培养条件及培养基组分对粘质沙雷氏菌生长及产D-乳酸的影响

一株产灵菌红素粘质沙雷氏菌株培养条件探索

一株产灵菌红素粘质沙雷氏菌株培养条件探索灵菌红素（prodigiosins，PG）是一类天然红色素的总称，通常都有3个吡咯环组成的甲氧基吡咯骨架结构，是由多种放线菌、沙雷氏菌、链霉菌属、假单胞菌属等产生的次级代谢产物[1]。

根据其侧链基团结构的不同，可分为灵菌红素、间环丙菌素、十一烷基灵菌红素、壬烷基灵菌红素和环丙烷灵菌红素等系列结构类似物（图1）。

灵菌红素呈暗红色，绿色反光，熔点151～152℃，属于脂溶性色素，易溶于甲醇、丙酮、氯仿、苯、DMF和DMSO，几乎不溶于水[2]。

灵菌红素对光不稳定，需要避光保存[2]。

灵菌红素受pH 值的影响较大，在酸性环境中能保存较长的时间，在碱性条件下则不稳定。

近年来研究显示PG具有抗细菌、抗真菌、抗疟疾、免疫抑制和抗肿瘤等多种活性。

一、材料与仪器1.菌种本实验室自有产灵菌红素的S. Marcescens y2菌株（y2+），经筛选纯化获得不产色素突变菌株（y2-），以y2-菌株作为对照，减少色素对菌体本身的作用，来检测外界环境因子对粘质沙雷氏菌生长繁殖的影响。

2.培养基前期研究发现，分别采用LB培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基PDA及SN 培养基（蔗糖20g/L、牛肉膏18g/L、CaCl21.1g/L）培养S. Marcescens y2菌株，28℃、200rpm条件下SN培养基可以获得较高产量的灵菌红素，且菌量较多。

3.试剂与仪器722可见光分光光度计（上海精密科学仪器有限公司），Varian cary 100型紫外可见分光光度计（Agilent Technologies），TGL 16G台式低温高速离心机（上海医用分析仪器厂），Thermo MK3酶标仪。

二、实验方法1.细菌培养从平板上挑取单菌落至30mlSN液体培养基中，28℃、200rpm振荡培养至OD600=0.1，再分别以100μl新鲜菌液接种到30mlSN液体培养基中28℃、200rpm 振荡培养48h，用以观察鉴定。

粘质沙雷氏菌次生代谢产物灵菌红素的生理与生物学活性的研究

粘质沙雷氏菌次生代谢产物灵菌红素的生理与生物学活性的研究一、本文概述Overview of this article本文旨在全面研究和探讨粘质沙雷氏菌次生代谢产物灵菌红素的生理与生物学活性。

粘质沙雷氏菌作为一种重要的微生物资源，其次生代谢产物灵菌红素因其独特的生物活性和潜在的应用价值，近年来受到了广泛关注。

本文将从灵菌红素的生物合成途径、提取分离方法、生理作用机制以及生物学活性等方面进行深入探讨，以期为灵菌红素的开发利用提供理论基础和实践指导。

This article aims to comprehensively study and explore the physiological and biological activities of the secondary metabolite of Streptomyces mucilaginosus, erythromycin. As an important microbial resource, Serratia marcescens has received widespread attention in recent years due to its unique biological activity and potential application value, as well as its secondary metabolite, erythromycin. This article will delve into the biosynthesis pathways, extraction andseparation methods, physiological mechanisms of action, and biological activities of erythromycin, in order to provide theoretical basis and practical guidance for the development and utilization of erythromycin.本文将概述灵菌红素的生物合成途径，探讨其合成过程中的关键酶和调控机制。

医疗器械加速老化实验方案及报告

山东华普医疗科技有限公司加速老化试验版本/修改状态：生效日期：文件编号：发放号：控制状态：拟制：审核：批准：加速老化实验计划一、使用范围本公司生产的一次性使用氧气面罩，一次性使用鼻氧管，医用雾化器及其外包装。

二、过程要求1、微生物屏障2、无毒性3、物理特性的符合性4、化学特性的符合性5、生物特性的符合性三、预计完成时间：老化实验前全能性实验：2012年5月20日前包装验证实验：2012年5月22日前阻菌实验：2012年5月24日前老化实验时间：2012年5月26日前加速第一年验证无菌实验：2012年6月18日前全能性实验：2012年6月25日前包装验证实验：2012年6月25日前阻菌实验：2012年6月27日前加速第二年验证无菌实验：2012年7月1日前全能性实验：2012年7月8日前包装验证实验：2012年7月8日前阻菌实验：2012年7月10日前加速第三年验证无菌实验：2012年7月15日前全能性实验：2012年7月22日前包装验证实验：2012年7月22日前阻菌实验：2012年7月24日前加速第四年验证无菌实验：2012年7月29日前全能性实验：2012年8月6日前包装验证实验：2012年8月6日前阻菌实验：2012年8月8日前加速第五年验证无菌实验：2012年8月13日前全能性实验：2012年8月20日前包装验证实验：2012年8月20日前阻菌实验：2012年8月22日前目的：在有效期三年内和三年有效期外，通过对我公司产品检验实验，来验证我们的产品规定为三年的有效期是有科学依据的，可靠有效的。

加速老化试验(一)老化试验1.目的：通过老化试验以后对产品的外观、无菌、热原试验等全性能试验来证明本公司生产的产品规定为三年的有效期是有科学依据，可靠有效的。

2.范围：本公司生产的一次性使用氧气面罩，一次性使用鼻氧管射器，医用雾化器。

3.测试依据：按ISO11137-95和ISO11607-2003方法4.样品来源：成品留样产品（二）试验准备1.本次试验所需样品10只，从中随机抽取2只用于试验前的产品的全能性检验，抽取2 只做包装材料渗漏性试验，抽取2只做真空泄露性试验，抽取2只做爆破和蠕动性试验，抽取2只做阻菌性试验（琼脂接触攻击性试验）。

粘质沙雷氏菌使用说明

粘质沙雷氏菌编号名称北京华越洋生物NRR00340 粘质沙雷氏菌基本信息：名称：粘质沙雷氏菌规格：300ul甘油菌储存温度：-‐80℃基因组：粘质沙雷氏菌简介：粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens ) 又称灵杆菌，一种产生鲜红色素的细菌，存在于空气和水中，可生长在动、植物性食品中。

为细菌中最小者，约0.5×(0.5～1.0)微米。

近球形短杆菌，但形态多样。

粘质沙雷氏菌广泛分布于自然界，是水和土壤中的常居菌群，亦是临床上常见的条件致病菌，在机体免疫功能降低时可引起肺部和尿道感染以及败血症。

操作说明：1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。

也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

2，为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

冷冻管开封：用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。

菌株复溶：无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取1ml 左右复溶液，加入到冷冻管中。

轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。

菌株复壮：用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。

做好标识，在适宜温度下培养。

细菌在30-‐35℃培养箱中培养24-‐48h，真菌在23-‐28℃培养箱中培养24-‐72h （必要时，可适当延长培养时间）。

菌株传代：将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中（尽量增大接种量：如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓慢释放），适宜温度下培养，用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。

注意事项：1、菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放置会导致菌种衰退；2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；3、一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才能正常生长；4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时来电询问；5、某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态；培养过程中亦要保持厌氧状态；6、某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-‐10%CO2 促进生长；7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。

从导致腹泻的茶叶蛋中检出粘质沙雷氏菌

从导致腹泻的茶叶蛋中检出粘质沙雷氏菌常州市疾病预防控制中心杜强钱红2005年8月中旬，我市农贸市场几名打工者在食用某商贩提供的茶叶蛋后，出现了不同程度的腹痛腹泻。

接到通知后，我疾控工作人员前往采集了剩余的茶叶蛋，送往实验室检测，从中我们检出了一种少见的条件致病菌——粘质沙雷氏菌，现将检验经过报告如下。

1实验室检验1．1 样本情况样品数量一份，是无菌瓶包装的四只完整未食用的茶叶蛋，经检查包装完好，无破损。

1．2 材料来源培养基为宜兴万石培养基厂产品，微量生化管由浙江省军区后勤卫生防疫检验所提供。

bioLIASON CC3/CC4 全自动微生物分析仪（VITEK32）、GNI+鉴定卡、氧化酶反应试剂均由生物梅里埃中国有限公司提供。

1．3 检验方法及结果导致腹泻的致病菌种类很多，因此我们结合调查的实际情况，先从常见的几种肠道致病菌和致病性球菌入手，对样品进行如下处理。

检测依据如下：沙门氏菌检验依据：GB/T 4789.4-2003 沙门氏菌检验志贺氏菌检验依据：GB/T 4789.5-2003 志贺氏菌检验致泻大肠埃希氏菌检验依据：GB/T 4789.6-2003 致泻大肠埃希氏菌检验副溶血性弧菌检验依据：GB/T 4789.7-2003 副溶血性弧菌检验金黄色葡萄球菌检验依据：GB/T 4789.10-2003 金黄色葡萄球菌检验溶血性链球菌检验依据：GB/T 4789.11-2003 溶血性链球菌检验变形杆菌检验依据：食品卫生检验方法注解微生物学部分——第12章变形杆菌检验1．3．1 增菌及分离沙门菌:前增菌培养：无菌操作，取样品25g加入225mLBP中， 37℃培养4h后，增菌液有少许混浊。

增菌培养：移取10mL转种于100mLSC增菌液中， 37℃培养24h后，增菌液澄清。

分离培养：接种于SS平板， 37℃培养24h。

平板生长情况： SS平板上无菌落生长。

志贺菌:增菌培养：无菌操作，取样品25g加入225mLGN增菌液中， 37℃培养8h后，增菌液有混浊。

D-乳酸产生菌的研究进展

D-乳酸产生菌的研究进展刘娟;王刚;张明磊;姜兴林;郭明珠;陈光【摘要】As an important industrial organic acid, D-lactic acid is the intermediate of many chiral substances.It has received increased attention for use as a monomer for the production of biodegradable poly especially.Microbial fer-mentation is the most important method for D-lactic acid production and microorganisms play a key role in the fermen-tation method.The research development of D-lactic acid-producing microorganisms was summarized.%D-乳酸作为一种重要的工业有机酸，是许多手性物质的中间体，特别是高光学纯度D-乳酸因其可以提高聚乳酸材料的性能而广泛应用。

微生物发酵法是目前D-乳酸的主要生产方法，而菌种在发酵生产中占有非常重要的地位，是决定整个生产过程的关键。

就近几十年来产D-乳酸常用菌株、菌种进化、研究方法、存在问题及前景做一综述。

【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2016(036)001【总页数】4页(P96-99)【关键词】D-乳酸;乳酸菌;乳酸脱氢酶【作者】刘娟;王刚;张明磊;姜兴林;郭明珠;陈光【作者单位】吉林农业大学生命科学学院，吉林长春 130118;吉林农业大学生命科学学院，吉林长春 130118;吉林农业大学生命科学学院，吉林长春 130118;吉林农业大学生命科学学院，吉林长春 130118;长春职业技术学院信息分院，吉林长春 130118;吉林农业大学生命科学学院，吉林长春 130118【正文语种】中文【中图分类】Q939.97乳酸又名α-羟基丙酸、2-羟基丙酸、丙醇酸，分为L-乳酸、D-乳酸，在食品、农业、环保、医药、饲料、日用品、化工等领域具有广泛的用途。

微生物检验实验室沙雷菌属标准操作规程

微生物检验实验室沙雷菌属标准操作规程1. 概述沙雷菌属包括粘质沙雷菌、液化沙雷菌、气味沙雷菌、普城沙雷菌、深红沙雷菌、无花果沙雷菌、嗜虫沙雷菌、居泉沙雷菌、格里蒙沙雷菌和变形沙雷菌等10种。

在临床标本中以粘质沙雷菌最为常见。

2. 标本类型痰液、脑脊液、穿刺液、脓液、血液等标本。

3. 鉴定3.1 形态与染色：革兰阴性杆菌。

3.2 培养特性经35℃培养18-24小时，在血琼脂平板上菌落较大，呈红色；在麦康凯琼脂平板上菌落呈红色，部分菌株呈无色菌落。

3.3 生化反应氧化酶试验阴性，TSI为K/A；发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇水杨苷和肌醇，不发醇乳糖、卫矛醇和鼠李糖；IMViC--++，DNA酶、脂酶、明胶酶、赖氨酸脱羧酶和鸟氨酸脱羧酶试验均为阳性。

3.4 鉴别要点3.4.1 本菌特征：大部分菌株产生红色色素，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，DNA酶、脂酶、明胶酶、赖氨酸脱羧酶和鸟氨酸脱羧酶试验均为阳性。

3.4.2 粘质沙雷菌与深红沙雷菌和普城沙雷菌的鉴别：三者均能产生两种不同的红色色素（灵菌红素和吡羧酸），但粘质沙雷菌发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖和棉子糖，鸟氨酸脱羧酶试验阳性；深红沙雷菌则相反。

普城沙雷菌发酵阿拉伯糖，赖氨酸脱羧酶试验阴性，可与粘质沙雷菌相鉴别。

3.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验参见氧化酶试验标准操作规程。

3.5.2 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行菌鉴定。

4. 药敏参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。

5. 质量控制参见质量管理程序。

检验结果解释与分析粘质沙雷菌易产生诱导酶，临床上使用三代头孢菌素治疗的过程易产生耐药性，通常在治疗3-4日左右即转化为耐药菌株，因此应定期复查菌株的敏感性。

临床意义粘质沙雷菌长期以来认为对人体无害，但由于该菌具有侵袭性并对许多常见抗生素有耐药性，已成为临床感染的标本中一种重要的病原菌。

可导致肺炎、泌尿道感染、败血症和外科手术感染等。

我院粘质沙雷氏菌的分布及耐药性分析

ｌｄｅｅｔｐｓｖ，ｅｏｅｍｕｄ］Ｎｕｓ，０２２：ｏｃｏ１ｏｉｅｎｕｎｉｔｏｓ．ｅｒｃ２０，ｉｒｐｒ－ｔｉｒｓｎｈｅｏｉ２
４５．０７
［］ａＫｌ，ｔｉ，ｌａＰＨＤｅ。．ｔｖｌｓＡ＿４￣ｋｎｉｒｕＫｌＣｎｒ．．ｉｚｃｔ１ｎａ￣Ｔｎ
液和脑脊液中分离出来。近年来文献报导本菌能引起多种感染，尿路感染、炎、胸、如肺脓肺脓肿、伤创
感染、膜炎、内膜炎和败血症等。本菌亦为院内脑心
感染的重要条件致病菌［。川
１材料与方法
个ＭＨ琼脂平板上，５ — ３ ℃孵育ｌ —１ｈ若任何一６８，组含克拉维酸的药敏片比相应不含克拉维酸的药敏
一
片抑菌环直径 ≥５ｒｎ可确定为该菌株ＥＢｓ阳ｎ，ｌＳＬ性。质控菌株同时进行ＫＢ法试验，．结果符合Ｎ — Ｃ
Ｃ．质控要求。Ｉｓ
２结果
１１标本来源．
我院２０ — ０７门诊和住院病０３２０年
人所分离的粘质沙雷菌。质控菌株，大肠埃希菌
２０，４：３４．０３３１０
（收稿Ｅ期：０７２０ｌ２０ —１ —２）
文章编号：０７４８（０８１ —１８ —０１０ — ２７２０）２５１２
我院粘质沙雷氏菌的分布及耐药性分析
孔丽清，齐雅君，唱丽敏，王铁军

各工艺条件对发酵的影响(一)

各工艺条件对发酵的影响发酵条件控制的目的就是要为生产菌创造一个最适的环境，使我们所需要的代谢活动得以最充分的表达，积累更多的代谢产物。

影响L-苏氨酸产量的因素有很多，如培养基、温度、pH、溶氧等。

1、培养基对发酵的影响：发酵培养基必需满足微生物的能量、元素及特殊养分的需求：碳源、氮源、无机盐类、生长因子等。

（1）碳、氮、磷的平衡：C/N直接影响菌体的生长和代谢，如果C/N偏小（氮源丰富），会导致菌体生长过剩，易造成菌体提前衰老自溶；C/N过大，菌体繁殖数量少，发酵密度低，细菌代谢不平衡，不利于产物的积累。

磷是核酸与磷脂的成分，组成高能磷酸化合物及许多酶的活性基，磷不足影响菌体生长。

在代谢方面，适量磷有利于糖代谢的进行；磷酸根在能量代谢中起调节作用。

另外，在一定范围内，磷酸盐对培养基pH值的变化起缓冲作用。

（2）基质浓度对发酵的影响：低浓度有诱导作用（迟滞期产生各种酶），高浓度会起分解代谢物阻遏作用；培养基过于丰富，会使菌体生长过盛，发酵液黏稠，影响传质。

（3）碳源的种类和浓度对发酵的影响：碳源的种类对发酵的影响主要取决于其性质，即快速利用的碳源（速效碳源）和缓慢利用的碳源（迟效碳源）。

速效碳源（如葡萄糖）能较快地参与微生物的代谢，合成菌体、产生能量、合成代谢产物等；迟效碳源（如蔗糖）不能被微生物直接吸收利用，需要微生物分泌胞外酶先将其分解成小分子物质，因此菌体利用缓慢。

速效碳源（葡萄糖）的特点：优点：吸收快，利用快，能迅速参加代谢合成菌体和产生能量。

缺点：有的分解代谢产物对产物的合成会产生阻遏作用。

碳源的浓度对菌体的生长和产物的合成有着明显的影响。

以葡糖糖为例，它对糖代谢中的一个关键酶——葡糖糖氧化酶（GOD）的形成具有双重效应，即低浓度下有诱导作用，而高浓度下有分解代谢产物阻遏效应。

为避免初始培养基中渗透压过高，一般采用中间补糖的方法控制碳源浓度。

发酵过程中补糖过量，碳代谢流在糖酵解途径中过量，必须分解部分氧化副产物（如乙酸、乳酸、其它氨基酸等）来维持碳代谢流平衡，易造成碳源浪费，糖酸转化率低。

粘质沙雷氏菌发酵工艺参数研究

摘
要：研究了发酵温度、培养基ｐ接种量及溶解氧等对粘质沙雷氏菌生长的影响，出粘质沙雷氏菌的优化培养条Ｈ、得
件为温度３０℃左右，Ｈ７０７５ｐ．～．，接种量１１，通过振荡或通气的方法保证培养基中含一定的溶解氧有利于细菌的生：０长。用发酵罐测定了粘质沙雷氏菌的生长曲线，在上述优化培养条件下粘质沙雷氏菌约４ｈ后进入对数生长期，８ｈ达１
ＳｕｙｏｒｅｔｔｎＴｅｈｉａａａｅｅｓｏｅｒｔｒｅｃｎｔｄｎＦｅｍｎａｉｃｎｃｌＰｒｍｔｒｆＳｒａｉｍａｃｓｅｓｏａ
ＸＩｅｇｘｎ，ＨＵＫ，ＨＯＹ－ｉ，ＩａｌｇＺＡＧＦｎ－ｅｇＥＦｎ－ｉｇＺＯｅＺＡｕｊＬ－ｉ，ＨＮｅｇｆｅＹｎｎ
ｈｅｕｔｓｏｄｔａｈｐｉｅｍｅｔｔａａｔｒｆＳｒａｉｍａｃｓｅｓｗｅｅ３Ｃ，ｐＴｅｒｓｌｈｗｅｈｔｔｅｏｔｌｆｒｎａｉｎｐｒｍｅｅｓｏｅｒｔｒｅｃｎｒ０ｏｓｍａｏａＨ７．７５ｎｃｌｔｎｒｔ：００－．，ｉｏｕａｉａｅｌ１ｏ
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粘质沙雷氏菌标准

粘质沙雷氏菌标准粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）是一种常见的细菌，在自然界和医院环境中均有分布。

它是一种机会致病菌，在一定条件下可引起人类感染，尤其是对免疫系统受损的人群具有潜在的危险性。

因此，对粘质沙雷氏菌的鉴定、分离和检测非常重要。

以下是粘质沙雷氏菌的标准：1.生物学特性：粘质沙雷氏菌为革兰阴性杆菌，无芽孢、无鞭毛，氧化酶阳性。

在固体培养基上生长良好，形成光滑、湿润、半透明的菌落。

在37℃和pH 7.2的环境下生长最佳，最适宜的生长温度为25-30℃，最适宜的生长pH为6.9-7.1。

2.鉴定方法：粘质沙雷氏菌的鉴定主要依据表型特征和遗传学特征。

在表型特征方面，可以通过观察菌落的形态、染色特性、氧化酶试验等指标进行鉴定。

在遗传学特征方面，可以通过16S rRNA基因测序、多位点序列分析等技术进行鉴定。

3.分离与检测：粘质沙雷氏菌的分离与检测通常采用微生物学方法和分子生物学方法。

微生物学方法包括培养基分离、生化试验和药敏试验等。

分子生物学方法包括PCR、基因测序等。

在临床实验室中，通常采用微生物学方法进行分离和检测，以确定感染源和制定治疗方案。

4.耐药性：粘质沙雷氏菌对多种抗菌药物具有耐药性，包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类等。

因此，对分离得到的粘质沙雷氏菌进行药敏试验非常重要，可以帮助医生选择有效的抗菌药物进行治疗。

5.预防与控制：由于粘质沙雷氏菌具有潜在的致病性，因此需要采取有效的预防和控制措施。

医院应加强感染防控意识，严格执行消毒灭菌制度，减少医院交叉感染的风险。

同时，对医护人员进行定期培训和教育，提高他们对医院感染的认识和控制能力。

6.临床意义：粘质沙雷氏菌在医院感染中具有一定的意义。

它可引起术后切口感染、泌尿道感染、血液感染等疾病，也可引起新生儿脑膜炎、老年人肺炎等严重疾病。

因此，及时发现和控制粘质沙雷氏菌的感染对于保障患者安全和医疗质量具有重要意义。

综上所述，粘质沙雷氏菌的标准包括其生物学特性、鉴定方法、分离与检测方法、耐药性、预防与控制措施以及临床意义等方面的内容。

培养基配制的原理

培养基配制的原理
培养基配制的原理是根据细菌或其他微生物的营养需求，选择适当的营养成分，通过配制培养基来提供必要的营养物质。

培养基通常包括有机和无机物质，如碳源、氮源、磷源、微量元素等。

这些物质通过提供能量和构建细胞组分的必需元素，为微生物的生长提供所需营养。

在配制培养基时，根据不同微生物的需要，需要对不同营养成分的浓度进行调整。

一般来说，培养基中的营养成分要满足微生物的生长需求，但不能过量，否则可能对微生物产生抑制作用。

因此，培养基的配制需要经过实验确定最佳配方。

此外，还需要考虑培养基的酸碱度（pH值）、温度、气氛等
因素，因为这些因素对微生物的生长和代谢也会产生影响。

对于不同类型的微生物，这些条件可能有所不同，因此在配制培养基时需要根据具体的微生物要求进行调节。

总结起来，培养基的配制原理是根据微生物的营养需求，选择适当的营养成分和环境条件，通过合理调配来提供微生物生长和繁殖所需的营养和环境条件。

不同微生物对于营养物质和环境条件的需求不同，因此需要根据具体微生物的特性进行配制。

支气管肺泡灌液中检出一粘质沙雷菌

支气管肺泡灌液中检出一粘质沙雷菌发表时间：2014-08-07T17:04:16.310Z 来源：《医药前沿》2014年第12期供稿作者：杨桂荣[导读] 经补液抗炎及对症等支持治疗，患者一般情况较差，拌脓毒血症，多脏器能衰竭，家属要求出院。

杨桂荣（内蒙古民族大学附属医院检验科内蒙古通辽 028000）【摘要】粘质沙雷氏菌广泛分布于自然界,近年来渐成为临床上常见的条件致病菌。

本文报道了从一肺泡灌洗液中分离到一株产红色色素的革兰氏阴性杆菌。

根据标本中分离得到的粘质沙雷氏菌的生化特性，本菌属于肠杆菌科，经微生物学鉴定该菌为粘质沙雷氏菌属。

药敏试验结果表明该粘质沙雷菌对左旋氧氟沙星、环丙沙星、丁胺卡那、磷酶素、克林霉素、利福平等敏感(S)，对庆大霉素、妥布霉素敏感性下降为中介[1]，对头胞类、氨苄青霉素、羧苄青霉素、四环素、氯霉素、复方：新诺明、多粘菌素B等耐药(R)。

该菌株耐紫外线照射。

动物试验结果表明,该菌对小白鼠有致病力。

【关键词】粘质沙雷氏菌分离生物学特性【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）12-0355-01 1. 病历分析我院2012年12月收治一呼吸内科患者，患者王XX、男、68岁、严重的呼吸道感染症状，畏寒、寒战后发热40℃，抗炎治疗5天无效转入我院。

人院后查体：T：38.9℃；P：104次／分；R：20次／分；BP：110／89mmHg；X光片检查显示：左上肺感染灶。

WBC计数：28.2×109几，分类计数：中性分叶核粒细胞：88％、淋巴细胞：11％。

单核细胞：1％；血红蛋白：60g／L；CT提示两侧胸腔积液，积液常规检查提示为化脓性积液。

经补液抗炎及对症等支持治疗，患者一般情况较差，拌脓毒血症，多脏器能衰竭，家属要求出院。

2.微生物学检查2.1分离培养2.1.1仪器与试剂：MH琼脂平板、血平板(BAP)、中国兰平板(EMB)、麦康凯平板(MAC)均由杭州天和生物试剂公司提供，Vitek全自动细菌分析仪，35℃C02恒温孵育箱，GY-15e细菌鉴定卡，GPS-107药敏试验卡为生物梅里埃公司产品。

培养条件及培养基组分对粘质沙雷氏菌生长及产D-乳酸的影响

培养条件及培养基组分对粘质沙雷氏菌生长及产D-乳酸的影响满永博;范季瀛;苏刚;饶犇;沈亚领【摘要】According to flask experiments,the culture conditions of D-lactic acid production by Serratia marcescens are determined as follows:culture temperature of 34 ℃,pH value of 6.5,the inoculum amount of 5％,loading liquid of 150 mL/500 mL,two-stage(pre-aerobic culture to accumulated the thallus,later anaerobic fermentation) culture method.Effects of medium components on cell growth and lactic acid yield are studied.Glucose is selected as carbon source,yeast is selected as nitrogen source,and meanwhile appropriate metal ions are added into medium.The optimal medium components (g · L-1) are as follows:glucose 15,yeast 15,KH2 PO4 1.5,K2HPO4 · 3H2 O 2.0,MgSO4 · 7H2O 1.0,FeSO4 · 7H2O0.03,MnSO4 · H2O 0.005.Under the optimal culture conditions and medium components by shake flask fermentation,D-lactic acid yield increases from (13.5±1.29) g · L-1 to (29.0± 1.42) g · L-1 with optical purity over 97％.%通过摇瓶实验,确定粘质沙雷氏菌发酵生产D-乳酸的培养条件为:温度34℃,pH值6.5,种子波接种量5％,载波量为150 mL/500 mL,采用前期通气有氧培养至菌体对数生长后期、而后厌氧发酵产酸的两阶段培养工艺.考察培养基各组分对菌体生长及乳酸产量的影响,确定葡萄糖及酵母粉作为碳、氮源,并补充添加适量的无机氮.培养基各组分如下(g·L-1):葡萄糖15,酵母粉15,KH2 PO41.5,K2HPO4·3H2O 2.0,MgSO4·7H2O 1.0,FeSO4·7H2O 0.03,MnSO4·H2O 0.005,以此培养条件及培养基配方进行摇瓶发酵,D-乳酸产量由(13.5±1.29)g·L-1提高至(29.0士1.42)g·L-1,提高一倍以上,光学纯度大于97％.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2013(030)007【总页数】6页(P56-60,70)【关键词】粘质沙雷氏菌;D-乳酸;培养条件;培养基组分【作者】满永博;范季瀛;苏刚;饶犇;沈亚领【作者单位】华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所,上海 200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所,上海 200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所,上海 200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所,上海 200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所,上海 200237【正文语种】中文【中图分类】TQ921.3乳酸［1－4］是一种重要的有机酸，是合成多种物质的基础原料，同L－乳酸相比，D－乳酸的经济价值更大，除应用在医药、日化和化学工业外，其更重要的应用价值体现在可以改良聚乳酸特性［5］，提升其熔点并延长降解时间。

加速老化实验

山东华普医疗科技有限公司加速老化试验版本/修改状态：生效日期：文件编号：发放号：控制状态：拟制：审核：批准：加速老化实验计划一、使用范围本公司生产的一次性使用氧气面罩，一次性使用鼻氧管，医用雾化器及其外包装。

二、过程要求1、微生物屏障2、无毒性3、物理特性的符合性4、化学特性的符合性5、生物特性的符合性三、预计完成时间：老化实验前全能性实验：2012年5月20日前包装验证实验：2012年5月22日前阻菌实验：2012年5月24日前老化实验时间：2012年5月26日前加速第一年验证无菌实验：2012年6月18日前全能性实验：2012年6月25日前包装验证实验：2012年6月25日前阻菌实验：2012年6月27日前加速第二年验证无菌实验：2012年7月1日前全能性实验：2012年7月8日前包装验证实验：2012年7月8日前阻菌实验：2012年7月10日前加速第三年验证无菌实验：2012年7月15日前全能性实验：2012年7月22日前包装验证实验：2012年7月22日前阻菌实验：2012年7月24日前加速第四年验证无菌实验：2012年7月29日前全能性实验：2012年8月6日前包装验证实验：2012年8月6日前阻菌实验：2012年8月8日前加速第五年验证无菌实验：2012年8月13日前全能性实验：2012年8月20日前包装验证实验：2012年8月20日前阻菌实验：2012年8月22日前目的：在有效期三年内和三年有效期外，通过对我公司产品检验实验，来验证我们的产品规定为三年的有效期是有科学依据的，可靠有效的。

加速老化试验(一)老化试验1.目的：通过老化试验以后对产品的外观、无菌、热原试验等全性能试验来证明本公司生产的产品规定为三年的有效期是有科学依据，可靠有效的。

2.范围：本公司生产的一次性使用氧气面罩，一次性使用鼻氧管射器，医用雾化器。

3.测试依据：按ISO11137-95和ISO11607-2003方法4.样品来源：成品留样产品（二）试验准备1.本次试验所需样品10只，从中随机抽取2只用于试验前的产品的全能性检验，抽取2 只做包装材料渗漏性试验，抽取2只做真空泄露性试验，抽取2只做爆破和蠕动性试验，抽取2只做阻菌性试验（琼脂接触攻击性试验）。

微生物检验实验室沙雷菌属标准操作规程

微生物检验实验室沙雷菌属标准操作规程1. 概述沙雷菌属包括粘质沙雷菌、液化沙雷菌、气味沙雷菌、普城沙雷菌、深红沙雷菌、无花果沙雷菌、嗜虫沙雷菌、居泉沙雷菌、格里蒙沙雷菌和变形沙雷菌等10种。

在临床标本中以粘质沙雷菌最为常见。

2. 标本类型痰液、脑脊液、穿刺液、脓液、血液等标本。

3. 鉴定3.1 形态与染色：革兰阴性杆菌。

3.2 培养特性经35℃培养18-24小时，在血琼脂平板上菌落较大，呈红色；在麦康凯琼脂平板上菌落呈红色，部分菌株呈无色菌落。

3.3 生化反应氧化酶试验阴性，TSI为K/A；发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇水杨苷和肌醇，不发醇乳糖、卫矛醇和鼠李糖；IMViC--++，DNA酶、脂酶、明胶酶、赖氨酸脱羧酶和鸟氨酸脱羧酶试验均为阳性。

3.4 鉴别要点3.4.1 本菌特征：大部分菌株产生红色色素，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，DNA酶、脂酶、明胶酶、赖氨酸脱羧酶和鸟氨酸脱羧酶试验均为阳性。

3.4.2 粘质沙雷菌与深红沙雷菌和普城沙雷菌的鉴别：三者均能产生两种不同的红色色素（灵菌红素和吡羧酸），但粘质沙雷菌发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖和棉子糖，鸟氨酸脱羧酶试验阳性；深红沙雷菌则相反。

普城沙雷菌发酵阿拉伯糖，赖氨酸脱羧酶试验阴性，可与粘质沙雷菌相鉴别。

3.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验参见氧化酶试验标准操作规程。

3.5.2 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行菌鉴定。

4. 药敏参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。

5. 质量控制参见质量管理程序。

检验结果解释与分析粘质沙雷菌易产生诱导酶，临床上使用三代头孢菌素治疗的过程易产生耐药性，通常在治疗3-4日左右即转化为耐药菌株，因此应定期复查菌株的敏感性。

临床意义粘质沙雷菌长期以来认为对人体无害，但由于该菌具有侵袭性并对许多常见抗生素有耐药性，已成为临床感染的标本中一种重要的病原菌。

可导致肺炎、泌尿道感染、败血症和外科手术感染等。

粘质沙雷氏菌使用说明

粘质沙雷氏菌编号名称北京华越洋生物NRR00340 粘质沙雷氏菌基本信息：名称：粘质沙雷氏菌规格：300ul甘油菌储存温度：-‐80℃基因组：粘质沙雷氏菌简介：粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens ) 又称灵杆菌，一种产生鲜红色素的细菌，存在于空气和水中，可生长在动、植物性食品中。

为细菌中最小者，约0.5×(0.5～1.0)微米。

近球形短杆菌，但形态多样。

粘质沙雷氏菌广泛分布于自然界，是水和土壤中的常居菌群，亦是临床上常见的条件致病菌，在机体免疫功能降低时可引起肺部和尿道感染以及败血症。

操作说明：1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。

也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

2，为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

冷冻管开封：用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。

菌株复溶：无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取1ml 左右复溶液，加入到冷冻管中。

轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。

菌株复壮：用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。

做好标识，在适宜温度下培养。

细菌在30-‐35℃培养箱中培养24-‐48h，真菌在23-‐28℃培养箱中培养24-‐72h （必要时，可适当延长培养时间）。

菌株传代：将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中（尽量增大接种量：如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓慢释放），适宜温度下培养，用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。

注意事项：1、菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放置会导致菌种衰退；2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；3、一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才能正常生长；4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时来电询问；5、某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态；培养过程中亦要保持厌氧状态；6、某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-‐10%CO2 促进生长；7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。