一起雅南猪猪肺疫病原菌的分离鉴定

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猪常见细菌性病原菌的分离鉴定及药敏实验研究

猪常见细菌性病原菌的分离鉴定及药敏实验研究

猪常见细菌性病原菌的分离鉴定及药敏实验研究作者:方勤来源:《农业开发与装备》 2018年第2期摘要:课题试图通过对重庆涪陵区两规模化猪场送检的病死猪病料进行细菌分离鉴定,掌握川渝地区猪场常见的致病性细菌种类,主要有大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌。

通过对分离的纯化菌进行生化试验和药敏试验,查出耐药,减少治疗错误,并了解其敏感抗生素种类,便于猪场选择治疗方案、节省费用。

利用耐药检测结果控制抗菌药物的应用,减少耐药菌株的出现,选择高效合理的抗菌药物,对于指导临床用药具有重要作用。

在更有效的防治细菌性疾病的同时,能够最大化提高养殖业的经济效益。

关键词:耐药性;抗生素;分离;鉴定1材料与方法1.1材料1.1.1试剂。

普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板、营养肉汤培养基、SS琼脂平板和各种微量生化鉴定管。

1.1.2仪器。

LDZX-40B1高压灭菌锅(中国.上海)、电子天平、锥形瓶、灭菌培养皿、生化培养箱、超净工作台。

1.1.3培养基的制备。

营养肉汤:称取12.5g溶于500mL蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,经121℃高压蒸汽灭菌20min,置于4℃保存备用;营养琼脂:称取33g于1000mL蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,经121℃高压蒸汽灭菌20min,置于4℃保存备用;麦康凯琼脂:称取55g溶于1000mL蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,经121℃高压蒸汽灭菌20min,置于4℃保存备用。

1.1.4病料。

无菌采取A、B两猪场病死猪心、肺、淋巴等脏器,置于4℃冰箱待检验。

1.1.5抗菌药物。

药敏实验采用的抗生素类药物有TET(四环素)、NT(呋喃妥因)、KAN (卡纳霉素)、GEN(庆大霉素)、VAN(万古霉素)、CIP(环丙沙星)、SXT(复方新诺明)、EM(红霉素)、OFX(氧氟沙星)、CEP(头孢噻吩)。

1.2方法1.2.1分离培养及纯化。

将病料无菌划线接种于普通营养琼脂平板,置于37℃恒温培养箱中培养18~24h,然后用接种环无菌挑取单个完整的菌落,接种于普通琼脂培养基,进行纯化培养得到纯培养物。

一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究

一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究

一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究猪链球菌是一种常见的猪源性病原菌,对猪群的健康和猪肉品质有重要影响。

本文将介绍一株猪链球菌的分离鉴定和其生物学特性研究。

1. 分离鉴定从猪群中分离出猪链球菌需要以下步骤:1.1 细菌分离取病猪的淋巴结、脑脊髓液或其他疑似感染部位,进行细菌分离。

将样品切碎悬浮于生理盐水中,进行稀释,然后接种在选择性富养基上。

在血寒情况下,猪链球菌会产生特征性的红色菌落。

1.2 分离纯化从富养基中挑选红色菌落进行分离纯化。

将菌落接种在琼脂平板上,培养后选择几个单独的菌落进行继续培养,直至获得纯净菌株。

1.3 鉴定进行相关鉴定测试,确认所分离的菌株是猪链球菌。

2. 生物学特性研究对分离到的猪链球菌进行生物学特性研究有助于了解其病原性和抗生素耐药性等方面的特点。

2.1 形态学特征猪链球菌是革兰氏阳性菌,呈圆形或椭圆形。

在显微镜下观察,猪链球菌呈串珠状排列,类似珠链。

菌落呈灰白色,质地松软,有明显的凹陷。

2.2 生理生化特性猪链球菌是厌氧菌,对氧气敏感。

它能进行无氧发酵代谢,产生乳酸和醒酸。

在细菌培养基中加入卡伯醇阳性试验可以测定猪链球菌的β-溶血素产生情况。

2.3 病原性猪链球菌是一种重要的猪源性病原菌,可以引起猪群的链球菌病。

具体症状包括发热、呼吸困难、食欲减退等。

猪链球菌可以通过呼吸道、皮肤和消化道等途径传播,尤其在密集饲养条件下传播更为广泛。

2.4 抗生素耐药性猪链球菌在抗生素治疗中的耐药性是研究重点。

通过药敏试验可以观察猪链球菌对不同抗生素的敏感性。

目前,一些猪链球菌菌株出现了对青霉素、大环内酯类、林可霉素和四环素等抗生素的耐药现象。

本文简要介绍了一株猪链球菌的分离鉴定和生物学特性研究。

通过对猪链球菌的了解,可以更好地预防和控制链球菌病的传播,并提供针对该细菌的有效治疗方法。

猪传染性胸膜肺炎病原的分离鉴定及防治

猪传染性胸膜肺炎病原的分离鉴定及防治

病 是 一 种 呼 吸 道 疾 病 ,影 响 着全 球 养猪 业 的 发 展 。 本 研 究采 用 多种 培 养 基 进 行 接 种 培 养 ,从 某 猪 场 典 型 传 染 性 胸 膜 肺 炎
症 状 猪 的 肺 脏 和 扁桃 体 中分 离到 了革 兰 氏 阴 性 杆 菌 。通 过 该 病 原 茵 的 培 养 特 性 、 生 物 学特 性 和 生化 鉴 定 结 果 显 示 .该 细 茵 为 猪 胸 膜 肺 炎放 线 杆 菌 。 同 时本 研 究 也 为 今 后 对 该 病 的预 防控 制 与诊 断治 疗 奠 定 了有 效 的基 础 。 关键 词 :猪 ;胸 膜 肺 炎放 线杆 茵 ;分 离 :鉴 定
疾 病 ,主 要 表 现 为 急 性 出血 性 和 慢 性 坏 死 性 纤 维 素 性 肺 炎 。
急 性 死 亡 率 高 ,慢 性 者 常 能 耐 过 。该 病 自 1 9 5 7年 发 现 以 后 就 流 行 于 世 界 各 国 ,给 各 国 的养 殖 业 都 产 生 了 严 重 的影 响 ,
有马血清和 N A D 的 营养 肉汤 中 ,3 7 ℃培 养 2 4 — 4 8 h 。 猪 传 染 性 胸 膜肺 炎 是 由胸 膜 肺 炎 放 线 杆 菌 ( A c t i n o b a c i l —
l u s p l e u r o p n e u mo n i a e ,AP P) 引 起 猪 的一 种 急 性 热 性 呼 吸 道
1 . 2 - 3 _ 3 卫 星 现 象
将 分 离 到 的 细 菌 菌 株 接 种 在 胰 蛋 白胨 大 豆 肉 汤 琼 脂 平 板 上 ,用 金 黄 色 葡 萄 球 菌 作 滋 养菌 划一 直线 .在 3 7 ℃条 件 下 培 养2 4 ~ 4 8 h 。 1 . 2 . 3 . 4 C A MP实 验 金 黄色葡萄球 菌和可 疑菌按垂 直方 向划线于血 平板 上 .

猪源大肠杆菌的分离 鉴定及耐药性监测

猪源大肠杆菌的分离 鉴定及耐药性监测

大肠杆菌是一种常见的人类和动物肠道病原菌,其中一些菌株已经对多种抗 生素产生了耐药性。因此,对大肠杆菌进行分离鉴定和耐药性分析对于防控细菌 性感染和合理使用抗生素具有重要意义。本次演示以一株猪源大肠杆菌为例,介 绍了其分离鉴定和耐药性分析的过程。
实验材料包括采样猪的粪便、大肠杆菌标准菌株、药敏试纸、培养基等。实 验方法包括细菌分离、纯化、鉴定和药敏试验。结果发现,该菌株属于大肠杆菌 O157:H7血清型,具有较高的耐药性,对多种抗生素如青霉素、氨苄西林、头孢 曲松、氟苯尼考等产生了耐药性。肠杆菌菌株分别接种在含有不同浓度抗菌 药物的培养基上。通过测量抑菌圈的直径,评估菌株对抗菌药物的敏感性。参照 国际抗菌药物敏感性试验委员会(NCCLS)制定的标准,分析耐药性水平及变化 趋势。
三、结果
1、分离与鉴定结果
经过分离和鉴定,共获得50株猪源大肠杆菌。这些菌株在培养基上呈现出典 型的圆形、湿润、半透明菌落,革兰氏染色阴性,具有典型的大肠杆菌形态特征。 分子生物学鉴定结果表明,所有菌株均含有16S rRNA基因,与大肠杆菌属的亲缘 关系较近。
需要注意的是,本次演示的研究成果对于指导临床合理用药和控制羊源大肠 杆菌的传播具有一定的实践意义,但仍需进一步扩大样本量、增加实验代表性以 及加强多学科联合研究,以提供更全面、准确的研究结论。在未来的研究中,我 们应注重对新型检测技术和治疗方法的研究与开发,以便更好地应对耐药性和致 病性问题。
谢谢观看
研究羊源大肠杆菌的耐药性与致病性对于指导临床合理用药、控制病情具有 重要意义。目前,耐药性大肠杆菌已成为一个全球性的问题,给治疗带来了很大 的困难。因此,我们需要更加深入地研究羊源大肠杆菌的耐药机制和致病机理, 寻找有效的解决方法。
本研究采用细菌培养、分子生物学等技术手段对羊源大肠杆菌进行分离鉴定, 并对其耐药性和致病性进行分析。首先,对临床疑似感染大肠杆菌的羊只进行细 菌分离培养,获得纯菌落。接着,采用基因测序、PCR等方法对菌落进行分子生 物学鉴定,确定其为大肠杆菌。

猪肺部病理剖检诊断的要点

猪肺部病理剖检诊断的要点
面 , 可全 肺 。 亦
分布不均 , 体温升高 , 传播快等特点 ; 伪狂犬病 除有 花斑样间质性肺炎外 , 还有肾的针尖状 出血 , 扁桃体 的伪 膜 与化 脓坏 死 ,脑膜 的 充 血水 肿 ,临床 上 有肢 瘫, 失声等症状。
小 叶性肺炎的病变一般分布在尖 叶, , 、 n 中间 Lf 叶、 偶在 膈 叶 , 多在 肺 脏腹 侧 ; 血行 散 播 , 且 若 则在 全
灶。
性, 从而为正确选择抗菌药提供依据。 般讲 ,引起肺部病损的细菌以革兰 氏阴性居

4 混 杂病 变 的鉴 别
若在尖 叶、 叶 、 f 心 膈
多。
多见病 多见 的规 律 同样 支 配着肺部 病损 的诊 断, 但是 同样需要综合诊断信息 的支持 , 不可妄下论
断。
又有 间质 的增宽 。发 炎 , J 、
1 开 胸
开胸 后 , 急于 取 出肺 脏 , 察 肺 肋 面 浆膜 ( 不 观 肺
是致命病变 , 多与心内膜心肌出血一块 出现。
病灶 周 围有 肺 膨胀 不 全 , 气 肿 的病 变 , 为 中 肺 多
后期病 变 。
胸膜 ) 与肋胸膜 之间有无纤维素沉着 , 洁度 、 光 胸水
多少, 以排 出胸 膜 炎 。 观察 肺部 膨 胀程 度 , 无肋 骨 有
病 灶 颜 色 暗 红 、 红 、 红 、 黄 , 地 如 捏 脾 黑 灰 灰 质 脏 , 切 面流 出粘 液 脓性 分 泌 物 , 面呈 颗粒 状 应 为 从 切
7 确定细菌性病损 中细菌 的性质
根据肺部病损与其他脏器病损和临床信息是可
以概略性确定病损 细菌是革兰 氏阳性还是革兰氏阴
较陈旧病灶。 颜色灰 白质 地如胰脏 , 颜色 暗红 , 质地如肉样 , 切面可挤出脓性物质或切面较干燥 的病灶 为陈旧病

一株猪肺炎支原体强毒株的分离和鉴定_刘茂军

一株猪肺炎支原体强毒株的分离和鉴定_刘茂军

江苏农业学报(J iangsu J.of A gr.Sci.),2009,25(2):308~310一株猪肺炎支原体强毒株的分离和鉴定刘茂军1, 邵国青1, 周勇岐2, 苏国东1, 王继春1, 孙佩元1, 冯志新1, 刘冬霞1(1.江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;2.南京天邦生物科技有限公司,江苏南京211102)收稿日期:2008210210基金项目:江苏省自然科学基金项目(BK2007711);江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(08)608];江苏省农业科学院基金项目(061080823)作者简介:刘茂军(19772),男,山西阳曲人,硕士,助理研究员,从事动物重大疫病研究。

(E2mail)maojunliu@通讯作者:邵国青,(Tel)025*********;(E2mail)84391973@ 摘要: 从猪支原体肺炎病例病料中分离得到1株支原体,对其进行培养试验、代谢抑制试验、PCR鉴定和动物回归试验。

分离株攻毒猪后,该猪出现典型的猪支原体肺炎临床症状和病变,证明该分离株为猪肺炎支原体。

这为猪肺炎支原体的研究提供了条件。

关键词: 猪肺炎支原体;分离;鉴定;毒力中图分类号: S851.34+7.109 文献标识码: A 文章编号: 100024440(2009)022*******Isol ati on and I denti fi cati on of a Vi rulent Stra i n of M ycoplas m a hyopneu2 m on iaeL I U Mao2jun1, SHAO Guo2qing1, Z HOU Yong2qi2, S U Guo2dong1, WANG J i2chun1, S UN Pei2yuan1, FENG Zhi2xin1, L I U Dong2xia1(1.Institute of Veterinary M edicine,J iangsu A cade m y of Agriculture Sciences,Key Laboratory of A ni m al D iseases D iagnosis and I mm unology,M inistry of Agriculture,N ational Center for Engineering Research of Veterinary B io2products,N anjing210014,China;2.N anjing Tech2B ank B io2Industry Co.L td., N anjing211102,China) Abstract: A strain of M ycoplas m a was is olated fr om pathogenic tissue of M ycoplas m a pneum onia of s wine.The M y2 coplas m a was p r oved t o be a M ycoplas m a hyopneum oniae thr ough culture,metabolic inhibiti on,PCR assay and ani m al tests.Ani m al tests showed that the strain is olated could cause apparent clinical syndr ome.Key words: M ycoplas m a hyopneum oniae;is olati on;identificati on;virulence 猪支原体肺炎(Mycop las ma pneu monia of s wine,MPS),又称猪气喘病,猪地方性肺炎(Enz ootic pneu2monia of s wine,EPS),是由猪肺炎支原体(M ycoplas2m a hyopneum on iae,Mhp)引起的一种猪慢性呼吸道传染病。

一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究

一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究

一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究猪链球菌属于革兰氏阳性球形细菌,它是一个严格的人畜共患病菌,可以引起多种疾病,如喉炎、肺炎、败血症等。

因此,研究猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性对于猪养殖业和公共卫生具有重要意义。

本文报道了一株从猪肺组织中分离出的猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性。

以下是研究的具体过程和结果。

一、分离鉴定从自闭育的猪肺组织中分离出猪链球菌。

首先用生理盐水对肺组织进行洗涤和淋洗,然后用1%的甲酚进行灭菌,细菌液接种在板上,用血琼脂进行分离。

在乳清琼脂上培养24小时后形成多个典型的小透明菌落,分别进行进一步鉴定。

1. 形态学特点:该菌为革兰氏阳性球形细菌,直径为0.7-1微米。

在血琼脂上可形成3mm左右的独立透明菌落,表面光滑,无色透明。

2. 生理学特性:该菌为革兰氏阳性细菌,产生过氧化氢酶。

能使牛血红细胞溶解,在83%羊血液琼脂板上呈现大致半透明周围的浅青区域,且可形成β溶血。

3. 生化鉴定:该菌在甲酸钠葡萄糖肉汤中进行碳源利用试验,其酸碱指数为5.5,证实了其为猪链球菌。

二、生物学特性1. 感受性:该菌对链霉素、大环内酯类、β-内酰胺酶抑制剂等药物敏感,而对头孢菌素、克林霉素等药物有中等耐药性。

在金黄色葡萄球菌最小抑制浓度试验中,其最小抑制浓度为1ug/mL。

2. 生长曲线:用光密度法检测其生长曲线,结果显示菌体在24小时后进入稳定生长期。

3. 生长温度:温度试验表明,该菌体的适生温度为37℃,在45℃时生长速度较慢,在10℃时停止生长。

4. 线形成实验:该菌体在鲍曼莎菲蓝琼脂上形成了阳性较强的菌落,并形成了黑色线状菌落,进一步证实了其为猪链球菌。

综上所述,本研究成功分离出一株猪链球菌,并对其进行了生物学特性的研究。

这些结果将为进一步探究猪链球菌的致病机制和防控措施提供重要信息。

猪肺疫的病原分离及鉴定

猪肺疫的病原分离及鉴定

猪 巴 氏杆 菌 病 (wn atuels ) 由多 杀性 巴 氏杆 s iep s rl i 是 e os 菌 引起 的一 种 传 染病 , 又名 猪 肺 疫 、 出血 性 败 血 症 , 称 猪 俗
接 种于 甲基 红试 验培 养基 中 。7℃培 养 4 , 3 8h后 于培养 基 中 加 入 甲基 红 试 剂 2 3滴 , 果 培 养基 上 层 变 为红 色 即 为 阳 ~ 如
现 代农 业科技
21 0 2年第 4期
动物科 学
猪肺疫的病原分离及鉴定
夏英 杰 ・ 陈达 燕 2 张 云波 ・ 朱凤琼 杨贵 树
( 云南省呈贡 县畜牧兽 医站 , 云南呈贡 6 0 0 ; 云 南省昭通农业学校 ; 陆 良县动物疫病预防控制中心 ; 云南农业大学动物科学技术学 院) 5 5 0
反之 为 阴性 。 试 验 方法 也可 在 室 温 加 ℃以 下培 养 4 6d 该 ~
后。 观察结果 。 ⑥触酶试验。 先于洁净载玻片上滴 3 过氧化 %
氢 l , 滴 用牙 签挑 取 分 离 菌株 的 2 丁 琼 脂纯 培 养 菌落 4h马 于 载玻片 上 , 合均 匀 , 产生气 泡即为触酶 阳性反应 。 混 若
性反应 , 反之为阴性反应 。 P试验。 ③v 将分离菌的纯培养物
接种 于 甲基红 试 验培 养基 中 ,7℃培 养 4 , 3 8h后 于培养 基 中 先加 入 4 % KO 0 H溶 液 2 3滴 , 加入 6 O 萘 酚酒 精 溶液 ~ 再 % / . 一 2 3滴 , 培 养基 变 为红 色 为 阳 性 反应 , ~ 如 反之 为 阴性 反应 。
“ 喉 风 ”该病 的特征 最 急 性型 呈 败血 症变 化 , 锁 。 咽喉 部 急性

猪肺疫的鉴别诊断与防治

猪肺疫的鉴别诊断与防治

本 病 在世 界各 地可 见 ,给养猪 业造 成 巨大 损失 。主要 特 征为 败血 症 ,咽喉
及 其 周 围 组 织 急 性 炎 性 肿 ,或 表 现 为 肺 、胸 膜 的 纤 维 蛋 白渗 出 性 炎 症 。 急
有 纤维 素胶 性物 和 大量胶 胨样 淡黄 色 水肿液 。皮下组织出现大量的出血点 。 全 身淋 巴结 出血肿 大 ,呈 浆液 性 出血 性 炎症 ,以咽喉 部 淋 巴结 最 显著 ,心 内外膜 有 出血 斑 点 ,肺 充 血 、水 肿 , 表 面盖 有一 层 浆液 性 、纤 维蛋 白性 渗 出物 ,肺 脏 表 面与胸 膜粘 连 ,胸腔 及 心 包积 液严 重 。散发 性猪 肺疫 的肺 部 既 有红 色 或灰 色肝 变 ,又可见 周 围 区 域 的肺水肿 、肺气肿 。 依 据 流行 病学 特 点 、临床 症状 及 病 理学 变化 可 做 出初步 诊 断 ,确诊 时 应 进行 实 验室 病原 学诊 断 ,如涂 片镜 检、 分离 培养 、 生化试 验 、 血 清型鉴定 、 动物 回归 实验 等。 由于该 病 临床 上与 猪 瘟 、猪丹 毒 、猪传 染性 胸 膜肺 炎 、 猪 喘 气病 、急性 咽 喉型炭 疽 等 多种疾 病 有相 似之处 ,应注意鉴别诊断 。 3 . 1 猪瘟 又称为 “ 烂 肠 瘟 ”、 “ 瞎 眼瘟 ”。稽 留热 型 ,皮肤 多发 性 小点
嗽 或排 出恶 臭下 痢粪 便等 症状 ,病 程 3 - 6周 以 上 的 多 衰 竭 死 亡 。 病 死 率 在
5 0 — 7 0 %左右。
主动脉瓣处 出现菜花样增生物 。 3 . 3 猪传 染性胸膜肺 炎 传染性胸 膜肺 炎 的病 变局 限于 呼 吸系统 ,以胸
膜 炎 和 出 血 性 坏 死 性 肺 炎 为 特 征 。 亚 急性 胸膜 肺 炎不 引起猪 的急性 死 亡 ,

猪源肺炎克雷伯菌的分离鉴定

猪源肺炎克雷伯菌的分离鉴定

Ab s t r a c t : To d e t e r mi n e t h e p a t ho g e n i c b a c t e r i a i n t h e e fe c t e d p i g s , a b a c t e ia r wa s i s o l a t e d f r o m t h e l u n g o f d i s e a s e d p i g a n d i d e n t i i f e d a s Kl e b s i e l l a p n e u mo n i a e b y b i o c h e mi c a l t e s t s ,p a t h o g e n i c i t y t e s t , a n d b a c t e i r a 1 6 S r R NA g e n e s e q u e n c i n g ,wh i c h wa s 9 9 % h o mo l o g y wi h t K. p n e u mo n i a e .I n a d d i t i o n ,b a c t e ia r l c o l o n i e s we r e f o r me d o n b l o o d a g a r ,p r e s e n t i n g s i g h t o 【h e mo l y t i c
了基 础 。
关 键 词 :肺 炎克 雷伯 菌 ;分 离 ;鉴 定 ; 溶 血 中 图分 类 号 :¥ 8 5 2 . 6 1 文献 标 识 码 :A 文章编号 :1 0 0 8 . 0 5 8 9 ( 2 0 1 5 ) 0 5 . 0 3 7 5 . 0 4
I s o l a t i on a n d i d e n t i f i c a t i on o f Kl e b s i e l l a p n e u mo n i a e f r O m s wi n e

猪肺炎支原体强毒株的分离和鉴定

猪肺炎支原体强毒株的分离和鉴定
c h a l l e n g e p o t e n c y a s s a y f o r e v a l u a t i o n o f my c o p l a s ma
p n e u m o n i a e v a c c i n e s [ J ] .I n f e c t I m mu n e , 1 9 8 8 , 5 6 ( 9) .

[ 1 1 】熊焰 , 石谦 , 邓均 华, 等. 猪肺 炎支原体 M Y 一 9 9株 的致病 性[ J 】 . 中国兽医学报 , 2 0 0 6 , 2 6 I 一 3 ) : 2 5 9 — 2 6 1 . [ 1 2 】蔡宝祥. 家畜传 染病 学【 M】 . 4版. 北京 : 中国农业 出版社 ,
r e s p i r a t o r y s y n d r o m e v i r u s - i n d u c e d p n e u mo n i a [ J ] . J C l i n
降; 涂片染色镜检 , 观察到特征性 的多形态茵体 , 有点
状、 环状 、 球状 和两极状 , 无杂菌 污 染 ; P C R鉴定 结果
6 7 y 7 7 . ’
【 3 】T h a c k e r E L , H a l b u r P G, R o s s R F, e t o 1 . M y c o p l a s ma
h y o n t i a t i o n o f p o r c i n e r e p r o d u c t i v e a h d
养物菌数[ J ] . 中国预防兽医学报, 2 0 0 6 , 2 8 ( 1 ) : 5 5 — 5 7 .
【 7 】 G o o d w i n R F .F i e l d t i r a l s w i t h a f o r m a l i n i z e d v a c c i n e

猪肺疫的病原分离及鉴定

猪肺疫的病原分离及鉴定

猪巴氏杆菌病(swine pasteurellosis )是由多杀性巴氏杆菌引起的一种传染病,又名猪肺疫、猪出血性败血症,俗称“锁喉风”。

该病的特征最急性型呈败血症变化,咽喉部急性肿胀,高度呼吸困难;急性型呈纤维素性胸膜肺炎症状;慢性型症状不明显,多为慢性肺炎、胃肠炎,逐渐消瘦,有时伴发关节炎。

在国外又将该型称为肺炎巴氏杆菌病。

该病广泛分布于世界各地,是猪的一种常见传染病,发病率达40%,死亡率在5%左右。

根据感染的菌型不同,可分为地方流行性和散发性2种。

其中以Fo 型多杀性巴氏杆菌引起的散发性猪肺疫比较多见,我国猪群以散发为主。

近年来,随着我国集约化养猪业的迅猛发展,猪群巴氏杆菌病的报道逐渐增多[1-3]。

该试验对一株疑似菌株通过培养特性、生化特性鉴定,结果与多杀巴氏杆菌相符,可为该病的诊断提供依据。

1材料与方法1.1试验材料1.1.1病料来源。

采自具有猪肺疫典型临床表现病例的病料。

1.1.2主要试剂。

常规分离培养基:血琼脂、麦康凯琼脂等;生化培养基:糖发酵培养基、MR 、VP 培养基、尿素酶培养基、硫化氢试验培养基等,由云南农业大学动物医学实验教学中心提供,按常规方法制备备用[4]。

1.1.3试验仪器。

光照培养箱、电子恒温培育箱、电热恒温鼓风干燥箱、单人单面净化工作台、离心机、离心管、高压蒸气消毒器、显微镜、接种环、酸度计、移液枪、水浴锅、冰箱、超低温冰箱等,以上仪器均由云南农业大学动物医学实验教学中心提供。

1.2试验方法1.2.1病原的分离培养。

将病料从横断面剪开,暴露新鲜切面,以无菌手续在血液琼脂培养基上涂抹一点后,作常规划线分离,于37℃条件下培养24~48h 。

挑取可疑菌落接种于麦康凯琼脂上,同时作镜检、纯培养及生化试验鉴定。

1.2.2生化试验鉴定[5]。

具体有以下几点:①糖发酵试验。

将分离菌株分别接种于乳糖、葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、蔗糖、D-半乳糖、果糖、甘露糖、鼠李糖,水杨素、菊糖、肌醇培养基中,置37℃温箱中培养48h ,观察反应情况。

猪肺疫的诊断、剖检变化及预防措施

猪肺疫的诊断、剖检变化及预防措施

摘要:猪肺疫是巴氏杆菌病的一种,属于革兰氏阴性染色杆菌,巴氏杆菌病主要由多杀性巴氏杆菌引发,是猪比较常见的一种呼吸道传染病。

不同年龄的猪都能够感染,其中,仔猪和育肥猪发病率较高。

该病全年任何季节都能够发生,尤其是春秋季节更容易发生,往往呈地方流行性发生。

该病的发生往往与气候变化、饲养管理不当等应激因素紧密相关,也可继发引起其他传染病,损害养猪业效益,应加强防控。

关键词:猪肺疫;诊断;预防中图分类号:S858.28文献标识码:ADOI 编号:10.14025/ki.jlny.2019.17.044姚振(黑山县农业农村事务服务中心,辽宁黑山121400)猪肺疫的诊断、剖检变化及预防措施猪肺疫又名猪巴氏杆菌病、猪出血性败血症。

猪肺疫是巴氏杆菌病的一种,属于革兰氏阴性染色杆菌,巴氏杆菌病主要是由多杀性巴氏杆菌所引发的,发生于各种家畜、家禽、野生动物和人类的一种传染病的总称。

病原为多杀性巴氏杆菌、溶血性巴氏杆菌,两者在形态、培养特性、抵抗力等方面基本相似。

显微镜下可见菌体多数为卵圆形,中间部分着色较浅,很像两个球菌。

由于大多数病猪都出现颈部肿胀、喉头炎和呼吸困难等症状,因此,俗称“锁喉风”“大红脖”“肿嗓瘟”。

实验证明,某些健康猪的呼吸道常存在毒力较弱的猪巴氏杆菌,当肌体抵抗力降低或发生其他传染病时,往往引起继发传染。

单纯发生猪肺疫的较少。

1诊断猪肺疫的病情比较复杂,急性病猪死亡快,症状不明显,而经过较慢的病猪,往往与其他传染病并发,因此,诊断时,应从以下几方面进行检查和认真分析,才能正确的诊断。

1.1临床检查潜伏期1~5天,临床诊断上一般分为最急性、急性和慢性。

最急性型:有的病猪发病很急,前一天晚上一切如常,第二天早上未见明显症状就死亡了。

病程稍长、症状明显的可表现为体温升高到41℃~42℃,食欲废绝,卧地不起,病猪腹侧、耳根和四肢内侧皮肤有红斑出现,一经出现以上症状,即迅速恶化,死亡很快。

病程1~2天,病死率100%,未见自然康复。

猪肺疫的检疫及实验室检验方法

猪肺疫的检疫及实验室检验方法
病猪心脏衰弱 , 卧地不起 , 窒息死亡 。 。 2 . 3 慢性型 出现在流行后期 , 主要呈现慢性 胃肠炎和慢性
当发现猪群 中存在病猪 , 要立 即采取有效处 理措施 。病 猪必须采取 隔离饲养 , 避免传播 和扩散 。没有 发病 的猪 只要 紧急免 疫接种 猪肺疫 、 猪瘟 、 猪丹 毒三联 苗 。猪场 要彻底 清 洗, 对猪场 以及周 围使用消毒威 喷雾消毒 , 1次 / d , 连续进行
般在 于燥空气 中经过 2~ 3 d就会死 亡 , 在排泄物 、 血 液 中
前下缘炎 性病灶 , 肺脏 有程度 不同 的肝 变区 , 病变周 围有气 肿和水肿 , 病 程持续 长时会在肝 变 区内出现坏死灶 , 肺 小叶
间发生浆液浸润 , 切面外观呈大理石样 。病变严重 时有淡黄
只能够生存 6~1 0 d , 在 疏松粪便能够 生存 1 4 d左右 , 在腐败 的动物尸体 中可存活长达 1 ~3个月 ,而在直射 阳光 只能够
试 验 研 究
猪肺疫 的检疫及实验室检验 方法
裴 晓丹 ,程
关键词 : 猪肺疫 ; 流行病 学; 临床 症状 ; 宰后剖检 ; 实验 室检查
DO 1 : 1 0 . 3 9 6 9 / J . I S SN. 1 6 7 1 — 6 0 2 7. 20 1 8 . 0 1 . 0 0 9

1 2 5 2 0 0)
( 辽宁省绥 中县动物检疫站 ,辽宁 绥 中
猪肺疫病是 经呼吸道 感染 巴氏杆菌而导致 , 还能够经皮
出血点 ,特别是 咽喉部及周围组织发生 出血性浆液性 浸润 。
肤损伤或者 消化 道感 染发病 。该病是一种散发性传染 病 , 猪 只饲养条件恶劣 时任何 季节都有发生 , 气候 寒冷的冬季 比较 容易发生 。小 、 中猪发病率较高 , 而大猪发病率较低 。

猪肺疫的诊断鉴别和综合防治

猪肺疫的诊断鉴别和综合防治
. A1 ll流行R病i学ghts Reserved.
多杀性巴氏杆菌渊 PM 冤 是一种革兰氏阴性的需氧或兼性 厌氧菌袁它呈微小的球杆状或短杆状袁两端钝圆袁中间微凸曰 它没有鞭毛袁不能自由运动袁也不能产生芽孢袁绝大部分的菌 株都没有荚膜袁部分毒力强的菌株刚分离出来时具有粘液状 的荚膜袁例如 5院A 和 6院B 菌株遥 在培养液中袁它常以单一的 形式存在袁偶尔也成对排列曰在血清琼脂培养基上培养袁能看 到表面光滑袁边缘齐整袁湿润的浅灰白色的圆形菌落袁有的毒 力强的菌株的菌落略呈粘稠状遥 根据它的菌体抗原和荚膜抗 原的不同袁可以分为 16 个不同的血清型袁不同的血清型之间 抗原性不同袁彼此之间不能互相免疫袁而且致病性的差异也 较大遥 本菌对光照尧温度尧干湿及酸碱等外界环境因素的耐受 力都比较差袁70益 的热水 3m in 内就能轻易的杀死它袁但它在 腐烂的病死猪身上却能存活 1耀 3 个月遥 该菌用普通的化学 消毒药品就能有很好的消毒效果袁 例如院1% ~2% 的氢氧化钠 溶液或 5% 的漂白粉消毒遥
全身淋巴结肿胀袁质软袁切面湿润多液袁有血水流出袁呈 深红色或紫黑色曰全身黏膜和皮下组织有出血点袁肺部水肿袁 充血袁剖开肺部袁切面和表面都有出血点或大小不同的斑状 出血灶曰咽喉肿大袁喉管上面有出血点袁气管尧支气管充满泡 沫状的血水混合物曰胃肠黏膜有出血点曰脾脏出血但不肿大袁 心包有积液袁最显著的特征就是咽喉部肿大袁切开颈部皮肤袁 有果冻状的淡黄色粘浆流出遥
病猪和带菌猪是主要传染源袁病原体主要通过病猪呼吸 道的分泌物尧呕吐物及排泄物排出体外袁通过污染饲养工具尧
食物尧饮用水及猪舍等外界环境而传染扩散遥 其它患上该病 的家畜和家禽如牛尧羊尧鸡尧鸭也是重要的传染源之一遥 呼吸道和 消化道是主要传播途径袁 或通过皮肤和粘膜的创伤口感染袁 还有蚊子尧 蜱螨及虱子等吸血昆虫也能作为媒介传染本病曰 此外本菌是一种条件性致病菌袁1/3 的健康猪也带有该菌袁一 般都是无致病性或弱毒菌株袁 当猪群自身抵抗力下降时袁也 能引发内源性感染遥 多杀性巴氏杆菌对很多种家畜和家禽袁 甚至对人都有致病性曰以猪最为易感袁不同品种尧性别尧年龄 的猪都能感染本病袁其中以幼猪和架子猪的发病最为严重遥

猪肺炎支原体强毒株的分离和鉴定_姜来生

猪肺炎支原体强毒株的分离和鉴定_姜来生

试验从 15 份猪疑似支原体肺炎的临床病料中分离到 1
株毒株,经培养传代、染色镜检、PCR 鉴定及测序分析,
鉴定为猪肺炎支原体。分离株在攻毒健康猪后出现典型
的猪支原体肺炎临床症状和病变,并从病变肺中又分离
到了该毒株,说明所分离的毒株不仅是猪肺炎支原体,
而且该分离株对猪具有一定的毒力。

参考文献:
[1] 毕丁仁,王桂枝.动物霉形体及研究方法[M].北京:中国
Key words:Mycoplasma hyopneumoniae;Isolation and identification;Regression of animal test
猪肺炎支原体是猪支原体肺炎(MPS)(又称猪喘气 病或猪地方流行性肺炎)的病原,是一种介于细菌和病 毒之间的原核微生物。猪喘气病是一种高传染性、接触 性、高发病率和低死亡率的慢性呼吸道病,而且很容易 继发其他病原感染,最终形成慢性肺炎。该病流行范围 广,且难以治愈,严重影响了养猪业的发展,是世界上最 主要的猪病之一。本试验从疑似猪支原体肺炎病例病料 中分离、培养并鉴定获得了 1 株猪肺炎支原体强毒株, 并进行了部分基因序列测序分析,为后续猪肺炎支原体
农业出版社,1998.
[2] Kobisch M,Blanchard B,Le Potier M F. Mycoplasma
hyopneumoniae infection in pigs: duration of the disease
and resistance to reinfection [J]. Vet Res,1993,24(1): 67-77. [3] Thacker E L,Halbur P G,Ross R F,et al. Mycoplasma hyopneumoniae potentiation of porcine reproductive and respiratory syndrome virus-induced pneumonia[J]. J Clin Microbiol,1999,37(3):620-627. [4] 刘茂军,邵国青,周勇岐,等.一株猪肺炎支原体强毒株的 分离和鉴定[J].江苏农业学报,2009,25(2):308-310. [5] 王继春,邵国青,何家惠,等.猪肺炎支原体 168 无细胞弱 毒疫苗株的变色单位测定试验[J].畜牧与兽医,2001,33 (6):22-23. [6] 沈青春,谭青松,王琴,等.PCR 方法测定猪肺炎支原体培 养物菌数[J].中国预防兽医学报,2006,28(1):55-57. [7] Goodwin R F. Field trials with a formalinized vaccine against enzootic pneumonia of pigs [J]. Br. Ver. J, 1973,129:456-470. [8] Barile M F,Chandler D K,Yoshida H,et al. Hamster challenge potency assay for evaluation of mycoplasma pneumoniae vaccines[J]. Infect Immune,1988,56(9). [9] 张锋钢,沈志强,高云英,等.猪肺炎支原体的分离及 PCR 鉴定[J].中国兽医杂志,2007,43(4):21-22. [10] 邵国青,刘茂军,孙佩元,等.猪气喘病人工发病模型的建 立[J].微生物与感染,2007,2(4):215-218. [11] 熊焰,石谦,邓均华,等.猪肺炎支原体 MY-99 株的致病 性[J].中国兽医学报,2006,26(3):259-261. [12] 蔡宝祥.家畜传染病学[M].4 版.北京:中国农业出版社, 2001.

猪肺疫病原菌的检验报告

猪肺疫病原菌的检验报告

猪肺疫病原菌的检验报告王俊江【期刊名称】《当代畜禽养殖业》【年(卷),期】2010(000)011【总页数】2页(P8-9)【作者】王俊江【作者单位】吉林省白城市洮北区畜牧站,吉林白城,137000【正文语种】中文猪肺疫是由多杀性巴氏杆菌引起的传染病,本病呈急性或慢性经过,以败血和组织器官出血性炎症为特征,该病的流行对养猪业生产造成严重的危害。

现将某养猪户一起病例的病原菌检验情况报告如下:1 发病情况及临床症状2006年5月中旬,某养猪户饲养猪130头,部分出现发病现象,并发生死亡。

起初见有几头发病,而后不断增加,3天内出现有20多头猪发病,不同日龄的猪均有发病,但以中、小猪居多。

病猪表现精神沉郁,少食或不食,咳嗽,体温升高41℃以上,呼吸困难,可见黏膜发绀,耳根、颈部及腹下等处皮肤有紫红斑,急性病例咽喉部肿胀,坚硬而热,呼吸困难,成犬坐姿势,口吐白沫,通常1-3天死亡,病程稍长病猪表现痉挛性咳嗽,流鼻汁,气喘,脓性结膜炎,体弱无力,通常在发病后4-6天死亡。

2 剖检病理变化剖检病死猪多头。

急死猪全身黏膜、浆膜和皮下组织有大量出血点,咽喉部水肿,其周围组织有出血性浆液浸润;下颌、咽及颈部淋巴结肿胀、出血,切面红色;心外膜和心内膜有小出血点;肺急性水肿;脾有出血,但不肿大;病程稍长病猪表现为纤维素性胸膜肺炎变化,肺有肝变、水肿、气肿和出血等病变,有的肝变区有坏死灶,肺小叶间浆液浸润,切面呈大理石状纹理;胸膜有纤维素性附着物,有的胸膜与病肺粘连;胸腔及心包积液;胸腔淋巴结肿大,切面多汁;支气管、气管内含有多量泡沫状黏液,黏膜有炎症病变。

3 实验室检验3.1 涂片镜检:做心血、肝、脾组织及喉部水肿液涂片数张,瑞特氏染色镜检发现有数量较多、单个散在、有时见成双排列、呈明显两极着色的球杆状或短杆状、两端钝圆、无芽胞细菌,革兰式染色阴性。

3.2 病原分离培养:无菌采取心血、肝、脾组织,接种于血琼脂平板和麦康凯琼脂培养基上,37℃培养24h,在血琼脂平板上可见湿润的水滴样小菌落,无溶血区,麦康凯琼脂上不生长。

一株猪肺炎支原体HN0613株的分离鉴定

一株猪肺炎支原体HN0613株的分离鉴定

一株猪肺炎支原体HN0613株的分离鉴定廖永洪;张许科;孙进忠;胡东波;谷世江;刘栓;白朝勇【摘要】采集疑似猪支原体肺炎病理变化的肺脏,经Friis液体、固体培养基培养、纯化,PCR、测序分析、生化鉴定、生长抑制、代谢抑制和致病性试验证实分离获得一株猪肺炎支原体菌株,命名为HN0613.该菌株能适应人工培养基的培养,且传代生长良好,液体培养基中培养达108 CCU/mL;菌株有较强的毒力,可作为疫苗候选株进一步研究.该菌株的分离鉴定为研制猪支原体肺炎灭活疫苗奠定了基础.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2013(047)003【总页数】4页(P4-6,10)【关键词】猪肺炎支原体;分离鉴定【作者】廖永洪;张许科;孙进忠;胡东波;谷世江;刘栓;白朝勇【作者单位】国家兽用药品工程技术研究中心生物制品研究所,河南洛阳471003;普莱柯生物工程股份有限公司,河南洛阳471003【正文语种】中文【中图分类】S858.28猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)可引起猪支原体肺炎,又称地方流行性肺炎,是猪的一种慢性消耗性呼吸道病,临床感染率极高。

其主要症状为咳嗽和气喘,以高发病率和低死亡率为特点。

猪群一旦感染Mhp,便难以清除,不仅严重影响猪群的生长发育,用药量增加,而且容易继发感染PRRSV、PCV等,从而导致多种疫苗接种失败[1-2]。

猪肺炎支原体作为猪呼吸道病综合征的重要病原之一,直接或间接对养猪业造成了巨大的经济损失。

猪肺炎支原体体外培养对生长条件要求苛刻,营养要求高且生长速度缓慢,分离过程中受猪的其他支原体(如猪鼻支原体)的影响,导致猪肺炎支原体分离鉴定难度较大。

本研究通过采集河南各地猪场疑似猪肺炎支原体感染猪病变肺脏,进行了猪肺炎支原体的分离、培养,得到一分离株,命名为HN0613株,并对其进行了生物学特性研究,包括PCR、测序分析、生化鉴定、生长抑制和致病性试验。

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1 . 试 验 方 法 2
1 . 细 菌分 离培 养与 纯化 用 采 集 的肺 脏 涂 布 .1 2 两个制 备好 的血平 板 ,分别进 行有氧 和厌氧 培养 , 3 培养 2 7c c 4h后 , 观察菌落 生长情 况 。 分别挑取 不 同形态 菌落进行革 兰 氏染色 和美蓝 染色 ,镜 检 , 观 察其染色情况及 形态特征 。 挑取 单个典型菌落划线 接种于血清平 板 ,7 培养 2 。再 次挑 取单个 典 3 4h 型菌落 进行革兰 氏染色和美蓝 染色 , 察分 离菌染 观 色情况及形态 特征 。 若有杂菌 则挑取典型疑似菌 落 重复上述 分离 培养操作 , 直至 分离菌无杂菌 为止 。 1 . 生化试 验 参 照相关文 献 进 行生化 试验 : .2 2 取分离 菌的纯培养 物接种 生化 试验培 养基和 糖 、 醇 等发酵管 ,7℃培养 2 8h 观察结果 。 3 44 , 1 - 动物试验 将符合 以上试验 目标 的分离菌株 .3 2 接种血 清 肉汤 培养基 ,于 3 7℃水浴振 荡器 中培养 l 8h后 ,观 察分离 菌在液体培养 基 中的生长表 6 1 现 。同时取 6只体重 相近、 健康 的雄 性小 白鼠, 4只 设 为试 验 组 ,腹 腔 接 种血 清 肉汤纯 培养 菌液 ,. 02 mL只 ; 2只为对照 组 , / 另 腹腔 注射相 同体积 的灭菌 生理盐水圈 。解剖死亡 小 鼠, 察其病 理变化 , 观 并取 小 鼠肝脏等病料作组织涂片 、 染色镜检 。 1 . 药敏试验 按纸片法操作[ 将纯培养物制成 .4 2 句 。 菌悬液 ,0 L涂布于血平 板上 ,贴上选 好 的药敏 2 0I x 纸 片, 3 于 7℃恒温培养 2 后 , 4h 观察 并记录 结果。 2 结果与分 析 氏染色镜 检 , 察到 两端钝 圆 、 观 革兰 氏 阴性小 杆菌 ; 蓝染 色镜 检 , 美 ・ 观察 到两 极着
21 0 1第 5期
养 猪 S N R U TO WI E P OD C I N
13 0

起 雅 南 Leabharlann 猪 肺 疫 病 原 菌 的 分 离 鉴 定
刘 孟 良 代 洪波 唐 兴 明 安 志伟 。唐 兴云 朱 , , , , 玲
(. 1 四川农业大学动物医学院, 四川 雅安 6 5 1;. 2 0 42四川省资阳市安岳县石羊镇 畜牧兽医站 , 资阳 62 5 ; 4 37 3资阳市安岳县龙台镇畜牧兽医站 , . 资阳 62 5 ; . 阳市安岳县瑞 云乡畜牧 兽医站, 4 3 34资 资阳 6 2 5 ) 4 3 7
中图分类号 :8 2 1 ¥5. + 62 文献标志码 : B 文章编 号: 0 — 9 7 0 0 — 13 0 1 2 15 ( 1 ) 0 0 — 2 0 2 15

要: 四川 某猪场 发生严 重的猪 呼吸道 疾病 , 据其临床症状无法确诊是 否为猪肺疫 , 根 因此采集 病猪肺脏进行 实验 室检 测。经病料 涂片镜 检、 细菌分离培养、 生化鉴定 、 动物试验鉴定 , 结果 显示 , 从病猪肺脏 中分 离得 到 1 株致病性 多杀性 巴氏杆 菌。药敏试验结果显 示, 该分 离菌株对 丁胺 卡那 霉素 、 庆大霉 素、 卡那霉 素、 新霉 素、 头孢 唑啉、 磺胺 异嚼 唑、 红霉素 、 复方 新诺 明等药物有不 同程度 的敏感 性, 对指 导临床用 药具有积极 的意义。 关键词 : 猪肺 疫; 多杀性 巴氏杆菌; 雅南猪 猪 肺疫 是 由多 杀性 巴 氏杆 菌 引起 的猪 的一 种 热性、 急性传 染病 , 分为 最急 性型 、 可 急性型 、 性 慢 型, 临床上危 害较大 。 病猪 出现 呼吸困难 、 体温 升高、 不食等 临床症状 。 该病一般通过 临床症状较 难确定 , 所 以一般借助于实验室诊 断对其确 诊。 雅南猪 主产于 四川省洪雅 、 丹棱 、 崃、 邛 雅安 等 1 个 县, 1 数量较少 , 是优 秀的地方 品种 之一 , 在猪 的 繁殖育 种上有重 要意义 。雅 南猪被 毛黑色 , 体型 较 大 , 躯 较长 、 窄 , 体 略 嘴较 长 , 部 皱 纹 浅 , 腰平 额 背 直, 后躯稍 倾斜 , 腿欠 丰满 , 大而 不下 垂 , 头 大 腹 乳 数多 。一般上 圈 9 1 ~ 4个月 ,其 中催 肥期 1 ~ . 2个 5 月, 体重达 8 ~ Ok 0 9 g出栏 , 具有 良好的繁殖性 能。 产 区用 长 白、约克 夏等 为父 本与雅 南 猪进 行经 济 杂 交 , 有屠宰率提 高、 具 胴体增 长 、 变薄等 效果 。所 皮 以要进 一步加 强雅 南猪选育 工作 , 立雅 南猪繁 育 建 体系 , 积极 开展 本 品种选 育 的 同时 , 计划 地 推 在 有 广杂种优势利 用【 】 。 2 1 年 6月中旬, 01 雅安一生态养殖场 内 4 -0k 05 g - 雅南猪突然 出现严重 的呼吸 困难 、 便秘 、 厌食 以及 急 性死 亡 。解 剖后可见病猪肺部严重病变 ,肺 间质增 宽, 肺脏有 出血 , 胸腔 和心包严 重积液 , 喉管 内有大 量泡沫样黏液 , 全身多处淋 巴结 出血 , 肠道 内有大量 干粪 球。怀 疑为猪 肺疫 。无菌采 集病猪 肺脏进行病 原菌分离, 以判定发病原因 。 1 材料 与方法 11 试验材料 . 四川 省雅 安某 生态 养殖 场 内患严 重 呼吸 道疾 病猪 的肺脏 。L B液体培 养基 、 清 肉汤培养基 、 B 血 L 固体培养基 、 血清平板 、 血平板均按 文献[ l 。6 8 2J 1备  ̄ 周龄体 重 1 2gS F级 B l c小 白鼠,购 自四川 8 2 P a/ b 大学实验动物 中心 。
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