马桑内酯对大鼠海马神经元钠电流的作用
马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内及培养的神经元内PLCβ1的影响
( 摘要] 目的 揭示 星形胶质 细胞对大 鼠脑内及 培养 的神经元 磷脂 酶 e t f 1( P L C 3 I 1 )的影 响及其 在癫痫 发病 中 的作 用。 方 法 将马桑 内酯 激活 的 星形胶 质 细胞 条件 培养 液 ( a s t r o c y t e - c o n d i t i o n e d m e d i u m, A C M)注 射人正 常 S D大 鼠侧 脑 室 ,观察大 鼠的行为变化 ;运用 免疫 组织化学 方法 ,观察大 鼠大脑皮质 、海 马内 P L C 3 I 1 免疫 反应 的变 化 ;将培养 的神经元
随机 分为 2组 :1 .对 照组 ( 无 血清培养基组 ) ,2 .AC M 组 。各组 细胞分别 培养 4 、8 、1 2 h 后 ,免疫细胞 化学方法 观察 培 养神 经元 内 P L C I 3 1 表达的变化 ,We s t e r n b l o t 法检 测各组培养神经元 P L C I 3 1 含量 的变化 。结果 AC M 组大 鼠在 注射 AC M 后3 0 mi n出现癫痫行 为 ,2 h恢 复正 常 ;免疫组织 化学显示 : AC M 作 用后 4 h ,大 鼠大脑皮 质 、海 马 P L C l f l免疫反 应 阳性 神经元 数和平均光 密度值显著增 高 ( P <O . 0 5 ) ;培养 神经 元的免疫 细胞化 学染 色证 明 A C M 组在作 用 4 h时 P L C 3 I 1免疫 阳 性反 应产物 明显增加 ,与对 照组 比较有 明显差异 ( P <O . 0 5 ) ;We s t e n r b l o t 结果表 明 P L C I 3 1 含量在 AC M 作用 4 h较对照组
Hu a z h o n g U n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y, Wu h a n 4 3 0 0 3 0 , C h i n a ) [ Ab s t r a c t ] Ob j e c t i v e To e x p l o r e t h e e f f e c t s o f c o r i a r i a l e c t o n a c t i v a t e d a s t r o c y t e - c o n d i t i o n e d me d i — u m ( AC M)o n t h e P I C B 1 o f t h e b r a i n a n d t h e c u l t u r e d n e u r o n s , a n d t h e i r r o l e s i n e p i l e p t o g e n e s i s .Me t h _
大鼠海马神经元钠离子通道电流的记录与分析
外膜向外记录模式
• 形成细胞贴附记录模式后,采用继续施 加负压或者电击的方法打破细胞膜,就形 成了全细胞记录模式。在形成全细胞记录 模式后,将电极缓缓提起,逐渐脱离细胞, 同样由于细胞具有流动性,粘在电极尖端 的细胞膜会自动融合,这样细胞膜外面就 朝向电极极端外,形成外膜向外记录模式。
全细胞膜片钳技术
细胞膜离子通道
• 细胞膜上存在多种类型的离子通道,主要 有电压门控离子通道、配体门控离子通道 以及机械门控离子通道等。 • 本实验主要讨论使用膜片钳放大器测量门 控离子通道的方法。在大鼠海马组织细胞 膜上存在多种门控离子通道。电压门控钠 离子通道,电压门控钾离子通道以及电压 门控钙离子通道等
电压门控钠离子通道
膜片钳技术
• 膜片钳技术是一种通过微电极与细胞膜之 间形成紧密接触的方法,采用电压钳或者 电流钳技术对生物膜上离子通道的电活动 (尤其是可对单通道电流)进行记录的微 电极技术。
膜片钳技术的基本操作过程:
• 首先在细胞膜表面,给电极间断施加负压, 这样在玻璃微电极壁与膜之间就形成了紧 密接触,术语叫做高阻封接(Gigaohm Seal),其电阻达109(1G)以上,以使 离子不能从玻璃电极尖端与膜之间通过, 只能从膜上的离子通道进出。如果轻轻的 回撤电极,细胞膜可被撕下一片,能记录 着小片膜的跨膜离子电流。如果运气好的 话,这片膜上也许只有一个离子通道,可 以记录单通道电流。
• 持电位于-80mV,给予从-70mV至+60mV 的阶梯去极化脉冲电压刺激,步幅+10mV, 刺激波宽160ms,刺激频率0.5Hz,可记录 得到CA3区锥体神经元全细胞跨膜总电流.
•
从图中可知,全细胞跨膜总电流既有内向电流 成分,又有外向电流成分。内向电流主要发生在 刺激初期几毫秒,表现为快速激活和快速失活的 特性,之后外向电流成分被激活。
麻醉药对大鼠海马锥体神经元钠通道电流的影响和其机制
麻醉药对大鼠海马锥体神经元钠通道电流的影响及其机制孛文摘要弼蟊全麻原理楚麻醉学最重癸的基本理论之一,德全麻药俸蕉的确切棱I镅楚今不明。
一般认为吸入全麻药的作用机制较为复杂,其中可能包涵静脉全麻药的作最视翱。
不管吸入全麻药宏鬣秘徽蕊承平的作震部位如衙,现在可以肯定分子水平的作用部位是在神经细胞膜。
越来越多的证据表明吸入麻醉药发挥效应的部位是缫臆膜上的离子逶道。
在诸多的离子通道中,麻醉药对13.一乙酰胆碱受体(nAChR)和r一氨基丁酸度受体(GABA。
歉)通遘影嚷的研究最多,因实验条件翻药物裁量簿嚣索不同,研究结果不一。
一般认为nAChR通道不是全麻药作用的主要靶位。
尽管GABA。
受体透道燕丈家公认豹全麻药主要靶位之一,在其蕊臻麻醉浓度主要增强GABA对该受体通道的效应,但融发现许多用对该通道作鲻不能解释的现象,敬全麻药对其它兴奋性离子遥道的作蔫邑受蓟鬟视。
在中枢神经系统(CNS)主要的兴奋性离子通道中,钠通道为主要的兴奋性电压}-】控登离子通道,是可兴奋缨魏产生动作电彼及传释神经摔凌的关键部位和决定因索,虽以前的实验发现枪乌贼巨轴突模型的钠通道对全麻药不敏感,僵磊聚的研究证臻l瓶床浓度的全麻药对鬣脑钠遵遂、肺泡ll登缅胞钠通道及心肌细胞钠通道都有显著的抑制作用,且遵循Meyer—Overton规则。
因茈,全麻药对脑钠通道的影响以及此影响在全麻串的地位值得研究。
本课题分三部分研究异丙酚(静脉麻酩药)、异氟醚(吸人麻醉药)和利多卡因(局部麻醉药)对急健分离的CNS铺通道的影响。
第一部分异丙酚对大鼠海马锥体神经元钠通道电流的影响材料和方法选用10~14dSD大鼠,雌雄不拘,体重20—309,由徐州医学院实验动物中心提供。
将实验大鼠快速断头,置于0~4℃氧饱和的人工脑脊液(ACSF)中分离出海马,手工切成约5001山m厚的脑片。
将脑片放人孵育槽中用ACSF漂浮孵育60rain,连续通以95%O:+5%CO:维持pH在7.35~7.40。
马桑内酯致痫大鼠海马结构内SYN和GFAP的表达及其意义
鼠 3 0只 , 机 分 为 模 型 组 及 对 照 组 , 用 马 桑 内 酯 (0 g k ) 脑 室 注 射 法 建 立 急 , 痫 随 采 5 ̄ / g 侧 J 生癫
( zo 4 0 0 Lu h u 6 6 0 ) Ha Xu F c i H u n ih n n Yi u u a g Jc u e l ta
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陕 西医学 杂志 2 0 0 7年 9月第 3 6卷第 9期
马桑 内酯致 病大 鼠海 马结构 内 S YN 和 G AP的表 达及 其意义 △ F
泸 州医学 院组织 学 与胚 胎学教研 室( 泸州 6 6 0 ) 韩 艺 4 0 0 徐 富翠 黄 吉春 王 巧稚
mo e u a a e n t ed n a e g r s( lc lrl y r i h e t t y u P< O 0 ) . 5 .Co a e t o to r u mp r d wih c n r l o p.t e a e a e o t a e s t g h v r g p i l n iy c d
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马桑内酯对大鼠海马神经元细胞内游离钙离子浓度的影响
马桑内酯对大鼠海马神经元细胞内游离钙离子浓度的影响赖晓晖;张勤;周东【期刊名称】《生物医学工程学杂志》【年(卷),期】2008()4【摘要】以荧光探针Fluo-3/AM为胞浆内游离钙特异性指示剂,通过激光扫描共聚焦显微镜动态监测急性分离SD大鼠(出生后7~14d)海马神经元细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化情况,以了解钙离子及钙通道在癫痫发病中的作用,探讨马桑内酯(coriaria lactone,CL)调节神经细胞内钙稳态的机理。
实验发现,CL能使急性分离大鼠海马神经元[Ca2+]i增加;nifedipine和低浓度NiCl2虽可延迟,但不能完全阻断这种作用。
除促使电压依赖的T-、L-型钙离子通道开放外,CL尚可通过其他途径增加海马神经元内[Ca2+]i,改变细胞兴奋性而致痫。
【总页数】5页(P912-916)【关键词】马桑内酯;海马神经元;钙离子;Fluo-3;癫痫【作者】赖晓晖;张勤;周东【作者单位】四川大学华西医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R742.1【相关文献】1.芋螺毒素SO3对大鼠海马神经元缺氧后胞内游离钙离子浓度的影响 [J], 蒋世卫;周晓巍;丁爱石;范明;黄培堂2.致痫剂青霉素对新生大鼠锥体神经元细胞内游离钙离子浓度的影响 [J], 邹晓毅;赵晓梅;章为;方一心3.垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻谷氨酸引起的大鼠海马神经元细胞内钙离子浓度升高的可能机理 [J], 董艳;韩晞;唐铁山;娄素杰;路长林;黄秀英;孙方臻4.异丙酚对N-甲基-D-天冬氨酸诱发大鼠海马神经元内游离钙离子浓度的影响 [J], 关婷婷;吴新民5.五味子酮对β-淀粉样蛋白诱导大鼠海马神经元内游离钙离子浓度变化的影响[J], 朱嘉琦;拓西平;贾丽艳;周俊因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大鼠海马神经元钠离子通道电流的记录与分析
大鼠海马神经元钠离子通道电流的记录与分析摘要:离子通道是生物电活动的基础。
自1976年德国的E.Neher和B.Sakmannw创立了膜片钳技术以来使得研究细胞膜上单个离子通道的特性成为可能。
膜片钳技术是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一的或者多个离子通道分子活动的技术。
l980年以来,由于吉欧姆阻抗的封接方法的确立,此技术被越来越多地应用于细胞研究,点燃了细胞和分子水平的生理学研究的革命之火。
在国内也掀起了一股离子通道的研究热潮。
本文主要介绍了运用膜片钳技术测量大鼠海马神经元钠离子通道电流的方法,同时对测量的数据进行了分析处理,实验结果表明:钠离子通道具有电压依赖性,钠通道的激活曲线反映了通道开启的速度非常迅速(几个毫秒),钠通道的I-V曲线反映了通道的激活过程、阈电位大约-50mV左右、反转电位60mV、内向整流特性等。
此实验结果可以做为辐射组细胞的对照组。
关键词:海马神经元、钠离子通道、膜片钳技术、全细胞记录模式、I-V曲线引言过去的二十世纪是一个伟大的时代,人类在科学技术方面得到了巨大的发展。
人类不再仅仅局限在单一的学科内进行研究,而是将各种学科相互结合,产生了诸如生物物理学、生物化学等交叉学科,取得了巨大的成就。
生物电的研究便是其中最重要的成就之一。
科学家在很早便注意到了生物组织中存在生物电流的现象,并进行了初步研究与探索。
18世纪,电学研究逐渐兴起,Galvani首次在生物体(蛙)上发现了生物电现象。
1902年J.伯恩斯坦在他的膜学说中提出神经细胞膜对钾离子有选择通透性。
1939年A.L.霍奇金与A.F.赫胥黎用微电极插入枪乌贼巨神经纤维中,直接测量到膜内外电位差。
1949年A.L.霍奇金和B.卡茨在一系列工作基础上提出膜电位离子假说,认为细胞膜动作电位的发生是膜对纳离子通透性快速而特异性地增加,称为“钠学说”。
尤其重要的是,1952年A.L.霍奇金和A.F.赫胥黎用电压钳技术在枪乌贼巨神经轴突上对细胞膜的离子电流和电导进行了细致地定量研究,结果表明Na+和K+的电流和电导是膜电位和时间的函数,并首次提出了离子通道的概念【1】。
大鼠脑海马神经元原代培养方法的建立及其纯度的鉴定
大鼠脑海马神经元原代培养方法的建立及其纯度的鉴定任玥;苏秋香;张勇;张庭深【摘要】目的:为建立一种稳定的大鼠胎鼠海马神经元培养方法并能够有效的鉴定其纯度.方法:分离Wista大鼠胚胎并取海马组织,比较两种常用酶,胰酶和木瓜酶消化效果对海马神经元产量的影响及两种不同培养方法对海马神经元纯度的影响.结果:培养的神经元胞体清晰晕光明显,应用两种不同的酶消化对神经元的产量影响无明显统计学意义,而应用无血清方法培养神经元在纯度上要优于应用阿糖胞苷去除神经胶质细胞的培养方法.结论:采用木瓜酶消化并用无血清培养的方法培养大鼠胎鼠海马神经元,稳定可靠,提高了原代神经元培养的产量和纯度.【期刊名称】《沈阳医学院学报》【年(卷),期】2010(012)004【总页数】3页(P203-205)【关键词】海马神经元;原代培养方法;木瓜酶;阿糖胞苷【作者】任玥;苏秋香;张勇;张庭深【作者单位】沈阳医学院教务处,辽宁,沈阳,110034;基础医学院组织与胚胎学教研室;基础医学院组织与胚胎学教研室;基础医学院组织与胚胎学教研室【正文语种】中文【中图分类】Q954.671977 年,Banker and Cowan[1-3]首次在体外成功的分离并培养了大鼠胚胎海马神经元。
此后随着研究的深入,胎鼠海马神经元的体外分离培养技术被不断的改进和提高。
但在原代培养中神经元的纯度和产量方面还存在一些急待解决的问题。
本研究采用了木瓜酶和胰酶消化的方法来比较神经元产量上的差异,并采用血清培养基加入阿糖胞苷和无血清培养基的培养方法比较其对胎鼠海马神经元纯度的影响。
旨在探讨一种高效、稳定的胎鼠神经元的原代培养方法,为中枢神经系统的研究提供理想的细胞模型。
1 材料方法1.1 实验动物孕18 d的SPF级Wista大鼠,由沈阳医学院实验动物中心提供。
1.2 主要化学试剂 DMEM/F12(Invitrogen),Neurobasalmedium、B27 supplement(Gibco),多聚赖氨酸 (Sigma),阿糖胞苷 (Ara-C,Invitrogen),L-谷氨酰胺 (L-Gin,Sigma)、庆大霉素(Gibco),胎牛血清 FBS(Gibco),马血清HOS(Gibco),其他试剂均为国产分析纯。
马桑内酯致痫大鼠海马区GABA和G1u在神经元和神经胶质内时空变化研究
元与神经胶质之间的时空变化情况 。方法 采用免疫细胞化学方法 对癫痫发 生不 同时间段 的 鼠脑海 马区进行 G B A A和 Gu l
的标记。结果 癫痫发作前期及 间歇期 , 马区 G B 海 A A和 G u l 在神 经胶 质内聚集 明显 , 而癫痫发作期 , A A和 Gu在神经 GB l 元 内聚集明显。结论 癫痫发作过程 中, A A和 Gu G B l 存在一个从神经胶质转移到神经元后再 转移到神经胶 质的过程 , 这个
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28 4第6第1 0年 月 4 1 0 卷 期
・ 基础 研 究 ・
马桑内 痫大鼠 酯致 海马区G B A A和Gu 神经元和 胶质内 l在 神经 时 化研究 空变
张 秀丽 郑德 枢
(. 1 大连市 中心医院神经内二科 , 大连 16 3 ;. 1032 广州医学院神经科 学研究所 , 广州 50 6 ) 120 【 摘要】目的 观察马桑 内酯致癫痫 鼠脑海 马内不同时间段兴奋性神 经递质谷氨酸 与抑 制性 神经递质 一氨基 丁酸在神经
St y he Te por ud oft m alCha e of GABA d u ng n a Gl bet e n e on d e w e N ur n a N u- r la n i og i i H ppoc m pus ofRatI uc d a nd e by Cor a i La one i r a t
马桑内酯在大鼠海马脑片上引起的癫痫样放电活动
光 镜 观 察发 现 各 组 均 无 明 显 的 病 理 改 变 用 于 电 镜 实 验 的 动 物分 为 空 白对 照 组
、
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生理 盐水对 照 组 和 点 燃 组
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区 组 织 块 进 行透 射 电 镜 观
等的 整 体生理 效 应 尚无 报 导
的影 响
,
本 实 验 的 目 的在 于 观 察 该 药 对 健 康 麻 醉 犬 循 环
呼吸 功 能
以 助 了 解 其 临床 用 药 的 可 行 性
,
本 实 验 用 健康 犬 8 只 顺 序 分另 lJ 给予 O 积
P C一
雌 雄不拘
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以 匀速静脉 推 注 的 方法 ( )
亮
谢扬 高
柴慧霞
( 华 西 医 科 大 学 生 理 学教 研 室 )
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成分 获成
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目前
运 用 C l 在 整 体 动 物身 上 建立 急
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发 现点燃 组动 物 海马 C A 和 C A
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马桑内酯对大鼠海马神经元钠电流的影响
马桑内酯对大鼠海马神经元钠电流的影响张勤;赖晓晖;廖大清;刘洁;周东【期刊名称】《四川大学学报:医学版》【年(卷),期】2007(38)1【摘要】目的研究马桑内酯(coriaria lactone,CL)对大鼠海马神经元钠离子通道电流的影响,探讨该影响在CL致痫中的意义。
方法利用全细胞膜片钳技术,在急性分离的大鼠海马神经元上记录钠电流,观察CL对电流幅度的影响。
结果经0.1 mg/mL、0.2 m g/mL的CL作用后,海马神经元钠电流有不同程度的增加〔CL 0.1 m g/mL组的最大峰值电流密度为(-90.11±14.02)pA/pF,增幅为17.32%±8.52%;CL 0.2 m g/mL组的最大峰值电流密度为(-111.52±6.65)pA/pF,增幅为37.98%±4.91%〕;经与对照组相比,CL 0.2 m g/mL组(P<0.05)的变化较CL 0.1 m g/mL组(P>0.05)明显。
结论CL使海马神经元电压依赖性钠电流的幅度增大,从而改变细胞的兴奋性,引发异常放电。
【总页数】4页(P119-122)【关键词】马桑内酯;海马神经元;钠电流;膜片钳技术;癫痫【作者】张勤;赖晓晖;廖大清;刘洁;周东【作者单位】四川大学华西医院神经内科;四川大学麻醉与危重急救研究室;四川省人民医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R741【相关文献】1.海马电刺激对耐药性颞叶癫痫大鼠CA1区神经元钠通道电流的影响 [J], 伍国锋;洪震;高宾丽;周凤2.拉莫三嗪对大鼠急性分离海马神经元钠电流的影响 [J], 笱玉兰;朱遂强;唐明;罗利俊;陈国华3.人参皂苷Rb1对缺血大鼠海马神经元持续性钠电流的影响 [J], 江炜炜;姜正林;柯开富4.人参皂苷Rb_1对缺血大鼠海马神经元持续性钠电流的影响 [J], 江炜炜;姜正林;柯开富5.大鼠海马神经元钙电流特性及马桑内酯对其影响的研究 [J], 赖晓晖;张勤;周东因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
马桑内酯对培养的海马神经元γ-氨基丁酸和谷氨酸的影响——免疫细胞化学研究
马桑内酯对培养的海马神经元γ-氨基丁酸和谷氨酸的影响——免疫细胞化学研究余达经;刘云华;周洁萍;朱长庚【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】1996(000)002【摘要】用免疫细胞化学方法,观察研究了马桑内酯(CL)对培养的海马神经元内γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)神经元的影响.结果表明:CL作用后,GABA免疫反应阳性神经元数目减少,反应强度减弱;Glu免疫反应阳性神经元数目变化不明显,但反应增强.推测:CL可能引起海马神经元兴奋性增高是使动物模型致痫的基础,其机理可能与阻断GABA的合成途径有关.【总页数】5页(P193-197)【作者】余达经;刘云华;周洁萍;朱长庚【作者单位】同济医科大学基础医学院解剖学教研室;同济医科大学基础医学院解剖学教研室;武汉430030;武汉430030【正文语种】中文【中图分类】R742.1【相关文献】1.Toll样受体4拮抗剂厄立特兰对抑郁症大鼠前额叶和海马神经元发生和γ-氨基丁酸谷氨酸平衡的影响 [J], 丁迎;戢汉斌;陈钰;苏邹2.Toll样受体4拮抗剂厄立特兰对抑郁症大鼠模型前额叶和海马神经元发生和γ-氨基丁酸谷氨酸平衡的影响 [J], 彭亮; 董汉宁; 余雪丹; 刘忠纯3.白细胞介素-2对大鼠海马谷氨酸能神经元和γ-氨基丁酸能神经元的影响———免疫组织化学和狭线杂交研究 [J], 林勇;刘庆莹;朱长庚;薛德麟4.马桑内酯致痫大鼠大脑皮层,海马谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量的测定 [J], 王群;龙洁;张在强;赵性泉5.马桑内酯对培养的大鼠海马胶质细胞的影响──胶质细胞增生及胶质原纤维酸性蛋白免疫细胞化学观察 [J], 周洁萍;刘云华;余达经;朱长庚因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
马桑内酯在大鼠离体海马脑片上引起的癫痫样放电活动
马桑内酯在大鼠离体海马脑片上引起的癫痫样放电活动
郭亮;谢扬高
【期刊名称】《华西医科大学学报》
【年(卷),期】1990(021)001
【摘要】采用大鼠离体海马脑片技术,建立了马桑内酯(Coriaria lactone,CL)引起的海马CA 1区锥体细胞癫痫样放电活动模型,并初步探讨了CL的致痫作用机理,可能与直接影响锥体细胞固有爆发放电能力有关。
【总页数】4页(P50-53)
【作者】郭亮;谢扬高
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R338.8
【相关文献】
1.无镁液灌流大鼠海马脑片自发性癫痫样放电的药物敏感性 [J], 王天佑;徐立新;董丽萍;张莉
2.马桑内酯对大鼠海马脑片细胞外Na+、K+活度的影响 [J], 邹飞;倪再玉;袁太宁;王尊琼;郑世玲;王阿敬
3.马桑内酯点燃大鼠海马脑片CA1区的双脉冲... [J], 郭亮;柴慧霞
4.马桑内酯在大鼠海马脑片上引起的癫痫样放电活动 [J], 郭亮;谢扬高;柴慧霞
5.SC_(100)Na对马桑内酯点燃大鼠海马脑片CA_1区锥体细胞群体锋电位的影响 [J], 刘晓兰;柴慧霞;郭亮;谢扬高
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马桑内酯对瞬时外向钾电流的影响及在致痫机制中的作用
马桑内酯对瞬时外向钾电流的影响及在致痫机制中的作用杨烨;邬丽莎;吴民泸;何涛;曾晓荣【期刊名称】《山西医药杂志》【年(卷),期】2005(34)10【摘要】目的本实验拟采用全细胞膜片钳记录技术,研究马桑内酯(CL)对培养大鼠皮层神经元瞬时外向钾电流(ⅠA)的影响,从而探讨CL致癫痫的电生理机制及与ⅠA 的关系,为临床更有效地防治癫痫提供新的依据.方法采用全细胞膜片钳技术记录ⅠA,进行以下方面实验:①培养大鼠皮层神经元ⅠA的特性及鉴定;②三种不同浓度CL对神经元ⅠA的影响;③CL对神经元ⅠA的I-V曲线的影响.结果测试电压为+65 mV时,三种不同浓度CL后均可抑制IA的电流振幅,其抑制差异均有统计学意义.结论 CL具有抑制瞬时外向钾电流的作用,且在一定范围内抑制呈剂量依赖性,推测CL致癫痫的发生机制可能与IA的抑制有关.【总页数】3页(P829-831)【作者】杨烨;邬丽莎;吴民泸;何涛;曾晓荣【作者单位】泸州医学院基础医学院,646000;泸州医学院基础医学院,646000;泸州医学院基础医学院,646000;泸州医学院基础医学院,646000;泸州医学院心肌电研究室【正文语种】中文【中图分类】R74【相关文献】1.马桑内酯对大鼠瞬时外向钾电流的影响 [J], 杨烨;邬丽莎;吴民泸;曾晓荣;谢华富2.谷氨酸NMDA受体在马桑内酯致痫中的作用 [J], 邬丽莎;柴慧霞3.Kv 1.4和Kv4.3在狗心室瞬时外向钾电流中的作用 [J], 张梅4.瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构中的作用 [J], 刘星;张良胜;诸波;査克岚;张雪梅;杨悠;范忠才5.利血平对马桑内酯致痫作用和癫痫小鼠脑内CAMP水平的影响 [J], 黄梅;谢扬高因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
马桑毒内酯对大鼠海马锥体神经细胞内钙稳态的影响
马桑毒内酯对大鼠海马锥体神经细胞内钙稳态的影响邹晓毅;曾红;郑洪波;张杰;李胜富【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2004(008)025【摘要】背景:神经元异常放电是癫痫的基本特征,这种异常放电的基础是细胞内外离子的跨膜运动,然而癫痫时是否存在钙离子内流,神经元膜上的钙通道是否开放还不清楚.目的:了解钙离子及钙通道在癫痫发病中的作用,探讨马桑毒内酯(coriamyrtiry,CM)调节神经细胞内钙稳态的机制.设计:培养的原代神经元随机分成:正常对照组;致痫组;尼莫地平组.利用激光扫描共聚焦显微镜技术观察胞内游离钙离子浓度的变化.地点和对象:以培养的Wistar乳鼠海马锥体神经元为靶细胞进行测试,实验在四川大学华西医院完成.干预:正常对照组不加任何条件;致痫组加入不同浓度的致痫剂CM.根据加入CM浓度的不同,又分为致痫10 mL/L组、致痫20 mL/L 组、致痫40mL/L组、致痫80 mL/L组.尼莫地平组同时加入CM(40 mL/L)和尼莫地平.三组均培养24 h后以Fluo-3进行负载,利用激光扫描共聚焦显微镜检测.主要观察指标:测量并记录锥体神经元和背景的荧光强度,以相对荧光强度代表游离钙离子值.结果:正常组神经细胞内Ca2+浓度为95.43±10.52,经致痫剂CM作用后,神经细胞内Ca2+浓度致痫10 mL/L组为129 9.87±68.53,致痫20 mL/L组为133 3.00±55.99,致痫40 mL/L组为131 5.33±55.73,致痫80mL/L组为137 9.47±57.11,高于正常组(P<0.01),但其升高不呈剂量依赖性(P>0.05);经钙通道阻滞剂尼莫地平处理后,CM仍能引起神经元细胞内Ca2+浓度升高(321.60±22.80,P <0.01),但与单纯使用CM组相比仍有明显差异(P<0.01).结论:L-型钙通道开放在痫性放电的发生、发展上起了重要作用,促进钙通道开放可能是马桑毒内酯致痫的重要途径之一.%BACKGROUND: Abnormal discharge of neurons is the basic feature of epilepsy, which is based on the transmembrane movements of ions inside or outside cells. However, whether there is influx of Ca2 + and the opening of the calcium channels on neuronal membrane in epilepsy are still unknown.OBJECTIVE: To investigate the role of Ca2 + and calcium channels in the pathogenesis of epilepsy and to discuss the mechanism of Coriamyrtin(CM)in the regulations of intracellular calcium homeostasis.DESIGN: Primary cultured hippocampal pyramidal neurons were randomly allocated into control group, epileptic group, and Nimodipine group. The levels of intracellular free calcium ion ( [ Ca2 + ] i) were tested by Laser Confocal Scanning Microscopetechniques(LCSM).SETTINGS and MATERIALS: The primary cultured single pyramidal neurons of hippocampus in Wistar suckling rats were used as target cells in our study. This experiment was completed in West China Hospital affiliated to Sichuan University in Chengdu, China.INTERVENTION: No intervention was given to control group(group A). CM of different concentrations was given into epilepsy group (group B) . According to the different concentration of CM, group B was divided into 10 mL/L of CM group (group B1), 20 mL/L of CM group(group B2), 40 mL/L of CM group (group B3), and 80 mL/L of CM group(group B4). 40 mL/L of CM and Nimodipine were given simultaneously into Nimodipine group (group C). Neurons of these 3 groups were loaded by Fluo-3 after being cultured for another 24 hours following intervention. The intracellular Ca2+ levels of neurons were detected by LCSM.MAIN OUTCOME MEASURES: Fluorescentintensity of pyramidal neurons and the background were measured and recorded. The relative fluorescent intensity represented the values of [Ca2+ ]i.RESULTS: The [Ca2 + ]i concentration in the control group was 95.43 ± 10.52.After reacted with CM, a epilepsy inducer, the [Ca2 + ]i concentration of group B1 was 129 9.87 ±68.53, group B2 was 133 3.00±55.99, group B3 was 131 5.33 ±55.73, and group B4 was 137 9.47 ±57.11, which were higher than normal group (P < 0.01), but with no dose-dependent( P > 0.05).After the management of Nimodipine, a calcium channel blocker, CM still cause an elevation of [Ca2 + ] i (321.60 ± 22. 80) compared with that of control group ( P < 0. 01 ), which was also significantly different from that of group B(P < 0.01).CONCLUSION: The opening of L-calcium channels plays an important role in the pathogenesis and development of epilepsy. It may be one of the important approaches of Coriamyrtin-induced epilepsy to promote the opening of calcium channels.【总页数】2页(P5456-5457)【作者】邹晓毅;曾红;郑洪波;张杰;李胜富【作者单位】四川大学华西医院神经内科,四川省成都市,610041;四川大学华西医院神经内科,四川省成都市,610041;四川大学华西医院神经内科,四川省成都市,610041;四川大学华西医院移植免疫室,四川省成都市,610041;四川大学华西医院移植免疫室,四川省成都市,610041【正文语种】中文【中图分类】R74【相关文献】1.马桑内酯对大鼠海马锥体神经元钙激活钾通道的影响 [J], 邹晓毅;赖晓晖;商慧芳;周树舜;曾晓荣;杨艳2.马桑内酯对大鼠海马锥体神经元钙激活钾通道的影响(英文) [J], 邹晓毅;赖晓晖;商慧芳;周树舜;曾晓荣;杨艳3.马桑内酯对大鼠海马神经元细胞内游离钙离子浓度的影响 [J], 赖晓晖;张勤;周东4.马桑内酯对大鼠海马锥体神经细胞内钙稳态的影响 [J], 邹晓毅;曾红;郑洪波;张杰;李胜富5.SC_(100)Na对马桑内酯点燃大鼠海马脑片CA_1区锥体细胞群体锋电位的影响 [J], 刘晓兰;柴慧霞;郭亮;谢扬高因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
马桑内酯对大鼠脑突触膜Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶作用的研究
马桑内酯对大鼠脑突触膜Ca^(2+),Mg^(2+)-ATP酶作用的研究朱晓峰;朱长庚;赵西龙【期刊名称】《中国药学杂志》【年(卷),期】1997(32)1【摘要】目的:探讨致痫剂马桑内酯(coriarialactone)对大鼠大脑皮层突触膜Ca2+,Mg2+ATP酶的作用。
方法:酶底物动力学分析(Hanes作图法)。
结果:马桑内酯对Ca2+,Mg2+ATP酶具有抑制作用,在1.2×10-9~6.0×10-7mol·L-1范围内,随浓度增加其抑制作用增强。
此作用有明显的时效关系,抑制作用随作用时间延长而增强。
酶底物动力学分析表明,马桑内酯对该酶的抑制属非竞争性抑制。
结论:马桑内酯是Ca2+,Mg2+ATP酶的强力抑制剂。
本文对Ca2+,Mg2+ATP酶与胞内游离钙之间的关系及该酶抑制在癫痫发病机制中的意义进行了讨论。
【总页数】3页(P14-16)【关键词】马桑内酯;二磷酸腺苷酶;脑突触膜;钙;镁【作者】朱晓峰;朱长庚;赵西龙【作者单位】重庆医科大学神经病学研究所;同济医科大学脑研究室;中国预防医学科学院环境卫生监测所【正文语种】中文【中图分类】R971.6【相关文献】1.维拉帕米对大鼠脑突触体内Ca2+和Ca(2+)Mg(2+)—ATP酶的影响[J], 董志;薛春生2.丙泊酚对大鼠脑突触体Na^+,K^+-ATP酶和Ca^(2+)-ATP酶活性的影响 [J], 王钧;胡兴国;曾因明;许鹏程;段世明3.马桑内酯对大鼠大脑皮层突触膜Ca^(2+)、Mg(2+)-ATP酶作用的量效、时效关系 [J], 刘德武;杨霄伟;朱晓峰4.赛庚啶对大鼠脑突触体Ca^(2+)水平和Ca^(2+)·Mg^(2+)-ATP酶活性的影响[J], 袁成;王景祥;于金萍;曾林因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马NMDA受体亚单位1(NMDAR1)mRNA表达的变化
马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马NMDA受体亚单位1(NMDAR1)mRNA表达的变化王群;阮旭中;史庭慧;张苏明【期刊名称】《中风与神经疾病杂志》【年(卷),期】2000(017)001【摘要】目的探讨癫痫发病的分子机制.方法采用原位杂交技术,研究了马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚单位1(NMDAR1)mRNA表达的变化.结果马桑内酶致痫大鼠顶叶大脑皮层及海马齿状回NMDAR1 mRNA水平显著高于生理盐水对照组(P<0.01,P<0.05).结论马桑内酯上调脑组织内NMDAR1 mRNA水平,此可能是其致痫及惊厥易感性增加的分子机制之一.【总页数】3页(P17-19)【作者】王群;阮旭中;史庭慧;张苏明【作者单位】北京天坛医院神经内科,北京,100050;同济医科大学同济医院神经内科,湖北,武汉,430030;同济医科大学同济医院神经内科,湖北,武汉,430030;同济医科大学同济医院神经内科,湖北,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R742.1【相关文献】1.海仁藻酸致痫老年大鼠脑NMDA受体亚单位R1蛋白表达的变化 [J], 王赞;孟红梅;林卫红;张淑琴2.马桑内酯致痫大鼠大脑皮层及海马神经元钙离子活度的变化 [J], 谢虹;郭斌3.马桑内酯致痫大鼠大脑皮质、海马NMDA受体亚单位1 mRNA表达的动态变化 [J], 王群;阮旭中;史庭慧;张苏明;朱长庚4.马桑内酯致痫时大鼠大脑皮层和海马诱发电位的特征 [J], 张玉芹;王阿敬;胡谋先;邹飞5.马桑内酯致痫大鼠大脑皮层,海马谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量的测定 [J], 王群;龙洁;张在强;赵性泉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
马桑—新西兰的毒蜜
马桑—新西兰的毒蜜
斯图.,BA;龚蜜
【期刊名称】《中国养蜂》
【年(卷),期】1992(000)004
【摘要】1890年以来,蜂蜜中毒事件在新西兰时有报道,其中有些是致命的。
自1945年一起严重的中毒事件后,终于搞清中毒的原因,与此有关的是当地一种马桑属灌木(Criaria arborea)、澳洲光蝉和蜜蜂。
由于这个问题得到重视。
【总页数】1页(P43)
【作者】斯图.,BA;龚蜜
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S896.1
【相关文献】
1.马桑毒素致毒后试虫酯酶同工酶变化的时序分析 [J], 李孟楼;郭新荣;庄世宏;唐光辉
2.一半是蜜一半是毒一些关于“情毒”的另类解读 [J], ;
3.马桑毒内酯对大鼠海马锥体神经细胞内钙稳态的影响 [J], 邹晓毅;曾红;郑洪波;张杰;李胜富
4.访问当年毒蜜事件幸存者——有毒蜜源植物调查之一 [J], 何成文;徐祖荫;周文才;何汝态
5.毒蜜与有毒蜜源植物 [J], 克罗奇梅;宁建长
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马桑内酯致痫对大鼠突触及血脑屏障超微结构的影响
马桑内酯致痫对大鼠突触及血脑屏障超微结构的影响程基焱;黄吉春;高然;殷菱;刘广益;郑福蓉【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2008(27)3【摘要】目的观察马桑内酯致痫大鼠运动皮质突触和血脑屏障的超微结构改变,探讨突触和血脑屏障在癫痫发作过程的可能机制.方法成年健康雄性SD大鼠20只,随机分为对照组、癫痫组;癫痫组用马桑内酯注入到大鼠侧脑室,制作癫痫动物模型;7天后取大脑运动皮质,做超薄切片,电镜观察运动皮质突触和血脑屏障的超微结构改变.结果①癫痫组突触界面弯曲形态、突触活性区、突触后致密物和穿孔性突触明显增加;②癫痫组内皮细胞、基膜、周细胞出现明显水肿,基膜电子密度降低.结论①马桑内酯致痫改变了大鼠突触和血脑屏障超微结构,提高突触的传导活性,增强血脑屏障的通透性;②突触和血脑屏障的结构改变可能是癫痫发作重要机制.【总页数】4页(P382-385)【作者】程基焱;黄吉春;高然;殷菱;刘广益;郑福蓉【作者单位】泸州医学院组织学与胚胎学教研室,四川泸州646000;泸州医学院电子显微镜实验室;泸州医学院组织学与胚胎学教研室,四川泸州646000;泸州医学院组织学与胚胎学教研室,四川泸州646000;泸州医学院电子显微镜实验室;泸州医学院电子显微镜实验室;泸州医学院电子显微镜实验室【正文语种】中文【中图分类】R742.1;Q95-33【相关文献】1.人参皂甙Rb1对马桑内酯致痫大鼠海马组织蛋白质组的影响 [J], 徐倩;张春来;杨烨;张春燕;赵春玲2.愈痫灵颗粒对戊四氮致痫大鼠海马CA3区超微结构及认知功能障碍的影响 [J], 李智雄;尹烨;谢静涛;王净净3.宁痫冲剂对戊四唑致痫大鼠脑神经元超微结构的影响 [J], 张丽萍;方卓;李中华;武丽;秦生发;臧知明4.褪黑素对马桑内酯致痫大鼠海马及皮质内TNF-α水平的影响 [J], 王琴;周厚纶;赵虎;黄东晖5.褪黑素对马桑内酯致痫大鼠海马内SP水平的影响 [J], 万娜;周厚纶;赵虎;黄东辉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
马桑内酯对星形胶质细胞细胞周期变化的影响
马桑内酯对星形胶质细胞细胞周期变化的影响郭文平;朱长庚;刘庆莹【期刊名称】《神经解剖学杂志》【年(卷),期】2005(21)6【摘要】胶质细胞细胞周期的改变,会导致细胞自身功能的改变,从而引发一些疾病的形成。
研究致痫时星形胶质细胞细胞周期的变化,可能对癫痫的形成机制提供新的思路。
用马桑内酯(CL)刺激体外纯化培养的海马星形胶质细胞2、4、6、8h后,应用流式细胞技术测定星形胶质细胞细胞周期各时期细胞的变化。
结果显示:CL作用4h后,G1期细胞数较对照组和2h组明显下降(P<0.05),S期和G2+M期比对照组明显增高(P<0.05)。
同时细胞凋亡也随着时间的延长而增加(P<0.05)。
本实验结果提示致痫时星形胶质细胞细胞周期会发生改变,即细胞由G1/G0期向S和G2+M期快速转化。
【总页数】4页(P607-610)【关键词】马桑内酯;星形胶质细胞;细胞周期;流式细胞术;海马【作者】郭文平;朱长庚;刘庆莹【作者单位】复旦大学医学院解剖学系;华中科技大学同济医学院解剖学教研室【正文语种】中文【中图分类】Q421;P315.7【相关文献】1.马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对大鼠脑内谷氨酸及其受体GluR2表达的影响 [J], 张树华;朱长庚;刘庆莹;魏瑛;王伟2.马桑内酯诱发急性癫痫大鼠皮质星形胶质细胞的变化 [J], 韩艺;高然;余鸿;刘广益3.马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对大鼠脑内钙调蛋白激酶Ⅱ表达的影响[J], 张树华;朱长庚;刘庆莹;魏瑛;王伟4.马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内及培养的神经元内PLCβ1的影响 [J], 李忠玉;刘庆莹;朱长庚;王伟5.马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内谷氨酸和GABA的影响 [J], 李忠玉;刘庆莹;朱长庚;王伟因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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结果
一、细胞的分离:
按照以上步骤进行大鼠海马神经元细胞的分离。
彩图1—5依次为大鼠头颅上面观,完整分离的双侧海马,倒置相差显微镜下的海马神经细胞,倒置相差显微镜下所见电极与神经细胞接触的情况和神经细胞的银染鉴定。
彩图1火鼠耍葡jE面窥,图中1示嗅球,2示大脑皮质,3示海马,4示上丘,5示^卜|丘,6示小脑。
四川大学七年制学生学位论文
彩图2完整分离的大鼠双侧海马。
彩圈3倒置相差显微镜下所见的海马神经元.细胞胞体呈椭圆形或锥形,顶树突和/或轴突较完整,有的还保留数个基树突。
胞体饱满圆润,颗粒均匀细腻。
细胞膜光滑,细胞光晕明显,透光度好,立体感强。
(x300)
彩图4倒置相差显微镜下所见电极与神经细胞接触。
(x300)
彩剀5银染法验让的海马锥体神经细胞。
20。