工作顺利！
• 若当地流感监测网络实验室检测结果为H5、H7核酸检测 阳性时，应当于24小时内将其中2管呼吸道相关原始标本 分别送省级疾控中心流感网络实验室和国家具备相应生物安全条件的网络实验室可开展病毒 分离，并将分离的毒株按要求及时送国家流感中 心。
• 3.若当地流感监测网络实验室检测结果为甲型流 感和乙型流感通用引物均阴性时，应当立即将1管 原始呼吸道标本送省级疾控中心。省级疾控中心 收到标本后，应当立即对其中1管进行SARS 、新 型冠状病毒等相关病原体的检测，另1管送国家流 感中心。
H7N9禽流感病毒实验室检测
人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤 其是下呼吸道标本）和发病7天内急性期血清 以及间隔2-4周的恢复期血清。如病人死亡， 应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸体 解剖，采集组织（如肺组织、气管、支气管组 织）标本。医疗机构采集的呼吸道标本每份不 少于3ml。血清标本每份分为2管，每管不少 于0.5ml。
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人感染H7N9禽流感强化监测实施方案
.严重急性呼吸道感染（SARI）病例
（1）5岁以上儿童及成人。 新收入院患者具有以下4项临床表现： ①急性起病； ②腋下体温≥38℃； ③咳嗽或咽痛； ④气促（呼吸频率≥25次/分钟）或呼吸困难 正在住院治疗的患者如出现上述4项临床表现，也视 为严重急性呼吸道感染病例。
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相关技术文件
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
标本采集 为进行病例诊断，医疗机构应尽早采集病人的 相关临床样本。采集的临床标本包括病人的上 呼吸道标本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物 、咽漱液和鼻洗液）、下呼吸道标本（如气管 吸取物、肺洗液、肺组织标本）和血清标本等 。
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
对人感染H7N9禽流感确诊病例可能暴露的禽 类饲养或交易等场所，由疾控机构采集禽类粪 便、笼具涂拭标本和环境污水等标本，技术要 求参考《职业暴露人群血清学和环境高致病性 禽流感监测方案（2011年版）》。（ /jkzt/crb/rgrgzbxqlg_5 295/rgrglgyh/）
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
人感染H7N9禽流感采样以及实验室检测技术
用真空负压采血管采集血液标本5ml，室温静置30分钟， 1500～2000rpm离心10分钟，收集血清于2ml无菌螺口塑料管 中。
样本采集方法 (5)
鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：
用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取 呼吸道分泌物。先将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负 压，旋转收集器头部并缓慢退出；收集抽取的粘液，并用 采样液3ml涮洗收集器1次（可用小孩导尿管接在50ml注射 器上来代替收集）。
注：应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼 吸道标本）和发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复 期血清。
要求 呼吸道标本：发病早期采样，每份不少于3ml 血清标本每份分为2管，每管不少于0.5ml
样本采集方法 (1)
咽拭子：左手用压舌板压住患者舌头，右手用2根聚丙烯纤
维头的塑料杆拭子同时檫拭双侧咽扁桃体及咽后壁，应避免 接触舌头，将拭子头浸入含3ml采样液的管中，弃去尾部，旋 紧管盖。
胞分类计数减少； 4. 不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所
致的肺炎。
• 包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱 液和鼻洗液）；
◆下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）；
◆ 血清标本；
◆ 如病人死亡，应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸 体解剖，采集组织（如肺组织、气管、支气管组织）标本；
样本采集方法 (4)
鼻洗液 患者取坐姿，头微后仰，用移液管将5 ml生理盐水注入一侧鼻孔，嘱患 者同时发K音以关闭咽腔。然后让患者低头使生理盐水流出，用平皿或烧 杯收集洗液。重复此过程洗两侧鼻孔
漱口液 用10 ml生理盐水漱喉。漱时让患者头部微后仰，发“噢”声，让生理
盐水在咽部转动。然后，用50ml的无菌螺口塑料管收集洗液。
禽流感病毒H7N9实验活动风险评估报告
禽流感病毒H7N9实验活动风险评估报告一、生物因子（一）一般特性H7N9禽流感病毒是一种新型禽流感病毒，属于甲型流感病毒中的一种，既往仅在禽间发现，未发生人感染的情况。
2013年3月底在我国上海率先出现全球首例人感染H7N9禽流感病例，并逐渐蔓延至全国多个地区。
H7N9型禽流感已经纳入我国法定传染病监测报告系统，为乙类报告传染病，目前尚未有疫苗推出。
该病毒感染以发热及呼吸道症状为主，目前尚不具备有效的人传染人的特性。
截至2014年2月28日，全球已有实验室确诊病例375例，死亡115例，病例分布于北京、上海、江苏、浙江、安徽、山东、河南、福建等地，以长江三角洲地区为多。
甲型流感病毒根据病毒表面的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的差异可以分为多个亚型，HA可分为16个亚型，NA可分为9个亚型。
禽流感病毒中H3、H5、H7、H9亚型可以传染给人。
由于2013年3月底才出现人感染H7N9禽流感病例，因此对这个病毒的生物学特点、致病力、传播力，还没有足够充分的依据进行分析判断，对其实验操作的风险评估参照以往人感染高致病性H5N1禽流感病毒的风险评估进行。
（二）来源甲型流感病毒除感染禽外，还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。
可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H7N9、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3。
此次发现的人感染H7N9禽流感病毒为一种新型重配的禽流感病毒，其内部基因来自于H9N2禽流感病毒。
2013年4月初，中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室对H7N9禽流感病毒进行基因溯源研究显示，H7N9禽流感病毒基因来自于东亚地区野鸟和中国上海、浙江、江苏鸡群的基因重配，而病毒自身基因变异可能是H7N9型禽流感病毒感染人并导致高死亡率的原因。
研究结果初步显示，H7N9禽流感病毒暂未发现在猪群中的进化痕迹，提示猪在这次病毒基因重配中未发挥中间宿主的作用。
研究人员表示，H7N9禽流感病毒的8个基因片段中，H7片段与浙江鸭群中分离的禽流感病毒相似，对浙江鸭群中的病毒再进行追溯，与东亚地区野鸟中分离的禽流感病毒基因相似；N9片段与东亚地区野鸟中分离的禽流感病毒相似。
9.18传染病预防控制相关 答案
肠道传染病监测与防控1.全球轮状病毒监测网络正式建立时间是：(6分)A2001年B2008年C2020年D2009年考生答案：B难易程度：一般2近年引起我国轮状病毒胃肠炎的优势基因型为：(5分)AG1P8BG9P8CG8P8DG3P8考生答案：B难易程度：一般3我国诺如病毒感染疫情呈上升趋势，发生聚集性/暴发疫情的重点场所是：(5分)A学校和托幼机构B机关企事业单位C养老机构D医疗机构考生答案：A难易程度：一般4以下属于我国法定报告甲乙类肠道传染病的病种有：(10分) A细菌性痢疾B阿米巴痢疾C霍乱D手足口病E伤寒和副伤寒考生答案：A,B,C,E难易程度：一般5引起感染性腹泻的病原中，有疫苗可预防的疾病是：(10分) A轮状病毒感染B诺如病毒感染C副伤寒D霍乱E伤寒考生答案：A,B,C,E难易程度：一般6今年我国霍乱的流行特点是：(10分)A多为食源性传播B流行强度较低C以散发病例为主D甲鱼等海水产品为常见感染来源EO1群小川型和O139群交替流行考生答案：A,B,C,D,E难易程度：一般7接种霍乱疫苗是预防霍乱最有效的手段。
(5分)A正确B错误考生答案：B难易程度：一般8全球腹泻疾病负担依然严重，不同区域差异化不明显。
(5分)A正确B错误考生答案：B难易程度：一般9我国伤寒/副伤寒发病呈持续下降趋势。
但3岁以下儿童发病率呈上升趋势。
(5分)A正确B错误考生答案：A难易程度：一般10《预防和控制肺炎与腹泻病的全球综合行动计划(GAPPD)》中,5岁以下儿童腹泻防控目标为，到2025年，在全球5岁以下儿童中，重症腹泻发病率比2010年降低75%，腹泻死亡率减少到1%。
(13分)1 75%2 1‰备注：全部空答对给分，答案无序难易程度：一般11已上市的霍乱疫苗包括两种，分别为单价灭活全菌-重组霍乱肠毒素B亚单位疫苗、双价灭活疫苗。
(13分)1单价灭活全菌-重组霍乱肠毒素B亚单位疫苗2双价灭活疫苗难易程度：一般12我国上市使用的轮状病毒疫苗有口服五价重配轮状病毒减毒活疫苗、口服轮状病毒疫苗（LLR）口服、口服三价重配轮状病毒减毒活疫苗。
201x最新人感染H7N9禽流感监测与防控-课件
应尽早进行抗病毒治疗
在使用抗病毒药物之前宜留取呼吸道标本。 抗病毒药物应尽早使用，无需等待病原学检测结果。 即使发病超过48小时也应进行抗病毒治疗
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被批准的抗流感病毒药物
注： 1 H3N2, pH1N1, 局部 H5N1 和 H7N9; 2 除了季节性H1N1, 2021-9
抗病毒药物的应用
不宜使用大剂量激素治疗
纳入288例住院H7N9病毒性肺炎患者，年龄中位数 58 (45-68) 岁，男性占69.8%，住院 病死率31.9%.其中204 (70.8%) 接受糖皮质激素辅助治疗
COX回归分析显示：大剂量激素增加H7N9禽流感患者30/60天病死率
小剂量激素无明显影响
治疗
加强支持治疗，维持内环境稳定，防治继发感染。一旦出现继发感 染征象或存在感染的高危因素，应合理选择抗菌药物治疗。
美国CDC称H7N9死亡率可达40%
2003年在捷克、日本、荷兰、美国曾别离到过 H7N9，但从未有过感染人事件！ 2021年首次在中国感染人事件中别离到的H7N9 与以往禽类中发现的H7N9完全不同，是一种重未 出现过的新型禽流感病毒。
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通知
目前，我国处于人感染H7N9禽流感〔以下简称H7N9〕疫情高 发季节，报告病例数明显高于往年同期水平，新发病例 和新发 疫情地区持续出现。为有效应对H7N9疫情，做好H7N9医疗救 治有关工作，切实保障人民群众健康平安，现将有关要求通知 如下： 一、高度重视医疗救治工作； 二、科学开展医疗救治； 三、 加强医务人员培训； 四、进一步加强医院感染管理工作。
发病第42天
主要内容
H7N9概述 H7N9的流行概况及病原学特点 H7N9的主要临床表现 H7N9诊断和治疗 H7N9防控
人感染H7N9禽流感标本采集要求
人感染H7N9禽流感标本采集要求人感染H7N9禽流感病毒的病原学依据《人感染H7N9禽流感诊疗方案》（2013第一版）禽流感病毒属正粘病毒科甲型流感病毒属。
禽甲型流感病毒颗粒呈多形性，其中球形直径80〜120nm,有囊膜。
基因组为分节段单股负链RNA。
依据其外膜血凝素（H）和神经氨酸酶（N）蛋白抗原性不同，目前可分为16个H亚型（H1H16）和9个N亚型（N1〜N9）。
禽甲型流感病毒除感染禽外，还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。
可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3,此次报道的为全球首次发现人感染H7N9禽流感病毒。
该病毒为H7N9和H9N2重配的新型病毒，其内部基因来自于H9N2禽流感病毒，基因序列分析表明为禽源病毒。
人感染H7N9禽流感监测病例定义：同时具备以下4项条件依据《人感染H7N9禽流感疫情防控方案》（第版）1、发热（腋下体温》38C）;2、具有肺炎的影像学特征；3、发病早期白细胞总数降低或正常，或淋巴细胞分类计数减少；4、不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎。
除第4条不同于不明原因肺炎病例定义，以上三条均相符。
不明原因肺炎第4条为：经规范抗菌药物治疗3-5天，病情无明显改善或呈进行性加Sr o标本采集种类：医疗机构应当及时采集病例相矢临床样本。
1、上呼吸道标本（包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）；2、下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）3、血清标本（发病7天内急性期血清以及间隔2・4周的恢复期血清）尸检标本（如病人死亡，应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸体解剖，采集肺组织、气管、支气管等组织标本）5、应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）。
四、标本采集主要器材和试剂：1、拭子：WHO及美国CDC规定，鼻烟拭子采集只能用塑料杆的涤纶或人造棉拭子（如常用的聚酯纤维拭子），不能用藻酸钙拭子或木杆拭子，因可能使某些病毒失活或抑制PCR;脫脂棉含有荧光物质，影响实时应荧光定量PCR结果。
人感染H7N9禽流感诊疗方案(2014年版)
Ｈ ７ Ｎ３等 ， 此 次为 Ｈ ７ Ｎ ９禽 流感 病 毒。该 病 毒 为新 型 重配病毒 ， 编 码 ＨＡ 的基 因来 源 于 Ｈ ７ Ｎ ３ ， 编码 Ｎ Ａ 的基 因来 源 于 Ｈ７ Ｎ ９ ， 其 ６个 内部 基 因来 自于 Ｈ ９ Ｎ ２
禽 流感 病 毒 。
致全身炎症反应， 可出现 Ａ Ｒ Ｄ Ｓ 、 休克及 多脏器功 能 衰竭。 个 别 重症 病 例 下呼 吸道 病毒 可持 续 阳性 至病
禽 流 感 病 毒 亚 型 为 Ｈ５ Ｎ１ 、 Ｈ ９ Ｎ ２ 、 Ｈ７ Ｎ ７ 、 Ｈ７ Ｎ ２ 、
Ｈ ７ Ｎ ９禽 流 感 病 毒 可 以 同时 结合 唾液 酸 Ｏ Ｌ 一 ２ ． ３ 型受体（ 禽 流感 病 毒 受体 ） 和唾液酸 仅 一 ２ ， ６型 受 体 （ 人 流 感 病 毒 受体 ） ， 较Ｈ ５ Ｎ １禽 流 感 病 毒 更 易 与人
二、 流 行病 学
四、 临床 表现
根据流感 的潜伏 期及现有人感 染 Ｈ ７ Ｎ ９禽流 感病例 的调查结果 ， 潜伏期一般为 ７天 以内。 （ 一） 症状 、 体征和临床特点。患者一般表现为流感 样症状 ， 如发 热 、 咳嗽 、 少痰 ， 可伴 有头痛 、 肌 肉酸
一
触感染禽类的分泌物或排泄物而获得感染 ； 或通过 接触病毒污染 的环境传播至人 ； 不排 除有限的非持
续 的人传 人 。
、
病原 学
（ 三） 高危人群。 在发病前 １ 周 内接触过禽类或者到
过 活禽 市场 者 ， 特别 是老 年 人 。
三、 发病 机制 和病 理
禽 流感 病 毒属 正粘 病 毒科 甲型流 感病 毒属 。甲
型 流感 病 毒颗 粒 呈 多形 性 ，其 中球 形直 径 ８ Ｏ ～ １ ２ ０ ｎ ｍ， 有 囊膜 。 基 因组为分 节 段 单股 负链 Ｒ Ｎ Ａ。 依
《人感染H7N9禽流感医院感染预防与控制技术指南(2021年版)》
《人感染H7N9禽流感医院感染预防与控制技术指南(2021年版)》人感染h7n9禽流感是由h7n9亚型禽流感病毒引起的急性呼吸道传染病。
自2021年2月以来,上海市、安徽省、江苏省先后发生不明原因重症肺炎病例,其中确诊人感染h7n9禽流感3例,2例死亡。
3例均为散发病例,目前尚未发现3例病例间有流行病学关联。
一、病原学禽流感病毒属于正黏病毒科甲型流感病毒属于。
禽甲型流感病毒颗粒呈圆形多形性,其中球形直径80~120nm,存有囊膜。
基因组为分节段单股负链rna。
依据其外膜血凝素(h)和神经氨酸酶(n)蛋白抗原性相同,目前可以分成16个h亚型(h1~h1⑴和9个n亚型(n1~n9)。
甲型流感病毒除病毒感染禽外,还可以病毒感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。
可以病毒感染人的禽流感病毒亚型为h5n1、h9n2、h7n7、h7n2、h7n3,此次报导的为人病毒感染h7n9禽流感病毒。
该病毒为新型重配病毒,其内部基因源自于h9n2禽流感病毒。
禽流感病毒广泛对热脆弱,对低温抵抗力较强,65℃冷却30分钟或煮熟(100℃)2分钟以上可以灭活。
病毒在较低温度粪便中可以存活1周,在4℃水中可以存活1个月,对酸性环境存有一定抵抗力,在ph4.0的条件下也具备一定的存活能力。
在存有甘油存有的情况下可以维持活力1年以上。
二、流行病学(一)传染源。
目前尚不明晰,根据以往经验及本次病例流行病学调查,推断可能将为随身携带h7n9禽流感病毒的禽类及其分泌物或排泄物。
(二)传播途径。
经呼吸道传播,也可通过密切接触感染的禽类分泌物或排泄物等被感染,直接接触病毒也可被感染。
现尚无人与人之间传播的确切证据。
(三)极易感人群。
目前未有清楚证据表明人类对h7n9禽流感病毒极易感。
现有诊断病例均为****。
(四)高危人群。
现阶段主要是从事禽类养殖、销售、宰杀、加工业者,以及在发病前1周内接触过禽类者。
三、临床表现根据流感的潜伏期及现有h7n9禽流感病毒感染病例的调查结果,潜伏期一般为7天以内。
人感染H7N9禽流感病毒培训ppt课件
标本运输
经过行政审批 包装
临床样品：B类， UN3373包装 病毒分离物： A类， UN2814包装
专人专车运输并注意防护
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25
感染性物质包装分类
航空运输B类包装（ UN号3373
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26
A类、 B类包装的区别
定义 运输专用名称
UN编号
运输对象
UN专用标记 主容器 次级容器 外包装
发病早期白细胞总数降低或正常、淋巴细胞分类计数 减少；
经规范抗菌药物治疗3－5天
监测病例（同时具备以下4项）：
发热(腋下体温≥38℃)
具有肺炎的影像学特征
发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数 减少
不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎
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9
病例定义
疑似病例：
12
Eagel`s基础培养基
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13
咽拭子
用灭菌棉签（最好用塑料柄、尼龙拭子，因为 木头柄棉拭子会抑制PCR实验）擦拭双侧咽扁桃 体及咽后壁，将棉签头部浸入3-4ml采集 液中，尾部弃去
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14
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15
采咽拭子的器材和容器
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16
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17
标本采集要求
为防止采样液生长细菌和真菌，在采样液中需加 入抗菌素，加入庆大霉素（终浓度0.1mg/ml可高 至0.5mg/ml ）、抗真菌药物（终浓度2ug/ml）。 加入抗菌素以后重新调节pH值为7.4， 配制好的 采样液，分装每个采样管3-4ml，-20℃冻存。
庆大霉素:80mg（８万单位）／2ml
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10
H7N9禽流感病毒实验室检测及防控措施
禽流感病毒是一种具有较强传染能力的病
死性炎症。在进行实验室检测时，通常需要先确
毒，主要在禽类之间传播。家禽饲养行业的发展
定病症的种类以及病症的严重程度。为了提高检
规模不断扩大，如何保障饲养工作的科学性和合
验工作的准确性，兽医还会采用抽血化验的方
理性，避免带来环境污染问题和给养殖者造成经
式，对家禽的血清标本进行检测，以确定疾病的
的羊比较容易感染这种病症，方便有针对性地制定
史称“软肾病”。本病在临床症状上与羊快疫相似，
防控对策。结合数据资料的统计结果可以看出，一
有些地区也称之为“类快疫”
。羊肠毒血症最早出现
般情况下，绵羊和山羊比较容易感染该病症。且该
在我国内蒙古地区，后来随着羊群不断引种和羊肉
疾病没有明显的日龄特征，羊只幼崽、怀孕的母羊
和通风工作。尤其要关注圈舍内的环境是否过于
表示家禽感染了禽流感病毒，需要及时采取治疗
潮湿，潮湿的环境容易滋生细菌，给病毒提供传
措施。
播的空间，需要养殖场引起重视。
1.2
2.2
病毒鉴定
禽流感可引起家禽全身广泛出血和多器官坏
疾病治疗工作
在实际展开对 H7N9 禽流感病毒的治疗工作
收稿日期：2021-03-18
差比较大的情况时，就会出现该病症。而且，这种
收稿日期：2021-03-02
作者简介：徐义双（l970—），男，吉林德惠人，助理兽医师，主要从事动物防疫工作。
时，兽医应当对于区域内出现的禽流感病例进行统
文章编号：1001-0084（2021）05-0091-02
羊肠毒血症是羊的一种急性毒血症传染病，是
由 D 型产气荚膜梭菌，即魏氏梭菌造成的。病原菌
人感染H7N9禽流感病毒标本采集、运送及保存
√
×
标本采集
2. 鼻拭子
将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻 腭处，停留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤 维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。上 述两根拭子浸入同一含3ml采样液的管中，尾部弃去， 旋紧管盖。
标本采集
3. 鼻咽抽取物或气管抽取物
用与负压泵相连的收集器从鼻 咽部抽取粘液或从气管抽取呼 吸道分泌物。将收集器头部插 入鼻腔或气管，接通负压，旋 转收集器头部并缓慢退出，收 集抽取的粘液，并用3ml采样液 冲洗收集器1次（亦可用小孩导 尿管接在50ml注射器上来替代 收集器）
应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是
下呼吸道标本） 症状出现后尽早采集 尽量在抗病毒药物使用前采集
血清标本应采集发病早期和恢复期双份血清；
标本采集
1. 咽拭子
用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁 桃体及咽后壁，将拭子头浸入含3ml采样液的管中， 尾部弃去，旋紧管盖。
采集前的准备
常用的采样液/病毒运输液(VTM）
1. pH 7.4～7.6的Hanks液 2. MEM/DMEM液
在采样液中需加入抗菌素，可用青霉素（终浓度为100U/ml）、 庆大霉素（终浓度为1mg/ml）和抗真菌药物（终浓度为 2µg/ml）。 在无菌的带螺旋塑料管分装2-3ml采样液。最好储存在:– 20℃,4℃可放48–96h,室温1–2天。
序列测定
PB2 PB1 PA HA NP NA MP NS
6个内部片段来源于H9N2
三株H7N9病毒为同一基因类型
序列特点
耐药性分析 对烷胺类药物是耐药的，即M2蛋白25-42位氨基酸发生S31N突变。 HA连接肽分析 HA蛋白339位连接肽由单个（PKGRGLFG）碱性氨基酸组成，根据既往 研究，具有这种序列特点的病毒对禽类呈低致病性。 受体结合位点及其它重要位点分析 Shanghai/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸属于禽源受体结合位点 （为QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白 226-228位氨 基酸受体结合位点（为LSG） PB2蛋白627位氨基酸为K，提示致病性增强。 NS1蛋白92位氨基酸为D，与禽流感病毒一致，而与人流感病毒不同。
h7n9禽流感诊断标准
H7N9禽流感是一种由H7N9亚型甲型流感病毒引起的呼吸道感染疾病。
该病毒首次在2013年在中国被发现，并能够从禽类传播给人类。
H7N9禽流感的诊断标准主要包括流行病学史、临床表现和实验室检测：
1.流行病学史：
-患者在发病前14天内有活禽市场的暴露史，或接触过病死禽或其它H7N9禽流感病例。
-患者有与已知H7N9禽流感病例的密切接触史。
2.临床表现：
-发热（体温≥38°C）。
-呼吸道症状，如咳嗽、咳痰或呼吸困难。
-部分病例可出现头痛、肌肉痛、全身乏力等全身症状。
-重症病例可迅速进展为严重肺炎、急性呼吸窘迫综合症（ARDS）、休克或多脏器功能衰竭。
3.实验室检测：
-通过实时逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、病毒分离或血清学检测确认H7N9病毒感染。
综合以上因素，当患者符合流行病学史和临床表现，并且实验室检测结果阳性时，可以确诊为H7N9禽流感。
对于疑似病例，应尽快进行实验室检测，并根据检测结果和临床表现进行综合评估。
由于H7N9禽流感具有一定的致死率和人传人的潜在风险，对疑似病例应及时进行报告、隔离和治疗，以防止疾病的进一步传播和爆发。
感染HN9禽流感病毒毒病毒原特点及实验检测
CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION
人感染H7N9禽流感病毒 实验室检测
CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION
A/H7N3
禽
2004/加拿大
2/结膜炎、ILI; 1名LPAI；1名HPAI
A/H5N2
禽
2005/日本(Ibaraki) 13/无临床症状，血清学诊断
A/H7N2
禽
2007/英国(Wales) 1/结膜炎、ILI
A/H9N2
来源不清
2007/香港
1/ ILI
A/H10N7
鸭
2004/埃及( Ismaillia) 2/ ILI
共25株
均为LPAI 无感染人病例
亚洲：7株 均来自野禽 5株—韩国 2株—蒙古
CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION
H7N9的致病力和传播力
HPAI H7N3
HPAI H7N3
LPAI H7N9
LPAI H7N9
LPAI H7N9
A/H7N7
鸥
1980/美国
3/结膜炎
A/H7N7
鸭
1996/英国
1/结膜炎
A/H5N1
禽
1997/香港
18/ILI，肺炎
A/H9N2
鸡
1998/中国广东
5/ ILI，肺炎
A/H9N2
禽
1999/香港
2/ILI
A/H7N2 A/H9N2
人感染H7N9禽流感医疗救治专家共识
人感染H7N9禽流感医疗救治专家共识国家人感染H7N9禽流感临床专家组在总结前一阶段医疗救治工作经验，分析现有病例救治情况的基础上，就人感染H7N9禽流感医疗救治相关工作形成以下共识：一、病原学及相关检测抗病毒治疗之前必须采集呼吸道标本送检（如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上皮细胞）。
有病原学检测条件的医疗机构应尽快检测，无病原学检测条件的医疗机构应留取标本送指定机构检测。
（一）甲型流感病毒抗原筛查。
优点是简便易行，部分检测试剂可用在诊室或病床旁完成检测，并可在15分钟内获得结果，适用于基层的流感筛查。
现有甲型流感病毒抗原筛查法的缺点一是敏感性低，试剂间存在较大差异。
既往研究表明，甲型流感病毒抗原筛查法对季节性流感筛查的敏感性为20-70%，目前缺乏此方法对人感染H7N9禽流感病毒筛查价值的临床评价。
二是本方法不能确定流感病毒的亚型，但不会影响抗病毒药物的早期使用。
（二）H7N9核酸检测。
采用realtimeRT-PCR方法，对患者呼吸道标本H7N9禽流感病毒核酸进行检测，诊断敏感性高、特异性强，推荐临床首选使用。
受条件和设各限制，本诊断方法尚无法在基层医疗机构普及。
对于高度怀疑的病例或甲型流感病毒抗原检测阳性的疑似病例应进行H7N9禽流感病毒核酸检测，以明确诊断。
由于病毒复制过程中，血凝素抗原及神经氨酸酶抗原mRNA含量不同，在标本检测中可能会出现H7检测阳性而N9检测阴性的情况。
因此，在我国目前尚无其它H7亚型流感病毒感染人的情况下，建议可仅检测敏感性较高的H7亚型来进行临床诊断，以便早期发现病例。
（三）病毒分离。
从患者呼吸道标本中分离H7N9禽流感病毒，为实验室诊断的金标准，应当在符合P3级生物安全要求的实验室开展。
（四）特异性抗体检测。
动态检测双份血清H7N9禽流感病毒特异性抗体水平呈4倍或以上升高。
二、胸部影像学检查人感染H7N9禽流感病毒的病例发生肺炎时肺部出现不同范围的片状影像。
人感染H7N9禽流感诊断报告流程
人感染H7N9禽流感诊断报告流程一、流行病学调查流行病学调查是诊断人感染H7N9禽流感的第一步，主要目的是了解病例的相关信息，如接触禽类及禽类排泄物的情况、旅游史、近期接触史等。
流行病学调查有助于确定病例是否存在暴露的风险因素，进一步指导诊断过程。
二、临床表现评估对于疑似病例，医生需对其进行详细的临床评估。
人感染H7N9禽流感的症状与其他呼吸道感染病症相似，包括高热、咳嗽、咳痰、头痛、肌肉酸痛、流鼻涕、咽痛、乏力等。
但H7N9禽流感的特点是病情进展迅速，容易导致重症甚至死亡。
三、实验室检测在临床表现评估的基础上，通过实验室检测来确认人感染H7N9禽流感。
主要的实验室检测方法包括呼吸道标本分离病毒和测定病毒感染相关的生物标志物。
常见的呼吸道标本有咽拭子、鼻拭子、痰液、呼吸道分泌物等。
分离病毒可通过病毒培养、免疫荧光试验、RT-PCR等方法进行。
此外，还可以通过血清学检测尼群诺酮结合试验等，测定抗原和抗体水平。
四、病例报告一旦诊断出病例为H7N9禽流感感染，医生应立即向当地卫生部门进行报告。
涉及到人感染H7N9禽流感等副职医学事故的报告、处理和追踪管理等，都需要严格按照当地卫生部门的要求操作。
五、鉴别诊断确认人感染H7N9禽流感的临床症状与其他冠状病毒感染病症相似，如人感染SARS、MERS等。
因此，在诊断H7N9禽流感之前，需要排除其他疾病的可能性。
此外，应与常见的流感、金黄色葡萄球菌感染等进行鉴别诊断。
总之，诊断人感染H7N9禽流感的流程包括流行病学调查、临床表现评估、实验室检测、病例报告和鉴别诊断确认等。
及时、准确地诊断人感染H7N9禽流感对于疫情的防控以及患者的治疗具有重要意义。
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禽
禽
血清学证据： 2002/北美（Virginia） 1/ILI，血清学诊断
2003/香港 1/ILI 2003/荷兰 2003至今, 15个国家 89/结膜炎、ILI、肺炎; 1名死亡病例 602/ ILI, 肺炎
人感染H4, H5, H6, H7,H9,H10, H11 AIVs. 禽 2003/香港 2/ ILI，肺炎
亚型：
H7N1, H7N2, H7N3, H7N
7, H7N8
野禽居多 LPAI
人感染H7N9禽流感病毒特点
核酸检测
病毒分离
从3个病例中分离到3株病毒
A/Shanghai/1/2013(H7N9) A/Shanghai/2/2013(H7N9) A/Anhui/1/2013(H7N9)
禽 禽 来源不清 禽 禽 禽 来源不清 鸭 来源于疫区的鸟 2003/北美(New York)， 1/肺炎 2004/加拿大 2005/日本(Ibaraki) 2007/英国(Wales) 2007/香港 2004/埃及( Ismaillia) 2/结膜炎、ILI; 1名LPAI；1名HPAI 13/无临床症状，血清学诊断 1/结膜炎、ILI 1/ ILI 2/ ILI
LPAI H7N8、 H7N9（Korea） HPAI H7N3 （Pakistan） HPAI H7N3 LPAI H7N9 HPAI H7N7、 H7N3 、 H7N4
禽中暴发的H7
2006年前暴发的均为HPAI H7 欧洲：意大利、英国、德国、比利时、荷兰、丹麦、挪威、 捷克、西班牙、瑞典
近年来人感染禽流感病毒病例
H7N9病毒
亚洲, 7 欧洲, 5 共25株 均为LPAI 无感染人病例 美 洲, 13
亚洲：7株 均来自野禽 5株—韩国 2株—蒙古
H7N9的致病力和传播力
HPAI H7N3 HPAI H7N3
LPAI H7N9
LPAI H7N9
LPAI H7N9
Nose (white bars) , lung (black bars)
序列测定
PB2 PB1 PA HA NP NA MP NS
2个片段来源于H7N9 6个片段来源于H9N2
三株H7N9病毒为同一基因类型
序列特点
耐药性分析 对烷胺类药物是耐药的，即M2蛋白25-42位氨基酸发生S31N突变。
HA连接肽分析 HA蛋白339位连接肽由单个（PKGRGLFG）碱性氨基酸组成，根据既往研究， 具有这种序列特点的病毒对禽类呈低致病性。 受体结合位点及其它重要位点分析 Shanghai/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸属于禽源受体结合位点（为 QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸受体 结合位点（为LSG） PB2蛋白627位氨基酸为K，提示致病性增强。 NS1蛋白92位氨基酸为D，与禽流感病毒一致，而与人流感病毒不同。
病毒亚型 A/H7N7 病原来源 鸥 时间/国家 1980/美国 病例数/临床表现 3/结膜炎
A/H7N7
A/H5N1 A/H9N2 A/H9N2
鸭
禽 鸡 禽
1996/英国
1997/香港 1998/中国广东 1999/香港
1/结膜炎
18/ILI，肺炎 5/ ILI，肺炎 2/ILI
A/H7N2
A/H9N2 A/H5N1 A/H7N7 A/H5N1 A/H7N2(NY/107) A/H7N3 A/H5N2 A/H7Nபைடு நூலகம் A/H9N2 A/H10N7 A/H10N7
2010/悉尼(New South 7/上呼吸道感染症状、结膜炎
Wales)
HPAI
4/USA H7N7 1/USA H7N7 1/USA H7N7 1996 2002
89/ Netherlands H7N7 1/ Canada 1 died H7N3 2003 2004
2/ Mexico H7N3
人感染H7N9禽流感病毒病原学特点
及实验室检测要求
河南省疾病预防控制中心 2013年4月3日
病例1
病例2
病例3
既往禽H7Nx病毒简介
HPAI H7N3 LPAI H7N9
HPAI H7N7 、 H7N3、 H7N1 LPAI H7Nx、H7N2、 H7N3、H7N1、H7N9
LPAI H7N9
人感染H7N9禽流感病毒
实验室检测要求
标本采集、保存、运送与实验室检测
做好人员安排以及试剂、耗材准备；
参照近期将下发的《全国不明原因肺炎病例监测、 排查和管理方案（2013年）》和《人感染H7N9禽流 感标本采集及实验室检测策略》进行。 依托市级、省级流感监测网络实验室，开展核酸检 测和病毒分离工作。
2006 2007
1959
1977 19791/England 1/ USA 1980 7/ Italy 1/ Canada H7N7 H7N2 H7N3 H7N3 1/ USA H7N2
4/ Wales H7N2
LPAI
1/ Norfolk H7N3
H7感染人（>100人）
美国、英国、意大利、荷兰、加拿大
LPAI H7N9不需经过适应便可在小鼠体内有 效复制，且能在雪貂上下呼吸道有效复制。
LPAI H7N9在雪貂模型中不传播。
中国地区H7 AIV
A/Baer's pochard/HuNan/414/2010(H7N1) A/chicken/Hebei/1/2002(H7N2) A/duck/Guangdong/1/1996(H7N3) A/duck/Hubei/126/1985(H7N8) A/duck/Jiangxi/1742/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1760/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1814/03(H7N7) A/duck/Nanchang/1904/1992(H7N1) A/duck/Nanchang/1944/92(H7N1) A/duck/Zhejiang/10/2011(H7N3) A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3) A/duck/Zhejiang/2/2011(H7N3) A/magpie-robin/China/28710/93(H7)