【课件】岛津紫外、可见、近红外分光光度计新人培训资料精编版
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紫外可见分光光度计的使用课件PPT
定义与工作原理
定义
紫外可见分光光度计是一种基于 物质对紫外可见光的吸收特性进 行物质定量和定性分析的仪器。
工作原理
通过测量物质在特定波长下的吸光 度，利用朗伯-比尔定律（A=εbc） 计算物质的浓度。
类型与特点
类型
单光束分光光度计、双光束分光光度 计和双波长分光光度计。
特点
具有较高的测量精度和稳定性，广泛 应用于化学、生物学、医学、环境监 测等领域。
每次使用后记录仪器使用 情况，包括测试样品、测 试波长、测试结果等，以 便后续分析。
常见故障排除
波长不准确
检查仪器是否正确设置波长，并 确保仪器没有受到强烈震动或磁
场干扰。
读数不稳定
检查样品是否均匀，仪器是否处于 稳定状态，以及是否有外界干扰。
仪器无响应
检查电源是否正常，仪器是否处于 正常工作状态，以及是否有硬件故 障。
THANKS
开始测量
点击开始按钮，仪器自动扫描并记录 数据。
数据处理
将测量数据导入计算机进行进一步处 理和分析。
实验操作技巧
保持样品池清洁
定期清洗样品池，避免残留物对测量结果的 影响。
选择合适的标准物质
选择与待测样品性质相近的标准物质进行校 准，提高测量准确性。
控制环境因素
确保实验室内温度、湿度和光照等环境因素 稳定，以减小误差。
多次测量求平均值
为减小误差，可以对同一样品进行多次测量， 取平均值作为最终结果。
常见问题及解决方案
波长校准不准确
可能是由于仪器内部棱镜或光路不干 净导致。解决方法是清洁仪器内部并 重新进行波长校准。
测量数据不稳定
数据处理软件崩溃
可能是由于计算机内存不足或软件 bug导致。解决方法是关闭不必要的 程序，释放计算机内存，或更新数据 处理软件。
《分光光度计培训》ppt课件
单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质 的浓度和液层的厚度〔光路长度〕成正比，其关系如下式：
A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中：A为吸光度；
I。为入射的单色光强度；
I为透射的单色光强度；
T为物质的透射率；
k为摩尔吸收系数； L为被分析物质的光程，即比色皿的边长 ；
拓展-任务原理
；
分类-按波长
1、可见光分光光度计：测定波长范围为400～760nm的可见光区； 2、紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区； 3、红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区； 4、荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标志物所发出的荧光光 谱； 5、原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经 过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，经过测定 特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
市局面上普通运用的石英比色皿均为石英粉烧接的，可用公用 超声波清洗，比色皿清洗时毛面朝下。
清洁方法 1、比如测定溶液是酸，假设不干净，就用弱碱溶液洗，要是测 定溶液是碱，假设不干净，就用弱酸溶液洗，要是测定溶液是有机 物质，假设不干净，就用有机溶剂，比如酒精等溶液洗 2、选择比色皿洗涤液的原那么是去污效果好，不损坏比色皿， 同时又不影响测定 3、分析常用的铬酸洗液不宜用于 洗涤比色皿，这是由于带水 的比色皿在该洗液中有时会部分发热，致使比色皿胶接面裂开而损
分光光度计
2021年2月18日
；
目录
A
简介
B
722分光光度计
C
仪器缺点及处理
D
拓展
；
简介
分光光度法是经过测定被测物质在特定波优点或一定波 长范围内光的吸收度，对该物质进展定性和定量分析。
紫外 可见 近红外分光光度计18页PPT
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
紫外 可见 近红外分光光度计
31、园日涉以成趣，门虽设而常关。 32、鼓腹无所思。朝起暮归眠。 33、倾壶绝余沥，窥灶不见烟。
34、春秋满四泽，夏云多奇峰，秋月 扬明辉 ，冬岭 秀孤松 。 35、丈夫志四海，我愿不知老。
谢谢你的阅读
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分光光度计培训课件共35页PPT资料
工作环境
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
1、该仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35 ℃ 。 2、该仪器应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈震动或持 续震动。
3、室内照明不宜太强，且避免日光直射。 4、电风扇不宜直接吹向仪器，以免影响仪器的正常使用。 5、尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 6、供给仪器的电源为220V±10%，49.5-50Hz，并须装有良好的 接地线。宜使用100W以上的稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。 7、避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
5、吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。
a 可见光区：光学玻璃池
b 紫外区：石英池
6、检测器：利用光电效应，将光能转换成电流信号。
光电池，光电管，光电倍增管
7、指示器：
a 低档仪器：刻度显示
b 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作 台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防 止灯泡灯丝发亮不稳定。 2、为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光 路切断，以延长光电管的使用寿命。 3、取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰 比色皿的光学表面。 4、比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛 刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸 吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。
722分光光度计
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
简介：该仪器适用于对可见光谱区域内物质的含量进行定 量分析，可广泛应用于工厂、学校、冶金、农业、食品、生 化、环保、石油化工、医疗卫生等单位的基础实验室。
岛津紫外分光光度计基础知识
(红移) (蓝移)
溶剂的选择原则
1、溶剂应能很好地溶解被测试样，溶剂对溶质应该是 惰性的。即所成溶液应具有良好的化学和光化学稳定性 2、在溶解度允许的范围内，尽量选择极性较小的溶剂
3、溶剂在样品的吸收光谱区应无明显吸收
四、参比液选择
溶剂参比：试样组成简单、共存组份少（基体干扰少） 显色剂不吸收时，直接采用溶剂（多为蒸馏水）为参比 试剂参比：当显色剂或其它试剂在测定波长处有吸收时 采用试剂作参比（不加待测物） 试样参比：如试样基体在测定波长处有吸收，但不与显 色剂反应时，可以试样作参比（不能加显色剂）。
UV-Vis分光光度法的应用
一、定性分析
不同物质结构不同或者说其分子 能级的能量(各种能级能量总和) 或能量间隔各异，因此不同物质 将选择性地吸收不同波长或能量 的外来辐射，这是UV-Vis定性分 析的基础。 定性分析具体做法是让不同波长 的光通过待测物，经待测物吸收 后，测量其对不同波长光的吸收 程度(吸光度A)，以吸光度A为纵 坐标，辐射波长为横坐标作图， 得到该物质的吸收光谱或吸收曲 线，据吸收曲线的特性(峰强度、 位置及数目等)研究分子结构。
样品室(Cell，Container) 比色皿：液体试样。分为石英或玻璃两种材料制作，有些透明有 机玻璃亦可用作吸收池。 检测器： 硅光电池、PMT、InGaAs、PbS
UV2600/2700光路图
UV2600光路图 UV2700光路图
分析条件选择
一、仪器测量条件
由于光源不稳定性、读数不准等带来的误差。当分析高浓度的样品 时，误差更大。 A lg T lc 由L-B定律： dT d lg T 0.434 ldc T 微分后得： 将上两式相比，并将dT和dc分别换为DT 和 Dc，得：
紫外-可见分光光度计 ppt课件
kx 1
kx 2
ppt课件
Cs(x)
35
（二）双波长分光光度法
不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束
单色光(λ1和λ2)；以参比波长λ1处的吸光度Aλ1作为
参比，来消除干扰。
对于多组分混合物、浑浊试样分析及存在背景干扰 或共存组分吸收干扰的情况，利用双波长分光光度法灵 敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提 高。
6
（5）同一物质在不同波长下的 k 值是不同的。在 最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以 kmax 表示。K max表明了该吸收物质最大限度的吸光能
力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵 敏度。
（6）kmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度
法测定该物质的灵敏度越高。
（7）k在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm
（2）200-400nm；近紫外光区
（3）400-800nm；可见光区
ppt课件
4
二、光的吸收定律：
1.朗伯——比尔定律：A＝kbc。
表明：一定温度下，一定波长的单色光通过均匀的、非散射的溶液 时，溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。
入射光 I0
透射光 It
A＝kbc 式中: A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度； k：摩尔吸光系数，单位 L·mol－１·cm－１； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的摩尔浓度，单位 mol·L－１；
度的精度等对分析结果都有影响。
ppt课件
14
4. 检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用
的有光电管、光电倍增管、光电二极管、光电摄像管等。 要求灵敏度高、响应时间短、噪声水平低、稳定性好的优点。
岛津UV-3600培训班培训讲义模板
样品的厚度 样品较厚时（3mm以上），由于空气和样品的折射率不同，与 基线校正时相比，检测器上的聚光焦点位置发生变化，因此，不
能得到正确的透射率。对于这样的厚样品，请使用积分球或端窗 式光电倍增管进行全光线透射测定。
注意事项（三）
积分球种类
积分球的大小不同。一般常用60mmφ的积分球，也有150mmφ的 积分球。 样品设置场所的尺寸不同。积分球附件不能设置太大的测定样品， 但多用途大型样品室可设置较大样品。 与有开口部（孔）数不同的透射测定用积分球。此透射型积分球适 于诸如透镜等在基线校正时和样品测定时聚光焦点位置变化大的样
4.2.1
不含镜面反射的漫反射测定
不含镜面反射的漫反射测定是测定以与入射光角度不同的 角度反射的漫反射光的方法，使用反射基准进行测定。
镜面反射光 （正反射光） 入射光 漫反射光
θ
θ
不含镜面反射的漫反射光
注意事项（一）
不含镜面反射的漫反射测定的注意事项
反射基准（标准白板）
不含镜面反射的漫反射测定基准根据JIS规格等规定，使用硫酸 钡、氧化镁、氧化铝。另外，有时使用上述基准以外的氟树脂 材料。不使用镜面反射镜。 在近红外区域硫酸钡有水分吸收，因此测定样品的水分少时， 水的吸收通常显示为倒峰。
注意事项（三）
C. 积分球的开口率 开口率是指积分球内面积与测定光、检测器等的光出入口（开口 部）面积总和的比率(开口率=全部窗面积/球内表面积)。开口率越小
积分球效果越大（接近理想的积分球），但另一方面，到达检测器的 光量减少，所以，噪声増加。为减小开口率，积分球直径加大。
大小积分球比较
品。
注意事项（四）
全光线透射的比较
散射透射光多的样品时，使用以同一个积分球测定的数据进行 全光线透射率比较。使用不同的积分球时，有时不能比较数据 。这是因为在基线校正时(Air)和样品测定时光最先照射到的位 置不同。入射积分球内的光在基线校正时首先照射到标准白板 ，但在样品测定时照射到积分球的整个内面。由此造成数据差 。
能得到正确的透射率。对于这样的厚样品，请使用积分球或端窗 式光电倍增管进行全光线透射测定。
注意事项（三）
积分球种类
积分球的大小不同。一般常用60mmφ的积分球，也有150mmφ的 积分球。 样品设置场所的尺寸不同。积分球附件不能设置太大的测定样品， 但多用途大型样品室可设置较大样品。 与有开口部（孔）数不同的透射测定用积分球。此透射型积分球适 于诸如透镜等在基线校正时和样品测定时聚光焦点位置变化大的样
4.2.1
不含镜面反射的漫反射测定
不含镜面反射的漫反射测定是测定以与入射光角度不同的 角度反射的漫反射光的方法，使用反射基准进行测定。
镜面反射光 （正反射光） 入射光 漫反射光
θ
θ
不含镜面反射的漫反射光
注意事项（一）
不含镜面反射的漫反射测定的注意事项
反射基准（标准白板）
不含镜面反射的漫反射测定基准根据JIS规格等规定，使用硫酸 钡、氧化镁、氧化铝。另外，有时使用上述基准以外的氟树脂 材料。不使用镜面反射镜。 在近红外区域硫酸钡有水分吸收，因此测定样品的水分少时， 水的吸收通常显示为倒峰。
注意事项（三）
C. 积分球的开口率 开口率是指积分球内面积与测定光、检测器等的光出入口（开口 部）面积总和的比率(开口率=全部窗面积/球内表面积)。开口率越小
积分球效果越大（接近理想的积分球），但另一方面，到达检测器的 光量减少，所以，噪声増加。为减小开口率，积分球直径加大。
大小积分球比较
品。
注意事项（四）
全光线透射的比较
散射透射光多的样品时，使用以同一个积分球测定的数据进行 全光线透射率比较。使用不同的积分球时，有时不能比较数据 。这是因为在基线校正时(Air)和样品测定时光最先照射到的位 置不同。入射积分球内的光在基线校正时首先照射到标准白板 ，但在样品测定时照射到积分球的整个内面。由此造成数据差 。
紫外可见分光计ppt课件
I0= Ia+ It+ Ir
由于反射光强度基本相同，其影响可相互抵 消，上式可简化为：
I0= Ia+ It
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19
透光度：透光度为透过光的强度It与入射光 强度I0之比，用T表示：
即 T= It/I0 吸光度: 为透光度倒数的对数，用A表示， 即
A=lg1/T=lgI0/It
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9
2.2 有机化合物的吸收带
吸收带(absorption band): 在紫外光谱中，吸 收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分 子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。
(1) R吸收带 (2) K吸收带 (3) B吸收带 (4) E吸收带
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10
3 无机化合物的紫外-可见吸收光谱
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6
饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*， n→σ* 跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区， 吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。
不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*， π→π* 跃迁，吸收峰一般大于200nm。
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7
生色团：是指分子中可以吸收光子而产生电 子跃迁的原子基团。人们通常将能吸收紫外、 可见光的原子团或结构系统定义为生色团。 见表3-1和3-2。
助色团：是指带有非键电子对的基团，如OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等， 它们本身不能吸收大于200nm的光，但是当 它们与生色团相连时，会使生色团的吸收峰 向长波方向移动，并且增加其吸收强度。见 表3-4。
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8
红移和紫移
在有机化合物中，常常因取代基的变更 或溶剂的改变，使其吸收带的最大吸收波长 λmax发生移动。向长波方向移动称为红移(表33)，向短波方向移动称为紫移。
由于反射光强度基本相同，其影响可相互抵 消，上式可简化为：
I0= Ia+ It
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19
透光度：透光度为透过光的强度It与入射光 强度I0之比，用T表示：
即 T= It/I0 吸光度: 为透光度倒数的对数，用A表示， 即
A=lg1/T=lgI0/It
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9
2.2 有机化合物的吸收带
吸收带(absorption band): 在紫外光谱中，吸 收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分 子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。
(1) R吸收带 (2) K吸收带 (3) B吸收带 (4) E吸收带
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10
3 无机化合物的紫外-可见吸收光谱
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6
饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*， n→σ* 跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区， 吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。
不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*， π→π* 跃迁，吸收峰一般大于200nm。
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7
生色团：是指分子中可以吸收光子而产生电 子跃迁的原子基团。人们通常将能吸收紫外、 可见光的原子团或结构系统定义为生色团。 见表3-1和3-2。
助色团：是指带有非键电子对的基团，如OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等， 它们本身不能吸收大于200nm的光，但是当 它们与生色团相连时，会使生色团的吸收峰 向长波方向移动，并且增加其吸收强度。见 表3-4。
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8
红移和紫移
在有机化合物中，常常因取代基的变更 或溶剂的改变，使其吸收带的最大吸收波长 λmax发生移动。向长波方向移动称为红移(表33)，向短波方向移动称为紫移。
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Analytical ConsumeV-300; 100
1994 UV-2401/2501/1601 1995 UV-2401/2501(苏州)
UV-240; 120; 1998 MPS-2400
UV-3000
UV-260
世界1第9一99台 UV-2450/2550/1650 扫描型紫外 (日本和苏州)
UV-160
2000 UV-3150
UV-3101 UV-2101PC
2001 UV-1700 2003 UV-1700/1240(苏州)
2003年国内UV双光束产品市场
岛津日本 12%
日立天美 12%
普析通用 21%
北分瑞利 Varian 6%
11% PE 3% Unicam 1% 其他 6%
岛津苏州 29%
（三）吸收池
吸收池用于盛放分析试样，一般有石英和玻璃材料 两种。石英池适用于可见光区及紫外光区，玻璃吸收池 只能用于可见光区。为减少光的损失，吸收池的光学面 必须完全垂直于光束方向。在高精度的分析测定中（紫 外区尤其重要），吸收池要挑选配对。因为吸收池材料 的本身吸光特征以及吸收池的光程长度的精度等对分析 结果都有影响。
紫外-可见分光光度计的结构
（一）光源 对光源的基本要求是应在仪器操作所需的光
谱区域内能够发射连续辐射，有足够的辐射强度 和良好的稳定性，而且辐射能量随波长的变化应 尽可能小。
热辐射光源用于可见光区，如钨丝灯和卤钨 灯，钨灯和碘钨灯可使用的范围在340－2500nm ； 气体放电光源用于紫外光区，如氘灯。它可在 160－375 nm范围内产生连续光源。氘灯的灯管 内充有氢的同位素氘，它是紫外光区应用最广泛 的一种光源。
第二篇
岛津 UV的历史与地位
年
1952 1959 1964
产品
年
产品
QB-50; DF-1 1990 UV-2201
QV-50; RS-27 世电界倍1第增99一管0台紫光外UV-1200
MPS-50
1995
1966 1970 1974 1981
1983
1984 1987 1989
DOUBLE-40
72 315 UV-2450
33 167 UV-2550
岛津日本 岛津苏州
岛津UV24/25产品近年增长情况
岛津UV增长情况
800 700 600 500 400 300 200 100
Jasco 1%
其它 2%
岛津苏州 普析通用 日立天美 岛津日本 Varian 北分瑞利 PE Unicam 安马西亚 Beck-man Jasco 其它
Total:2200
2003岛津UV产品销售分布
450
400
350
300
250
200
150
100
9
50
77
0
UV-1240
44 140 UV-1700
紫外-可见分光光度计
（二）单色器 单色器是能从光源辐射的复合光中分出单色
光的光学装置，其主要功能：产生光谱纯度高的 波长且波长在紫外可见区域内任意可调。
单色器一般由入射狭缝、准光器（透镜或凹 面反射镜使入射光成平行光）、色散元件、聚焦 元件和出射狭缝等几部分组成。其核心部分是色 散元件，起分光的作用。单色器的性能直接影响 入射光的单色性，从而也影响到测定的灵敏度度、 选择性及校准曲线的线性关系等。
经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液 和样品溶液，以进行吸光度的测定。这种简易型分光光 度计结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。 2，双光束分光光度计
经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光，
一束通过参比池，一束通过样品池。光度计能自动比较 两束光的强度，此比值即为试样的透射比，经对数变换 将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。
（四）检测器 检测器的功能是检测信号、测量单色光透过
溶液后光强度变化的一种装置。 常用的检测器有光电池和光电倍增管等。 硅光电池对光的敏感范围为190-1100nm。但
由于容易出现疲劳效应而只能用于中低档的分光 光度计中。
光电倍增管是检测微弱光最常用的光电元件， 它的灵敏度比一般的光电池要高200倍，因此可 使用较窄的单色器狭缝，从而对光谱的精细结构 有较好的分辨能力。
双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。 由于两束光同时分别通过参比池和样品池，还能自动消 除光源强度变化所引起的误差。
3，比例双光束分光光度计
由同一单色器发出的光被分成两束，一束直接到达 检测器，另一束通过样品后到达另一个检测器。这种仪 器的优点是可以监测光源变化带来的误差，但是并不能 消除参比造成的影响
（五）数据系统
它的作用是放大信号并以适当方式指示或 记录下来。现在一般的紫外可见分光光度计有计 算机控制和主机单片机控制两种类型，功能基本 类似
紫外-可见分光光度计的类型
紫外-可见分光光度计的类型很多，但可归纳为三种 类型，即单光束分光光度计、双光束分光光度计和比例 双光束分光光度计。 1，单光束分光光度计
电磁波的区分
UV/VIS/NIR 光照射到物质上
透射光 I1
检测器
入射光 I0
自光源
光程长 透射率 T =
I0
I1
LAMBERT-BEER定律
吸收
A=
log
1 =
eCl
T
此处
T
e
l C
: 透射率
: 摩尔消光系数 : 光程长 : 浓度
紫外-可见分光光度计的结构
紫外-可见分光光度计的基本结构是由五 个部分组成： •光源 •单色器 •吸收池 •检测器 •数据系统。
岛津紫外、可见、近红外 分光光度计
新人培训资料
岛津国际贸易（上海）有限公司
小型分析仪器部 市场部
目录
第一篇 紫外、可见、近红外分光光 度计的原理及应用领域
第二篇 岛津 UV 的历史与地位 第三篇 岛津 UV 光学系统的特点 第四篇 岛津 UV 操作软件的特点
第一篇
紫外、可见、近红外分光光度计 的原理及应用领域
光栅是利用光的衍射与干涉作用制成的，它可用于紫 外、可见及红外光域，而且在整个波长区具有良好的、 几乎均匀一致的分辨能力。它具有色散波长范围宽、分 辨本领高、成本低、便于保存和易于制备等优点。缺点 是各级光谱会重叠而产生干扰。
入射、出射狭缝，透镜及准光镜等光学元件中狭缝在 决定单色器性能上起重要作用。狭缝的大小直接影响单 色光纯度，但过小的狭缝又会减弱光强。