[最新]测定唾液淀粉酶的最适ph值

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唾液淀粉酶最适PH的测定论文

唾液淀粉酶最适PH的测定论文

唾液淀粉酶最适pH的测定广西医科大学11级17班1组黄爱春黄燚燚程邦李定使摘要:本实验的目的是掌握测量pH对酶活力影响的基本原理和方法,了解pH 对酶活力的影响。

影响酶反应活力的因素很多,影响胞外酶的因素主要包括PH 值、温度和金属离子、抑制剂及其他小分子,以及酶浓度等因素。

在温度、酶浓度相同的条件下,酶的活力在最适pH处达到最大,远离则变小。

在底物过量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同的条件下,接近最适pH的反应体系中消耗淀粉的量最大,剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅,吸光度越小,利用分光光度计测出各管的吸光度后,取处于升高与降低趋势之间的较小吸光度范围对应的pH值即为唾液淀粉酶的最适pH。

关键词:淀粉酶、活性、温度、吸光度前言:生物体内一切化学反应,几乎都是在酶催化下进行的,只要有生命的地方,就有酶在起作用,生命不能离开酶而存在。

酶量与酶活性的改变都会引起代谢的异常乃至生命活动的停止。

由于酶的独特的催化功能,使它在工、农业和医疗卫生等领域具有重大实用意义。

酶的高效性和专一性,及其不需要在高温、强酸、强碱条件下作用的特点是普遍化学催化反应所无法比拟的。

其研究成果给催化理论、催化剂的设计、药物的设计和作用原理的了解、疾病的诊断和治疗以及遗传和变异等方面提供了理论的依据和新的概念。

正文:一、材料与方法仪器:吸量管(5mL,1mL),试管,试管架,小烧杯,722型分光光度计,恒温箱,吸耳球试剂:0.01mol/L碘液,0.2mol/L磷酸氢二钠,0.2mol/L磷酸二氢钠,淀粉溶液,唾液,蒸馏水方法:相同时间内,在温度、酶浓度相同、pH不同的条件下,酶的活度不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量碘液生成的颜色不同,通过测量吸光度,得出酶的最适pH范围。

实验步骤:1、缓冲液的配制:2、唾液淀粉酶的获取:先喝口蒸馏水,将口中食物残渣漱净,然后口中含一口水,做咀嚼运动2分钟即可.3、淀粉用量确定:4、唾液淀粉酶稀释倍数确定:5、最适pH确定以A660为纵坐标,pH为横坐标作图二、结果与讨论用量(ml)讨论:本实验中,当唾液淀粉酶的活性最大时,淀粉被分解的最多,剩余的底物的量最少,A值最小,过酸或者过碱均会影响酶的活性,使之分解的底物减少,A值增大。

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定【摘要】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、pH值等因素影响。

温度一定时,酶活力最高时的pH值为该酶在该温度的最适pH。

在不同pH值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶的最适pH值。

在不同pH条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘液反应呈现颜色反应,通过对颜色的观察和分光光度计测量产物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀粉酶的最适pH。

Enzymes are highly efficient catalytic ability of biological macromolecular material, phase at the same time, initial concentration of enzyme catalytic activity was mainly affected by factors such as temperature, pH value. At a certain temperature, the highest enzyme activity of enzyme in the pH value of the temperature of the optimum pH.Under different pH, by measuring the degree of hydrolysis enzyme substrates, determination of salivary amylase optimum pH value. Under the condition of different pH, starch is saliva amylase hydrolysis, and iodine liquid reaction to colors, through the observation of the color and the size of the spectrophotometer absorbance value measurement products, shows the reaction degree of substrates, which can determine the optimal pH of salivary amylase.【关键词】唾液淀粉酶、最适pH、碘-淀粉比色法【引言】新陈代谢是生命活动的基础。

唾液淀粉酶最适pH值的测定

唾液淀粉酶最适pH值的测定

唾液淀粉酶最适pH值的测定作者:黎海燕黎唐燕何会姣吴妙凤摘要:目的:(1)掌握测量pH对酶活力影响的基本原理和方法,了解pH对酶活力的影响,把酶学知识应用于临床诊断与应用治疗(2)熟悉不同pH值缓冲溶液的配制和分光光度计的使用.方法:通过唾液淀粉酶在不同pH环境中水解淀粉,测出未被水解的淀粉与碘液结合成的蓝色复合物的分光光度值,根据实验数据判断酶的最适pH。

因为在温度、酶浓度相同的条件下,酶的活力在最适pH处达到最大,远离则变小。

在底物过量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同的条件下,接近最适pH的反应体系中消耗淀粉的量最大,剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅,吸光度越小,利用分光光度计测出各管的吸光度后,取处于升高与降低趋势之间的较小吸光度范围对应的pH值即为唾液淀粉酶的最适pH。

结果:在ph值6.0~8.0内范围变化,并且随着ph的增大而先减少后增大,ph=6.6左右,吸光值最低,所以唾液淀粉酶最适ph值约为6.6。

关键词唾液淀粉酶、活性、PH、吸光度前言酶学与医学的关系密切。

人体的许多疾病和酶都密切相关。

酶分子中的许多极性基团,在不同的pH条件下解离状态不同,其所带电荷的种类和数量也各不相同,酶活性中心的某些必需基团往往仅在某一解离状态时才容易同底物结合或具有最大的催化活性。

此外,pH的改变还可以引起酶活性中心的构象改变,因此pH的改变对酶的催化作用影响很大。

人的唾液中99%是水,有机物主要是唾液淀粉酶、粘多糖、粘蛋白及溶菌酶等,无机物有钠、钾、钙、氯和硫氰离子等。

唾液中含有的一种有催化活性的蛋白质,可以催化淀粉水分解为麦芽糖。

唾液淀粉酶发挥作用的最适pH值在中性范围内,唾液中的氯和硫氰酸盐对此酶有激活作用。

食物进入胃后,唾液淀粉酶还可继续使用一段时间,直至胃内容物变为pH值约为4.3~4.8的酸性反应为止。

正文实验原理:ph的改变对酶的催化影响很大,酶催化活性最高时,反应体系的PH值称为最适PH值。

唾液淀粉酶最适pH值

唾液淀粉酶最适pH值

陆绍龙广西医科大学七年制临床医学10级4班摘要:目的:1)掌握测定唾液淀粉酶最适pH值的测定方法以及原理;2)熟悉不同pH值缓冲溶液的配制和分光光度计的使用;方法:通过唾液淀粉酶在不同pH环境中水解淀粉,测出未被水解的淀粉与碘液结合成的蓝色复合物的分光光度值,根据实验数据判断酶的最适pH;结果:当pH=时,唾液淀粉酶的活性最高。

关键词:唾液淀粉酶 pH 分光光度计前言:酶学与医学的关系密切。

人体的许多疾病和酶都密切相关。

酶分子中的许多极性基团,在不同的pH条件下解离状态不同,其所带电荷的种类和数量也各不相同,酶活性中心的某些必需基团往往仅在某一解离状态时才容易同底物结合或具有最大的催化活性。

此外,pH的改变还可以引起酶活性中心的构象改变,因此pH的改变对酶的催化作用影响很大。

人的唾液中99%是水,有机物主要是唾液淀粉酶、粘多糖、粘蛋白及溶菌酶等,无机物有钠、钾、钙、氯和硫氰离子等。

唾液中含有的一种有催化活性的蛋白质,可以催化淀粉水分解为麦芽糖。

唾液淀粉酶发挥作用的最适pH值在中性范围内,唾液中的氯和硫氰酸盐对此酶有激活作用。

食物进入胃后,唾液淀粉酶还可继续使用一段时间,直至胃内容物变为pH值约为~的酸性反应为止。

正文:1.材料与方法:仪器:吸量管(5mL,1mL),试管若干,试管架,小烧杯,洗耳球,721G-722G 分光光度计,恒温箱(含温度计),一次性纸杯,pH试纸。

试剂:L淀粉,L Na2HPO4溶液,L NaH2PO4 溶液,蒸馏水,唾液,碘液。

2.操作步骤1)1. 不同pH缓冲液配制按下表加样,最后加蒸馏水稀释至10ml。

pHL Na2HPO4溶液(mL)L NaH2PO4 溶液(mL)注:应用pH值试纸来确定所配溶液pH。

2)唾液的获取先漱口1~2次,然后含一大口水约1min,期间做咀嚼运动,然后收集至杯子中。

3)淀粉用量的确定123空白缓冲液L淀粉——唾液(稀释10倍)混匀,37℃水浴,然后向每管加2滴碘液O6H2混匀,观察现象,并选择适中一支,记录其用量4)酶稀释液的倍数确定稀释倍数51015202530酶液(mL)1O(mL)4H2稀释倍数51015202530空白缓冲液(mL)L淀粉由第3步操作确定唾液——混匀,37℃水浴,然后向每管加2滴碘液HO6666666 2混匀,观察现象,并选择适中一支,记录其稀释倍数5)最适pH值的确定pHpH缓冲液某倍数唾液(由由第3步操作确定第四步确定)混匀,37℃水浴,然后向每管加2滴碘液O6666666H2混匀,37℃水浴,然后向每管加2滴碘液A660以蒸馏水调零,用分光光度计测出各试管中溶液的A值,记录好数据。

关于唾液淀粉酶的最适PH

关于唾液淀粉酶的最适PH

关于唾液淀粉酶的最适PH 姓名邱远学号201150716摘要:为了探究唾液淀粉酶的最适宜PH值,通过配置不同PH值的基质液作为酶与底物反应的环境,再加碘液与未反应的底物作用成色,用分光仪测定溶液吸光度来比较底物的剩余量,以此推断出唾液淀粉酶的最适宜PH的范围。

关键词:唾液淀粉酶最适PH值前言:作为一名医学生,未来的医生,通过实验来学习获得科研的基础知识,熟悉一些基本原则和操作,更是为了完成老师布置的作业。

此次实验具有重要意义。

实验原理:淀粉经样品中淀粉酶的水解,生成糊精和麦芽糖。

在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物。

其颜色的深浅与空白管颜色的差值和淀粉酶的活力成正比。

即颜色越浅,吸光度越低,淀粉酶的活力越高。

操作步骤:一:基质液的配置:1:取十一支规格相同的干净试管,分别编号1到10.置于试管架的第一排。

2:按下表加入试剂。

二:酶液的配置:1:实验者用蒸馏水漱口,洗去残留食物,然后含一口蒸馏水在口中三分钟,时间到后将唾液吐在一个干净的纸杯。

2:取两个干净烧杯,分别标注为1:5和1:10.三:反应进行。

1:去20支规格相同的试管,平均分成两组,分别编号1到20 其中1到10号试管加入1:5号烧杯的酶液置于试管架第三排11到20号试管加入1:10号烧杯的酶液置于试管架第二排。

2.按下表在各试管中加入试剂。

3:因为用肉眼感觉各试管区别不是很明显,故在每一只试管中注入2ml的蒸馏水。

4:混匀后用分光度法在660nm波长下用蒸馏水调零,测量各管的A660。

测得的读数已并入上表。

绘制成图:四讨论:1:总体来看,唾液淀粉酶在偏酸性的环境中活性较高。

2:从1到10号试管的吸光度都接近或低于相对应的同样PH值下的11到20号试管的吸光度。

说明其他条件相同时,酶的浓度越高,对底物的消耗越多。

3:从1:5组的数据来看,4号试管的吸光度值最小,4号试管对应的PH值是6.6,推出唾液淀粉酶的最适ph值在6.5——6.7之间。

唾液淀粉酶最适pH值的测定

唾液淀粉酶最适pH值的测定
【参考文献】 [1]许冰,袁 媛,赵 文 献 .p H 值 对 酶活 性影响 的实验 观 察 [J].临床合理用药,2010.(10) [2]吴耀生.医学生物化学与分子生物学实验指南[M].北 京:人民卫生出版社,2007 [3]尚渤程,黎一苇.人体常见pH值[J].生物学教学,2 0 0 9 (12)
(责编 卢建龙)
118 广西教育 2015.2
理科园地·教学创新
唾液淀粉酶最适pH值的测定
□清华大学附属中学14班 唐睿谦
【摘 要】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物 浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、pH值等因素影响。温度 一定时,酶活力最高时的pH值为该酶在该温度的最适pH。在不 同pH值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶 的最适pH值。在不同pH条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘 液 反 应呈现 颜色反 应,通 过 对颜色的观 察和分光 光 度计测量产 物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀 粉酶的最适pH。
0.1
唾液(稀释 10 倍)
0.1
H2O
5.9
2
3
0.9
0.9
0.2
0.3
0.1
0.1
5.8
5.7
空白对照 0.9 — 0.1 6
混匀,37℃水浴7.5 min,然后向每管加2滴碘液。
混匀,观察现象看出,0.3 mL 2.5 g/L淀粉溶液颜色反应
最浅,选择该管做下一步实验。
(四)酶液稀释倍数的确定
淀粉经唾液中的淀粉酶水解,生成糊精和麦芽糖,在底物 过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝 色复合物,其颜色的深浅与空白管颜色的差值和淀粉酶的活力 成正比。用单位时间剩余淀粉量与碘反应产生的蓝色在660 nm 处的吸 光 度值 来 表 示淀 粉 酶的 活性。在 温 度、酶浓度相同的情 况下,酶活力在最适pH的情况下达到最大。

唾液淀粉酶最适pH值测定

唾液淀粉酶最适pH值测定

唾液淀粉酶最适pH值测定广西医科大学2012级8班3组崖晓怡(201250424)路海燕(201250426)实验原理:淀粉经唾液中淀粉酶的水解,生成糊精和麦芽糖。

在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物唾液淀粉酶最适pH为6.8,但在磷酸缓冲溶液中,其最适pH为6.4—6.6,而在乙酸缓冲溶液中则为5.6。

在底物过量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同的条件下,接近最适pH 的反应体系中消耗淀粉的量最大,剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅,吸光度越小,利用分光光度计测出各管的吸光度后,取处于升高与降低趋势之间的较小吸光度范围对应的pH 值即为唾液淀粉酶的最适pH。

一、材料与方法仪器:吸量管(5mL,1mL),试管,试管架,小烧杯,722 型分光光度计,恒温箱,吸耳球试剂:0.01mol/L 碘液,0.2mol/L 磷酸氢二钠,0.2mol/L 磷酸二氢钠,淀粉溶液,唾液,蒸馏水二、方法:相同时间内,在温度、酶浓度相同、pH 不同的条件下,酶的活度不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量碘液生成的颜色不同,通过在660nm测量吸光度,得出酶的最适pH 范围。

操作步骤:1、唾液的获取:蒸馏水漱口后在口中含蒸馏水,适宜时间后将蒸馏水连同唾液一同放置于事先准备好的容器中即可,在实验过程中应注意酶的失活,为了防止此现象发生应将此液体置于冰水中冷却。

2、不同pH 缓冲液配制:根据下表配置各个pH 值的缓冲溶液各10ml 单位:ml3、淀粉用量的确定:单位:ml1 2 3 4 PH7.0缓冲液0.90.90.90.92.5g/L 淀粉 0.1 0.2 0.3 -释10倍酶液0.10.1 0.1 0.137℃水浴7.5min试管 1 2 3 4 5 6PH6.26.4 6.6 6.87.0 7.20.2mol/L42HPO Na0.925 1.325 1.875 2.450 3.050 3.6000.2mol/L42PO NaH4.075 3.675 3.125 2.550 1.950 1.400碘液2滴为了更好观察颜色变化,可以加入适量蒸馏水使总体积相同。

唾液淀粉酶活性观察实验报告

唾液淀粉酶活性观察实验报告

一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生理功能及其在人体消化过程中的作用。

2. 掌握观察唾液淀粉酶活性的实验方法。

3. 分析影响唾液淀粉酶活性的因素,如温度、pH值等。

二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,具有催化淀粉水解为麦芽糖的作用。

本实验通过观察唾液淀粉酶催化淀粉水解的过程,分析影响酶活性的因素。

三、实验材料与试剂1. 实验材料:唾液、淀粉溶液、碘液、蒸馏水、试管、移液器等。

2. 实验试剂:0.5%淀粉溶液、稀碘溶液、NaCl溶液、醋酸溶液、NaOH溶液等。

四、实验步骤1. 将唾液用蒸馏水稀释10倍,混匀。

2. 取两支试管,分别加入0.5%淀粉溶液和唾液稀释液各2ml。

3. 将试管放入37℃水浴中,保温5分钟。

4. 向两支试管中分别加入2滴碘液,观察溶液颜色变化。

5. 分别设置不同温度(如25℃、37℃、50℃、75℃)的实验组,重复步骤2-4。

6. 分别设置不同pH值(如4、6、7、8、10)的实验组,重复步骤2-4。

7. 分别设置不同浓度的NaCl溶液、醋酸溶液、NaOH溶液的实验组,重复步骤2-4。

五、实验结果与分析1. 在37℃水浴中,唾液淀粉酶催化淀粉水解,溶液颜色由蓝色变为无色,表明唾液淀粉酶具有活性。

2. 在不同温度下,唾液淀粉酶活性随温度升高而增强,在37℃时活性最强,超过此温度后活性逐渐降低。

3. 在不同pH值下,唾液淀粉酶活性在pH值为6.8时最强,过高或过低的pH值均会降低酶活性。

4. 在不同浓度的NaCl溶液中,唾液淀粉酶活性随NaCl浓度增加而增强,但超过一定浓度后活性不再增加。

5. 在不同浓度的醋酸溶液和NaOH溶液中,唾液淀粉酶活性均受到抑制,且抑制程度随浓度增加而增强。

六、实验结论1. 唾液淀粉酶具有催化淀粉水解为麦芽糖的生理功能。

2. 温度、pH值、NaCl浓度等均会影响唾液淀粉酶的活性。

3. 唾液淀粉酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.8。

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验(设计性实验)

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验(设计性实验)

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验实验目的:1掌握设计性实验的基本思路,并完成设计报告2.掌握唾液淀粉酶最适PH的测定原理和方法。

3.熟悉影响酶促反应速度的因素。

实验原理:1酶促反应速度受到许多因素的影响,如温度、PH、激动剂和抑制剂等。

上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响,可用定性或定量的反应来观察。

利用碘与淀粉机器不同程度纾解产物反应的颜色,来衡量酶促反应的速度的快慢。

蓝色—紫红色—黄色,颜色由蓝变黄,表示酶促反应速度由慢到快。

此为定性观察。

2.进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。

由于在被水解的程度也不一样。

当唾液淀粉酶不能将完全水解时,淀粉遇碘呈蓝色,吸收波长位于660nm处。

不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同,吸光度值也不同。

因此,通过测量660nm处的吸光度值,可以了解PH对酶促反应的影响,吸光度最小的溶液其PH即为唾液淀粉酶的最适PH。

仪器材料和试剂药品:仪器材料:方盘,试管架,中试管,毛刷,吸耳球,玻璃铅笔,小烧杯,白瓷板,坐标纸,漱口杯。

0.1ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml刻度吸管,胶头滴管,37 C恒温水浴箱,分光光度计,电磁炉。

试剂药品: 0.02%淀粉溶液. 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L磷酸氢二钠溶液碘液;称取碘1g,碘酸钾2g,溶于300ml蒸馏水中。

实验步骤:1、缓冲液的配置:根据下表[5],配置各个pH值的缓冲溶液各10mlpH 值6.0 6.2 6.4 6.6 6.87.0 7.2 7.4 7.6 7.88.0磷酸氢二钠 12.3 18.5 26.5 37.5 49.0 61.0 72.0 81.0 87.0 91.5 94.7磷酸二氢钠 87.7 81.5 73.5 62.5 51.0 39.0 28.0 19.0 13.0 8.5 5.32、唾液的获取:[6]a.吐取法:蒸馏水漱口,然后用舌尖抵住上额或下额齿根后,微低头.轻启双唇,将下嘴唇搁在烧杯边缘,让唾液自然流入试管中.b.实验者先把痰咳尽,用蒸馏水漱口,清除口腔内的食物残渣,再在口腔内含蒸馏水,并作漱口运动,3分钟后吐入垫有两层经润湿过处理的脱脂纱布漏斗里,过滤于小烧杯备用。

【精品】探索性实验唾液淀粉酶的最适ph值测定

【精品】探索性实验唾液淀粉酶的最适ph值测定

【精品】探索性实验唾液淀粉酶的最适ph值测定
对唾液淀粉酶最适pH值的研究,关系到唾液淀粉酶在生理功能中的表现及应用。


了探索唾液淀粉酶的最适pH值,本实验采取技术指标分析及多步法分析方法来研究了唾
液淀粉酶最适pH值的研究。

实验设计:本实验材料采用功能性实验唾液淀粉酶标准曲线,采用同一批次的淀粉酶,pH从5-9步骤改变,每步间隔为0.2,试验有五轮重复,每轮实验结果取平均值。

实验方法:实验中采用朗恩公司出品的D-1801流变仪通过电位控制(逆步运动),
在各不同pH值下,用圆柱形测试模块分析唾液淀粉酶的流变特性,再用电脑处理实验数
据以确定参数得出结论。

实验结果:实验结果表明,唾液淀粉酶在室温25℃,PH值介于6.5~7.5的环境中有
较好的活性,浓度在0.10 g/ml时产生的最大应力值为495.2Pa,可得出结论,唾液淀粉
酶的最适pH值为6.5~7.5。

结论:唾液淀粉酶在pH在6.5~7.5时可促进其最佳活性,此范围内可有效表达唾液
淀粉酶的最佳生理功能。

提示相关实验室合理配置pH值,以便有效调控实验唾液淀粉酶
的环境及机制。

唾液淀粉酶最适ph值的实验步骤

唾液淀粉酶最适ph值的实验步骤

唾液淀粉酶最适pH值的实验步骤(张晴)1.唾液的获取蒸馏水漱口1~2次,然后含一大口水约1min,期间做咀嚼运动,然后收集至杯子中。

2.不同pH缓冲液的配制(用量:ml)———————————————————————————————————————pH 5.8 6.0 6.2 6 .4 6.6 6.8 7.0 7.2 Na2HPO4 0.40 0.62 0.93 1.33 1.88 2.45 3.05 3.60 NaH2PO4 4.60 4.39 4.08 3.68 3.13 2.55 1.95 1.40H2O 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 ———————————————————————————————————————3.淀粉用量的确定(用量:ml)———————————————————————————————————————试剂 1 2 3 4 空白pH=7.0缓冲液0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 2.5g/L淀粉0.3 0.4 0.5 0.6 0唾液(稀释10倍)0.1 0.1 0.1 0.1 0.1混匀,37 ℃水浴7.5min,然后向每管加2滴碘液。

———————————————————————————————————————H2O 5.7 5.6 5.5 5.4 6.0———————————————————————————————————————混匀,观察现象,并选择适颜色最浅的一支,记录其中用量。

(若3号试管颜色最浅)4.酶液稀释倍数的确定(用量:ml)———————————————————————————————————————试剂 1 2 3 4 5稀释倍数 5 10 15 20 25酶液 1.0 0.5 0.4 0.25 0.2H2O 4.0 4.5 5.6 4.75 4.8 ———————————————————————————————————————另取试管各取配好的稀释液0.1ml。

唾液淀粉酶最适ph值测定

唾液淀粉酶最适ph值测定

唾液淀粉酶最适ph值测定
唾液淀粉酶最适pH值测定通常是通过测定唾液淀粉酶在不同pH值下的反应速率来确定。

测定的方法一般是使用淀粉为底物,将唾液淀粉酶与淀粉混合,然后在不同pH值的缓冲溶液中进行反应,通过测定反应物的吸光度变化或淀粉的降解程度来测定酶的活性。

根据反应速率或反应物的变化,可以确定唾液淀粉酶在不同pH值下的最适活性。

唾液淀粉酶的最适pH值通常在中性到弱碱性范围内,一般在pH 6.7-7.0左右最为适宜。

根据不同实验条件和唾液淀粉酶的来源,最适pH值可能会有轻微差异。

因此,在具体实验中可以在pH值6.0-8.0的范围内进行测定,以确定唾液淀粉酶最适活性的pH值。

怎么测定唾液淀粉酶的最适ph

怎么测定唾液淀粉酶的最适ph

怎么测定唾液淀粉酶的最适ph唾液淀粉酶(pancreaticamylase)是由唾液腺分泌的一种水解酶,而淀粉经唾液中淀粉酶的水解,生成糊精和麦芽糖。

而知道唾液淀粉酶的最适ph对于自身有好处,那么唾液淀粉酶的最适ph是多少呢,又应该怎么测定唾液淀粉酶的最适ph?在底物过量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同的条件下,接近最适pH 的反应体系中消耗淀粉的量最大,剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅,吸光度越小,利用分光光度计测出各管的吸光度后,取处于升高与降低趋势之间的较小吸光度范围对应的pH 值即为唾液淀粉酶的最适 pH。

一、材料与方法仪器:吸量管(5mL,1mL) ,试管,试管架,小烧杯, 722 型分光光度计,恒温箱,吸耳球试剂:0.01mol/L 碘液,0.2mol/L 磷酸氢二钠,0.2mol/L 磷酸二氢钠,淀粉溶液,唾液,蒸馏水二、方法:相同时间内,在温度、酶浓度相同、pH 不同的条件下,酶的活度不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量碘液生成的颜色不同,通过在660nm测量吸光度,得出酶的最适 pH 范围。

操作步骤:1、唾液的获取:蒸馏水漱口后在口中含蒸馏水,适宜时间后将蒸馏水连同唾液一同放置于事先准备好的容器中即可,在实验过程中应注意酶的失活,为了防止此现象发生应将此液体置于冰水中冷却。

2、不同pH缓冲液配制:根据下表配置各个pH值的缓冲溶液各10ml3、淀粉用量的确定(为了更好观察颜色变化,可以加入适量蒸馏水使总体积相同。

混匀,观察现象,并选择颜色变化适中一支,记录其用量。

)4、酶液稀释倍数确定(为了更好观察颜色变化,可以加入适量蒸馏水使总体积相同,混匀,观察现象,并选择适中一支,记录其稀释倍数。

)5、最适pH确定(蒸馏水调零,测定660nm处吸光度A,最后以A为纵坐标,pH为横坐标作图,取曲线最低点对应的pH值,即为唾液淀粉酶的最适pH值。

)从上述的实验中或许可以得出6.8为曲线最低点对应的pH值,即为唾液淀粉酶的最适pH值。

实验五 唾液淀粉酶的最适PH测定

实验五  唾液淀粉酶的最适PH测定

山东大学实验报告2011年4月6日姓名张行润系年级2009级生科4班学号200900140177 同组者于潜科目生物化学实验题目唾液淀粉酶的最适PH测定仪器编号105一.实验目的1、了解pH对酶活力的影响2、了解什么叫最适pH,掌握测量pH对酶活力影响的基本原理和方法二.实验原理影响酶反应活力的因素很多,影响胞外酶的因素主要包括PH值、温度和金属离子、抑制剂及其他小分子,以及酶浓度等因素。

PH值对酶反应活力的影响:1、酸或碱可以使酶的空间结构破坏,引起酶的活力丧失,这种丧失活力可以是可逆的或者是不可逆的,对可逆的来说,改变PH值后可使活力恢复。

2、酸或碱影响酶的活性部位催化基团的离解状态,使得底物不能分解成产物。

3、酸或碱影响酶的活性部位结合基团的离解状态,使得底物不能和它结合。

4、酸或碱影响底物的离解状态,或使底物不能和酶结合。

由于上述种种原因,各种酶的作用都有一个最适合的PH值范围。

最适pH 酶的催化活性与pH环境有密切关系,通常各种酶只在一定pH范围内才具有活性,酶活力最高时的pH,称为酶的最适pH。

高于或低于此pH时酶的活性逐渐降低。

用酶活力对PH值作图,往往是钟罩形曲线。

最适合的PH值还随着底物浓度、温度和其他条件的变化而变化,因此确定最适合的PH值应在所实验的条件下测得。

需要注意的是:1.酶的最适pH不是一个特征性常数。

不同种类的酶其最适合的PH值范围不同;2.同一种酶,来源不同,其最适合的PH值也有差异;3.同一种酶由于作用底物不同,酶最适合的PH值也不同;4.同一种酶作用于同一底物,随着温度等条件变化,最适合的PH值也有变化。

如唾液淀粉酶最适pH为6.8,但在磷酸缓冲溶液中,其最适pH为6.4—6.6,而在乙酸缓冲溶液中则为5.6。

总之,不同的酶在不同的PH值范围不仅稳定性不同,而且活力也不同,在最适合的PH值内活力最强,这是酶的一个重要特征,要仔细控制。

三.实验器材电热恒温水浴锅,旋涡混合仪,电炉,电子秤,试管10支,试管架,100mL容量瓶,小烧杯,移液管(1mL,2mL,5mL,10mL),三角瓶7个,胶头滴管,玻璃棒,白瓷板,洗耳球四.实验材料1.0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液100ml(新鲜配制):称取0.30gNaCl溶于80mL水中,电炉加热煮沸,加入0.50g淀粉溶解至澄清透明,冷却,定容至100mL2.0.2mol/L Na2HPO4溶液 200ml3.0.1mol/L柠檬酸溶液 100ml4.不同浓度的唾液淀粉酶(1:100,1:200,1:400···)5.碘液五.实验步骤1、不同PH缓冲液的配制:试剂PH值5.46.0 6.4 6.87.27.68.00.2mol/L Na2HPO4溶液/mL 11.15 12.63 13.85 30.90 17.39 18.73 19.450.1mol/L柠檬酸溶液/mL 8.5 7.37 6.15 9.10 2.61 1.27 0.55总体积/mL 20.0 20.0 20.0 40.0 20.0 20.0 20.02、唾液的获取:蒸馏水漱口后在口中含蒸馏水,适宜时间后将蒸馏水连同唾液一同放置于事先准备好的容器中即可,在实验过程中应注意酶的失活,为了防止此现象发生应将此液体置于冰水中冷却;3、确定最佳保温时间:取3支洁净试管,分别加入0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液2 mL,然后加入PH6.8的 Na2HPO4—柠檬酸缓冲溶液3 mL,分别加入稀释不同倍数的唾液淀粉酶各2 mL,充分摇匀后,放入37℃水浴中保温并计时,每隔1min用滴管取1滴混合液于点滴板上,加1滴碘液,检验淀粉水解程度,为橙黄色时,为水解完全,为进一步确定保温时间,应加1滴碘液至试管中,若为橙黄色时表示反应完全,记录所需保温时间。

探究人唾液淀粉酶的最适PH(碘-淀粉比色法)

探究人唾液淀粉酶的最适PH(碘-淀粉比色法)

探究人唾液淀粉酶的最适PH(碘-淀粉比色法)欧奇灿学号:201680075 临床医学“5+3”2班3组摘要:唾液淀粉酶是由唾液腺分泌的一种水解酶,可作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖原等α-1,4-葡聚糖等,属于α-淀粉酶的一种。

酶学与医学联系紧密,测定酶的最适pH,有利于我们把酶学知识运用于临床诊断与应用治疗。

本实验尝试用碘-淀粉比色法测定唾液淀粉酶最适pH,加深对酶学知识的理解。

关键词:缓冲液;唾液淀粉酶;分光光度计前言:人体内各种代谢反应,都离不开酶的催化作用,酶量的改变以及酶活性的改变都会引起人体化学反应的异常或紊乱,因此酶在人体内是否能发挥正常活性关系着人体内环境的稳定。

而pH是影响酶活性的一个重要因素,因此,通过探究实验探究人唾液淀粉酶的最适pH,不仅可以检测我们的生物化学实验操作能力和探究能力,也可以加深我们对酶学知识的理解。

正文:【实验原理】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,其化学结构上具有许多极性基团,在不同酸碱环境中,这些基团的解离状态不同,所带电荷也不同。

只有当酶处于一定的解离状态,才能和作用物结合。

因此,溶液的pH对酶活性影响很大。

若其他条件不变,酶只有在一定的pH范围内才能表现出催化活性。

在某pH时,酶催化活性最大,此pH称为酶作用的最适pH。

当溶液的pH偏离最适pH时,酶活性降低,甚至失活。

淀粉经唾液中淀粉酶的水解,生成糊精和麦芽糖。

在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其颜色深浅与空白管颜色的差值和唾液淀粉酶的活力成正比。

在底物过量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同、pH不同的条件下,越接近最适 pH的反应体系中酶活性越高,消耗淀粉的量越大,剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅,吸光度越小。

本实验利用分光光度计测出各管的吸光度后,取处于降低与升高趋势之间的较小吸光度范围对应的 pH 值即为唾液淀粉酶的最适pH。

【仪器与试剂】仪器材料:试管架,试管,烧杯,一次性纸杯,移液枪,刻度吸管,洗耳球,胶头滴管,pH试纸,恒温水浴箱,分光光度计试剂药品:2.5g/L淀粉溶液,碘液,0.2mol/L NaH2PO4、0.2mol/LNa2HPO4,唾液,纯净水【实验步骤】1、唾液的获取纯净水先漱口1~2次,然后含一大口水约2分钟,其间做咀嚼运动,然后将水和唾液一同收集至烧杯中。

唾液淀粉酶PH测定方法及论文

唾液淀粉酶PH测定方法及论文

唾液淀粉酶的最适pH值测定摘要:目的:1、掌握测量pH对酶活力影响的基本原理和方法。

2、熟悉缓冲溶液的配置。

3、掌握分光光度计的正确使用方法。

原理:1、pH的改变对酶的催化影响很大,酶催化活性最高时,反应体系的PH值称为最适PH值2、淀粉经唾液淀粉酶水解生成糊精和麦芽糖。

在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物。

方法:碘液与淀粉的不同程度水解的产物反应呈不同颜色,利用朗伯—比尔定律,用分光光度计测量出各溶液在660nm处地吸光度A,从而间接测出唾液淀粉酶的最适值pH。

结果:pH=6.8左右,吸光度值最低。

pH=6.8左右,唾液淀粉酶的活性最大关键词:唾液淀粉酶 pH 吸光度正文一、前言唾液由三对大唾液腺(下颌腺、肋腺和舌下腺)分泌的液体和口腔壁上许多小粘液腺分泌的粘液,里面含有唾液淀粉酶。

唾液中含有的一种有催化活性的蛋白质,可以催化淀粉水分解为麦芽糖。

生物体内一切化学反应,几乎都是在酶催化下进行的,只要有生命的地方,就有酶在起作用,生命不能离开酶而存在。

酶量与酶活性的改变都会引起代谢的异常乃至生命活动的停止。

二、材料和方法仪器:吸量管,试管,试管架,小烧杯,722型分光光度计,恒温箱吸耳球试剂:碘液、0.2mol/L磷酸二氢钠、0.2mol/L磷酸氢二钠、淀粉溶液、唾液、蒸馏水方法:方法相同时间内,在温度、酶浓度相同、pH不同的条件下,酶的活度不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量碘液生成的颜色不同,通过测量吸光度,得出酶的最适pH范围。

实验步骤:1、缓冲液的配置:根据下表1,取10支试管进行编号1-10,配置各个pH值的缓冲溶液各10ml,PH表1 用量(ml)编号 1 2 3 4 5PH 6.0 6.2 6.4 6.6 6.80.2mol/L0.62 0.93 1.33 1.88 2.45 NaHPO40.2mol/L4.38 4.07 3.67 3.12 2.55 NaH2PO4蒸馏水 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00编号 6 7 8 9 10PH 7.0 7.2 7.4 7.6 7.80.2mol/L3.05 3.604.05 4.35 4.58 NaHPO40.2mol/L1.95 1.40 0.95 0.65 0.42 NaH2PO4蒸馏水 5.00 5.00 5.00 5.00 5.002、唾液的获取:[2]吐取法:蒸馏水漱口,然后用舌尖抵住上额或下额齿根后,微低头.轻启双唇,将下嘴唇搁在烧杯边缘,让唾液自然流入试管中.3、唾液的稀释:取8支试管,分别编上号1~8用量(ml)管号 1 2 3 4 5 6 7 8唾液1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00蒸馏水 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.004、唾液稀释倍数的选取另取8支试管,分别编上1~8号,各取上述稀释的唾液各1ml,分别加入相应编号的试管里,向8支试管内同时加入1ml的0.02%的淀粉溶液,振荡混匀后放入37 C恒温水浴5分钟后取出,滴加1~2滴碘液,振荡混匀,观察颜色,选取颜色变化适中的一支,记录稀释倍数。

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定【摘要】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、pH值等因素影响。

温度一定时,酶活力最高时的pH值为该酶在该温度的最适pH。

在不同pH值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶的最适pH值。

在不同pH条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘液反应呈现颜色反应,通过对颜色的观察和分光光度计测量产物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀粉酶的最适pH。

Enzymes are highly efficient catalytic ability of biological macromolecular material, phase at the same time, initial concentration of enzyme catalytic activity was mainly affected by factors such as temperature, pH value. At a certain temperature, the highest enzyme activity of enzyme in the pH value of the temperature of the optimum pH.Under different pH, by measuring the degree of hydrolysis enzyme substrates, determination of salivary amylase optimum pH value. Under the condition of different pH, starch is saliva amylase hydrolysis, and iodine liquid reaction to colors, through the observation of the color and the size of the spectrophotometer absorbance value measurement products, shows the reaction degree of substrates, which can determine the optimal pH of salivary amylase.【关键词】唾液淀粉酶、最适pH、碘-淀粉比色法【引言】新陈代谢是生命活动的基础。

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[最新]测定唾液淀粉酶的最适ph值测定唾液淀粉酶的最适PH值
制作人:叶小晴学号:201140095 班组:15-4 学院:护理学院
摘要:酶催化活性最大时相应的环境PH称为酶促反应的最适PH值。

虽然不同酶的最适PH值各不相同,但大多数酶的最适PH值接近中性,本论文主要在一定浓度、温度等条件下研究唾液淀粉酶的最适PH值,从而知道唾液淀粉酶的最适PH 值,进而了解影响酶的活性的因素。

关键词:唾液淀粉酶、最适PH值、活性前言:生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质或核酸,酶是机体内最重要的生物催化剂。

在不同PH条件下,酶分子的许多极性基团的解离状态不同,受到PH变化的影响,从而影响酶对它们的亲和力。

PH还会影响酶的活性中心的空间构象,从而影响酶的活性,因而PH的改变对酶的催化作用影响很大。

材料与方法:
1、材料:唾液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水、温水、
试管、试管架、洗耳球、烧杯、胶头滴管、水浴箱、分光光度计、吸量管、坐标纸
2、方法:(1)缓冲溶液的配置:根据各个PH值的缓冲溶液(用量:ml)表
1:
PH5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0

磷酸0.40 0.62 0.93 1.33 1.88 2.45 3.05 3.60 4.05 4.35 4.58 4.74 氢二

磷酸4.60 4.39 4.08 3.68 3.13 2.55 1.95 1.40 0.95 0.65 0.43 0.27 二氢

蒸馏5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 水
(2)唾液的获取:温的水漱口,将蒸馏水含于口中2min后吐于烧杯中,取5ml
唾液20ml水配成1/5的唾液,从中取5ml的1/5的唾液再加入10ml水配成1/10
的唾液。

(3)测量PH:取12支管,分别标上1~12,按下表操作:
管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1/50.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
唾液
淀粉0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
溶液
0.5ml5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0
缓冲
溶液
PH
蒸馏3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0

表2:
管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1/100.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 唾液
淀粉0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 溶液
0.5ml5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 缓冲
溶液
PH
蒸馏3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 水
3、分别加入两滴碘液
4、水浴加热
5、测量吸光度
6、作标准曲线图
本实验中,当唾液淀粉酶的活性最大时,淀粉被分解得最大,剩余的底物最少.A 值最小,过酸或过碱均会抑制酶的活性,使之分解的底物减少,A值增大。

由所作的曲线可知,唾液淀粉酶的最适PH值为6.6。

当PH<6.6时,唾液淀粉酶的活性随PH值的增大而增大,当PH=6.6时,唾液淀粉酶的活性达到最大,当PH>6.6时,唾液淀粉酶的活性随PH值的增大而减小。

参考文献:《分子酶学》陈惠黎李文杰编著人民卫生出版社
《酶与酶工程及其应用》孙君社主编化学工业出版社
《酶学》郭勇郑穗平编著华南理工大学出版社
《医用生物化学》陈诗书孔良曼章有章主编上海医科大学出版社
《生物化学》高国全主编人民卫生出版社。

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